CN108079098A - 抗真菌感染的药物制剂及其制作方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，公开了抗真菌感染的药物制剂，其由如下原料制备而得：硝酸芬替康唑、陈皮提取物、虎杖提取物以及丁香提取物。本发明还公开了上述药物制剂的制作方法。本发明采用陈皮提取物、虎杖提取物以及丁香提取物与硝酸芬替康唑进行配合，能够协同作用，提升药物抑制真菌的性能，而且不易复发。

Description

抗真菌感染的药物制剂及其制作方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及抗真菌感染的药物制剂及其制作方法。

背景技术

真菌感染涉及对人类有致病性的真菌约有300多个种类。除新型隐球菌和蕈之外，医学上有意义的致病性真菌几乎都是霉菌。根据侵犯人体部位的不同，临床上将致病真菌分为浅部真菌和深部真菌。浅部真菌(癣菌)仅侵犯皮肤、毛发和指(趾)甲，而深部真菌能侵犯人体皮肤、黏膜、深部组织和内脏，甚至引起全身播散性感染。深部真菌感染肠道即表现为真菌性肠炎。

硝酸芬替康唑，英文化学名: 1-[2-(2,4-dichlorophenyl)-2-[[4-(phenylthio)phenyl] methoxy] ethyl- 1H-imidazole mononitrate。中文化学名: 1-[2-(2,4-二氯苯基)-2-[[4-(苯硫代)苯基]甲氧基]乙基-1H-咪唑硝酸盐；分子式为C24H20Cl2N2OS·HNO3。

硝酸芬替康唑为咪唑类广谱抗真菌药，用于治疗浅部真菌和阴道念珠菌感染。该药于1986年在意大利被批准上市，剂型有乳膏剂、喷雾剂和阴道栓剂。其作用机理是通过抑制真菌细胞的细胞色素P-450的羟基化作用使其细胞壁的磷脂质呈现不稳定状态，进而使真菌细胞破裂和坏死，然而，该药物停药容易反复，治疗和康复的时间比较长。就其所取得的近期、远期疗效而言，结果也难以令人满意。并且会引起一定的毒副作用，如肾毒性、肝毒性等，还会诱发产生耐药性。申请人之前的专利技术“CN104623252A,一种复方硝酸芬替康唑制剂及其应用”采用中西药结合的方式，降低了硝酸芬替康唑，毒副作用减少，但是该制剂采用中草药物组分较多，成本增加，并且其中一种或者几种原料药一旦断货，就会造成无法生产，给企业带来巨大的损失。

陈皮为芸香科植物橘及其栽培变种的干燥成熟果皮。陈皮提取物中含有丰富的挥发油以及黄酮类物质，具有抗氧化、消除自由基抑菌等功效。虎杖为蓼科植物虎杖的干燥根茎和根，含有丰富的皂苷以及黄酮类物质，有防腐、抗菌、抗病毒等功效。丁香为桃金娘科植物丁香的花蕾，其提取物中含有丁香醇等物质，对多种细菌和真菌具有抑制和杀灭作用。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明提供了抗真菌感染的药物制剂及其制作方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

抗真菌感染的药物制剂，其由如下原料制备而得：硝酸芬替康唑、陈皮提取物、虎杖提取物以及丁香提取物。

具体由如下原料制备而得：

硝酸芬替康唑8g、陈皮提取物10g、虎杖提取物10g、丁香提取物10g、泊洛沙姆407 25g、泊洛沙姆188 15g、卡波姆5g、丙二醇250g、甘油150g、苯甲酸钠5g，乙二胺四乙酸二钠0.3g、蒸馏水462g。

进一步地，所述制剂的制作方法包括如下步骤：

将硝酸芬替康唑、陈皮提取物、虎杖提取物、丁香提取物、泊洛沙姆407、泊洛沙姆188以及甘油混合，加热至65℃，保温条件下，100rpm搅拌10min，得到组分A；

将苯甲酸钠和乙二胺四乙酸二钠溶解于蒸馏水中，加入卡波姆和丙二醇使充分溶解，并混合均匀，得到组分B；

将组分A和组分B混合均匀，即得。

进一步地，

所述陈皮提取物的制备方法包括：

取陈皮，粉碎，过200目筛，得到陈皮粉，置于反应釜中，然后添加五倍重量的85%的乙醇浸提三次，每次6h，然后合并三次浸提液，减压浓缩至无醇，最后低温冷冻干燥，得到陈皮提取物。

进一步地，

所述虎杖提取物的制备方法包括：

取虎杖，粉碎，过100目筛，再进行高压脉冲电场处理，然后添加到五倍重量的70%的乙醇中，加热至50℃，保温条件下100rpm搅拌提取2h，过滤收集滤液，将滤液进行减压蒸馏至无乙醇，再进行真空冷冻干燥，即得虎杖提取物。

优选地，

所述高压脉冲电场处理的参数为：电场强度为20kv/cm，总处理时间为200μs，脉冲宽度为4μs，脉冲频率为400pps。

进一步地，

所述丁香提取物的制备方法包括：

取丁香，粉碎，过100目筛，然后添加到3倍重量的95%的乙醇中，超声波提取45min，过滤收集滤液，将滤液进行减压蒸馏回收乙醇，收集浓缩液，将浓缩液采用真空冷冻干燥，即得丁香提取物。

优选地，

所述超声波的强度为25kHz。

本发明的立足点以及有益效果主要包括但是并不限于以下几个方面：

本发明通过多因素分析以及具体试验发现，采用陈皮、虎杖以及丁香的提取物与硝酸芬替康唑进行配伍，协同性能好，能够有效治疗各种真菌感染；使用原料药较少，避免采用多种中药与硝酸芬替康唑进行配伍，药理作用相对清晰，而且避免了由于大量原料中的一种或者几种原料药断货，造成的生产停滞和企业损失；陈皮采用简易的乙醇浸提工艺，较为简单，提取物中含有黄酮和挥发油，抗菌性能好；虎杖采用高压脉冲电场配伍乙醇提取，能够获得含量较高的皂苷、黄酮类物质，抑菌效果好；丁香采用超声波辅助乙醇提取，工艺简单可行，并且能够获得含量较高的丁香醇等抑菌物质。

具体实施方式

为了使本技术领域的人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将结合本申请具体实施例，对本发明进行更加清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。

实施例1

抗真菌感染的药物制剂，其由如下原料制备而得：硝酸芬替康唑8g、陈皮提取物10g、虎杖提取物10g、丁香提取物10g、泊洛沙姆407 25g、泊洛沙姆188 15g、卡波姆5g、丙二醇250g、甘油150g、苯甲酸钠5g，乙二胺四乙酸二钠0.3g、蒸馏水462g。

所述制剂的制作方法包括如下步骤：

将硝酸芬替康唑、陈皮提取物、虎杖提取物、丁香提取物、泊洛沙姆407、泊洛沙姆188以及甘油混合，加热至65℃，保温条件下，100rpm搅拌10min，得到组分A；

将苯甲酸钠和乙二胺四乙酸二钠溶解于蒸馏水中，加入卡波姆和丙二醇使充分溶解，并混合均匀，得到组分B；

将组分A和组分B混合均匀，即得。

所述陈皮提取物的制备方法包括：

取陈皮，粉碎，过200目筛，得到陈皮粉，置于反应釜中，然后添加五倍重量的85%的乙醇浸提三次，每次6h，然后合并三次浸提液，减压浓缩至无醇，最后低温冷冻干燥，得到陈皮提取物。

所述虎杖提取物的制备方法包括：

取虎杖，粉碎，过100目筛，再进行高压脉冲电场处理，然后添加到五倍重量的70%的乙醇中，加热至50℃，保温条件下100rpm搅拌提取2h，过滤收集滤液，将滤液进行减压蒸馏至无乙醇，再进行真空冷冻干燥，即得虎杖提取物；所述高压脉冲电场处理的参数为：电场强度为20kv/cm，总处理时间为200μs，脉冲宽度为4μs，脉冲频率为400pps。

所述丁香提取物的制备方法包括：取丁香，粉碎，过100目筛，然后添加到3倍重量的95%的乙醇中，超声波提取45min，过滤收集滤液，将滤液进行减压蒸馏回收乙醇，收集浓缩液，将浓缩液采用真空冷冻干燥，即得丁香提取物；所述超声波的强度为25kHz。

对比例1

抗真菌感染的药物制剂，其由如下原料制备而得：硝酸芬替康唑8g、陈皮提取物10g、虎杖提取物10g、泊洛沙姆407 25g、泊洛沙姆188 15g、卡波姆5g、丙二醇250g、甘油150g、苯甲酸钠5g，乙二胺四乙酸二钠0.3g、蒸馏水472g。

所述制剂的制作方法包括如下步骤：

将硝酸芬替康唑、陈皮提取物、虎杖提取物、泊洛沙姆407、泊洛沙姆188以及甘油混合，加热至65℃，保温条件下，100rpm搅拌10min，得到组分A；

将苯甲酸钠和乙二胺四乙酸二钠溶解于蒸馏水中，加入卡波姆和丙二醇使充分溶解，并混合均匀，得到组分B；

将组分A和组分B混合均匀，即得。

所述陈皮提取物的制备方法包括：

取陈皮，粉碎，过200目筛，得到陈皮粉，置于反应釜中，然后添加五倍重量的85%的乙醇浸提三次，每次6h，然后合并三次浸提液，减压浓缩至无醇，最后低温冷冻干燥，得到陈皮提取物。

所述虎杖提取物的制备方法包括：

取虎杖，粉碎，过100目筛，再进行高压脉冲电场处理，然后添加到五倍重量的70%的乙醇中，加热至50℃，保温条件下100rpm搅拌提取2h，过滤收集滤液，将滤液进行减压蒸馏至无乙醇，再进行真空冷冻干燥，即得虎杖提取物；所述高压脉冲电场处理的参数为：电场强度为20kv/cm，总处理时间为200μs，脉冲宽度为4μs，脉冲频率为400pps。

对比例2

抗真菌感染的药物制剂，其由如下原料制备而得：硝酸芬替康唑8g、陈皮提取物10g、丁香提取物10g、泊洛沙姆407 25g、泊洛沙姆188 15g、卡波姆5g、丙二醇250g、甘油150g、苯甲酸钠5g，乙二胺四乙酸二钠0.3g、蒸馏水472g。

所述制剂的制作方法包括如下步骤：

将硝酸芬替康唑、陈皮提取物、丁香提取物、泊洛沙姆407、泊洛沙姆188以及甘油混合，加热至65℃，保温条件下，100rpm搅拌10min，得到组分A；

将苯甲酸钠和乙二胺四乙酸二钠溶解于蒸馏水中，加入卡波姆和丙二醇使充分溶解，并混合均匀，得到组分B；

将组分A和组分B混合均匀，即得。

所述陈皮提取物的制备方法包括：

取陈皮，粉碎，过200目筛，得到陈皮粉，置于反应釜中，然后添加五倍重量的85%的乙醇浸提三次，每次6h，然后合并三次浸提液，减压浓缩至无醇，最后低温冷冻干燥，得到陈皮提取物。

所述丁香提取物的制备方法包括：取丁香，粉碎，过100目筛，然后添加到3倍重量的95%的乙醇中，超声波提取45min，过滤收集滤液，将滤液进行减压蒸馏回收乙醇，收集浓缩液，将浓缩液采用真空冷冻干燥，即得丁香提取物；所述超声波的强度为25kHz。

对比例3

抗真菌感染的药物制剂，其由如下原料制备而得：硝酸芬替康唑8g、虎杖提取物10g、丁香提取物10g、泊洛沙姆407 25g、泊洛沙姆188 15g、卡波姆5g、丙二醇250g、甘油150g、苯甲酸钠5g，乙二胺四乙酸二钠0.3g、蒸馏水472g。

所述制剂的制作方法包括如下步骤：

将硝酸芬替康唑、虎杖提取物、丁香提取物、泊洛沙姆407、泊洛沙姆188以及甘油混合，加热至65℃，保温条件下，100rpm搅拌10min，得到组分A；

将苯甲酸钠和乙二胺四乙酸二钠溶解于蒸馏水中，加入卡波姆和丙二醇使充分溶解，并混合均匀，得到组分B；

将组分A和组分B混合均匀，即得。

所述虎杖提取物的制备方法包括：

取虎杖，粉碎，过100目筛，再进行高压脉冲电场处理，然后添加到五倍重量的70%的乙醇中，加热至50℃，保温条件下100rpm搅拌提取2h，过滤收集滤液，将滤液进行减压蒸馏至无乙醇，再进行真空冷冻干燥，即得虎杖提取物；所述高压脉冲电场处理的参数为：电场强度为20kv/cm，总处理时间为200μs，脉冲宽度为4μs，脉冲频率为400pps。

所述丁香提取物的制备方法包括：取丁香，粉碎，过100目筛，然后添加到3倍重量的95%的乙醇中，超声波提取45min，过滤收集滤液，将滤液进行减压蒸馏回收乙醇，收集浓缩液，将浓缩液采用真空冷冻干燥，即得丁香提取物；所述超声波的强度为25kHz。

实施例2

毒理研究

一、急性毒性试验

将40只家兔随机分为4组，每组10只，雌雄各半，用10％硫化钠给家兔背部脱毛，去毛面积直径为4cm。破损皮肤的制作采用消毒铁锉划破(以渗血为度)，去毛后分别涂敷本发明制剂0.1、0.5、1.0以及2.0ml于脱毛区并用无刺激性胶布加以固定，每只动物分笼饲养，给药24小时后1、24、48、72小时至第七日，每日观察并记录动物的体重、皮毛、光泽、饮食、眼和粘膜的变化，呼吸中枢、神经系统、四肢活动和死亡情况，并于七日后处死家兔，解剖观察其心、肝、脾、肺、肾等脏器的变化。

结果：本发明制剂对破损皮肤家兔的行为、 活动、饮食、皮毛光泽、呼吸中枢、神经系统和体重无任何不良影响，无一家兔死亡。七日后处死家兔，解剖观察其心、肝、脾、肺、肾等主要脏器未见明显异常。

二、刺激性试验

研究结果显示：本品对家兔正常和破损皮肤均未见刺激性；本品皮肤局部给药未见对豚鼠有致敏作用。

实施例3

抗真菌试验：

每管不同浓度的药液培养基 10ml（含有不同浓度的药物）中加入菌液1ml (含有100万个菌 )，摇匀后放入培养箱中培养72h，观察结果。肉汤清亮与对照管相同，为有抑菌作用；肉汤混浊，或有菌膜生长，则为无抑菌作用。试验菌株分别选用白色念珠菌、光滑球拟酵母菌以及石膏样毛癣菌。试验药物分别为实施例1，对比例1-3；设置三次平行实验求均值，各组别的最小抑菌浓度（mg/L）见表1：

表1

组别	实施例1	对比例1	对比例2	对比例3
					白色念珠菌	2.85	3.23	3.79	3.54
光滑球拟酵母菌	5.21	6.49	5.76	6.11
					石膏样毛癣菌	1.78	2.19	2.31	1.96

结论：通过上表1可见，实施例1组采用三种提取物与硝酸芬替康唑配伍对白色念珠菌、光滑球拟酵母菌以及石膏样毛癣菌的最小抑菌浓度均低于两种提取物配伍的对比例1-3，说明陈皮提取物、虎杖提取物以及丁香提取物三种中药提取物能够与硝酸芬替康唑配合使用，而且协同杀菌性能好，可显著提升硝酸芬替康唑的抑菌效果。

实施例4

动物实验：

选取200只健康豚鼠，分为四组，每组50只。以豚鼠的背面的左侧、中侧和右侧为感染区，分别用四种不同药物治疗；即观察真菌感染后的自然消长。每只豚鼠背面三处感染区各剃毛直径约2cm；按常规方法人工感染红色毛癣菌，至第6天局部感染明显形成，再进行药物治疗。每感染处用药量0.2ml，每天用药两次，连续用药2周，观察皮损；

临床疗效评价标准为：治愈为皮损消退，真菌镜检连续二次阴性，停药后无复发；无效为皮损未消退，真菌镜检阳性；复发为临床痊愈停药后一周后，在原处又出现皮损，真菌镜检阳性。四种试验药物分别为实施例1和对比例1-3；具体见表2：

表2

组别	实施例1	对比例1	对比例2	对比例3
					治愈（只）	41	39	37	36
无效（只）	1	1	2	5
					复发（只）	8	10	11	9

结论：如表2所示，实施例1组的治愈率最高，可达到82%，对比例1-3的治愈率分别为78%、74%以及72%，实施例1的复发率最低，仅为16%。上述数据说明陈皮提取物、虎杖提取物以及丁香提取物与硝酸芬替康唑相互配合合理，能够协同作用，提升药物抑制真菌的性能，而且不易复发。

上述数据对本发明的具体实施方式进行了详尽描述，但并非对本发明保护范围的限制，所属领域技术人员应该明白，在本发明的技术方案的基础上，本领域技术人员不需要付出创造性劳动即可做出的各种修改或变形仍在本发明的保护范围以内。

Claims (8)

1.抗真菌感染的药物制剂，其由如下原料制备而得：硝酸芬替康唑、陈皮提取物、虎杖提取物以及丁香提取物。

2.根据权利要求1所述的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂由如下原料制备而得：

硝酸芬替康唑8g、陈皮提取物10g、虎杖提取物10g、丁香提取物10g、泊洛沙姆407 25g、泊洛沙姆188 15g、卡波姆5g、丙二醇250g、甘油150g、苯甲酸钠5g，乙二胺四乙酸二钠0.3g、蒸馏水462g。

3.根据权利要求1-2所述的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂的制作方法包括如下步骤：

将硝酸芬替康唑、陈皮提取物、虎杖提取物、丁香提取物、泊洛沙姆407、泊洛沙姆188以及甘油混合，加热至65℃，保温条件下，100rpm搅拌10min，得到组分A；

将苯甲酸钠和乙二胺四乙酸二钠溶解于蒸馏水中，加入卡波姆和丙二醇使充分溶解，并混合均匀，得到组分B；

将组分A和组分B混合均匀，即得。

4.根据权利要求1-3所述的药物制剂，其特征在于，所述陈皮提取物的制备方法包括：

取陈皮，粉碎，过200目筛，得到陈皮粉，置于反应釜中，然后添加五倍重量的85%的乙醇浸提三次，每次6h，然后合并三次浸提液，减压浓缩至无醇，最后低温冷冻干燥，得到陈皮提取物。

5.根据权利要求1-3所述的药物制剂，其特征在于，所述虎杖提取物的制备方法包括：

取虎杖，粉碎，过100目筛，再进行高压脉冲电场处理，然后添加到五倍重量的70%的乙醇中，加热至50℃，保温条件下100rpm搅拌提取2h，过滤收集滤液，将滤液进行减压蒸馏至无乙醇，再进行真空冷冻干燥，即得虎杖提取物。

6.根据权利要求5所述的药物制剂，其特征在于，所述高压脉冲电场处理的参数为：电场强度为20kv/cm，总处理时间为200μs，脉冲宽度为4μs，脉冲频率为400pps。

7.根据权利要求1-3所述的药物制剂，其特征在于，所述丁香提取物的制备方法包括：取丁香，粉碎，过100目筛，然后添加到3倍重量的95%的乙醇中，超声波提取45min，过滤收集滤液，将滤液进行减压蒸馏回收乙醇，收集浓缩液，将浓缩液采用真空冷冻干燥，即得丁香提取物。

8.根据权利要求7所述的药物制剂，其特征在于，所述超声波的强度为25kHz。