CN108414555A - 一种切片熏展装置 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种切片熏展装置，由活塞、溶液筒、乳头套、硅胶套和卡槽组成。本发明提供了一种安全简便有效的切片熏展装置，可在捞取切片的同时或单独对切片进行熏展，提高了实验效率并降低毒性溶液对人体的伤害。

Description

一种切片熏展装置

技术领域

本发明涉及一种对样品实施熏展的技术，具体是一种切片熏展装置。该切片熏展装置在医学生物学研究中用于供透射电镜观察使用。

背景技术

透射电子显微镜技术在医学生物学研究种发挥着重要作用，用于进行样品超微结构的观察。传统的透射电镜标本制备方法多采用化学或物理方法固定、脱水和干燥，用环氧树脂等包埋剂进行包埋聚合，使用玻璃刀或钻石刀在超薄切片机上对包埋块进行超薄切片，将超薄切片捞取至铜网等载网上后对超薄切片进行醋酸双氧铀和柠檬酸铅双重染色。具体步骤为：使用戊二醛固定液浸泡样品进行前固定；磷酸盐缓冲液对前固定后的样品进行漂洗；使用锇酸固定液浸泡样品进行后固定和染色；磷酸盐缓冲液对后固定和染色后的样品进行漂洗；级别酒精或丙酮等进行脱水；使用环氧树脂等包埋剂进行包埋聚合；将完成聚合的样品进行修块和半薄切片定位；在超薄切片机上使用玻璃刀或钻石刀对定位后的样品树脂块进行超薄切片，使超薄切片漂浮于刀架上的双蒸水液面，利用三氯甲烷或二甲苯等挥发性溶液对漂浮的切片进行熏展；使用镊子夹取铜网等载网进行超薄切片的捞取或使用捞片器对超薄切片进行捞取。

传统透射电镜样品在超薄切片过程中，由于刀刃的切削而产生的压缩力会使样品的结构发生方向性变形，在切片上表现为规则均匀的形态变化。切削挤压也会在切片上形成皱褶。电镜下观察这些切片的皱褶基本与刀刃方向平行排列，犹如稍弯曲的曲线，部分表现为成排的波纹，皱褶常常会影响样品超微结构的观察进而影响实验结果。使用三氯甲烷或二甲苯等挥发性溶液进行熏片，可使被压缩的切片伸展，大大提高切片的质量，有助于获得理想的实验结果。但使用三氯甲烷或二甲苯等溶液进行熏片存在以下问题：1、三氯甲烷(Trichloromethane)又名氯仿或三氯化碳，常温下为无色透明液体，有特殊气味，质重，易挥发，对光敏感，遇光照会与空气中的氧作用，逐渐分解而生成剧毒的光气(碳酰氯)和氯化氢，可通过人体的呼吸系统、消化道和皮肤进入人体，有麻醉作用并容易引起急性中毒，初期出现头痛、头晕、恶心、呕吐、兴奋、皮肤湿热和粘膜刺激症状，以后精神紊乱、呼吸表浅、反射消失、昏迷等，严重者甚至发生呼吸麻痹、心室纤维性颤动而发生死亡；2、二甲苯(o-Xylene)又名1,2-二甲苯或邻二甲苯，常温下为为无色透明液体，有特殊气味，易燃，易挥发，人体吸入或与经皮肤粘膜接触容易引起急性中毒，有致畸性，会导致肌肉骨骼系统发育畸形，还可能具有致癌性；3、目前常用的熏片方法，多使用镊子夹取滤纸，用滤纸吸取三氯甲烷或二甲苯等挥发性溶液后，迅速放置于漂浮在液面上的切片附近进行熏展，当镊子夹取的滤纸溶液吸取过少，放置到切片上方时，可能溶液已经完全挥发，无法再对切片进行熏展，需要反复吸取进行熏展，较耗时耗力，且大量的挥发性气体又会对使用者产生危害，而镊子夹取的滤纸溶液吸取过多，大量的挥发性气体同样会对使用者产生危害；4、目前常用的镊子夹取滤纸吸取三氯甲烷或二甲苯溶液等挥发性溶液进行熏片的方法，熏展的张力容易使切片飘散而难以收集，使捞片难度大大增加；5、目前常用的镊子夹取滤纸吸取三氯甲烷等溶液等挥发性溶液进行熏片的方法，常常会发生溶液腐蚀镊子的现象。

发明内容

本发明针对现有技术中的缺陷，提供一种切片熏展装置。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

一种切片熏展装置由活塞、溶液筒、乳头套、硅胶套和卡槽组成；

1.各部件结抅

所述活塞为带活塞柄和活塞轴的圆柱体，圆柱体高40mm、直径3mm，活塞柄高1mm、直径5mm，活塞轴长15mm、上顶面直径2mm、下底面直径3mm。

所述溶液筒为带有溶液筒柄、乳头和容量刻度的中空圆柱体，圆柱体高40mm、内直径3mm，溶液筒柄为侧翼状，其侧翼长3mm，厚1mm，乳头为中空圆台，其高7mm、上顶面内直径2.5mm、下底面内直径2mm。

所述乳头套为下底面封闭的中空圆台，上顶面内直径2.4mm、下底面内直径2mm，下底面中央为十字切口，切口长1.5mm。

所述硅胶套为中空圆台，高7mm，上顶面内直径2.2mm，下底面内直径2mm，内部可放置直径为2mm的滤纸，下底面为筛网，筛网直径2mm。

所述卡槽高2mm、厚0.5mm，其位于溶液筒的前端边缘，并带有两根凸起的卡槽柄，其长3mm、宽1mm、高1mm，两根卡槽柄之间距离为3mm。

2.各部件的连接关系

所述活塞柄及活塞轴依次位于活塞末端；溶液筒柄、容量刻度及乳头依次位于溶液筒上，其中乳头位于溶液筒的前端，容量刻度位于溶液筒侧壁；十字切口位于乳头套的下底面中央，滤纸位于硅胶套内，筛网位于硅胶套的下底面；卡槽位于溶液筒的前端边缘，卡槽柄位于卡槽上；活塞套装在溶液筒内；溶液筒的乳头套装在乳头套内；乳头套套装在硅胶套内；以上实现活塞、溶液筒、乳头套和硅胶套的依次紧密连接；通过外力拉拔，实现乳头、乳头套、硅胶套的分离拆卸。

上述活塞、溶液筒由玻璃制成，其中溶液筒为棕色玻璃制成。

上述乳头套、硅胶套和卡槽由硅胶制成。

上述活塞除活塞柄和活塞轴外，其他表面经过磨砂处理。

上述十字切口在无压力状态下密闭。

上述筛网的目数为3～200目。

上述卡槽可拆卸。

本发明的优点或有益效果：

1.本发明通过利用棕色玻璃等材料制成的切片熏展装置对切片样品进行熏展，更合理地在使用过程中避光保存三氯甲烷或二甲苯等挥发性溶液，克服了这些溶液见光易分解的缺点,此外，磨砂处理的活塞利于密闭保存溶液筒内的溶液，有助于在使用过程中提升溶剂质量获得理想的实验结果，减少溶液挥发性气体对人体造成的伤害。

2.本发明通过利用棕色玻璃等材料制成的切片熏展装置对切片样品进行熏展，利用其溶液筒上的容量刻度，可明确溶液筒内挥发性溶液的使用量，利用活塞缓慢按压控制压注出的溶液量，更好地合理使用三氯甲烷或二甲苯等挥发性溶液，不仅可节约挥发性溶液的使用，还可减少溶液挥发性气体对人体造成的伤害。

3.本发明通过利用棕色玻璃等材料制成的切片熏展装置对切片样品进行熏展，利用乳头套底面的十字切口在无压力状态下密闭的特点，有助于在不需要使用溶液筒内的三氯甲烷或二甲苯等挥发性溶液时，更好地密闭保存这些溶液，当需要使用三氯甲烷或二甲苯等挥发性溶液进行熏展切片时，活塞按压产生的压力使十字切口开放，三氯甲烷或二甲苯等挥发性溶液通过十字切口注入硅胶套内，被硅胶套内的滤纸吸收，再通过筛网挥发，对切片进行熏展，不仅可节约挥发性溶液的使用，还可减少溶液挥发性气体对人体造成的伤害。此外，熏展器的使用还可以避免三氯甲烷等溶液对镊子等精密工具的腐蚀，降低实验成本。

4.本发明通过利用棕色玻璃等材料制成的切片熏展装置对切片样品进行熏展，利用熏展器溶液筒上的可拆卸卡槽的安装，使熏展装置能固定于切片捞取装置上，当切片捞取装置捞取切片到捞片环中时，可直接利用切片熏展装置对捞片环液面上的切片进行熏展，捞片环内范围小且切片无法漂移出捞片环，切片可在小范围内被少量的三氯甲烷或二甲苯完成熏展，克服了切片飘散难以熏展捞取的缺点，大大提升了实验效率，还可节约挥发性溶液的使用并减少溶液挥发性气体对人体造成的伤害。

附图说明

图1是本发明切片熏展装置的结构示意图。

图中：活塞1、溶液筒2、乳头套3、硅胶套4、卡槽5、活塞柄6、活塞轴7、溶液筒柄8、乳头9、容量刻度10、十字切口11、滤纸12、筛网13、卡槽柄14。

图2为本发明实施例使用切片熏展装置捞取切片获得的透射电镜图像。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步详细描述。

本发明一种切片熏展装置如图1所示，一种切片熏展装置由活塞1、溶液筒2、乳头套3、硅胶套4和卡槽5组成。

1.各部件结抅

所述活塞1为带活塞柄6和活塞轴7的圆柱体，圆柱体高40mm、直径3mm，活塞柄6高1mm、直径5mm，活塞轴7长15mm、上顶面直径2mm、下底面直径3mm。

所述溶液筒2为带有溶液筒柄8、乳头9和容量刻度10的中空圆柱体，圆柱体高40mm、内直径3mm，溶液筒柄8为侧翼状，其侧翼长3mm，厚1mm，乳头9为中空圆台，其高7mm、上顶面内直径2.5mm、下底面内直径2mm。

所述乳头套3为下底面封闭的中空圆台，上顶面内直径2.4mm、下底面内直径2mm，下底面中央为十字切口11，切口长1.5mm。

所述硅胶套4为中空圆台，高7mm，上顶面内直径2.2mm，下底面内直径2mm，内部可放置直径为2mm的滤纸12，下底面为筛网13，筛网13直径2mm。

所述卡槽5高2mm、厚0.5mm，其位于溶液筒2的前端边缘，并带有两根凸起的卡槽柄14，其长3mm、宽1mm、高1mm，两根卡槽柄14之间距离为3mm。

2.各部件的连接关系

所述活塞柄6及活塞轴7依次位于活塞1末端；溶液筒柄8、容量刻度10及乳头9依次位于溶液筒2上，其中乳头9位于溶液筒2的前端，容量刻度10位于溶液筒2侧壁；十字切口11位于乳头套3的下底面中央，滤纸12位于硅胶套4内，筛网13位于硅胶套4的下底面；卡槽5位于溶液筒2的前端边缘，卡槽柄14位于卡槽5上；活塞1套装在溶液筒2内；溶液筒2的乳头9套装在乳头套3内；乳头套3套装在硅胶套4内；以上实现活塞1、溶液筒2、乳头套3和硅胶套4的依次紧密连接；通过外力拉拔，实现乳头9、乳头套3、硅胶套4的分离拆卸。

上述活塞1、溶液筒2由玻璃制成，其中溶液筒2为棕色玻璃制成。

上述乳头套3、硅胶套4和卡槽5由硅胶制成。

上述活塞1除活塞柄6和活塞轴7外，其他表面经过磨砂处理。

上述十字切口11在无压力状态下密闭。

上述筛网13的目数为3～200目。

上述卡槽5可拆卸。

使用本发明切片熏展装置对样品实施熏展的步骤为：

1.准备：将活塞1套装在溶液筒2内，将溶液筒2的乳头9放置入三氯甲烷液面，抽提活塞1的活塞柄6，将三氯甲烷吸入溶液筒2，将溶液筒2前端的乳头9套装在乳头套3内，将乳头套3套装在装有滤纸12的硅胶套4内，实现活塞1、溶液筒2、乳头9、乳头套3和硅胶套4的紧密连接；利用卡槽5上的卡槽柄14将溶液筒2固定于切片捞取装置上，调整溶液筒2上的卡槽5，使硅胶套4的筛网13与切片捞取装置的切片环之间的距离到达5mm备用；将铜网按照样品编号依次放入垫有滤纸的玻璃培养皿内备用。

2.将修好切面的包埋块安装到超薄切片机样品架上，调整好钻石刀口。

3.使用注射器将双蒸水注入钻石刀水槽内至液面平刀口。

4.启动超薄切片机进行超薄切片，使切片漂浮于钻石刀水槽内的双蒸水液面上。

5.手持切片捞取装置的手持杆，将捞片环对准漂浮在水面上的切片，往下覆盖切片并接触水面，使切片圈定在捞片环内。

6.轻轻按压切片熏展装置的活塞1，使活塞1下移，溶液筒2中的三氯甲烷由乳头9通过乳头套3上的十字切口11注入硅胶套4内的滤纸12上，滤纸12上的三氯甲烷挥发通过硅胶套4的筛网13对捞片环液面上的切片进行熏展，密切注意溶液筒2侧壁上的容量刻度10，根据液面变化判断注压入硅胶套4内滤纸12中的三氯甲烷的容量。

7.使用滤纸于捞片环上的点片口吸水后使切片粘于铜网，并使用滤纸在点片口轻压铜网上提切片捞取装置手持杆使捞取装置与铜网分离。

8.将粘贴有切片样品的铜网放入干燥箱内干燥。

9.使用醋酸双氧铀和柠檬酸铅对粘贴有切片样品的铜网进行双重染色。

10.将完成染色的样品进行透射电镜观察和采图，如图2所示。

总之，以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所作的均等变化与修饰，皆应属本发明专利的涵盖范围。

Claims (7)

1.一种切片熏展装置，其特征在于：装置由活塞(1)、溶液筒(2)、乳头套(3)、硅胶套(4)和卡槽(5)组成；

各部件结抅

所述活塞(1)为带活塞柄(6)和活塞轴(7)的圆柱体，圆柱体高40mm、直径3mm，活塞柄(6)高1mm、直径5mm，活塞轴(7)长15mm、上顶面直径2mm、下底面直径3mm；

所述溶液筒(2)为带有溶液筒柄(8)、乳头(9)和容量刻度(10)的中空圆柱体，圆柱体高40mm、内直径3mm，溶液筒柄(8)为侧翼状，其侧翼长3mm，厚1mm，乳头(9)为中空圆台，其高7mm、上顶面内直径2.5mm、下底面内直径2mm；

所述乳头套(3)为下底面封闭的中空圆台，上顶面内直径2.4mm、下底面内直径2mm，下底面中央为十字切口(11)，切口长1.5mm；

所述硅胶套(4)为中空圆台，高7mm，上顶面内直径2.2mm，下底面内直径2mm，内部可放置直径为2mm的滤纸(12)，下底面为筛网(13)，筛网(13)直径2mm；

所述卡槽(5)高2mm、厚0.5mm，其位于溶液筒(2)的前端边缘，并带有两根凸起的卡槽柄(14)，其长3mm、宽1mm、高1mm，两根卡槽柄(14)之间距离为3mm。

各部件的连接关系

所述活塞柄(6)及活塞轴(7)依次位于活塞(1)末端；溶液筒柄(8)、容量刻度(10)及乳头(9)依次位于溶液筒(2)上，其中乳头(9)位于溶液筒(2)的前端，容量刻度(10)位于溶液筒(2)侧壁；十字切口(11)位于乳头套(3)的下底面中央，滤纸(12)位于硅胶套(4)内，筛网(13)位于硅胶套(4)的下底面；卡槽(5)位于溶液筒(2)的前端边缘，卡槽柄(14)位于卡槽(5)上；活塞(1)套装在溶液筒(2)内；溶液筒(2)的乳头(9)套装在乳头套(3)内；乳头套(3)套装在硅胶套(4)内；以上实现活塞(1)、溶液筒(2)、乳头套(3)和硅胶套(4)的依次紧密连接；通过外力拉拔，实现乳头(9)、乳头套(3)、硅胶套(4)的分离拆卸。

2.根据权利要求1所述的一种切片熏展装置，其特征在于：所述活塞(1)、溶液筒(2)由玻璃制成，其中溶液筒(2)为棕色玻璃制成。

3.根据权利要求1所述的一种切片熏展装置，其特征在于：所述乳头套(3)、硅胶套(4)和卡槽(5)由硅胶制成。

4.根据权利要求1所述的一种切片熏展装置，其特征在于：所述活塞(1)除活塞柄(6)和活塞轴(7)外，其他表面经过磨砂处理。

5.根据权利要求1所述的一种切片熏展装置，其特征在于：所述十字切口(11)在无压力状态下密闭。

6.根据权利要求1所述的一种切片熏展装置，其特征在于：所述筛网(13)的目数为3～200目。

7.根据权利要求1所述的一种切片熏展装置，其特征在于：所述卡槽(5)可拆卸。