CN108040871A - 一种利用低糖组培技术培育矾根的方法 - Google Patents
一种利用低糖组培技术培育矾根的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108040871A CN108040871A CN201711165308.1A CN201711165308A CN108040871A CN 108040871 A CN108040871 A CN 108040871A CN 201711165308 A CN201711165308 A CN 201711165308A CN 108040871 A CN108040871 A CN 108040871A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture
- root
- alum
- alum root
- method described
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明涉及一种利用低糖组培技术培育矾根的方法，包括如下步骤：将经增殖培养获得的矾根的丛芽修剪成单株，接种到生根培养基上进行生根培养；所述生根培养基的包括：1/2MS基础培养基，0.1～0.3mg/L萘乙酸，1～2mg/L赤霉素，8～12g/L蔗糖，4～8g/L琼脂，0.1～0.3mg/L活性炭。本发明提供的方法通过组培技术培育矾根，不仅可保持优良植物品种的遗传稳定性，而且能有效提高其繁殖系数，为进一步开展品种改良奠定基础。
Description
技术领域
本发明涉及植物组织培养领域，具体涉及一种利用低糖组培技术培育矾根的方法。
背景技术
矾根(Heuchera micrantha)又名珊瑚铃，虎耳草科矾根属，多年生耐寒草本花卉，浅根性。叶基生，阔心型，长20-25cm，深紫色，在温暖地区常绿，花小，钟状，花径0.6-1.2cm，红色，两侧对称,花期4-10月。喜半荫，耐全光；园林中多用于林下花境、花坛、花带、地被、庭院绿化等。
矾根是国外引入的多年生宿根花卉，自然生长在湿润多石的高山或悬崖旁。性耐寒，喜阳耐阴。在肥沃、排水良好，富含腐殖质的土壤上生长良好。喜中性偏酸、疏松肥沃的壤土，适宜生长在湿润但排水良好、半遮阴的土壤中，忌强光直射。幼苗长势较慢，成苗后生长旺盛，是少有的彩叶阴生地被植物，耐-34℃低温。
植物无糖组织培养技术经过近20年的发展，基础理论的建立和研究已经成熟，但商业化的应用还处于起步阶段。与有糖培养相比，无糖组织培养技术显示出其特有的优势,无糖组织培养技术能显著改善根的质量，提高生根率，消除了小植株生理和形态方面的紊乱，种苗质量显著提高，且大小比较均匀，便于工厂化生产。同时，无糖试验能在一定程度上节约成本，还能大幅度降低污染率，是组培工厂化育苗的发展趋势。
随着材料科学、物理农业的发展，以及植物无糖组织培养技术理论体系的成熟，这一技术将以低成本生产高质量种苗的优势，应用于植物种苗工厂化生产。
发明内容
本发明克服现有技术的缺陷，提供一种利用低糖组培技术培育矾根的方法。
具体而言，本发明提供的利用低糖组培技术培育矾根的方法，包括如下步骤：将经增殖培养获得的矾根的丛芽修剪成单株，接种到生根培养基上进行生根培养。
其中，所述生根培养基的包括：1/2MS基础培养基，0.1～0.3mg/L萘乙酸(简称NAA)，1～2mg/L赤霉素(简称GA3)，8～12g/L蔗糖，4～8g/L琼脂，0.1～0.3mg/L活性炭；优选地，所述生根培养基灭菌前的pH值为5.8～6.2。
本发明所述1/2MS基础培养基是指将常规MS基础培养中大量元素量减半使用的培养基。
本发明通过大量实践发现，当对生根培养基的组成以及各组分的用量进行优化控制，尤其是将蔗糖的用量控制在8～12g/L的范围内，可以确保矾根组培苗的生根率达到98％以上，在实际培养时，10天左右即可开始生根，每株平均根数在3-5根，根长在3cm左右；将所述组培苗移栽到室外后，成活率可到85％以上。
本发明所述生根培养的条件包括：温度23～27℃，光照强度2450～2550Lx，光照时间10～14h/d。
上述方法中作为原料的矾根的丛芽可以采用本领域常规的组培方法培育而成。作为本发明的一种优选方案，所述矾根的丛芽由包括如下步骤的方法培育而成：
(1)取矾根幼嫩的叶片，灭菌清洗后，接种到初代培养培养基上进行初代培养；
(2)将所述初代培养分化出的丛生芽切取下来，接种到增殖培养基上进行增殖培养，得到长到3～5cm且增殖系数在8以上的丛芽。
本发明步骤(1)所述的灭菌清洗可采用本领域的常规操作。作为本发明的一种优选方案，可以为：在无菌的操作台上，先用75％的酒精处理8～12s，用无菌水清洗多次后，再用0.1％的氯化汞处理2-4min(具体处理时间可依据材料的老嫩程度确定)，无菌水清洗多次，晾干。优选地，所述矾根幼嫩的叶片可先用少量洗涤剂溶液浸泡，用毛刷轻轻刷洗干净后放在流水下冲洗过夜，再在无菌操作台上进行处理。
本发明采用的初代培养基以及增殖培养基均可以采用本领域常规的培养基。为了提高矾根丛芽的性能，尤其是实现长3～5cm且增殖系数在8以上，从而确保生根培养过程的顺利进行，本发明进一步对所述初代培养基和增殖培养基的组成进行优选。其中：
所述初代培养基优选包括：MS基础培养基，0.1～0.3mg/L萘乙酸(简称NAA)，28～32g/L蔗糖，4～8g/L琼脂；优选地，该培养基灭菌前的pH值为5.8～6.2。
所述增殖培养基优选包括：MS基础培养基，0.4～0.8mg/L苯基噻二唑基脲(简称TDZ)，萘乙酸(简称NAA)，28～32g/L蔗糖，4～8g/L琼脂；优选地，所述增殖培养基灭菌前的pH值为5.8～6.2。
采用上述培养基进行培养，15天左右生长点开始萌发新芽，28天左右芽基本长到3～5cm，芽比较粗壮且增殖系数在8以上。
本发明所述初代培养、增殖培养的条件可以与生根培养不同，也可以相同。作为本发明的一种优选方案，所述初代培养、增殖培养的条件均为：温度23～27℃，光照强度2450～2550Lx，光照时间10～14h/d。
经本发明所述生根培养后，可以获得健康、茁壮的矾根组培苗。在此基础上，本发明所述方法还可以包括：将经所述生根培养获得的矾根组培苗移栽到室外，进行室外培养。
所述移栽优选为：先将所述矾根组培苗在室外放置进行炼苗，洗掉培养基后移栽于由珍珠岩和腐殖土组成的基质中。
为了进一步满足矾根组培苗的生存条件，本发明优选，所述基质是由由珍珠岩和腐殖土以质量比4：5～7混合而成。
所述进行室外培养可以在湿度65～75％、温度为22～26℃的条件下进行。
本发明提供的方法采用特定、优选的培养基，通过组培技术培育矾根，不仅可保持优良植物品种的遗传稳定性，而且能有效提高其繁殖系数，为进一步开展品种改良奠定基础。
附图说明
图1为矾根生根培养阶段接种3周时的照片；
图2为矾根炼苗移栽阶段炼苗4周后的穴盘苗照片。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1
本实施例提供了一种培育矾根的方法，具体为：
(1)切取矾根幼嫩的叶片，先用少量洗涤剂溶液浸泡20min，用毛刷轻轻刷洗叶片，刷洗干净后放在流水下冲洗过夜；在无菌的操作台上，先用75％酒精处理10s，用无菌水清洗3次，再用0.1％的升汞处理3min，无菌水清洗6次，晾干；将其接种到初代培养基上，放在温度为25±2℃、光照2500Lx、光照时间12h/d的条件下进行初代培养；
所述初代培养基的组成为：MS基础培养基，0.2mg/LNAA，30g/L蔗糖，6g/L琼脂；所述培养基在灭菌前调节pH值至6.0；
(2)将所述初代培养分化出的丛生芽在无菌操作台上切取下来，接种到增殖培养基上，在温度为25±2℃、光照2500Lx、光照时间12h/d的条件下进行增殖培养，15天左右生长点开始萌发新芽，28天左右芽基本长到3-5cm，芽比较粗壮且增殖系数在8以上；
所述增殖培养基的组成为：MS基础培养基，0.6mg/LTDZ，0.2mg/LNAA，30g/L蔗糖，6g/L琼脂；所述培养基在灭菌前调节pH值至6.0；
(3)将经步骤(2)所述增殖培养获得的2cm以上的丛芽修剪成单株，接种到生根培养基上，在温度为25±2℃、光照2500Lx、光照时间12h/d的条件下进行生根培养，10天左右开始生根，每株平均根数在3-5根，根长在3cm左右(接种3周时组培苗的照片如图1所示)；
所述生根培养基的组成为：1/2MS基础培养基，0.2mg/LNAA，1.5mg/LGA3，10g/L蔗糖，6g/L琼脂，0.2mg/L活性炭；所述培养基在灭菌前调节pH值至6.0。
对比例1
与实施例1相比，区别仅在于：所述生根培养基中不含有蔗糖。
对比例2
与实施例1相比，区别仅在于：所述生根培养基中蔗糖的含量为20g/L。
经统计，分别按照实施例1、对比例1以及对比例2的方法进行平行培养，每种方法培养90株，生根培养3周后，生根情况如表1所示。其中，实施例1提供的方法能够获得近99％的生根率。
表1：生根培养的数据统计
| 接种量(株) | 统计时培养周数 | 生根数(株) | 生根率(％) | |
| 实施例1 | 90 | 3周 | 89 | 98.89 |
| 对比例1 | 90 | 3周 | 80 | 88.89 |
| 对比例2 | 90 | 3周 | 84 | 93.33 |
实施例2
将经实施例1培养获得的矾根组培苗于室外放置3天后，开盖炼苗7天，洗掉培养基后移栽于珍珠岩与腐殖土以质量比4：6混合而成的基质中，保持湿度70％左右、温度24℃左右，进行栽培；炼苗4周后的穴盘苗照片如图2所示。
按照上述方法，同时对对比例1、对比例2获得的组培苗进行栽培；每种方法重复3组，每组30株，成活率如表2所示。
表2：炼苗移栽结果统计
由表2结果可知，本发明提供的方法培育得到的组培苗进行室外栽培，存活率可到85％以上，显著高于各对比例。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种利用低糖组培技术培育矾根的方法，其特征在于，包括如下步骤：将经增殖培养获得的矾根的丛芽修剪成单株，接种到生根培养基上进行生根培养；
所述生根培养基的包括：1/2MS基础培养基，0.1～0.3mg/L萘乙酸，1～2mg/L赤霉素，8～12g/L蔗糖，4～8g/L琼脂，0.1～0.3mg/L活性炭。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生根培养基灭菌前的pH值为5.8～6.2。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述生根培养的条件包括：温度23～27℃，光照强度2450～2550Lx，光照时间10～14h/d。
4.根据权利要求1～3任意一项所述的方法，其特征在于，所述矾根的丛芽由包括如下步骤的方法培育而成：
(1)取矾根幼嫩的叶片，灭菌清洗后，接种到初代培养培养基上进行初代培养；
(2)将所述初代培养分化出的丛生芽切取下来，接种到增殖培养基上进行增殖培养，得到长到3～5cm且增殖系数在8以上的丛芽。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的灭菌清洗具体为：在无菌的操作台上，先用75％的酒精处理8～12s，用无菌水清洗多次后，再用0.1％的氯化汞处理2-4min，无菌水清洗多次，晾干；
优选地，所述矾根幼嫩的叶片先用少量洗涤剂溶液浸泡，用毛刷轻轻刷洗干净后放在流水下冲洗过夜，再在无菌操作台上进行处理。
6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，步骤(1)采用的初代培养基的组成包括：MS基础培养基，0.1～0.3mg/L萘乙酸(简称NAA)，28～32g/L蔗糖，4～8g/L琼脂；优选地，该培养基灭菌前的pH值为5.8～6.2。
7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述增殖培养基的组成包括：MS基础培养基，0.4～0.8mg/L苯基噻二唑基脲(简称TDZ)，萘乙酸(简称NAA)，28～32g/L蔗糖，4～8g/L琼脂；优选地，所述增殖培养基灭菌前的pH值为5.8～6.2。
8.根据权利要求4～7任意一项所述的方法，其特征在于，所述初代培养和/或所述增殖培养的条件包括：温度23～27℃，光照强度2450～2550Lx，光照时间10～14h/d。
9.根据权利要求1～8任意一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：将经所述生根培养获得的矾根组培苗移栽到室外，进行室外培养；
所述移栽优选为：先将所述矾根组培苗在室外放置进行炼苗，洗掉培养基后移栽于由珍珠岩和腐殖土组成的基质中。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述基质是由由珍珠岩和腐殖土以质量比4：5～7混合而成；
和/或，所述进行室外培养的湿度为65～75％，温度为22～26℃。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201711165308.1A CN108040871B (zh) | 2017-11-21 | 2017-11-21 | 一种利用低糖组培技术培育矾根的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201711165308.1A CN108040871B (zh) | 2017-11-21 | 2017-11-21 | 一种利用低糖组培技术培育矾根的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN108040871A true CN108040871A (zh) | 2018-05-18 |
| CN108040871B CN108040871B (zh) | 2020-05-08 |
Family
ID=62120284
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201711165308.1A Active CN108040871B (zh) | 2017-11-21 | 2017-11-21 | 一种利用低糖组培技术培育矾根的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN108040871B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108513911A (zh) * | 2018-07-02 | 2018-09-11 | 杭州市园林绿化股份有限公司 | 一种矾根叶柄不定芽高频再生的组织培养诱导方法 |
-
2017
- 2017-11-21 CN CN201711165308.1A patent/CN108040871B/zh active Active
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108513911A (zh) * | 2018-07-02 | 2018-09-11 | 杭州市园林绿化股份有限公司 | 一种矾根叶柄不定芽高频再生的组织培养诱导方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN108040871B (zh) | 2020-05-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104663200B (zh) | 一种蕨类植物规模繁殖方法 | |
| CN102972190A (zh) | 一种西瓜嫁接及嫁接苗培育的方法 | |
| CN105104203A (zh) | 一种非洲菊脱毒种苗的高效扩繁方法 | |
| CN102204512A (zh) | 细叶百合的组织培养方法 | |
| CN106613988B (zh) | 瓶内塑型快速培育难扦插繁殖的拟石莲属商品小盆栽方法 | |
| CN104521482A (zh) | 一种茉莉花单主干形盆栽培育方法 | |
| CN105766619B (zh) | 一种黄花菜种子的培育方法 | |
| CN108718740A (zh) | 采用地膜对金槐扦插育苗的方法 | |
| CN105594540A (zh) | 毛瓣金花茶嫁接育苗方法 | |
| CN107197746A (zh) | 一种杉木野外优异资源的繁育方法 | |
| CN105340537B (zh) | 小蜡扦插方法 | |
| CN102246700A (zh) | 以嫩茎为外植体的滇杨组织培养方法 | |
| CN106165648B (zh) | 一种紫荆组培培养基及培养方法 | |
| CN101743908A (zh) | 红花银桦组培快繁及栽培方法 | |
| CN105557515B (zh) | 一种圆叶鸟巢蕨的组培快繁方法 | |
| CN105284622B (zh) | 一种快速获得鸢尾杂交优良无性系的方法 | |
| CN113973673B (zh) | 一种珠芽魔芋扩繁种苗的方法 | |
| CN108040871A (zh) | 一种利用低糖组培技术培育矾根的方法 | |
| CN108719067A (zh) | 一种滇重楼的组培快繁方法 | |
| CN104488711A (zh) | 一种快速获得洋桔梗品种间杂交种的方法 | |
| CN103947551B (zh) | 一种促进春鹃种子萌发成苗的方法 | |
| CN105340742A (zh) | 一种云南樱桃成年优良单株“广州”樱的组培快繁方法 | |
| CN110809934A (zh) | 一种猪血木种子萌发及育苗的方法 | |
| CN102812903A (zh) | 一种通过茎尖细胞层重排对嵌合体彩叶植物进行种质创新的方法 | |
| CN114931097B (zh) | 用于千年健的组织培养产品、千年健的组织培养方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB02 | Change of applicant information | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: 636600 Tissue Culture Workshop Building of Rare and Colorful Leaf Plant Varieties in Guangwu Mountain, Sanshe, Changtan Village, Zhengzheng Town, Nanjiang County, Bazhong City, Sichuan Province Applicant after: Sichuan Qicai Forestry Co., Ltd. Address before: Six agency 636611 Dong Yu Zhen Huai Shu Cun, Bazhong city of Sichuan province Nanjiang County Applicant before: SICHUAN QICAI FORESTRY INDUSTRY DEVELOPMENT CO., LTD. |
|
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20210624 Address after: No. 358, Kejin Road, Wenjiang District, Chengdu, Sichuan 610000 Patentee after: Sichuan Lide Seedling Technology Co.,Ltd. Address before: 636600 Guangwu mountain rare color leaf plant variety tissue culture workshop building, sanshe, Changtan village, Zhengzheng Town, Nanjiang County, Bazhong City, Sichuan Province Patentee before: Sichuan Qicai Forestry Co.,Ltd. |