CN108289895B - 噻吩并嘧啶衍生物及其用途 - Google Patents

Abstract

具有通式I或III的化合物、以及包含该化合物的药物组合物。本发明的化合物可以用作突变表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR‑TK)抑制剂，以及用于治疗EGFR相关疾病和病症例如癌症。

Description

噻吩并嘧啶衍生物及其用途

技术领域

本发明涉及癌症治疗，具体涉及抑制癌细胞的表皮生长因子受体的组合物和方法。

背景技术

表皮生长因子受体(EGFR，Erbb1)参与正常细胞和恶性肿瘤细胞的增殖。已经发现EGFR的过表达与癌症例如肺癌、乳腺癌、头颈癌以及膀胱癌相关。

在EGFR家族有四种受体酪氨酸激酶：EGFR(ErbB1)、人表皮生长因子受体2(HER2，ErbB2)、HER3(ErbB3)和HER4(ErbB4)。酪氨酸激酶起到信号转导的作用。配体，在细胞外与受体的配体结合结构域结合，从而形成有活性的同型二聚体或异型二聚体，引起EGFR的自体磷酸化以及停靠蛋白的活化(Greulich H.Chen，PLoS Med，2005，2，e313；Olayioye MA，EMBO J，2000，19，3159-3167)。这些信号促进细胞进程例如增殖、蛋白合成、血管再生、细胞生长和存活。

EGFR的过表达存在于约70％的癌症患者中(Seymour，L.K.，Curr Drug Targets，2001，2，117-133)。EGFR酪氨酸激酶已经成为治疗靶点，且已经开发出抑制激酶活性并阻断其信号转导通路的一些药物来作为ATP竞争物，例如FDA批准的特罗凯(Tarceva)、易瑞沙(Irressa)和阿法替尼(Gilotrif)(三者均为4-氨基-喹唑啉类抑制剂)。这些药物已经广泛用在EGFR过表达的非小细胞肺癌(NSCLC)患者中，包括野生型和活性突变患者(W.Pao，Nat.Rev.Cancer，2010，10，760-774；R.Rosell，Lancet Oncol，2012，13，239-246；N.U.Lin，Breast Cancer Res，2004，6，204-210)。

在患者中有两个常见活性突变：L858R和delE746-A750。对于机制的研究表明，特罗凯和易瑞沙对于活性突变患者的临床活性可能是抑制剂与突变激酶的结合亲和性加强以及突变细胞对原癌基因的成瘾这两者结合作用的结果(JA.Engelman，Science，2007，316，1039-1043)。

然而，这些具有4-氨基-喹唑啉类核心结构的1代和2代抑制剂，在约50％具有复发和获得性耐药疾病例如NSCLC的患者中，效果并不好。获得性耐药是由卡口残基T790M的突变造成(LV.Sequist，Sci Transl Med，2011，3，75ra26；S.Kobayashi，N Engl J Med，2005，352，786-792；W.Pao，PLoS Med，2005，2，373；JA.Engelman，Semin Respir Crit Care Med，2005，26，314-322)。该突变(第二种突变)增加ATP对EGFR酪氨酸激酶的结合亲和性并影响这些制剂的热力学和动力学结合特性(CH.Yun，Proc Natl Acad Sci USA，2008，105，2070-2075；Cancer Cell，2007，11，217-227；M.Azam，Nat Struct Mol Biol，2008，15，1109-1118；TA.Carter，Proc Natl Acad Sci USA，2005，102，11011-11016)。在卡口区域的较大体积的甲硫氨酸侧链阻止那些药物分子以临床有效浓度与ATP结合口袋进行相互作用。

第二代共价EGFR抑制剂，例如FDA批准的阿法替尼和处于临床试验的化合物HKI-272对于T790M突变患者有效。但是阿法替尼因为引起野生型EGFR抑制的剂量限制性毒性，其在活性突变患者中的用途受到限制。

因此，需要找到一种选择性地抑制突变EGFR而不影响野生型EGFR的治疗药物。

发明内容

本发明的稠环嘧啶衍生物满足上述需求，是突变表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶的有效的选择性抑制剂，且不影响野生型EGFR，实现降低的副作用。本发明的化合物对于治疗靶点有活性，且有效用于治疗与EGFR、HER2的不正常活性相关的疾病，例如癌症。

本发明涉及稠环嘧啶衍生物，其选择性地且有效地抑制与突变表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶的癌症或肿瘤，而不影响野生型EGFR，以降低副作用。

本发明的化合物具有以下通式(I)：

或通式(III)：

或其各自的几何异构体，及其药学上可接受的盐、前药和溶剂化物，其中，

R和R¹独立地为H、卤素、SH、OH、NO₂、CN、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷氧羰基、二C_1-6烷基胺基C_2-6烷基羰基、氨基、C_1-6烷基胺基、二C_1-6烷基胺基、胺基甲酰、C_1-6烷基胺基甲酰、二(C_1-6烷基)胺基甲酰、二C_1-6烷基胺基C_2-6烷基胺基甲酰、胺磺酰基、C_1-6烷基磺酰基、C_1-6烷基亚磺酰基、二C_1-6烷基胺基C_2-6烷基胺基磺酰基、二C_1-6烷基膦酰基C_1-6烷基、羟基C_2-6烷氧基、羟基羰基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、二C_1-6烷基胺基C_2-6烷基胺基、取代的二C_1-6烷基胺基C_2-6烷基胺基、胺基C_1-6烷基、二C_1-6烷基胺基乙酰基、羟基二C_2-6烷基胺基、C_1-6烷基胺基C_2-6烷氧基、二C_1-6烷基胺基C_2-6烷氧基、杂芳基，杂环基，杂环氧基、杂环硫代基、杂环亚磺酰基、杂环磺酰基、杂环胺基磺酰基、杂环C_1-6烷基、杂环C_1-6烷氧基、杂环胺基、杂环C_1-6烷基胺基、杂环羰基、或杂环C_1-6烷基羰基；其中杂环基是含一个或多个N、O、S、SO和SO₂的饱和或部分饱和的3-8元单杂环或双杂环，且其中C或杂原子可以具有一个或多个选自C_1-6烷基、羟基、羟基C_1-6烷基、C_1-6烷基羰基、C_1-6烷基胺基、和二C_1-6烷基胺基的取代基。

在一个实施方式中，本发明还公开包含上述化合物和药学上可接受赋形剂的药物组合物，以及使用本发明药物组合物治疗癌症的方法。

在一个实施方式中，本发明的化合物选自：

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-4-甲氧基-5-[[4-(1-甲基吲哚-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基]胺基]苯基]丙-2-烯酰胺，

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-5-[[4-(1-乙基吲哚-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基]胺基]-4-甲氧基-苯基]丙-2-烯酰胺，

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-5-[[4-(1-异丙基吲哚-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基]胺基]-4-甲氧基-苯基]丙-2-烯酰胺，

N-[5-[[4-(1-叔丁基吲哚-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基]胺基]-2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-4-甲氧基-苯基]丙-2-烯酰胺，

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-5-[[4-(1，5-di甲基吲哚-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基]胺基]-4-甲氧基-苯基]丙-2-烯酰胺，

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-4-甲氧基-5-[[4-(5-甲氧基-1-甲基-吲哚-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基]胺基]苯基]丙-2-烯酰胺，

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-4-甲氧基-5-[[4-(6-甲氧基-1-甲基-吲哚-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基]胺基]苯基]丙-2-烯酰胺，

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-5-[[4-(1，6-二甲基吲哚-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基]胺基]-4-甲氧基-苯基]丙-2-烯酰胺，和

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-4-甲氧基-5-[[4-(1-甲基吲哚-3-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2-基]胺基]苯基]丙-2-烯酰胺。

同时还公开使用本发明化合物作为选择性的突变表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TK)抑制剂、以及用于治疗EGFR相关疾病和病症例如癌症的方法。本发明的药物组合物可以用于抑制过表达表皮生长因子受体(EGFR)的癌细胞的生长，包括对细胞施用有效量的权利要求1的化合物。在一个实施方式中，癌细胞表达的EGFR是突变EGFR。例如，突变EGFR是T790M突变、L858R突变或E746-A750缺失突变。

本发明还提供治疗有需求的受试者的方法，包括对受试者施用本发明的药物组合物。在一个实施方式中，受试者是罹患由不正常细胞增殖，例如由EGFR过表达引起的不正常细胞增殖，引起的疾病的人。在一个实施方式中，不正常细胞增殖由选自ErbB1、ErbB2、ErbB3和ErbB4的EGFR的过表达所引起的不正常细胞增殖。在一个实施方式中，受试者罹患复发的或获得性耐药恶性肿瘤疾病。在一个实施方式中，受试者是罹患NSCLC的人。

具体实施方式

在第一个实施方式中，本发明的化合物具有以下示出的式(I)，或其几何异构体、对映异构体、非对映异构体、外消旋物、药学上可接受的盐、前药和溶剂化物：

R和R¹独立地为H、卤素、SH、OH、NO₂、CN、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷氧羰基、二C_1-6烷基胺基C_2-6烷基羰基、氨基、C_1-6烷基胺基、二C_1-6烷基胺基、胺基甲酰、C_1-6烷基胺基甲酰、二(C_1-6烷基)胺基甲酰、二C_1-6烷基胺基C_2-6烷基胺基甲酰、胺磺酰基、C_1-6烷基磺酰基、C_1-6烷基亚磺酰基、二C_1-6烷基胺基C_2-6烷基胺基磺酰基、二C_1-6烷基膦酰基C_1-6烷基、羟基C_2-6烷氧基、羟基羰基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、二C_1-6烷基胺基C_2-6烷基胺基、取代的二C_1-6烷基胺基C_2-6烷基胺基、胺基C_1-6烷基、二C_1-6烷基胺基乙酰基、羟基二C_2-6烷基胺基、C_1-6烷基胺基C_2-6烷氧基、二C_1-6烷基胺基C_2-6烷氧基、杂芳基，杂环基，杂环氧基、杂环硫代基、杂环亚磺酰基、杂环磺酰基、杂环胺基磺酰基、杂环C_1-6烷基、杂环C_1-6烷氧基、杂环胺基、杂环C_1-6烷基胺基、杂环羰基、或杂环C_1-6烷基羰基；其中杂环基是含一个或多个N、O、S、SO和SO₂的饱和或部分饱和的3-8元单杂环或双杂环，且其中C或杂原子可以具有一个或多个选自C_1-6烷基、羟基、羟基C_1-6烷基、C_1-6烷基羰基、C_1-6烷基胺基、和二C_1-6烷基胺基的取代基。

在第二个实施方式中，化合物具有以下示出的式(II)，或其几何异构体、对映异构体、非对映异构体、外消旋物、药学上可接受的盐、前药和溶剂化物：

其中，R¹的定义如上。

在第三个实施方式中，化合物具有以下示出的式(III)，或其几何异构体、对映异构体、非对映异构体、外消旋物、药学上可接受的盐、前药和溶剂化物：

其中，R和R¹的定义如上。

在第四个实施方式中，化合物具有以下示出的式(IV)，或其几何异构体、对映异构体、非对映异构体、外消旋物、药学上可接受的盐、前药和溶剂化物：

其中，R¹的定义如上。

本发明的代表性化合物还包括，但不限于，以下表1中列出的化合物或其几何异构体、对映异构体、非对映异构体、外消旋物、药学上可接受的盐、前药和溶剂化物：

表1

本发明提供预防或治疗与细胞的异常增殖、分化或存活有关的疾病或症状的方法。在一个实施方式中，本发明还提供本发明一种或多种化合物在药物制备中的用途，该药物用于中止或减少与细胞的异常增殖、分化或存活相关的疾病。在优选的实施方式中，疾病为癌症。在一个实施方式中，本发明涉及在有治疗需求的受试者中治疗癌症的方法，包括向该受试者施用治疗有效量的本发明化合物。

与其他已知的EGFR抑制剂相比，本发明的化合物显示出更好的活性/效力、和/或较低的毒性问题、和/或更好的物理特性(例如水溶性、渗透性和蛋白结合)、和/或较好的代谢特性。因此，本发明的化合物可用于治疗与EGFR和/或EGFR的活性突变和/或EGFR的耐药突变有关的疾病的治疗。

大体而言，相比于野生型EGFR，本文所述的化合物和组合物可用于EGFR突变的突变。在一些实例中，EGFR突变为T790M，EGFR的其他突变为L858R或T790M。在另一个实例中，其可以是EGFR的缺失突变，E746-A750缺失，是一种EGFR的活性突变。

本发明化合物作为选择性抑制剂的活性可以在细胞系中体外检测或进行体内检测。体外检测确定磷酸化活性和随后功能的抑制，或活化EGFR的ATP酶活性的抑制。

术语“癌症”是指由恶性肿瘤细胞的增殖引起的任何癌症，例如肿瘤、赘生物、癌、肉瘤、白血病、淋巴瘤等。例如，癌症包括但不限于间皮瘤、白血病和淋巴瘤例如皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)、非皮肤外周T细胞淋巴瘤、与人T淋巴细胞病毒(HTLV)相关的淋巴瘤例如成人T细胞白血病/淋巴瘤(ATLL)、B细胞淋巴瘤、急性非淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞性白血病、急性髓细胞性白血病、淋巴瘤、和多发性骨髓瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、霍奇金淋巴瘤、Burkitt淋巴瘤、成人T细胞白血病淋巴瘤、急性髓细胞样白血病(AML)、慢性髓细胞样白血病(CML)、或肝细胞癌。其他的实例包括骨髓增生异常综合征、儿童实体瘤例如脑瘤、神经母细胞瘤、眼癌、肾母细胞瘤、骨瘤、和软组织肉瘤、成人的常见实体瘤例如头颈癌(例如，口腔癌、喉癌、鼻咽癌和食道癌)、泌尿生殖器癌(例如，前列腺癌、膀胱癌、肾癌、子宫癌、卵巢癌、睾丸癌)、肺癌(例如，小细胞肺癌和非小细胞肺癌)、乳癌、胰腺癌、黑色素瘤和其他皮肤癌、胃癌、脑瘤、与Gorlin综合征相关的肿瘤(例如，成神经管细胞瘤、脑(脊)膜瘤等)、和肝癌。其他示例性的可被当前化合物治疗的癌症形式包括但不限于骨骼肌或平滑肌癌、胃癌、小肠癌、直肠癌、唾液腺癌、子宫内膜癌、肾上腺癌、肛门癌、直肠癌、甲状旁腺癌和垂体癌。

可用本文所述化合物预防、治疗和研究的其他癌症为，例如，结肠癌、家族性腺体息肉癌、遗传性非息肉病性大肠癌、或黑色素瘤。此外，癌症包括但不限于唇癌、喉癌、下咽癌、舌癌、唾液腺癌、胃癌、腺癌、甲状腺癌(髓质癌和乳头状甲状腺癌)、肾癌、肾实质癌、宫颈癌、子宫体癌、子宫内膜癌、绒膜上皮癌、睾丸癌、膀胱癌、黑色素癌、脑癌例如成胶质细胞瘤、星形细胞瘤、脑(脊)膜瘤、成神经管细胞瘤、和周围神经外胚层瘤、胆囊癌、支气管癌、多发性骨髓瘤、基底细胞癌、畸胎瘤、眼癌、脉络膜黑色素瘤、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤、脑咽瘤、骨肉瘤、软骨癌、平滑肌肉瘤、脂肪肉瘤、纤维肉瘤、尤文氏肉瘤、和浆细胞瘤。在本发明的一个方面，本发明提供本发明一个或多个化合物在制备癌症治疗药物中的用途。

在一个实施方式中，本发明包括本发明一种或多种化合物在制备预防细胞的异常增殖、分化或存活的药物中的用途。例如，本发明的化合物可以用于预防肿瘤大小增加或变成转移状态。本发明的化合物可以给药，以阻碍癌症的进程或发展、或引起肿瘤的细胞凋亡、或抑制肿瘤血管再生。此外，本发明包括本发明化合物在预防癌症复发中的用途。

本发明还涉及治疗或预防细胞增生疾病例如增生、增生不良和癌前病变。增生是病理学家可通过活组织检查而辨认的最早形式的癌前病变。本发明的化合物可以以防止增生、增生不良或癌前病患继续扩展或发展成癌的目的而给药。癌前病变的实例可以发生在皮肤、食管阻止、乳腺和宫颈上皮组织中。

“联合疗法”包括本发明化合物与其他生物学上有活性的成分(例如，但不限于，第二种不同的抗肿瘤药物)以及非药物疗法(例如，但不限于，手术或放射治疗)的共同给药。例如，本发明的化合物可以与其他药学上的活性化合物一起使用，优选为能够加强本发明化合物的效果的化合物。本发明的化合物可以与其他药物疗法同时(作为单一的制剂或分开的制剂)或按序进行。总体而言，联合疗法涉及两种或更多种药物在疗法的单个循环或疗程中的给药。

在本发明的一个方面，本发明的化合物可以与一种或多种调节多种疾病状态中涉及的蛋白激酶的其他药物一起给药。这些激酶的实例可以包括，但不限于，丝氨酸/苏氨酸特异性激酶、受体酪氨酸特异性激酶、和非受体酪氨酸特异性激酶。丝氨酸/苏氨酸激酶包括有丝分裂活化蛋白激酶(MAPK)、减数分裂特异性激酶(Aurora)、RAF和Aurora激酶。受体激酶家族的实例包括表皮生长因子受体(EGFR)(例如，HER2/neu、HER3、HER4、ErbB、ErbB2、ErbB3、ErbB4、Xmrk、DER、Let23)；成纤维细胞生长因子(FGF)受体(例如，FGF-R1、GFF-R2/BEK/CEK3、FGF-R3/CEK2、FGF-R4/TKF、KGF-R)；肝细胞生长/扩散因子受体(HGFR)(例如，MET、RON、SEA、SEX)；胰岛素受体(例如，IGFI-R)；Eph(例如，CEK5、CEK8、EBK、ECK、EEK、EHK-1、EHK-2、ELK、EPH、ERK、HEK、MDK2、MDK5、SEK)；Axl(例如，Mer/Nyk、Rse)；RET；和血小板源生长因子受体(PDGFR)(例如，PDGFα-R、PDGβ-R、CSF1-R/FMS、SCF-R/C-KIT、VEGF-R/FLT、NEK/FLK1、FLT3/FLK2/STK-1)。非受体酪氨酸激酶家族包括但不限于BCR-ABL(例如，p43^abl、ARG)；BTK(例如ITK/EMT、TEC)；CSK、FAK、FPS、JAK、SRC、BMX、FER、CDK和SYK。

在优选实施方式中，本发明化合物可以与抑制一个或多个生物靶标的抗肿瘤药物(例如，小分子、单克隆抗体、反义RNA、和融合蛋白)，例如伏立诺他(Zolinza)、泰立沙(Tykerb)、格列卫(Gleevec)、索坦(Sutent)、达沙替尼(Sprycel)、索拉非尼(Nexavar)、Sorafinib、CNF2024、RG108、BMS387032、Affinitak、Avastin、赫塞汀(Herceptin)、西妥昔单抗(Erbitux)、AG24322、PD325901、ZD6474、PD184322、Obatodax、ABT737和AEE788。相对于由任何单独的药物达到的效果，这样的联合可以加强疗效，且可以防止或推延抗药突变体的出现。

在某些优选实施方式中，本发明的化合物与化疗药物联合给药。化疗药物在疾病的各个阶段给药，以缩小肿瘤、摧毁在手术后仍留存的癌细胞，引起与癌症或其治疗相关的症状的缓和、保持缓和和/或减轻症状。这些药物的实例包括但不限于烷基化药物例如芥子气衍生物(氮芥、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、马法兰(melphalan)、异环磷酰胺)、乙烯亚胺(ethylenimine)(塞替派、六甲蜜胺)、烷基磺酸盐/酯(白消安)、联氨和三嗪(六甲蜜胺、甲基苄肼、氮烯唑胺和替莫唑胺)、亚硝脲(卡氮芥、洛莫司汀和链脲菌素)、异环磷酰胺和金属盐(卡铂、顺铂、和奥沙利铂)；植物生物碱例如鬼臼毒素(依托泊甙和Tenisopide)、紫杉烷类(紫杉醇和多西他赛)、长春花生物碱(长春新碱、长春碱、长春地辛和长春瑞滨)、和and喜树碱类似物(依立替康和托泊替康)；抗肿瘤抗生素例如色霉素(放线菌素D和普卡霉素)、蒽环类(阿霉素、柔红霉素、表阿霉素、米托葱醌、戊柔比星和去甲氧柔红霉素)、和其他抗生素例如丝裂霉素、放线菌素D和博来霉素；抗代谢药物例如叶酸拮抗剂(甲氨蝶呤、培美曲塞、雷替曲塞、氨基喋呤)、嘧啶拮抗剂(5-氟尿嘧啶、氟脲嘧啶脱氧核苷、阿糖胞苷、卡培他滨、和吉西他滨)、嘌呤拮抗剂(6-巯嘌呤和6-硫鸟嘌呤)和腺甙脱氨酶抑制剂(克拉屈滨、氟达拉滨、巯嘌呤、氯法拉滨、硫鸟嘌呤、奈拉滨、和喷司他丁)；拓扑异构酶抑制剂例如拓扑异构酶I抑制剂(伊立替康、托泊替康)和拓扑异构酶II抑制剂(安吖啶、依托泊苷、磷酸依托泊苷、替尼泊苷)；单克隆抗体(阿伦单抗、吉妥单抗(Gemtuzumabozogamicin)、利妥昔单抗、曲妥单抗、替伊莫单抗、西妥昔单抗、帕尼单抗、托西莫单抗、贝伐单抗)；和其他抗肿瘤药物例如核糖核苷酸还原酶抑制剂(羟基脲)；皮质激素抑制剂(米托坦)；酶(门冬酰胺酶和培门冬酶)；抗微管药物(雌二醇氮芥)；和类维生素A(贝沙罗汀、异维甲酸、视黄酸(ATRA))。

在某些优选实施方式中，本发明的化合物与化疗药物一起给药。化疗药物起到保护机体或将化疗的副作用降至最低的作用。这些药物的实例包括但不限于Amfostine、美司纳(mesna)、和右雷佐生(Dexrazoxane)。

在本发明的一个方面，本发明化合物与放射疗法一起施用。放射物通常从采用质子(x光或γ射线)或粒子辐射的机器中向内(在癌部位附近移植放射性材料)或向外递送。在联合疗法还包括放射治疗时，放射治疗可以在任何合适的时间进行，只要达到治疗药物和放射治疗联合的共同作用的有益效果即可。例如，在适当的案例中，当放射治疗在治疗药物给药时暂时停止数天，甚至数周，仍可以达到有益效果。

将意识到的是，本发明的化合物可以与免疫治疗药物联合使用。免疫疗法的一种形式是通过在远离肿瘤的部位施用疫苗组合物，从而使宿主产生主动的全身性的肿瘤特异性免疫应答。已经建议多种类型的疫苗，包括分离的肿瘤抗原疫苗和抗个体基因的疫苗。另一个途径是使用待治疗的受试者的肿瘤细胞、或该类细胞的衍生物(由Schirrmacher etal.(1995)J.Cancer Res.Clin.Oncol.121：487综述)。在美国专利5,484,596中，Hanna Jr.等要求保护一种治疗可切除癌以防止复发或转移的方法，包括手术移除肿瘤，用胶原酶使细胞分散，对细胞进行辐射，以及用约10⁷个细胞的至少三个连续剂量对患者进行接种免疫。

在一个实施方式中，本发明的化合物可以用于引发或抑制细胞凋亡，一种对于正常发育和内稳态很关键的生理性细胞死亡程序。细胞凋亡通路的改变造成多种人类疾病的发病。本发明的化合物，作为细胞凋亡的调节物，可用于治疗多种与细胞凋亡的异常相关的人类疾病，包括癌症(特别是，但不限于，滤泡性淋巴瘤、与p53突变相关的癌、乳腺、前列腺和卵巢的激素相关肿瘤、癌前病变例如家族性腺瘤性息肉病)、病毒感染(包括，但不限于，孢疹病毒、痘病毒、EB病毒、辛德毕斯病毒、和腺病毒)、自身免疫疾病(包括，但不限于，红斑性狼疮、全身性红斑狼疮、免疫介导的肾小球肾炎、类风湿关节炎、牛皮癣、炎性肠疾病、和自身免疫性糖尿病)、血液病(慢性贫血和再生障碍性贫血)、以及癌症疼痛。

本发明包括药物组合物，包含上述本发明化合物的药学上可接受的盐。本发明还涉及包含本发明化合物的水合物的药物组合物。术语“水合物”包括但不限于半水合物、一水合物、二水合物、三水合物等。本发明还涉及含有任何固体或液体物理形式的本发明化合物的药物组合物。例如，化合物可以是晶体形式、无形态，且具有任何粒径。颗粒可以微粒化、或者可以是聚集的颗粒、粉、油、油状混悬物或任何其他形式的固体或液体物理形式。

本发明的化合物、及其衍生物、部分片段、类似物、同型物、药学上可以接受的盐或水合物可以与药学上可接受的载体或赋形剂一起包括在适于给药的药物组合物中。这样的组合物典型地包含治疗有效量的任何上述化合物、以及药学上可接受的载体。优选地，治疗癌症时的有效量是有效地选择性地引起适当肿瘤细胞的终末分化且低于在患者中引起毒性的量。

本发明的化合物可以通过任何合适的方式给药，包括但不限于，肠道外、静脉、肌内、皮下、移植、经口、舌下、经颊、经鼻、经肺、透皮、局部、阴道、直肠和粘膜给药。局部给药还可以涉及使用经皮给药，例如经皮贴剂、或离子电渗透装置。药物制剂包括固体、半固体或液体制剂(片剂、球剂、含片剂、胶囊剂、栓剂、膏剂、软膏剂、喷雾剂、粉剂、液剂、乳液剂、混悬剂、浆剂、注射剂等)，包含有本发明的化合物作为有效成分，其适用于所选的给药模式。在一个实施方式中，药物组合物经口给药，因此配制成适于经口给药的形式，即，固体或液体制剂。合适的固体口服制剂包括片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、球剂、囊剂、泡腾剂、粉剂等。合适的液体口功夫制剂包括溶液剂、混悬剂、分散剂、乳剂、油剂等。在本发明的一个实施方式中，组合物配制在胶囊中。根据该实施方式，本发明的组合物除有效化合物和惰性载体或稀释剂外还包括凝胶硬胶囊。

通常用作载体或稀释剂的任何惰性赋形剂可以用在本发明的制剂中，例如胶、淀粉、糖、纤维素材料、丙烯酸酯、或其混合物。优选的稀释剂是微晶纤维素。组合物还可以包含崩解剂(例如，交联羧甲基纤维素钠)和润滑剂(例如，硬脂酸镁)，且还可以包含一种或多种选自粘合剂、缓冲剂、蛋白酶抑制剂、表面活性剂、助溶剂、增塑剂、乳化剂、稳定剂、增粘剂、甜味剂、成膜剂、或任何其组合的添加剂。此外，本发明的组合物可以为缓释或速释制剂的形式。

对于液体制剂，药学上可接受的载体可以是水性或非水性溶液、混悬液、乳液或油。非水性溶剂的实例是丙二醇、聚乙二醇、和可注射的有机酯例如油酸乙酯。水性载体包括水、醇/水溶液、乳液或混悬液，包括盐水和缓冲介质。油的实例是石油、动物油、植物油或合成油，例如花生油、大豆油、矿物油、橄榄油、葵花油和鱼肝油。溶液或混悬液还可以包括以下成分：无菌稀释剂例如注射用水、盐水、非挥发油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其他合成溶剂；抗菌剂例如苯丙醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂例如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂例如乙二胺四乙酸(EDTA)；缓冲剂例如乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐，以及用于调节张度的试剂，例如氯化钠或右旋糖。pH可以用酸或碱调节，例如盐酸或氢氧化钠。

特别有利的是配制单位剂量型的口服组合物，以便于给药和给药的均一性。本文所用的单位剂量型是指物理上分开的适于待治疗受试者的单次给药的单位；各单位包含预定量的活性化合物，该预定量计算出来以与所需的药物载体一起产生所期望的治疗效果。用于本发明单位剂量型的规格可以由活性化合物的独特性质和要达到的特定疗效、以及在本领域调合该活性化合物以用于个体治疗的固有限制决定，且直接取决于上述要素。

药物组合物可以与给药说明一起包括在容器、包装或分配器中。

日常给药可以在数天到数年的期间持续重复。经口治疗可以持续一周或延续患者的终身。优选地，给药可以连续五天，在这之后可以评估该患者来决定是否需要进一步的给药。给药可以是持续性的或间断性的，例如，治疗连续数日，然后休息一段时间。本发明的化合物可以在治疗的首日经静脉给药，在第二天和接下来的时间经口给药。

包含活性组分的药物组合物的制备在领域内熟知，例如经混合、造粒或压片工序。活性治疗成分通常与药学上可接受且与有效成分相容的赋形剂混合。对于经口给药，活性剂与常用于该目的的添加剂混合，例如载体、稳定剂或惰性稀释剂，并通过常用方法转化为适当的给药形式，例如片剂、包衣片剂、硬或软凝胶胶囊剂、水剂、醇剂或油溶液剂等，如上所述。

施用给患者的化合物量要少于可能造成患者毒性的量。在某些实施方式中，施用给患者的化合物的量少于造成患者血药浓度等于或超过化合物毒性水平的量。在本发明的实施中，施用给患者的化合物的最优量将取决于所使用的特定化合物和所治疗的癌症类型。

贯穿说明书和权利要求书，用于描述本发明的多个术语具有以下含义，除非在特定环境中另外定义。

“脂烃基”或“脂肪族”是非芳香基团，其可以是饱和的(例如，单键)或包含一个或多个不饱和单元，(例如，双键和/或三键)。脂烃基可以是直链、支链、或环状的，包含碳、氢，或任选地一个或多个杂原子，且可以是取代的或非取代的。脂烃基优选地包含约1-约24个原子，更优选地约4-约24个原子，更优选为约4-12个原子，更优选为约4-约8个原子。

术语“烷基”包括直链或支链原子团，具有1-约20个碳原子，或者优选地1-约12个碳原子。更优选的烷基原子团是“低级烷基”原子团，具有1-约10个碳原子。最优选的是具有1-约8个碳原子的低级烷基原子团。这些原子团的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、己基等。

术语“烯基”包括直链或支链原子团，具有至少一个碳碳双键，具有2-约20个碳原子，或者优选地2-约12个碳原子。更优选的烯基原子团是“低级烯基”原子团，具有2-约10个碳原子，更优选约2-约8个碳原子。烯基原子团的实例包括乙烯基、丙烯基、丁烯基和4-甲基丁烯基。术语“烯基”和“低级烯基”包括具有“顺式”和“反式”方向，或者“E”和“Z”方向的原子基团。

术语“炔基”包括直链或支链原子团，具有至少一个碳碳三键，具有2-约20个碳原子，或者优选地2-约12个碳原子。更优选的炔基原子团是“低级炔基”原子团，具有2-约10个碳原子，更优选约2-约8个碳原子。烯基原子团的实例包括炔丙基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基和1-戊炔基。

术语“环烷基”包括饱和的碳环形原子基团，含有3-约12个碳原子。术语“环烷基”包括饱和的3-约12个碳原子的碳环形原子基团。更加优选的环烷基原子基团是“低级环烷基”原子基团，具有3-约8个碳原子。这些原子基团的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、和环丁基。

术语“环烯基”包括部分不饱和的碳环形原子基团，具有3-12个碳原子。包含2个双键(可以共轭也可以不是共轭)的部分不饱和碳环形基团的环烯基原子基团称为“环烷基二烯基”。更加优选的环烯基原子基团为“低级环烯基”基团，具有4-约8个碳原子。这些原子基团的实例包括环丁烯基、环戊烯基和环己烯基。

术语“环氧基”包括直链或支链的含氧原子基团，各个具有具有1-约12个碳原子，或者优选地1-约12个碳原子的烷基部分。更加优选的环氧基团是“低级环氧基”，具有1-约10个碳原子，更加优选地具有1-约8个碳原子。这些原子基团的实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基和叔丁氧基。

术语“烷氧基烷基”包括一个或多个烷氧基附于烷基(即，形成单烷氧基烷基和二烷氧基烷基)的烷基原子团。

术语“芳基”，单独的或组合的，是指包含一个、两个或三个环的碳环形芳香体系，其中这些环可以以垂挂的方式附着在一起，或者可以稠合。术语“芳基”包括芳香基，例如苯基、萘基、四氢萘基、茚满和联苯基。

术语“杂环基”包括饱和的、部分不饱和的和不饱和的含杂原子的环状原子基团，其还可以像相应地称为“杂环烯基”和“杂芳基”，其中杂原子可以选自氮、硫和氧。饱和杂环基的实例包括含1-4个氮原子的饱和3-6元杂单环(例如，吡咯烷基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基)；含1-2个氧原子和1-3个氮原子的饱和3-6元杂单环基(例如，吗啉基等)；含有1-2个硫原子和1-3个氮原子的饱和3-6元杂单环基(例如，噻唑烷基)。部分饱和的杂环基原子基团的实例包括二氢噻吩、二氢吡喃、二氢呋喃、二氢噻唑。杂环基可以在例如四唑和吡啶原子基团中包含五价氮。术语“杂环”还可以包含杂环基于芳基或环烷基稠合的杂环基。这些稠合双环基团的实例包括苯并呋喃、苯并噻吩等。

术语“杂芳基”包括不饱和杂环基。杂芳基的实例包括含有1-4个氮原子的不饱和3-6元杂单环基，例如吡咯基、吡咯烷基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基(例如，4H-1，2，4-三唑基、1H-1，2，3-三唑基、2H-1，2，3-三唑基等)、四唑基(例如，1H-四唑基、2H-四唑基等)等；包含1-5个氮原子的不饱和缩合杂环基，例如，吲哚基、异吲哚基、吲哚嗪基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、吲唑基、苯并三唑基、四唑并哒嗪基等；含有氧原子的不饱和3-6元杂单环基、含有硫原子的不饱和3-6元杂单环基；含有1-2个氧原子和1-3个单元等的不饱和3-6元杂单环基；含有1-2个氧原子和1-3个氮原子的不饱和缩合杂环基；含有1-2个硫原子和1-3个氮原子的不饱和3-6元杂单环基，例如噻唑基、噻二唑基等；含有1-2个硫原子和1-3个氮原子等的不饱和缩合杂环基。

术语“杂环烷基”包括杂环取代的烷基。更加优选的杂环烷基为在杂环基团中含有1-6个然原子的“低级杂环烷基”。

术语“芳烷基”或“芳基烷基”包括芳基取代的烷基，例如苯甲基、二苯甲基、三苯甲基、苯乙基、和二苯乙基。

术语“芳氧基”包括通过氧原子附于其他原子基团的芳基。

术语“芳烷氧基”或“芳基烷氧基”包括通过氧原子附于其他基团的芳烷基。

术语“氨基烷基”包括被氨基取代的烷基。优选的氨基烷基具有约1-约20个碳原子、或优选地为1-约12个碳原子的烷基。更优选的氨基烷基为烷基具有1-约10个碳原子的“低级氨基烷基”。最优选的是具有含1-8个碳原子的低级烷基的氨基烷基。这些基团的实例包括氨甲基、氨乙基等。

术语“烷基胺基”是指被一个或两个烷基取代的胺基。优选的烷基胺基具有含约1-约20个碳原子、或优选地1-约12个碳原子的烷基的烷基胺基。更加优选的烷基胺基是具有含1-约10个碳原子的烷基的“低级烷基胺基”。最优选的是具有含1-约8个碳原子的低级烷基的烷基胺基。合适的低级烷基胺基可以是单取代的N-烷基胺基或双取代的N，N-烷基胺基，例如N-烷基胺基、N-乙基胺基、N，N-二甲基胺基、N，N-二乙基胺基等。

为简单起见，贯穿全文定义并涉及的化学基团可以是在本领域技术人员清楚的合适结构环境下的单价化学基团(例如，烷基，芳基等)或多价基团。例如，“烷基”可以是一价基团(例如，CH₃-CH₂-)，或在其他情况下，二价连接基团可以使“烷基”，该该情况下本法领域技术人员将理解烷基是二价基团(例如，-CH₂-CH₂-)，其与术语“亚烷基”等效。相似地，在需要二价基团且称为“烷氧基”、“烷基氨基”、“芳氧基”、“烷基硫代基”、“芳基”、“杂芳基”、“杂环基”、“烷基”、“烯基”、“炔基”、“脂烃基”、或“环烷基”的情况下，本领域技术人员将理解，术语“烷氧基”、“烷基氨基”、“芳氧基”、“烷基硫代基”、“芳基”、“杂芳基”、“杂环基”、“烷基”、“烯基”、“炔基”、“脂烃基”、或“环烷基”是指相应的二价基团。

本文所用的术语“卤素”，是指选自氟、氯、溴和碘的原子。

本文所用的术语“异常增生”是指不正常的细胞生长。

术语“附加治疗”包括用减少或避免与本发明联合疗法相关的副作用的药物治疗受试者，包括但不限于，例如减少抗癌药物毒副作用的药物，例如，骨吸收抑制剂、心肌保护剂；防止或减少与化疗、放疗、或手术相关的反胃和呕吐的发生的药物；或减少与骨髓抑制抗癌剂的施用有关的感染发生的药物。

本文所用的术语“细胞凋亡”是指在正常功能的人和动物细胞在处于细胞健康和疾病下由细胞核发信号的程序性细胞死亡。“细胞凋亡诱导剂”引发程序性细胞死亡的过程。

本文所用的术语“癌症”是指以不受控制的细胞分裂和这些细胞经侵袭而直接生长到相邻组织或通过转移而植入到较远部位的方式侵染其他组织的能力为特征的一类疾病或病症。

术语“化合物”在本文中定义为包括具有本文所列通式的化合物的药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、多晶型、旋光对映体、非对映异构体、外消旋体等。

术语“装置”是指任何设备，通常为机械的或电子的，设计成执行特定功能。

如本文所用的，术语“有效量的本发明化合物”，当述及治疗方法时，是指本发明化合物作为所期望剂量方案的一部分而递送时，产生细胞增殖率和/或细胞的分化状态和/或存活率变化到临床可接受标准的效果的量。这个量还可以在一定程度上缓解肿瘤疾病的一个或多个症状，包括但不限于：1)癌细胞数量减少；2)肿瘤大小减小；3)抑制(即，一定程度上的减缓，优选停止)癌细胞侵入周边器官；4)抑制(即，一定程度上的减缓，优选停止)肿瘤转移；5)在一定程度上抑制肿瘤生长；6)在一定程度上缓解或减轻一个或多个与疾病相关的症状；和/或7)缓解或减少与抗癌药物给药相关的副作用。

本文所用的术语“增生”是指过度的细胞分裂或生长。

术语“免疫治疗剂”是指用于将免疫供体(例如，另一个人或动物)的免疫力通过接种转移给宿主的药物。术语包括包含由另一个个体或动物产生的执行抗体的血清或丙种球蛋白；非特异性全身性刺激；佐剂；活性特异性免疫疗法；和过继免疫疗法的使用。过继免疫疗法是指通过包括血清或丙种球蛋白中致敏淋巴细胞、转移因素、免疫RNA或抗体的宿主接种的疗法或药物来治疗疾病。

术语“抑制”，在肿瘤形成、肿瘤生长或或肿瘤细胞生长的情况下，可以通过原发性或继发性肿瘤的延迟出现、原发性或继发性肿瘤的减缓发展、原发性或继发性肿瘤的减少的发生、减缓的或严重程度降低的疾病二次影响、停滞的肿瘤生长和肿瘤缩小等进行评估。在极端情况下，完全的抑制在本文中也称为预防或化学预防。

本文所使用的术语“转移”是指癌细胞从原始肿瘤部位通过血管和淋巴管迁移从而在其他组织产生癌。转移也用于指代在较远部位生长的继发性癌。

本文所用的术语“肿瘤”是指由过度细胞分裂引起的不正常组织块。肿瘤可以是良性的(非癌)、或恶性的(癌)，也可以称为肿瘤。术语“肿瘤形成”是指由引起肿瘤形成的病理过程。

本文所用的术语“癌前”是指非恶性的，但是如果不处理可能变成恶性的症状。

术语“增殖”是指细胞进行有丝分裂。

术语“放疗剂”是指在肿瘤治疗中使用电磁或粒子辐射。

本文所用的术语“复发”是指在缓和一段时间后癌症的回归。这可能是原发癌症的细胞移除不彻底引起的，且可能在原位(原发癌症的同一个部位)、区域性地(在原发癌症的周边，可能在淋巴结或组织中)、和/或因转移引起的远端的发生。

术语“治疗”是指任何过程、行动、施用、治疗等，其中哺乳动物，包括人，以直接或间接地改善该哺乳动物的症状为目标而接受医疗救助。

本文所用的术语“药物上可接受的盐”是指，在正确的医疗判断的范围内，适于与人和低等动物的组织接触而没有过度毒性、刺激性、过敏反应等，且与合理的受益/风险比相应的那些盐。药学上可接受的盐在本领域公知。例如，S.M.Berge等人在J.Pharmaceutical Sciences，66：1-19(1977)中详细描述了药学上可接受的盐。该盐可以在本发明化合物的最终分离和纯化中原位制备，或另外通过与核实的有机酸或无机酸的游离碱基团反应而制备。药学上可接受的无毒酸加成盐的实例包括但不限于，与无机酸例如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸，或者有机酸例如醋酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸、乳糖酸或丙二酸形成的，或者通过使用本领域中其他的方法例如离子交换而形成的氨基的盐。其他药学上可接受的盐包括但不限于，己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天(门)冬氨酸盐、苯磺酸盐、安息香酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡(萄)糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、十二烷基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、扑酸盐、果胶酯酸盐、过硫酸盐、3-苯丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一酸盐、戊酸盐等。代表性的碱金属盐或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙、镁盐等。其他药学上可接受的盐包括，合适的无毒铵盐、季铵盐、和使用抗衡离子形成的胺阳离子，例如卤化物、氢氧化物、羧酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、具有1-6个碳原子的烷基、磺酸盐和芳基磺酸盐。

本文所用的“药学上可接受的载体”意在包括与药物施用相容的任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌和抗真菌剂、等压和吸收延迟剂等，例如无菌的无热原水。合适的载体在Remington′s Pharmaceutical Sciences的最新版本中有记载，该书为领域内的标准参考书，其通过引用的方式并入本文。这类载体或稀释剂的优选实例包括但不限于水、盐水、林格氏液、右旋糖溶液和5％人血清白蛋白。脂质体和非水载体例如非挥发油也可以使用。针对药学活性物质使用这些介质和和试剂在本领域内是公知的。除非任何常用介质或试剂与活性化合物不相容，其在组合物中的使用也包含在本文中。补充的活性化合物

可以并入组合物中。

本文所用的术语“癌前”是指不是恶性但是如果不处理很可能变成恶性的症状。

本文所用的术语“受试者”是指动物。优选地，动物为哺乳动物。更加优选地，哺乳动物是人。受试者也指代，例如，狗、猫、马、牛、猪、豚鼠、鱼、鸟等。

本发明的化合物可以通过将附加合适的功能性而加以修饰，以加强选择性生物特性。这样的修饰为本领域已知，且可以包括增加对指定生物系统(例如，血、淋巴系统、中枢神经系统)的生物渗透、增加口服利用度、增加溶解度以使得注射给药、改变代谢和改变排泄率的那些。

合成的化合物可以从反应混合物中分离出来并通过例如柱层析、高压液相色谱、或重结晶的方法进一步纯化。正如本领域技术人员意识到的，合成本文通式的化合物的其他方法对于本领域技术人员是较为显然的。此外，多个合成步骤可以以交替的顺序进行以得到所期望的化合物。可用于合成本文所述化合物的合成化学转化和保护基团方法论(保护和去保护)在领域内已知且包括例如在R.Larock，Comprehensive OrganicTransformations，VCH Publishers(1989)；T.W.Greene and P.G.M.Wuts，ProtectiveGroups in Organic Synthesis，2d.Ed.，John Wiley and Sons(1991)；L.Fieser andM.Fieser，Fieser and Fieser′s Reagents for Organic Synthesis，John Wiley andSons(1994)；以及L.Paquette，ed.，Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis，John Wiley and Sons(1995)及其后续版本中记载的那些。

药物组合物

本发明的药物组合物包含治疗有效量的本发明化合物，该化合物与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂配制在一起。

本文所用的术语“药学上可接受的载体或赋形剂”是指任何类型的无毒、惰性的固体、半固体或液体填料、稀释剂、包囊材料或制剂辅料。

本发明的药物组合物的施用可以是经口、肠道外、吸入喷雾、局部、直肠、经鼻、经颊、经阴道或经植入储库给药，优选地通过经口或注射给药。本发明的药物组合物可以包含任何传统的无毒药学上可接受的载体、佐剂或介质。在一些情况下，制剂的pH可以用药学上可接受的酸、碱或缓冲剂调节，以加强所配制化合物或其递送形式的稳定性。本文所用的术语“肠道外”包括经皮、皮内、静脉内、肌内、关节内、动脉内、滑膜内、胸骨内、膜内、病灶内、和颅骨内注射或输注技术。

用于经口给药的液体制剂包括药学上可接受的乳剂、微囊剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂、和酏剂。除活性化合物外，液体制剂可以包含领域内常用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂、助溶剂和乳化剂例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、醋酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(具体为，棉籽油、落花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃甲醇、聚乙二醇和山梨醇的脂肪酸酯、及其混合物。除惰性稀释剂外，经口组合物还可以包含佐剂，例如润湿剂、乳化剂和混悬剂、甜味剂、矫味剂和芳香剂。

可注射的制剂，例如，无菌可注射水性或油性混悬剂，可以根据已知常识使用合适的分散剂、或润湿剂和混悬剂配制。这些无菌可注射制剂也可以是在无毒肠道外科技手的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、混悬液或乳液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。在可接受的可采用介质和溶剂中，可以是水、林格氏液、U.S.P.和等渗氯化钠溶液。此外，无菌非挥发油常常用作溶剂或混悬介质。对于该目的，可以采用任何温和的非挥发油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸例如油酸用在可注射剂的制备中。

可注射的制剂可以例如通过使用拦截细菌的过滤器的过滤、或通过并入无菌固体组合物形式灭菌剂而无菌化，其中上述无菌固体组合物可以在使用前溶解或扩散在无菌水或其他无菌可注射介质中。

为延长药效，通常希望减缓皮下或肌内注射的药物的吸收。这可以通过使用水溶性很差的晶体或无形态材料的液体混悬液而实现。药物的吸收速率取决于其溶解速率，而其反过来取决于晶体大小和晶型。或者，肠道外给药的药物形式的延迟吸收通过将药溶解或混悬在油介质中而实现。可注射的储库形式通过在生物可降解聚合物例如聚乳酸-聚乙醇酸中形成药物的微囊矩阵而制备。取决于药物与聚合物的比率以及所采用的的特定聚合物的性质，可以控制药物释放的速率。其他生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。储库可注射制剂也可以通过将药物嵌入与身体组织相容的脂质体或微乳剂中而制备。

用于直肠或阴道给药的组合物优选为栓剂，其可以通过将本发明化合物与合适的非刺激性赋形剂或载体例如可可油、聚乙二醇或栓剂蜡混合而制备，上述的赋形剂或载体在常温下为固体但是在体温下为液体，因此在直肠或阴道腔中融化并释放活性化合物。

固用于经口给药的固体制剂包括胶囊剂、片剂、丸剂、粉剂、和颗粒剂。在这些固体制剂中，活性化合物与至少一种惰性的药学上可接受的赋形剂或载体例如柠檬酸钠或磷酸氢钙和/或：a)填料或增量剂例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、和硅酸；b)粘合剂例如羟甲基纤维素、藻酸盐/酯、白明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、阿拉伯树胶；c)润湿剂例如甘油；d)崩解剂例如琼脂、碳酸钙、土豆淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)溶液缓凝剂例如石蜡；f)吸收促进剂例如季铵盐化合物；g)润湿剂例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；h)吸收剂例如高岭土和膨润土；和i)润滑剂例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠或其混合物混合。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，制剂也可以包含缓冲剂。

类似类型的固体组合物也可以用作软和硬填充凝胶胶囊中的填充剂，使用赋形剂例如乳糖以及高分子量的聚乙二醇等。

固体制剂形式的片剂、糖衣丸剂、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可以用包衣和壳制备，例如肠溶衣和药物制剂领域公知的其他包衣。它们可以任选地包含乳浊剂，且可以是仅仅或者优先地在肠道的某个部分，任选地以缓释的方式，释放活性成分的组合物。可以使用的包埋组合物的实例包括聚合物和蜡。

用于本发明化合物的局部或经皮给药的制剂类型包括软膏剂、糊剂、膏剂、洗剂、凝胶剂、粉剂、溶液剂、喷雾剂、吸入剂或贴剂。活性化合物在无菌条件下与药学上可接受的载体以及任何需要防腐剂或可能需要的缓冲剂混合。眼用制剂、耳朵滴剂、眼用软膏、粉剂和溶液剂也可以包含在本发明的范围内。

除本发明的活性化合物外，软膏剂、糊剂、膏剂和凝胶剂可以包含赋形剂例如动物和植物脂肪、油、蜡、晶型蜡、淀粉、黄芪胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、硅酸、滑石和氧化锌、或其混合物。

除本发明的活性化合物外，粉剂和喷雾剂可以包含赋形剂例如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末、或这些物质的混合物。喷雾剂可以额外地包含惯用的推进剂例如氯氟烃。

对于经肺递送，本发明的药物组合物配制成固体或液体颗粒形式并通过直接给药(例如，吸入呼吸系统)施用给患者。制备用于实施本发明的活性化合物的固体或液体颗粒形式包括可呼吸大小的颗粒，即，颗粒的大小足够小，从而能够在吸入时通过嘴和喉进入肺的支气管和肺泡。雾化药物，特别是雾化抗生素的递送，为本领域所知(参见例如VanDevanter et al.的美国转5,767,068、Smith et al的美国专利5,508,269、以及Montgomery的WO 98/43,650，其通过引用的方式并入本文)。抗生素的经肺递送的讨论在美国专利6,014,969中，其通过引用的方式并入本文。

“治疗有效量的”本发明化合物是指一定量的化合物，其在应用于任何药物治疗时合理的受益/风险比下对治疗的受试者产生疗效。疗效可以是客观的(即，通过一些测试或标记物而可测量的)或主观的(即，受试者表明效果或感受效果)。上述化合物的有效量可以为约0.1mg/Kg-约500mg/Kg，优选为约0.1mg/Kg-约50mg/Kg。有效剂量也可以基于给药途径以及与其他药物的共使用的可能性而变化。然而，应当理解的是，本发明化合物和组合物的总日用量将由主治医师在正确医学判断的范围内决定。对于任何特定患者的特定治疗有效剂量水平将取决于多个因素，包括正在治疗的疾病和疾病的严重程度；所采用的特定化合物的活性；所采用的特定组合物；患者的年龄、体重、基本健康状况、性别和饮食；采用的特定化合物的给药时间、给药途径、和排泄速率；治疗的持续时间；与所采用的特定化合物联合使用或同时使用的药物等医学领域公知的因素。

以单剂量或分开剂量施用到人或其他动物上的本发明化合物的总的每日剂量可以是例如0.01-50mg/kg体重，或更常见的是0.1-25mg/kg体重。单剂量组合物可以包含上述量或其因数来构成日剂量。通常而言，根据本发明的治疗方案包括向每天需要该治疗的患者施用约10mg-约1000mg本发明化合物，单次给药或多次给药。

本文通式的化合物可以例如通过注射、静脉注射、动脉注射、皮下注射、腹膜内、肌内、或皮下给药；或经口、经颊、经鼻、经粘膜、局部给药，以眼用制剂或通过吸入剂形式，剂量为约0.1-约500mg/kg体重，或者剂量为1mg-1000mg/每次，每4-120小时一次，或根据特定药物的需要。本发明的方法包括施用有效量的化合物或化合物组合物，以达到所期望或所述的效果。通常而言，本发明的药物组合物每天施用约1-约6次，或者作为连续输注施用。这样的施用可以用作慢性或急性疗法。也可以与药学赋形剂或载体联合使用以制备单剂型的活性化合物的量将取决于所治疗的宿主和特定的给药模式而变化。典型的制剂将包含约5％-约95％活性化合物(w/w)。或者，这样的制剂可以包含约20％-约80％活性化合物。

可能需要比上述更低或更高的剂量。对于任何特定患者的特定给药和治疗方案将取决于多个因素，包括所采用的特定化合物的活性、患者的年龄、体重、基本健康状况、性别和饮食、给药时间、排泄速率、药物组合、疾病的严重程度和病程、症状、患者对疾病的计划、以及治疗医师的判断。

在改善患者病症时，如果需要的话，可以施用维持剂量的本发明化合物、组合物或组合。接下来，当症状已经减轻到所期望的水平时，作为症状的函数，可以降低给药的剂量或频次到保持改善症状的水平。然而，基于疾病症状的任何复发，患者可能需要长期的间歇治疗。

合成方法

通式I的嘧啶衍生物或其药物上可接受的盐，可以通过适用于化学相关化合物制备的任何工序(例如制备某些中间体的合适工序)来制备。必需的起始材料可以通过有机化学的标准程序获得。这些起始材料的制备在以下非限制性的实施例中有记载。或者，必需的起始材料可以通过本领域化学工作者已知的相类似的程序而获得。

结合以下代表性的合成方案，将更好地理解本文所述的化合物，以下合成方案示出制备本发明化合物的方法，其仅为示意而不限制本发明的范围。

方案1

实施例

通过以下实施例，可以更好地理解本发明的化合物和工艺，这些实施例仅作为示意说明而不限制本发明的范围。对所公开实施例的各种变化和修改对于本领域技术人员而言是明晰的，这些变化和修改包括但不限于与本发明的化学结构、取代基、衍生物、制剂和/或方法相关的那些，可以在不背离本发明精神和所附权利要求范围的情况下做出改变。

实施例1：N-[2-[2-(二甲胺胺基)乙基-甲基-胺胺基]-5-[-[[4-(1H-吲哚-3-基) 噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基]胺胺基]-4-甲氧基-苯基]丙-2-烯酰胺(化合物1)的合成：

噻吩并[3，2-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮(化合物102)的合成

将3-氨基-2-噻吩甲酸甲酯(13.48g，85.85mmol)和尿素(29.75g，0.43mol)的混合物在190℃加热2小时。然后将热反应混合物倒入氢氧化钠溶液中，通过过滤除去不溶性物质。然后将混合物用2N HCl溶液酸化，通过过滤收集并空气干燥，得到白色沉淀物状的化合物(9.62g，67％)。

2，4-二氯噻吩并[3，2-d]嘧啶(化合物103)的合成

化合物102(8.5g)用三氯氧磷(130mL)悬混。将混合物于100℃加热10小时。在减压下除去POCl₃。将混合物溶解在二氯甲烷中并用冰淬灭。产物用二氯甲烷萃取回收。把合并的有机层在MgSO₄上干燥并浓缩，得到白色固体样的化合物103。LCMS：205[M+1]⁺；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.48(d，J＝5.6Hz，1H)，8.05(d，J＝5.6Hz，1H).

2-氯-4-吲哚-3-基噻吩并[3，2-d]嘧啶(化合物104)的合成

向吲哚(14g，120mmol，2eq)于干THF(60mL)的溶液中滴加甲基溴化镁(60mL，120mmol，2N，2eq)于5℃以下THF的混合物，之后将混合物在该温度下搅拌30分钟。然后将2，4-二氯噻吩并[3，2-d]嘧啶(12.4g，60mmol，1eq)于50mL THF的混悬液在5℃以下加入上述混合物中，然后将得到的混合物搅拌1小时后加热至60℃，过夜。反应用乙酸(8mL，13mmol)淬灭，然后加入水(100mL)。通过过滤收集沉淀固体，用水洗，真空干燥，得到产物(9g，53％)。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d6)：δ12.22(br，1H)，8.59～8.66(m，1H)，8.51～8.53(m，1H)，8.42(m，1H)，7.50～7.61(m，2H)，7.23～7.38(m，2H)；

MS Calcd.285.0MS Found：286.0([M+H]⁺)。

2-氯-4-(1-甲基吲哚-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶(化合物105)的合成

在氮气中，于0℃，将氢化钠(60％悬浮于矿物油，0.862g，21.54mmol)加入到于THF(200mL)的化合物104(20.52mmol)中。将所得溶液于0℃搅拌15分钟。加入碘甲烷(1.347mL，21.54mmol)，使反应升温至室温，然后搅拌2小时。由于反应不完全，将混合物再次冰浴冷却，加入氢化钠(0.862g，21.54mmol)，悬浮液于0℃搅拌10分钟。然后加入碘甲烷(1.347mL，21.54mmol)，反应液再搅拌1小时。反应混合物用水稀释(100mL)，用EtOAc(100mL)萃取。将得到的有机物用水(75mL)洗涤，溶剂界面上形成有一些固体，过滤液体并用水和乙酸乙酯洗涤，将得到的固体干燥，得到白色固体样的化合物105(72％收率)。MS Calcd.298.09，MSFound：299.9([M+H]⁺).

N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基-苯基)-4-(1-甲基吲哚-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2- 胺(化合物106)的合成

将对甲苯磺酸水合物(1.4g，8.4mmol，1.2eq)一次性加入到化合物105(2g，7mmol，1eq)和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(1.3g，7mmol，1eq)于2-戊醇(50mL)的混合物中。将混合物于130℃过夜搅拌，然后冷却至常温。通过过滤收集沉淀，用2-戊醇(5mL)洗涤，在真空下干燥，得到一些黄色固体状的所期望产物。用MeOH回收固体，得到0.9g目标化合物106。MSCalcd.449.09，MS Found：449.9([M+H]⁺).

N4-[2-(二甲胺基)乙基]-2-甲氧基-N4-甲基-N1-[4-(1-甲基吲哚-3-基)噻吩并 [3，2-d]嘧啶-2-基]-5-硝基苯-1，4-二胺(化合物107)的合成

将DIPEA(185mg)加入到化合物106(300mg)和N1，N1，N1-三甲基乙-1，2-二胺(75mg)于DMF(4mL)的溶液中。将混合物加热至140℃，持续4小时。将所得混合物冷却至室温并倒入水(10mL)中，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。将合并的有机相用水、浓盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤，并浓缩。残留物用闪蒸柱纯化，得到淡红色固体(260mg，74％收率)。MSCalcd：531.2 MS Found：532.1([M+H]⁺).

N1-[2-(二甲胺基)乙基]-5-甲氧基-N1-甲基-N4-[4-(1-甲基吲哚-3-基)噻吩并 [3，2-d]嘧啶-2-基]苯-1，2，4-三胺(化合物108)的合成

向化合物107(180mg，0.35mmol)、铁(78mg，1.4mmol)和NH₄Cl(1.4mmol)的混合物中加入乙醇(4mL)和水(2mL)的混合溶液。将所得的混合物回流2小时。将混合物冷却至室温，过滤后浓缩。残留物在DCM和水之间。有机相用水、浓盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤浓缩，得到粗产物，直接用于下一步反应，无需进一步纯化。MS Calcd：501.1 MS Found：502.1([M+H]⁺).

N-[2-[2-(二甲胺基)乙基-甲基-胺基]-4-甲氧-5[[4-(1-甲基吲哚-3-基)噻吩并 [3，2-d]嘧啶-2-基]胺基]苯基]丙-2-烯酰胺(化合物1)的合成

在0℃环境下，向化合物108(90mg，0.18mmol)于DCM(2mL)的溶液中加入DIPEA(0.22mmol)，之后加入丙烯酰氯(0.22mmol)。将混合物搅拌1小时。用DCM(4mL)稀释混合物，用NaHCO₃处理后用DCM(3mL×2)提取。合并的有机相用水、浓盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤，并浓缩。残留物用闪蒸柱层析纯化，用DCM/甲醇＝40/1洗脱，得到所需产物(30mg，33％收率)。

¹H NMR(400MHz，CDCl3)：δ10.1(s，1H)，9.82(s，1H)，8.63(m，1H)，8.21(s，1H)，7.83(m，1H)，7.71(s，1H)，7.50(m，1H)，7.42(m，1H)，7.32-7.37(m，2H)，6.83(s，1H)，6.30-6.41(m，2H)，5.69-5.73(m，1H)，3.98(s，3H)，3.93(s，3H)，2.92(m，2H)，2.74(s，3H)，2.33(m，2H)，2.29(s，6H).MS Calcd：555.1，MS Found：556.1([M+H]⁺).

生物检测

如本文之前所述，本发明所定义的衍生物具有抗增殖活性。这些特性可以例如使用下面列出的一个或多个程序来评估：

1.EGFR酶活检测

以下表II列出了代表本发明的化合物及其在EGFR检测中的活性。在这些检测中，使用以下梯度：A：＜0.1μM；B：0.1-10μM。

表II

2.荷肿瘤小鼠的疗效研究

在雌性nu/nu小鼠侧腹皮下植入于50％Matrigel中的1×10⁷NCI-H1975细胞。以10只小鼠一组，进行肿瘤的两两配对。测试化合物每日口服40mg/kg。

所选化合物的抑瘤效果值显示在表III中。

表III

化合物#	肿瘤生长抑制(％)
		1	＞75
2	＞75
		9	＞50

本发明已通过上述描述和实施例加以说明。这些实施例并不是限制性的。贯穿全文所用的，范围被用作描述范围内的每个值的简写。范围内的任何值都可以被选择为范围的末端。据了解，当描述制剂时，是根据它们的成分来描述，这是本领域中常见的描述方法。尽管这些成分可以在实际配方中彼此反应，这种情况涵盖在配方描述中。此外，本合同所引用的所有参考资料均以其全部内容作为参考。

Claims (13)

1.一种式（I）或式（III）所示的化合物：

，

或其药学上可接受的盐，

其中，R和R¹独立地为H、C_1-6烷基、或C_1-6烷氧基。

2.根据权利要求1所述的化合物，如式（II）所示，

，

或其药物上可接受的盐。

3.根据权利要求1所述的化合物，如式（III）所示，

，

或其药物上可接受的盐。

4.根据权利要求1所述的化合物，如式（IV）所示，

，

或其药物上可接受的盐。

5.根据权利要求1所述的化合物，选自

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-4-甲氧基-5-[[4-(1-甲基吲哚-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]胺基]苯基]丙-2-烯酰胺，

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-5-[[4-(1-乙基吲哚-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]胺基]-4-甲氧基-苯基]丙-2-烯酰胺，

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-5-[[4-(1-异丙基吲哚-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]胺基]-4-甲氧基-苯基]丙-2-烯酰胺，

N-[5-[[4-(1-叔丁基吲哚-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]胺基]-2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-4-甲氧基-苯基]丙-2-烯酰胺，

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-5-[[4-(1,5-二甲基吲哚-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]胺基]-4-甲氧基-苯基]丙-2-烯酰胺，

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-4-甲氧基-5-[[4-(5-甲氧基-1-甲基-吲哚-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]胺基]苯基]丙-2-烯酰胺，

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-4-甲氧基-5-[[4-(6-甲氧基-1-甲基-吲哚-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]胺基]苯基]丙-2-烯酰胺，

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-5-[[4-(1,6-二甲基吲哚-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基]胺基]-4-甲氧基-苯基]丙-2-烯酰胺，和

N-[2-[2-(二甲基胺基)乙基-甲基-胺基]-4-甲氧基-5-[[4-(1-甲基吲哚-3-基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-基]胺基]苯基]丙-2-烯酰胺。

6.一种药物组合物，包含有效量的权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药物上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂。

7.权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药物上可接受的盐在制备一种治疗由过表达EGFR引起的非正常细胞增殖引起的疾病的药物中的用途。

8.根据权利要求7所述的用途，其中，所述EGFR选自ErbB1、ErbB2、ErbB3和ErbB4。

9.根据权利要求7所述的用途，其中，所述EGFR是突变EGFR。

10.根据权利要求9所述的用途，其中，所述突变EGFR是T790M突变、L858R突变或E746-A750缺失突变。

11.根据权利要求7所述的用途，其中，所述疾病是复发的或获得性耐药恶性疾病。

12.根据权利要求7所述的用途，其中，所述疾病是肿瘤或癌症。

13.根据权利要求7所述的用途，其中，所述疾病是非小细胞肺癌（NSCLC）。