CN108135150A - 经遗传修饰的非人类动物和涉及补体依赖性细胞毒性的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明总体上涉及以恢复的补体依赖性细胞毒性为特征的经遗传修饰的非人类动物和免疫缺陷的非人类动物，以及用于在所述经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物中评估治疗性抗体的方法和组合物。在具体方面中，本发明涉及免疫缺陷的非肥胖型糖尿病(NOD)、A/J、A/He、AKR、DBA/2、NZB/B1N、B10.D2/oSn和其他经遗传修饰以恢复未经修饰的免疫缺陷小鼠中缺乏的补体依赖性细胞毒性的小鼠品系。在进一步的具体方面中，本发明涉及NOD.Cg‑Prkdc scid IL2rg tm1Wjl/SzJ(NSG)、NOD.Cg‑Rag1tm1Mom IL2rg tmlWjl/SzJ(NRG)和NOD.Cg‑Prkdc scid IL2rgtm1Sug/JicTAc(NOG)小鼠，其经遗传修饰以恢复在未经修饰的NSG、NRG和NOG小鼠中缺乏的补体依赖性细胞毒性。根据本发明的具体方面，提供了用于在特征在于完整的补体系统的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠中评估治疗性抗体或推定的治疗性抗体的方法。

Description

经遗传修饰的非人类动物和涉及补体依赖性细胞毒性的方法
相关申请的参考
本申请要求于2015年6月16日提交的美国临时专利申请62/180,369和2016年4月25日提交的美国临时专利申请62/326，958的优先权，这二者的全部内容均通过引用的方式纳入本文。
技术领域
本发明总体上涉及特征在于恢复的补体依赖性细胞毒性的经遗传修饰的非人类动物和免疫缺陷的非人类动物，以及用于在经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物中评估治疗性抗体的方法和组合物。在具体方面中，本发明涉及免疫缺陷的非肥胖型糖尿病(NOD)、A/J、A/He、AKR、DBA/2、NZB/B1N、B10.D2/oSn和其他经遗传修饰以恢复未经修饰的免疫缺陷小鼠中缺乏的补体依赖性细胞毒性的小鼠品系。在进一步的具体方面中，本发明涉及NOD.Cg-Prkdcscid IL2rgtm1Wjl/SzJ(NSG)、NOD.Cg-Rag1tm1Mom IL2rgtmlWjl/SzJ(NRG)和NOD.Cg-Prkdcscid IL2rgtm1Sug/JicTac(NOG)小鼠，其经遗传修饰以恢复在未经修饰的NSG、NRG和NOG小鼠中缺乏的补体依赖性细胞毒性。根据本发明的具体方面，提供了用于在特征在于完整的补体系统的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠(例如特征在于完整的补体系统的NSG、NRG和NOG小鼠)中评估治疗性抗体的方法。
背景技术
单克隆抗体(mAb)已经脱颖而出成为癌症治疗中的主流治疗选择。mAb的Fc功能对于通过天然杀伤(NK)细胞的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和补体依赖性细胞毒性(CDC)介导的肿瘤细胞杀伤是特别重要的。然而，对抗肿瘤细胞的mAb介导的CDC的研究在很大程度上仍然依赖于体外系统。NSG、NRG、NOG和其他免疫缺陷小鼠支持人类肿瘤的增强植入。然而，在几种类型的免疫缺陷小鼠(例如NSG、NRG和NOG小鼠)中，由于溶血补体(He)基因的编码区中的2-bp缺失导致缺乏溶血补体，妨碍了这些小鼠中的体内CDC活性的评估。
对用于分析抗肿瘤细胞的mAb介导的CDC的方法和组合物有着持续的需求，以促进开发对疾病(如癌症)的有效医学和药物治疗。
发明内容
本发明提供了经遗传修饰的NOD小鼠，其中所述小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷非肥胖型糖尿病(NOD)、A/J、A/He、AKR、DBA/2、NZB/B1N、B10.D2/oSn小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述小鼠具有重症联合免疫缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括scid突变，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组是scid突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括Il2rg突变，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组是Il2rg突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和重组活化基因1缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括Rag1突变，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和RAG 1缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组是Rag1突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和RAG 1缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和重组活化基因2(RAG 2)缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括Rag2突变，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和RAG 2缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组是Rag2突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和RAG 2缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、重症联合免疫缺陷和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括scid突变，其中该动物具有IL2受体γ链缺陷，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、重症联合免疫缺陷和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组是scid突变纯合型的，其中该动物具有IL2受体γ链缺陷，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、重症联合免疫缺陷和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且其特征在于完整的补体系统，其中所述小鼠具有重组活化基因1缺陷和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括Rag1突变，其中该动物具有IL2受体γ链缺陷，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、RAG 1缺陷和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组是Rag1突变纯合型的，其中该动物具有IL2受体γ链缺陷，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、RAG 1缺陷和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述小鼠具有重组活化基因2缺陷和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括Rag2突变，其中该动物具有IL2受体γ链缺陷，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、RAG 2缺陷和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组是Rag2突变纯合型的，其中该动物具有IL2受体γ链缺陷，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、RAG 2缺陷和IL2受体γ链缺陷。
根据本发明各方面的经遗传修饰的免疫缺陷的非人小鼠是免疫缺陷的NOD、A/J、A/He、AKR、DBA/2、NZB/B1N或B10.D2/oSn小鼠。
根据本发明各方面的经遗传修饰的免疫缺陷的非人小鼠是免疫缺陷的NOD小鼠。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重症联合免疫缺陷，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括scid突变，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组是scid突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中该动物具有IL2受体γ链缺陷，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括Il2rg突变，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组是Il2rg突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中该动物具有RAG 1缺陷，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括Rag1突变，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和RAG 1缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组是Rag1突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和RAG 1缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中该动物具有RAG 2缺陷，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和RAG 2缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括Rag2突变，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和RAG 2缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组是Rag2突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和RAG 2缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组是scid突变纯合型的，其中该动物具有IL2受体γ链缺陷，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、重症联合免疫缺陷和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了一种NOD.Cg-Prkdc scid IL2rg tmlWjlHc1/SzJ(NSG-Hc1)小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、重症联合免疫缺陷和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组是Rag1突变纯合型的，其中该动物具有IL2受体γ链缺陷，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、RAG 1缺陷和IL2受体γ缺陷。
本发明提供了一种NOD.Cg-Rag1tm1Mom IL2rg tmlWjl/SzJ(NRG-Hc1)小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、RAG 1缺陷和IL2受体γ缺乏。
本发明提供了一种NOD.Cg-Prkdc scid IL2rg tm1SugHc1/JicTac
(NOG-Hc1)小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、重症联合免疫缺陷和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组是Rag2突变纯合型的，其中该动物具有IL2受体γ链缺陷，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、RAG 2缺陷和IL2受体γ链缺陷。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的分离细胞，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷的非人类动物表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
NSG-Hc1小鼠的分离细胞，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
NRG-Hc1小鼠的分离细胞，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
NOG-Hc1小鼠的分离细胞，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
根据本发明各方面，本发明的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠还包括异种移植肿瘤细胞。
根据本发明各方面，本发明的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠还包括人异种移植肿瘤细胞。
根据本发明各方面，本发明的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠还包括一个细胞系的异种移植肿瘤细胞(xenograft tumor cells of a cell line)。
本发明提供了进一步包括异种移植肿瘤细胞的NOD.Cg-Prkdc scid IL2rgtm1Wj1Hc1/SzJ(NSG-Hc1)小鼠。
本发明提供了进一步包括人异种移植肿瘤细胞的NOD.Cg-Prkdc scid IL2rgtm1Wj1Hc1/SzJ(NSG-Hc1)小鼠。
本发明提供了进一步包括一个细胞系的异种移植肿瘤细胞的NOD.Cg-Prkdc scidIL2rg tm1Wj1Hc1/SzJ(NSG-Hc1)小鼠。
本发明提供了进一步包括异种移植肿瘤细胞的NOD.Cg-Rag1tm1Mom IL2rg tmlWjl/SzJ(NRG-Hc1)小鼠。
本发明提供了进一步包括人异种移植肿瘤细胞的NOD.Cg-Rag1 tm1Mom IL2rgtmlWjl/SzJ(NRG-Hc1)小鼠。
本发明提供了进一步包括一个细胞系的异种移植肿瘤细胞的NOD.Cg-Rag1tm1MomIL2rg tmlWjl/SzJ(NRG-Hc1)小鼠。
本发明提供了进一步包括异种移植肿瘤细胞的NOD.Cg-Prkdc scid IL2rgtm1SugHc1/JicTac(NOG-Hc1)小鼠。
本发明提供了进一步包括人异种移植肿瘤细胞的NOD.Cg-Prkdc scid IL2rgtm1SugHc1/JicTac(NOG-Hc1)小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷的非肥胖型糖尿病(NOD)、A/J、A/He、AKR、DBA/2、NZB/B1N、B10.D2/oSn小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重症联合免疫缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括scid突变，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，以及具有重症联合免疫缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组是scid突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，以及具有重症联合免疫缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括Il2rg突变，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统以及具有IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组是Il2rg突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统以及具有IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因1缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括Rag1突变，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统以及具有重组活化基因1缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组是Rag1突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统以及具有重组活化基因1缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因2缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括Rag2突变，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组是Rag2突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统以及具有重组活化基因2缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重症联合免疫缺陷和IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠包括scid突变和Il2rg突变，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重症联合免疫缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组是scid突变和Il2rg突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重症联合免疫缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因1缺陷和IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括Rag1突变和Il2rg突变，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因1缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组是Rag1突变和Il2rg突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因1缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因2缺陷和IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括Rag2突变和Il2rg突变，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因2缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组是Rag2突变和Il2rg突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因2缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面，在产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法中给予的异种移植肿瘤细胞是人异种移植肿瘤细胞。
根据本发明各方面，在产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法中给予的异种移植肿瘤细胞是一个细胞系的异种移植肿瘤细胞(xenograft tumorcells of a cell line)。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重症联合免疫缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括scid突变，并且其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和重症联合免疫缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组是scid突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和重症联合免疫缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述小鼠具有IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠包括Il2rg突变，并且其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组是Il2rg突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重组活化基因1缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括Rag1突变，并且其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和重组活化基因1缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组是Rag1突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和重组活化基因1缺陷；并将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的NOD免疫缺陷小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重组活化基因2缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括Rag2突变，并且其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和重组活化基因2缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组是Rag2突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和重组活化基因2缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重症联合免疫缺陷和IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括scid突变和Ir2rg突变，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重症联合免疫缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组是scid突变和Ir2rg突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重症联合免疫缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重组活化基因1缺陷和IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括Rag1突变，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有IL2受体γ链缺陷和重组活化基因1缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组是Rag1突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述小鼠具有IL2受体γ链缺陷和重组活化基因1缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重组活化基因2缺陷和IL2受体γ链缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括Rag2突变，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有IL2受体γ链缺陷和重组活化基因2缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组是Rag2突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述小鼠具有IL2受体γ链缺陷和重组活化基因2缺陷；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供NSG-Hc1小鼠，其中所述NSG-Hc1小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述NSG-Hc1小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；并且将异种移植肿瘤细胞给予所述NSG-Hc1小鼠，其中所述NSG-Hc1小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述NSG-Hc1小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供NRG-Hc1小鼠，其中所述NRG-Hc1小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述NRG-Hc1小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述NRG-Hc1小鼠，其中所述NRG-Hc1小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述NRG-Hc1小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供NOG-Hc1小鼠，其中所述NOG-Hc1小鼠包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述NOG-Hc1小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述NOG-Hc1小鼠，其中所述NOG-Hc1小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述NOG-Hc1小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
根据本发明各方面用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的效果的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的效果的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷非肥胖型糖尿病(NOD)、A/J、A/He、AKR、DBA/2、NZB/B1N或B10.D2/oSn小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重症联合免疫缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括scid突变，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，以及具有重症联合免疫缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组是scid突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，以及具有重症联合免疫缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括Il2rg突变，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，以及具有IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的小鼠的基因组，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组是Il2rg突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，以及具有IL2受体γ链缺乏；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因1缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠包括Rag1突变，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，以及具有重组活化基因1缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠是Rag1突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，以及具有重组活化基因1缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因2缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括Rag2突变，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组是Rag2突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，以及具有重组活化基因2缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重症联合免疫缺陷和IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括scid突变和Il2rg突变，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重症联合免疫缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组是scid突变和Il2rg突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重症联合免疫缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因1缺陷和IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠包括Rag1突变和Il2rg突变，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因1缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组是Rag1突变和Il2rg突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因1缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因2缺陷和IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括Rag2突变和Il2rg突变，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因2缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组是Rag2突变和Il2rg突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有重组活化基因2缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中该经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重症联合免疫缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括scid突变，并且其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和重症联合免疫缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组是scid突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和重症联合免疫缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述小鼠具有IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括Il2rg突变，并且其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD的基因组小鼠是Il2rg突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重组活化基因1缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括Rag1突变，并且其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和重组激活的基因1缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠是Rag1突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和重组活化基因1缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重组活化基因2缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括Rag2突变，并且其中所述经遗传修饰的NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和重组活化基因2缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的NOD的基因组小鼠是Rag2突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统和重组活化基因2缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中该经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重症联合免疫缺陷和IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括scid突变和Il2rg突变，其中所述经遗传修饰的小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重症联合免疫缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组是scid突变和Il2rg突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重症联合免疫缺陷并且具有IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重组活化基因1缺陷和IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括Rag1突变，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有IL2受体γ链缺陷和重组活化基因1缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组是Rag1突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，并且其中所述小鼠具有IL2受体γ链缺陷和重组活化基因1缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有重组活化基因2缺陷和IL2受体γ链缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括Rag2突变，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠具有IL2受体γ链缺陷和重组活化基因2缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组是Rag2突变纯合型的，并且其中所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，其中所述小鼠具有IL2受体γ链缺陷和重组活化基因2缺陷；将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷NOD小鼠；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供NSG-Hc1小鼠，其中所述NSG-Hc1小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述NSG-Hc1小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；将异种移植肿瘤细胞给予所述NSG-Hc1小鼠，其中所述NSG-Hc1小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述NSG-Hc1小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供NRG-Hc1小鼠，其中NRG-Hc1小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得
NRG-Hc1小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；将异种移植肿瘤细胞给予NRG-Hc1小鼠，其中NRG-Hc1小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得NRG-Hc1小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面提供了产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括提供NOG-Hc1小鼠，其中所述NOG-Hc1小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述NOG-Hc1小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；将异种移植肿瘤细胞给予所述NOG-Hc1小鼠，其中所述NOG-Hc1小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述NOG-Hc1小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的应答。
根据本发明各方面，在产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法中给予的异种移植肿瘤细胞是人异种移植肿瘤细胞。
根据本发明各方面，在产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法中给予的异种移植肿瘤细胞是一个细胞系的异种移植肿瘤细胞(xenograft tumorcells of a cell line)。
附图说明
图1A是NSG和NSG-Hc1小鼠的小鼠C5补体成分结构蛋白的示意图，其示出了NSG小鼠中的2个碱基对缺失产生提前终止密码子并且与NSG-Hc1小鼠中修复的基因序列相比缺乏功能性补体系统，所述修复的基因序列导致产生全长功能性C5；
图1B是表示当与来自年龄和性别匹配的NSG或NSG-Hc1小鼠的1:5稀释的血清一起温育时，抗体包被的羊RBC即致敏细胞(EA细胞)的裂解水平的代表性图表。使用BALB/cByJ小鼠的血清作为阳性对照。数据表示为平均值±SD。*P<0.0001；
图2A示出了在通过静脉内注射移植1×105Daudi细胞，并且在移植物植入后第10天注射25μg/g利妥昔单抗或PBS的不同组的年龄和性别匹配的NSG和NSG-Hc1小鼠中，体重随时间变化的示意图。使用未植入的NSG小鼠作为阴性对照。PBS，磷酸盐缓冲盐水；RTX，利妥昔单抗。数据表示为平均值的百分比±SE。*P<0.05；
图2B示出了代表性的Kaplan-Meier存活曲线图，其示出了在通过静脉内注射移植1×105Daudi细胞，并且在移植物植入后第10天注射25μg/g利妥昔单抗或PBS的不同组的年龄和性别匹配的NSG和NSG-Hc1小鼠中随时间的存活率百分比。使用未植入的NSG小鼠作为阴性对照。PBS，磷酸盐缓冲盐水；RTX，利妥昔单抗。数据表示为平均值的百分比±SE。*P<0.05；
图3A示出了在通过静脉内注射移植1×105Daudi细胞，并且在移植物植入后第10天注射25μg/g利妥昔单抗或PBS的不同组的年龄和性别匹配的NSG和NSG-Hc1小鼠中，外周血淋巴细胞的代表性流式细胞术分析。使用未植入的NSG小鼠作为阴性对照。测量值取自移植物植入后第38天。数据表示为平均值±SD。PBS，磷酸盐缓冲盐水；RTX，利妥昔单抗；*P<0.05；
图3B示出了在通过静脉内注射移植1×105Daudi细胞，并且在移植物植入后第10天注射25μg/g利妥昔单抗或PBS的不同组的年龄和性别匹配的NSG和NSG-Hc1小鼠中，骨髓的代表性流式细胞术分析。使用未植入的NSG小鼠作为阴性对照。测量值取自移植物植入后第38天。数据表示为平均值±SD。PBS，磷酸盐缓冲盐水；RTX，利妥昔单抗；*P<0.05；
图4A示出了在通过静脉内注射移植1×105Daudi细胞，并且在植入后第10天注射25μg/g利妥昔单抗或PBS的不同组的年龄和性别匹配的NSG和NSG-Hc1小鼠中，Daudi细胞植入的卵巢显示水平的代表性图像。测量值取自植入后第38天。原始放大倍数×10(比例尺＝200μM)显示HE染色；高倍放大图像×20(比例尺＝100μm)显示抗人CD45IHC。PBS，磷酸盐缓冲盐水；RTX，利妥昔单抗；以及
图4B示出了在通过静脉内注射移植1×105Daudi细胞，并且在移植物植入后第10天注射25μg/g利妥昔单抗或PBS的不同组的年龄和性别匹配的NSG和NSG-Hc1小鼠中，Daudi细胞植入的肾脏显示水平的代表性图像。测量值取自移植物植入后第38天。原始放大倍数×10(比例尺＝200μM)显示HE染色；高倍放大图像×20(比例尺＝100μm)显示抗人CD45IHC。PBS，磷酸盐缓冲盐水；RTX，利妥昔单抗。
具体实施方式
根据本发明各方面的经遗传修饰非人类动物、方法和组合物使得能够评估基于抗体的治疗。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷的非人类动物，其中所述免疫缺陷的非人类动物的基因组包括修复的C5补体成分结构基因(也称为溶血性补体，Hc)，使得所述经遗传修饰非人类动物表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
在具体的方面中，本发明涉及免疫缺陷的非肥胖型糖尿病(NOD)、A/J、A/He、AKR、DBA/2、NZB/B1N、B10.D2/oSn和其他经遗传修饰以恢复未经修饰的免疫缺陷小鼠中缺乏的补体依赖性细胞毒性的小鼠品系。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷的非肥胖型糖尿病小鼠(NOD)，其中NOD小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NSG小鼠，其中NSG小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NSG小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
本发明提供了具有完整补体系统的经遗传修饰的NSG小鼠，命名为NSG-Hc1小鼠。
本发明提供了NSG-Hc1小鼠，其具有完整的补体系统并植入了特征在于异常增殖的细胞，如癌细胞。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NRG小鼠，其中NRG小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NRG小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
本发明提供了具有完整补体系统的经遗传修饰的NRG小鼠，命名为NRG-Hc1小鼠。
本发明提供了NRG-Hc1小鼠，其具有完整的补体系统并植入了特征在于异常增殖的细胞，如癌细胞。
本发明提供了经遗传修饰的免疫缺陷NOG小鼠，其中所述NRG小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NRG小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
本发明提供了具有完整补体系统的经遗传修饰的NOG小鼠，命名为NOG-Hc1小鼠。
本发明提供了NOG-Hc1小鼠，其具有完整的补体系统并植入了特征在于异常增殖的细胞，如癌细胞。
本文所用的科学和技术术语意欲具有本领域普通技术人员通常理解的含义。可以发现这样的术语在各种标准参考文献的上下文中被定义和使用，例如包括J.Sambrook andD.W.Russell,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,Cold Spring HarborLaboratory Press；3rd Ed.,2001；F.M.Ausubel,Ed.,Short Protocols in MolecularBiology,Current Protocols；5th Ed.,2002；B.Alberts et al.,Molecular Biology ofthe Cell,4th Ed.,Garland,2002；D.L.Nelson and M.M.Cox,Lehninger Principles ofBiochemistry,4th Ed.,W.H.Freeman&Company,2004；Herdewijn,P.(Ed.),Oligonucleotide Synthesis:Methods and Applications,Methods in MolecularBiology,Humana Press,2004；A.Nagy,M.Gertsenstein,K.Vintersten,R.Behringer(Eds)2002,Manipulating the Mouse Embryo:A Laboratory Manual,3rd edition,ColdSpring Harbor Laboratory Press,ISBN-10:0879695919；以及Turksen(Ed.),Embryonicstem cells:methods and protocols in Methods Mol Biol.2002；185,Humana Press；Current Protocols in Stem Cell Biology,ISBN:9780470151808。
单数术语“一”、“一个”和“该”并非意在进行限制，并且包括复数指示物，除非另有明确说明或上下文另有明确指示。
术语“免疫缺陷小鼠”和“免疫缺陷的非人类动物”是指特征在于以下一种或多种的小鼠或其他非人类动物：缺乏功能性免疫细胞，如T细胞和B细胞；DNA修复缺陷；编码淋巴细胞上抗原特异性受体的基因的重排的缺陷；缺乏免疫功能分子，如IgM、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3和IgA。
免疫缺陷动物(如小鼠)可以被表征为涉及免疫功能的基因(如Rag1和Rag2)中的一个或多个缺陷(Oettinger,M.A et al.,Science,248:1517-1523,1990；以及Schatz,D.G.et al.,Cell,59:1035-1048,1989)。
术语“重组活化基因1缺陷”是指与野生型非人类动物相比，RAG 1减少。RAG 1是在编码免疫球蛋白和T细胞受体分子的基因的重排和重组中发挥功能的酶，其缺陷减少或消除了成熟T和B细胞的生成。RAG1减少可以是由于基因缺失或突变。例如，可以通过使用公知的方法检测RAG 1基因缺失或突变和/或检测RAG 1表达减少来检测RAG 1减少。
术语“重组活化基因2缺陷”是指与野生型非人类动物相比，RAG 2减少。RAG 2是在编码免疫球蛋白和T细胞受体分子的基因的重排和重组中发挥功能的酶，其缺陷减少或消除了成熟T和B细胞的生成。RAG2减少可以是由于基因缺失或突变。例如，可以通过使用公知的方法检测RAG 2基因缺失或突变和/或检测RAG 2表达减少来检测RAG 2减少。
免疫缺陷小鼠可能具有导致小鼠中的异常免疫功能的任何这些或其他缺陷。
特别有用的免疫缺陷小鼠品系是通常被称为NOD scidγ(NSG)小鼠的NOD.Cg-Prkdc scid IL2rg tm1Wj1/SzJ，其详细记载于Shultz LD et al.,2005,J.Immunol,174:6477-89；通常被称为NRG小鼠的NOD.Cg-Rag1 tm1Mom IL2rg tmlWjl/SzJ，Shultz LD et al.,2008,Clin Exp Immunol 154(2):270-84；通常称为NOG小鼠的NOD.Cg-Prkdc scid IL2rgtm1Sug/JicTac，其详细记载于Ito,M.et al.,Blood 100,3175-3182(2002)。
术语“重症联合免疫缺陷(SCID)”是指以不存在T细胞和缺乏B细胞功能为特征的病症。
SCID的常见形式包括：伴X染色体的SCID，其特征在于IL2RG基因中的γ链基因突变和淋巴细胞表型T(-)B(+)NK(-)；以及常染色体隐性SCID，其特征在于Jak3基因突变和淋巴细胞表型T(-)B(+)NK(-)、ADA基因突变和淋巴细胞表型T(-)B(-)NK(-)、IL-7Rα链突变和淋巴细胞表型T(-)B(+)NK(+)、CD3δ或ε突变和淋巴细胞表型T(-)B(+)NK(+)、RAG 1/RAG 2突变和淋巴细胞表型T(-)B(-)NK(+)、Artemis基因突变和淋巴细胞表型T(-)B(-)N(+)、CD45基因突变和淋巴细胞表型T(-)B(+)NK(+)。
根据本发明各方面的经遗传修饰的小鼠具有通常称为scid突变的重症联合免疫缺陷突变(Prkdc scid)。scid突变是公知的并且位于小鼠16号染色体上，如Bosma et al.，Immunogenetics 29:54-56,1989中所述。scid突变纯合型的小鼠的特征在于不存在功能性T细胞和B细胞、淋巴细胞减少症、低球蛋白血症和正常造血微环境。scid突变可以例如通过使用公知的方法(如PCR或流式细胞术)检测scid突变的标记物来检测。
根据本发明各方面的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠具有IL2受体γ链缺陷。术语“IL2受体γ链缺陷”是指IL2受体γ链减少。IL2受体γ链的减少可以是由于基因缺失或突变。IL2受体γ链的减少可以例如通过使用公知的方法检测IL2受体γ链基因缺失或突变和/或检测IL2受体γ链表达减少来检测。
术语“NOD scidγ”和“NSG”在本文中可互换使用，是指公知的免疫缺陷小鼠品系NOD.Cg-Prkdc scid IL2rg tm1Wj1/SzJ。NSG小鼠结合来自NOD/ShiLtJ背景、重症联合免疫缺陷(scid)突变和白细胞介素-2受体γ链的完全敲除的多重免疫缺陷。结果，NSG小鼠缺乏成熟的T、B和NK细胞，并且在细胞因子信号传导中存在缺陷。NSG小鼠特征在于缺乏IL2R-γ(γc)表达、没有可检测的血清免疫球蛋白、没有溶血性补体、没有成熟的T淋巴细胞以及没有成熟的天然杀伤细胞。
本文所用的术语“NRG”是指公知的免疫缺陷小鼠品系NOD.Cg-Rag1tm1Mom IL2rgtmlWjl/SzJ。NRG小鼠结合NOD/ShiLtJ背景、由于Rag1tm1Mom突变导致的Rag1的完全敲除和白细胞介素-2受体γ链的完全敲除的多重免疫缺陷。结果，NRG小鼠缺乏成熟的T、B和NK细胞，并且在细胞因子信号传导中存在缺陷。NRG小鼠的特征在于缺乏IL2R-γ(γc)表达、没有可检测的血清免疫球蛋白、没有溶血性补体、没有成熟的T淋巴细胞以及没有成熟的天然杀伤细胞。
本文所用的术语“NOG”是指公知的免疫缺陷小鼠品系NOD.Cg-Prkdc scid IL2rgtm1Sug/JicTac。NOG小鼠结合NOD/Shi背景、重症联合免疫缺陷(scid)突变和白细胞介素-2受体γ链功能的完全敲除的多重免疫缺陷。结果，NOD小鼠缺乏成熟的T、B和NK细胞，并且在细胞因子信号传导中存在缺陷。NOD小鼠的特征在于IL2R-γ(γc)的截短突变(使得配体仍然能够与截短的蛋白质结合但没有信号产生)、没有可检测的血清免疫球蛋白、没有溶血性补体、没有成熟的T淋巴细胞以及没有成熟的天然杀伤细胞。
本发明提供了经遗传修饰的NOD小鼠，其中所述小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NOD小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。这种经遗传修饰的NOD小鼠NOD-Hc1可用于与免疫缺陷小鼠结合，例如通过交配或通过体外或其他体内技术来产生如本文所述的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
用于C5补体成分结构基因的术语“表达(express)”、“表达(expression)”、“表达(expressing)”和“表达(expresses)”是指C5补体成分结构基因的转录以产生相应的mRNA和/或mRNA的翻译以产生有功能的、相应的C5补体成分结构蛋白。
C5补体成分结构基因和相应的蛋白质是公知的。小家鼠(Mus musculus)C5补体成分结构蛋白如本文SEQ ID NO:1所示。
C5补体成分结构基因中的2-碱基对(TA)缺失是造成NOD小鼠(包括NSG、NRG和NOG品系)以及A/J、A/He、AKR、DBA/2、NZB/B1N和B10.D2/oSn小鼠品系中缺乏C5蛋白表达的原因，如Baxter,A.G.etal.，Diabetes,42(11):1574-8,1993中所述。这种靠近位于染色体2上的c5基因中外显子7的5'端的缺失产生提前终止密码子并阻止C5的表达。
因此，修复的C5补体成分结构基因恢复C5补体成分结构基因的表达，从而产生C5补体成分结构蛋白，并且经遗传修饰的小鼠的特征在于完整的补体系统。
修复的C5补体成分结构基因优选地被修复以替换失去的2个碱基对缺失，使得修复的基因编码SEQ ID NO:1的野生型蛋白质序列。
各种方法中的任一种均可用于在具有突变的C5补体成分结构基因的小鼠中修复C5补体成分结构基因，以产生其基因组包括修复的C5补体成分结构基因的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。根据基因工程的标准方法，例如但不限于基因剪辑方法、同源重组和反义RNA的转基因表达，在经遗传修饰的动物的基因组中修复C5补体成分结构基因。这样的技术是本领域中公知的，并且进一步包括但不限于前核显微注射和胚胎干细胞的转化。用于产生其基因组包括修复的C5补体成分结构基因的经遗传修饰的动物的方法包括但不限于：J.P.Sundberg and T.Ichiki,Eds.,Genetically Engineered Mice Handbook,CRCPress；2006；M.H.Hofker and J.van Deursen,Eds.,Transgenic Mouse Methods andProtocols,Humana Press,2002；A.L.Joyner,Gene Targeting:A Practical Approach,Oxford University Press,2000；Manipulating the Mouse Embryo:A LaboratoryManual,3rd edition,CSH Press；12月15日,2002,ISBN-10:0879695919；Kursad Turksen(Ed.),Embryonic stem cells:methods and protocols in Methods Mol Biol.2002；185,Humana Press；Current Protocols in Stem Cell Biology,ISBN:978047015180；Meyer et al.,PNAS USA,vol.107(34),15022-15026；以及CRISPR-Cas:A LaboratoryManual,Jennifer Doudna,J.and Mali,P.(Eds.),CSH Press,2016,ISBN 978-1-621821-30-4中所述的那些方法。
通过将基因靶向载体引入植入前胚胎或干细胞(如胚胎干(ES)细胞或诱导多能干(iPS)细胞)中，可以实现产生其基因组包括修复的C5补体成分结构基因的经遗传修饰的免疫缺陷的非人类动物。
术语“基因靶向载体”是指如通过插入到靶基因中或替换靶基因而有效地与特定染色体基因座重组并且突变所述特定染色体基因座的双链重组DNA分子。
为了进行靶向的基因修复，使用重组DNA技术制备基因靶向载体，并且包括与干细胞内源C5补体成分结构基因同源的5'和3'序列。基因靶向载体任选地且优选地还包括选择标记物，如新霉素磷酸转移酶、潮霉素或嘌呤霉素。本领域普通技术人员能够选择包含在基因靶向载体中的序列，并且只需要常规实验来使用这些序列。基因靶向载体可以使用公知的方法通过重组方式或合成方式产生。
为了进行将基因靶向载体DNA注入至植入前胚胎的方法，基因靶向载体在注入非人类植入前胚胎之前被线性化。优选地，将基因靶向载体注入受精的卵母细胞中。交配后第二天从超排卵雌性中采集受精的卵母细胞(0.5dpc)并注射表达构建体。将经注射的卵母细胞培养过夜，或者直接转移到0.5天p.c.假孕雌性的输卵管中。超排卵、卵母细胞采集、基因靶向载体注射和胚胎移植的方法是本领域中已知的，并记载于Manipulating the MouseEmbryo:A Laboratory Manual,3rd edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press；2002年12月15日,ISBN-10:0879695919。通过DNA分析(如PCR、DNA印迹或测序)可以检测子代中修复的C5补体组分结构基因的存在。可以例如通过使用ELISA或蛋白质印迹分析来测试具有修复的C5补体成分结构基因的小鼠中C5补体成分结构蛋白表达和/或例如通过RT-PCR来测试mRNA表达。
或者，可以使用公知的方法(如电穿孔、磷酸钙沉淀和脂质转染)将基因靶向载体转染到干细胞(ES细胞或iPS细胞)中。
使小鼠ES细胞在针对特定株系优化的培养基中生长。通常ES培养基在Dulbecco'sModified Eagle Media(DMEM)中含有15％胎牛血清(FBS)或合成或半合成等价物、2mM谷氨酰胺、1mM丙酮酸钠、0.1mM非必需氨基酸、50U/ml青霉素和链霉素、0.1mM 2-巯基乙醇和1000U/ml LIF(对于某些细胞系加上分化的化学抑制剂)。详细说明是本领域中已知的(Tremml et al.,2008,Current Protocols in Stem Cell Biology,第1章:第1C.4单元。对于ES细胞分化的抑制剂的综述，参见Buehr,M.,et al.(2003).Genesis of embryonicstem cells.Philosophical Transactions of the Royal Society B:BiologicalSciences 358,1397-1402。
通过DNA分析(如PCR、DNA印迹或测序)筛选具有修复的C5补体成分结构基因的细胞。可以例如通过使用ELISA或蛋白质印迹分析来测试具有修复C5补体成分结构基因的正确同源重组事件的细胞中C5补体成分结构蛋白表达和/或例如通过RT-PCR来测试mRNA表达。如果需要的话，可以通过用Cre重组酶处理干细胞来去除选择标记物。在Cre重组酶处理后，分析细胞中编码C5补体成分结构蛋白的核酸的存在。
可将具有修复C5补体成分结构基因的正确基因组事件的选定的干细胞注入植入前胚胎中。为了显微注射，使用胰蛋白酶和EDTA的混合物将ES或iPS细胞成为单细胞，随后在ES培养基中重悬。使用纤细的抽出玻璃针(内径20-25微米)选择多组单细胞，并使用装有显微操作器的倒置显微镜将其穿过胚胎的透明带引入胚泡腔(囊胚腔)中。作为胚泡注射的替代方式，可将干细胞注入早期胚胎(例如2-细胞、4-细胞、8-细胞，前桑椹胚或桑椹胚)。注射可以通过钻孔打开透明带的激光或压电脉冲来辅助。每个胚泡或8-细胞阶段胚胎注射大约9-10个选定的干细胞(ES或iPS细胞)，每4-细胞阶段胚胎注射6-9个干细胞，每2-细胞阶段胚胎注射约6个干细胞。在导入干细胞之后，允许胚胎在37℃下在5％CO2、5％O2的氮气中恢复几个小时，或者培养过夜，然后转移到假孕的受体雌性中。在干细胞注射的另一替代方式中，干细胞可以与桑椹胚期胚胎聚集。所有这些方法都已经很成熟，可以用来制造干细胞嵌合体。对于更详细的说明，参见Manipulating the Mouse Embryo:A LaboratoryManual,第3版(A.Nagy,M.Gertsenstein,K.Vintersten,R.Behringer,Cold SpringHarbor Laboratory Press；2002年12月15日,ISBN-10:0879695919,Nagy et al.,1990,Development 110,815-821；US7576259:Method for making genetic modifications,US7659442,US 7,294,754,Kraus et al.2010,Genesis 48,394-399)。
可使用规律成簇的间隔短回文重复(Clustered Regularly Interspaced ShortPalindromic Repeats，CRISPR)和CRISPR相关(Cas)系统来修复非人类动物(包括小鼠，例如NSG或NRG小鼠)中的C5补体成分结构基因。已经在广泛的细菌和古细菌宿主中鉴定了三种类型(I-III)的CRISPR系统，其中每个系统包含一簇CRISPR相关(Cas)基因、非编码RNA和区别性的重复元件阵列(同向重复)。这些同向重复是由来源于称为原型间隔区(protospacer)的外源DNA靶标的短变异序列间隔开的，并且它们一起构成CRISPR RNA(crRNA)阵列。在所述DNA靶标中，每个原型间隔区与原型间隔区相邻基序(PAM)相关联，其可以根据特定的CRISPR系统而变化。
例如，II型CRISPR-Cas9系统允许在各种真核细胞中的靶向基因切割和基因剪辑。为了轻松地使用CRISPR-Cas9系统操作基因，将天然存在的tracrRNA和crRNA融合成单个合成的‘导向RNA’，将Cas9引导至几乎任何所需的DNA序列。因此，由于CRISPR-Cas9系统中的核酸内切酶切割特异性是由RNA序列导向的，通过改造导向RNA序列并将其与Cas核酸内切酶一起递送至靶细胞，剪辑实际上可以针对任何基因组基因座。合成的导向RNA与20个核苷酸的DNA序列杂交，并且立即位于由Cas9识别的特定基序之前。这导致在所识别的基序上游三个核苷酸处的双链断裂。双链断裂可以启动同源性定向修复，其可以开发为利用外源引入的双链或单链DNA修复模板来修正基因组中的突变，例如修复C5补体结构基因。本领域普通技术人员能够改造Cas系统(例如CRISPR-Cas9系统)的导向RNA序列以靶向非人类动物(包括小鼠，例如NSG或NRG小鼠)的C5补体结构基因，并使用外源引入的双链或单链DNA修复模板来修复C5补体结构基因。
使用本领域中已知的方法制备假孕胚胎受体。简言之，将6-8周龄的可育雌性小鼠与切除输精管的或不育的雄性交配，以诱导有助于支撑手术方式引入的胚胎的荷尔蒙状态。在性交后2.5天(dpc)，将最多达15个含有胚泡的干细胞的引入非常靠近子宫-输卵管连接处的子宫角。对于早期胚胎和桑椹胚，将这些胚胎体外培养成胚泡或根据胚胎阶段将其植入0.5dpc或1.5dpc假孕雌性的输卵管中。来自植入胚胎的嵌合幼仔在转移后16-20天出生，取决于植入时的胚胎年龄。选择嵌合雄性用于繁殖。可以通过皮肤颜色和核酸分析(如PCR、DNA印迹或测序)来分析后代中ES细胞基因组的传递。进一步地，可以例如通过蛋白质分析(如免疫测定或功能测定)分析修复的C5补体成分结构基因的表达中的C5补体成分结构蛋白mRNA或蛋白质表达，以确认C5补体成分结构基因的修复。具有修复的C5补体成分结构基因的后代相互杂交以产生是修复的C5补体成分结构基因纯合型的非人类动物。将转基因小鼠与免疫缺陷小鼠杂交以产生具有修复的C5补体成分结构基因的同基因免疫缺陷株。
评估经遗传修饰的非人类动物以确定C5补体成分结构基因是否被修复以使得非人类动物表达修复的C5补体成分结构基因的方法是公知的，并且包括标准技术，如核酸测定、光谱测定、免疫测定和功能测定。
可以使用一种或多种标准品来定量测定样品中的C5补体成分结构蛋白。
可以进行评估在具有假定修复的C5补体成分结构基因的动物中的功能修复的C5补体成分结构基因的测定。
任选地，通过选择性育种产生本发明的特征在于修复的C5补体成分结构基因的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物。具有第一期望基因型的非人类动物的第一亲本株可以与具有第二期望基因型的非人类动物的第二亲本株繁殖以产生后代，所述后代是具有第一和第二期望的基因型的经遗传修饰的非人类动物。例如，免疫缺陷的并且具有突变的C5补体成分结构基因的第一小鼠可以与具有完整的C5补体成分结构基因的第二小鼠繁殖并进一步遗传杂交以产生免疫缺陷的并且具有修复的C5补体成分结构基因的后代，使得C5补体成分结构基因得以表达，并且该动物具有完整的补体系统并且表现出补体依赖性细胞毒性。
在进一步的实例中，NSG、NRG或NOG小鼠可以与具有完整的C5补体成分结构基因的小鼠繁殖以产生免疫缺陷的并且具有修复的C5补体成分结构基因的后代，使得所产生的小鼠具有完整的补体系统并且表现出补体依赖性细胞毒性。
本发明的各方面提供了经遗传修饰的动物，其基本上在其全部细胞中包括修复的C5补体成分结构基因，以及在一些但不是其全部细胞中包括修复的C5补体成分结构基因的经遗传修饰的动物。
本发明的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物优选地为非人类哺乳动物，特别是啮齿动物，如小鼠、大鼠或豚鼠。
根据本发明各方面产生用于异种移植肿瘤细胞应答的非人类动物模型系统的方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其包含修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物表达C5补体成分结构蛋白并且具有功能性补体系统；和将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物。所述免疫缺陷非人类动物可具有重症联合免疫缺陷、IL2受体γ链缺陷或重症联合免疫缺陷和IL2受体γ链缺陷的组合。
术语“异种移植物”在本文用于宿主细胞或生物体，以指示被称为“异种移植物”的材料是来自除宿主细胞或生物体之外的另一物种。
如本文所用，术语“肿瘤细胞”是指异常增殖的细胞，例如癌细胞。
根据本发明各方面的产生用于异种肿瘤细胞应答的小鼠模型系统的方法包括提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其具有修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构蛋白并且具有功能性补体系统；和将异种肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。所述免疫缺陷小鼠可具有重症联合免疫缺陷、IL2受体γ链缺陷或重症联合免疫缺陷和IL2受体γ链缺陷的组合。
用于给予具有修复的C5补体成分结构基因的经遗传修饰的免疫缺陷动物的肿瘤细胞可以获自受试者的肿瘤活组织检查或尸检样品或者癌细胞系。
将肿瘤细胞给予动物用于异种移植是公知的，例如但不限于肿瘤细胞或肿瘤组织的皮下手术插入，或肿瘤细胞或肿瘤组织的皮下或静脉内注射，参见例如，Morton et al.,Nature Protocols 2,247-250(2007)；以及Fujii et al.,Pathol.Int.,2008,58(9):559-67。
异种移植肿瘤细胞的移植物植入可以通过多种方法中的任一种来评估，例如但不限于肿瘤生长的光学检查，肿瘤细胞不是实体肿瘤形成细胞时的血液取样和分析，以及动物成像如MRI、PET、CT或荧光成像。
用于分离异种移植肿瘤细胞的示例性方法，将异种移植肿瘤细胞给予宿主生物体以及评估移植物植入的方法是公知的。
给予待植入的受体动物的异种移植肿瘤细胞的数量不受限制，并且可以在1个细胞-10亿个细胞的这样细胞的范围内，例如1个细胞-5亿个细胞、1个细胞-1亿个细胞、1个细胞-1000万个细胞、1个细胞-500万个细胞、1个细胞-100万个细胞、1个细胞-500000个细胞、1个细胞-100000个细胞、1个细胞-50000个细胞、1个细胞-10000个细胞或1个细胞-1000个细胞。
根据本发明各方面提供了方法，所述方法包括将抗癌治疗施用于具有修复的C5补体成分结构基因的免疫缺陷动物中的异种移植肿瘤细胞，并分析所述抗癌治疗对所述异种移植肿瘤细胞的效果。
用于评估C5补体成分结构基因缺陷和修复的测定
结合测定任选地用于根据本发明各方面的测定中以评估C5补体成分结构基因缺陷和修复。
术语“结合配偶体”是指能够与靶分析物特异性结合的生物分子。结合配偶体的非限制性实例包括用于靶分析物的酶促作用的抗体、适体、受体、配体和底物。结合配偶体也可以是核酸探针。本领域技术人员可以常规鉴定、分离和/或制备结合配偶体，并将它们用于结合测定。这样的技术对于本领域普通技术人员来说是公知的。
可以根据允许通过结合至结合配偶体来检测一种或多种靶分析物的各种方法中的任一种来进行结合测定。靶分析物和结合剂的结合可以直接或间接检测，例如通过使用可检测标签。
诸如测序、扩增测定和/或杂交测定的核酸测定可用于检测靶分析物的表达。核酸测定包括但不限于扩增反应如聚合酶链式反应(PCR)，如RT-PCR；斑点印迹；原位杂交；RNA印迹；以及RNA酶保护术。这样的测定的细节记载于例如J.Sambrook and D.W.Russell,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory Press；第3版,2001；以及F.M.Ausubel,Ed.,Short Protocols in Molecular Biology,CurrentProtocols；第5版,2002。
能够与靶分析物mRNA或cDNA杂交以检测和/或定量mRNA或cDNA的核酸探针或引物可用于核酸测定。核酸探针可以是长度为至少10、15、30、50或100个核苷酸并且足以在严格条件下与靶mRNA或cDNA或其互补序列特异性杂交的寡核苷酸。核酸引物可以是长度为至少10、15或20个核苷酸并且足以在严格条件下与mRNA或cDNA或其互补序列特异性杂交的寡核苷酸。术语“特异性杂交”和“特异性地杂交”是指特定核酸与靶核酸的杂交，而不与样品中除靶核酸以外的核酸实质性杂交。
杂交和洗涤条件的严格性取决于若干因素，包括探针和靶标的Tm以及杂交和洗涤条件的离子强度，如本领域技术人员所公知的。杂交和实现期望杂交严格性的条件记载于，例如，Sambrook et al.,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,Cold Spring HarborLaboratory Press,2001；以及Ausubel,F.et al.,(Eds.),Short Protocols inMolecular Biology,Wiley,2002。
任选地纯化来自非人类动物的样品用于根据本发明的方法的测定。分离mRNA和/或产生cDNA以用于测定特定序列的方法是本领域中公知的。
术语“核酸”是指具有多于一个核苷酸、以包括单链、双链、寡核苷酸或多核苷酸的任何形式的RNA或DNA分子。术语“核苷酸序列”是指单链形式的核酸中的寡核苷酸或多核苷酸中的核苷酸的排序。
术语“扩增测定”是指用于复制模板核酸，由此产生包含所述模板核酸全部或一部分的拷贝的核酸的方法。
扩增测定法包括那些这样的测定法，即所述测定法包括使用位于靶核酸侧翼的一对引物通过核酸聚合酶催化的模板定向引物延伸，示例性地包括但不限于聚合酶链式反应(PCR)、逆转录PCR(RT-PCR)、连接介导PCR(LM-PCR)、phi-29PCR以及其他核酸扩增方法，例如，C.W.Dieffenbach et al.,PCR Primer:A Laboratory Manual,Cold Spring HarborLaboratory Press,2003；以及V.Demidov et al.,DNA Amplification:CurrentTechnologies and Applications,Taylor&Francis,2004中所描述的。术语“引物”是指单链寡核苷酸，其长度通常约9-60个核苷酸，可以更长或更短，并且作为模板定向DNA合成的起始点。
用于体外核酸扩增方法的合适反应条件包括存在合适的反应组分，包括但不限于聚合酶和三磷酸核苷酸。本领域技术人员将能够仅通过常规实验来确定适合于使用本发明的引物来扩增靶核酸的条件，包括诸如缓冲液、核苷酸、pH、Mg盐浓度、引物浓度和温度的因素的选择。扩增方法的核酸产物任选地含有额外的材料，例如但不限于非靶核酸序列、用于化学反应的官能团以及存在于引物中但不存在于原始DNA模板中的可检测标签。PCR也可以定量PCR(Q-PCR)形式进行，也称为实时PCR或动力学PCR(KPCR)。Q-PCR用于扩增并同时定量靶DNA分子。
术语“定量PCR”或“Q-PCR”是指用于定量聚合酶链式反应结果的各种方法。Q-PCR方法通常决定或比较扩增因子，例如确定阈值循环(Ct)，或者是比较由靶模板和标准模板同时扩增产生的产物量的共同扩增方法。许多Q-PCR技术包括报告探针、嵌入剂染料或两者。报告探针包括但不限于探针(Applied Biosystems)、分子信标、引物、LuxTM引物和FRET引物；嵌入剂染料包括但不限于溴化乙锭、Green I(Molecular Probes)和(Molecular Probes)。
对于DNA样品中的一个或多个特定序列，实时PCR使得既能够检测又能够定量。数量可以是拷贝的绝对数目或者相对于DNA输入或其他标准化基因标准化时的相对量。在实时PCR中检测产物的两种常用方法是：(1)嵌入任何双链DNA的非特异性荧光染料，和(2)由用荧光报告分子标记的寡核苷酸组成的序列特异性DNA探针，所述荧光报告分子仅在探针与其互补的DNA靶标杂交后允许检测。例如使用TaqMan探针。TaqMan探针原理依赖Taq聚合酶的5'-3'核酸外切酶活性，以在与互补靶序列杂交和基于荧光团的检测期间裂解双标记的探针。如在其他实时PCR方法中那样，所得到的荧光信号允许在PCR的指数阶段期间定量测量产物的积累；然而，TaqMan探针显著增加了检测的特异性。TaqMan探针由与寡核苷酸探针的5'端共价连接的荧光团和在3'端处的猝灭剂组成。可获得几种不同的荧光团(例如6-羧基荧光素，缩略词：FAM，或四氯荧光素，缩略词：TET)和猝灭剂(例如四甲基罗丹明，缩略词：TAMRA，或二氢环吡咯并吲哚三肽小沟结合物，缩略词：MGB)。猝灭剂分子在被循环仪光源激发时，通过FRET(荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer))猝灭由荧光团发射的荧光。只要荧光团和猝灭剂靠近，猝灭就会抑制任何荧光信号。
设计TaqMan探针使得它们在由特定的一组引物扩增的DNA区域内退火。由于Taq聚合酶延伸引物并合成新生链(再次，在单链模板上，但是以与图中所示方向相反的方向，即从互补链的3'到5')，聚合酶的5'至3'核酸外切酶活性降解已退火至模板的探针。探针的降解从其中释放荧光团并破坏与猝灭剂的紧密相邻，从而减轻猝灭效应并使荧光团发荧光。因此，在实时PCR热循环仪中检测到的荧光与PCR中释放的荧光团和存在的DNA模板的量成正比。
用于核酸靶标的杂交测定包括但不限于斑点印迹、核酸杂交、小珠测定、原位杂交、RNA印迹、DNA印迹和微阵列测定。这些测定的细节记载于例如J.Sambrook andD.W.Russell,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,Cold Spring HarborLaboratory Press；第3版,2001；以及F.M.Ausubel,Ed.,Short Protocols in MolecularBiology,Current Protocols；第5版,2002。
核酸杂交测定包括使用在确定的杂交和洗涤条件下与靶核酸特异性杂交的核酸探针。术语“探针”涵盖各种长度的核酸序列，通常长度为至少约9至约8000个核苷酸，但是可以更短或更长，只要探针能够在核酸杂交测定中与靶核酸特异性杂交即可。探针可以是单链或双链的，并且可以通过重组方法、化学合成、从天然来源分离或这些中的两种或更多种的组合来产生。
免疫测定方法可用于测定靶分析物，包括但不限于酶联免疫吸附测定(ELISA)、酶联免疫过滤测定(ELIFA)、流式细胞术、免疫印迹、免疫沉淀、免疫组织化学、免疫细胞化学、发光免疫测定法(LIA)，荧光免疫测定法(FLA)和放射免疫测定法。可以使用测定方法来获得定性结果和/或定量结果。用于样品的定性和定量测定的合适测定方法的具体细节记载于标准参考文献中，其示例性地包括E.Harlow and D.Lane,Antibodies:A LaboratoryManual,Cold Spring Harbor Laboratory Press,1988；F.Breitling and S.Diibel,Recombinant Antibodies,John Wiley&Sons,New York,1999；H.Zola,MonoclonalAntibodies:Preparation and Use of Monoclonal Antibodies and EngineeredAntibody Derivatives,Basics:From Background to Bench,BIOS ScientificPublishers,2000；B.K.C.Lo,Antibody Engineering:Methods and Protocols,Methodsin Molecular Biology,Humana Press,2003；F.M.Ausubel et al.,Eds.,ShortProtocols in Molecular Biology,Current Protocols,Wiley,2002；S.Klussman,Ed.,The Aptamer Handbook:Functional Oligonucleotides and Their Applications,Wiley,2006；Ormerod,M.G.,Flow Cytometry:a practical approach,Oxford UniversityPress,2000；Givan,A.L.,Flow Cytometry:first principles,Wiley,New York,2001；Gorczyca,W.,Flow Cytometry in Neoplastic Hematology:morphologic-immunophenotypic correlation,Taylor&Francis,2006；Crowther,J.R.,The ELISAGuidebook(Methods in Molecular Biology),Humana Press,2000；Wild,D.,TheImmunoassay Handbook,第3版,Elsevier Science,2005；以及J.Sambrook andD.W.Russell,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,Cold Spring HarborLaboratory Press,第3版,2001。
抗体和制备抗体的方法是本领域中公知的。如本文所用，术语“抗体(antibody)”和“抗体(antibodies)”涵盖单克隆抗体、多克隆抗体、双特异性抗体、多特异性抗体、人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、骆驼源化抗体(camelized antibody)、单结构域抗体、单链Fv(scFv)、单链抗体、二硫键连接的Fv(sdFv)和抗独特型(抗Id)抗体和任何上述抗体的抗原结合片段。具体而言，抗体包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性片段，即含有抗原结合位点的分子。免疫球蛋白分子可以是任何类型(例如，IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)、类别(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)或亚类的。
如本文所用，术语“抗体片段”和“抗原结合片段”定义了免疫特异性地与靶分析物结合的抗体的片段。可以通过本领域技术人员已知的任何技术产生抗体片段。例如，Fab和F(ab')2片段可以通过使用诸如木瓜蛋白酶(产生Fab片段)或胃蛋白酶(产生F(ab')2片段)的酶，通过对免疫球蛋白分子的蛋白水解裂解来产生。抗体片段也是通过重组DNA技术产生的。
抗体、抗原结合片段、它们的产生方法和筛选所产生的抗体与抗原的基本上特异性的结合的方法是本领域是已知的，并且这些抗体、抗原结合片段和方法进一步详细地描述记载于，例如，Antibody Engineering,Kontermann,R.and Diibel,S.(Eds.),Springer,2001；Harlow,E.and Lane,D.,Antibodies:A Laboratory Manual,Cold Spring HarborLaboratory Press,1988；F.Breitling and S.Diibel,Recombinant Antibodies,JohnWiley&Sons,New York,1999；H.Zola,Monoclonal Antibodies:Preparation and Use ofMonoclonal Antibodies and Engineered Antibody Derivatives,Basics:FromBackground to Bench,BIOS Scientific Publishers,2000；Ausubel,F.et al.,(Eds.),Short Protocols in Molecular Biology,Wiley,2002；J.D.Pound(Ed.)ImmunochemicalProtocols,Methods in Molecular Biology,Humana Press,第2版,1998；B.K.C.Lo(Ed.),Antibody Engineering:Methods and Protocols,Methods in Molecular Biology,Humana Press,2003；以及Kohler,G.和Milstein,C,Nature,256:495-497(1975)。靶分析物的抗体可以是在动物中产生的、合成的、通过重组方法产生的和/或商购的。
适体可以用于测定靶分析物。术语“适体”是指与特定物质基本上特异性结合的肽和/或核酸。在核酸适体的情况下，适体的特征在于与靶标的结合相互作用，其不是Watson/Crick碱基配对或与第二和/或第三核酸结合的三重螺旋结合。例如，这样的结合相互作用可以包括范德华力相互作用、疏水相互作用、氢键和/或静电相互作用。类似地，基于肽的适体的特征在于与靶标的特异性结合，其中所述适体不是所述靶标的天然存在的配体。用于鉴定和产生肽和核酸适体的技术及其用途是本领域中已知的，记载于于例如F.M.Ausubelet al.,Eds.,Short Protocols in Molecular Biology,Current Protocols,Wiley,2002；S.Klussman,Ed.,The Aptamer Handbook:Functional Oligonucleotides andTheir Applications,Wiley,2006；以及J.Sambrook和D.W.Russell,Molecular Cloning:ALaboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory Press,第3版,2001。
通过本领域中已知的各种方法中的任一种来实现检测样品中存在的靶分析物与结合配偶体之间的结合，示例性地包括检测直接或间接连接至靶分析物或结合配偶体的可检测标签。术语“可检测标签”是指能够通过任何适当方法(示例性地包括光谱学、光学、光化学、生物化学、酶学、电学和/或免疫化学)产生指示所述可检测标签存在的信号的材料。可检测标签的实例示例性地包括荧光部分、化学发光部分、生物发光部分、电子致密颗粒、磁性颗粒、酶、底物、放射性同位素和发色团。
所使用的一种或多种特定可检测标签的特性取决于所使用的检测方法。这些检测方法以特定的测定形式纳入，示例性地包括ELISA、蛋白质印迹、免疫沉淀、免疫细胞化学、免疫荧光测定、液相色谱、流式细胞术、本领域中已知的其他检测方法或其组合。
结合测定可以包含与载体连接的结合配偶体。用于结合测定的具有连接的结合配偶体的载体可以是固体或半固体，并且可以是各种材料中的任一种，例如玻璃、硅、纸、合成或天然存在的聚合物(例如聚苯乙烯、聚碳酸酯、聚丙烯、PVDF、尼龙、纤维素、琼脂糖、葡聚糖和聚丙烯酰胺)或任何其他结合配偶体可以稳定地连接于其上以用于结合测定的物质。
所使用的载体可以包括用于与结合配偶体结合的官能团，例如但不限于羧基、胺、氨基、羧酸酯、卤化物、酯、醇、脲、醛、氯甲基、硫氧化物、氮氧化物、环氧和/或甲苯磺酰基官能团。结合配偶体与载体的连接是通过各种方法中的任一种来实现，示例性地包括吸附和化学键合。在一个实例中，1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳化二亚胺盐酸化物、EDC或EDAC化学可用于将结合配偶体连接至颗粒。结合配偶体可以直接或间接地结合到载体的材料上，例如通过键合到设置在载体上的涂层或接头。官能团、官能团的修饰以及结合配偶体与载体的连接是本领域中已知的，例如Fitch,R.M.,Polymer Colloids:A ComprehensiveIntroduction,Academic Press,1997中所描述的。
这样的载体可以是各种形式和形状中的任一种，包括但不限于微量滴定板、微量滴定孔、针、纤维、小珠、载玻片、硅片和膜如硝酸纤维素膜或PVDF膜。
根据本发明各方面，可以使用各种光谱方法中的任一种来测定靶分析物，包括但不限于气相色谱法、液相色谱法、离子迁移率光谱法、质谱法、液相色谱-质谱法(LC-MS或HPLC-MS)、离子迁移率光谱-质谱法、串联质谱法、气相色谱-质谱法、基质辅助解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱法、表面增强激光解离电离(SELDI)和核磁共振光谱法，所有这些都是本领域技术人员所公知的。
任选地，使用光谱测定分析来测定样品中的靶分析物。质量分析可以用于根据本发明各方面的测定中。例如使用飞行时间(TOF)质谱法或傅里叶变换离子回旋共振质谱法进行质量分析。质谱技术是本领域中已知的，并且用于蛋白质和/或肽测定的方法的示例性地详细说明记载于Li J.,et al.,Clin Chem.,48(8):1296-304,2002；Hortin,G.L.,Clinical Chemistry 52:1223-1237,2006；A.L.Burlingame,et al.(Eds.),MassSpectrometry in Biology and Medicine,Humana Press,2000；以及D.M.Desiderio,MassSpectrometry of Peptides,CRC Press,1990。
用于评估抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体对异种移植肿瘤细胞的效果的测定法。
可以使用在活体动物上进行的用于评估抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体对异种移植肿瘤细胞的效果的测定法，例如存活率研究、肿瘤大小和动物体重的测量。
可以通过本领域中已知的各种测定法中的任一种(例如通过用台盼蓝或碘化丙啶染色)来评估肿瘤活组织检查中估异种移植细胞的增殖和活力。
可以进行动物组织和/或血液样品的分析以确定抗癌治疗的毒性以及抗癌治疗的治疗效果。
肿瘤负荷和转移可以通过各种方法中的任一种来评估，例如流式细胞术和/或免疫组织化学。
诸如本文描述的那些结合测定法可以用于评估抗癌治疗对异种移植物的效果，例如检测一种或多种肿瘤生物标志物的测定法。
术语“抗癌治疗性抗体”是已知具有抗癌作用的抗体，所述有抗癌作用至少部分地是由针对至少一种类型的癌细胞的补体依赖性细胞毒性介导的。此类抗体是本领域中已知的，并且示例性地包括利妥昔单抗(rituximab)、曲妥珠单抗(trastuzumab)、阿仑单抗(alemtuzumab)、西妥昔单抗(cetuximab)、帕尼单抗(panitumumab)、卡妥索单抗(catumaxomab)和奥法木单抗(ofatumumab)。
术语“推定的抗癌治疗性抗体”是指这样的抗体，即其抗癌作用可以至少部分地是由针对至少一种类型的癌细胞的补体依赖性细胞毒性介导。用于评估根据本发明各方面提供的抗癌治疗的效果的方法允许确定推定的抗癌治疗性抗体是否具有抗癌作用，所述抗癌作用可以至少部分地是由针对至少一种类型的癌细胞的补体依赖性细胞毒性介导。
抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体可以是适合于通过补体依赖性细胞毒性介导抗癌作用的任何类型的抗体，示例性地包括源自任何动物物种的抗体，所述动物物种如小鼠、大鼠、豚鼠、兔、山羊、绵羊、猪、牛、马、鸡、狗、骆驼、人和非人灵长类。抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体可以是能够通过补体依赖性细胞毒性介导抗癌作用的任何类型的抗体，例如单克隆抗体、多克隆抗体、双特异性抗体、多特异性抗体、人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、骆驼源化抗体、单结构域抗体、单链Fv(scFv)、单链抗体、二硫键连接的Fv(sdFv)和抗独特型(抗Id)抗体和任何上述抗体的能够通过补体依赖性细胞毒性介导抗癌作用的片段。具体而言，抗体包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性片段，其通过补体依赖性细胞毒性介导靶细胞的裂解，即对靶癌细胞的抗癌作用。这样的抗体是能够通过补体依赖性细胞毒性介导靶细胞裂解，即对靶癌细胞的抗癌作用的任何类型(例如IgG和IgM)、类别(例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)或亚类。
标准
适合于测定法的标准是本领域中公知的，并且使用的标准可以是任何适当的标准。
在一个实例中，标准是来自对照动物的可比较样品中的一种或多种肿瘤生物标志物的测定结果。
标准可以是先前在个体对照动物或在对照动物的种群的样品中确定的一种或多种肿瘤生物标志物的参考水平，并且存储在印刷或电子介质中用于回顾和比较在给予抗癌治疗的动物中的一种或多种肿瘤生物标志物的测定结果。
标准可以是获自一个或多个种群的可比较样品中的一个或多个指标的平均水平。“平均水平”是通过对从种群中的每只动物获得的可比较样品中的一个或多个指标的测定来确定的。术语“可比较样品”用于表示所述样本是相同类型的，即每个可比较样品都是例如血清样本。
本发明测定法中在一种或多种靶分析物的水平或表达中检测到的与标准相比的差异可以是一种或多种靶分析物的水平或表达的增加或减少。增加或减少的幅度可以是，例如，标准水平的至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或更多。
测定结果可以通过各种方法的任一种，使用统计学分析来分析，例如通过参数或非参数检验、方差分析、协方差分析、对于多变量分析的逻辑回归、Fisher精确检验、卡方检验、Student’s T检验、Mann-Whitney检验、Wilcoxon符号等级检验、McNemar检验、Friedman检验和Page’s L趋势检验。这些和其他的统计学检验是本领域中公知的，如Hicks,CM,Research Methods for Clinical Therapists:Applied Project Design and Analysis,Churchill Livingstone(publisher)；第5版,2009；以及Freund,RJ et al.,StatisticalMethods,Academic Press；第3版,2010中所记载的。
以下实施例中举例说明了本发明的经遗传修饰的非人类动物、组合物和方法的各方面。提供这些实施例是为了说明的目的，并不应被认为是对本发明组合物和方法范围的限制。
实施例
实施例1
充分补体NSG的产生
NOD小鼠中溶血性补体裂解活性的缺失是由编码C5补体成分的Hc基因中的2个碱基对缺失造成的。终止密码子UGA存在于导致缺乏C5蛋白表达的缺失下游4bp处。通过CBA/Ls雌性与NOD/LT雄性小鼠的异型杂交将由NOD/LT小鼠表达的缺陷型Hc0等位基因(Hc基因座Chr 2)替换为来自CBA的野生型Hc1等位基因，其后是与NOD/Lt小鼠10轮回交以及NOD/Lt小鼠的性染色体的固定。获得纯合的同类系(congenic)小鼠品系，命名为NOD-Hc1，其携带来源于包括Hc1等位基因的CBA/Ls的Chr 2等位基因，即NOD.CBALs-Hc1/LT(品系#004306)，来自杰克逊实验室生物储存库。雄性NOD.CBALs-Hc1/Lt小鼠与来自杰克逊实验室生物储存库的雌性NSG小鼠(品系#005557)交配。
对F1子代小鼠的cDNA进行靶向Sanger测序，捕获Hc基因的外显子5上最高达0.21kb的区域。F1小鼠对于野生型Hc基因(Hc0/Hc1)、Prkdc scid突变和IL2rg null等位基因是杂合型的。然后，将这些杂合型的F1小鼠互交以产生Prkdc scid、IL2rg tm1Su和Hc1等位基因纯合型的NSG小鼠，即NSG-Hc1小鼠，图1A。通过NSG-Hc1小鼠的同胞交配维持该种群。
NSG品系的C5正常等位基因。使用的引物：
引物：寡核苷酸947、寡聚核苷酸945
引物1序列：CAATTAAAGCTTACTATAAGAAGGATTTTACAA(SEQ ID NO:2)
引物2序列：CAAGTTAGATCTAAGCACTAGCTACTCAAACAA(SEQ ID NO:3)
产品大小：0.21kb
MGI登记号：MGI：6305
212bp：BALB/cJ、DBA/1J、B10.D2-H2<d>/nSnJ、C57BL/6J
210bp AKR/J、A/HeJ、B 10.D2-H2<d>/oSnJ、NZB/B1NJ、SWR/J、DBA/2
为了进行Sanger测序和基因分型，由4-6周龄小鼠尾部的2mm切片制备总基因组DNA，其使用95度50mM NaOH加热步骤，随后中和并离心以沉淀碎片。使用以下引物组扩增含有Hc基因的外显子5的210bp产物；正向：CAATTAAAGCTTACTATAAGAAGGATTTTACAA(SEQ IDNO:2)和反向：
CAAGTTAGATCTAAGCACTAGCTACTCAAACAA(SEQ ID NO:3)。切下目的条带，用QIAquick凝胶提取试剂盒(Qiagen)提取凝胶，并在30μl双蒸水中洗脱。如果不需要凝胶提取来分离多个条带，则使用ExoSAP-It(USB，Cleveland，OH)直接清洁PCR产物。使用Nanodrop ND-1000UV分光光度计(Nanodrop Technologies，Wilmington，DE)定量DNA样品。使用BigDye终止循环测序化学作用进行使用基因特异性引物的测序反应，并在AB3703xl(Applied Biosystems Life Technologies，Carlsbad，CA)上解析。从NSG小鼠的链和NSG-Hc1小鼠的链测序cDNA。使用Sequencher 4.9(Gene Codes，Ann Arbor，MI)组装DNA序列。
在杰克逊实验室的12小时黑暗/12小时光照循环中，在修改的障碍条件下，以随意获取的NIH 31M饮食和酸化水饲养所有小鼠。
实施例2
NSG-Hc1小鼠中的补体依赖性细胞毒性的体外表征
收集9-10月龄的雄性BALB/cBy、NSG和NSG-Hc1小鼠的血清，并通过检查1:5稀释的小鼠血清裂解抗体包被的绵羊RBC，即致敏细胞(EA细胞)，的能力来测定小鼠血清中的补体活性水平。绵羊RBC(Cat#10H72)和兔抗血清绵羊RBC(Cat#10K945)购自Grainger。将绵羊RBC(SRBC)清洗并维持在HBSS培养基中。将小鼠全血直接收集到具有血清分离器的BectonDickinson microtainer试管中，并通过在室温下静置15分钟使其凝固。通过离心除去血块，用无菌移液管移出血清。小鼠血清中的补体活性是通过测量各种血清稀释液中的抗体包被的SRBC的裂解来确定。简言之，通过在HBSS中混合等体积的RBC(1×109个细胞/ml)和1:10稀释的抗绵羊RBC兔Ab，并在37℃下孵育30min来制备用抗SRBC抗体(EA细胞)孵育的SRBC细胞。补体活性是通过将HBSS培养基中的25μl的109/ml EA细胞与175μl 1:5稀释的小鼠血清在V底96孔板中混合来测定。用ACK裂解缓冲液或仅用HBSS培养基孵育的EA细胞分别用作阳性和阴性对照。将EA细胞和血清在37℃下孵育1小时，在2500x g下离心10min，测量上清液的OD 405以评估EA细胞裂解。相对于在ACK裂解缓冲液中裂解的细胞(100％裂解)和仅用HBSS孵育的细胞(0％裂解)，计算小鼠血清中补体依赖性裂解百分比。
NSG-Hc1小鼠的血清产生与携带野生型Hc1基因的BALB/cBy小鼠的血清相似的EA细胞裂解水平，图1B。然而，当与携带突变型Hc0等位基因的NSG小鼠的血清孵育时，观察到<0.1％的EA细胞裂解，图1B。该结果验证了NSG-Hc1小鼠中的同类系Hc1等位基因转录了功能性C5蛋白。
实施例3
NSG-Hc1小鼠中补体依赖性细胞毒性的体内表征
在第0天，将年龄匹配的雌性NSG和NSG-Hc1小鼠分成五组(每组5-7只小鼠)，并通过尾静脉注射1×105个有活力的Daudi Burkitt氏淋巴瘤细胞。Daudi细胞购自ATCC(CCL-213)。将Daudi细胞解冻并在含有10％FBS、2mM L-谷氨酰胺、100单位/ml青霉素和100μg/ml链霉素(GIBCO#15140-122)的RPMI-1640培养基(GIBCO#21870)中培养。将Daudi细胞在含有5％CO2的潮湿气氛中在37℃下孵育。改变RPMI生长培养基，并且每两到三天以1:10的比例分传培养物。Daudi细胞活力是由台盼蓝排除法测定。利妥昔单抗(Cat#680563)购自BiogenIdec。未注射肿瘤细胞或利妥昔单抗的小鼠用作另外的对照。在移植物植入后10天，小鼠同龄组腹膜内(IP)注射溶于200μL PBS中的利妥昔单抗(25μg/g)或仅200μLPBS。肿瘤植入的小鼠每周监测三次，并在它们表现出后肢麻痹或出现体重减轻>20％时通过CO2窒息安乐死，随后进行胸部穿刺。通过流式细胞术、组织学和免疫组织化学评估小鼠中的肿瘤负荷和肿瘤侵袭性。通过使用Prism统计学软件提供的Kaplan-Meier曲线分析处理组和对照组之间的存活率的统计学差异。使用Log-Rank检验进行统计学分析，并且在P值<0.05时认为差异是显著的。
体重和后肢麻痹
在注射Daudi细胞后38天，当与利妥昔单抗处理的小鼠相比时，在PBS处理的小鼠中观察到显著的体重减轻和后肢麻痹，图2A。PBS处理的同龄组中的所有小鼠具有>20％的体重减轻或表现出后肢麻痹，并且在植入后42天被安乐死。当与PBS处理的小鼠组相比时，利妥昔单抗处理导致显著的补体非依赖性延迟的体重减轻和后肢麻痹(p<0.05)，图2A。另一方面，在整个研究期间，即植入后52天，在利妥昔单抗处理的NSG-Hc1小鼠中没有观察到体重减轻，表明当用利妥昔单抗处理小鼠时，NSG-Hc1小鼠中的功能性补体系统通过介导针对人类肿瘤细胞的有效CDC活性而显著阻碍体重减轻和后肢麻痹，图2A。
存活率
在注射Daudi细胞后38天，在PBS处理的NSG小鼠(中位生存＝36天)和PBS处理的NSG-Hc1小鼠(中位生存＝38天)之间未观察到总体存活率的显著差异，图2B。当与PBS处理的小鼠同龄组相比时，利妥昔单抗治疗导致NSG小鼠中总体存活率的显著的补体非依赖性增加(中位生存＝46天)(p<0.05)，图2B。另一方面，在整个研究期间，即植入后52天，利妥昔单抗处理的NSG-Hc1小鼠中观察到100％的存活率，表明当用利妥昔单抗处理时，NSG-Hc1小鼠中的功能性补体系统通过介导针对人类肿瘤细胞的有效CDC活性而显著改善小鼠存活率，图2B。
远端转移
对于流式细胞术分析，通过将眶后静脉丛直接穿刺到含有FACS缓冲液(含有2％FBS和0.01％NaN3的PBS)的流量管中来从小鼠收集外周血。然后通过CO2窒息或颈椎脱臼使小鼠安乐死。通过冲洗从股骨收集骨髓。机械解聚后收集脾细胞。使用ACK裂解缓冲液对由血液、脾脏和骨髓制备的单细胞悬浮液进行RBC裂解，并洗涤两次，然后封闭于从Sigma-Aldrich商业购买的兔免疫球蛋白中。使用对于来自BD Biosciences的抗人CD45抗体(克隆HI30)、来自BioLegend的抗小鼠CD45抗体(克隆A20)和抗人CD20抗体(克隆2H7)的荧光缀合抗体对封闭的RBC耗尽的细胞进行染色。所有的表型分析均是使用FACSCalibur(BectonDickinson)通过流式细胞术进行，数据均是通过FlowJo软件进行处理。
在植入后38天，外周血和骨髓中的循环人CD45+Daudi细胞的流式细胞术分析也证实了NSC-Hc1小鼠中CDC介导的抗肿瘤活性，因为当与利妥昔单抗处理的NSG小鼠相比时，本发明人在利妥昔单抗处理的NSG-Hc1小鼠的外周血和骨髓中观察到显著更低数目的人CD45+Daudi细胞(p<0.05)，图3A和图3B。
对于组织学分析，通过CO2窒息接着通过颈椎脱臼或胸部穿刺使小鼠安乐死。对动物进行完整的尸检，并将组织固定在10％中性缓冲福尔马林(NBF)溶液中，包埋在石蜡中并切片成3-5μm。将切片用Mayer氏苏木精和曙红(H&E)或来自Dako的抗人CD45抗体(克隆2B11+PD7/26)染色。使用来自Ventana的DISCOVERY DAB Map Detection Kit(RUO)进行人CD45抗原的定性检测，并使用显微照相机(Olympus BX41)拍摄照片。
此外，如所期望的，在植入后38天小鼠各器官(包括卵巢、肾、肝、脾、肺、淋巴结等)的组织学分析表明，与其他组小鼠相比，来自利妥昔单抗处理的NSG-Hc1小鼠的组织中的Daudi细胞的数目减少，图4A和图4B。
序列
小家鼠C5补体成分结构蛋白氨基酸序列(SEQ ID NO:1)：
MGLWGILCLLIFLDKTWGQEQTYVISAPKILRVGSSENVVIQVHGYTEAFDATLSLKSYPDKKVTFSSGYVNLSPENKFQNAALLTLQPNQVPREESPVSHVYLEVVSKHFSKSKKIPITYNNGILFIHTDKPVYTPDQSVKIRVYSLGDDLKPAKKETVLTFIDPEGSEVDIVEENDYTGIISFPDFKIPSNPKYGVWTIKANYKKDFTTTGTAYFEIKEYVLPRFSVSIELERTFIGYKNFKNFEITVKARYFYNKVVPDAEVYAFFGLREDIKDEEKQMMHKATQAAKLVDGVAQISFDSETAVKELSYNSLEDLNNKYLYIAVTVTESSGGFSEEAEIPGVKYVLSPYTLNLVATPLFVKPGIPFSIKAQVKDSLEQAVGGVPVTLMAQTVDVNQETSDLETKRSITHDTDGVAVFVLNLPSNVTVLKFEIRTDDPELPEENQASKEYEAVAYSSLSQSYIYIAWTENYKPMLVGEYLNIMVTPKSPYIDKITHYNYLILSKGKIVQYGTREKLFSSTYQNINIPVTQNMVPSARLLVYYIVTGEQTAELVADAVWINIEEKCGNQLQVHLSPDEYVYSPGQTVSLDMVTEADSWVALSAVDRAVYKVQGNAKRAMQRVFQALDEKSDLGCGAGGGHDNADVFHLAGLTFLTNANADDSHYRDDSCKEILRSKRNLHLLRQKIEEQAAKYKHSVPKKCCYDGARVNFYETCEERVARVTIGPLCIRAFNECCTIANKIRKESPHKPVQLGRIHIKTLLPVMKADIRSYFPESWLWEIHRVPKRKQLQVTLPDSLTTWEIQGIGISDNGICVADTLKAKVFKEVFLEMNIPYSVVRGEQIQLKGTVYNYMTSGTKFCVKMSAVEGICTSGSSAASLHTSRPSRCVFQRIEGSSSHLVTFTLLPLEIGLHSINFSLETSFGKDILVKTLRVVPEGVKRESYAGVILDPKGIRGIVNRRKEFPYRIPLDLVPKTKVERILSVKGLLVGEFLSTVLSKEGINILTHLPKGSAEAELMSIAPVFYVFHYLEAGNHWNIFYPDTLSKRQSLEKKIKQGVVSVMSYRNADYSYSMWKGASASTWLTAFALRVLGQVAKYVKQDENSICNSLLWLVEKCQLENGSFKENSQYLPIKLQGTLPAEAQEKTLYLTAFSVIGIRKAVDICPTMKIHTALDKADSFLLENTLPSKSTFTLAIVAYALSLGDRTHPRFRLIVSALRKEAFVKGDPPIYRYWRDTLKRPDSSVPSSGTAGMVETTAYALLASLKLKDMNYANPIIKWLSEEQRYGGGFYSTQDTINAIEGLTEYSLLLKQIHLDMDINVAYKHEGDFHKYKVTEKHFLGRPVEVSLNDDLVVSTGYSSGLATVYVKTVVHKISVSEEFCSFYLKIDTQDIEASSHFRLSDSGFKRIIACASYKPSKEESTSGSSHAVMDISLPTGIGANEEDLRALVEGVDQLLTDYQIKDGHVILQLNSIPSRDFLCVRFRIFELFQVGFLNPATFTVYEYHRPDKQCTMIYSISDTRLQKVCEGAACTCVEADCAQLQAEVDLAISADSRKEKACKPETAYAYKVRITSATEENVFVKYTATLLVTYKTGEAADENSEVTFIKKMSCTNANLVKGKQYLIMGKEVLQIKHNFSFKYIYPLDSSTWIEYWPTDTTCPSCQAFVENLNNFAEDLFLNSCE
实施例3
补体分析
试剂
·来自Grainger的绵羊RBC，cat#10H72，20mL
·来自Grainger的兔抗绵羊RBC，Cat#10K945，2mL，用2mL H2O重构，等分试样并冷冻在-80下。
·来自Grainger的豚鼠补体，Cat#10H654，5mL。用5mL蒸馏水重构，等分试样并冷冻在-80下。
·来自Gibco的HBSS，#14025
概述—每个孔将具有总计200μl：175μl的裂解对照或稀释血清和25μl的抗体包被的绵羊RBC。
补体测定方案：
在HBSS中洗涤绵羊RBC(2.5mL/板，25μL/孔)。
制备EA(抗体致敏绵羊红细胞)
·向eppendorf管中加入1×109RBC并与1:10稀释的抗SRBC抗体混合(按比例增加孔的数量；25μl/孔)
·在37℃下孵育30min，然后在350x g下离心减慢5min并重新悬浮在原始体积的HBSS中。
制备样品
·向405μL HBSS中加入120μL血清。加入SRBC后，这将是1:5稀释。这对于三个重复孔来说是足够的血清。
·裂解对照：用于0％裂解，使用HBSS；用于100％裂解，使用ACK缓冲液
制备板
1.对于每个对照、血清和空白将需要三个孔。
2.对照：HBSS为0％，ACK为100％，豚鼠补体1:10稀释，HBSS单独用于板空白。
3.将175μL裂解对照或稀释的血清加入到V底板的它们各自的孔中。
4.向除空白以外的每个孔加入25μl EA悬浮液。
5.盖上板密封盖子，在37℃下孵育1小时，每隔10min轻轻拍打/摇动。
6.在1250x g下离心板5min以沉淀细胞。
7.在96孔ELISA板上从每个孔转移100μL上清液至其相应的孔中，并读取OD540。
计算结果(表示为裂解％)
·以RA＝(样品的绝对值)-(0％裂解孔的绝对值)求出相对吸光度(RA)
·以RBC裂解百分比＝((样品孔的RA)/(100％裂解孔的RA))*100求出裂解％
来自LDS 6564的血清在HBSS中1:5稀释(120μL血清+405μL HBSS)并一式三份进行
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
HBSS(0％) 10NSG
H2O(100％) 12NSG
ACK(100％) 14NSG
GPC 1:5 HBSS(空白)
HBSS(空白) 31NSG-Hc
1Balb 32NSG-Hc
2Balb 33NSG-Hc
3Balb HBSS(空白)
足够的空间运行24份样品(一式三份)，或80份样品(一式两份)。
附加信息：
品系名称：NOD.CBALs-Hc1/LtJ
通用名：NOD.Hc1
外观：白变种，粉红色眼睛
相关基因型：A/A Tyrc/Tyrc
描述：该NOD/Lt同类系品系携带来源于包括Hc1的CBA/Ls的Chr2等位基因。糖尿病发生和发病率与NOD/Lt相同。
发展：将位于Chr.2上的C5溶血性补体从CBA/Ls转移至NOD/Lt，持续10代，替代NOD/Lt中表达的缺陷型Hc0等位基因。T1DR在N10F11代具有纯合的NOD.CBALs-Hc1/Lt。
项
项1.一种经遗传修饰的免疫缺陷的非人类动物，其中所述非人类动物的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
项2.项1的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其中所述动物具有重症联合免疫缺陷。
项3.项1或2的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其中所述动物具有IL2受体γ链缺陷。
项4.项1、2或3中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其中所述动物具有重组活化基因1缺陷。
项5.项1至4中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其中所述动物具有重组活化基因2缺陷。
项6.项1至5中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其中所述动物是小鼠。
项7.项6的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其中所述小鼠为包括scid突变的NOD小鼠。
项8.项7的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其中所述NOD小鼠是scid突变纯合型的。
项9.项6、7或8中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其中所述小鼠为包括Rag1突变的NOD小鼠。
项10.项6至9中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其中所述NOD小鼠是Rag1突变纯合型的。
项11.项6至10中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其中所述小鼠为包含Rag1tm1Mom突变的NOD小鼠。
项12.项6至11中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其中所述NOD小鼠是Rag1tm1Mom突变纯合型的。
项13.项1的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物是NSG-Hc1小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NSG小鼠表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
项14.项1的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物是NRG-Hc1小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NRG小鼠表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
项15.项1的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物是NOG-Hc1小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NOG小鼠表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
项16.项1至15中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其还包含异种移植肿瘤细胞。
项17.项1至16中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，其还包含人异种移植肿瘤细胞。
项18.项1至17中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷非人类动物，还包含一个细胞系的异种移植肿瘤细胞(xenograft tumor cells of a cell line)。
项19.一种产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的非人类动物模型系统的方法，所述方法包括：提供非人类的经遗传修饰的免疫缺陷动物，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述非人类的经遗传修饰的免疫缺陷动物表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；以及将异种移植肿瘤细胞给予所述非人类的经遗传修饰的免疫缺陷动物。
项20.项19的方法，其中所述非人类的经遗传修饰的免疫缺陷具有重症联合免疫缺陷。
项21.项19或20的方法，其中所述非人类的经遗传修饰的免疫缺陷动物具有IL2受体γ链缺陷。
项22.项19、20或21中任一项的方法，其中所述非人类经遗传修饰的免疫缺陷动物具有重组活化基因1缺陷。
项23.项19至22中任一项的方法，其中所述非人类的经遗传修饰的免疫缺陷动物具有重组活化基因2缺陷。
项24.项19至23中任一项的方法，其中所述非人类的经遗传修饰的免疫缺陷动物是小鼠。
项25.项24的方法，其中所述小鼠为NOD小鼠，其包括scid突变并且具有重症联合免疫缺陷。
项26.项25的方法，其中所述NOD小鼠是scid突变纯合型的并且具有重症联合免疫缺陷。
项27.项24、25或26中任一项的方法，其中所述小鼠为NOD小鼠，其包括Rag1突变并且具有RAG 1缺陷。
项28.项24至27中任一项的方法，其中所述NOD小鼠是Rag1突变纯合型的并且具有RAG 1缺陷。
项29.项24至28中任一项的方法，其中所述小鼠是NOD小鼠，其包含Rag1tm1Mom突变并且具有RAG 1缺陷。
项30.项24至29中任一项的方法，其中所述NOD小鼠是Rag1tm1Mom突变纯合型的并且具有RAG 1缺陷。
项30.项24至26中任一项的方法，其中所述小鼠是NSG-Hc1小鼠。
项31.项24和27至30中任一项的方法，其中所述小鼠是NRG-Hc1小鼠。
项32.项24的方法，其中所述小鼠是NOG-Hc1小鼠。
项33.项19至32中任一项的方法，其中所述异种移植肿瘤细胞是人异种移植肿瘤细胞。
项34.项19至33中任一项的方法，其中所述异种移植肿瘤细胞是一个细胞系的异种移植肿瘤细胞。
项35.一种用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的效果的方法，所述方法包括：
提供非人类的经遗传修饰的免疫缺陷动物，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述非人类的经遗传修饰的免疫缺陷动物表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；将异种移植肿瘤细胞给予所述非人类的经遗传修饰的免疫缺陷动物；将抗癌治疗或推定的抗癌治疗给予所述动物；以及测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗的应答。
项36.项35的方法，其中所述抗癌治疗或推定的抗癌治疗是抗体。
项37.项35或36的方法，其中所述非人类的经遗传修饰的免疫缺陷动物具有重症联合免疫缺陷。
项38.项35、36或37的方法，其中所述非人类的经遗传修饰的免疫缺陷动物具有IL2受体γ链缺陷。
项39.项35至38中任一项的方法，其中所述非人类的经遗传修饰的免疫缺陷动物具有重组活化基因1缺陷。
项40.项35至39中任一项的方法，其中所述非人类的经遗传修饰的免疫缺陷动物具有重组活化基因2缺陷。
项41.项35至40中任一项的方法，其中所述非人类的经遗传修饰的免疫缺陷动物是小鼠。
项42.项41的方法，其中所述小鼠是NOD小鼠，其包括scid突变并且具有重症联合免疫缺陷。
项43.项41或42的方法，其中所述NOD小鼠是scid突变纯合型的并且具有重症联合免疫缺陷。
项44.项41、42或43中任一项的方法，其中所述小鼠是NOD小鼠，其包含Rag1tm1Mom突变并且具有RAG 1缺陷。
项45.项41至44中任一项的方法，其中所述NOD小鼠是Rag1tm1Mom突变纯合型的并且具有RAG 1缺陷。
项46.项41、42或43中任一项的方法，其中所述小鼠是NSG-Hc1小鼠。
项47.项41、44或45中任一项的方法，其中所述小鼠是NRG-Hc1小鼠。
项48.项35至47中任一项的方法，其中所述异种移植肿瘤细胞是人异种移植肿瘤细胞。
项49.项35至48中任一项的方法，其中所述异种移植肿瘤细胞是一个细胞系的异种移植肿瘤细胞。
项50.一种经遗传修饰的NSG小鼠，其中所述非人类动物的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NSG小鼠表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，基本上如本文所述。
项51.一种经遗传修饰的NRG小鼠，其中所述非人类动物的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NRG小鼠表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，基本上如本文所述。
项52.一种经遗传修饰的NOG小鼠，其中所述非人类动物的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NOG小鼠表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统，基本上如本文所述。
项53.一种产生用于评估基本上如本文所述的抗癌治疗的非人类动物模型系统的方法。
项54.一种用于在非人类动物模型系统中评估抗癌治疗的效果的方法，基本上如本文所述。
本说明书中提及的任何专利或出版物均通过引用的方式纳入本文，其程度如同具体且单独地指出每个单独的出版物均通过引用的方式纳入。
本文中所述的本发明的非人类动物、组合物和方法目前代表优选的实施方案，是示例性的，并且不旨在限制本发明的范围。本领域技术人员将会想到其中的改变和其他用途。可以进行这样的改变和其他用途而不背离如权利要求书中所阐述的本发明的范围。

Claims (47)

1.一种经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
2.权利要求1的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠具有重症联合免疫缺陷。
3.权利要求1或2的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠具有Ilr2g突变，并且所述小鼠的特征在于IL2受体γ链(ILR2g)缺陷。
4.权利要求1、2或3中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠具有Rag1突变，并且所述小鼠的特征在于重组活化基因1(RAG 1)缺陷。
5.权利要求1至4中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠具有Rag2突变，并且所述小鼠是重组活化基因2(RAG 2)缺陷。
6.权利要求1至5中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠是scid突变纯合型的，并且所述小鼠具有重症联合免疫缺陷。
7.权利要求1至6中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠包含Rag1tm1Mom突变并且具有RAG1缺陷。
8.权利要求1至7中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠是Rag1tm1Mom突变纯合型的并且具有RAG1缺陷。
9.权利要求1至8中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠是免疫缺陷的NOD、A/J、A/He、AKR、DBA/2、NZB/B1N或B10.D2/oSn小鼠。
10.权利要求1至9中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷动物是NSG-Hc1小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NSG小鼠表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、重症联合免疫缺陷和IL2Rg缺陷。
11.权利要求1至9中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷动物是NRG-Hc1小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NRG小鼠表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、RAG 1缺陷和IL2Rg缺陷。
12.权利要求1至9中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷动物是NOG-Hc1小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NOG小鼠表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、重症联合免疫缺陷和IL2Rg缺陷。
13.权利要求1至12中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其还包含异种移植肿瘤细胞。
14.权利要求1至13中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其还包含人异种移植肿瘤细胞。
15.权利要求1至14中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，还包含一个细胞系的异种移植肿瘤细胞。
16.一种产生用于评估抗癌治疗或推定的抗癌治疗的小鼠模型系统的方法，所述方法包括：
提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；以及
将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠。
17.权利要求16的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠具有重症联合免疫缺陷。
18.权利要求16或17的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠具有Ilr2g突变，并且所述小鼠的特征在于IL2受体γ链(ILR2g)缺陷。
19.权利要求16、17或18中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠具有Rag1突变，并且所述小鼠的特征在于重组活化基因1(RAG 1)缺陷。
20.权利要求16至19中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠具有Rag2突变，并且所述小鼠是重组活化基因2(RAG 2)缺陷。
21.权利要求16至20中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠是scid突变纯合型的，并且所述小鼠具有重症联合免疫缺陷。
22.权利要求16至21中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠包含Rag1tm1Mom突变并且具有RAG1缺陷。
23.权利要求16至22中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠是Rag1tm1Mom突变纯合型的并且具有RAG1缺陷。
24.权利要求16至23中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠是免疫缺陷的NOD、A/J、A/He、AKR、DBA/2、NZB/B1N或B10.D2/oSn小鼠。
25.权利要求16至24中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷动物是经遗传修饰的NSG小鼠NSG-Hc1，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NSG小鼠NSG-Hc1表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、重症联合免疫缺陷和IL2Rg缺陷。
26.权利要求16至24中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷动物是经遗传修饰的NRG小鼠NRG-Hc1，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NRG小鼠NRG-Hc1表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、RAG 1缺陷和IL2Rg缺陷。
27.权利要求16至24中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷动物是经遗传修饰的NOG小鼠NOG-Hc1，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NOG小鼠NOG-Hc1表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、重症联合免疫缺陷和IL2Rg缺陷。
28.权利要求16至27中任一项的方法，其中所述异种移植肿瘤细胞是人异种移植肿瘤细胞。
29.权利要求16至28中任一项的方法，其中所述异种移植肿瘤细胞是一个细胞系的异种移植肿瘤细胞。
30.一种用于评估抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体的效果的方法，所述方法包括：
提供经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统；
将异种移植肿瘤细胞给予所述经遗传修饰的免疫缺陷小鼠；
将抗癌治疗性抗体或推定的抗癌治疗性抗体给予所述小鼠；以及
测定所述异种移植肿瘤细胞对所述抗癌治疗性抗体的应答。
31.权利要求30的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠具有重症联合免疫缺陷。
32.权利要求30或31的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠具有Ilr2g突变，并且所述小鼠的特征在于IL2受体γ链(ILR2g)缺陷。
33.权利要求30、31或32中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠具有Rag1突变，并且所述小鼠的特征在于重组活化基因1(RAG 1)缺陷。
34.权利要求30至33中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠具有Rag2突变，并且所述小鼠是重组活化基因2(RAG 2)缺陷。
35.权利要求30至34中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠是scid突变纯合型的，并且所述小鼠具有重症联合免疫缺陷。
36.权利要求30至35中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠包含Rag1tm1Mom突变并且具有RAG1缺陷。
37.权利要求30至36中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠是Rag1tm1Mom突变纯合型的并且具有RAG1缺陷。
38.权利要求30至37中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述小鼠是免疫缺陷的NOD、A/J、A/He、AKR、DBA/2、NZB/B1N或B10.D2/oSn小鼠。
39.权利要求30至38中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷动物是经遗传修饰的NSG小鼠NSG-Hc1，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NSG小鼠NSG-Hc1表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、重症联合免疫缺陷和IL2Rg缺陷。
40.权利要求30至38中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷动物是经遗传修饰的NRG小鼠NRG-Hc1，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NRG小鼠NRG-Hc1表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、RAG 1缺陷和IL2Rg缺陷。
41.权利要求30至38中任一项的经遗传修饰的免疫缺陷小鼠，其中所述经遗传修饰的免疫缺陷动物是经遗传修饰的NOG小鼠NOG-Hc1，其包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NOG小鼠NOG-Hc1表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统、重症联合免疫缺陷和IL2Rg缺陷。
42.权利要求30至41中任一项的方法，其中所述异种移植肿瘤细胞是人异种移植肿瘤细胞。
43.权利要求30至42中任一项的方法，其中所述异种移植肿瘤细胞是一个细胞系的异种移植肿瘤细胞。
44.一种经遗传修饰的NOD小鼠，其中所述小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NOD小鼠表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
45.一种经遗传修饰的NOD小鼠，其中所述小鼠的基因组包括修复的C5补体成分结构基因，使得所述经遗传修饰的NOD小鼠表达所述C5补体成分结构基因并且特征在于完整的补体系统。
46.一种产生用于评估基本上如本文所述的抗癌治疗或推定的抗癌治疗的非人类动物模型系统的方法。
47.一种用于在非人类动物模型系统中评估基本上如本文所述的抗癌治疗或推定的抗癌治疗的效果的方法。
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