CN108210531A - 白芷挥发油在制备抗菌药物中的用途 - Google Patents

白芷挥发油在制备抗菌药物中的用途 Download PDF

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敖慧
张世洋
周勤梅
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Abstract

本发明提供了白芷挥发油在制备抗菌药物中的用途，其中祁白芷和山东白芷的挥发油的抑菌作用比其他产地的白芷好，其中祁白芷的抑菌作用最好，最低抑菌浓度为0.125‑0.25mg/mL，对多种菌具有抑菌作用，有利于临床用药。

Description

白芷挥发油在制备抗菌药物中的用途
技术领域
本发明涉及白芷挥发油在制备抗菌药物中的用途。
背景技术
白芷来源于伞形科多年生草本植物白芷的根，多年生，其性温，气芳香，味辛、微苦，具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓的作用，被临床广泛应用于感冒头痛、眉棱骨痛、鼻塞、鼻渊、牙痛、白带和疮疡肿痛等症，并有较好的疗效。根据其产地不同可分为川白芷、禹白芷、祁白芷、山东白芷、亳州白芷和杭白芷。
白芷的主要化学成分为香豆素类和挥发油。有关研究显示，白芷香豆素的提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等菌种具有良好的抑菌效果。
目前未见白芷挥发油同样具有抑菌作用的报道。
发明内容
本发明的目的在于提供白芷挥发油在制备抗菌药物中的用途。
进一步地，所述白芷为杭白芷、川白芷、禹白芷、祁白芷、亳州白芷或山东白芷；优选地，所述白芷为祁白芷或山东白芷；更优选地，所述白芷为祁白芷。
进一步地，所述菌为细菌或真菌。
进一步地，所述细菌为革兰式阳性菌或革兰式阴性菌；所述真菌包括白色念珠菌。
进一步地，所述革兰式阳性菌包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌；所述革兰式阴性菌包括志贺菌。
进一步地，所述金黄色葡萄球菌为金黄色葡萄球菌ATCC25923；所述表皮葡萄球菌为表皮葡萄球菌ATCC12228；所述粪肠球菌为粪肠球菌ATCC29212；所述志贺菌为宋内志贺菌。
进一步地，所述细菌为耐药性细菌。
进一步地，所述耐药性细菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；优选为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌ATCC33591。
进一步地，所述白芷挥发油是按以下方法制备得到：
1)称取白芷，粉碎，用水蒸气蒸馏提取，收集蒸馏液；
2)取步骤1)所得蒸馏液，除水，即得油状提取物。
本发明还提供了一种抗菌药物，它是以白芷挥发油为活性成分，加上药学上可接受的辅料或者辅助性成分制备而成的制剂。
实验结果表明，本发明的白芷挥发油抑菌效果优异，对耐药性细菌，特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑制效果更佳。并且不同产地白芷的挥发油的抑菌效果不同，祁白芷和山东白芷的挥发油的抑菌作用比其他产地的白芷好，其中祁白芷挥发油的抑菌作用最好，对多种菌都具有抑制作用，有利于临床用药。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
实施例1
1.材料与仪器
1.1药物
白芷均购自成都国际商贸城，经成都中医药大学药学院生药系陈璐副教授鉴定购买的川白芷、杭白芷为植物杭白芷Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.etHook.f.var.formosana(Boiss.)Shan et Yuan的干燥根，购买的祁白芷、禹白芷、亳州白芷、山东白芷为伞形科植物白芷Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.et Hook.f.的干燥根。
阳性药物：克霉唑(99.2％，中国食品药品检定研究院，批号：100004-200603)；阿莫西林胶囊(中诺药业有限公司，批号：20160906009)。
1.2试剂及菌株
无水硫酸钠(国药集团化学试剂有限公司，批号：20140114)为分析纯；二甲基亚砜(DMSO，成都市科龙化工试剂厂，批号：2015110201)；水为蒸馏水；MH琼脂(杭州百思生物技术有限公司，批号：20160602001)；沙氏琼脂培养基(杭州百思生物技术有限公司，批号：20161208001)。金黄色葡萄球菌ATCC25923、耐甲氧西林金黄色葡萄杆菌ATCC33591、ATCC43300、白色念珠菌CMCC98001均由四川省抑菌研究所赠送，表皮葡萄球菌ATCC12228、粪肠球菌ATCC29212、宋内志贺菌CMCC51592购自南京便诊生物科技有限公司，其余菌株均来自临床分离。
1.3仪器
轻油提取器(四川蜀牛玻璃仪器有限公司)，MIT-P细菌多点接种仪(日本佐久间公司)，电热套(北京中兴伟业仪器有限公司)，DHP-9050B智能型电热恒温培养箱(上海琅轩实验设备有限公司)，HX-200型高速中药粉碎机(浙江省永康市溪岸五金药具厂)。
2.实验方法
2.1挥发油的提取
水蒸气馏蒸馏器提取法：分别将不同产地的白芷粉碎成干粉(粒径为180-230μm)，分别称量500g不同产地的白芷干粉，分别装入10000ml水蒸气蒸馏提取器中，加入5000g蒸馏水，用电热套加热至微沸，提取8h，收集蒸馏液，加入适当无水硫酸钠除去下部蒸馏水既得油状提取物，密封后放置于4℃冰箱保存。计算提取率。提取率(％)＝油状液体体积/样品重量×100％。
取上述挥发油10μl溶于1ml正己烷，加入适当无水硫酸钠除水后用微孔滤膜过滤，装入进样瓶，获得具有特殊香味的油状物。
2.2挥发油抑菌活性研究
2.2.1菌种培养
在已灭菌的沙氏琼脂培养基的平板上用划线法接种白色念珠菌，在已灭菌的琼脂培养基的平板上用划线法接种实验所需的其它菌株，并将平板放入电热恒温培养箱中，于37℃下培养。
2.2.2待测样品的制备
精确称量不同产地白芷挥发油和阳性药物，用DMSO配置成15mg/mL的初始浓度，并用二倍稀释法配置4个浓度梯度，浓度分别为7.5mg/mL、3.75mg/mL、1.875mg/mL、0.9375mg/mL，再取1mLDMSO配置0浓度样品。依次取1mL各浓度的样品加入培养皿中，然后加入14mL培养基，混匀，所制得的含药培养基的浓度分别为为①1mg/mL②0.5mg/mL③0.25mg/mL④0.125mg/mL⑤0.0625mg/mL⑥0mg/mL。
2.2.3抑菌实验
在各个试管中加入2mL生理盐水，将实验所用真菌和细菌用接种环从培养皿转移到试管中，比浊法计数，用无菌生理盐水调至菌液浓度1.5×106CFU/ml。在点样仪的接种试管中加入2mL生理盐水，再分别取20μL已调好浓度的菌液加入接种试管中混匀，用点样仪将菌种接种在培养基上，一并放入恒温培养箱中37℃培养24h，观察结果。
3.实验结果
3.1挥发油的提取结果
川白芷、杭白芷、祁白芷、禹白芷、亳州白芷和山东白芷分别获取0.25ml、0.1ml、0.15ml、0.1ml、0.15ml、0.14ml油状液体，有刺激性。提取率分别为0.05％、0.02％、0.03％、0.02％、0.03％、0.028％。
3.2六种不同产地白芷挥发油抑菌结果见表1
表1六种不同产地白芷挥发油体外抑菌活性结果
注：此次试验给药组最大浓度为1mg/mL，“-”表示此次试验浓度没有表现出抑菌浓度，含样品浓度为0的只加入DMSO的培养基接种了菌种，但未加入样品，长出了细菌；空白组未接入菌种，未长出细菌，符合阳性对照和阴性对照的结果。
从上表中可以看出，白芷挥发油对白色念珠菌、白色念珠菌临床分离株、金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌临床分离株、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌临床分离株、表皮葡萄球菌、表皮葡萄球菌临床分离株2、粪肠球菌、粪肠球菌临床分离株、宋内志贺菌具有抑制效果，对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌临床分离株1、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌临床分离株3的最低抑菌浓度为0.125mg/mL，对表皮葡萄球菌、表皮葡萄球菌临床分离株2的最低抑菌浓度为0.0625mg/mL。
综上所述，本发明的白芷挥发油抑菌效果优异，对耐药性细菌，特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑制效果更佳。并且不同产地白芷的挥发油的抑菌效果不同，祁白芷和山东白芷的挥发油的抑菌作用比其他产地的白芷好，其中祁白芷挥发油的抑菌作用最好，对多种菌都具有抑制作用，有利于临床用药。

Claims (10)

1.白芷挥发油在制备抗菌药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述白芷为杭白芷、川白芷、禹白芷、祁白芷、亳州白芷或山东白芷；优选地，所述白芷为祁白芷或山东白芷；更优选地，所述白芷为祁白芷。
3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于：所述菌为细菌或真菌。
4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于：所述细菌为革兰式阳性菌或革兰式阴性菌；所述真菌包括白色念珠菌。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于：所述革兰式阳性菌包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌；所述革兰式阴性菌包括志贺菌。
6.根据权利要求5所述用途，其特征在于：所述金黄色葡萄球菌为金黄色葡萄球菌ATCC25923；所述表皮葡萄球菌为表皮葡萄球菌ATCC12228；所述粪肠球菌为粪肠球菌ATCC29212；所述志贺菌为宋内志贺菌。
7.根据权利要求4或5所述的用途，其特征在于：所述细菌为耐药性细菌。
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述耐药性细菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；优选为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌ATCC33591。
9.根据权利要求1～8任一项所述的用途，其特征在于：所述白芷挥发油是按以下方法制备得到：
1)称取白芷，粉碎，用水蒸气蒸馏提取，收集蒸馏液；
2)取步骤1)所得蒸馏液，除水，即得油状提取物。
10.一种抗菌药物，其特征在于：它是以白芷挥发油为活性成分，加上药学上可接受的辅料或者辅助性成分制备而成的制剂。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110305734A (zh) * 2019-07-03 2019-10-08 亳州职业技术学院 一种白芷叶挥发油的提取工艺

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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