CN108387503A - 一种颗粒计数微粒标准物质的定值方法 - Google Patents
一种颗粒计数微粒标准物质的定值方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108387503A CN108387503A CN201810057429.2A CN201810057429A CN108387503A CN 108387503 A CN108387503 A CN 108387503A CN 201810057429 A CN201810057429 A CN 201810057429A CN 108387503 A CN108387503 A CN 108387503A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- filter membrane
- measured
- particle
- grid filter
- solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000002245 particle Substances 0.000 title claims abstract description 132
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 60
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims abstract description 40
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 118
- 229920001343 polytetrafluoroethylene Polymers 0.000 claims abstract description 10
- 239000004810 polytetrafluoroethylene Substances 0.000 claims abstract description 10
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims abstract description 7
- -1 polytetrafluoroethylene Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 claims description 24
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 7
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 7
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 7
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 claims 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 claims 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 64
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 15
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 102100039397 Gap junction beta-3 protein Human genes 0.000 description 4
- 101100061841 Homo sapiens GJB3 gene Proteins 0.000 description 4
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 4
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 4
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 4
- 239000013618 particulate matter Substances 0.000 description 4
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 4
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- XUCNUKMRBVNAPB-UHFFFAOYSA-N fluoroethene Chemical compound FC=C XUCNUKMRBVNAPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 3
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 1
- 238000003921 particle size analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 208000011117 substance-related disease Diseases 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/1012—Calibrating particle analysers; References therefor
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/2813—Producing thin layers of samples on a substrate, e.g. smearing, spinning-on
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N2001/2893—Preparing calibration standards
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/1012—Calibrating particle analysers; References therefor
- G01N2015/1014—Constitution of reference particles
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
- Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明提供了一种颗粒计数微粒标准物质的定值方法，所述方法采用经预处理的混合纤维素酯网格滤膜或聚四氟乙烯网格滤膜制备样片，并结合显微镜直接计数的方法来对颗粒计数微粒标准物质进行定值。经测定本发明的定值方法准确可靠，切实可行。该定值方法操作简便、准确度高、可实现微粒浓度低于107个/mL的样品的精确定值。
Description
技术领域
本发明涉及粒度标准物质技术领域，特别涉及一种颗粒计数微粒标准物质的定值方法。
背景技术
微粒分析仪、库尔特颗粒计数及粒度分析仪等可用于颗粒计数的仪器，都需要用颗粒计数微粒标准物质定期进行标定。流式细胞仪在进行细胞计数时，需要使用荧光颗粒计数微粒标准物质作为检测的内参。因此，颗粒计数微粒标准物质的准确定值成为颗粒计数仪器检测结果准确与否的关键。
通常，颗粒计数微粒标准物质的定值使用血球计数板的计数方法，属于显微镜直接计数法。血球计数板有两种不同的规格，一种血球计数板的计数室有25个中格，每个中格有16个小格，共400个小格，总容积为0.1μL；另一种类型的血球计数板的计数室有16个中格，每个中格有25个小格，一样共400个小格，总容积也为0.1μL。血球计数板的测样体积都很小，0.1μL相当于将1mL待测样品稀释10000倍。颗粒计数微粒标准物质的定值，要求微粒达到1000个以上，否则可能会由于计数误差过大而引起定值结果不准确。人体血小板和白细胞计数用微粒标准物质的微粒浓度分别达到1.3×107个/mL和1.6×108个/mL，0.1μL中微粒数量大于1000个，因此可以采用血球计数板的计数方法直接进行定值。当微粒浓度≤107个/mL时，0.1μL中微粒数量小于1000个，因此不适用于微粒浓度≤107个/mL样品的定值。
近年来，随着科技的迅速发展，相关领域的科研与生产对较少微粒数的颗粒计数微粒标准物质有了越来越多的需求。因此，实现对微粒浓度低于甚至远低于107个/mL的颗粒计数微粒标准物质的准确定值，具有非常重要的意义。
发明内容
有鉴于此，本发明提供一种颗粒计数微粒标准物质的定值方法，该方法操作简便、准确度高、可实现微粒浓度低于107个/mL的样品的精确定值。
本发明提供一种颗粒计数微粒标准物质的定值方法，所述的方法包括：
对待测溶液进行预处理；
对网格滤膜进行预处理，所述网格滤膜的孔径小于待测溶液中微粒的直径；
利用网格滤膜拦截一定体积的待测溶液中的微粒制备样片；
对样片进行显微镜计数；
根据显微镜计数结果计算待测溶液微粒浓度；
测定多次，取平均微粒浓度作为定值结果。
进一步地，所述待测溶液预处理方法包括：
在所述待测溶液微粒浓度≤2000个/mL时，采用超声处理使微粒分散；以及
在所述待测溶液微粒浓度＞2000个/mL时，将待测溶液稀释到微粒浓度≤2000个/mL，再采用超声处理使微粒分散。
进一步地，所述网格滤膜为混合纤维素酯网格滤膜或聚四氟乙烯网格滤膜中的一种。
进一步地，所述网格滤膜的预处理方法为将所述网格滤膜用异丙醇或丙三醇浸润。
进一步地，所述待测溶液中微粒的粒径为1μm～1000μm，所述网格滤膜的孔径为0.15μm～5μm。
进一步地，所述样片的制备方法包括：
将网格滤膜置于抽滤器上；
用移液管吸取一定量预处理后的待测溶液滴在所述网格滤膜上；
抽去稀释剂；
将截留预处理后的待测溶液中微粒的网格滤膜置于玻璃载物片上。
进一步地，所述样片显微镜计数的方法为直接逐格计数，逐格计数网格滤膜上截留的微粒数，累积网格滤膜上截留的总微粒数。
进一步地，所述待测溶液微粒浓度通过如下公式计算得到：
待测溶液微粒浓度＝网格滤膜上截留的总微粒数÷通过网格滤膜处理的预处理后的待测溶液体积×待测溶液的稀释倍数。
网格滤膜需要用异丙醇或丙三醇浸润的原因主要有以下两个方面：一是由于聚四氟乙烯网格滤膜大多具有疏水性，对于水相悬浮的样品，水溶液不易渗透；二是网格滤膜通常为白色，与血球计数板相比透光性较差，在显微镜下直接观测时，对于粒径较小的颗粒，难以分辨清楚。
本发明采用网格滤膜的孔径有多种规格可选(0.15μm～5μm)，可根据定值颗粒的粒径大小自由选择，保证颗粒被网格滤膜全部截留的同时，使得水相高效过滤。
本发明对于微粒浓度≤2000个/mL的样品，可直接制样；对于微粒浓度＞2000个/mL的样品，稀释后再制样，始终保持网格滤膜上的总微粒数为1000～2000个。由于总微粒数过少容易导致定值结果偏差较大，过多又会增大实际操作难度，使定值过程耗时费力。
本发明所述定值方法采用经预处理的混合纤维素酯网格滤膜或聚四氟乙烯网格滤膜制备样片，并结合显微镜直接计数的方法来对颗粒计数微粒标准物质进行定值，实现了对微粒浓度≤107个/mL的样品的精确定值。本发明的定值方法对颗粒粒径的适用范围广，可用于粒径为1μm～1000μm颗粒计数微粒标准物质的定值。
附图说明
通过以下参照附图对本发明实施例的描述，本发明的上述以及其它目的、特征和优点将更为清楚，在附图中：
图1是本发明实施例的颗粒计数微粒标准物质的定值方法的流程图；
图2是本发明实施例的制备样片方法的流程图；
图3是本发明实施例1颗粒计数微粒标准物质的显微镜照片；
图4是本发明实施例3荧光计数微粒标准物质的显微镜照片。
具体实施方式
以下基于实施例对本发明进行描述，但是本发明并不仅仅限于这些实施例。在下文对本发明的细节描述中，详尽描述了一些特定的细节部分。对本领域技术人员来说没有这些细节部分的描述也可以完全理解本发明。
除非上下文明确要求，否则整个说明书和权利要求书中的“包括”、“包含”等类似词语应当解释为包含的含义而不是排他或穷举的含义；也就是说，是“包括但不限于”的含义。
图1是本发明实施例的颗粒计数微粒标准物质的定值方法的流程图，如图1所示，所述方法包括如下步骤：
步骤S100、对待测溶液进行预处理。
步骤S200、对网格滤膜进行预处理，所述网格滤膜的孔径小于待测溶液中的微粒的直径。
所述网格滤膜可以通过购买获得，本发明实施例中所述网格滤膜为北京北化黎明膜分离技术有限责任公司生产的混合纤维素酯网格滤膜或聚四氟乙烯网格滤膜，孔径为0.15μm～5μm，直径为25mm，每个网格滤膜上有55个小方格。
步骤S300、利用预处理后网格滤膜拦截一定体积的预处理后的待测溶液中的微粒制备样片。
步骤S400、对样片进行显微镜计数。
所述显微镜计数的方法为直接逐格计数，逐格计数网格滤膜上截留的微粒数，累积网格滤膜上截留的总微粒数。
步骤S500、根据预处理后网格滤膜截留总微粒数计算待测溶液微粒浓度。
计算公式为：
待测溶液微粒浓度＝网格滤膜上截留的总微粒数÷通过网格滤膜处理的预处理后的待测溶液体积×待测溶液的稀释倍数。
步骤S600、测定多次，取平均微粒浓度作为定值结果。
在步骤S100中，所述待测溶液预处理方法包括：
在所述待测溶液微粒浓度≤2000个/mL时，采用超声处理使微粒分散；以及
在所述待测溶液微粒浓度＞2000个/mL时，将待测溶液稀释到微粒浓度≤2000个/mL，再采用超声处理使微粒分散。
在步骤S200中，所述对网格滤膜进行预处理的方法为将所述网格滤膜用异丙醇或丙三醇浸润。
在步骤S300中，如图2所示，所述制备样片的方法包括以下步骤：
S310、将预处理后的网格滤膜置于抽滤器上。
S320、用移液管吸取一定量预处理后的待测溶液滴在所述网格滤膜上。
S330、抽去稀释剂。
S340、将截留预处理后的待测溶液中微粒的网格滤膜置于玻璃载物片上。
通过上述计数方法实现了对微粒浓度≤107个/mL的样品的精确定值。测量结果准确可靠，切实可行。
实施例1、标称值为1500个/mL颗粒计数微粒标准物质的定值
颗粒计数微粒标准物质为平均粒径为100μm的单分散聚苯乙烯乳胶粒子。
定值方法为：
对待测溶液进行预处理。测定前采用超声处理使待测溶液中微粒分散。
对网格滤膜进行预处理。将所述网格滤膜用丙三醇浸润。所述网格滤膜可以通过购买获得，本实施例中所述网格滤膜为北京北化黎明膜分离技术有限责任公司生产的混合纤维素酯网格滤膜，孔径为1μm，直径为25mm，每个网格滤膜上有55个小方格。
利用预处理后网格滤膜拦截一定体积的预处理后待测溶液中的微粒制备样片。将预处理后网格滤膜置于抽滤器上；用经准确标定的1mL移液管吸取1mL预处理后待测溶液滴在所述的预处理后网格滤膜上；抽去稀释剂；将截留预处理后的待测溶液中微粒的网格滤膜置于玻璃载物片上。
对样片显微镜计数。图3所示为本实施例颗粒计数微粒标准物质的显微镜照片。用CX31型显微镜(日本OLYMPUS)，目镜放大倍数×10，物镜放大倍数×4，逐格计数网格滤膜上截留的微粒数，累积网格滤膜上截留的总微粒数。
根据网格滤膜上截留的总微粒数计算待测溶液微粒浓度。按照如下计算公式计算待测溶液微粒浓度：
待测溶液微粒浓度＝网格滤膜上截留的总微粒数÷通过网格滤膜处理的预处理后的待测溶液体积×待测溶液的稀释倍数。
测定多次，取平均微粒浓度作为定值结果。
定值不确定度由显微镜测定、移液管、不均匀性和不稳定性引入的不确定度合成。定值不确定度的计算按照JJF 1343-2012“标准物质定值的通用原则及统计学原理”中规定的方法进行(下同)。上述颗粒计数微粒标准物质的定值结果为1527个/mL，3次测量的相对标准偏差为1.14％，计算得到定值不确定度为3.3％。使用经标定的不溶性微粒分析仪(GWF-5JA型，天津天河)对上述颗粒计数微粒标准物质的微粒浓度进行测试，测定结果为1536个/mL，与定值结果相差不大，表明本发明的定值方法准确可靠，切实可行。
实施例2、标称值为400个/mL颗粒计数微粒标准物质的定值
颗粒计数微粒标准物质为平均粒径为20μm的单分散聚苯乙烯乳胶粒子。
定值方法为：
对待测溶液进行预处理。测定前采用超声处理使待测溶液中微粒分散。
对网格滤膜进行预处理。将所述网格滤膜用异丙醇浸润。所述网格滤膜可以通过购买获得，本实施例中所述网格滤膜为北京北化黎明膜分离技术有限责任公司生产的聚四氟乙烯网格滤膜，孔径为0.45μm，直径为25mm，每个网格滤膜上有55个小方格。
利用预处理后网格滤膜拦截一定体积的预处理后待测溶液中的微粒制备样片。将预处理后网格滤膜置于抽滤器上；用经准确标定的5mL移液管吸取4mL预处理后待测溶液滴在所述的预处理后网格滤膜上；抽去稀释剂；将截留预处理后的待测溶液中微粒的网格滤膜置于玻璃载物片上。
对样片显微镜计数。用CX31型显微镜(日本OLYMPUS)，目镜放大倍数×10，物镜放大倍数×25，逐格计数网格滤膜上截留的微粒数，累积网格滤膜上截留的总微粒数。
根据网格滤膜上截留的总微粒数计算待测溶液微粒浓度。按照如下计算公式计算待测溶液微粒浓度：
待测溶液微粒浓度＝网格滤膜上截留的总微粒数÷通过网格滤膜处理的预处理后的待测溶液体积×待测溶液的稀释倍数。
测定多次，取平均微粒浓度作为定值结果。
定值不确定度由显微镜测定、移液管、不均匀性和不稳定性引入的不确定度合成。
上述颗粒计数微粒标准物质的定值结果为395个/mL，3次测量的相对标准偏差为0.89％，计算得到定值不确定度为2.7％。使用经标定的不溶性微粒分析仪(GWF-5JA型，天津天河)对上述颗粒计数微粒标准物质的微粒浓度进行测试，测定结果为398个/mL，与定值结果相差不大，表明本发明的定值方法准确可靠，切实可行。
实施例3、标称值为0.5×106个/mL荧光计数微粒标准物质的定值
颗粒计数微粒标准物质为平均粒径为7.5μm的单分散聚苯乙烯荧光粒子。
定值方法为：
对待测溶液进行预处理。待测溶液稀释1000倍：用经准确标定的1mL移液管移取1mL至1000mL容量瓶，用超纯水定容至刻度。测定前采用超声处理使稀释后待测溶液中微粒分散。
对网格滤膜进行预处理。将所述网格滤膜用丙三醇浸润。所述网格滤膜可以通过购买获得，本实施例中所述网格滤膜为北京北化黎明膜分离技术有限责任公司生产的聚四氟乙烯网格滤膜，孔径为0.45μm，直径为25mm，每个网格滤膜上有55个小方格。
利用预处理后网格滤膜拦截一定体积的预处理后待测溶液中的微粒制备样片。将预处理后网格滤膜置于抽滤器上；用经准确标定的2mL移液管吸取2mL预处理后待测溶液滴在所述的预处理后网格滤膜上；抽去稀释剂；将截留预处理后的待测溶液中微粒的网格滤膜置于玻璃载物片上。
对样片显微镜计数。图4所示为本实施例荧光计数微粒标准物质的显微镜照片。用CX31型显微镜(日本OLYMPUS)，目镜放大倍数×10，物镜放大倍数×25，逐格计数网格滤膜上截留的微粒数，累积网格滤膜上截留的总微粒数。
根据网格滤膜上截留的总微粒数计算待测溶液微粒浓度。按照如下计算公式计算待测溶液微粒浓度：
待测溶液微粒浓度＝网格滤膜上截留的总微粒数÷通过网格滤膜处理的预处理后的待测溶液体积×待测溶液的稀释倍数。
测定多次，取平均微粒浓度作为定值结果。
定值不确定度由显微镜测定、移液管和容量瓶、不均匀性和不稳定性引入的不确定度合成。
上述颗粒计数微粒标准物质的定值结果为0.511×106个/mL，3次测量的相对标准偏差为1.36％，计算得到定值不确定度为4.3％。使用经标定的不溶性微粒分析仪(GWF-5JA型，天津天河)对上述颗粒计数微粒标准物质的微粒浓度进行测试，测定结果为0.507×106个/mL，与定值结果相差不大，表明本发明的定值方法准确可靠，切实可行。
实施例4、标称值为107个/mL颗粒计数微粒标准物质的定值
颗粒计数微粒标准物质为平均粒径为2.2μm的单分散聚苯乙烯乳胶粒子。
定值方法为：
对待测溶液进行预处理。待测溶液稀释10000倍：用经准确标定的1mL移液管移取0.1mL至1000mL容量瓶，用超纯水定容至刻度。测定前采用超声处理使稀释后待测溶液中微粒分散。
对网格滤膜进行预处理。将所述网格滤膜用异丙醇浸润。所述网格滤膜可以通过购买获得，本实施例中所述网格滤膜为北京北化黎明膜分离技术有限责任公司生产的混合纤维素酯网格滤膜，孔径为0.15μm，直径为25mm，每个网格滤膜上有55个小方格。
利用预处理后网格滤膜拦截一定体积的预处理后待测溶液中的微粒制备样片。将预处理后网格滤膜置于抽滤器上；用经准确标定的2mL移液管吸取2mL预处理后待测溶液滴在所述的预处理后网格滤膜上；抽去稀释剂；将截留预处理后的待测溶液中微粒的网格滤膜置于玻璃载物片上。
对样片显微镜计数。用CX31型显微镜(日本OLYMPUS)，目镜放大倍数×10，物镜放大倍数×40，逐格计数网格滤膜上截留的微粒数，累积网格滤膜上截留的总微粒数。
根据网格滤膜截留总微粒数计算待测溶液微粒浓度。按照如下计算公式计算待测溶液微粒浓度：
待测溶液微粒浓度＝网格滤膜上截留的总微粒数÷通过网格滤膜处理的预处理后的待测溶液体积×待测溶液的稀释倍数。
测定多次，取平均微粒浓度作为定值结果。
定值不确定度由显微镜测定、移液管和容量瓶、不均匀性和不稳定性引入的不确定度合成。
上述颗粒计数微粒标准物质的定值结果为0.997×107个/mL，3次测量的相对标准偏差为1.21％，计算得到定值不确定度为3.5％。使用经标定的不溶性微粒分析仪(GWF-5JA型，天津天河)对上述颗粒计数微粒标准物质的微粒浓度进行测试，测定结果为1.006×107个/mL，与定值结果相差不大，表明本发明的定值方法准确可靠，切实可行。
以上所述仅为本发明的优选实施例，并不用于限制本发明，对于本领域技术人员而言，本发明可以有各种改动和变化。凡在本发明的精神和原理之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种颗粒计数微粒标准物质的定值方法，其特征在于，所述方法包括：
对待测溶液进行预处理；
对网格滤膜进行预处理，所述网格滤膜的孔径小于待测溶液中微粒的直径；
利用网格滤膜拦截一定体积的待测溶液中的微粒制备样片；
对样片进行显微镜计数；
根据显微镜计数结果计算待测溶液微粒浓度；
测定多次，取平均微粒浓度作为定值结果。
2.根据权利要求1所述的定值方法，其特征在于，所述待测溶液预处理方法包括：
在所述待测溶液微粒浓度≤2000个/mL时，采用超声处理使微粒分散；以及
在所述待测溶液微粒浓度＞2000个/mL时，将待测溶液稀释到微粒浓度≤2000个/mL，再采用超声处理使微粒分散。
3.根据权利要求1所述的定值方法，其特征在于，所述网格滤膜为混合纤维素酯网格滤膜或聚四氟乙烯网格滤膜中的一种。
4.根据权利要求1所述的定值方法，其特征在于，所述网格滤膜的预处理方法为将所述网格滤膜用异丙醇或丙三醇浸润。
5.根据权利要求1所述的定值方法，其特征在于，所述待测溶液中微粒的粒径为1μm～1000μm，所述网格滤膜的孔径为0.15μm～5μm。
6.根据权利要求1所述的定值方法，其特征在于，所述样片的制备方法包括：
将网格滤膜置于抽滤器上；
用移液管吸取一定量预处理后的待测溶液滴在所述网格滤膜上；
抽去稀释剂；
将截留预处理后的待测溶液中微粒的网格滤膜置于玻璃载物片上。
7.根据权利要求1所述的定值方法，其特征在于，所述样片显微镜计数的方法为直接逐格计数。
8.根据权利要求1所述的定值方法，其特征在于，所述待测溶液微粒浓度通过如下公式计算得到：
待测溶液微粒浓度＝网格滤膜上截留的总微粒数÷通过网格滤膜处理的预处理后的待测溶液体积×待测溶液的稀释倍数。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810057429.2A CN108387503B (zh) | 2018-01-22 | 2018-01-22 | 一种颗粒计数微粒标准物质的定值方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810057429.2A CN108387503B (zh) | 2018-01-22 | 2018-01-22 | 一种颗粒计数微粒标准物质的定值方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN108387503A true CN108387503A (zh) | 2018-08-10 |
| CN108387503B CN108387503B (zh) | 2021-06-22 |
Family
ID=63077118
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201810057429.2A Active CN108387503B (zh) | 2018-01-22 | 2018-01-22 | 一种颗粒计数微粒标准物质的定值方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN108387503B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111220516A (zh) * | 2018-11-27 | 2020-06-02 | 中国航发商用航空发动机有限责任公司 | 一种检测航空工作液中颗粒污染物含量方法 |
| CN112284869A (zh) * | 2020-09-02 | 2021-01-29 | 湖南省药品检验研究院(湖南药用辅料检验检测中心) | 一种可见异物标准品及其制备方法、制备装置 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005119201A1 (en) * | 2004-06-01 | 2005-12-15 | Umedik Inc. | Method and device for rapid detection and quantitation of macro and micro matrices |
| CN102908903A (zh) * | 2012-11-02 | 2013-02-06 | 东华大学 | 一种利用生物制剂进行中空纤维膜表面亲水改性的方法 |
| CN104101586A (zh) * | 2014-07-23 | 2014-10-15 | 中国计量科学研究院 | 一种微球荧光强度标准物质的定值方法 |
| CN104593475A (zh) * | 2015-02-03 | 2015-05-06 | 武汉市环境保护科学研究院 | 一种检测水体细菌数量的荧光显微计数方法 |
| CN105004643A (zh) * | 2015-06-30 | 2015-10-28 | 中国石油大学(华东) | 一种催化裂化油浆中固含物粒径分布的测定方法 |
-
2018
- 2018-01-22 CN CN201810057429.2A patent/CN108387503B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005119201A1 (en) * | 2004-06-01 | 2005-12-15 | Umedik Inc. | Method and device for rapid detection and quantitation of macro and micro matrices |
| CN102908903A (zh) * | 2012-11-02 | 2013-02-06 | 东华大学 | 一种利用生物制剂进行中空纤维膜表面亲水改性的方法 |
| CN104101586A (zh) * | 2014-07-23 | 2014-10-15 | 中国计量科学研究院 | 一种微球荧光强度标准物质的定值方法 |
| CN104593475A (zh) * | 2015-02-03 | 2015-05-06 | 武汉市环境保护科学研究院 | 一种检测水体细菌数量的荧光显微计数方法 |
| CN105004643A (zh) * | 2015-06-30 | 2015-10-28 | 中国石油大学(华东) | 一种催化裂化油浆中固含物粒径分布的测定方法 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111220516A (zh) * | 2018-11-27 | 2020-06-02 | 中国航发商用航空发动机有限责任公司 | 一种检测航空工作液中颗粒污染物含量方法 |
| CN112284869A (zh) * | 2020-09-02 | 2021-01-29 | 湖南省药品检验研究院(湖南药用辅料检验检测中心) | 一种可见异物标准品及其制备方法、制备装置 |
| CN112284869B (zh) * | 2020-09-02 | 2023-12-19 | 湖南省药品检验研究院(湖南药用辅料检验检测中心) | 一种可见异物标准品及其制备方法、制备装置 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN108387503B (zh) | 2021-06-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Goossens | Techniques to measure grain‐size distributions of loamy sediments: a comparative study of ten instruments for wet analysis | |
| US8312763B2 (en) | Method and apparatus for trapping single particles in microfluidic channels | |
| CN103471982B (zh) | 一种血细胞分析芯片、分析仪及分析方法 | |
| JP4814912B2 (ja) | 光学式赤血球および白血球の弁別 | |
| JP6823608B2 (ja) | 粘度測定 | |
| JP2016526671A (ja) | エアロゾルの希釈のための方法および装置 | |
| CN106823823B (zh) | 一种测定超微滤膜孔径及孔径分布的方法 | |
| CN104101586A (zh) | 一种微球荧光强度标准物质的定值方法 | |
| CN102539397B (zh) | 荧光光谱校正方法和荧光光谱测量装置 | |
| CN108387503A (zh) | 一种颗粒计数微粒标准物质的定值方法 | |
| US9222856B2 (en) | Measurement of particle morphology using filtration | |
| CN105301031B (zh) | 一维核磁共振氢谱法测定三硅氧烷表面活性剂中含氢硅油残留量的方法 | |
| CN108663292A (zh) | 油液污染度分析仪校准方法 | |
| US20230148043A1 (en) | Fluidic device for corpuscle analysis and related method | |
| Esteves et al. | Absorbency of superabsorbent polymers in cementitious environments | |
| CN105865990B (zh) | 一种金刚石微粉粒度分析取样定量方法 | |
| US5377005A (en) | Method for measuring particle size of a dispersed phase in a fluid stream | |
| CN104483245A (zh) | 一种利用非对称场流仪分离c60纳米晶体颗粒尺度分布的方法 | |
| CN115266627B (zh) | 一种快速测量混合微塑料与铅的紫外检测法 | |
| CN115559715A (zh) | 一种超高压低渗透气藏储层产水评价方法 | |
| Selim et al. | Brownian diffusion of hard spheres at finite concentrations | |
| CN207923722U (zh) | Icp-oes氢化物雾化系统 | |
| Hosseini et al. | Low-cost sheath-less microfluidic impedance cytometry for point-of-care applications | |
| Zhang et al. | Absolute quantification of particle number concentration using a digital single particle counting system | |
| US20240192105A1 (en) | Methods for determining the density of polymer particles for quality control materials using split flow thin (splitt) cell fractionation principle and fractionation cell for carrying out the methods |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: A setting method of particle counting particle reference material Effective date of registration: 20220209 Granted publication date: 20210622 Pledgee: Beijing finance Company limited by guarantee Pledgor: BEIJING HAIANHONGMENG REFERENCE MATERIAL TECHNOLOGY CO.,LTD. Registration number: Y2022990000080 |
|
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20230118 Granted publication date: 20210622 Pledgee: Beijing finance Company limited by guarantee Pledgor: BEIJING HAIANHONGMENG REFERENCE MATERIAL TECHNOLOGY CO.,LTD. Registration number: Y2022990000080 |
|
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: A method for calibrating particulate reference materials for particle counting Effective date of registration: 20230221 Granted publication date: 20210622 Pledgee: Beijing finance Company limited by guarantee Pledgor: BEIJING HAIANHONGMENG REFERENCE MATERIAL TECHNOLOGY CO.,LTD. Registration number: Y2023990000124 |