CN108249693B - 虾蟹和贝类暂养过程中的净化方法 - Google Patents

虾蟹和贝类暂养过程中的净化方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种虾蟹和贝类暂养过程的净化方法，包括三次净化，第一次净化过程投放杀菌剂进行杀菌处理；第二次净化过程中调整水温、盐度和pH值，并不断投放微藻除去大部分重金属；第三次净化过程中利用复合蛋白金属螯合肽除去残留的重金属。实现了对水体的杀菌消毒和重金属脱除，有效净化了虾蟹和贝类的暂养环境。先投放微藻除去大部分重金属再利用复合蛋白金属螯合肽除去残留的重金属，一方面可以节约复合蛋白金属螯合肽的消耗量，另一方面有效提高了重金属脱除率。

Description

虾蟹和贝类暂养过程中的净化方法
技术领域
本发明涉及一种水产品暂养过程中净化方法，具体涉及一种虾蟹和贝类暂养过程中的净化方法，属于海洋生物技术领域。
背景技术
虾蟹和贝类是备受人们喜爱的水产品，营养丰富而美味，随着人民生活水平的提高，虾蟹和贝类的食用消耗量逐年攀升，随之而来的是水产养殖区域的持续扩大。
但是，近年来我国水产养殖区域污染问题日益严重，水产品食用安全问题日显突出，特别是重金属污染已经成为水产品食用安全的极大隐患，重金属超标会对人体造成暂时或者持久损伤。
而虾蟹和贝类在摄食的时候会把重金属离子带进体内，却没有能力消化和排出，所以重金属非常容易残留在虾蟹和贝类的体内，时间长了就造成重金属富集，人类食用虾蟹和贝类后自然就会在人体内残留重金属，进而影响人们的身体健康。
另外，随着城市污水排放的增加，养殖水体受到来源于生活污水的微生物污染情况也不断加重，据调查，有些水产养殖区域养殖的贝类，其大肠杆菌超标率竟然高达90％以上，这样的水产品经人体长期摄入必然会影响人体健康。
发明内容
本发明的目的是为克服上述现有技术的不足，提供一种虾蟹和贝类暂养过程的净化方法。
为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：
虾蟹和贝类暂养过程中的净化方法，包括三次净化，第一次净化过程投放杀菌剂进行杀菌处理；第二次净化过程中调整水温、盐度和pH值，并不断投放微藻除去大部分重金属；第三次净化过程中利用复合蛋白金属螯合肽除去残留的重金属；其中，所述杀菌剂是由以下重量份的组分制成的：膨润土100份，膨胀蛭石30～40份，硫酸铜10～15份，硫酸亚铁8～12份，溴氯海因8～12份，二溴海因5～8份，二氯异氰尿酸钠4～6份，聚合硅酸铝铁4～6份。
优选的，杀菌剂的投放量为每立方米水体投放0.5～0.8kg，杀菌处理时间为24～32小时。
优选的，杀菌剂的制备方法包括以下步骤：
(1)将配方量的硫酸铜、硫酸亚铁、溴氯海因、二溴海因、二氯异氰尿酸钠和聚合硅酸铝铁加入蒸馏水中，搅拌混匀，得到混合溶液；蒸馏水的用量为膨润土质量的5～8倍；
(2)将膨胀蛭石投入步骤(1)所得混合溶液中，浸泡18～24小时，得到膨胀蛭石悬浮液；
(3)边搅拌边将膨润土缓慢倒入步骤(2)所得膨胀蛭石悬浮液中，超声波振荡处理20～30分钟，烘干，粉碎即得。
进一步优选的，步骤(3)中，膨润土的投料耗时控制在40～50分钟。
进一步优选的，步骤(3)中，烘干温度为70～80℃，烘干时间为18～24小时。
进一步优选的，步骤(3)中，粉碎至30～50目。
进一步优选的，所述膨胀蛭石是将天然蛭石于400～500℃加热200～250分钟，自然冷却而得。
优选的，第二次净化过程中，调整水温25～28℃，盐度25～30‰，pH值7.0～7.2，氧气饱和含量60％以上，保持20～30W紫外线持续照射。
优选的，第二次净化过程中，所述微藻为亚心形扁藻、骨条藻和针状蓝纤维藻的混合微藻，三者数量比为1：3～5：8～10。
优选的，第二次净化过程中，微藻投放后保持水体中微藻数量保持在100～120万藻细胞/mL。
优选的，第二次净化过程中，投放微藻处理时间为5～6天。
优选的，第三次净化过程的处理时间为1～2天。
优选的，第三次净化过程中，复合蛋白金属螯合肽的投放量为每立方米水体投放0.5～0.7kg。
优选的，所述复合蛋白金属螯合肽为钙离子、亚铁离子和锌离子混合螯合蛋白水解肽，其中，钙离子、亚铁离子和锌离子的物质的量之比为1：1.2～1.4：1.8～2。
优选的，所述复合蛋白金属螯合肽的制备方法如下：将海鲜脚料冷冻后经液氮粉碎至200～300目，所得粉末加入水中，超声处理1～2小时，加入复合风味蛋白酶和中性蛋白酶，50～60℃酶解2～3小时，灭酶活，得到酶解液；然后将钙离子、亚铁离子和锌离子的氯化盐加入到所述酶解液中，在40～50℃条件下振荡螯合40～50分钟，离心，去沉淀，即得；其中，海鲜脚料、水、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶和氯化盐的质量比为1：15～20：1～2：0.5～0.7：10～15。
进一步优选的，采用85～100℃水浴灭酶活10～15分钟。
进一步优选的，离心分离的转速为3000～5000转/分，时间为20～30分钟。
本发明的有益效果：
1、本发明包括三次净化，第一次净化过程投放杀菌剂进行杀菌处理；第二次净化过程中调整水温、盐度和pH值，并不断投放微藻除去大部分重金属；第三次净化过程中利用复合蛋白金属螯合肽除去残留的重金属。实现了对水体的杀菌消毒和重金属脱除，有效净化了虾蟹和贝类的暂养环境。先投放微藻除去大部分重金属再利用复合蛋白金属螯合肽除去残留的重金属，一方面可以节约复合蛋白金属螯合肽的消耗量，另一方面有效提高了重金属脱除率。
2、杀菌剂利用硫酸铜、硫酸亚铁、溴氯海因、二溴海因、二氯异氰尿酸钠和聚合硅酸铝铁协同起到杀菌消毒作用，净化水质。利用膨胀蛭石吸附上述的各成分，膨胀蛭石具有多孔结构，可以起到类似缓释的作用，即使在第一次净化过程结束后，也可持续缓慢释放剩余的杀菌消毒成分；膨胀蛭石的多孔结构还给各种微生物提供寄居环境，进一步促进池塘内微生物生态的形成。负载有杀菌消毒成分的膨胀蛭石均匀分散于膨润土中，投放到水体中后，自然飘散在水中最终沉积到水底，具有较佳的透气性，可避免水底病原微生物的滋长，并有利于水草根系的扩张，改善水底生存环境，持续改善水质。
3、杀菌剂制备时，先将杀菌消毒成分溶于蒸馏水中制成混合溶液，然后将膨胀蛭石在混合溶液中浸泡得到膨胀蛭石悬浮液，最后将膨润土缓慢倒入膨胀蛭石悬浮液中，超声波振荡处理后烘干粉碎；整个过程在水性体系中，促进各组分的均匀分散和混合，保证所得杀菌剂的均匀性。
4、微藻选择为特定比例的亚心形扁藻、骨条藻和针状蓝纤维藻的混合微藻时，可以达到更好的重金属脱除效果。
5、复合蛋白金属螯合肽为钙离子、亚铁离子和锌离子混合螯合蛋白水解肽，与单一离子螯合蛋白水解肽相比，具有更好的重金属脱除效果。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行进一步的阐述，应该说明的是，下述说明仅是为了解释本发明，并不对其内容进行限定。
本发明涉及的复合风味蛋白酶，购自郑州君凯化工产品有限公司；中性蛋白酶，购自济南东轩生物工程有限公司。
实施例1：
虾蟹和贝类暂养过程的净化方法，包括三次净化，第一次净化过程投放杀菌剂进行杀菌处理；第二次净化过程中调整水温、盐度和pH值，并不断投放微藻除去大部分重金属；第三次净化过程中利用复合蛋白金属螯合肽除去残留的重金属；其中，所述杀菌剂是由以下重量份的组分制成的：膨润土100份，膨胀蛭石30份，硫酸铜10份，硫酸亚铁8份，溴氯海因8份，二溴海因5份，二氯异氰尿酸钠4份，聚合硅酸铝铁4份。
杀菌剂的投放量为每立方米水体投放0.5kg，杀菌处理时间为24小时。
杀菌剂的制备方法包括以下步骤：
(1)将配方量的硫酸铜、硫酸亚铁、溴氯海因、二溴海因、二氯异氰尿酸钠和聚合硅酸铝铁加入蒸馏水中，搅拌混匀，得到混合溶液；蒸馏水的用量为膨润土质量的5倍；
(2)将膨胀蛭石投入步骤(1)所得混合溶液中，浸泡18小时，得到膨胀蛭石悬浮液；
(3)边搅拌边将膨润土缓慢倒入步骤(2)所得膨胀蛭石悬浮液中，超声波振荡处理20分钟，烘干，粉碎至30目，即得。
步骤(3)中，膨润土的投料耗时控制在40分钟。烘干温度为70℃，烘干时间为18小时。
膨胀蛭石是将天然蛭石于400℃加热200分钟，自然冷却而得。
第二次净化过程中，调整水温25℃，盐度25‰，pH值7.0，氧气饱和含量60％以上，保持20W紫外线持续照射。
第二次净化过程中，微藻为亚心形扁藻。微藻投放后保持水体中微藻数量保持在100万藻细胞/mL。投放微藻处理时间为5天。
第三次净化过程的处理时间为1天。复合蛋白金属螯合肽的投放量为每立方米水体投放0.5kg。
复合蛋白金属螯合肽为钙离子螯合蛋白水解肽。
复合蛋白金属螯合肽的制备方法如下：将海鲜脚料冷冻后经液氮粉碎至200目，所得粉末加入水中，超声处理1小时，加入复合风味蛋白酶和中性蛋白酶，50℃酶解2小时，灭酶活，得到酶解液；然后将钙离子的氯化盐加入到所述酶解液中，在40℃条件下振荡螯合40分钟，离心，去沉淀，即得；其中，海鲜脚料、水、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶和氯化盐的质量比为1：15：1：0.5：10。
实施例2：
虾蟹和贝类暂养过程的净化方法，包括三次净化，第一次净化过程投放杀菌剂进行杀菌处理；第二次净化过程中调整水温、盐度和pH值，并不断投放微藻除去大部分重金属；第三次净化过程中利用复合蛋白金属螯合肽除去残留的重金属；其中，所述杀菌剂是由以下重量份的组分制成的：膨润土100份，膨胀蛭石40份，硫酸铜15份，硫酸亚铁12份，溴氯海因12份，二溴海因8份，二氯异氰尿酸钠6份，聚合硅酸铝铁6份。
杀菌剂的投放量为每立方米水体投放0.8kg，杀菌处理时间为32小时。
杀菌剂的制备方法包括以下步骤：
(1)将配方量的硫酸铜、硫酸亚铁、溴氯海因、二溴海因、二氯异氰尿酸钠和聚合硅酸铝铁加入蒸馏水中，搅拌混匀，得到混合溶液；蒸馏水的用量为膨润土质量的8倍；
(2)将膨胀蛭石投入步骤(1)所得混合溶液中，浸泡24小时，得到膨胀蛭石悬浮液；
(3)边搅拌边将膨润土缓慢倒入步骤(2)所得膨胀蛭石悬浮液中，超声波振荡处理30分钟，烘干，粉碎至50目，即得。
步骤(3)中，膨润土的投料耗时控制在50分钟。烘干温度为80℃，烘干时间为24小时。
膨胀蛭石是将天然蛭石于500℃加热250分钟，自然冷却而得。
第二次净化过程中，调整水温28℃，盐度30‰，pH值7.2，氧气饱和含量60％以上，保持30W紫外线持续照射。
第二次净化过程中，微藻为骨条藻。微藻投放后保持水体中微藻数量保持在120万藻细胞/mL。投放微藻处理时间为6天。
第三次净化过程的处理时间为2天。复合蛋白金属螯合肽的投放量为每立方米水体投放0.7kg。
复合蛋白金属螯合肽为亚铁离子螯合蛋白水解肽。
复合蛋白金属螯合肽的制备方法如下：将海鲜脚料冷冻后经液氮粉碎至300目，所得粉末加入水中，超声处理2小时，加入复合风味蛋白酶和中性蛋白酶，60℃酶解3小时，灭酶活，得到酶解液；然后将亚铁离子的氯化盐加入到所述酶解液中，在50℃条件下振荡螯合50分钟，离心，去沉淀，即得；其中，海鲜脚料、水、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶和氯化盐的质量比为1：20：2：0.7：15。
实施例3：
虾蟹和贝类暂养过程的净化方法，包括三次净化，第一次净化过程投放杀菌剂进行杀菌处理；第二次净化过程中调整水温、盐度和pH值，并不断投放微藻除去大部分重金属；第三次净化过程中利用复合蛋白金属螯合肽除去残留的重金属；其中，所述杀菌剂是由以下重量份的组分制成的：膨润土100份，膨胀蛭石30份，硫酸铜15份，硫酸亚铁8份，溴氯海因12份，二溴海因5份，二氯异氰尿酸钠6份，聚合硅酸铝铁4份。
杀菌剂的投放量为每立方米水体投放0.8kg，杀菌处理时间为24小时。
杀菌剂的制备方法包括以下步骤：
(1)将配方量的硫酸铜、硫酸亚铁、溴氯海因、二溴海因、二氯异氰尿酸钠和聚合硅酸铝铁加入蒸馏水中，搅拌混匀，得到混合溶液；蒸馏水的用量为膨润土质量的8倍；
(2)将膨胀蛭石投入步骤(1)所得混合溶液中，浸泡18小时，得到膨胀蛭石悬浮液；
(3)边搅拌边将膨润土缓慢倒入步骤(2)所得膨胀蛭石悬浮液中，超声波振荡处理30分钟，烘干，粉碎至30目，即得。
步骤(3)中，膨润土的投料耗时控制在50分钟。烘干温度为70℃，烘干时间为24小时。
膨胀蛭石是将天然蛭石于400℃加热250分钟，自然冷却而得。
第二次净化过程中，调整水温25℃，盐度30‰，pH值7.0，氧气饱和含量60％以上，保持30W紫外线持续照射。
第二次净化过程中，微藻为亚心形扁藻、骨条藻和针状蓝纤维藻的混合微藻，三者数量比为1：3：10。微藻投放后保持水体中微藻数量保持在100万藻细胞/mL。投放微藻处理时间为6天。
第三次净化过程的处理时间为1天。复合蛋白金属螯合肽的投放量为每立方米水体投放0.7kg。
复合蛋白金属螯合肽为钙离子、亚铁离子和锌离子混合螯合蛋白水解肽，其中，钙离子、亚铁离子和锌离子的物质的量之比为1：1.2：2。
复合蛋白金属螯合肽的制备方法如下：将海鲜脚料冷冻后经液氮粉碎至200目，所得粉末加入水中，超声处理2小时，加入复合风味蛋白酶和中性蛋白酶，50℃酶解3小时，灭酶活，得到酶解液；然后将钙离子、亚铁离子和锌离子的氯化盐加入到所述酶解液中，在40℃条件下振荡螯合50分钟，离心，去沉淀，即得；其中，海鲜脚料、水、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶和氯化盐的质量比为1：15：2：0.5：15。
实施例4：
虾蟹和贝类暂养过程的净化方法，包括三次净化，第一次净化过程投放杀菌剂进行杀菌处理；第二次净化过程中调整水温、盐度和pH值，并不断投放微藻除去大部分重金属；第三次净化过程中利用复合蛋白金属螯合肽除去残留的重金属；其中，所述杀菌剂是由以下重量份的组分制成的：膨润土100份，膨胀蛭石40份，硫酸铜10份，硫酸亚铁12份，溴氯海因8份，二溴海因8份，二氯异氰尿酸钠4份，聚合硅酸铝铁6份。
杀菌剂的投放量为每立方米水体投放0.5kg，杀菌处理时间为32小时。
杀菌剂的制备方法包括以下步骤：
(1)将配方量的硫酸铜、硫酸亚铁、溴氯海因、二溴海因、二氯异氰尿酸钠和聚合硅酸铝铁加入蒸馏水中，搅拌混匀，得到混合溶液；蒸馏水的用量为膨润土质量的5倍；
(2)将膨胀蛭石投入步骤(1)所得混合溶液中，浸泡24小时，得到膨胀蛭石悬浮液；
(3)边搅拌边将膨润土缓慢倒入步骤(2)所得膨胀蛭石悬浮液中，超声波振荡处理20分钟，烘干，粉碎至50目，即得。
步骤(3)中，膨润土的投料耗时控制在40分钟。烘干温度为80℃，烘干时间为18小时。
膨胀蛭石是将天然蛭石于500℃加热200分钟，自然冷却而得。
第二次净化过程中，调整水温28℃，盐度25‰，pH值7.2，氧气饱和含量60％以上，保持20W紫外线持续照射。
第二次净化过程中，微藻为亚心形扁藻、骨条藻和针状蓝纤维藻的混合微藻，三者数量比为1：5：8。微藻投放后保持水体中微藻数量保持在120万藻细胞/mL。投放微藻处理时间为5天。
第三次净化过程的处理时间为2天。复合蛋白金属螯合肽的投放量为每立方米水体投放0.5kg。
复合蛋白金属螯合肽为钙离子、亚铁离子和锌离子混合螯合蛋白水解肽，其中，钙离子、亚铁离子和锌离子的物质的量之比为1：1.4：1.8。
复合蛋白金属螯合肽的制备方法如下：将海鲜脚料冷冻后经液氮粉碎至300目，所得粉末加入水中，超声处理1小时，加入复合风味蛋白酶和中性蛋白酶，60℃酶解2小时，灭酶活，得到酶解液；然后将钙离子、亚铁离子和锌离子的氯化盐加入到所述酶解液中，在50℃条件下振荡螯合40分钟，离心，去沉淀，即得；其中，海鲜脚料、水、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶和氯化盐的质量比为1：20：1：0.7：10。
实施例5：
虾蟹和贝类暂养过程的净化方法，包括三次净化，第一次净化过程投放杀菌剂进行杀菌处理；第二次净化过程中调整水温、盐度和pH值，并不断投放微藻除去大部分重金属；第三次净化过程中利用复合蛋白金属螯合肽除去残留的重金属；其中，所述杀菌剂是由以下重量份的组分制成的：膨润土100份，膨胀蛭石35份，硫酸铜12份，硫酸亚铁10份，溴氯海因10份，二溴海因6份，二氯异氰尿酸钠5份，聚合硅酸铝铁5份。
杀菌剂的投放量为每立方米水体投放0.7kg，杀菌处理时间为30小时。
杀菌剂的制备方法包括以下步骤：
(1)将配方量的硫酸铜、硫酸亚铁、溴氯海因、二溴海因、二氯异氰尿酸钠和聚合硅酸铝铁加入蒸馏水中，搅拌混匀，得到混合溶液；蒸馏水的用量为膨润土质量的7倍；
(2)将膨胀蛭石投入步骤(1)所得混合溶液中，浸泡20小时，得到膨胀蛭石悬浮液；
(3)边搅拌边将膨润土缓慢倒入步骤(2)所得膨胀蛭石悬浮液中，超声波振荡处理25分钟，烘干，粉碎至40目，即得。
步骤(3)中，膨润土的投料耗时控制在45分钟。烘干温度为75℃，烘干时间为20小时。
膨胀蛭石是将天然蛭石于450℃加热220分钟，自然冷却而得。
第二次净化过程中，调整水温26℃，盐度28‰，pH值7.1，氧气饱和含量60％以上，保持25W紫外线持续照射。
第二次净化过程中，微藻为亚心形扁藻、骨条藻和针状蓝纤维藻的混合微藻，三者数量比为1：4：9。微藻投放后保持水体中微藻数量保持在110万藻细胞/mL。投放微藻处理时间为5天。
第三次净化过程的处理时间为1天。复合蛋白金属螯合肽的投放量为每立方米水体投放0.6kg。
复合蛋白金属螯合肽为钙离子、亚铁离子和锌离子混合螯合蛋白水解肽，其中，钙离子、亚铁离子和锌离子的物质的量之比为1：1.3：1.9。
复合蛋白金属螯合肽的制备方法如下：将海鲜脚料冷冻后经液氮粉碎至200目，所得粉末加入水中，超声处理1.5小时，加入复合风味蛋白酶和中性蛋白酶，55℃酶解2.5小时，灭酶活，得到酶解液；然后将钙离子、亚铁离子和锌离子的氯化盐加入到所述酶解液中，在45℃条件下振荡螯合45分钟，离心，去沉淀，即得；其中，海鲜脚料、水、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶和氯化盐的质量比为1：18：1.5：0.6：12。
对比例1
虾蟹和贝类暂养过程的净化方法，包括三次净化，第一次净化过程投放杀菌剂进行杀菌处理；第二次净化过程中调整水温、盐度和pH值，并不断投放微藻除去大部分重金属；第三次净化过程中利用复合蛋白金属螯合肽除去残留的重金属；其中，所述杀菌剂是由以下重量份的组分制成的：膨润土100份，膨胀蛭石35份，硫酸铜12份，硫酸亚铁10份，二溴海因6份，二氯异氰尿酸钠5份，聚合硅酸铝铁5份。
杀菌剂的投放量为每立方米水体投放0.7kg，杀菌处理时间为30小时。
杀菌剂的制备方法包括以下步骤：
(1)将配方量的硫酸铜、硫酸亚铁、二溴海因、二氯异氰尿酸钠和聚合硅酸铝铁加入蒸馏水中，搅拌混匀，得到混合溶液；蒸馏水的用量为膨润土质量的7倍；
(2)将膨胀蛭石投入步骤(1)所得混合溶液中，浸泡20小时，得到膨胀蛭石悬浮液；
(3)边搅拌边将膨润土缓慢倒入步骤(2)所得膨胀蛭石悬浮液中，超声波振荡处理25分钟，烘干，粉碎至40目，即得。
步骤(3)中，膨润土的投料耗时控制在45分钟。烘干温度为75℃，烘干时间为20小时。
膨胀蛭石是将天然蛭石于450℃加热220分钟，自然冷却而得。
第二次净化过程中，调整水温26℃，盐度28‰，pH值7.1，氧气饱和含量60％以上，保持25W紫外线持续照射。
第二次净化过程中，微藻为亚心形扁藻、骨条藻和针状蓝纤维藻的混合微藻，三者数量比为1：4：9。微藻投放后保持水体中微藻数量保持在110万藻细胞/mL。投放微藻处理时间为5天。
第三次净化过程的处理时间为1天。复合蛋白金属螯合肽的投放量为每立方米水体投放0.6kg。
复合蛋白金属螯合肽为钙离子、亚铁离子和锌离子混合螯合蛋白水解肽，其中，钙离子、亚铁离子和锌离子的物质的量之比为1：1.3：1.9。
复合蛋白金属螯合肽的制备方法如下：将海鲜脚料冷冻后经液氮粉碎至200目，所得粉末加入水中，超声处理1.5小时，加入复合风味蛋白酶和中性蛋白酶，55℃酶解2.5小时，灭酶活，得到酶解液；然后将钙离子、亚铁离子和锌离子的氯化盐加入到所述酶解液中，在45℃条件下振荡螯合45分钟，离心，去沉淀，即得；其中，海鲜脚料、水、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶和氯化盐的质量比为1：18：1.5：0.6：12。
对比例2
虾蟹和贝类暂养过程的净化方法，包括三次净化，第一次净化过程投放杀菌剂进行杀菌处理；第二次净化过程中调整水温、盐度和pH值，并不断投放微藻除去大部分重金属；第三次净化过程中利用复合蛋白金属螯合肽除去残留的重金属；其中，所述杀菌剂是由以下重量份的组分制成的：膨胀蛭石35份，硫酸铜12份，硫酸亚铁10份，溴氯海因10份，二溴海因6份，二氯异氰尿酸钠5份，聚合硅酸铝铁5份。
杀菌剂的投放量为每立方米水体投放0.7kg，杀菌处理时间为30小时。
杀菌剂的制备方法包括以下步骤：
(1)将配方量的硫酸铜、硫酸亚铁、溴氯海因、二溴海因、二氯异氰尿酸钠和聚合硅酸铝铁加入蒸馏水中，搅拌混匀，得到混合溶液；蒸馏水的用量为膨润土质量的7倍；
(2)将膨胀蛭石投入步骤(1)所得混合溶液中，浸泡20小时，烘干，粉碎至40目，即得。
步骤(2)中，烘干温度为75℃，烘干时间为20小时。
膨胀蛭石是将天然蛭石于450℃加热220分钟，自然冷却而得。
第二次净化过程中，调整水温26℃，盐度28‰，pH值7.1，氧气饱和含量60％以上，保持25W紫外线持续照射。
第二次净化过程中，微藻为亚心形扁藻、骨条藻和针状蓝纤维藻的混合微藻，三者数量比为1：4：9。微藻投放后保持水体中微藻数量保持在110万藻细胞/mL。投放微藻处理时间为5天。
第三次净化过程的处理时间为1天。复合蛋白金属螯合肽的投放量为每立方米水体投放0.6kg。
复合蛋白金属螯合肽为钙离子、亚铁离子和锌离子混合螯合蛋白水解肽，其中，钙离子、亚铁离子和锌离子的物质的量之比为1：1.3：1.9。
复合蛋白金属螯合肽的制备方法如下：将海鲜脚料冷冻后经液氮粉碎至200目，所得粉末加入水中，超声处理1.5小时，加入复合风味蛋白酶和中性蛋白酶，55℃酶解2.5小时，灭酶活，得到酶解液；然后将钙离子、亚铁离子和锌离子的氯化盐加入到所述酶解液中，在45℃条件下振荡螯合45分钟，离心，去沉淀，即得；其中，海鲜脚料、水、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶和氯化盐的质量比为1：18：1.5：0.6：12。
对比例3
虾蟹和贝类暂养过程的净化方法，包括三次净化，第一次净化过程投放杀菌剂进行杀菌处理；第二次净化过程中调整水温、盐度和pH值，并不断投放微藻除去大部分重金属；第三次净化过程中利用复合蛋白金属螯合肽除去残留的重金属；其中，所述杀菌剂是由以下重量份的组分制成的：膨润土100份，硫酸铜12份，硫酸亚铁10份，溴氯海因10份，二溴海因6份，二氯异氰尿酸钠5份，聚合硅酸铝铁5份。
杀菌剂的投放量为每立方米水体投放0.7kg，杀菌处理时间为30小时。
杀菌剂的制备方法包括以下步骤：
(1)将配方量的硫酸铜、硫酸亚铁、溴氯海因、二溴海因、二氯异氰尿酸钠和聚合硅酸铝铁加入蒸馏水中，搅拌混匀，得到混合溶液；蒸馏水的用量为膨润土质量的7倍；
(2)边搅拌边将膨润土缓慢倒入步骤(1)所得混合溶液中，超声波振荡处理25分钟，烘干，粉碎至40目，即得。
步骤(2)中，膨润土的投料耗时控制在45分钟。烘干温度为75℃，烘干时间为20小时。
第二次净化过程中，调整水温26℃，盐度28‰，pH值7.1，氧气饱和含量60％以上，保持25W紫外线持续照射。
第二次净化过程中，微藻为亚心形扁藻、骨条藻和针状蓝纤维藻的混合微藻，三者数量比为1：4：9。微藻投放后保持水体中微藻数量保持在110万藻细胞/mL。投放微藻处理时间为5天。
第三次净化过程的处理时间为1天。复合蛋白金属螯合肽的投放量为每立方米水体投放0.6kg。
复合蛋白金属螯合肽为钙离子、亚铁离子和锌离子混合螯合蛋白水解肽，其中，钙离子、亚铁离子和锌离子的物质的量之比为1：1.3：1.9。
复合蛋白金属螯合肽的制备方法如下：将海鲜脚料冷冻后经液氮粉碎至200目，所得粉末加入水中，超声处理1.5小时，加入复合风味蛋白酶和中性蛋白酶，55℃酶解2.5小时，灭酶活，得到酶解液；然后将钙离子、亚铁离子和锌离子的氯化盐加入到所述酶解液中，在45℃条件下振荡螯合45分钟，离心，去沉淀，即得；其中，海鲜脚料、水、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶和氯化盐的质量比为1：18：1.5：0.6：12。
对比例4
虾蟹和贝类暂养过程的净化方法，包括三次净化，第一次净化过程投放杀菌剂进行杀菌处理；第二次净化过程中调整水温、盐度和pH值，利用复合蛋白金属螯合肽除去一部分重金属；第三次净化过程中，不断投放微藻除去一部分重金属；其中，所述杀菌剂是由以下重量份的组分制成的：膨润土100份，膨胀蛭石35份，硫酸铜12份，硫酸亚铁10份，溴氯海因10份，二溴海因6份，二氯异氰尿酸钠5份，聚合硅酸铝铁5份。
杀菌剂的投放量为每立方米水体投放0.7kg，杀菌处理时间为30小时。
杀菌剂的制备方法包括以下步骤：
(1)将配方量的硫酸铜、硫酸亚铁、溴氯海因、二溴海因、二氯异氰尿酸钠和聚合硅酸铝铁加入蒸馏水中，搅拌混匀，得到混合溶液；蒸馏水的用量为膨润土质量的7倍；
(2)将膨胀蛭石投入步骤(1)所得混合溶液中，浸泡20小时，得到膨胀蛭石悬浮液；
(3)边搅拌边将膨润土缓慢倒入步骤(2)所得膨胀蛭石悬浮液中，超声波振荡处理25分钟，烘干，粉碎至40目，即得。
步骤(3)中，膨润土的投料耗时控制在45分钟。烘干温度为75℃，烘干时间为20小时。
膨胀蛭石是将天然蛭石于450℃加热220分钟，自然冷却而得。
第二次净化过程中，调整水温26℃，盐度28‰，pH值7.1，氧气饱和含量60％以上，保持25W紫外线持续照射。
第二次净化过程的处理时间为1天。复合蛋白金属螯合肽的投放量为每立方米水体投放0.6kg。
复合蛋白金属螯合肽为钙离子、亚铁离子和锌离子混合螯合蛋白水解肽，其中，钙离子、亚铁离子和锌离子的物质的量之比为1：1.3：1.9。
复合蛋白金属螯合肽的制备方法如下：将海鲜脚料冷冻后经液氮粉碎至200目，所得粉末加入水中，超声处理1.5小时，加入复合风味蛋白酶和中性蛋白酶，55℃酶解2.5小时，灭酶活，得到酶解液；然后将钙离子、亚铁离子和锌离子的氯化盐加入到所述酶解液中，在45℃条件下振荡螯合45分钟，离心，去沉淀，即得；其中，海鲜脚料、水、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶和氯化盐的质量比为1：18：1.5：0.6：12。
第三次净化过程中，微藻为亚心形扁藻、骨条藻和针状蓝纤维藻的混合微藻，三者数量比为1：4：9。微藻投放后保持水体中微藻数量保持在110万藻细胞/mL。投放微藻处理时间为5天。
试验例
随机选取一块小龙虾养殖水域(养殖历史5年)，划分为相互隔离的10个小区块，其中一个为对照组，剩余的9个小区块作为试验组，分别用实施例1～5或对比例1～4的净化方法进行处理，净化完成后，在对照组和试验组每个小区块内继续养殖小龙虾，投苗密度相同，基础饲料喂食，成熟捕捞后检测虾肉内重金属(铅、镉)平均含量以及大肠杆菌、金黄色葡萄球菌平均含量(每克虾肉中细菌总数)，结果见表1。
表1.净化效果比较
Figure BDA0001518989990000121
Figure BDA0001518989990000131
由表1可知，与对照组相比，采用实施例1～5的净化方法进行水质处理后，重金属(铅、镉)含量以及大肠杆菌、金黄色葡萄球菌含量(每克虾肉中细菌总数)均有明显下降，说明具有良好的重金属脱除效果和杀菌效果；其中，实施例1和实施例2采用了单一微藻处理和单一离子螯合蛋白水解肽处理，重金属脱除效果略逊于实施例3～5。对比例1中的杀菌剂略去了溴氯海因，对比例2中的杀菌剂略去了膨润土，对比例3的杀菌剂略去了膨胀蛭石，杀菌效果与实施例1～5相比明显变差，强于对照组；对比例4将微藻处理和复合蛋白金属螯合肽处理步骤进行了颠倒，重金属脱除效果与实施例1～5相比明显变差，强于对照组。
上述虽然对本发明的具体实施方式进行了描述，但并非对本发明保护范围的限制，在本发明的技术方案的基础上，本领域技术人员不需要付出创造性劳动即可做出的各种修改或变形仍在本发明的保护范围以内。

Claims (1)

1.虾蟹和贝类暂养过程的净化方法，其特征在于，包括三次净化，第一次净化过程投放杀菌剂进行杀菌处理；第二次净化过程中调整水温、盐度和pH值，并不断投放微藻除去大部分重金属；第三次净化过程中利用复合蛋白金属螯合肽除去残留的重金属；其中，所述杀菌剂是由以下重量份的组分制成的：膨润土100份，膨胀蛭石30～40份，硫酸铜10～15份，硫酸亚铁8～12份，溴氯海因8～12份，二溴海因5～8份，二氯异氰尿酸钠4～6份，聚合硅酸铝铁4～6份；
杀菌剂的投放量为每立方米水体投放0.5～0.8kg，杀菌处理时间为24～32小时；
杀菌剂的制备方法包括以下步骤：
（1）将配方量的硫酸铜、硫酸亚铁、溴氯海因、二溴海因、二氯异氰尿酸钠和聚合硅酸铝铁加入蒸馏水中，搅拌混匀，得到混合溶液；蒸馏水的用量为膨润土质量的5～8倍；
（2）将膨胀蛭石投入步骤（1）所得混合溶液中，浸泡18～24小时，得到膨胀蛭石悬浮液；
（3）边搅拌边将膨润土缓慢倒入步骤（2）所得膨胀蛭石悬浮液中，超声波振荡处理20～30分钟，烘干，粉碎即得；
所述膨胀蛭石是将天然蛭石于400～500℃加热200～250分钟，自然冷却而得；
步骤（3）中，膨润土的投料耗时控制在40～50分钟；烘干温度为70～80℃，烘干时间为18～24小时；粉碎至30～50目；
第二次净化过程中，调整水温25～28℃，盐度25～30‰，pH值7.0～7.2，氧气饱和含量60%以上，保持20～30W紫外线持续照射；
第二次净化过程中，所述微藻为亚心形扁藻、骨条藻和针状蓝纤维藻的混合微藻，三者数量比为1：3～5：8～10；
第三次净化过程中，复合蛋白金属螯合肽的投放量为每立方米水体投放0.5～0.7kg；
所述复合蛋白金属螯合肽为钙离子、亚铁离子和锌离子混合螯合蛋白水解肽，其中，钙离子、亚铁离子和锌离子的物质的量之比为1：1.2～1.4：1.8～2；
所述复合蛋白金属螯合肽的制备方法如下：将海鲜脚料冷冻后经液氮粉碎至200～300目，所得粉末加入水中，超声处理1～2小时，加入复合风味蛋白酶和中性蛋白酶，50～60℃酶解2～3小时，灭酶活，得到酶解液；然后将钙离子、亚铁离子和锌离子的氯化盐加入到所述酶解液中，在40～50℃条件下振荡螯合40～50分钟，离心，去沉淀，即得；其中，海鲜脚料、水、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶和氯化盐的质量比为1：15～20：1～2：0.5～0.7：10～15。
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