CN108135880A - 用于治疗神经退化性疾病的方法及组成物 - Google Patents

Abstract

本发明揭露一种治疗神经退化性疾病的方法。所述方法包含向一对象施用一治疗有效量的一趋化因子受体CXCR4拮抗剂及一乳酸盐或/及锌。本发明也揭露多种用于治疗神经退化性疾病的套件。

Description

用于治疗神经退化性疾病的方法及组成物

技术领域及背景技术

本发明在一些实施方案中是有关于用于治疗神经退化性疾病的方法及组成物，并且更具体地用于治疗肌萎缩性侧索硬化症。

肌萎缩性侧索硬化症(ALS)是成人运动神经元(MN)退化最常见及最具侵略性的形式。这种神经退化性疾病的病理生理学复杂，包含胆碱能缺陷、谷氨酸兴奋毒性(glutamateexcitatoxicity)、神经炎症、免疫调节异常、葡萄糖代谢障碍及血液中枢神经系统屏障(B-CNS-B)破坏。

星形细胞被认为在肌萎缩性侧索硬化症(ALS)的病理过程中起主要作用，并且是运动神经元死亡的实质性贡献者。星形胶质细胞的异常，如星形胶质细胞谷氨酸的释放及摄取预示疾病的临床症状的变化(Vargas等人，2010)。

趋化因子受体，包含G蛋白耦联受体CXCR4，在神经元及神经胶质细胞中广泛表现。CXCR4的配体，趋化因子基质衍生因子1(SDF-1)，也被称为CXCL12，引起谷氨酸释放，藉此调节神经元功能或细胞雕亡。作用机制包含增加细胞内Ca²⁺浓度，刺激细胞外信号相关的激酶，并从星形胶质细胞及小胶质细胞表面释放TNFα(Allen等人，2001)。

AMD3100(1,1’-[1,4-亚苯基双(亚甲基)]双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷)是一双环拉类(bicyclam)分子，特定地且可逆地阻断SDF-1键结到CXCR4。已显示AMD3100将来自骨髓(BM)的造血干细胞及祖细胞(HSPCs)快速移动到小鼠、非人灵长类动物及人类的血液中。如在偏瘫小鼠中观察到的，经由AMD3100破坏CXCR4信号传导被认为抑制移植的神经元干细胞/祖细胞的迁移活性(Arimitsu等人，2012)。在2008年，AMD3100获得FDA核准用于在接受自体移植的非霍奇金淋巴瘤及多发性骨髓瘤患者中HSPC结合粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的运用(Pusic等人，2010)。

AMD3100的另一个基本上的临床特征是通过调节血浆SDF-1水平促进CXCR4+VEGFR1+细胞的运用，表明AMD3100在促血管生成细胞的招募及在血管再生的限度上起着调节的作用(Petit等人，2007)，对于中枢神经系统(CNS)神经元的维持及功能是重要的。

在ALS患者及表达ALS相关连的超氧化物歧化酶1(SOD1)的突变改变的啮齿类动物中，据报道由血脑屏障(BBB)、血-脊髓屏障(BSCB)及血-脑脊液屏障(BCSFB)组成的血-中枢神经系统屏障(B-CNS-B)，正如从内皮细胞之间各种紧密连接蛋白(包含ZO-1，封闭蛋白(occluding)及水闸蛋白-5(claudin-5))水平的降低所表明的。微血管系统中紧密连接蛋白的封闭蛋白及ZO-1的丢失也被证明是由各种细胞因子介导的，如单核细胞趋化蛋白-1(MCP1)、TNF-α、IL-1β及IFN-γ。紧密连接蛋白的减少，导致释放伴有神经毒性的血红蛋白衍生物的微出血、微循环减少及灌注不足。SOD1突变体被提出介导内皮损伤，甚至在运动神经元死亡及缺氧及炎症导致BSCB通透性增加及破坏之前。早期运动神经元功能障碍及损伤显示出与BSCB破坏程度成正比，并且发现BSCB完整性的早期保护延迟运动神经元损伤及退化的发作。总之，在老鼠身上的这些发现表明BSCB障碍在早期疾病发病机制中起作用且恢复BSCB的完整性可以阻碍疾病进程。

另外的背景技术包含在PCT专利申请案公开第WO2015/031722号及Bridger等人，1995，药物化学杂志，20；38(2)：366-78。

发明内容

根据本发明的一些实施例的一个方面，提供了一种一种治疗有需要的一对象的一神经退化性疾病的方法，所述的方法包含：向所述对象施用一治疗有效量的一趋化因子受体CXCR4拮抗剂及一乳酸盐，藉此治疗所述神经退化性疾病。

根据本发明的一些实施例的一个方面，提供了一种治疗有需要的一对象的一神经退化性疾病的方法，所述的方法包含：在所述神经退化性疾病不是肌萎缩性侧索硬化症的一条件下，向所述对象施用一治疗有效量的AMD3100及锌，藉此治疗所述神经退化性疾病。

根据本发明的一些实施例的一个方面，提供了一种用于治疗一神经退化性疾病的套件，所述套件包含一趋化因子受体CXCR4拮抗剂及一乳酸盐。

根据本发明的一些实施例的一个方面，提供了一种用于治疗一神经退化性疾病的趋化因子受体CXCR4拮抗剂及乳酸盐。

根据本发明的一些实施例的一个方面，提供了一种在所述神经退化性疾病不是肌萎缩性侧索硬化症的一条件下用于治疗一神经退化性疾病的AMD3100及锌。

根据本发明的一些实施例，所述神经退化性疾病选自由以下组成的群组：肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、帕金森氏病(PD)、阿尔茨海默症(AD)、亨汀顿氏舞蹈症、多发性硬化症(MS)、库兹菲德-雅各氏症(CJD)、癫痫、中风、自身免疫性脑脊髓炎、糖尿病性神经病变及青光眼性神经病变。

根据本发明的一些实施例，所述神经退化性疾病是肌萎缩性侧索硬化症。

根据本发明的一些实施例，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂选自由以下组成的群组：AMD3100(普乐沙福)、BKT140、TN14003、CTCE-9908、KRH-2731、TC14012、KRH-3955及AMD070。

根据本发明的一些实施例，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂是AMD3100。

根据本发明的一些实施例，所述乳酸盐与所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂系为同时施用。

根据本发明的一些实施例，所述乳酸盐在所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂施用之前或之后施用。

根据本发明的一些实施例，AMD3100的一剂量小于240微克/千克。

根据本发明的一些实施例，AMD3100的一剂量介于0.1至500微克/千克之间。

根据本发明的一些实施例，AMD3100的一剂量介于10至150微克/千克之间。

根据本发明的一些实施例，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂是经由皮下施用。

根据本发明的一些实施例，所述方法更包含：对所述对象施用锌。

根据本发明的一些实施例，AMD3100与锌复合。

根据本发明的一些实施例，所述神经退化性疾病选自由以下组成的群组：帕金森氏病、阿尔茨海默症、亨汀顿氏舞蹈症、多发性硬化症、库兹菲德-雅各氏症、癫痫、中风、自身免疫性脑脊髓炎、糖尿病性神经病变及青光眼性神经病变。

根据本发明的一些实施例，所述神经退化性疾病是肌萎缩性侧索硬化症。

根据本发明的一些实施例，所述锌与所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂系为同时施用。

根据本发明的一些实施例，锌在所述施用之前先与AMD3100复合。

根据本发明的一些实施例，锌在AMD3100施用之前或之后施用。

根据本发明的一些实施例，所述方法更包含：对所述对象施用一乳酸盐。

根据本发明的一些实施例，AMD3100的一剂量小于240微克/千克。

根据本发明的一些实施例，AMD3100的一剂量介于0.1至500微克/千克之间。

根据本发明的一些实施例，AMD3100的一剂量介于10至150微克/千克之间。

根据本发明的一些实施例，AMD3100是经由皮下施用。

根据本发明的一些实施例，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂为AMD3100。

根据本发明的一些实施例，AMD3100与锌复合。

根据本发明的一些实施例，所述套件更包含锌。

根据本发明的一些实施例，所述神经退化性疾病选自由以下组成的群组：肌萎缩性侧索硬化症、帕金森氏病、阿尔茨海默症、亨汀顿氏舞蹈症、多发性硬化症、库兹菲德-雅各氏症、癫痫、中风、自身免疫性脑脊髓炎、糖尿病性神经病变及青光眼性神经病变。

除非另外定义，否则本文使用的所有技术及/或科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。尽管在本发明的实施例的实践或测试中可以使用与本文所述的方法及材料类似或等同的方法及材料，但是下面描述示例性的方法及/或材料。如果发生冲突，将验证包含定义在内的专利说明。另外，这些材料，方法及示例仅是说明性的，并非意在限制。

附图说明

这里仅通过举例的方式参照附图来描述本发明的一些实施例。现在具体参照附图详细说明，应该强调的是，所示出的细节是作为示例并且出于对本发明的实施例的说明性讨论的目的。就此而言，对于本领域技术人员来说，利用附图进行的描述对于可以如何实施本发明的实施例是明白易懂的。

在附图中：

图1是下列磷酸盐缓冲盐水(PBS)；5毫克/千克的AMD3100；5毫克/千克的AMD3100+896的毫克/千克的乳酸盐；896毫克/千克的乳酸盐的各种治疗后50日龄的雌性SOD1-G93A小鼠的存活率图。PBS治疗存活的中位数为131天；5毫克/千克的AMD3100治疗存活的中位数为144天；5毫克/千克的AMD3100+896毫克/千克的乳酸盐治疗存活的中位数为141天；896毫克/千克的乳酸盐的中位数为148天。根据雌性小鼠的生存情况，可以得出结论，用5毫克/千克的AMD3100+896毫克/千克的乳酸盐治疗的小鼠中50％的寿命延长到最小138天龄及最大149天龄。(由曼特尔-考克斯检验(Mantel-Cox test)执行的P值<0.0001)。根据存活的概率，用5毫克/千克的AMD3100+896毫克/千克的乳酸盐治疗的小鼠的存活概率100％仅在第138天开始死亡，而所有PBS小鼠这个时期已死亡。

图2是示出在50日龄的雌性SOD1-G93A小鼠中进行下列5毫克/千克的AMD3100；PBS；5毫克/千克的AMD3100+896毫克/千克的乳酸盐；896毫克/千克的乳酸盐的各种治疗后的体重变化的图。

图3是示出在50日龄的雌性SOD1-G93A小鼠中进行下列5毫克/千克的AMD3100；PBS；5毫克/千克的AMD3100+896毫克/千克的乳酸盐；896毫克/千克的乳酸盐的各种治疗后运动功能变化的图。

图4A至图4B示出在50日龄的雌性SOD1-G93A小鼠中5毫克/千克的AMD3100治疗后单羧酸转运蛋白1(MCT1)水平的变化。图4A显示了脊髓中MCT1水平的增加。图4B显示了肌肉中的MCT1水平。对照组设置为100％。结果为平均值±平均值标准误(S.E.M)，T检验；*P<0.05。

图5示出在50日龄的SOD1-G93A小鼠的雌性同窝小鼠中，5毫克/千克的AMD3100治疗后的MCT1水平变化与5毫克/千克的AMD3100+896毫克/千克的乳酸盐治疗后的MCT1水平变化。在50天龄开始用5毫克/千克的AMD3100治疗的SOD1-G93A小鼠的雌性同窝小鼠与未治疗的小鼠相比显示MCT1水平显着增加。

图6A至图6B示出在50日龄的SOD1-G93A小鼠的雌性小鼠中，5毫克/千克的AMD3100治疗后相对于5毫克/千克的AMD3100+896毫克/千克的乳酸盐治疗后髓磷脂结合蛋白(MBP)及β-分泌酶1(BACE1)的变化。图6A显示MBP水平。图6B显示BACE1水平。结果是平均值±S.E.M.，T检验；*P<0.05。

图7A至图7B示出在50日龄的SOD1-G93A小鼠的雌性小鼠中，5毫克/千克的AMD3100治疗后相对于5毫克/千克的AMD3100+896毫克/千克的乳酸盐治疗后的星形胶质细胞活化的变化。图7A显示胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平。图7B显示了钙结合蛋白(S100B)水平。结果是平均值±S.E.M.，T检验；*P<0.05。

图8A至图8B示出在50日龄的SOD1-G93A小鼠的雌性小鼠中，5毫克/千克的AMD3100治疗后与5毫克/千克的AMD3100+896毫克/千克的乳酸盐治疗后的小神经胶质细胞反应性的变化。图8A显示离子化钙结合衔接分子1(Iba-1)水平。图8B显示白细胞介素6(IL-6)水平。结果是平均值±S.E.M.，T检验；*P<0.05。

图9是在50日龄的雌性SOD1-G93A小鼠中用0.25毫克/千克的AMD3100+0.08毫克/千克的锌治疗后或用0.125毫克/千克的AMD3100+0.04毫克/千克的锌治疗后的存活率图。PBS；5毫克/千克的AMD3100；0.25毫克/千克的AMD3100+0.08毫克/千克的锌；0.125毫克/千克的AMD3100+0.04毫克/千克的锌。PBS治疗存活的中位数为131天；5毫克/千克的AMD3100治疗存活的中位数为144天；0.25毫克/千克的AMD3100+0.08毫克/千克的锌治疗存活的中位数为是143天；0.125毫克/千克的AMD3100+0.04毫克/千克的锌治疗存活的中位数是148天。(由Mantel-Cox测试执行的P值<0.0001)。根据存活的概率，用AMD3100-锌治疗的小鼠存活率100％仅在141天后开始死亡，而所有PBS小鼠在这个时期已死亡。

图10是表示在50日龄的雌性SOD1-G93A小鼠进行5毫克/千克的AMD3100；PBS；0.25毫克/千克的AMD3100+0.08毫克/千克的锌的各种治疗后的体重变化的图。

图11是示出在50日龄的雌性SOD1-G93A小鼠中进行PBS；5毫克/千克的AMD3100；0.25毫克/千克的AMD3100+0.08毫克/千克的锌的各种治疗后运动功能变化的图。

图12是在50日龄的雄性SOD1-G93A小鼠中进行PBS；5毫克/千克的AMD3100；0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌+896毫克/千克的乳酸盐各种治疗后的存活率图。PBS治疗存活的中位数为126天；5毫克/千克的AMD3100治疗存活的中位数为140天；5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌+896毫克/千克的乳酸盐治疗存活的中位数为145天。根据所述生存曲线，与单独使用5毫克/千克的AMD3100治疗相比，使用0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌+896毫克/千克的乳酸盐组的存活延长5天，并且与PBS相比延长19天(由Mantel-Cox测试执行的P值<0.0001)。

图13A至图13B示出在50日龄的SOD1-G93A小鼠的雌性小鼠中用5毫克/千克的AMD3100治疗后与0.25毫克/千克的AMD3100+0.08毫克/千克的锌治疗后的炎症变化。图13A显示GFAP水平。图13B显示Iba-1水平。结果是平均值±S.E.M.，T检验；*P<0.05。

图14A至图14B是在50日龄的雄性及雌性SOD1-G93A小鼠中用PBS；5毫克/千克AMD3100；0.125毫克/千克AMD3100+0.04毫克/千克锌+896毫克/千克乳酸盐的各种治疗后小鼠的存活率曲线。图14A，雌性PBS治疗存活的中位数为131天；雌性5毫克/千克AMD3100治疗存活的中位数为144天；雌性0.125毫克/千克AMD3100+0.04毫克/千克的锌+896毫克/千克的乳酸盐治疗存活的中位数为144天。图14B，雄性PBS治疗存活的中位数为132天；雄性5毫克/千克的AMD3100治疗存活的中位数为140天；雄性0.125毫克/千克的AMD3100+0.04毫克/千克的锌+896毫克/千克的乳酸盐治疗存活的中位数为151天。(由Mantel-Cox测试执行的P值<0.0001)。

图15A至图15B是示出用PBS；0.5毫克/千克的AMD3100(AMD)；0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌(AMD+锌)；0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌+896毫克/千克的乳酸盐(AMD+复合物)治疗后的雌性三重转基因AD(3xTg-AD)小鼠中Y迷宫结果的柱状图。A.进入新异臂的频率。B.花在新异臂的时间。

图16A至图16B是示出用PBS；0.5毫克/千克的AMD3100(AMD)；0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌(AMD+锌)；0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌+896毫克/千克的乳酸盐治疗后的3xTg-AD小鼠的配对螺旋丝(PHF-1)及单羧酸转运蛋白(MCT-1)结果变化的柱状图。A(AMD+复合体)。A.仅与AMD相比，PHF-1的减少在AMD+锌及AMD+复合物中显着。B.观察到在MCT-1有增加的趋势，但没有统计学意义。结果是平均值±S.E.M.，T检验；*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。

图17A至图17B是示出在髓磷脂结合蛋白(MBP)同种型中变化的柱状图。用PBS；0.5毫克/千克的AMD3100(AMD)；0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌(AMD+锌)；0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌+896毫克/千克的乳酸盐治疗后的3xTg-AD小鼠的结果。A(AMD+复合体)。A.增加MBP-23kDa同种型。B.增加MBP-18kDa同种型。结果是平均值±S.E.M.，T检验；*p<0.05，**p<0.01。

图18是示出胆碱乙酰转移酶(ChAT)变化的柱状图。用PBS；0.5毫克/千克的AMD3100(AMD)；0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌(AMD+锌)；0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌+896毫克/千克的乳酸盐治疗后的3xTg-AD小鼠的结果。仅在AMD+锌及AMD+复合治疗组中，ChAT的增加具有统计学显着性。结果是平均值±S.E.M.，T检验；**P<0.01。

图19是示出通过酶联免疫分析(ELISA)的Aβ分子变化的柱状图。用PBS；0.5毫克/千克的AMD3100(AMD)；0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌(AMD+锌)；0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌+896毫克/千克的乳酸盐治疗后的3xTg-AD小鼠的结果。在AMD及AMD+复合物治疗组中，Aβ分子的减少在膜体碎片(membrane fraction)中具有统计学显着性。结果是平均值±S.E.M.，T检验；**P<0.01。

具体实施方案

本发明在一些实施方案中是有关于用于治疗神经退化性疾病的方法及组成物，并且更具体地用于治疗肌萎缩性侧索硬化症。

在详细解释本发明的至少一个实施方案之前，应该理解的是，本发明的应用并不一定限于以下描述中阐述的细节或实施例所例举的细节。本发明能够具有其他实施例或以各种方式实践或执行。

响应于趋化因子CXCL12结合的信号传导会引发免疫细胞的迁移及包含T细胞及单核细胞在内的免疫细胞募集到脑中，以及神经元及少突胶质前体细胞的迁移。

先前已显示趋化因子受体CXCR4拮抗剂(AMD3100)显着增加SOD1-G93A转基因小鼠(肌萎缩性侧索硬化症(ALS)的动物模型)的存活并且进一步延迟疾病发作并改善他们的运动功能。此外，AMD3100显示出对血-脊髓屏障(BSCB)完整性的恢复、髓鞘再生标志物增加及炎症减轻具有有益作用。

本发明的发明人现在已经显示锌及乳酸盐都增强了AMD3100对SOD1-G93A转基因小鼠的治疗效果。更具体地，显示AMD3100及锌的复合物显着增加小鼠体重(图10)并改善小鼠运动功能(图11)，并且显示AMD3100及乳酸盐的混合物延迟疾病发作导致统计显着滞后在小鼠开始死亡的时间(图1)。AMD3100，锌及乳酸盐的组合显示具有协同效应(图14)。

在进一步减少本发明的实施的同时，本发明的发明人表明AMD3100及锌的复合物对治疗另一种神经退化性疾病-阿尔茨海默症也具有有益作用(图15A至图15B)。

因此，根据本发明的第一方面，提供了一种治疗有需要的一对象的一神经退化性疾病的方法，其特征在于，所述的方法包含：向所述对象施用一治疗有效量的一趋化因子受体CXCR4拮抗剂及一乳酸盐，藉此治疗所述神经退化性疾病。

如本文所用，术语“神经退化性疾病”是指以神经元功能丧失、结构及/或神经元死亡为特征的病症。神经退化性疾病的示例包含但不限于亚历山大症、阿尔珀氏病、阿尔茨海默症、肌萎缩性侧索硬化症、共济失调毛细血管扩张症、巴滕病(也称为Spielmeyer-Vogt-Sjogren-Batten病)、牛海绵状脑病(BSE)、卡纳万病、科凯恩综合征、皮质基底节变性、克雅氏病、亨廷顿病、HIV相关性痴呆、肯尼迪氏病、克拉伯病、路易体痴呆、马查多-约瑟夫病(脊髓小脑性共济失调型3)、多发性硬化症、多系统萎缩症、神经疏螺旋体病、帕金森氏症、慢性儿童型脑硬化症(Pelizaeus-Merzbacher氏病)、皮克病、原发性侧索硬化症、朊病毒病、瑞福森氏疾病、山德霍夫氏病、希尔德病、脐带次级急性联合变性有害的贫血症、精神分裂症、Spielmeyer-Vogt-Sjogren-Batten病(也称为巴滕病)、脊髓小脑失调症(多种类型，各种特征)、脊髓性肌肉萎缩症、进行性上眼神经核麻痹症(Steele-Richardson-Olszewski症)及运动性共济失调。

根据一个具体实施方案，所述神经退化性疾病是一运动神经元疾病。

术语“运动神经元疾病(moto neuron disease或motoneuron disease)”包含以运动神经元(神经元是结合形成神经的基本神经细胞)进行性退化为特征的一组神经系统的严重疾病。运动神经元控制肌肉的行为。运动神经元疾病可能会影响多个上部运动神经元，即从大脑到达髓质(脑干的一部分)或脊髓或下部运动神经元的神经，从脊髓到身体肌肉的神经，或两者。痉挛及夸张的反射表明上运动神经元的损伤。失去神经供应的肌肉进行性削瘦(萎缩)及虚弱表示下运动神经元的损伤。运动神经元疾病的示例包含但不限于：进行性延髓麻痹、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、脊髓性肌萎缩症、库格勃-韦兰德综合症(Kugelberg-Welander Syndrome)、卢·贾里格症(Lou Gehrig disease)、杜兴氏瘫痪、沃德尼格·霍夫曼病(Werdnig-Hoffmann Disease)、少年型脊髓性肌萎缩、良性局部肌萎缩及小儿脊髓性肌萎缩。

如本文所用，术语“趋化因子受体CXCR4拮抗剂”是指能够阻断基质细胞衍生因子-1(SDF1)与趋化因子受体CXCR4结合的药剂。

在一个实施方案中，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂是一种抗CXCR4抗体。

在一个实施方案中，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂是一种趋化因子CXCL12类似物。CTCE-9908及CTCE-0214分别是具有抑制性及激动剂活性的趋化因子CXCL12的胜肽类似物。

在另一个实施方案中，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂是一种胜肽。示例性胜肽拮抗剂包含LY2510924(Galsky等人，临床癌症研究，2014年7月1日，20，3581)、T22、T134、T140、TN14003及TC14012(如Burger等人，白血病期刊(2009)23,43-52)。其他胜肽拮抗剂由Portella等人，PLoS One期刊，2013；8(9)：e74548。

在另一个实施方案中，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂是非胜肽拮抗剂，例如双环拉类AMD3100。

在进一步优选地的实施方案中，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂是BMS-936564/MDX-1338、LY2510924、1,1'-[1,4-亚苯基双(亚甲基)]双[1,4，8,11-四氮杂环十四烷](AMD3100；普乐沙福)、N，N-二丙基-N-[4-({[(1H-咪唑-2-基)甲基)苄基][(1-甲基-1H-咪唑-2-基)甲基]氨基]甲基)苄基]-N-甲基丁烷-1,4-二胺三(2R，3R)-酒石酸盐(KRH-3955)、([5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2-({甲基[(8＞＞S)-5,6,7,8-四氢-8-喹啉基]氨基}甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基]甲醇)(GSK812397)、或N-(1H-苯并咪唑-2-基甲基)-N'-(5,6,7,8-四氢喹啉-8-基)丁烷-1,4-二胺(AMD11070)。

所述乳酸盐可以是一乳酸盐类或乳酸。

术语“乳酸”是指乳酸盐的酸形式，即2-羟基丙酸。

乳酸盐的盐类或离解形式在本文中具体地称为“乳酸盐类”，例如乳酸的钠盐(或钙盐)或乳酸钠(或乳酸钙)。

在一个实施方案中，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂在所述乳酸盐施用之前施用。

在另一个实施方案中，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂在所述乳酸盐施用之后施用。在另一个实施方案中，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂与所述乳酸盐系为同时施用。

本发明的所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂及所述乳酸盐通常以组合的数量以实现治疗及/或预防的有效性。此数量显然将取决于选择使用的特定化合物、其他治疗方式的性质及数量、待治疗或预防的病症、对象的种类、年龄、性别、体重、健康及预后、给药方式、目标有效性、停留时间、间距模式、所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂的副作用的类型及严重程度以及许多其他因素，这些因素对于在本领域中技术人员来说是明白易懂的。

在一个实施方案中，所述乳酸盐通常以其正常最小治疗剂量的10％及其最大正常治疗剂量的200％之间的水平使用。更优选地，此范围将是其正常最小剂量的25％至正常最大剂量的90％。

在一个优选地实施方案中，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂的量低于当用作单一治疗时治疗或预防有效性所需的最小剂量(例如10％至99％，优选地25％至75％的最小剂量)。这可以减少由所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂引起的副作用，但是由于与所述乳酸盐结合，所述组合整体是有效的，因此此疗法是有效的。

因此，例如如果所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂是AMD3100，则剂量优选地小于500微克/千克，例如0.1至200微克/千克之间或0.1至200微克/千克之间，或者在10至150微克/千克之间，或者在20至100微克/千克之间。

所述乳酸盐通常地以0.1毫摩尔/毫升至10毫摩尔/毫升的乳酸盐溶液的输液提供(例如500毫升或1000毫升)，更优选地为0.1毫摩尔/毫升至1毫摩尔/毫升的溶液(例如约0.5毫摩尔/毫升或0.6毫摩尔/毫升)。一个示例性乳酸盐的剂量在100毫克/千克至10,000毫克/千克之间，更优选地在100毫克/千克至2000毫克/千克之间，500毫克/千克至1000毫克/千克之间。

在本发明的一个优选地方面，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂及所述乳酸盐在剂量方面具有协同作用。也就是说所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂提供的效应大于预期所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂及所述乳酸盐单独使用时相加的效应。在另一个但同样优选地的实施方案中，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂及所述乳酸盐在其副作用方面是协同的。也就是说，所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂与所述乳酸盐组合引起的副作用小于通过当所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂或所述乳酸盐单独使用提供等效治疗效果时预期的副作用。

所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂与所述乳酸盐一起可以与另外的药剂一起施用以增强它们的治疗效果。在一个实施方案中，所述另外的药剂是锌。锌可以作为单独独立存在物施用，或者在所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂是AMD3100的情况下，一锌螯合剂，锌可以与AMD3100复合。

根据本发明的另一方面，提供了一种治疗有需要的一对象的一神经退化性疾病的方法，所述的方法包含：向所述对象施用一治疗有效量的AMD3100及锌，藉此治疗所述神经退化性疾病。

在一个实施方案中，本发明此方面的锌以一盐类的形式提供。

根据一个实施方案，AMD3100在锌施用之前施用。在另一个实施方案中，AMD3100在锌施用之后施用。

在又一个实施方案中，AMD3100与所述乳酸盐同时施用。在此实施方案中，AMD3100可以作为与锌的复合物施用。

为了制备AMD3100及锌的一复合物，通常两者可以以约1：1至1:10的摩尔比组合，更优选地以1:1至1:5之间的摩尔比结合，例如以约1：2的比例。由于AMD3100是锌的天然螯合剂，因此会产生一复合物。

AMD3100及锌通常是以组合数量提供以实现治疗及/或预防有效性。这数量显然将取决于选择使用的特定化合物、其他治疗方式的性质及数量、待治疗或预防的病症、对象的种类、年龄、性别、体重、健康及预后、给药方式、目标有效性、停留时间、间距模式、AMD3100副作用的类型及严重程度以及本领域技术人员明白易懂的许多其他因素。

锌通常以其正常最小治疗剂量的10％及其最大正常治疗剂量的200％之间的水平使用。更优选地，这个范围将是正常最小剂量的25％到正常最大剂量的90％。

锌的量通常在0.1至100微克/千克之间，更优选地在约0.1至10微克/千克之间。

在一个优选地的实施方案中，AMD3100的量低于当作为单一疗法使用时治疗或预防有效性所需的最小剂量(例如10％至99％，优选地最小剂量的25％至75％)。这样可以减少AMD3100引起的副作用，但是因为与锌结合使用这种治疗表现是有效的，所述多个组合总体上是有效的。

因此，例如AMD3100的剂量优选地小于500微克/千克，更优选地小于240微克/千克，例如0.1至200微克/千克之间或10至150微克/千克之间。可将所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂(例如AMD3100)、乳酸盐及/或锌本身施用于生物体，作为单一药物组成物或作为多个单独药物组成物，其中它们与合适的载体或赋形剂。

如本文所用，“药物组成物”是指本文所述的一种或多种活性成分与其他化学组分(例如生理上合适的载体及赋形剂)的制剂。一药物组成物的目的是使化合物向生物体的施用便利。

本文中术语“活性成分”是指所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂/锌/乳酸盐对生物效应的重要因素。

在下文中，可互换使用的短语“生理上可接受的载体”及“药学上可接受的载体”是指一载体或稀释剂不会对一生物体造成显着刺激并且不会消除所施用的化合物的生物活性及性质。这些短语中包含一佐剂。

本文术语“赋形剂”是指一种惰性物质加入到药物组成物中以进一步促进给药的一活性成分。多个赋形剂非限制性地示例包含碳酸钙、磷酸钙、各种糖及各种淀粉、多种纤维素衍生物、明胶、多种植物油及聚乙二醇。

用于制备及施用药物的技术可以在“雷明顿药物科学”，麦克出版公司，伊斯顿，宾夕法尼亚州，最新版中找到，其通过引用并入本文。

合适的给药途径可以，例如，包含口服、直肠给药、粘膜给药，尤其是经鼻、肠道或非肠道递送，及包含肌内、皮下及髓内注射以及鞘内给药、直接心室内给药、心内给药，例如进入右心室或左心室腔、进入普通冠状动脉、静脉内、腹膜内、鼻内或眼内注射。

根据一个具体实施方案，当所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂是AMD3100时，给药途径是皮下给药。

用于向中枢神经系统(CNS)递送药物的常规方法包含：神经外科措施(例如脑内注射或脑室内输液)；试剂的分子操作法(例如，所述嵌合融合蛋白包含对与内皮细胞表面分子具有亲及力的转运肽，与本身不能穿过血脑屏障(BBB)的试剂组合)，试图利用BBB的内源性运输途径之一；旨在增加药剂的脂溶性的药理学措施(例如，将水溶性试剂与脂质或胆固醇载体缀合)；以及通过高渗透破坏导致BBB完整性的暂时性破坏(由甘露醇溶液注入颈动脉或使用生物活性剂如血管紧张素胜肽产生)。但是，这些措施都有局限性，如与侵入性外科手术程序相关的固有风险，由于内源性运输系统固有的限制施加的尺寸限制，潜在与全身施用由载体图案组成的嵌合分子相关的不良生物副作用，这可能在中枢神经系统以外是活跃的，以及BBB被破坏的大脑区域内可能存在脑损伤的风险，使得其是不理想的递送方法。

替代地，可以以局部而非全身的方式施用药物组成物，例如通过将药物组成物直接注射到患者的组织区域中。

术语“组织”是指由设计用于执行一个或多个功能的细胞组成的生物体的一部分。示例包含但不限于脑组织、视网膜、皮肤组织、肝组织、胰腺组织、骨、软骨、结缔组织、血液组织、肌肉组织、心脏组织、血管组织、血管组织、肺组织、性腺组织、造血组织。

根据特定的实施方案，所述多种药剂的至少一种施用到所述对象的肌肉中。

本发明一些实施方案的多个药物组成物可以通过本领域公知的方法制备，例如通过常规混合、溶解、制粒、糖衣丸制造、研磨、乳化、囊封、包封或冻干方法。

因此，根据本发明的一些实施方案使用的多个药物组成物可以以常规方式使用一种或多种生理上可接受的载体配制，所述载体包含赋形剂及助剂，其有助于将活性成分加工成可药用的多个制剂。适当的配方取决于所选的给药途径。

用于注射，所述药物组成物的活性成分可以配制在多种水溶液中，优选地在生理相容的缓冲液中，例如汉克氏液(Hank’s solution)，林格氏溶液或生理盐缓冲液中。对于粘膜给药，在配方中使用适合渗透屏障的渗透剂。这种渗透剂在本领域中通常是已知的。

对于口服给药，药物组成物可以通过将活性化合物与本领域公知的药学上可接受的载体组合而容易地配制。此类载体使得药物组成物能够配制成用于由患者口服摄入的片剂、丸剂、糖锭剂、胶囊剂、液体剂、凝胶剂、糖浆剂、浆剂、混悬剂等。口服使用的药理学制剂可以使用固体赋形剂制备，任选地研磨所得的混合物，并且在加入合适的助剂(如果需要)后加工颗粒混合物以获得片剂或糖衣丸核心。合适的赋形剂是(特别是填充剂)例如糖，包含乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇；纤维素制剂，例如玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠；及/或生理学上可接受的聚合物如聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要，可以加入崩解剂，如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐类如海藻酸钠。

糖衣核心提供多种合适的涂层。为此目的，多种浓缩糖溶液可以使用任选地含有阿拉伯树胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡波普凝胶、聚乙二醇、二氧化钛、漆溶液及合适的有机溶剂或溶剂混合物。可以将多种染料或颜料加入片剂或糖衣丸包衣中以识别或表征活性化合物剂量的不同组合。

可以口服使用的药物组成物包含由明胶制成的推合(push-fit)胶囊以及由明胶及增塑剂(如甘油或山梨糖醇)制成的软、密封的胶囊。所述推合胶囊可含有所述活性成分与填充剂(如乳糖，粘合剂如淀粉，润滑剂如滑石或硬脂酸镁)混合，及任选地多种稳定剂。在多种软胶囊中，所述活性成分可以溶解或悬浮在合适的液体中，例如脂肪油、液体石蜡或液态聚乙二醇。另外，可以加入多种稳定剂。所有用于口服给药的配方应该是在剂量上适合于所选择的给药途径。

对于口腔给药，所述多种组成物可以采取以常规方式配制的片剂或锭剂的形式。

对于经由鼻吸入给药，根据本发明的一些实施方案使用的活性成分便利地以加压包装或喷雾器的气溶胶喷雾形式递送，以合适的推进剂使用，例如二氯二氟甲烷，三氯氟甲烷，二氯-四氟乙烷或二氧化碳。在加压气雾剂的情况下，剂量单位可以通过提供一阀以递送一计量来决定。胶囊及药筒(例如用于一分配器中的明胶)可以配制成含有化合物及合适的粉末基质(如乳糖或淀粉)的粉末混合物。

本文所述的药物组成物可以配制成用于肠胃外给药，例如通过一次全剂量注射(bolus injection)或连续输液。用于注射的多种配方可以以单位剂量形式呈现，例如安瓿或多剂量容器中，具有任选地添加防腐剂。所述多种组成物可以是在油性或水性载体中的悬浮液、溶液或乳液，并且可以含有配制剂如悬浮剂、稳定剂及/或分散剂。

用于肠胃外给药的多种药物组成物包含以水溶性形式的活性制剂水溶液。另外，多种活性成分的悬浮液可以制备成合适的油性或水性基底的注射悬浮液。合适的亲脂性溶剂或载体包含脂肪油(如芝麻油)，或合成脂肪酸酯(如油酸乙酯、甘油三酯或脂质体)。水状注射悬浮剂可含有增加悬浮液黏滞性的物质，如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇或葡聚糖。

任选地，所述悬浮液还可以含有合适的稳定剂或增加活性成分的溶解度作用剂以允许制备高度浓缩的溶液。

替代地，所述活性成分可以是粉末形式，用于在使用前用合适的载体(如无菌无热原的水性基底溶液)进行配制。

本发明一些实施方案的所述药物组成物还可以配制成直肠组成物(如栓剂或保留灌肠剂)，使用例如常规的栓剂基质(如可可脂或其他甘油酯)。

适用于本发明一些实施方案内文中的多种药物组成物包含其中含有有效量的多种活性成分以达到预期目的的组成物。

在治疗有效量的决定完全在本领域技术人员的能力范围内，特别是根据本文提供的详细揭露内容。

对于本发明方法中使用的任何制剂，治疗上有效量或剂量可以初始从体外及细胞培养测定估计。例如，可以在动物模型中配制剂量以达到期望的浓度或效价。这样的信息可以用来更准确地确定人体中有用的剂量。

本文所述的活性成分的毒性及治疗功效可以通过体外、细胞培养物或实验动物中的标准药物程序来确定。从这些体外及细胞培养测定以及动物研究中获得的数据可以用于配制用于使用在人类的剂量范围。所述剂量可以根据使用的剂型及使用的给药途径而变化。确切的剂型、给药途径及剂量可以由个别的医生根据患者的状况来选择。(参见例如，Fingl等人,1975年,“治疗学的药理学基础”，第1章第1页)。

可以单独调整剂量及时间间隔以确保活性成分的肌肉或大脑水平足以诱导或抑制生物效应(最小有效浓度，MEC)。MEC将随每种制剂变化，但可以从体外数据中估算。必须达到MEC的剂量取决于个体特征及给药途径。检测测定可用于确定血浆浓度。

取决于待治疗病症的严重性及反应性，剂量可以是单次或多次给药，治疗过程持续数日至数周或直至治愈或达到疾病状态的减轻。

当然，待施用的组成物的量将取决于所治疗的对象、痛苦的严重程度、施用方式、处方医师的判断等。

如果需要，本发明的一些实施方案的组成物可以存在于包装或分配装置中，例如FDA批准的套件，其可以包含含有活性成分的一种或多种单位剂量形式。

因此，例如所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂(例如AMD3100)可以与锌或所述乳酸盐中的任一种或两种一起提供在多个套件中。

所述包装可以例如包含金属或塑料箔，例如吸塑包装。所述包装或分配器装置可伴有给药说明。所述包装或分配器还可以伴有与所述容器相关联由政府机构明订规范制造、使用或销售药物的形式的告示，此告示反映机构对所述组成物的形式或人类或兽医管理的批准。例如，这种告示可以是由美国食品及药物管理局批准用于处方药或经批准的产品说明书的标签。如上面进一步详述，多个组成物包含配制在相容的药物载体中的本发明制剂也可以制备、放置在合适的容器中，并标记用于治疗指定的病症。

预计在本发明申请到成为专利的到期的有效期间，将开发许多相关的趋化因子受体CXCR4拮抗剂，并且所述术语趋化因子受体CXCR4拮抗剂的范围意在预先包含所有这些新技术。

如本文所使用的，术语“约(about)”是指±10％。

术语“包含(comprises,comprising,includes,including)”，“具有(having)”及其结合词意味着“包含但不限于”。

术语“由......组成(consisting of)”是指“包含并限于”。

术语“基本上由......组成(consisting essentially of)”是指组成物、方法或结构可以包含附加的成分、步骤及/或部分，但只有当作附加成分、步骤及/或部分不会实质上改变权利要求的组成物、方法或结构的基本及新颖特征。

如本文所使用的，除非上下文另外清楚地指出，否则单数形式“一(a,an)”，及“所述(the)”包含复数形式，除非上下文另有明确指出。例如，术语“一种化合物”或“至少一种化合物”可以包含多种化合物，包含所述化合物的混合物。

贯穿整个申请中，本发明的各种实施例可以以范围的形式呈现。应该理解的是，范围形式的描述仅仅是为了方便及简洁，不应该被解释为对本发明范围缺乏弹性的限制。因此，范围的描述应该被认为是具体公开了所有可能的子范围以及在所述范围内的单个数值。例如，从1到6范围的描述应该被认为具有特定公开的子范围，例如从1到3、1到4、1到5、2到4、2到6、3到6等，以及在所述范围内的个别数字，例如1、2、3、4、5及6。无论所述范围的广度如何，这都适用。

应该认识到，为了清楚起见，在分开的多个实施例的上下文中描述的本发明的某些特征也可以在单个实施例中组合提供。相反地，为了简洁起见，在单个实施例的上下文中描述的本发明的各种特征也可以单独地或以任何合适的子组合或者在本发明的任何其他描述的实施例中合适地提供。在各种实施例的上下文中描述的某些特征不被认为是那些实施例的基本特征，除非该实施例在没有那些元件的情况下不起作用。

本发明的各种实施例及方面如上文所描述的以及如权利要求部分所要求保护的在以下实施例中找到实验支持。

实施例

现在参考以下实施例，其连同以上描述以非限制性方式说明了本发明的一些实施方案。

通常，本文使用的命名法及本发明中使用的实验室程序包含分子生物化学、微生物学及重组DNA技术。这些技术在文献中有充分的描述。例如参见，“分子克隆：实验室手册”,Sambrook等人,(1989)；“分子生物学最新方案,卷I-III,Ausubel,R.M.编辑(1994)；Ausubel等人,“分子生物学最新方案”,约翰威立出版社,巴尔的摩,马里兰(1989)；Perbal,“分子克隆实用指南”,约翰威立出版社,纽约(1988)；Watson等人,“重组DNA”,科学美国图书,纽约；Birren等人编辑“基因组分析：实验室手册”,卷1-4,冷泉港实验室出版社,纽约(1998)；如在美国专利第5,511,621号中所述的方法美国专利号4,666,828；4,683,202；4801531；5,192,659及5,272,057；“细胞生物学：实验室手册”,卷I-III,Cellis,J.E.编辑(1994)；Freshney期刊,Wiley-Liss出版分社,纽约(1994),第三版,“动物细胞的培养-基本技术手册”“现今免疫学实验方案”卷I-III Coligan J.E.编辑(1994)；Stites等人编辑,“基础临床免疫学”(第8版),Appleton&Lange出版社,诺沃克,康涅狄格州(1994)；Mishell及Shiigi编辑,“细胞免疫学中的选择方法”,W.H.Freeman公司,纽约(1980)；可用的免疫测定在专利及科学文献中有广泛的描述，美国专利第3,791,932号；第3839153号；第3,850,752号；第3850578号；第3853987号；第3867517号；第3879262号；第3901654号；第3935074号；第3984533号；第3,996,345号；第4034074号；第4098876号；第4879219号；第5,011,771及5,281,521号；“寡核苷酸合成”,Gait,M.J.编辑(1984)；“核酸杂交”,Hames,BD及HigginsSJ编辑(1985)；“转录及翻译”,Hames,BD及Higgins SJ编辑(1984)；“动物细胞培养”,Freshney,RI编辑(1986)；“细胞及酶的固定化”IRL出版社,(1986)；“分子克隆实用指南”,Perbal,B.,(1984)及“酶学的方法”,卷1-317,学术出版社；“PCR协议：方法及应用指南”,学术出版社,圣地亚哥,加州(1990)；Marshak等人,“蛋白质纯化及表征策略-实验课程手册”,CSHL出版社(1996)；所有这些都通过引入其中的过程被认为是本领域公知的，并且为了读者的方便而提供，其中包含的所有信息通过引用并入本文。

实施例1

以AMD3100及乳酸盐治疗ALS

实验建制：将50日龄雌性SOD1-G93A小鼠单独用5毫克/千克的AMD3100，每周两次单独用896毫克/千克的L-乳酸钠或用5毫克/千克mM的AMD3100及896毫克/千克的L-乳酸钠，从50天龄开始(对于ALS)，直至死亡。所有治疗均皮下施用。在各种治疗之后，每周一次称重小鼠并每周一次测试运动功能。时间记录直到死亡。

结果：联合治疗表明增加存活、体重及运动功能，除了导致直到死亡的时间滞后外，还表现出协同效应。100％的小鼠对治疗有反应(图1至图3)。此外，在SOD1-G93A小鼠及其同窝小鼠中单独用5毫克/千克的AMD3100治疗显示MCT1水平增加，提供了乳酸盐及AMD3100的协同效应的阐述(图4及5)。

图6A至图6B分别示出了在50日龄SOD1-G93A小鼠的雌性小鼠中，在5毫克/千克的AMD3100治疗后与5毫克/千克的AMD3100+896毫克/千克的乳酸盐治疗后MBP及BACE1的变化。图7A至图7B示出了在50日龄SOD1-G93A小鼠的雌性小鼠中，在5毫克/千克的AMD3100治疗后相对于5毫克/千克的AMD3100+896毫克/千克的乳酸盐治疗后，星形胶质细胞激活的变化。具体而言，图7A显示GFAP水平，图7B显示S100B水平。图8A至图8B示出在50日龄SOD1-G93A小鼠的雌性小鼠中，在5毫克/千克的AMD3100治疗后相对于5毫克/千克的AMD3100+896毫克/千克的乳酸盐治疗后的小神经胶质细胞反应性变化。具体而言，图8A显示Iba-1水平，而图8B显示IL-6水平。

实施例2

以AMD3100及锌治疗ALS

实验建制：一周两次用5毫克/千克的AMD3100或用0.25毫克/千克的AMD3100+0.08毫克/千克的锌的一复合物或用0.125毫克/千克的AMD3100+0.04毫克/千克的锌单独治疗50日龄雌性SOD1-G93A小鼠，从50日龄开始直到死亡。所有治疗均皮下施用。在各种治疗之后，每周一次称重小鼠并每周一次测试运动功能。时间记录直到死亡。

结果：所述复合物通过增加存活率、体重及特别是运动功能显示出的有益效果(图9至图12)。图13A至图13B示出在50日龄SOD1-G93A小鼠的雌性小鼠中，在5毫克/千克的AMD3100治疗之后的炎症变化与0.25毫克/千克的AMD3100+0.08毫克/千克的锌治疗之后的变化。具体而言，图13A示出GFAP水平，而图13B示出Iba-1水平。

实施例3

以AMD3100-锌及乳酸盐治疗ALS

实验建制：一周两次用5毫克/千克的AMD3100单独治疗或用0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌+896毫克/千克的乳酸盐的复合物治疗50日龄雄性SOD1-G93A小鼠，开始在50日龄，直到死亡。所有治疗均皮下施用。时间记录直到死亡。

结果：与PBS相比，所述复合物通过增加存活率显示出有益效果，与PBS相比为19天，并且与单独使用5毫克/千克的AMD3100相比为5天(图14)。

实施例4

以AMD3100-锌(及乳酸盐)治疗阿尔茨海默症

实验建制：每周一次用PBS或0.5毫克/千克的AMD3100或0.5毫克/千克的AMD3100，0.17毫克/千克的锌或0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌+896毫克/千克的乳酸盐治疗9月龄的3xTg-AD小鼠。所有治疗均皮下施用。治疗3个月后，将所有小鼠进行Y迷宫测试以评估其认知功能。每只小鼠允许探索Y迷宫的两个臂5分钟，再休息5分钟，然后探索Y迷宫的所有3个臂再另外5分钟。

结果：雌性3xTg-Ad小鼠用0.5毫克/千克的AMD3100，0.17毫克/千克的锌或0.5毫克/千克的AMD3100+0.17毫克/千克的锌+896毫克/千克的乳酸盐治疗显示其认知功能的改善(图15A至图15B)。图16A至图16B是显示3xTg-AD小鼠的PHF-1及MCT-1的结果变化柱状图。具体而言，图16A示出与仅使用AMD相比，PHF-1的减少在AMD+锌及AMD+复合物中显着。图16B显示观察到在MCT-1增加的趋势，虽然它没有统计学显着性。图17A至图17B是示出髓磷脂结合蛋白(MBP)同种型变化的柱状图。具体而言，图17A示出了MBP-23kDa同种型的增加，而图17B示出了MBP-18kDa同种型的增加。图18是示出ChAT变化的柱状图。仅在AMD+锌及AMD+复合治疗组中，ChAT的增加具有统计学显着性。图19是显示通过ELISA的Aβ分子变化的柱状图。膜体碎片中AMD及AMD+复合物治疗组中Aβ分子的减少具有统计学显着性。

尽管已经结合其具体实施例描述了本发明，但是很显然，对于本领域技术人员而言，许多替代、修改及变化将是明白易懂的。因此，旨在涵盖落入所附权利要求的精神及广泛范围内的所有这些替代、修改及变化。

本说明书中提及的所有出版物、专利及专利申请在此通过引用整体并入本说明书，其程度如同每个单独的出版物、专利或专利申请被具体及单独地指出通过引用并入本文。另外，本申请中任何参考文献的引用或标识不应被解释为承认这种参考文献可作为本发明的现有技术。在使用章节标题的范围内，不应将其解释为限制。

Claims (32)

1.一种治疗有需要的一对象的一神经退化性疾病的方法，其特征在于，所述的方法包含：向所述对象施用一治疗有效量的一趋化因子受体CXCR4拮抗剂及一乳酸盐，藉此治疗所述神经退化性疾病。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述神经退化性疾病选自由以下组成的群组：肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、帕金森氏病(PD)、阿尔茨海默症(AD)、亨汀顿氏舞蹈症、多发性硬化症(MS)、库兹菲德-雅各氏症(CJD)、癫痫、中风、自身免疫性脑脊髓炎、糖尿病性神经病变及青光眼性神经病变。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述神经退化性疾病是肌萎缩性侧索硬化症。

4.如权利要求1至3任一项所述的方法，其特征在于：所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂选自由以下组成的群组：AMD3100(普乐沙福)、BKT140、TN14003、CTCE-9908、KRH-2731、TC14012、KRH-3955及AMD070。

5.如权利要求1至4任一项所述的方法，其特征在于：所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂是AMD3100。

6.如权利要求1至3任一项所述的方法，其特征在于：所述乳酸盐与所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂系为同时施用。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述乳酸盐在所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂施用之前或之后施用。

8.如权利要求5所述的方法，其特征在于：AMD3100的一剂量小于240微克/千克。

9.如权利要求5所述的方法，其特征在于：AMD3100的一剂量介于0.1至500微克/千克之间。

10.如权利要求5所述的方法，其特征在于：AMD3100的一剂量介于10至150微克/千克之间。

11.如权利要求1至3任一项所述的方法，其特征在于：所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂是经由皮下施用。

12.如权利要求1至3任一项所述的方法，其特征在于：所述方法更包含：对所述对象施用锌。

13.如权利要求5所述的方法，其特征在于：AMD3100与锌复合。

14.一种治疗有需要的一对象的一神经退化性疾病的方法，其特征在于，所述的方法包含：在所述神经退化性疾病不是肌萎缩性侧索硬化症的一条件下，向所述对象施用一治疗有效量的AMD3100及锌，藉此治疗所述神经退化性疾病。

15.如权利要求14所述的方法，其特征在于：所述神经退化性疾病选自由以下组成的群组：帕金森氏病、阿尔茨海默症、亨汀顿氏舞蹈症、多发性硬化症、库兹菲德-雅各氏症、癫痫、中风、自身免疫性脑脊髓炎、糖尿病性神经病变及青光眼性神经病变。

16.如权利要求14或15所述的方法，其特征在于：所述神经退化性疾病是肌萎缩性侧索硬化症。

17.如权利要求14至16任一项所述的方法，其特征在于：所述锌与所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂系为同时施用。

18.如权利要求17所述的方法，其特征在于：锌在所述施用之前先与AMD3100复合。

19.如权利要求14所述的方法，其特征在于：锌在AMD3100施用之前或之后施用。

20.如权利要求14至19任一项所述的方法，其特征在于：所述方法更包含：对所述对象施用一乳酸盐。

21.如权利要求14至20任一项所述的方法，其特征在于：AMD3100的一剂量小于240微克/千克。

22.如权利要求14至21任一项所述的方法，其特征在于：AMD3100的一剂量介于0.1至500微克/千克之间。

23.如权利要求14至22任一项所述的方法，其特征在于：AMD3100的一剂量介于10至150微克/千克之间。

24.如权利要求14至23任一项所述的方法，其特征在于：AMD3100是经由皮下施用。

25.一种用于治疗一神经退化性疾病的套件，其特征在于：所述套件包含一趋化因子受体CXCR4拮抗剂及一乳酸盐。

26.如权利要求25所述的套件，其特征在于：所述趋化因子受体CXCR4拮抗剂为AMD3100。

27.如权利要求26所述的套件，其特征在于：AMD3100与锌复合。

28.如权利要求25所述的套件，其特征在于：所述套件更包含锌。

29.如权利要求25所述的套件，其特征在于：所述神经退化性疾病选自由以下组成的群组：肌萎缩性侧索硬化症、帕金森氏病、阿尔茨海默症、亨汀顿氏舞蹈症、多发性硬化症、库兹菲德-雅各氏症、癫痫、中风、自身免疫性脑脊髓炎、糖尿病性神经病变及青光眼性神经病变。

30.如权利要求25所述的套件，其特征在于：所述神经退化性疾病是肌萎缩性侧索硬化症。

31.一种用于治疗一神经退化性疾病的趋化因子受体CXCR4拮抗剂及乳酸盐。

32.一种在所述神经退化性疾病不是肌萎缩性侧索硬化症的一条件下用于治疗一神经退化性疾病的AMD3100及锌。