CN108124797A - 海胆专用震荡式取卵器及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种海胆专用震荡式取卵器及其使用方法，属于海胆生殖研究技术领域，取卵器包括电动震荡圆筒主体，电动震荡圆筒主体下表面外边沿连接有支架底座，电动震荡圆筒主体下表面中心连接有电动循环冲刷采集机构，支架底座一侧固接有电动循环水泵，电动循环冲刷采集机构下方设有卵粒收集器皿。上述取卵器及其使用方法采用电动循环冲刷收集卵粒，且配合电动震荡促进排卵，实现自动化程度高的取卵方法，以自动化装置代替密集的人工活动，降低生产成本，且取卵效率高，对卵粒伤害小。
Description
技术领域
本发明属于海胆生殖研究技术领域，具体涉及一种海胆专用震荡式取卵器及其使用方法。
背景技术
海胆属棘皮动物门（Echinodermata）海胆纲（Echinoidea）。目前世界上已发现的海胆有850余种，我国约有100余种，但是大部分海胆不能食用，可食用的经济海胆只不过10余种，主要有虾夷马粪海胆、光棘球海胆、马粪海胆、紫海胆、白棘三列海胆、海刺猬等。由于海胆具有较高的食用价值、药用价值和经济价值，其中的经济种类自20世纪50年代以来也成为美国、日本等发达国家的渔业资源，近年来被作为主要增养殖品种之一。
因此，我国乃至全球对海胆的增养殖活动越来越频繁，人工采集精卵已经成为实验室研究和生产实践中必不可少的操作。目前常用的取精卵方法为剖取性腺释放精卵、水流刺激海胆壳体排放精卵、药物注射刺激排放精卵等方式方法。
上述方式方法均存在无法脱离手工操作程序、费时费力，又或者具有所取精卵质量不好等等缺点。目前行业内亟需解决上述问题，开发一种自动采集海胆精卵的装置或者方式方法，以提高行业内该操作的效率。
发明内容
本发明的目的之一在于提供一种以自动化采集代替密集人工采集的装置，可有效节省人力物力消耗，降低生产成本，且取卵效率高，对卵粒的收集率高，所采集的卵粒质量好，对海胆的伤害小的海胆专用震荡式取卵器。
本发明的目的之二在于提供一种使用方法简单、可视化、自动化程度高，采集效率高，采集可靠性高，所采集的卵粒具有较高生物活性，采集过程对海胆伤害小的海胆专用震荡式取卵器的使用方法。
本发明为解决上述技术问题所采取的方案为：海胆专用震荡式取卵器，包括电动震荡圆筒主体，电动震荡圆筒主体下表面外边沿连接有支架底座，电动震荡圆筒主体下表面中心连接有电动循环冲刷采集机构，支架底座一侧固接有电动循环水泵，电动循环水泵连接于电动循环冲刷采集机构，电动循环冲刷采集机构下方设有卵粒收集器皿。电动震荡圆筒主体用于放置待取卵的海胆，支架底座处于电动震荡圆筒主体正下方，支架底座具有支撑电动震荡圆筒主体的作用，且支架底座为内部中空，具有足够的空间容纳电动循环冲刷采集机构，减少外界环境对取卵的影响，电动循环水泵为循环冲刷提供动力，卵粒收集器皿用于存放收集卵粒，便于收集卵粒的取拿存放。上述取卵器采用电动循环冲刷收集卵粒，且配合电动震荡促进排卵，实现自动化程度高的取卵方法，以自动化装置代替密集的人工活动，降低生产成本，且取卵效率高，对卵粒伤害小。
作为优选，电动震荡圆筒主体包括圆筒，圆筒为上端敞口的圆柱形筒状结构，圆筒的下端中心设有同心圆洞口，圆筒内部通过弹簧组连接有电动震荡承托，圆筒上端连接有弹性固着片。圆筒下端设有同心圆洞口，使得圆筒下端呈半封闭状，提高与电动循环冲刷采集机构的连接配合度。电动震荡承托和弹性固着片用于放置和固定海胆，提高卵粒收集便利性。
作为优选，电动震荡承托一侧连接有电动机，电动震荡承托下端为镂空，镂空位置处于圆筒下端设有的同心圆洞口的正上方。通过电动机传输的震动，使得与弹簧组连接的电动震荡承托发生震动，使得置于电动震荡承托内待采集卵粒的海胆发生低频震动，促使刺激排卵试剂均布与雌性海胆性腺表面，最大程度的接触、渗透，使得性腺发生收缩，继而排出卵粒，保证了卵粒采集的正常进行。
作为优选，弹性固着片尾端连接于圆筒内壁上端，弹性固着片首端通过弹性材料连接于圆筒内壁，弹性固着片首端连接有开口向下的按压管，按压管由管壁围绕形成管内空间，管壁的两端厚度比H1:H2为1:2.2~3.1。弹性材料对弹性固着片施加了向下的拉力，使得弹性固着片具有向下按压的功能，用于固定海胆，弹性固着片表面连接的按压管，可用于放置海胆表面的棘，加强对海胆的固定，且管壁的两端设有的厚度比使得管内空间具有与棘贴合的斜度，有效避免了在固定海胆时对海胆产生伤害，提高本取卵器对动物的保护性，有利于实现经济和生态的同步发展。
作为优选，电动循环冲刷采集机构包括电动循环冲刷采集漏斗，电动循环冲刷采集漏斗上端设置于电动震荡圆筒主体内部，电动循环冲刷采集漏斗下端连接有卵粒收集管，电动循环冲刷采集漏斗为上端敞口、下端细窄的漏斗状结构，有利于循环水实现上下循环，进而收集卵粒，上述水体循环收集卵粒的方法对卵粒伤害小，使得所收集的卵粒质量高，且循环水体使得卵粒和杂质分离，提高卵粒收集纯度。
作为优选，卵粒收集管上端通过进水管连接至电动循环水泵，进水管包括穿过并固着于卵粒收集管的滤水区，滤水区管口连接有过滤网，滤水区尾部连接有盛水区，盛水区为向下凹陷的半圆形，盛水区连接有抽水区，抽水区上边沿延伸至盛水区内部，抽水区尾部连接至电动循环水泵。卵粒收集管上端连接的进水管，为电动循环水泵提供循环进水。过滤网有效阻挡了卵粒进入进水管，提高了卵粒收集率，与卵粒收集管直接连接的滤水区，处于倾斜向下状态，由于水位高低差，使得在电动循环水泵未工作时，卵粒收集管内的水也可向滤水区内部流入，流入的水进入盛水区进行储存，不仅节省了电动循环水泵的用电量，还可在需要水体循环时保证能有水体吸入，避免了进水管内部发生空吸现象，提高了电动循环冲刷采集机构的工作可靠性；抽水区上边沿延伸至盛水区内部，避免在电动循环水泵未工作时，因卵粒收集管内部水体流动给进水管带来的水体波动而冲击电动循环水泵，延长了电动循环水泵的使用寿命；盛水区为向下凹陷的半圆形，在电动循环水泵工作时，水体经过过滤网进入滤水区，后从盛水区一边流入，盛水区的弧边使得水体的动能损耗极小，水体凭借流入过程重力势能转化为动能所获得的动力而冲入抽水区内部，减少了水体流动所需的压力差，降低了电动循环水泵工作能耗，节省能源消耗。
作为优选，卵粒收集管通过进水管连接至电动循环水泵，卵粒收集管下端连接有软管，软管表面连接有弹性夹扣，软管下端悬浮于卵粒收集器皿开口上端或内部。弹性夹扣控制软管的通塞，从而控制取卵器的工作状态，人为操作便利、可观，软管可将卵粒直接排入卵粒收集器皿，无需过多流程，减少了卵粒的能量损耗，提高所收集的卵粒的质量。
作为优选，电动循环冲刷采集漏斗上端外边沿固着有导水管，导水管表面设有1~10个冲水短管，导水管一侧通过出水管连接至电动循环水泵。电动循环水泵将水体通过出水管压入导水管内部，设置于导水管表面的冲水短管将导水管内部的水体喷洒至海胆，用于冲刷海胆排出的卵粒，从而将卵粒收集，避免了需人工收集排出的卵粒，提高取卵器自动化程度。冲水短管设置的个数可根据实际需求设定，使得本装置既能物尽其用，又能节省装置材料。
作为优选，冲水短管的出口由多个出水口组成，冲水短管穿过电动循环冲刷采集漏斗倾斜设置，冲水短管的出水方向为朝向电动循环冲刷采集漏斗内侧且倾斜向上15°~85°。多个出水口使得冲水短管喷洒出的水体较为分散，降低了水体冲力对海胆和卵粒的伤害，提高所采集的卵粒的质量，向内倾斜设置的冲水短管可实现向海胆冲水，且冲水距离为电动震荡承托的半径，即向放置在电动震荡承托中心的海胆冲击，根据公式，式中，P为水压， 为水体密度，g为重力加速度，r为电动震荡承托半径，L为冲水短管长度， 为冲水短管倾斜角度，可得电动震荡承托半径和冲水短管长度在符合实际应用的情况下，冲水短管的向上倾斜角度优选为15°~85°，此倾斜角度下，水体不仅能恰好对海胆进行冲刷，提高卵粒的收集率，且冲刷水压较小，对海胆和卵粒的冲击力小，有利于收集无损伤的高质量卵粒，且降低对海胆的伤害，提高本取卵器对动物的保护性，有利于实现经济和生态的同步发展。
电动循环冲刷采集漏斗嵌套于圆筒下端的同心圆洞口中，电动循环冲刷采集漏斗上端固定于同心圆洞口上方的圆筒内部，电动循环冲刷采集漏斗下端穿过同心圆洞口设置于圆筒正下方，上述连接避免了循环水体冲刷飞溅出圆筒，提高了取卵器工作环境的整洁性，也避免了海胆排出的卵粒流失，提高了本取卵器对卵粒的收集率。
海胆专用震荡式取卵器的使用方法，包括以下步骤：
1）关闭弹性夹扣使软管闭塞，向电动循环冲刷采集漏斗内注满经灭菌消毒的人工海水；
2）取性成熟的雌性海胆，使用注射器从其生殖孔一侧柔软处向壳内注射刺激排卵试剂5~10ml；
3）将注射后的海胆背面向下，置于取卵器圆筒内的电动震荡承托上，海胆生殖孔对准电动循环冲刷采集漏斗敞口端，将弹性固着片扣压在海胆上方使其固定于电动震荡承托上；
4）启动与电动震荡承托连接的电动机，使海胆随电动震荡承托产生低频震荡；
5）启动电动循环水泵使水流冲刷海胆口器部位；
6）海胆排出卵粒经水流冲刷沉入卵粒收集管内，待卵粒收集管内收集一定体积的卵粒后，即关闭电动循环水泵电源，打开软管的弹性夹扣，将卵粒释放到卵粒收集器皿内，保存。上述使用方法采用震荡使刺激排卵试剂均布于雌性海胆性腺表面，最大程度的接触和渗透入性腺，使得性腺发生收缩，继而排出卵粒，所得的卵粒纯度高、质量好。整个使用方法简单，采集过程可视化程度高，便于观察研究与应急措施的实施。取卵器采用电动循环冲刷使得人工海水不断冲刷排出的卵粒并进而收集至采集管中，全程自动化程度高，卵粒收集效率高、可靠性高，海胆排出的卵粒通过水体被快速转移至卵粒收纳器皿，减少外界环境对卵粒的刺激，使所采集的卵粒保持较高生物活性，且具有较强的受精能力，也便于后续对卵粒的保存和使用。
作为优选，刺激排卵试剂为多盐水溶液，多盐水溶液的溶质组分包括KCl和Na3C6H5O7，KCl的浓度为0.65~1.25 mol·L-1，Na3C6H5O7 的浓度为0.04~0.23 mol·L-1。上述刺激排卵试剂中KCl和Na3C6H5O7可以促进性腺收缩，从而促进排卵，上述浓度可使海胆进行顺畅的排卵，且不会对海胆性腺造成过大的刺激压力，对海胆的伤害小，有利于海胆性腺维持正常功能。
与现有技术相比，本发明的有益效果为:1）上述取卵器采用电动循环冲刷收集卵粒，且配合电动震荡促进排卵，实现自动化程度高的取卵方法，以自动化装置代替密集的人工活动，降低生产成本；2）弹性固着片实现了海胆的强力固定，且贴合海胆的棘，对海胆无伤害；3）进水管提高了电动循环冲刷采集机构的工作可靠性，延长了电动循环水泵的使用寿命，降低了电动循环水泵工作能耗，节省能源消耗；4）冲击短管喷洒的水体不仅能恰好对海胆进行冲刷，提高卵粒的收集率，且冲刷水压较小，对海胆和卵粒的冲击力小；5）海胆专用震荡式取卵器的使用方法简单，可视化、自动化程度高，采集了卵粒活性高，便于卵粒的收集和保存。
本发明采用了上述技术方案提供一种海胆专用震荡式取卵器及其使用方法，弥补了现有技术的不足，设计合理，操作方便。
附图说明
图1为本发明实施例1的取卵器结构示意图；
图2为本发明取卵器结构示意图；
图3为本发明电动震荡圆筒主体结构示意图；
图4为本发明冲水短管的出水口示意图；
图5为本发明卵粒收集管与进水管的连接示意图；
图6为本发明弹性固着片与按压管的连接示意图；
图7为本发明按压管的截面图；
图8为本发明实施例5受精率示图；
图9为本发明实施例5畸形率示图。
附图标记说明：1电动震荡圆筒主体；2电动循环冲刷采集漏斗；3支架底座；4圆筒；5电动震荡承托；6弹性固着片；7弹簧组；8电动机；9弹性材料；10导水管；11电动循环水泵；12软管；13卵粒收集器皿；14卵粒收集管；15冲水短管；15a出水口；16过滤网；17弹性夹扣；18进水管；18a滤水区；18b盛水区；18c抽水区；19出水管；20按压管；20a管内空间；20b管壁；21微电流源。
具体实施方式
以下结合附图和实施例作进一步详细描述：
实施例1：
如图1所示，海胆专用震荡式取卵器，包括电动震荡圆筒主体1，电动震荡圆筒主体1下表面外边沿连接有支架底座3，电动震荡圆筒主体1下表面中心连接有电动循环冲刷采集机构，支架底座3一侧固接有电动循环水泵11，电动循环水泵11连接于电动循环冲刷采集机构，电动循环冲刷采集机构下方设有卵粒收集器皿13。电动震荡圆筒主体1用于放置待取卵的海胆，支架底座3处于电动震荡圆筒主体1正下方，支架底座3具有支撑电动震荡圆筒主体1的作用，且支架底座3为内部中空，具有足够的空间容纳电动循环冲刷采集机构，减少外界环境对取卵的影响，电动循环水泵11为循环冲刷提供动力，卵粒收集器皿13用于存放收集卵粒，便于收集卵粒的取拿存放。上述取卵器采用电动循环冲刷收集卵粒，且配合电动震荡促进排卵，实现自动化程度高的取卵方法，以自动化装置代替密集的人工活动，降低生产成本，且取卵效率高，对卵粒伤害小。
电动震荡圆筒主体1包括圆筒4，圆筒4为上端敞口的圆柱形筒状结构，圆筒4的下端中心设有同心圆洞口，圆筒4内部通过弹簧组7连接有电动震荡承托5，圆筒4上端连接有弹性固着片6。圆筒4下端设有同心圆洞口，使得圆筒4下端呈半封闭状，提高与电动循环冲刷采集机构的连接配合度。电动震荡承托5和弹性固着片6用于放置和固定海胆，提高卵粒收集便利性。
电动震荡承托5一侧连接有电动机8，电动震荡承托5下端为镂空，镂空位置处于圆筒4下端设有的同心圆洞口的正上方。通过电动机8传输的震动，使得与弹簧组7连接的电动震荡承托5发生震动，使得置于电动震荡承托5内待采集卵粒的海胆发生低频震动，促使刺激排卵试剂均布与雌性海胆性腺表面，最大程度的接触、渗透，使得性腺发生收缩，继而排出卵粒，保证了卵粒采集的正常进行。
电动循环冲刷采集机构包括电动循环冲刷采集漏斗2，电动循环冲刷采集漏斗2上端设置于电动震荡圆筒主体1内部，电动循环冲刷采集漏斗2下端连接有卵粒收集管14，电动循环冲刷采集漏斗2为上端敞口、下端细窄的漏斗状结构，有利于循环水实现上下循环，进而收集卵粒，上述水体循环收集卵粒的方法对卵粒伤害小，使得所收集的卵粒质量高，且循环水体使得卵粒和杂质分离，提高卵粒收集纯度。
卵粒收集管14上端通过进水管18连接有电动循环水泵11，卵粒收集管14下端连接有软管12，软管12表面连接有弹性夹扣17，软管12下端悬浮于卵粒收集器皿13开口上端或内部。弹性夹扣17控制软管12的通塞，从而控制取卵器的工作状态，人为操作便利、可观，软管12可将卵粒直接排入卵粒收集器皿13，无需过多流程，减少了卵粒的能量损耗，提高所收集的卵粒的质量。
电动循环冲刷采集漏斗2上端外边沿固着有导水管10，导水管10表面设有1~10个冲水短管15，导水管10一侧通过出水管19连接有电动循环水泵11。电动循环水泵11将水体通过出水管19压入导水管10内部，设置于导水管10表面的冲水短管15将导水管10内部的水体喷洒至海胆，用于冲刷海胆排出的卵粒，从而将卵粒收集，避免了需人工收集排出的卵粒，提高取卵器自动化程度。冲水短管15设置的个数可根据实际需求设定，使得本装置既能物尽其用，又能节省装置材料。
电动循环冲刷采集漏斗2嵌套于圆筒4下端的同心圆洞口中，电动循环冲刷采集漏斗2上端固定于同心圆洞口上方的圆筒4内部，电动循环冲刷采集漏斗2下端穿过同心圆洞口设置于圆筒4正下方，上述连接避免了循环水体冲刷飞溅出圆筒4，提高了取卵器工作环境的整洁性，也避免了海胆排出的卵粒流失，提高了本取卵器对卵粒的收集率。
本实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，在此不作详细叙述。
实施例2：
如图2~7所示，本实施例在实施例1的基础上，进一步优化方案为：弹性固着片6尾端连接于圆筒4内壁上端，弹性固着片6首端通过弹性材料9连接于圆筒4内壁，弹性固着片6首端连接有开口向下的按压管20，按压管20由管壁20b围绕形成管内空间20a，管壁20b的两端厚度比H1:H2为1:2.2~3.1。弹性材料9对弹性固着片6施加了向下的拉力，使得弹性固着片6具有向下按压的功能，用于固定海胆，弹性固着片6表面连接的按压管20，可用于放置海胆表面的棘，加强对海胆的固定，且管壁20b的两端设有的厚度比使得管内空间20a具有与棘贴合的斜度，有效避免了在固定海胆时对海胆产生伤害，提高本取卵器对动物的保护性，有利于实现经济和生态的同步发展。
圆筒4内部一侧固定有微电流源21，微电流源21的正负电源线通过电阻连接在电动震荡承托5对称边沿，微电流源21输出2~5μA恒定电流，电流输出频率为0.1~0.2Hz。当待取卵海胆安放在电动震荡承托5上时，微电流源21即开始工作，排卵前微电流的刺激，促进海胆血管扩张，加速血液循环，舒缓因人为取卵操作给海胆带来的神经紧张反应，降低海胆性腺对外界添加的刺激排卵试剂的排斥反应，增加刺激排卵试剂对性腺的渗透，促进性腺发生收缩，提高卵粒收集成功率以及效率；在雌性海胆排出卵粒时，微电流作用于卵子，可有效防止处于外界环境的卵子受到紫外线的影响，在外界环境中的紫外线作用于DNA时，微电流能够阻断同一条多核苷酸链内相邻的胸腺嘧啶之间相互联结，其具体阻断机制尚不明确，阻断后可有效避免联结产物胸腺嘧啶二聚体对卵子的影响，减少紫外线对卵子的刺激，具有意想不到的保持卵子较高的遗传活性和活力的作用，使收集所得的卵粒具有高生物活性、高质量和较强的受精能力。
卵粒收集管14上端通过进水管18连接有电动循环水泵11，进水管18包括穿过并固着于卵粒收集管14的滤水区18a，滤水区18a管口连接有过滤网16，滤水区18a尾部连接有盛水区18b，盛水区18b为向下凹陷的半圆形，盛水区18b连接有抽水区18c，抽水区18c上边沿延伸至盛水区18b内部，抽水区18c尾部连接至电动循环水泵11。卵粒收集管14上端连接的进水管18，为电动循环水泵11提供循环进水。过滤网16有效阻挡了卵粒进入进水管18，提高了卵粒收集率，与卵粒收集管14直接连接的滤水区18a，处于倾斜向下状态，由于水位高低差，使得在电动循环水泵11未工作时，卵粒收集管14内的水也可向滤水区18a内部流入，流入的水进入盛水区18b进行储存，不仅节省了电动循环水泵11的用电量，还可在需要水体循环时保证能有水体吸入，避免了进水管18内部发生空吸现象，提高了电动循环冲刷采集机构的工作可靠性；抽水区18c上边沿延伸至盛水区18b内部，避免在电动循环水泵11未工作时，因卵粒收集管14内部水体流动给进水管18带来的水体波动而冲击电动循环水泵11，延长了电动循环水泵11的使用寿命；盛水区18b为向下凹陷的半圆形，在电动循环水泵11工作时，水体经过过滤网16进入滤水区18a，后从盛水区18b一边流入，盛水区18b的弧边使得水体的动能损耗极小，水体凭借流入过程重力势能转化为动能所获得的动力而冲入抽水区18c内部，减少了水体流动所需的压力差，降低了电动循环水泵11工作能耗，节省能源消耗。
冲水短管15的出口由多个出水口15a组成，冲水短管15穿过电动循环冲刷采集漏斗2倾斜设置，冲水短管15的出水方向为朝向电动循环冲刷采集漏斗2内侧且倾斜向上15~85°。多个出水口15a使得冲水短管15喷洒出的水体较为分散，降低了水体冲力对海胆和卵粒的伤害，提高所采集的卵粒的质量，向内倾斜设置的冲水短管15可实现向海胆冲水，且冲水距离为电动震荡承托5的半径，即向放置在电动震荡承托5中心的海胆冲击，根据公式，式中，P为水压， 为水体密度，g为重力加速度，r为电动震荡承托5半径，L为冲水短管15长度， 为冲水短管15倾斜角度，可得电动震荡承托5半径和冲水短管15长度在符合实际应用的情况下，冲水短管15的向上倾斜角度优选为15~85°，此倾斜角度下，水体不仅能恰好对海胆进行冲刷，提高卵粒的收集率，且冲刷水压较小，对海胆和卵粒的冲击力小，有利于收集无损伤的高质量卵粒，且降低对海胆的伤害，提高本取卵器对动物的保护性，有利于实现经济和生态的同步发展。
本实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，在此不作详细叙述。
实施例3：
如图2~7所示，海胆专用震荡式取卵器，在本实施例中对取卵器优选参数设置如下：
1）电动机8功率为30w，震荡频率为200次/min；
2）电动循环水泵11的排水流量为300 ml/min；
3）电动震荡承托5托盘直径为3cm；
4）按压管17的管壁17b两端厚度比H1:H2优选为1:2.5；
5）导水管10表面设有的冲水短管15个数优选为3个，冲水短管15向上倾斜角度优选为45°；
6）微电流源18输出3.8μA恒定电流，电流输出频率为0.1Hz
上述优选参数设置可使海胆专用震荡式取卵器达到优异的取卵效果，能够实现自动化程度高的高效率、高质量的取卵。
本实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，在此不作详细叙述。
实施例4：
海胆专用震荡式取卵器的使用方法，其优选使用方法包括以下步骤：
1）关闭弹性夹扣使软管闭塞，向电动循环冲刷采集漏斗内注满经灭菌消毒的人工海水；
2）取直径为5cm的性成熟的雌性海胆一枚，使用注射器从其背侧柔软处向壳内注射刺激排卵试剂8ml；
3）将注射后的海胆背面向下，置于取卵器圆筒内的电动震荡承托上，海胆生殖孔对准电动循环冲刷采集漏斗敞口端，将弹性固着片扣压在海胆腹面，使其固定于电动震荡承托上；
4）启动微电流源，使电动震荡承托上带有电流为3.8μA，频率为0.1Hz的恒定电流，使取卵过程中海胆受到微电流作用；
5）启动与电动震荡承托连接的电动机，使海胆随电动震荡承托产生低频震荡；
6）启动电动循环水泵使水流冲刷海胆口器部位；
7）海胆排出卵粒经水流冲刷沉入卵粒收集管内，待10min卵粒收集管中收集3ml左右的卵粒后，即关闭电动循环水泵电源，打开软管的弹性夹扣，将卵粒释放到卵粒收集器皿内，保存。上述使用方法采用震荡使刺激排卵试剂均布于雌性海胆性腺表面，最大程度的接触和渗透入性腺，使得性腺发生收缩，继而排出卵粒，所得的卵粒质量好。整个使用方法简单，采集过程可视化程度高，便于观察研究与应急措施的实施。取卵器采用电动循环冲刷使得人工海水不断冲刷排出的卵粒并进而收集至采集管中，全程自动化程度高，卵粒收集效率高，海胆排出的卵粒通过水体被快速转移至卵粒收纳器皿，减少外界环境对卵粒的刺激，使所采集的卵粒保持较高生物活性，且具有较强的受精能力，也便于后续对卵粒的保存和使用。
刺激排卵试剂为多盐水溶液，多盐水溶液的溶质组分包括KCl和Na3C6H5O7，KCl的优选浓度为0.65 mol·L-1，Na3C6H5O7 的优选浓度为0.04 mol·L-1。上述刺激排卵试剂中KCl和Na3C6H5O7可以促进性腺收缩，从而促进排卵，上述浓度可使海胆进行顺畅的排卵，且不会对海胆性腺造成过大的刺激压力，对海胆的伤害小，有利于海胆性腺维持正常功能。
本实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，在此不作详细叙述。
实施例5：
采用本发明的优选参数设定的海胆专用震荡式取卵器以及方法进行海胆取卵后卵粒受精率和胚胎发育畸形率测试试验：
以本实验取卵方法为试验组，以剖取性腺释放卵粒方法为对照组进行试验。试验采用虾夷马粪海胆作为试验对象，虾夷马粪海胆取自舟山市水产研究所，均为1龄，性腺成熟，直径为5cm。试验所用海水取自舟山附近污染度低的海域，经沉淀、过滤、灭菌消毒后用于试验，海水温度为25℃，盐度为30.27，导电率为48.6，pH值为8.01。每次试验取一枚海胆，共进行20次试验。
将采集后的卵粒加入海水稀释至25个/ml，得卵液，备用。取受精能力强、活性高、来源一致、密度为 个/mL的健康精液，按照卵液：精液比例为1:10与精液充分混合进行受精，受精30min后洗去1ml混合液于血球计数板上，在 倍的光学显微镜下观察形态并计数，在卵质膜外周形成1层透明的受精膜，脱离卵质膜而举起，即为受精成功，受精率为以100个卵粒中受精成功个数Y计算百分比，受精率（%）= （%），受精率如图8所示。受精200min，即大约8细胞期时观察受精卵分裂形态，判断胚胎畸形率，畸形率以受精成功个数Y中分裂畸形个数Z计算百分比，畸形率（%）= （%），畸形率如图9所示。
由图8数据可得，本发明试验组所取得的卵粒受精率远大于对照组的受精率，且本发明在多次试验中其受精率更加稳定，故可得本发明的取卵操作对卵粒的损伤小，所取得的卵粒的生物活性高、质量好，具有更强的受精能力，且每次取卵所得的卵粒活性和质量均匀，可看出本发明取卵器工作可靠性高。
由图9数据可得，本发明试验组所取得的卵粒受精后胚胎的畸形率远小于对照组，且在多次试验中其畸形率变化率小于对照组，故可得本发明取卵方法所取得的卵粒损伤小、遗传活性高，变化率较为平稳反应出本发明装置与方法的工作可靠性高。
管壁20b的两端厚度比H1:H2不仅限于1:2.2~3.1，还应包括1:2.2或1:2.21或1:2.22或1:2.23或1:2.24……或1:3.09或1:3.1。
冲水短管15倾斜向上的倾角不仅限于15°~85°，还应包括15°或15.1°或15.2°或15.3°或15.4°……或84.9°或85°。
本实施例中的常规技术，如海胆剖取性腺释放卵粒方法为本领域技术人员所知晓的现有技术，在此不作详细叙述。
尽管已结合优选的实施例描述了本发明，然其并非用以限定本发明，任何本领域技术人员，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，能够对在这里列出的主题实施各种改变、同等物的置换和修改，因此本发明的保护范围当视所提出的权利要求限定的范围为准。
Claims (10)
1.海胆专用震荡式取卵器，包括电动震荡圆筒主体（1），所述的电动震荡圆筒主体（1）下表面外边沿连接有支架底座（3），所述的电动震荡圆筒主体（1）下表面中心连接有电动循环冲刷采集机构，其特征在于：所述的支架底座（3）一侧固接有电动循环水泵（11），所述的电动循环水泵（11）连接于电动循环冲刷采集机构，所述的电动循环冲刷采集机构下方设有卵粒收集器皿（13）。
2.根据权利要求1所述的海胆专用震荡式取卵器，其特征在于：所述的电动震荡圆筒主体（1）包括圆筒（4），所述的圆筒（4）为上端敞口的圆柱形筒状结构，所述的圆筒（4）的下端中心设有同心圆洞口，所述的圆筒（4）内部通过弹簧组（7）连接有电动震荡承托（5），所述的圆筒（4）上端连接有弹性固着片（6）。
3.根据权利要求2所述的海胆专用震荡式取卵器，其特征在于：所述的电动震荡承托（5）一侧连接有电动机（8），所述的电动震荡承托（5）下端为镂空，所述的镂空位置处于圆筒（4）下端设有的同心圆洞口的正上方。
4.根据权利要求2所述的海胆专用震荡式取卵器，其特征在于：所述的弹性固着片（6）尾端连接于圆筒（4）内壁上端，所述的弹性固着片（6）首端通过弹性材料（9）连接于圆筒（4）内壁，所述的弹性固着片（6）首端连接有开口向下的按压管（20），所述的按压管（20）由管壁（20b）围绕形成管内空间（20a），所述的管壁（20b）的两端厚度比H1:H2为1:2.2~3.1。
5.根据权利要求1所述的海胆专用震荡式取卵器，其特征在于：所述的电动循环冲刷采集机构包括电动循环冲刷采集漏斗（2），所述的电动循环冲刷采集漏斗（2）上端设置于电动震荡圆筒主体（1）内部，所述的电动循环冲刷采集漏斗（2）下端连接有卵粒收集管（14）。
6.根据权利要求5所述的海胆专用震荡式取卵器，其特征在于：所述的卵粒收集管（14）通过进水管（18）连接至电动循环水泵（11），所述的卵粒收集管（14）下端连接有软管（12），所述的软管（12）表面连接有弹性夹扣（17），所述的软管（12）下端悬浮于卵粒收集器皿（13）开口上端或内部。
7.根据权利要求5所述的海胆专用震荡式取卵器，其特征在于：所述的电动循环冲刷采集漏斗（2）上端外边沿固着有导水管（10），所述的导水管（10）表面设有1~10个冲水短管（15），所述的导水管（10）一侧通过出水管（19）连接至电动循环水泵（11）。
8.根据权利要求7所述的海胆专用震荡式取卵器，其特征在于：所述的冲水短管（15）的出口由多个出水口（15a）组成，所述的冲水短管（15）穿过电动循环冲刷采集漏斗（2）倾斜设置，所述的冲水短管（15）的出水方向为朝向电动循环冲刷采集漏斗（2）内侧且倾斜向上15°~85°。
9.海胆专用震荡式取卵器的使用方法，包括以下步骤：
1）关闭弹性夹扣使软管闭塞，向电动循环冲刷采集漏斗内注满经灭菌消毒的人工海水；
2）取性成熟的雌性海胆，使用注射器从其生殖孔一侧柔软处向壳内注射刺激排卵试剂5~10ml；
3）将注射后的海胆背面向下，置于取卵器圆筒内的电动震荡承托上，海胆生殖孔对准电动循环冲刷采集漏斗敞口端，将弹性固着片扣压在海胆上方使其固定于电动震荡承托上；
4）启动与电动震荡承托连接的电动机，使海胆随电动震荡承托产生低频震荡；
5）启动电动循环水泵使水流冲刷海胆口器部位；
6）海胆排出卵粒经水流冲刷沉入卵粒收集管内，待卵粒收集管内收集一定体积的卵粒后，即关闭电动循环水泵电源，打开软管的弹性夹扣，将卵粒释放到卵粒收集器皿内，保存。
10.根据权利要求9所述的海胆专用震荡式取卵器的使用方法，其特征在于：所述的刺激排卵试剂为多盐水溶液，所述的多盐水溶液的溶质组分包括KCl和Na3C6H5O7，所述的KCl的浓度为0.65~1.25 mol·L-1，所述的Na3C6H5O7 的浓度为0.04~0.23 mol·L-1。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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