CN108102952A - 一种筛选耐低温耐高盐自养硝化菌的方法及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及废水处理方法，具体的说是一种筛选耐低温耐高盐自养硝化菌的方法及其应用。以水产品加工厂污水处理的活性污泥为样品，加入自氧硝化细菌富集培养基中进行培养，而后通过逐级分离方式在自氧硝化细菌分离培养基中形成菌群，即为获得耐低温，耐高盐自氧硝化菌系。本发明利用特殊性的培养基对活性污泥进行富集，培养基中只存在无机碳源，而且培养温度为20℃，培养基中又存在较高浓度的氯离子，在此条件下其它菌种生长较慢通过多次富集后甚至会死亡，同时培养基中含有有利于自养硝化细菌快速生长的微量元素可以使自养硝化细菌快速生长并形成优势种群，通过多次富集后即可获得耐低温耐高盐的硝化菌种。

Description

一种筛选耐低温耐高盐自养硝化菌的方法及其应用
技术领域
本发明涉及废水处理方法，具体的说是一种筛选耐低温耐高盐自养 硝化菌的方法及其应用。
背景技术
利用微生物菌剂来处理废水是目前一种比较常见而且操作比较简单 的方法，对于氨氮这一目标污染物所用的微生物是硝化细菌，硝化细菌 分为自养和异样两种，自养硝化细菌的代谢途径比较单一只能利用无机 碳源，将氨氮先转化成亚硝氮最终变成硝态氮，而异样硝化菌相对而言 代谢途径就比较多元化，可以利用多种有机碳源，而在实际废水中存在 着多种有机碳源，这些有机碳源中也会含有氮元素，因此异氧硝化菌在 利用有机碳源时很有可能获得足够的氮源因此对氨氮去除的效果就会降 低，同时在复杂的实际废水中异氧菌的数量十分多结构也十分复杂，外 来的异氧菌能否存活还是一个很大的问题。专利CN101643271B和专利 CN1215991C采用异氧硝化菌处理废水。专利CN101899401B、专利CN1215991C和专利CN106434412A以及其它相关专利中所用的自养硝化菌 的培养温度全部为30℃，而且菌株并不具备耐盐性，因此这些专利中所 涉及的菌种并不能处理类似于水产加工废水这种温度低盐度高的废水。 同时自养硝化菌投加浓度也是一个关键因素，尤其是处理一些氨氮浓度 较高的废水投加量必须足够大，现有专利中基本上没有涉及如何提高硝 化菌扩培效率的技术，因此无法解决硝化细菌投加量的问题，所用现有 技术中只能处理一些氨氮浓度较低的废水。专利CN106434412A中公开了 一种硝化细菌连续扩培的方法及设备，通过该设备生产的硝化菌剂硝化 速率可以达到500mgN/L菌液/h，这篇专利的技术虽然可以解决硝化菌投 加量的问题，但是专利中的扩培温度为30℃，菌种不具备耐盐性，最主 要的是这篇专利中的硝化菌需要多长扩培后才能达到较高的浓度，因此 硝化菌在保藏过程中活性会衰减，此外菌体投入不同的废水后的硝化菌 在实际环境中的适应能力较差也会使硝化菌的活性衰减，因此现有技术 不能够很好的处理一些低温盐度高氨氮浓度较高的废水。
发明内容
本发明目的在于提供一种筛选耐低温耐高盐自养硝化菌的方法及其 应用。
为实现上述目的，本发明采用技术方案为：
一种筛选耐低温耐高盐自养硝化菌的方法，以水产品加工厂污水处 理的活性污泥为样品，加入自氧硝化细菌富集培养基中进行培养，而后 通过逐级分离方式在自氧硝化细菌分离培养基中形成菌群，即为获得耐 低温，耐高盐自氧硝化菌系。
其中，水产品加工厂污水处理的好氧活性污泥必须符合以下要求：1、 污泥浓度在2500mg/L以上；2、活性污泥中存在自养硝化细菌；3、好氧 池活性污泥硝化速率大于2mgNH4-N/L/h。
所述自氧硝化细菌富集培养基为每升培养基中含有下列成分：硫酸 铵1-3g，碳酸钠1-2g，碳酸氢钠1-3g，磷酸氢二钾0.4-0.6g，氯化钾 0.5-0.8g，磷酸二氢钾0.8-1.2g，无水硫酸镁0.03-0.05g，七水和硫酸 亚铁0.03-0.06g，氯化钴0.003-0.006g，L-脯氨酸0.001-0.005g，DL- 丙氨酸0.001-0.005g，DL-丝氨酸0.001-0.005g，维生素0.0005-0.001g， 自来水定容1.0L，pH为7.5-7.8；
自氧硝化细菌分离培养基为每升培养基中含有下列成分：硫酸铵 1-3g，碳酸钠1-2g，自来水定容1.0L，pH为7.5-7.8。
进一步的说：
1)以水产品加工厂污水处理的活性污泥作为样品，破碎、清洗后接 种于含氯化钠的自氧硝化细菌富集培养基中进行转接培养，每次培养条 件为20℃、150-180R培养，转接培养至培养基中氨氮浓度没有明显变化， 保留上一次的富集培养液待用；其中，每次转接培养至含氯化钠逐渐增 加的自氧硝化细菌富集培养基中；且，每次转接量为0.5-3％(体积百分 比)；
2)将上述富集培养液逐级稀释，而后分别接种(接种量体积百分比 计为10％)到自氧硝化细菌分离培养基中，于150-180R，20℃培养7-10 天，取培养基中氨氮浓度没有明显下降的稀释倍数培养基的前一个梯度 的培养液接入到富集培养基中于150-180R，20℃培养7-10天，所得培养 物即为耐低温，耐高盐自氧硝化菌系。
所述步骤1)中氯化钠首次加入量为1.6g/L，而后以1.6g/L逐渐递 增，即首次添加量为1.6g/L、第一次转接添加量为3.2g/L、第二次转 接添加量为4.8g/L……；所述转接培养时间逐渐递增，首次培养时间为 7-10天，而后以7天逐渐增加，即首次培养时间为7-10天、第一次转接 培养时间为14-17天、第二次转接培养时间为21-24天……；
所述步骤2)逐级稀释为将富集培养液照10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、 10-6逐级稀释。
一种耐低温耐高盐自养硝化菌剂，以水产品加工厂污水处理的活性 污泥为样品，加入自氧硝化细菌富集培养基中进行培养，而后通过逐级 分离方式在自氧硝化细菌分离培养基中形成菌群，即为耐低温，耐高盐 自氧硝化菌剂。
所述自氧硝化细菌富集培养基为每升培养基中含有下列成分：硫酸 铵1-3g，碳酸钠1-2g，碳酸氢钠1-3g，磷酸氢二钾0.4-0.6g，氯化钾0.5-0.8g，磷酸二氢钾0.8-1.2g，无水硫酸镁0.03-0.05g，七水和硫酸 亚铁0.03-0.06g，氯化钴0.003-0.006g，L-脯氨酸0.001-0.005g，DL- 丙氨酸0.001-0.005g，DL-丝氨酸0.001-0.005g，维生素0.0005-0.001g， 自来水定容1.0L，pH为7.5-7.8；
自氧硝化细菌分离培养基为每升培养基中含有下列成分：硫酸铵 1-3g，碳酸钠1-2g，自来水定容1.0L，pH为7.5-7.8。
进一步的说，
1)以加工厂污水处理的活性污泥作为样品，破碎、清洗后接种于含 有氯化钠的自氧硝化细菌富集培养基中进行转接培养，转接培养至培养 基中氨氮浓度没有明显变化，保留上一次的富集培养液待用；其中，每 次转接培养至含氯化钠逐渐增加的自氧硝化细菌富集培养基中；且，每 次转接量为0.5-3％(体积百分比)；
2)将上述保留的富集培养液逐级稀释，而后分别接种(接种量体积 百分比计为10％)到自氧硝化细菌分离培养基中，于150-180R，20℃培养 7-10天，取培养基中氨氮浓度没有明显下降的稀释倍数培养基的前一个 梯度的培养液接入到富集培养基中于150-180R，20℃培养7-10天，所得 培养物即为耐低温，耐高盐自氧硝化菌剂。
所述步骤1)中氯化钠首次加入量为1.6g/L，而后以1.6g/L逐渐递 增，即首次添加量为1.6g/L、第一次转接添加量为3.2g/L、第二次转 接添加量为4.8g/L……；所述转接培养时间逐渐递增，首次培养时间为 7-10天，而后以7天逐渐增加，即首次培养时间为7-10天、第一次转接 培养时间为14-17天、第二次转接培养时间为21-24天……；
所述步骤2)逐级稀释为将富集培养液照10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、 10-6逐级稀释。
将步骤2)所得培养物接种到在线扩培培养基中进行反复连续在线培 养，获得硝化速率为120mgN/L菌液/h的耐低温耐高盐自氧硝化细菌培 养液，即为菌液。
所述在线培养后菌液加入至过度培养基，同时接入好氧池活性污泥 使培养基中的活性污泥浓度为1000-2000mg/L进行连续培养，直至培养 基中氨氮全部被消耗，得菌剂。
所述步骤2)所得培养物在线培养时硝化速率为5-10mgN/L菌液/h， 反复连续培养过程中每次向在线扩培培养基中补加氨氮，使培养基中氨 氮浓度控制在150mg/L-200mg/L，PH控制在7.5，溶解氧控制在2mg/L；
自氧硝化细菌在线扩培培养基为每升培养基中含有下列成分：氨氮 浓度180-540mg/L，碳酸钠1.5-2.0g/L，氯化钠4.8-6.4g/L，磷酸氢二 钾0.4-0.6g/L，磷酸二氢钾0.8-1.2g/L，氯化钾0.5-0.8g/L，无水硫酸 镁0.03-0.05g/L，七水和硫酸亚铁0.03-0.06g/L，氯化钴 0.003-0.006g/L，L-脯氨酸0.001-0.005g/L，DL-丙氨酸0.001-0.005g/L，DL-丝氨酸0.001-0.005g/L，维生素0.0005-0.001g/L，自来水定容1.0L， PH为7.5-7.8。
所述过度培养培养基为每升培养基中含有下列成分：氨氮浓度为 150-200mg/L，碳酸钠1.5-2.0g/L，甲醇100-150mg/L，COD为50-80mg/L 的耗氧生物系统的二沉池出水，PH为7.5-7.8。
一种耐低温耐高盐自养硝化菌剂的应用，所述自养硝化菌剂在处理 低温、高盐的废水中的应用。
本发明所具有的优点：
本发明利用特殊性的培养基对活性污泥进行富集，培养基中只存在 无机碳源，而且培养温度为20℃，培养基中又存在较高浓度的氯离子， 在此条件下其它菌种生长较慢通过多次富集后甚至会死亡，同时培养基 中含有有利于自养硝化细菌快速生长的微量元素可以使自养硝化细菌快 速生长并形成优势种群，通过多次富集后即可获得耐低温耐高盐的硝化 菌种。
本发明的菌剂从水产加工废水中获得耐低温耐高盐的硝化菌种，实 现了自养硝化菌无法适应低温、高盐废水的问题；通过对硝化细菌培养 基的优化以及发酵工艺的优化，解决自养硝化细菌由于投加量较低无法 处理高氨废水的问题，和硝化细菌保藏难度大衰减快的问题。
通过优化的发酵培养基同时增大发酵液的初始硝化速率实现了硝化 细菌的快速生长，实现了每1天的连续投加效果要优于每3天或时间更 久的连续投加方案；通过利用系统出水和系统少量的活性污泥对硝化细 菌进行一次过度培养，提升了自养硝化细菌在实际废水中适应能力。
本发明所获得菌剂可以再20℃条件下代谢氨氮，可以耐受3000mg/L 的氯离子浓度，其是能耐低温耐高盐的自氧硝化细菌，此外将本发明获 得菌剂在自养硝化细菌培养基以及连续培养过程中，使其可以在20℃条 件下，和高盐度条件下进行连续培养，通过增大接种量缩短了连续培养 的时间，培养时间最短为24h，发酵液硝化速率可达120mgN/L菌液/h； 本发明所得菌剂为了提高硝化菌在实际环境中的适应性可在投加前将硝 化细菌与待投加系统的二沉池出水和耗氧池活性污泥共同培养，进而可 大大地提升菌剂在实际环境中的适应能力，解决低温高盐高氨氮废水的 氨氮出水较高的问题，又解决一些系统冬季出水氨氮超标的问题，解决 一些系统在冲击情况下出水氨氮过高的问题。
附图说明
图1为本发明实施例提供的消耗细菌连续培养及过度培养装置图； 其中，1、氨氮调节补加罐；2、碱度调节补加罐；3、风机；4、连续培 养罐；5、搅拌电机；6、菌体收集罐；7、过渡培养罐；8、搅拌桨；9、 氨氮调节补加罐；10、碱度调节补加罐；11、风机。
具体实施方式
下面结合附图和实施例最本发明作进一步的解释说明。
实施例1
1)培养物的获得，
将大连某水产品加工厂中污水处理系统的好氧池活性污泥10mL接入 100mL蒸馏水中，加入一些玻璃珠120R破碎清洗30min，清洗后离心回 收污泥，如此清洗3次；
将清洗后的活性污泥全部接入100mL自养硝化细菌富集培养基中进 行富集培养，培养基中接入1.6g/L的氯化钠，150R，20℃培养7天；培 养基氨氮初始浓度为122mg/L，培养结束时培养基中氨氮浓度为65mg/L。 培养结束后取10mL培养液接入100mL新的富集培养基中，培养基中接入 3.2g/L氯化钠，150R，20℃培养14天，培养基氨氮初始浓度为126mg/L，培养结束时培养基中氨氮浓度为34mg/L；培养结束后取10mL培养液接入 100mL新的富集培养基中，培养基中接入4.8g/L氯化钠，150R，20℃培 养21天，培养基氨氮初始浓度为123mg/L，培养结束时培养基中氨氮浓 度为54mg/L；培养结束后取10mL培养液接入100mL新的富集培养基中， 培养基中接入6.4g/L氯化钠，150R，20℃培养28天，培养基氨氮初始 浓度为124mg/L，培养结束时培养基中氨氮浓度为123mg/L；此时富集培 养基中的氨氮浓度没有明显变化，即，富集培养基中氯化钠添加量为6.4 g/L，取上一个富集培养获得的富集液进行稀释培养；
所述自氧硝化细菌富集培养基：硫酸铵1g/L，碳酸钠1g/L，碳酸氢 钠1g/L，磷酸氢二钾0.4g/L，氯化钾0.5g/L，磷酸二氢钾0.8g/L，无 水硫酸镁0.03g/L，七水和硫酸亚铁0.03g/L，氯化钴0.003g/L，L-脯氨 酸0.001g/L，DL-丙氨酸0.001g/L，DL-丝氨酸0.001g/L，维生素 0.0005g/L，自来水定容1.0L，用磷酸将PH调节到7.5。
取上一个梯度的富集液按照10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6逐级稀 释接种到自氧硝化细菌分离培养基中，培养基中加入4.8g/L氯化钠， 150R，20℃培养7天，发现从10-5开始之后的稀释倍数培养基中初始氨氮 浓度为125mg/L，培养结束后氨氮浓度为122mg/L，氨氮浓度没有明显变 化证明该梯度已经没有自养硝化细菌生长。取按10-4稀释倍数的培养液接入自氧硝化细菌分离培养基中接种量按照10％接入，培养基中加入4.8g/L 氯化钠，150R，20℃培养7天，培养基初始氨氮浓度为126mg/L，培养基 结束后氨氮浓度为66mg/L，将获得的培养物收集保藏，获得耐低温，耐 高盐自氧硝化培养物命名SYND-01。
自氧硝化细菌分离培养基：硫酸铵1g/L，碳酸钠1g/L，自来水定容1.0L， 用磷酸将PH调节到7.5)
2)将所得培养物进行在线连续培养：
将上述获得的培养物通过1L摇瓶，10L发酵罐、100L发酵罐逐级放 大培养后接入1立自氧硝化细菌富集培养基中，初始扩培液中的硝化速 率为4.89mgN/L菌液/h，培养温度20℃，培养基氯离子浓度3000mg/L左 右，溶解氧控制在2mg/L，PH控制在7.5，氨氮控制在150-200mg/L，连 续培养7天后发酵液硝化速率为23.52mgN/L菌液/h，通过2立的菌体 收集罐收集菌体，并从新接回上述1立培养基中，此时培养液的初始硝 化速率为31.25mgN/L菌液/h，连续培养3天后发酵液硝化速率为57.96 mgN/L菌液/h，通过2立的菌体收集罐收集菌体，并从新接回上述1立培 养基中，此时培养液的初始硝化速率为88.65mgN/L菌液/h，连续培养1 天后发酵液硝化速率为116.82mgN/L菌液/h，通过2立的菌体收集罐收 集菌体，收集的菌体一半4℃保存，一半从新接回1立培养基中，此时培 养液的初始硝化速率为93.65mgN/L菌液/h，连续培养1天后发酵液硝 化速率为118.96mgN/L菌液/h，即获得菌剂。
对比例
将市购的硝化菌NB1(该菌剂由专利CN101899401B中所涉及的硝酸 菌和亚硝酸菌组成)，硝化菌NB2(该菌剂由专利CN1215991C中所涉及 的汉堡硝化杆菌、乌氏硝化杆菌、维氏硝化杆菌组成)，按照上述步骤2) 记载的在线方式进行处理；具体为：
将这两种菌剂分别在2立装置中连续培养，培养温度20℃，培养基 氯离子浓度3000mg/L左右，首次连续培养7天后，NB1的扩培液硝化速 率为6.58mgN/L菌液/h，NB2的扩培液硝化速率为5.89mgN/L菌液/h，
由上述实施例以及对比例可见，本发明菌系培养后的扩培液硝化速 率为23.52mgN/L菌液/h。可见本发明菌系与现有菌剂相比能耐受低温 高盐的环境。同时本发明菌系通过本发明培养基和连续培养工艺可以实 现菌系在培养温度20℃，培养基氯离子浓度3000mg/L左右，培养时间为 1天时发酵液硝化速率可达118.96mgN/L菌液/h。
实施例2
利用上述实施例1记载的菌系对氨氮废水处理小试评价：
以某水产加工废水进行小试评价试验，该水产加工厂的好氧生化系 统进水氨氮＝120mg/L左右，出水氨氮在110mg/L左右，系统温度在20℃ 左右，水体氯离子浓度为2000mg/L左右，将该好氧池的泥水混合物50L 装入100L开口容器中同时分别投加上述实施例获得菌剂，并以硝化菌NB1 和硝化菌NB2作为对照，并利用空气泵进行曝气将溶解氧控制在试验采 用间歇式换水，每24h换一次，试验温度为20-25℃，系统溶解氧控制咋 2-5mg/L，试验分为投加NB1菌剂、投加NB2菌剂和投加上述实施例菌剂。 (投加菌剂的量为反应体系的0.2‰(体积))
实验数据如表1，数据显示投加菌剂后每24h进行持续换水7天后， 系统出水氨氮可以达到10mg/L以下，说明本发明方法可以有效处理低温 高盐高氨氮废水中的氨氮，而一般的硝化菌剂如NB1和NB2，无法在系统 温度为20-25℃，体系氯离子浓度为2000mg/L左右时进行去除废水中的 氨氮。
实施例3
耐低温耐高盐硝化细菌连续投加效果评价
某农药企业污水处理系统，好氧池有效池容积3000立，好氧池污泥 浓度3000mg/L左右，冬季水温在18-20℃左右，停留时间24h左右，进 水氯离子浓度2700mg/L，进水氨氮浓度15-20mg/L，出水氨氮浓度 15-20mg/L，系统硝化能力基本为零。在该企业污水处理站搭建2立规模 的的硝化细菌连续培养装置，将上述实施例获得耐低温耐高盐硝化细菌 剂连续培养投加，每24h向生化池中投加0.75立的硝化菌发酵液，发酵 液硝化速率可达120mgN/L菌液/h，实验结果如表2。
通过实验结果可以看出连续投加硝化菌剂后，出水氨氮浓度稳定在 10mg/L左右，说明上述实施例获得菌剂可以在低温高盐环境下处理废水 中氨氮，在连续扩培装置后增加一个2立的过度培养装置，用好氧二沉 池出水配制好过度培养基，向装置内同时接入该药厂好氧池活性污泥使 培养基中的活性污泥浓度为1500mg/L，同时接入0.75立的硝化菌发酵液 进行培养，直至培养基中氨氮全部被消耗，实现过度培养，然后将培养 物全部投加，投加后进行下一次培养在投加如此重复，结果如表3。
所述过度培养培养基为每升培养基中含有下列成分：氨氮浓度为 150mg/L，碳酸钠1.5g/L，甲醇100mg/L，COD为60mg/L的耗氧生物系统 的二沉池出水，PH为7.5-7.8。
通过实验结果可以看出增加了过度培养后，硝化菌在好氧池的适应 能力明显提升，出水氨氮出现了明显降低，经过10天的连续投加后出水 氨氮基本上在1-2mg/L之间稳定，实验结果说明，利用上述实施例获得 菌剂在通过本专利所涉及的连续培养方法进行连续扩培投加，同时利用 本专利中的过渡培养装置培养后投加，可以有效的解决一些低温高盐废 水中的氨氮问题。

Claims (10)

1.一种筛选耐低温耐高盐自养硝化菌的方法，其特征在于：以水产品加工厂污水处理的活性污泥为样品，加入自氧硝化细菌富集培养基中进行培养，而后通过逐级分离方式在自氧硝化细菌分离培养基中形成菌群，即为获得耐低温，耐高盐自氧硝化菌系。
2.按权利要求1所述的筛选耐低温耐高盐自养硝化菌的方法，其特征在于：所述自氧硝化细菌富集培养基为每升培养基中含有下列成分：硫酸铵1-3g，碳酸钠1-2g，碳酸氢钠1-3g，磷酸氢二钾0.4-0.6g，氯化钾0.5-0.8g，磷酸二氢钾0.8-1.2g，无水硫酸镁0.03-0.05g，七水和硫酸亚铁0.03-0.06g，氯化钴0.003-0.006g，L-脯氨酸0.001-0.005g，DL-丙氨酸0.001-0.005g，DL-丝氨酸0.001-0.005g，维生素0.0005-0.001g，自来水定容1.0L，pH为7.5-7.8；
自氧硝化细菌分离培养基为每升培养基中含有下列成分：硫酸铵1-3g，碳酸钠1-2g，自来水定容1.0L，pH为7.5-7.8。
3.按权利要求1或2所述的筛选耐低温耐高盐自养硝化菌的方法，其特征在于：
1)以水产品加工厂污水处理的活性污泥作为样品，破碎、清洗后接种于含氯化钠的自氧硝化细菌富集培养基中进行转接培养，每次培养条件为20℃、150-180R培养，转接培养至培养基中氨氮浓度没有明显变化，保留上一次的富集培养液待用；其中，每次转接培养至含氯化钠逐渐增加的自氧硝化细菌富集培养基中；
2)将上述富集培养液逐级稀释，而后分别接种10％)到自氧硝化细菌分离培养基中，于150-180R，20℃培养7-10天，取培养基中氨氮浓度没有明显下降的稀释倍数培养基的前一个梯度的培养液接入到富集培养基中于150-180R，20℃培养7-10天，所得培养物即为耐低温，耐高盐自氧硝化菌系。
4.按权利要求3所述的筛选耐低温耐高盐自养硝化菌的方法，其特征在于：
所述步骤1)中氯化钠首次加入量为1.6g/L，而后以1.6g/L逐渐递增；所述转接培养时间逐渐递增，首次培养时间为7-10天，而后以7天逐渐增加；
所述步骤2)逐级稀释为将富集培养液照10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6逐级稀释。
5.一种耐低温耐高盐自养硝化菌剂，其特征在于：以水产品加工厂污水处理的活性污泥为样品，加入自氧硝化细菌富集培养基中进行培养，而后通过逐级分离方式在自氧硝化细菌分离培养基中形成菌群，即为耐低温，耐高盐自氧硝化菌剂。
6.按权利要求5所述的耐低温耐高盐自养硝化菌剂，其特征在于：所述自氧硝化细菌富集培养基为每升培养基中含有下列成分：硫酸铵1-3g，碳酸钠1-2g，碳酸氢钠1-3g，磷酸氢二钾0.4-0.6g，氯化钾0.5-0.8g，磷酸二氢钾0.8-1.2g，无水硫酸镁0.03-0.05g，七水和硫酸亚铁0.03-0.06g，氯化钴0.003-0.006g，L-脯氨酸0.001-0.005g，DL-丙氨酸0.001-0.005g，DL-丝氨酸0.001-0.005g，维生素0.0005-0.001g，自来水定容1.0L，pH为7.5-7.8；
自氧硝化细菌分离培养基为每升培养基中含有下列成分：硫酸铵1-3g，碳酸钠1-2g，自来水定容1.0L，pH为7.5-7.8。
7.按权利要求5或6所述的耐低温耐高盐自养硝化菌剂，其特征在于：
1)以加工厂污水处理的活性污泥作为样品，破碎、清洗后接种于含有氯化钠的自氧硝化细菌富集培养基中进行转接培养，转接培养至培养基中氨氮浓度没有明显变化，保留上一次的富集培养液待用；其中，每次转接培养至含氯化钠逐渐增加的自氧硝化细菌富集培养基中；
2)将上述保留的富集培养液逐级稀释，而后分别接种到自氧硝化细菌分离培养基中，于150-180R，20℃培养7-10天，取培养基中氨氮浓度没有明显下降的稀释倍数培养基的前一个梯度的培养液接入到富集培养基中于150-180R，20℃培养7-10天，所得培养物即为耐低温，耐高盐自氧硝化菌剂。
8.按权利要求7所述的耐低温耐高盐自养硝化菌剂，其特征在于：
所述步骤1)中氯化钠首次加入量为1.6g/L，而后以1.6g/L逐渐递增；所述转接培养时间逐渐递增，首次培养时间为7-10天，而后以7天逐渐增加；
所述步骤2)逐级稀释为将富集培养液照10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6逐级稀释。
9.按权利要求7所述的耐低温耐高盐自养硝化菌剂，其特征在于：将步骤2)所得培养物接种到在线扩培培养基中进行反复连续在线培养，获得硝化速率为120mgN/L菌液/h的耐低温耐高盐自氧硝化细菌培养液，即为菌液。
10.按权利要求9所述的耐低温耐高盐自养硝化菌剂，其特征在于：所述在线培养后菌液加入至过度培养基，同时接入好氧池活性污泥使培养基中的活性污泥浓度为1000-2000mg/L进行连续培养，直至培养基中氨氮全部被消耗，得菌剂。
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