CN108138093A - 洗衣方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及角质酶用于防止绒毛和绒球的积累和/或去除绒毛和绒球的用途，一种用于湿洗纺织品的方法和一种洗涤剂组合物。

Description

洗衣方法

序列表的引用

本申请含有一个处于计算机可读形式的序列表，将其通过引用结合在此。

技术领域

本发明涉及角质酶用于防止绒毛和绒球的积累和/或去除绒毛和绒球的用途，一种用于湿洗纺织品的方法和一种洗涤剂组合物。

背景技术

织物和纺织品的穿着、洗涤和滚筒烘干使该纺织品暴露于机械应力，该机械应力通过破坏织物/纺织品中的纤维而损坏该纺织品和织物，并且从而使该纺织品/织物被绒毛和绒球覆盖。这给予该织物或纺织品磨损的样子。

在工业和机构洗衣房中洗涤的纺织品表面上的绒毛和绒球对纺织品寿命有负面影响，并且它还影响工业洗衣房的盈利，因为这些洗衣房通常拥有并且出租它们正在洗涤的纺织品。绒毛和绒球造成的磨损的样子使得出租该纺织品变得不可能。由聚酯纤维制成的纺织品(作为纯聚酯织物或与例如棉混合的)广泛用于在工业和机构洗衣房中洗涤的工作服、制服和其他织物。其结果是更强韧的纺织品寿命更长，但是即使是聚酯纤维也会破裂并产生绒毛和绒球，导致该纺织品报废。

发明内容

本发明涉及角质酶用于通过在洗衣过程中将纺织品暴露于该酶来防止绒毛和绒球的积累和/或从该纺织品上去除绒毛和绒球的用途。本发明进一步涉及一种用于湿洗纺织品的方法，该方法包括以下步骤：

a.使该纺织品与包含表面活性剂的洗液接触；

b.任选地将一种或多种洗涤剂组分添加到该洗液中；

c.完成至少一个洗涤循环；并且

d.任选地用水冲洗该纺织品，

其中角质酶应在至少一个洗涤循环或至少一个冲洗循环期间存在于该洗液或冲洗水中。还披露了一种包含角质酶、纤维素酶和表面活性剂的洗涤剂组合物，其中该角质酶与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性，并且其中该角质酶与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性或该角质酶与SEQ ID NO:3的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性。

定义

“抗起球”：术语“抗起球”表示从纺织品表面去除绒毛和绒球和/或预防在纺织品表面上形成绒毛和绒球。

“洗涤剂组分”：在此将术语“洗涤剂组分”定义为意指可以用于洗涤剂组合物中的化学品的类型。洗涤剂组分的实例是碱、表面活性剂、助水溶剂、助洗剂、共助洗剂、螯合剂(chelator)或螯合试剂(chelating agent)、漂白系统或漂白组分、聚合物、织物调色剂、织物调理剂、增泡剂、抑泡剂、分散剂、染料转移抑制剂、荧光增白剂、香料、光学增亮剂、杀细菌剂、杀真菌剂、污垢悬浮剂、污垢释放聚合物、抗再沉积剂、酶抑制剂或稳定剂、酶活化剂、抗氧化剂以及增溶剂。

机构的：在此将术语“机构的”定义为意指与类似于家庭情况的那些小OPL的手动给予单个完全配制的洗涤剂组合物相反，足够大足以使用将若干部分配制的洗涤剂组合物自动给予至其一个或多个洗涤机中运行其类似于工业洗衣房的洗涤过程的室内洗衣房(OnPremise Laundry，OPL)。

纺织品：术语“纺织品”意指包括纱线、纱线中间体、纤维、非机织材料、天然材料、合成材料、以及任何其他纺织品材料的任何纺织品材料，这些材料制造的织物和由这些织物制成的产品(例如衣服和其他物品)。该纺织品或织物可以处于针织品、机织物、牛仔布、非机织物、毡、纱线、以及毛巾布的形式。这些纺织品可以是基于纤维素的，如天然纤维素，包括棉、亚麻/亚麻布、黄麻、苎麻、剑麻或椰壳纤维或者人造纤维素(例如，来源于木浆)，包括粘胶纤维/人造丝、乙酸纤维素纤维(三胞)、莱赛尔纤维(lyocell)或其共混物。纺织品或织物也可以不基于纤维素，如天然聚酰胺，包括羊毛、驼毛、羊绒、马海毛、兔毛和蚕丝或合成聚合物如尼龙、芳族聚酰胺、聚酯、丙烯酸、聚丙烯和氨纶/弹性纤维(spandex/elastane)、或其共混物其以及基于纤维素和不基于纤维素的纤维的共混物。共混物的实例是棉和/或人造丝/粘胶纤维与一种或多种伴随材料的共混物，该伴随材料如羊毛、合成纤维(例如聚酰胺纤维、丙烯酸纤维、聚酯纤维、聚氯乙烯纤维、聚氨酯纤维、聚脲纤维、芳族聚酰胺纤维)和/或含纤维素的纤维(例如人造丝/粘胶纤维、苎麻、亚麻/亚麻布、黄麻、乙酸纤维素纤维、莱赛尔纤维)。织物可以是常规的可洗涤衣物，例如染污的家居衣物。当使用术语织物或衣服时，旨在还包括广义术语纺织品。

如在此使用的“聚酯”意指一种含有链内酯基团的线性聚合分子，这些酯基团是从一种二酸与一种二醇的缩合或从羟基酸的聚合衍生。本发明适用于脂肪族的和芳香族的聚酯两者。特别优选的聚酯是芳香族的聚酯物品，其被用于产生纤维和树脂，并且包括合成地产生的长链聚合物，包括按重量计至少85％、优选至少90％并且最优选至少95％的一种取代的芳香族羧酸的一种酯，例如取代的对苯二甲酸或对位取代的羟苯酸酯或其混合物。其他有用的聚酯物品包括由本体聚合物、纱线、纺织物、膜、树脂以及粉末制成的那些。工业使用中的这些基本的聚酯包括聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、四亚甲基对苯二甲酸酯(PTMT)、聚对苯二甲酸丁二酯(PBT)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)和聚萘二甲酸乙二醇酯(polyethylenenaphthalate)(PEN)、聚环己烷二亚甲基对苯二甲酸酯(CHDMT)、聚乙烯-4-氧基苯甲酸酯、A-Tell、聚乙交酯、PHBA以及2GN。然而，PET是产生的最常见的线性聚合物并且占现今工业中应用的聚酯的大部分。

在此使用的聚酯纺织品意指包括包含聚酯的纤维、纱线、织物以及衣服。该聚酯纱线或织物或衣服由纯的聚(对苯二甲酸乙二酯)制成，或由聚(对苯二甲酸乙二酯)纤维和常规用于制造纺织品例如毛料、棉布、粘胶纤维和丝绸的任何其他材料的共混物制成。

在一个优选实施例中，该聚酯织物是包含大于5％(w/w)的聚酯，特别是大于10％、大于15％、大于20％、大于30％、大于35％、大于50％、大于65％、大于90％、或大于95％的聚酯的织物共混物。在甚至优选的实施例中，这种织物共混物是聚酯/棉共混织物。在甚至优选的实施例中，将本发明的方法施用于基本上由聚酯组成的纺织品，即，纯聚酯纺织品(100％聚酯)，如纯PET纺织品。

部分配制：在此将术语“部分配制”定义为意指不含有所有用以洗涤纺织品/织物的所需洗涤剂和/或酶组分的洗涤剂组合物。部分配制的洗涤剂组合物可以缺少清洁过程开始所需的酶组合物或一种或多种碱、表面活性剂、助洗剂或其他洗涤剂组分。可以通过添加两种或更多种部分配制的洗涤剂组合物至洗涤循环中，在该洗涤循环中制备完全配制的洗涤剂组合物。

洗涤周期：在此将术语“洗涤周期”定义为一个洗涤操作，其中将纺织品浸泡在洗液中，将某种机械作用施加至该纺织品，以释放污渍，并且协助洗液流进和流出该纺织品，并且最终去除多余的洗液。在一个或多个洗涤周期后，总体上对该纺织品进行冲洗和干燥。

洗液：在此将术语“洗液”定义为任选地包括一种或多种酶的水和洗涤剂组分的溶液或混合物。

具体实施方式

本发明人意外地发现，角质酶可以用于通过在洗衣过程中将纺织品暴露于该酶来防止绒毛和绒球的积累和/或从该纺织品上去除绒毛和绒球。可以在洗衣过程中的洗涤循环和/或冲洗循环期间将该纺织品暴露于角质酶。洗涤可以在住宅洗涤机、工业或机构洗衣房中进行。

在洗涤过程期间，打磨和纤维损伤导致形成松散的纤维或“绒毛”，该纤维或“绒毛”可能会缠结并形成“绒球”。具有绒毛和绒球的纺织品经常表现出磨损的外观，并且该纺织品变得较不柔软。这对于消费者/最终用户来说，当然是不希望的。

工业和机构洗衣房经常洗涤纺织品多达50次。因此，对于工业洗涤而言，起毛和起球是一个巨大的问题，因为即使纺织品没有磨损，洗衣房也会由于磨损的样子而丢弃纺织品。

本发明进一步涉及一种用于湿洗纺织品的方法，该方法包括以下步骤：

a.使该纺织品与包含表面活性剂的洗液接触；

b.任选地将一种或多种洗涤剂组分添加到该洗液中；

c.完成至少一个洗涤循环；并且

d.任选地用水冲洗该纺织品，

其中角质酶应在至少一个洗涤循环或至少一个冲洗循环期间存在于该洗液或冲洗水中。

为了防止和去除绒毛和绒球的积聚，应使用角质酶进行洗涤若干次。应使用角质酶进行洗涤至少5次，然后才能看到对绒毛和绒球的效果。在一个实施例中，该洗衣过程进行至少5次。在一个实施例中，该洗衣过程进行至少10次、至少15次或至少20次。

当根据本发明的方法洗涤纺织品时，该方法可以包括至少两个洗涤循环，其中至少一个洗涤循环是预洗涤循环，并且至少一个洗涤循环是主洗涤循环。角质酶可以在预洗涤或主洗涤期间存在于洗液中，或者角质酶可以在预洗涤和主洗涤期间存在。在一个实施例中，角质酶可以在冲洗循环期间存在。

该方法可以在家中由消费者进行或者在工业或机构洗衣房进行。

对于工业的和机构的洗涤，使用了大批洗涤机(洗涤脱水机)或隧道式洗涤机(连续批次洗涤器)。可以由有资质的洗涤器操作员来操作它们。洗涤器操作员加载并且卸载洗涤器(对于隧道式洗涤器，这是一个自动化的过程)，并且决定将哪一种化学品添加至洗涤机以及温度、洗涤循环的次数和它们的持续时间-典型地是通过选择若干个预先编程好的洗涤程序中的一个来实现。分开地或作为部分配制的洗涤剂组合物来添加用于洗涤过程的不同洗涤剂组分，并且因此允许操作员来分开地给予这些组分。通常在非常严苛的环境中进行工业的和机构的洗涤过程，其中在该过程期间使用强碱、强酸和强漂白剂。常规洗涤脱水机中的洗涤过程由若干个步骤组成，包括一个或多个预洗涤、洗涤和冲洗步骤。这些步骤是连续进行的。常规的CBW由独立的预洗涤、洗涤和冲洗区组成。将淡水引入机器的冲洗区，并且在衣物以逆流方向被运输的同时使其以串联方式流向主洗涤区。这些步骤是在运输洗涤负载的同时按顺序进行的。

在工业的和机构的洗涤期间，在洗涤过程期间，强碱(氢氧化钠，氢氧化钾，偏硅酸钠或碳酸钠)和强酸的添加可以进行若干次。

在本发明的一个实施例中，该洗液的pH在7至13的范围内。该洗液的pH可以在8.5-13的范围内、9.5-13的范围内、10-13的范围内、10.5-13的范围内、11-13的范围内、11.5-13的范围内、12-13的范围内、或12.5-13的范围内。工业洗衣中的洗液的pH通常比住宅洗衣中的高1-4个pH单位。

该洗液的温度可以在15℃至90℃的范围内。

在本发明的一个实施例中，该温度可以在15℃-60℃的范围内，例如约15℃、约20℃、约25℃、约30℃、约35℃、约40℃、约45℃、约50℃、约55℃或约60℃。

在一个实施例中，该温度可以在65℃-90℃的范围内，例如约65℃、约70℃、约75℃、约80℃、约85℃或约90℃。

在一个实施例中，该洗液的温度可以在40℃-60℃的范围内，例如在45℃-60℃的范围内，或在50℃-60℃的范围内。

角质酶是根据酶命名法被分类为EC 3.1.1.74的脂肪分解酶。参考Recommendations of the Nomenclature Committee of the International Union ofBiochemistry and Molecular Biology[国际生物化学与分子生物学联合会的命名委员会的建议]，学术出版社公司(Academic Press Inc.),1992。

出于本发明的目的，根据本发明专利申请书的测定1，角质酶活性是使用低聚物对苯二甲酸-双-2-苯甲酰氧基-乙酯(BETEB)作为底物确定的。BETEB是PET合成期间的一种副产物，并且通常在纺织品制造期间保留在该纺织物或衣服中。BETEB是通过例如对苯二甲酸、苯甲酸和乙二醇的缩合产生的，其与PET具有相同的苯甲酰氧基-乙酯单元。

如果测试之后显示透明区的话，则所讨论的酶适合作为角质酶用于根据本发明所述用途。

已知角质酶来自不同的真菌，例如一种丝状真菌角质酶，例如产自于腐质霉属或镰孢属或大毁壳属或假单胞菌属的一个菌株，特别是特异腐质霉或豌豆腐皮镰孢或稻梨孢或门多萨假单胞菌，更特别是特异腐质霉菌株DSM 1800(US 5,827,719)、或豌豆腐皮镰孢(WO 90/09446图1；WO 94/14964图1D，WO 94/03578图1D，通过引用全部特此结合)或稻梨孢(WO 10/107560SEQ ID NO:1，通过引用特此结合)或门多萨假单胞菌ATCC 53552(US 5,389,536，权利要求1，通过引用特此结合)。

SEQ ID NO:1是特异腐质霉角质酶的氨基酸序列(对应于US 5,827,719的SEQ IDNO:2的成熟部分)。在一些实施例中，该角质酶是包含SEQ ID NO:1的一个或多个(或若干个)氨基酸取代、缺失、和/或插入的变体。优选地，SEQ ID NO:1的氨基酸取代、缺失和/或插入的总数不超过10，例如1、2、3、4、5、6、7、8、或9。将描述于WO 2001/092502中的特异腐质霉角质酶变体通过引用特此结合。角质酶也可以是亲本角质酶的变体，如描述于WO 00/34450(通过引用特此结合)中的那些。

在一个实施例中，该角质酶与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性。

真菌角质酶也可以源自其他真菌菌株，例如丝核菌属例如立枯丝核菌的菌株，或链格孢属例如甘蓝链格孢的菌株(WO 94/03578)。

在本发明的一个实施例中，可以将本发明的多肽以对应于以下的量添加至洗涤剂组合物中：每升的洗液0.001-200mg的蛋白，例如0.005-100mg的蛋白，优选0.01-50mg的蛋白，更优选0.05-20mg的蛋白，甚至更优选0.1-10mg的蛋白。

可以使用常规稳定剂稳定本发明的洗涤剂组合物的一种或多种酶，这些常规稳定剂例如是多元醇，例如丙二醇或甘油、糖或糖醇、乳酸、硼酸或硼酸衍生物，例如芳香族硼酸酯，或苯基硼酸衍生物，例如4-甲酰苯基硼酸，并且可以如在例如WO 92/19709和WO 92/19708中所述配制该组合物。

本发明的多肽还可以结合到WO 97/07202中所披露的洗涤剂配制品中，通过引用将其特此结合。

术语“变体”意指具有角质酶活性的、包含改变(即在一个或多个(例如，若干个)位置处的取代、插入、和/或缺失)的多肽。取代意指用不同氨基酸置换占据某一位置的氨基酸；缺失意指去除占据某一位置的氨基酸；并且插入意指在邻接并且紧随占据位置的氨基酸之后添加氨基酸。本发明的这些变体具有SEQ ID NO:1的成熟多肽的至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少100％的角质酶活性。

在描述本发明的变体中，以下所述的命名法适于引用方便。采用了已接受的IUPAC单个字母和三字母的氨基酸缩写。

取代.对于氨基酸取代，使用以下命名法：初始氨基酸、位置、取代氨基酸。因此，将在位置226处的苏氨酸被丙氨酸取代表示为“Thr226Ala”或者“T226A”。多个突变由加号(“+”)分开，例如“Gly205Arg+Ser411Phe”或“G205R+S411F”代表分别在位置205和位置411处甘氨酸(G)被精氨酸(R)取代，并且丝氨酸(S)被苯丙氨酸(F)取代。

缺失.对于氨基酸缺失，使用以下命名法：初始氨基酸、位置、*。因此，在位置195处的甘氨酸缺失表示为“Gly195*”或者“G195*”。多重缺失通过加号(“+”)分开，例如，“Gly195^*+Ser411^*”或“G195^*+S411^*”。

不同的改变.在可以在一个位置处引入不同的改变的情况下，这些不同的改变由逗号分开，例如“Arg170Tyr,Glu”代表在位置170处的精氨酸被酪氨酸或谷氨酸取代。因此，“Tyr167Gly,Ala+Arg170Gly,Ala”命名了以下变体：“Tyr167Gly+Arg170Gly”、“Tyr167Gly+Arg170Ala”、“Tyr167Ala+Arg170Gly”以及“Tyr167Ala+Arg170Ala”。

在本发明的一个实施例中，该角质酶是SEQ ID NO:1的变体，该变体包含对应于SEQ ID NO:1的位置A4、T29、A88、N91、A130、Q139、A161、T166、I169、L167、I178、R181、G182或R189的至少一个氨基酸残基的取代。

在一个实施例中，该变体具有SEQ ID NO:1的以下改变T29M+A161L+T166I+L167P+R181P+G182*。

可以使用本领域已知的任何诱变程序来制备变体，如定点诱变、合成基因构建、半合成基因构建、随机诱变、改组等。

定点诱变是在编码该亲本的多核苷酸中的一个或多个限定位点处引入一个或多个(例如，若干个)突变的技术。

通过涉及使用含有所希望的突变的寡核苷酸引物的PCR可以体外实现定点诱变。也可以通过盒式诱变进行体外定点诱变，所述盒式诱变涉及由限制酶在包含编码亲本的多核苷酸的质粒中的位点处切割并且随后将含有突变的寡核苷酸连接在多核苷酸中。通常，消化该质粒与该寡核苷酸的限制酶是相同的，从而允许该质粒的粘性末端以及插入片段彼此连接。参见例如Scherer和Davis，1979，Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]76：4949-4955；和Barton等人，1990，ucleic Acids Res.[核酸研究]18：7349-4966。

还可以通过本领域已知的方法在体内实现定点诱变。参见例如，US 2004/0171154；Storici等人，2001，Nature Biotechnol.[自然生物技术]，19:773-776；Kren等人，1998，Nat.Med.[自然医学]，4:285-290；以及Calissano和Macino，1996，FungalGenet.Newslett.[真菌遗传学通讯]，43:15-16。

在本发明中可以使用任何定点诱变程序。存在许多可以用于制备变体的可商购的试剂盒。

合成基因构建需要体外合成设计的多核苷酸分子以编码感兴趣的多肽。基因合成可以利用多种技术来进行，如由Tian等人(2004，Nature[自然]432:1050-1054)所述的基于多路微芯片的技术、以及在光可编程的微流芯片上合成并组装寡核苷酸的类似技术。

使用已知的诱变、重组和/或改组方法、随后进行一个相关的筛选程序可以做出单一或多种氨基酸取代、缺失和/或插入并对其进行测试，这些相关的筛选程序例如由Reidhaar-Olson和Sauer，1988，Science[科学]241:53-57；Bowie和Sauer，1989，Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]86：2152-2156；WO 95/17413；或WO 95/22625。其他可以使用的方法包括易错PCR、噬菌体展示(例如Lowman等人，1991，Biochemistry[生物化学]30:10832-10837；US 5223409；WO 92/06204)以及区域定向诱变(Derbyshire等人，1986，Gene[基因]46:145；Ner等人，1988，DNA 7:127)。

诱变/改组方法可以与高通量自动化筛选方法组合以检测由宿主细胞表达的克隆的诱变多肽的活性(Ness等人，1999，Nature Biotechnology[自然生物技术]17:893-896)。可从宿主细胞回收编码活性多肽的诱变的DNA分子，并使用本领域的标准方法快速测序。这些方法允许迅速确定多肽中单个氨基酸残基的重要性。

通过组合合成基因构建、和/或定点诱变、和/或随机诱变、和/或改组的多方面来实现半合成基因的构建。半合成构建典型地是利用合成的多核苷酸片段的过程结合PCR技术。因此，基因的限定区域可以从头合成，而其他区域可以使用位点特异性诱变引物来扩增，然而还有其他区域可以进行易错PCR或非易错PCR扩增。然后可以对多核苷酸子序列进行改组。

两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的关联度通过参数“序列一致性”来描述。

出于本发明的目的，使用如在EMBOSS包(EMBOSS:The European MolecularBiology Open Software Suite[EMBOSS：欧洲分子生物学开放软件套件]，Rice等人，2000，Trends Genet.[遗传学趋势]，16:276-277)(优选3.0.0版或更新版本)的尼德尔(Needle)程序中所实施的尼德尔曼-翁施(Needleman-Wunsch)算法(Needleman和Wunsch，1970，J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]48:443-453)来确定两个氨基酸序列之间的序列一致性的程度。所用的可选参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5，和EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版)替代矩阵。Needle标注的“最长的一致性”的输出(使用-非简化选项获得)被用作百分比一致性，并且如下计算：

(相同的残基×100)/(比对长度-比对中的空位总数)

出于本发明的目的，使用如在EMBOSS包(EMBOSS：欧洲分子生物学开放软件套件，赖斯(Rice)等人，2000，同上)(优选3.0.0版或更新版本)的尼德尔程序中所实施的尼德尔曼-翁施(Needleman-Wunsch)算法(Needleman和Wunsch，1970，同上)来确定两个脱氧核糖核苷酸序列之间的序列一致性程度。所用的任选参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5，和EDNAFULL(NCBI NUC4.4的EMBOSS版)替代矩阵。Needle标注的“最长的一致性”的输出(使用-非简化选项获得)被用作百分比一致性，并且如下计算：

(相同的脱氧核糖核苷酸×100)/(比对长度-比对中的空位总数)。

除了角质酶外，还可以使用另外的酶用于洗涤。在本发明的一个实施例中，该洗液进一步包含至少一种选自下组的酶，该组由以下各项组成：半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、果胶酶、甘露聚糖酶、裂解酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、聚戊糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、叶绿素酶、淀粉酶、过水解酶、过氧化物酶和黄原胶酶。

下文指定了另外的酶的选择。

角质酶对包含聚酯的纺织品上的起毛和起球具有一定作用。在一个实施例中，该纺织品由聚酯组成。在一个实施例中，该纺织品进一步包含棉。起毛和起球也是棉纺织品公认的问题。可以用纤维素酶防止和/或除去起源于棉纤维的起毛和起球。

在一个实施例中，在洗衣过程期间将纺织品进一步暴露于纤维素酶。可以在洗涤循环期间将纤维素酶添加到洗液中。该纤维素酶可以是内切葡聚糖酶。

在一个实施例中，该纤维素酶与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性。

在一个实施例中，该纤维素酶与SEQ ID NO:3的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性。防止和/或除去绒毛和绒球的可商购纤维素酶在以下商品名下出售：Carezyme^TM(由诺维信公司(Novozymes)供应)、CarezymePremium^TM(由诺维信公司供应)、Celluclean Classic^TM(由诺维信公司供应)、(AB酶公司(AB Enzymes))和(杜邦公司(Dupont))。

本发明人发现通过使用用于防止/去除绒毛和绒球的角质酶，与没有角质酶存在于该洗液中的类似洗涤相比，至少25％的绒球从该纺织品表面去除。在本发明的一个实施例中，与没有角质酶存在于该洗液中的类似洗涤相比，至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的绒球从该表面去除。

本发明进一步涉及包含角质酶、纤维素酶和表面活性剂的洗涤剂组合物，其中该角质酶与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性，并且其中该角质酶与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性或该角质酶与SEQ ID NO:3的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性。

表面活性剂可以是阴离子表面活性剂，并可以选自以下提到的阴离子表面活性剂。

该洗涤剂组合物可以进一步包含一种或多种另外的洗涤剂组分。另外的组分的选择处于技术人员的能力范围内并且包括常规的成分，包括下文所述的示例性非限制性组分。

表面活性剂

该洗涤剂组合物可以包含一种或多种表面活性剂，该表面活性剂可以是阴离子的和/或阳离子的和/或非离子的和/或半极性的和/或兼性离子的，或其混合物。在具体实施例中，洗涤剂组合物包括一种或多种非离子型表面活性剂和一种或多种阴离子表面活性剂的混合物。这种或这些表面活性剂典型地以按重量计从约0.1％至60％的水平存在，如约1％至约40％、或约3％至约20％、或约3％至约10％。基于所希望的清洁应用来选择这种或这些表面活性剂，并且这种或这些表面活性剂包括本领域中已知的任何常规表面活性剂。

当包含在其中时，该洗涤剂通常将会包含按重量计约1％至约40％的阴离子表面活性剂，如约5％至约30％，包括从约5％至约15％，或从约15％至约20％，或从约20％至约25％的阴离子型表面活性剂。阴离子表面活性剂的非限制性实例包括硫酸盐和磺酸盐，具体地说是直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)(如十二烷基硫酸钠(SDS))、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES，也被称为醇乙氧基硫酸盐或脂肪醇醚硫酸盐)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸或脂肪酸盐(皂)的二酯和单酯及其组合。

当被包括在其中时，该洗涤剂将通常包含按重量计从约1％至约40％的阳离子表面活性剂，例如从约0.5％至约30％，特别是从约1％至约20％、从约3％至约10％，如从约3％至约5％、从约8％至约12％或从约10％至约12％。阳离子表面活性剂的非限制性实例包括烷基二甲基乙醇季胺(ADMEAQ)、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、二甲基二硬脂酰氯化铵(DSDMAC)、以及烷基苄基二甲基铵、烷基季铵化合物、烷氧基化季铵(AQA)化合物、酯季铵及其组合。

当被包括在其中时，该洗涤剂将通常包含按重量计从约0.2％至约40％的非离子表面活性剂，例如从约0.5％至约30％，特别是从约1％至约20％、从约3％至约10％，如从约3％至约5％、从约8％至约12％或从约10％至约12％。非离子型表面活性剂的非限制性实例包括醇乙氧基化物(AE或AEO)、醇丙氧基化物、丙氧基化的脂肪醇(PFA)，烷氧基化的脂肪酸烷基酯(例如乙氧基化的和/或丙氧基化的脂肪酸烷基酯)，烷基酚乙氧基化物(APE)，壬基酚乙氧基化物(NPE)，烷基多糖苷(APG)，烷氧基化胺，脂肪酸单乙醇酰胺(FAM)，脂肪酸二乙醇酰胺(FADA)，乙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(EFAM)，丙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(PFAM)，多羟基烷基脂肪酸酰胺，或葡萄糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(葡糖酰胺(GA)，或脂肪酸葡糖酰胺(FAGA))，连同在SPAN和TWEEN商品名下可获得的产品，及其组合。

当被包括在其中时，洗涤剂将通常含有按重量计从约0％至约20％的半极性表面活性剂。半极化表面活性剂的非限制性实例包括氧化胺(AO)，如烷基二甲胺氧化物、N-(椰油基烷基)-N,N-二甲胺氧化物和N-(牛油-烷基)-N,N-双(2-羟乙基)胺氧化物，及其组合。

当包括于其中时，洗涤剂通常将含有按重量计从大约0％至大约20％的两性离子表面活性剂。兼性离子表面活性剂的非限制性实例包括甜菜碱，如烷基二甲基甜菜碱、磺基甜菜碱及其组合。

助水溶剂

助水溶剂是以下化合物，该化合物在水性溶液中溶解疏水化合物(或相反地，在非极性环境中的极性物质)。典型地，助水溶剂具有亲水和疏水两种特征(所谓的两亲特性，如由表面活性剂已知的)；然而，助水溶剂的分子结构一般不利于自发性自聚集，参见例如通过Hodgdon和Kaler(2007)，Current Opinion in Colloid&InterfaceScience[胶体和界面科学新见]12：121-128的综述。助水溶剂并不显示临界浓度，高于该浓度就会发生如对表面活性剂而言所发现的自聚集以及脂质形成胶束、薄层或其他很好地定义的中间相。相反，许多助水溶剂显示连续类型的聚集过程，在该过程中聚集物的大小随着浓度增加而增长。然而，很多助水溶剂改变了包含极性和非极性特征的物质的系统(包括水、油、表面活性剂、和聚合物的混合物)的相行为、稳定性、和胶体特性。助水溶剂常规在从药学、个人护理、食品到技术应用的各个产业中应用。助水溶剂在洗涤剂组合物中的使用允许例如更浓的表面活性剂配制品(如在通过去除水而压缩液体洗涤剂的过程中)而不引起不希望的现象，如相分离或高粘度。

洗涤剂可以包含按重量计0-10％，例如按重量计0-5％，例如约0.5至约5％、或约3％至约5％的助水溶剂。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何助水溶剂。助水溶剂的非限制性实例包括苯磺酸钠、对甲苯磺酸钠(STS)、二甲苯磺酸钠(SXS)、枯烯磺酸钠(SCS)、伞花烃磺酸钠、氧化胺、醇和聚乙二醇醚、羟基萘甲酸钠、羟基萘磺酸钠、乙基己基磺酸钠及其组合。

助洗剂和共助洗剂

该洗涤剂组合物可以包含按重量计约0-65％，例如约5％至约50％的洗涤剂助洗剂或共助洗剂、或其混合物。在餐具清洗洗涤剂中，助洗剂的水平典型地是40％-65％，特别是50％-65％。助洗剂和/或共助洗剂可以具体是形成具有Ca和Mg的水溶性络合物的螯合试剂。可以利用本领域中已知的用于在衣物洗涤剂中使用的任何助洗剂和/或共助洗剂。助洗剂的非限制性实例包括沸石、二磷酸盐(焦磷酸盐)、三磷酸盐例如三磷酸钠(STP或STPP)、碳酸盐例如碳酸钠、可溶性硅酸盐例如硅酸钠、层状硅酸盐(例如来自赫斯特公司(Hoechst)的SKS-6)、乙醇胺例如2-氨基乙-1-醇(MEA)、二乙醇胺(DEA，也称为2,2’-亚氨基二乙-1-醇)、三乙醇胺(TEA，也称为2,2’,2”-次氮基三乙-1-醇)、以及羧甲基菊粉(CMI)、及其组合。

该洗涤剂组合物还可以含有按重量计0-50％，如约5％至约30％的洗涤剂共助洗剂。洗涤剂组合物可以包括单独的共助洗剂、或与助洗剂如沸石助洗剂组合的共助洗剂。共助洗剂的非限制性实例包括聚丙烯酸酯的均聚物或其共聚物，如聚(丙烯酸)(PAA)或共聚(丙烯酸/马来酸)(PAA/PMA)。另外的非限制性实例包括柠檬酸盐、螯合剂(如氨基羧酸盐、氨基多羧酸盐和磷酸盐)、以及烷基-或烯基琥珀酸。另外的具体实例包括2,2’,2”-次氨基三乙酸(NTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、亚氨基二丁二酸(IDS)、乙二胺-N,N’-二丁二酸(EDDS)、甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、谷氨酸-N,N-二乙酸(GLDA)、1-羟基乙烷-1,1-二膦酸(HEDP)、乙二胺四(亚甲基膦酸)(EDTMPA)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTMPA或DTPMPA)、N-(2-羟乙基)亚氨基二乙酸(EDG)、天冬氨酸-N-单乙酸(ASMA)、天冬氨酸-N,N-二乙酸(ASDA)、天冬氨酸-N-单丙酸(ASMP)、亚氨基二丁二酸(iminodisuccinic acid)(IDA)、N-(2-磺甲基)-天冬氨酸(SMAS)、N-(2-磺乙基)-天冬氨酸(SEAS)、N-(2-磺甲基)-谷氨酸(SMGL)、N-(2-磺乙基)-谷氨酸(SEGL)、N-甲基亚氨基二乙酸(MIDA)、α-丙氨酸-N,N-二乙酸(α-ALDA)、丝氨酸-N,N-二乙酸(SEDA)、异丝氨酸-N,N-二乙酸(ISDA)、苯丙氨酸-N,N-二乙酸(PHDA)、邻氨基苯甲酸-N,N-二乙酸(ANDA)、磺胺酸-N,N-二乙酸(SLDA)、牛磺酸-N,N-二乙酸(TUDA)以及磺甲基-N,N-二乙酸(SMDA)、N-(2-羟乙基)-亚乙基二胺-N,N’,N”-三乙酸盐(HEDTA)、二乙醇甘氨酸(DEG)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTPMP)、氨基三(亚甲基膦酸)(ATMP)及其组合和盐。其他示例性助洗剂和/或共助洗剂描述于例如WO 09/102854、US 5977053中

漂白系统

洗涤剂可以含有按重量计0-30％，如约1％至约20％的漂白系统。可以使用本领域中已知用于衣物清洁洗涤剂中的任何漂白系统。适合的漂白系统组分包括漂白催化剂、光漂白剂、漂白活化剂、过氧化氢源如过碳酸钠、过硼酸钠和过氧化氢―尿素(1:1)、预成型过酸及其混合物。适合的预成型过酸包括但不限于过氧羧酸及盐、二过氧二羧酸、过亚氨酸(perimidic acid)及盐、过氧单硫酸及盐(例如过硫酸氢钾(Oxone(R))及其混合物。漂白系统的非限制性实例包括基于过氧化物的漂白系统，这些系统可以包含例如与过酸形成漂白活化剂组合的无机盐，包括碱金属盐，如过硼酸盐(通常是单水合物或四水合物)、过碳酸盐、过硫酸盐、过磷酸盐、过硅酸盐的钠盐。术语漂白活化剂在此意指与过氧化氢反应以经由过水解反应形成过酸的化合物。以此方式形成的过酸构成活化的漂白剂。在此有待使用的适合漂白活化剂包括属于酯、酰胺、酰亚胺或酸酐类别的那些。适合的实例是四乙酰乙二胺(TAED)、4-[(3,5,5-三甲基己酰基)氧基]苯-1-磺酸钠(ISONOBS)、4-(十二酰基氧基)苯-1-磺酸盐(LOBS)、4-(癸酰基氧基)苯-1-磺酸盐、4-(癸酰基氧基)苯甲酸盐(DOBS或DOBA)、4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)和/或披露于WO 98/17767中的那些。感兴趣的漂白活化剂的具体家族披露于EP 624154中并且该家族中特别优选的是乙酰柠檬酸三乙酯(ATC)。ATC或短链甘油三酸酯(像三醋汀)具有以下优点，它是环境友好的。此外，乙酰柠檬酸三乙酯和三醋汀在存储时在产品中具有良好的水解稳定性，并且是一种有效的漂白活化剂。最后，ATC是多功能的，因为在过水解反应中释放的柠檬酸盐可以作为助洗剂起作用。可替代地，漂白系统可以包含例如酰胺、酰亚胺或砜型的过氧酸。漂白系统还可以包含过酸，如6-(苯二甲酰亚氨基)过己酸(PAP)。该漂白系统还可以包括漂白催化剂。在一些实施例中，漂白组分可以是选自下组的有机催化剂，该组由以下各项组成：具有下式的有机催化剂：

(iii)及其混合物；

其中每个R¹独立地是含有从9至24个碳的支链烷基基团或含有从11至24个碳的直链烷基基团，优选地每个R¹独立地是含有从9至18个碳的支链烷基基团或含有从11至18个碳的直链烷基基团，更优选地每个R¹独立地选自下组，该组由以下各项组成：2-丙基庚基、2-丁基辛基、2-戊基壬基、2-己基癸基、十二烷基、十四烷基、十六烷基、十八烷基、异壬基、异癸基、异十三烷基以及异十五烷基。其他示例性漂白系统描述于例如WO 2007/087258、WO2007/087244、WO 2007/087259、EP 1867708(维生素K)以及WO 2007/087242中。适合的光漂白剂可以例如是磺化的酞菁锌或酞菁铝。

优选地，除了漂白催化剂、特别是有机漂白催化剂以外，漂白组分还包括过酸源。过酸源可以选自(a)预成形的过酸；(b)过碳酸盐、过硼酸盐或过硫酸盐(过氧化氢源)，优选与一种漂白活化剂组合；和(c)过水解酶以及酯，用于在纺织品或硬表面处理步骤中在水的存在下原位形成过酸。

聚合物

洗涤剂可以含有按重量计0-10％，如0.5％-5％、2％-5％、0.5％-2％或0.2％-1％的聚合物。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何聚合物。该聚合物可以作为如上文提到的共助洗剂起作用，或可以提供抗再沉积、纤维保护、污垢释放、染料转移抑制、油污清洁和/或抑泡特性。一些聚合物可以具有多于一种的以上提到的特性和/或多于一种的以下提到的基序。示例性聚合物包括(羧甲基)纤维素(CMC)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚(乙烯吡咯烷酮)(PVP)、聚(乙二醇)或聚(环氧乙烷)(PEG)、乙氧基化的聚(亚乙基亚胺)、羧甲基菊粉(CMI)、和聚羧化物，例如PAA、PAA/PMA、聚-天冬氨酸、和甲基丙烯酸月桂酯/丙烯酸共聚物、疏水修饰CMC(HM-CMC)和硅酮、对苯二甲酸和低聚乙二醇的共聚物、聚(对苯二甲酸乙二酯)和聚(氧乙烯对苯二甲酸乙二酯)的共聚物(PET-POET)、PVP、聚(乙烯基咪唑)(PVI)、聚(乙烯吡啶-N-氧化物)(PVPO或PVPNO)以及聚乙烯吡咯烷酮-乙烯基咪唑(PVPVI)。另外的示例性聚合物包括磺化的聚羧酸酯、聚环氧乙烷和聚环氧丙烷(PEO-PPO)以及乙氧基硫酸二季铵盐。其他示例性聚合物披露于例如WO 2006/130575中。也考虑了以上提到的聚合物的盐。

织物调色剂

本发明的洗涤剂组合物还可以包括织物调色剂，例如染料或色素，当配制在洗涤剂组合物中时，当所述织物与一种洗液接触时织物调色剂可以沉积在织物上，该洗液包括所述洗涤剂组合物，并且因此通过可见光的吸收/反射改变所述织物的色彩。荧光增白剂发射至少一些可见光。相比之下，因为它们吸收至少一部分可见光光谱，所以织物调色剂改变表面的色彩。适合的织物调色剂包括染料和染料-粘土轭合物，并且还可以包括色素。适合的染料包括小分子染料和聚合物染料。适合的小分子染料包括选自下组的小分子染料，该组由落入颜色索引(Colour Index)(C.I.)分类的以下染料组成：直接蓝、直接红、直接紫、酸性蓝、酸性红、酸性紫、碱性蓝、碱性紫和碱性红、或其混合物，例如描述于WO 2005/03274、WO 2005/03275、WO 2005/03276和EP 1876226中(将其通过引用而特此结合)。洗涤剂组合物优选包含从约0.00003wt％至约0.2wt％、从约0.00008wt％至约0.05wt％、或甚至从约0.0001wt％至约0.04wt％的织物调色剂。该组合物可以包含从0.0001wt％至0.2wt％的织物调色剂，当该组合物处于单位剂量袋的形式时，这可以是特别优选的。适合的调色剂还披露于例如WO 2007/087257和WO 2007/087243中。

酶

洗涤剂添加剂连同洗涤剂组合物可以包括一种或多种另外的酶，例如蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、糖酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、氧化酶，例如漆酶、和/或过氧化物酶。

一般而言，一种或多种所选酶的特性应与选定的洗涤剂相容(即，最适pH，与其他酶和非酶成分的相容性等)，并且该一种或多种酶应以有效量存在。

纤维素酶

适合的纤维素酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。适合的纤维素酶包括来自芽孢杆菌属、假单胞菌属、腐质霉属、镰刀菌属、梭孢壳属、支顶孢属的纤维素酶，例如披露于US 4,435,307、US 5,648,263、US 5,691,178、US5,776,757以及WO 89/09259中的由特异腐质霉、嗜热毁丝霉和尖孢镰刀菌产生的真菌纤维素酶。

特别适合的纤维素酶是具有颜色护理益处的碱性或中性纤维素酶。这类纤维素酶的实例是在EP 0 495 257、EP 0 531 372、WO 96/11262、WO 96/29397、WO 98/08940中描述的纤维素酶。其他实例是例如描述于WO 94/07998、EP 0 531 315、US 5,457,046、US 5,686,593、US 5,763,254、WO 95/24471、WO 98/12307以及WO 99/001544中的那些纤维素酶变体。

其他纤维素酶是具有以下序列的内切-β-1,4-葡聚糖酶，该序列与WO 2002/099091的SEQ ID NO:2的位置1至位置773的氨基酸序列具有至少97％一致性，或家族44木葡聚糖酶，该木葡聚糖酶具有以下序列，该序列与WO 2001/062903的SEQ ID NO:2的位置40-559具有至少60％一致性。

可商购的纤维素酶包括Celluzyme^TM和Carezyme^TM(诺维信公司(Novozymes A/S))、Carezyme Premium^TM(诺维信公司)、Celluclean^TM(诺维信公司)、CellucleanClassic^TM(诺维信公司)、Cellusoft^TM(诺维信公司)、Whitezyme^TM(诺维信公司)、Clazinase^TM和Puradax HA^TM(杰能科国际公司(Genencor International Inc.))以及KAC-500(B)^TM(花王株式会社(Kao Corporation))。

甘露聚糖酶

适合的甘露聚糖酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学或基因修饰的突变体。该甘露聚糖酶可以是家族5或26的碱性甘露聚糖酶。它可以是一种来自芽孢杆菌属或腐质霉属的野生型，特别是粘琼脂芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、耐盐嗜碱芽孢杆菌(B.halodurans)、克劳氏芽孢杆菌(B.clausii)或特异腐质霉。适合的甘露聚糖酶描述在WO1999/064619中。可商购的甘露聚糖酶是Mannaway(诺维信公司)。

纤维素酶

适合的纤维素酶包括细菌或真菌来源的完整纤维素酶或单组分内切葡聚糖酶。包括化学或基因修饰的突变体。该纤维素酶可以，例如，是通常就称为内切葡聚糖酶的单-组分的内切-1,4-β-葡聚糖酶的单-组分或混合物。适合的纤维素酶包括一种真菌纤维素酶，该真菌纤维素酶来自特异腐质霉(US 4,435,307)或来自木霉属，例如里氏木霉或绿色木霉。纤维素酶的实例在EP 0 495 257进行了描述。其他适合的纤维素酶来自梭孢壳菌属，例如如在WO 96/29397中描述的土生梭孢壳霉或如在WO 91/17244中描述的尖镰孢，或者来自如在WO02/099091和JP 2000210081中所描述的芽孢杆菌属。其他实例是纤维素酶变体，例如描述于WO94/07998、EP 0 531 315、US 5,457,046、US 5,686,593、US 5,763,254、WO 95/24471、WO 98/12307中的那些。可商购的纤维素酶包括和 (诺维信公司(Novozymes A/S))、Puradax HA、(AB酶公司)、和Puradax EG(获得自杰能科公司(Genencor))。

过氧化物酶/氧化酶

适合的过氧化物酶/氧化酶包括植物、细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。有用的过氧化物酶的实例包括来自鬼伞属，例如来自灰盖鬼伞的过氧化物酶，及其变体，如在WO 93/24618、WO 95/10602、以及WO 98/15257中描述的那些。可商购的过氧化物酶包括Guardzyme^TM(诺维信公司)。

蛋白酶

适合的蛋白酶包括细菌、真菌、植物、病毒或动物来源的那些，例如植物或微生物来源。优选的是微生物来源。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。它可以是碱性蛋白酶，例如丝氨酸蛋白酶或金属蛋白酶。丝氨酸蛋白酶可以例如是S1家族(如胰蛋白酶)或S8家族(如枯草杆菌蛋白酶)。金属蛋白酶可以例如是来自例如家族M4的嗜热菌蛋白酶或其他金属蛋白酶，如来自M5、M7或M8家族的那些。

术语“枯草杆菌酶”是指根据Siezen等人，Protein Engng.[蛋白质工程学]4(1991)719-737和Siezen等人，Protein Science[蛋白质科学]6(1997)501-523的丝氨酸蛋白酶亚组。丝氨酸蛋白酶是通过在活性位点具有与底物形成共价加合物的丝氨酸来表征的蛋白酶的一个亚组。枯草杆菌蛋白酶(subtilase)可以划分为6个亚部，即，枯草杆菌蛋白酶家族、嗜热蛋白酶(Thermitase)家族、蛋白酶K家族、羊毛硫氨酸抗生素肽酶(Lantibioticpeptidase)家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。

枯草杆菌酶的实例是来源于芽孢杆菌属的那些，例如描述于US 7262042和WO 09/021867中的迟缓芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和吉氏芽孢杆菌；和描述于WO 89/06279中的枯草杆菌蛋白酶lentus、枯草杆菌蛋白酶Novo、枯草杆菌蛋白酶Carlsberg、地衣芽孢杆菌、枯草杆菌蛋白酶BPN’、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶147和枯草杆菌蛋白酶168以及描述于(WO 93/18140)中的蛋白酶PD138。其他有用的蛋白酶可以是描述于WO 92/175177、WO 01/016285、WO 02/026024以及WO 02/016547中的那些。胰蛋白酶样蛋白酶的实例是胰蛋白酶(例如猪或牛来源的)和镰孢菌蛋白酶(描述于WO 89/06270、WO 94/25583和WO 05/040372中)，以及来源于纤维单胞菌(Cellumonas)的胰凝乳蛋白酶(描述于WO 05/052161和WO 05/052146中)。

进一步优选的蛋白酶是来自迟缓芽孢杆菌DSM 5483的碱性蛋白酶(如描述于例如WO 95/23221中)、及其变体(描述于WO 92/21760、WO 95/23221、EP 1921147以及EP1921148中)。

金属蛋白酶的实例是如描述于WO 07/044993(杰能科国际公司(Genencor Int.))中的中性金属蛋白酶，例如来源于解淀粉芽孢杆菌的那些。

有用的蛋白酶的实例是描述于以下各项中的变体：WO 92/19729、WO 96/034946、WO 98/20115、WO 98/20116、WO 99/011768、WO 01/44452、WO 03/006602、WO 04/03186、WO04/041979、WO 07/006305、WO 11/036263、WO 11/036264，尤其是在以下位置的一个或多个中具有取代的变体：3、4、9、15、27、36、57、68、76、87、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、106、118、120、123、128、129、130、160、167、170、194、195、199、205、206、217、218、222、224、232、235、236、245、248、252以及274，使用BPN’进行编号。更优选地，这些枯草杆菌酶变体可以包含以下突变：S3T、V4I、S9R、A15T、K27R、^*36D、V68A、N76D、N87S,R、^*97E、A98S、S99G,D,A、S99AD、S101G,M,R、S103A、V104I,Y,N、S106A、G118V,R、H120D,N、N123S、S128L、P129Q、S130A、G160D、Y167A、R170S、A194P、G195E、V199M、V205I、L217D、N218D、M222S、A232V、K235L、Q236H、Q245R、N252K、T274A(使用BPN’进行编号)。

适合的可商购蛋白酶包括以下列商品名出售的那些：Duralase^Tm、Durazym^Tm、Ultra、Ultra、 Ultra、 Ultra、以及(诺维信公司)，以下列商品名出售的那些：PurafectPurafectPurafectPurafect 以及(丹尼斯克/杜邦公司(Danisco/DuPont))、Axapem^TM(吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-Brocases N.V.))、BLAP(序列示于US 5352604的图29中)及其变体(汉高股份(Henkel AG))以及来自花王株式会社(Kao)的KAP(嗜碱芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶)。

脂肪酶和角质酶：

适合的脂肪酶和角质酶包括细菌来源或真菌来源的那些。包括化学修饰的或蛋白质工程化的突变酶。实例包括来自嗜热丝孢菌属(Thermomyces)(例如来自疏绵状嗜热丝孢菌(T.lanuginosus)(以前命名为柔毛腐质霉(Humicola lanuginosa))的脂肪酶(如描述于EP 258 068和EP 305 216中)、来自腐质霉(例如特异腐质霉(H.insolens)(WO 96/13580))的角质酶、来自假单胞菌属(Pseudomonas)(这些假单胞菌属中的一些现在重命名为伯克氏菌属(Burkholderia))的脂肪酶(例如，产碱假单胞菌(P.alcaligenes)或类产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligene))(EP 218272)、洋葱假单胞菌(P.cepacia)(EP 331 376)、假单胞菌属物种菌株SD705(WO 95/06720&WO 96/27002)、威斯康星假单胞菌(P.wisconsinensis)(WO 96/12012)、GDSL型链霉菌属脂肪酶(WO 10/065455)、来自稻瘟病菌(Magnaporthegrisea)(WO 10/107560)的角质酶、来自门多萨假多胞菌(Pseudomonas mendocina)(US 5,389,536)的角质酶、来自嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的脂肪酶(WO 11/084412)、嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)脂肪酶(WO 11/084417)、来自枯草芽孢杆菌的脂肪酶(WO 11/084599)、以及来自灰色链霉菌(WO 11/150157)和始旋链霉菌(WO 12/137147)的脂肪酶。

其他实例是脂肪酶变体，例如描述于EP 407225、WO 92/05249、WO 94/01541、WO94/25578、WO 95/14783、WO 95/30744、WO 95/35381、WO 95/22615、WO 96/00292、WO 97/04079、WO 97/07202、WO 00/34450、WO 00/60063、WO 01/92502、WO 07/87508以及WO 09/109500中的那些。

优选的商业化脂肪酶产品包括Lipolase^TM、Lipex^TM；Lipolex^TM和Lipoclean^TM(诺维信公司)，Lumafast(来自杰能科公司(Genencor))以及Lipomax(来自吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-Brocades))。

再其他实例是有时称为酰基转移酶或过水解酶的脂肪酶，例如与南极假丝酵母(Candida antarctica)脂肪酶A具有同源性的酰基转移酶(WO 10/111143)、来自耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)的酰基转移酶(WO 05/56782)、来自CE 7家族的过水解酶(WO 09/67279)以及耻垢分枝杆菌过水解酶的变体(特别是来自亨斯迈纺织品染化有限公司(Huntsman Textile Effects Pte Ltd)的商业产品Gentle Power Bleach中所用的S54V变体)(WO 10/100028)。

淀粉酶：

可以与角质酶一起使用的适合的淀粉酶可以是α-淀粉酶或葡糖淀粉酶并且可以是细菌或真菌来源的。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。淀粉酶包括例如从芽孢杆菌属，例如地衣芽孢杆菌的特定菌株(更详细地描述于GB 1,296,839中)获得的α-淀粉酶。

适合的淀粉酶包括具有在WO 95/10603中的SEQ ID NO:2的淀粉酶或与SEQ IDNO:3具有90％序列一致性的其变体。优选的变体描述于WO 94/02597、WO 94/18314、WO 97/43424以及WO 99/019467的SEQ ID NO:4中，如在以下位置中的一个或多个处具有取代的变体：15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408以及444。

不同的适合的淀粉酶包括具有WO 02/010355中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或与SEQID NO:6具有90％序列一致性的其变体。SEQ ID NO:6的优选变体是在位置181和182中具有缺失并且在位置193中具有取代的那些。

其他适合的淀粉酶是包括示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的来源于解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:4中的地衣芽孢杆菌α-淀粉酶的残基36-483的杂合α-淀粉酶或其具有90％序列一致性的变体。这种杂合α-淀粉酶的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：G48、T49、G107、H156、A181、N190、M197、I201、A209以及Q264。包括示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的来源于解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和SEQ ID NO:4的残基36-483的杂合α-淀粉酶的最优选变体是具有以下取代的那些：

M197T；

H156Y+A181T+N190F+A209V+Q264S；或

G48A+T49I+G107A+H156Y+A181T+N190F+I201F+A209V+Q264S。

另外的适合的淀粉酶是具有在WO 99/019467中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或其与SEQ ID NO:6具有90％序列一致性的变体。SEQ ID NO:6的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的变体的那些：R181、G182、H183、G184、N195、I206、E212、E216和K269。特别优选的淀粉酶是在位置R181和G182或位置H183和G184中具有缺失的那些。

能被使用的另外的淀粉酶是具有WO 96/023873的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQID NO:2或SEQ ID NO:7的那些或与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:7具有90％序列一致性的其变体。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:7的优选变体是那些在以下一个或多个位置具有取代、缺失或插入的变体：140、181、182、183、184、195、206、212、243、260、269、304和476，使用WO 96/023873的SEQ ID 2用于编号。更优选的变体是在选自181、182、183和184的两个位置中具有缺失的那些，例如位置181和182、182和183、或位置183和184。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的最优选淀粉酶变体是那些在位置183和184具有缺失并在位置140、195、206、243、260、304和476中的一个或多个具有取代的变体。

其他能被使用的淀粉酶是具有WO 08/153815的SEQ ID NO:2、WO 01/66712的SEQID NO:10的淀粉酶或与WO 08/153815的SEQ ID NO:2或WO 01/66712的SEQ ID NO:10具有90％序列一致性的其变体。WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：176、177、178、179、190、201、207、211以及264。

另外的适合的淀粉酶是具有WO 09/061380的SEQ ID NO:2的淀粉酶或其与SEQ IDNO:2具有90％序列一致性的变体。SEQ ID NO:2的优选变体是具有C末端截短和/或在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：Q87、Q98、S125、N128、T131、T165、K178、R180、S181、T182、G183、M201、F202、N225、S243、N272、N282、Y305、R309、D319、Q320、Q359、K444和G475。SEQ ID NO:2的更优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代：Q87E,R、Q98R、S125A、N128C、T131I、T165I、K178L、T182G、M201L、F202Y、N225E,R、N272E,R、S243Q,A,E,D、Y305R、R309A、Q320R、Q359E、K444E以及G475K，和/或在位置R180和/或S181或T182和/或G183中具有缺失的那些。SEQ ID NO:2的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些：

N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K；

N128C+K178L+T182G+F202Y+Y305R+D319T+G475K；

S125A+N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K；或

S125A+N128C+T131I+T165I+K178L+T182G+Y305R+G475K，其中这些变体是C-末端截断的并且任选地进一步包括在位置243的取代和/或在位置180和/或位置181的缺失。

另外的适合的淀粉酶是具有WO 13184577的SEQ ID NO:1的淀粉酶或与SEQ IDNO:1具有90％序列一致性的其变体。SEQ ID NO:1的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：K176、R178、G179、T180、G181、E187、N192、M199、I203、S241、R458、T459、D460、G476和G477。SEQ ID NO:1的更优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代：K176L、E187P、N192FYH、M199L、I203YF、S241QADN、R458N、T459S、D460T、G476K和G477K和/或在位置R178和/或S179或T180和/或G181中具有缺失的那些。SEQ IDNO:1的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些：

E187P+I203Y+G476K

E187P+I203Y+R458N+T459S+D460T+G476K

其中这些变体任选地进一步在位置241处包括取代和/或在位置178和/或位置179处包括缺失。

另外的适合的淀粉酶是具有WO 10104675的SEQ ID NO:1的淀粉酶或其与SEQ IDNO:1具有90％序列一致性的变体。SEQ ID NO:1的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：N21、D97、V128、K177、R179、S180、I181、G182、M200、L204、E242、G477和G478。SEQ ID NO:1的更优选变体是在以下位置：N21D、D97N、V128I、K177L、M200L、L204YF、E242QA、G477K和G478K中的一个或多个中具有取代和/或在位置R179和/或S180或I181和/或G182处具有缺失的那些。SEQ ID NO:1的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些：

N21D+D97N+V128I

其中这些变体任选地进一步在位置200处包括取代和/或在位置180和/或位置181处包括缺失。

其他适合的淀粉酶是具有WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的α-淀粉酶或与SEQ IDNO:12具有至少90％序列一致性的变体。优选的淀粉酶变体是在WO 01/66712中的SEQ IDNO:12的以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：R28、R118、N174；R181、G182、D183、G184、G186、W189、N195、M202、Y298、N299、K302、S303、N306、R310、N314；R320、H324、E345、Y396、R400、W439、R444、N445、K446、Q449、R458、N471、N484。特别优选的淀粉酶包括具有D183和G184的缺失并且具有取代R118K、N195F、R320K及R458K的变体，以及在选自下组的一个或多个位置中另外具有取代的变体：M9、G149、G182、G186、M202、T257、Y295、N299、M323、E345和A339，最优选的是在所有这些位置中另外具有取代的变体。

其他的实例是淀粉酶变体，例如在WO2011/098531、WO2013/001078和WO2013/001087中描述的那些。

可商购的淀粉酶是Duramyl^TM、Termamyl^TM、Fungamyl^TM、Stainzyme^TM、StainzymePlus^TM、Natalase^TM、Liquozyme X和BAN^TM(来自诺维信公司)，以及Rapidase^TM、Purastar^TM/Effectenz^TM、Powerase、Preferenz S1000、Preferenz S100和Preferenz S110(来自杰能科国际有限公司/杜邦公司(Genencor International Inc./DuPont))。

过氧化物酶/氧化酶

根据本发明的过氧化物酶是由如由国际生物化学与分子生物学联合会命名委员会(IUBMB)陈述的酶分类EC 1.11.1.7包括的过氧化物酶，或源自其中的展示出过氧化物酶活性的任何片段。

适合的过氧化物酶包括植物、细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。有用的过氧化物酶的实例包括来自拟鬼伞属，例如来自灰盖拟鬼伞(C.cinerea)的过氧化物酶(EP 179,486)，及其变体，如在WO 93/24618、WO 95/10602以及WO 98/15257中描述的那些。

根据本发明的过氧化物酶还包括卤代过氧化物酶，例如氯过氧化物酶、溴过氧化物酶以及展示出氯过氧化物酶或溴过氧化物酶活性的化合物。卤过氧化物酶依据它们对卤离子的特异性来分类。氯过氧化物酶(E.C.1.11.1.10)催化从氯根离子形成次氯酸盐。

在一个实施例中，本发明的卤代过氧化物酶是氯过氧化物酶。优选地，该卤代过氧化物酶是钒卤代过氧化物酶，即含钒酸盐的卤代过氧化物酶。在本发明的优选方法中，将含钒酸盐的卤代过氧化物酶与氯根离子来源组合。

已经从许多不同真菌，特别是从暗色丝孢菌(dematiaceous hyphomycete)真菌组中分离出了卤代过氧化物酶，如卡尔黑霉属(Caldariomyces)(例如，煤卡尔黑霉(C.fumago))、链格孢属、弯孢属(例如，疣枝弯孢(C.verruculosa)和不等弯孢(C.inaequalis))、内脐蠕孢属、细基格孢属以及葡萄孢属。

还已经从细菌，如假单胞菌属(例如，吡咯假单胞菌(P.pyrrocinia))和链霉菌属(例如，金色链霉菌(S.aureofaciens))中分离出了卤代过氧化物酶。

在一个优选实施例中，该卤代过氧化物酶可源自弯孢属，特别是疣枝弯孢(Curvularia verruculosa)或不等弯孢，例如如描述于WO 95/27046中的不等弯孢CBS102.42或描述于WO 97/04102中的疣枝弯孢CBS 147.63或疣枝弯孢CBS 444.70；或可源自如描述于WO 01/79459中的Drechslera hartlebii，如描述于WO 01/79458中的盐沼小树状霉(Dendryphiella salina)、如描述于WO 01/79461中的Phaeotrichoconis crotalarie或如描述于WO 01/79460中的Geniculosporium属。

根据本发明的氧化酶具体包括由酶分类EC 1.10.3.2囊括的任何漆酶或源自其中的展示出漆酶活性的片段、或展示出类似活性的化合物，例如儿茶酚氧化酶(EC1.10.3.1)、邻氨基苯酚氧化酶(EC 1.10.3.4)或胆红素氧化酶(EC 1.3.3.5)。

优选的漆酶是微生物来源的酶。这些酶可以源自植物、细菌或真菌(包括丝状真菌和酵母)。

来自真菌的适合实例包括可源自以下项的菌株的漆酶：曲霉属，脉孢菌属(例如，粗糙脉孢菌)，柄孢壳菌属，葡萄孢属，金钱菌属(Collybia)，层孔菌属(Fomes)，香菇属，侧耳属，栓菌属(例如，长绒毛栓菌和变色栓菌)，丝核菌属(例如，立枯丝核菌(R.solani))，拟鬼伞属(例如，灰盖拟鬼伞、毛头拟鬼伞(C.comatus)、弗瑞氏拟鬼伞(C.friesii)及C.plicatilis)，小脆柄菇属(Psathyrella)(例如，白黄小脆柄菇(P.condelleana))，斑褶菇属(例如，蝶形斑褶菇(P.papilionaceus))，毁丝霉属(例如，嗜热毁丝霉)，Schytalidium(例如，S.thermophilum)，多孔菌属(例如，P.pinsitus)，射脉菌属(例如，射脉侧菌(P.radiata))(WO 92/01046)或革盖菌属(例如，毛革盖菌(C.hirsutus))(JP 2238885)。

来自细菌的适合实例包括可源自芽孢杆菌属的菌株的漆酶。

优选的是源自拟鬼伞属或毁丝霉属的漆酶；特别是源自灰盖拟鬼伞的漆酶，如披露于WO 97/08325中；或源自嗜热毁丝霉，如披露于WO 95/33836中。

该一种或多种洗涤剂酶可以通过添加含有一种或多种酶的单独的添加剂，或通过添加包含所有这些酶的组合添加剂而被包括于洗涤剂组合物中。本发明的洗涤剂添加剂，即单独的或组合的添加剂，可以配制成例如颗粒、液体、浆液等，优选的洗涤剂添加剂剂型为颗粒，特别是无粉尘颗粒；液体，特别是稳定化液体；或者浆液。

无尘颗粒例如可以如在US 4,106,991和4,661,452中所披露的那样产生并且可以任选地通过本领域已知的方法包衣。蜡状包衣材料的实例是平均分子量为1000至20000的聚乙二醇(PEG)；具有从16至50个环氧乙烷单元的乙氧基化壬基酚；具有15个至80个环氧乙烷单元的乙氧基化脂肪族醇，其中醇包含12个至20个碳原子；脂肪醇；脂肪酸；以及脂肪酸的甘油单酯、甘油二酯、和甘油三酯。适用于通过流化床技术应用的成膜包衣材料的实例在GB 1483591中给出。液体酶制剂可以例如通过根据已确立的方法添加多元醇(例如丙二醇)、糖或糖醇、乳酸或硼酸而稳定化。受保护的酶可以根据EP 238,216中披露的方法来制备。

辅料

还可以利用本领域中已知的用于在洗衣洗涤剂中使用的任何洗涤剂组分。其他任选的洗涤剂组分包括防腐剂、防缩剂、抗污垢再沉积剂、抗皱剂、杀细菌剂、粘合剂、腐蚀抑制剂、崩解剂(disintegrant)/崩解试剂(disintegration agent)、染料、酶稳定剂(包括硼酸、硼酸盐、CMC和/或多元醇如丙二醇)、织物整理剂(包括粘土)、填充剂/加工助剂、荧光增白剂/光学增亮剂、增泡剂、泡沫(泡)调节剂、香料、污垢助悬剂、软化剂、抑泡剂、晦暗抑制剂以及芯吸剂，单独或组合使用。可以利用本领域中已知的用于在洗衣洗涤剂中使用的任何成分。此类成分的选择完全在技术人员的技术范围内。

分散剂

本发明的洗涤剂组合物还可以含有分散剂。具体而言，粉状洗涤剂可以包含分散剂。适合的水溶性有机材料包括均聚合或共聚合的酸或其盐，其中聚羧酸包含被不多于两个碳原子彼此分开的至少两个羧基。适合的分散剂例如描述于Powdered Detergent[粉末洗涤剂]，Surfactant Science Series[表面活性剂科学系列]，第71卷，马塞尔·德克尔公司(Marcel Dekker,Inc)。

染料转移抑制剂

本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种染料转移抑制剂。适合的聚合物染料转移抑制剂包括但不限于聚乙烯吡咯烷酮聚合物、多胺N-氧化物聚合物、N-乙烯吡咯烷酮与N-乙烯基咪唑的共聚物、聚乙烯噁唑烷酮以及聚乙烯咪唑或其混合物。当存在于主题组合物中时，染料转移抑制剂可以按组合物重量计的以下水平存在：从约0.0001％至约10％、从约0.01％至约5％或甚至从约0.1％至约3％。

荧光增白剂

本发明的洗涤剂组合物将优选地还包含另外的组分，这些组分可以给正在清洁的物品着色，如荧光增白剂或光学增亮剂。当存在时，该增亮剂优选以约0.01％至约0.5％的水平存在。在本发明的组合物中可以使用适合用于在衣物洗涤剂组合物中使用的任何荧光增白剂。最常用的荧光增白剂是属于以下类别的那些：二氨基芪-磺酸衍生物、二芳基吡唑啉衍生物和二苯基-联苯乙烯基衍生物。二氨基芪-磺酸衍生物类型的荧光增白剂的实例包括以下的钠盐：4,4’-双-(2-二乙醇氨基-4-苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2’-二磺酸盐、4,4’-双-(2,4-二苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2.2’-二磺酸盐、4,4’-双-(2-苯胺基-4-(N-甲基-N-2-羟基-乙基氨基)-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2’-二磺酸盐、4,4’-双-(4-苯基-1,2,3-三唑-2-基)芪-2,2’-二磺酸盐以及5-(2H-萘并[1,2-d][1,2,3]三唑-2-基)-2-[(E)-2-苯基乙烯基]苯磺酸钠。优选的荧光增白剂是可从汽巴–嘉基股份有限公司(Ciba-Geigy AG)(巴塞尔，瑞士)获得的天来宝(Tinopal)DMS和天来宝CBS。天来宝DMS是4,4’-双-(2-吗啉代-4-苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2’-二磺酸盐的二钠盐。天来宝CBS是2,2’-双-(苯基-苯乙烯基)-二磺酸盐的二钠盐。还优选荧光增白剂，是可商购的Parawhite KX，由派拉蒙矿物与化学(Paramount Minerals and Chemicals)，孟买，印度供应。适合用于本发明的其他荧光剂包括1-3-二芳基吡唑啉和7-氨烷基香豆素。

适合的荧光增亮剂水平包括从约0.01wt％、从0.05wt％、从约0.1wt％或甚至从约0.2wt％的较低水平至0.5wt％或甚至0.75wt％的较高水平。

污垢释放聚合物

本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种污垢释放聚合物，这些聚合物帮助从织物(如棉和基于聚酯的织物)去除污垢，特别是从基于聚酯的织物去除疏水性污垢。污垢释放聚合物可以例如是基于非离子型或阴离子型对苯二甲酸的聚合物、聚乙烯基己内酰胺和相关共聚物、乙烯基接枝共聚物、聚酯聚酰胺，参见例如Powdered Detergents[粉末洗涤剂]，Surfactant science series[表面活性剂科学系列]第71卷第7章，马塞尔·德克尔公司(Marcel Dekker，Inc.)。另一种类型的污垢释放聚合物是包含核心结构和附接至该核心结构的多个烷氧基化基团的两亲性烷氧基化油污清洁聚合物。核心结构可以包括聚烷基亚胺结构或聚烷醇胺结构，如WO 2009/087523中详细描述的(将其通过引用而特此结合)。此外，随机接枝共聚物是适合的污垢释放聚合物。适合的接枝共聚物更详细地描述于WO2007/138054、WO 2006/108856和WO 2006/113314中(将其通过引用而特此结合)。其他污垢释放聚合物是取代的多糖结构，尤其是取代的纤维素结构，如修饰的纤维素衍生物，如EP1867808或WO 2003/040279中描述的那些(将二者都通过引用特此结合)。适合的纤维素聚合物包括纤维素、纤维素醚、纤维素酯、纤维素酰胺及其混合物。适合的纤维素聚合物包括阴离子修饰的纤维素、非离子修饰的纤维素、阳离子修饰的纤维素、兼性离子修饰的纤维素及其混合物。适合的纤维素聚合物包括甲基纤维素、羧甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、酯羧甲基纤维素及其混合物。

抗再沉积剂

本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种抗再沉积剂，如羧甲基纤维素(CMC)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚氧乙烯和/或聚乙二醇(PEG)、丙烯酸的均聚物、丙烯酸和马来酸的共聚物、和乙氧基化的聚乙亚胺。在以上污垢释放聚合物下描述的基于纤维素的聚合物还可以用作抗再沉积剂。

流变改性剂

本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种流变改性剂、结构剂或增稠剂，不同于降粘剂。流变改性剂选自下组，该组由以下各项组成：非聚合物结晶、羟基功能材料、聚合物流变改性剂，它们为液体洗涤剂组合物的水性液相基质赋予剪切稀化特征。可以通过本领域已知的方法修饰和调整洗涤剂的流变学和粘度，例如如在EP2169040中所示。

其他适合的辅料包括但不限于防缩剂、抗皱剂、杀细菌剂、粘合剂、载体、染料、酶稳定剂、织物柔软剂、填充剂、泡沫调节剂、助水溶剂、香料、色素、抑泡剂、溶剂以及用于液体洗涤剂的结构剂和/或结构弹性剂。

洗涤剂产品的配制

本发明的洗涤剂组合物可以处于任何合宜的形式，例如，条，均质片剂，具有两个或更多个层的片剂，具有一个或多个隔室的袋，常规或压型粉末，颗粒，糊剂，凝胶或常规、压型或浓缩液体。

袋可以被配置为单个或多个的室。它可以具有适合保持该组合物的任何形式、形状和材料，例如在与水接触之前，不允许该组合物从袋中释放出来。该袋由水溶性薄膜制成，它包含了一个内部体积。所述内部体积可以分成袋的室。优选的膜是高分子材料，优选被制成膜或薄片的形式的聚合物。优选的聚合物、共聚物或其衍生物选自聚丙烯酸酯、和水溶性丙烯酸酯共聚物、甲基纤维素、羧甲基纤维素、糊精钠、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、麦芽糊精、聚甲基丙烯酸酯，最优选地是聚乙烯醇共聚物以及羟丙基甲基纤维素(HPMC)。优选地，聚合物在膜例如PVA中的水平是至少约60％。优选的平均分子量将典型地是约20,000至约150,000。膜还可以是共混组合物，该共混组合物包含可水解降解并且水可溶的聚合物共混物，如聚乳酸和聚乙烯醇(已知在贸易参考号M8630下，如由美国印第安纳州的MonoSol有限责任公司出售)加增塑剂，像甘油、乙二醇、丙二醇、山梨醇及其混合物。这些袋可以包含固体衣物清洁组合物或部分组分和/或液体清洁组合物或由水溶性膜分开的部分组分。用于液体组分的室在组成上可以与含有固体的室不同：US 2009/0011970A1。

可以由水可溶的袋中或片剂的不同层中的室来将洗涤剂成分物理地彼此分开。因此，可以避免组分间的不良的存储相互作用。在洗涤溶液中，每个室的不同溶解曲线还可以引起选择的组分的延迟溶解。

非单位剂量的液体或凝胶洗涤剂可以是水性的，典型地含有按重量计至少20％并且高达95％的水，如高达约70％的水、高达约65％的水、高达约55％的水、高达约45％的水、高达约35％的水。包括但不限于链烷醇、胺、二醇、醚以及多元醇的其他类型的液体可以被包括在水性液体或凝胶中。含水液体或凝胶洗涤剂可以含有从0-30％的有机溶剂。

液体或凝胶洗涤剂可以是非水性的。

洗衣皂条

可以将该洗涤剂组合物的角质酶和纤维素酶添加至洗衣皂条中并且用于手洗衣物、织物和/或纺织品。术语洗衣皂条包括衣物条、皂条、组合条(combo bar)、合成洗涤剂条以及洗涤剂条。条的类型通常区别在于它们含有的表面活性剂的类型，并且术语洗衣皂条包括含有来自脂肪酸的皂和/或合成皂的那些。洗衣皂条具有在室温下为固体而非液体、凝胶或粉末的物理形式。术语固体被定义为不随时间显著变化的物理形式，即如果固体物体(例如，洗衣皂条)被置于容器里，该固体物体不会为了填充其被放置的容器而发生改变。该条是固体时典型地是条的形式但也可能是其他的固体形状如圆形或椭圆。

该洗衣皂条可以含有一个或多个另外的酶、蛋白酶抑制剂如肽醛类(或次硫酸盐加合物或半缩醛加合物)、硼酸、硼酸盐、硼砂和/或苯基硼酸衍生物如4-甲酸基本硼酸、一个或多个皂或合成的表面活性剂、多元醇如甘油、pH控制化合物如脂肪酸、柠檬酸、乙酸和/或甲酸、和/或一价阳离子和有机阴离子的盐，其中该一价阳离子可以是例如Na⁺、K⁺或NH₄ ⁺并且该有机阴离子可以是例如甲酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐或乳酸盐，因此该一价阳离子和有机阴离子的盐可以是例如甲酸钠。

洗衣皂条还可以含有络合剂像EDTA和HEDP、香料和/或不同类型的填充剂、表面活性剂例如阴离子型合成表面活性剂、助洗剂、聚合的污垢释放剂、洗涤剂螯合剂、稳定剂、填充剂、染料、着色剂、染料转移抑制剂、烷氧基化的聚碳酸酯、抑泡剂、结构剂、粘合剂、浸出剂、漂白活化剂、粘土去污剂、抗再沉积剂、聚合分散剂、增亮剂、织物柔软剂、香料和/或本领域已知的其他化合物。

洗衣皂条可以在常规的洗衣皂条制造设备中进行加工，如但不限制于：混合器、压条机例如双级真空压条机、挤出机、切割机、标识压模机(logo-stamper)、冷却隧道以及包装机。本发明不局限于通过任何单一方法制备洗衣皂条。可以在过程的不同阶段向皂中添加本发明的预混料。例如，可以制备包含肥皂、酶共混物、任选地一种或多种另外的酶、蛋白酶抑制剂以及一价阳离子和有机阴离子的盐的预混料并且然后将该混合物压条。可以同时添加作为例如处于液态的蛋白酶抑制剂的酶的共混物以及任选的另外的酶。除了混合步骤和出条步骤，该工艺可以进一步包括以下步骤：研磨、挤出、切割、冲压、冷却和/或封装。

共颗粒中酶的配制品

本发明的酶用途可以被配制为颗粒，例如，配制为结合一种或多种酶的共颗粒。然后，每种酶将存在于多种颗粒中，这些颗粒确保酶在洗涤剂中的分布更均匀。这还减少了由于不同的粒度，不同酶的物理隔离。用于生产针对洗涤剂工业的多酶共颗粒的方法披露于IP.com公开内容IPCOM000200739D中。

通过使用共颗粒的酶的配制品的另一个实例披露于WO 2013/188331中，其涉及包括以下各项的洗涤剂组合物：(a)多酶共颗粒；(b)少于10wt沸石(无水基底)；和(c)少于10wt磷酸盐(无水基底)，其中所述酶共颗粒包含从10至98wt％的水分汇组分，并且该组合物另外还包含从20至80wt％的洗涤剂水分汇组分。WO 2013/188331还涉及处理和/或清洁表面的方法，优选织物表面，该方法包括以下步骤：(i)将所述表面与在含水洗液中如在此要求保护的并且描述的洗涤剂组合物接触，(ii)冲洗和/或干燥该表面。

该多酶共颗粒可以包含本发明的酶和(a)选自下组的一种或多种酶，该组由以下各项组成：首次洗涤脂肪酶、清洁纤维素酶、木葡聚糖酶、过水解酶、过氧化物酶、脂氧合酶、漆酶及其混合物；和(b)选自下组的一种或多种酶，该组由以下各项组成：半纤维素酶、蛋白酶、护理纤维素酶、纤维二糖脱氢酶、木聚糖酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶酸裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、木质酶、普鲁兰酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、地衣聚糖酶、葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、玻璃酸酶、软骨素酶、淀粉酶、及其混合物。

在以下各段中进一步概述本发明：

1.角质酶用于通过在洗衣过程中将纺织品暴露于该酶来防止绒毛和绒球的积累和/或从该纺织品上去除绒毛和绒球，或者用于改进该纺织品的白度的用途。

2.根据段落1所述的用途，其中将该纺织品在洗衣过程中的洗涤循环期间暴露于该角质酶。

3.根据段落1-2中任一项所述的用途，其中将该纺织品在洗衣过程中的冲洗循环期间暴露于该角质酶。

4.根据前述段落中任一项所述的用途，其中该洗衣过程在住宅洗衣过程、工业洗衣过程和机构洗衣过程中进行。

5.根据前述段落中任一项所述的用途，其中该洗衣过程进行至少5次。

6.根据前述段落所述的用途，其中该洗衣过程进行至少10次、至少15次或至少20次。

7.根据前述段落中任一项所述的用途，其中该纺织品包含聚酯。

8.根据段落6所述的用途，其中该纺织品进一步包含棉。

9.根据段落7所述的用途，其中该纺织品由聚酯组成。

10.根据前述段落中任一项所述的用途，其中该角质酶与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性。

11.根据段落10所述的用途，其中该角质酶是SEQ ID NO:1的变体，该变体包含对应于SEQ ID NO:1的氨基酸序列的位置A4、T29、A88、N91、A130、Q139、A161、T166、I169、L167、I178、R181、G182或R189的至少一个氨基酸残基的取代。

12.根据段落10所述的用途，其中该变体具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的以下改变T29M+A161L+T166I+L167P+R181P+G182*。

13.根据前述段落中任一项所述的用途，其中将该纺织品在洗衣过程期间进一步暴露于纤维素酶。

14.根据段落13所述的用途，其中该纤维素酶与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性。

15.根据段落13所述的用途，其中该纤维素酶与SEQ ID NO:3的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性。

16.一种用于湿洗纺织品的方法，该方法包括以下步骤：

a.使该纺织品与包含表面活性剂的洗液接触；

b.任选地将一种或多种洗涤剂组分添加到该洗液中；

c.完成至少一个洗涤循环；并且

d.任选地用水冲洗该纺织品，

其中角质酶应在至少一个洗涤循环或至少一个冲洗循环期间存在于该洗液或冲洗水中。

17.根据段落16所述的方法，其中该方法进行至少5次、至少10次、至少15次或至少20次。

18.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中该方法包括至少两个洗涤循环，其中至少一个洗涤循环是预洗涤循环，并且至少一个洗涤循环是主洗涤循环。

19.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中该角质酶在该预洗涤循环期间存在于该洗液中。

20.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中该角质酶在主洗涤循环期间存在于洗液中。

21.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中该角质酶在该冲洗循环期间存在于该冲洗水中。

22.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中该洗液的温度在15℃至90℃的范围内。

23.根据段落22所述的方法，其中该温度在15℃-60℃的范围内，例如约15℃、约20℃、约25℃、约30℃、约35℃、约40℃、约45℃、约50℃、约55℃或约60℃。

24.根据段落22所述的方法，其中该温度在65℃-90℃的范围内，例如约65℃、约70℃、约75℃、约80℃、约85℃或约90℃。

25.根据段落22所述的方法，其中该洗液的温度在40℃-60℃的范围内，例如在45℃-60℃的范围内，或在50℃-60℃的范围内。

26.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中该洗液的pH在7至13的范围内。

27.根据段落23所述的方法，其中该洗液的pH在8.5-13的范围内、9.5-13的范围内、10-13的范围内、10.5-13的范围内、11-13的范围内、11.5-13的范围内、12-13的范围内、或12.5-13的范围内。

28.根据段落23-24中任一项所述的方法，其中该洗液的pH通过添加氢氧化钠、氢氧化钾、偏硅酸钠或碳酸钠来调节。

29.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中与没有角质酶存在于该洗液中的类似洗涤相比，至少25％的绒球从该纺织品表面去除。

30.根据段落26所述的方法，其中与没有角质酶存在于该洗液中的类似洗涤相比，至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％的绒球从该表面去除。

31.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中该角质酶与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性。

32.根据段落31所述的方法，其中该角质酶是SEQ ID NO:1的变体，该变体包含对应于SEQ ID NO:1的氨基酸序列的位置A4、T29、A88、N91、A130、Q139、A161、T166、I169、L167、I178、R181、G182或R189的至少一个氨基酸残基的取代。

33.根据段落31-32中任一项所述的方法，其中该变体具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的以下改变T29M+A161L+T166I+L167P+R181P+G182*。

34.根据前述段落中任一项所述的方法，其中该洗液中的角质酶的浓度范围为0.001-200mg酶蛋白/L洗液。

35.根据前述方法段落中任一项所述的方法，其中该洗液进一步包含至少一种选自下组的酶，该组由以下各项组成：半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、果胶酶、甘露聚糖酶、裂解酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、聚戊糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、叶绿素酶、淀粉酶、过水解酶、过氧化物酶和黄原胶酶。

36.根据段落35所述的方法，其中该另外的酶是纤维素酶。

37.根据段落36所述的方法，其中该纤维素酶与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性。

38.根据段落36所述的用途，其中该纤维素酶与SEQ ID NO:3的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性。

39.一种包含角质酶、纤维素酶和表面活性剂的洗涤剂组合物，其中该角质酶与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性，并且其中该角质酶与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性或该角质酶与SEQ ID NO:3的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性。

40.根据段落39所述的组合物，其中该表面活性剂是选自下组的非离子表面活性剂，该组由以下各项组成：醇乙氧基化物(AE或AEO)、醇丙氧基化物、丙氧基化的脂肪醇(PFA)、烷氧基化的脂肪酸烷基酯(乙氧基化的和/或丙氧基化的脂肪酸烷基酯)、烷基酚乙氧基化物(APE)、壬基酚乙氧基化物(NPE)、烷基多糖苷(APG)、烷氧基化胺、脂肪酸单乙醇酰胺(FAM)、脂肪酸二乙醇酰胺(FADA)、乙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(EFAM)、丙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(PFAM)、多羟基烷基脂肪酸酰胺、或葡萄糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(葡糖酰胺(GA)、或脂肪酸葡糖酰胺(FAGA))。

实例

测定

测定I

用于评估角质酶活性的BETEB-琼脂板

BETEB被角质酶水解为更易溶的试剂。因此，在通过酶水解之后，在倾倒了琼脂和BETEB的混合物的板上存在透明区。

BETEB分子结构

BETEB的水解会产生

通过以下方法测量角质酶活性：

a)BETEB溶液制备：将5ml 100％乙醇添加到具有塞子的玻璃瓶中，将20mgBETEB添加到该乙醇中并且然后将该瓶置于60℃水浴以溶解该BETEB。

b)通过以下制备1.5％琼脂溶液：将0.75g琼脂添加到45ml Tris-HCl缓冲液(25mM,pH 7.0)中，并且然后将烘干器置于微波炉中加热两次持续30秒以溶解该琼脂。

c)将该琼脂溶液冷却至60℃并与步骤a中制备的BETEB溶液混合。将该混合物倾倒皮氏培养皿中。

d)用6mm直径的尖端或打孔器在该皮氏培养皿中挖小孔。

e)针对每个孔将30微克/ml的酶样品由带有75微升(ul)酶样品的尖端添加到皮氏培养皿中。将该皮氏培养皿置于37℃下过夜。

在孔周围的区域中角质酶变体显示透明区，因为BETEB被该角质酶水解。

酶

在这些实例中使用下列酶：

-角质酶：SEQ ID NO:1的角质酶，和

-角质酶变体：来自特异腐质霉的SEQ ID NO:1的角质酶变体，其在SEQ IDNO:1的亲本特异腐质霉角质酶上具有改变T29M+A161L+T166I+L167P+R181P+G182^*(该角质酶变体可以根据WO 2001/092502中所述的方法来生产)

实例1

通过在Miele Softtronic中使用测试小块布样评估抗起球洗涤性能

进行这一试验来评估洗涤剂组合物中角质酶的抗起球洗涤性能。

表1：洗涤剂组合物

洗涤剂	百分比
		LAS	7.20％
AEOS	4.20％
		AEO	6.50％
皂	5.50％
		其他
总计	100％

表2：酶

**EP＝酶蛋白

在相同的程序中，在每个pH下，洗涤预洗涤的聚酯纺织品(以除去可能的淀粉，PVA)，一种用角质酶/角质酶变体，一种不用角质酶/角质酶变体。将六个测试条件列于下表3中。每种条件洗涤20次，并且在连续洗涤期间，每完成五次重复洗涤，每种纺织品中的两个被取出一次。

表3：使用的四种不同洗涤条件的描述

将使用的3种测试小块布样(表4)中的每一种的八个附接至4条茶巾上，在每条茶巾上，每条茶巾上有2片每种小块布样并且总共有6片小块布样。将Miele洗涤机(Softtronic W5841)装载Ballast(棉80％T恤，20％床单)，并添加具有测试的白色小块布样的四条茶巾。洗涤滚筒中的总填充是4kg。对于正常程序，启动机器并且按正常运行-这总计进行20次。对于酶程序，将该酶作为洗涤成分(0.43g/kg干纺织品)直接添加到洗涤滚筒中，于是启动机器-这也总计进行了20次。

表4：用于抗起球评估的小块布样

小块布样	片数
		机织聚酯(100％)(WFK 30A)	8
针织短纤维聚酯(100％)	8
		机织短纤维聚酯(100％)	8

洗涤后，将茶巾挂干，并继续下一轮重复洗涤。5次重复完成后，从每种条件中取出1条茶巾；另外3条茶巾继续添加到下面的洗涤中；10次重复完成后，再取出1条茶巾；另外2条茶巾继续添加到下面的洗涤中；15次重复完成后，再取出1条茶巾；最后一条茶巾继续添加到下面的洗涤中；20次重复完成后，从这些茶巾上扯下干燥的小块布样，并且由一组经训练的测试人员对抗起球效果进行小组评估，参见表5。

结果清楚地表明，酶溶液能够通过在洗涤期间裂解掉由穿着、撕扯和洗涤形成的绒毛和绒球并防止新的绒球形成而使纺织品表面保持为新的。机织聚酯(100％)(WFK30A)和机织短纤维聚酯(100％)显示出比针织短纤维聚酯(100％)更好的抗起球性能。

表5：来自对抗起球效果的小组评估的评分*

^*6名经训练的测试人员，每人可给出每种纺织品3张投票。应根据绒球数量和绒球大小，通过使用空白@pH 8作为参考给出投票。前三栏进行平行评分；并且最后一栏的评分以空白@pH 10作为参照进行。

分数0：与参考相同

分数1：稍好

分数2：中等较好

分数3：显著更好

分数-1：稍差

分数-2：中等较差

分数-3：显著更差

测量抗起球洗涤性能

还测量了WFK 30A小块样本以支持使用小组评分测试获得的结果。使用来自威力瓦有限公司(VeriVide Limited)(莱斯特，LE19 4SG英国)的Digieye测量绒球的数量。结果可见于下表6中。

表6：在WFK 30A小块布样上测量的绒球^*

^*Digieye，威力瓦有限公司(莱斯特，LE19 4SG英国)

在两种pH下，清楚地看到当不添加角质酶时，随着不断洗涤绒球的数量增加，结束时为71-77个绒球。然而，使用相同的洗涤方法，但包括角质酶，则限制了绒球的形成。这在pH 10时可见最佳效果，在pH 10下随着不断洗涤绒球的数量保持在低至14-25个。

实例2

通过在Miele Softtronic中使用测试小块布样评估复原洗涤性能

进行这一试验来评估角质酶的复原效果。

洗涤剂组合物组分：

使用的所有洗涤剂组合物组分都是实例1中表1中所定义的洗涤剂。

表7：酶

**EP＝酶蛋白

在两个pH下在相同的程序中洗涤预洗涤的和打磨的聚酯纺织品(以除去可能的淀粉，PVA)。在每个pH下，一种条件用角质酶/角质酶变体，一种条件不用角质酶/角质酶变体。四个测试条件列于上表3中。每种条件洗涤20次，并且在连续洗涤期间，一旦每完成五次重复，每种纺织品中的两个被取出。

将使用的3种测试小块布样(与实例1表4中使用相同数量和种类的小块布样，但这些小块布样由Nu Martindale(系列号403/97/2050)以2000自旋逐一进行打磨(NuMartindale由James H Heal有限公司(James H Heal&Co,LTD)，英国生产))中的每一种的八个附接至4条茶巾上，每条茶巾一种，每条茶巾上有2片每种小块布样并且总共有6片小块布样。将Miele机器(Softtronic W5841)装载Ballast(棉80％T恤，20％床单)，并添加具有测试的白色小块布样的四条茶巾。洗涤滚筒中的总填充是4kg。对于正常程序，启动机器并且按正常运行-这总计进行20次。对于酶程序，将该酶作为洗涤成分(0.43g/kg干纺织品)直接添加到洗涤滚筒中，于是启动机器-这也总计进行了20次。

洗涤后，将茶巾挂干，并继续下一轮重复洗涤。5次重复完成后，从每种条件中取出1条茶巾；另外3条茶巾继续添加到下面的洗涤中；10次重复完成后，再取出1条茶巾；另外2条茶巾继续添加到下面的洗涤中；15次重复完成后，再取出1条茶巾；最后一条茶巾继续添加到下面的洗涤中；20次重复完成后，从这些茶巾上扯下干燥的小块布样，并且由一组经训练的测试人员对抗起球效果进行小组评估，参见表9。

结果清楚地表明，酶溶液能够通过在pH 8和pH 10下去除随时间形成的绒毛和绒球来使纺织品复原。机织聚酯(100％)(WFK 30A)和机织短纤维聚酯(100％)显示出比针织短纤维聚酯(100％)更好的复原。

表9：来自对去除绒毛和绒球(复原)的小组评估的评分^*

^*6名经训练的测试人员，每人可给出每种纺织品3张投票。应根据绒球数量和绒球大小，通过使用空白@pH 8作为参考给出投票。前三栏进行平行评分；并且最后一栏的评分以空白@pH 10作为参照进行。

分数0：与参考相同

分数1：稍好

分数2：中等较好

分数3：显著更好

分数-1：稍差

分数-2：中等较差

分数-3：显著更差

实例3

对在Miele Softtronic中在具有色小块布样的洗涤试验中由于使用角质酶变体的减少的起球造成的色彩亮度评估

在与实例1中所述的pH＝10试验相同的新洗涤试验中，使用角质酶变体来研究在色彩亮度/色彩清晰度方面减少的起球对有色小块布样的影响。

在试验中，包括了针织和机织的不同有色小块布样，以及丝绒小块布样。此外，包括了无色的WFK 30A作为用于防起球的对照。使用的小块布样列于下表10中。

无色WFK 30A小块布样的结果与实例1中所述的相似，即与不用角质酶变体进行的洗涤相比，当用角质酶变体进行洗涤时具有明显的抗起球效果。在所有有色小块布样(除了丝绒型之外)上都看到类似的抗起球效果。对于丝绒型，当用/不用角质酶变体洗涤时，没有差异可见。除了在有色小块布样上观察到的抗起球效果之外，具有减少的起球的小块布样似乎具有更明亮的色彩，尤其是在红色小块布样和黑色机织小块布样上可见。因此，在绒球和色彩方面，用角质酶变体洗涤的有色聚酯纺织品会显得更明亮并且看起来很新持续更长久。

序列表

<110> 诺维信公司

<120> 洗衣方法

<130> 13272-WO-PCT

<160> 3

<170> PatentIn版本3.5

<210> 1

<211> 194

<212> PRT

<213> 特异腐质霉

<400> 1

Gln Leu Gly Ala Ile Gln Asn Asp Leu Glu Ser Gly Ser Pro Asp Ala

1 5 10 15

Cys Pro Asp Ala Ile Leu Ile Phe Ala Arg Gly Ser Thr Glu Pro Gly

20 25 30

Asn Met Gly Ile Thr Val Gly Pro Ala Leu Ala Asn Gly Leu Lys Glu

35 40 45

His Ile Pro Asn Ile Trp Ile Gln Gly Val Gly Gly Pro Tyr Asp Ala

50 55 60

Ala Leu Ala Thr Asn Phe Leu Pro Arg Gly Thr Ser Gln Ala Asn Ile

65 70 75 80

Asp Glu Gly Lys Arg Leu Phe His Leu Ala His Gln Lys Cys Pro Asn

85 90 95

Thr Pro Val Val Ala Gly Gly Tyr Ser Gln Gly Ala Ala Leu Ile Ala

100 105 110

Ala Ala Val Ser Glu Leu Ser Gly Ala Val Lys Glu Gln Val Lys Gly

115 120 125

Val Val Leu Phe Gly Tyr Thr Gln Asn Leu Gln Asn Arg Gly Gly Ile

130 135 140

Pro Asn Tyr Pro Arg Glu Arg Thr Lys Val Phe Cys Asn Val Gly Asp

145 150 155 160

Ala Val Cys Thr Gly Thr Leu Ile Ile Thr Pro Ala His Leu Ser Tyr

165 170 175

Thr Ile Gln Ala Arg Gly Glu Ala Ala Arg Phe Leu Val Asp Arg Ile

180 185 190

Arg Ala

<210> 2

<211> 305

<212> PRT

<213> 特异腐质霉

<400> 2

Met Arg Ser Ser Pro Leu Leu Arg Ser Ala Val Val Ala Ala Leu Pro

1 5 10 15

Val Leu Ala Leu Ala Ala Asp Gly Arg Ser Thr Arg Tyr Trp Asp Cys

20 25 30

Cys Lys Pro Ser Cys Gly Trp Ala Lys Lys Ala Pro Val Asn Gln Pro

35 40 45

Val Phe Ser Cys Asn Ala Asn Phe Gln Arg Ile Thr Asp Phe Asp Ala

50 55 60

Lys Ser Gly Cys Glu Pro Gly Gly Val Ala Tyr Ser Cys Ala Asp Gln

65 70 75 80

Thr Pro Trp Ala Val Asn Asp Asp Phe Ala Leu Gly Phe Ala Ala Thr

85 90 95

Ser Ile Ala Gly Ser Asn Glu Ala Gly Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Glu

100 105 110

Leu Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Lys Met Val Val Gln

115 120 125

Ser Thr Ser Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn His Phe Asp Leu Asn

130 135 140

Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asp Gly Cys Thr Pro Gln Phe

145 150 155 160

Gly Gly Leu Pro Gly Gln Arg Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Arg Asn Glu

165 170 175

Cys Asp Arg Phe Pro Asp Ala Leu Lys Pro Gly Cys Tyr Trp Arg Phe

180 185 190

Asp Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Ser Phe Ser Phe Arg Gln Val

195 200 205

Gln Cys Pro Ala Glu Leu Val Ala Arg Thr Gly Cys Arg Arg Asn Asp

210 215 220

Asp Gly Asn Phe Pro Ala Val Gln Ile Pro Ser Ser Ser Thr Ser Ser

225 230 235 240

Pro Val Asn Gln Pro Thr Ser Thr Ser Thr Thr Ser Thr Ser Thr Thr

245 250 255

Ser Ser Pro Pro Val Gln Pro Thr Thr Pro Ser Gly Cys Thr Ala Glu

260 265 270

Arg Trp Ala Gln Cys Gly Gly Asn Gly Trp Ser Gly Cys Thr Thr Cys

275 280 285

Val Ala Gly Ser Thr Cys Thr Lys Ile Asn Asp Trp Tyr His Gln Cys

290 295 300

Leu

305

<210> 3

<211> 435

<212> PRT

<213> 特异腐质霉

<400> 3

Met Ala Arg Gly Thr Ala Leu Leu Gly Leu Thr Ala Leu Leu Leu Gly

1 5 10 15

Leu Val Asn Gly Gln Lys Pro Gly Glu Thr Lys Glu Val His Pro Gln

20 25 30

Leu Thr Thr Phe Arg Cys Thr Lys Arg Gly Gly Cys Lys Pro Ala Thr

35 40 45

Asn Phe Ile Val Leu Asp Ser Leu Ser His Pro Ile His Arg Ala Glu

50 55 60

Gly Leu Gly Pro Gly Gly Cys Gly Asp Trp Gly Asn Pro Pro Pro Lys

65 70 75 80

Asp Val Cys Pro Asp Val Glu Ser Cys Ala Lys Asn Cys Ile Met Glu

85 90 95

Gly Ile Pro Asp Tyr Ser Gln Tyr Gly Val Thr Thr Asn Gly Thr Ser

100 105 110

Leu Arg Leu Gln His Ile Leu Pro Asp Gly Arg Val Pro Ser Pro Arg

115 120 125

Val Tyr Leu Leu Asp Lys Thr Lys Arg Arg Tyr Glu Met Leu His Leu

130 135 140

Thr Gly Phe Glu Phe Thr Phe Asp Val Asp Ala Thr Lys Leu Pro Cys

145 150 155 160

Gly Met Asn Ser Ala Leu Tyr Leu Ser Glu Met His Pro Thr Gly Ala

165 170 175

Lys Ser Lys Tyr Asn Pro Gly Gly Ala Tyr Tyr Gly Thr Gly Tyr Cys

180 185 190

Asp Ala Gln Cys Phe Val Thr Pro Phe Ile Asn Gly Leu Gly Asn Ile

195 200 205

Glu Gly Lys Gly Ser Cys Cys Asn Glu Met Asp Ile Trp Glu Ala Asn

210 215 220

Ser Arg Ala Ser His Val Ala Pro His Thr Cys Asn Lys Lys Gly Leu

225 230 235 240

Tyr Leu Cys Glu Gly Glu Glu Cys Ala Phe Glu Gly Val Cys Asp Lys

245 250 255

Asn Gly Cys Gly Trp Asn Asn Tyr Arg Val Asn Val Thr Asp Tyr Tyr

260 265 270

Gly Arg Gly Glu Glu Phe Lys Val Asn Thr Leu Lys Pro Phe Thr Val

275 280 285

Val Thr Gln Phe Leu Ala Asn Arg Arg Gly Lys Leu Glu Lys Ile His

290 295 300

Arg Phe Tyr Val Gln Asp Gly Lys Val Ile Glu Ser Phe Tyr Thr Asn

305 310 315 320

Lys Glu Gly Val Pro Tyr Thr Asn Met Ile Asp Asp Glu Phe Cys Glu

325 330 335

Ala Thr Gly Ser Arg Lys Tyr Met Glu Leu Gly Ala Thr Gln Gly Met

340 345 350

Gly Glu Ala Leu Thr Arg Gly Met Val Leu Ala Met Ser Ile Trp Trp

355 360 365

Asp Gln Gly Gly Asn Met Glu Trp Leu Asp His Gly Glu Ala Gly Pro

370 375 380

Cys Ala Lys Gly Glu Gly Ala Pro Ser Asn Ile Val Gln Val Glu Pro

385 390 395 400

Phe Pro Glu Val Thr Tyr Thr Asn Leu Arg Trp Gly Glu Ile Gly Ser

405 410 415

Thr Tyr Gln Glu Val Gln Lys Pro Lys Pro Lys Pro Gly His Gly Pro

420 425 430

Arg Ser Asp

435

Claims (15)

1.角质酶用于通过在洗衣过程中将纺织品暴露于该酶来防止绒毛和绒球的积累和/或从该纺织品上去除绒毛和绒球，或者用于改进该纺织品的白度的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其中将该纺织品在洗衣过程中的洗涤循环期间暴露于该角质酶。

3.根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中该洗衣过程在住宅洗衣过程、工业洗衣过程和机构洗衣过程中进行。

4.根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中该洗衣过程进行至少5次。

5.根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中该角质酶与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性。

6.一种用于湿洗纺织品的方法，该方法包括以下步骤：

a.使该纺织品与包含表面活性剂的洗液接触；

b.任选地将一种或多种洗涤剂组分添加到该洗液中；

c.完成至少一个洗涤循环；并且

d.任选地用水冲洗该纺织品，

其中角质酶应在至少一个洗涤循环或至少一个冲洗循环期间存在于该洗液或冲洗水中。

7.根据权利要求6所述的方法，其中该方法进行至少5次、至少10次、至少15次或至少20次。

8.根据前述方法权利要求中任一项所述的方法，其中该方法包括至少两个洗涤循环，其中至少一个洗涤循环是预洗涤循环，并且至少一个洗涤循环是主洗涤循环。

9.根据前述方法权利要求中任一项所述的方法，其中该角质酶在该预洗涤循环期间存在于该洗液中。

10.根据前述方法权利要求中任一项所述的方法，其中该角质酶在主洗涤循环期间存在于洗液中。

11.根据前述方法权利要求中任一项所述的方法，其中该角质酶在该冲洗循环期间存在于该冲洗水中。

12.根据前述方法权利要求中任一项所述的方法，其中该洗液的温度在15℃至90℃的范围内。

13.根据前述方法权利要求中任一项所述的方法，其中该洗液的pH在7至13的范围内。

14.根据前述方法权利要求中任一项所述的方法，其中该洗液进一步包含至少一种选自下组的酶，该组由以下各项组成：半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、果胶酶、甘露聚糖酶、裂解酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、聚戊糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、叶绿素酶、淀粉酶、过水解酶、过氧化物酶和黄原胶酶。

15.一种包含角质酶、纤维素酶和表面活性剂的洗涤剂组合物，其中该角质酶与SEQ IDNO:1的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性，并且其中该角质酶与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性或该角质酶与SEQ ID NO:3的氨基酸序列具有至少70％、75％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％一致性。