CN108030756A - 一种含有枸杞干细胞提取物祛黑眼圈护肤品及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种祛黑眼圈护肤品，含有以下重量份的成分，枸杞干细胞提取物1～3.5份、车前草提取物3～10份、毛活血丹提取物2.5～8份、冬虫夏草提取物5～15份；中药提取物具有很好的促进微循环和抑制黑色素生成的功效，且制备方法简便，利用其制备得到的护肤制剂，所得产品绿色安全，功效显著，易吸收，采用枸杞的干细胞对人体具有良好的相容性，更易于被人体吸收，对皮肤细胞的生长具有良好的促进作用，可以加快细胞的新陈代谢，增强皮肤细胞的活力，同时添加车前草提取物、毛活血丹提取物、冬虫夏草提取物，与枸杞干细胞提取物发生协同作用，起到祛黑眼圈的增效协同作用，效果明显高于单独添加其中一种或两种提取物。

Description

一种含有枸杞干细胞提取物祛黑眼圈护肤品及其制备方法
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域，具体是涉及一种含有枸杞干细胞提取物祛黑眼圈护肤品及其制备方法。
背景技术
爱美是每个人的天性，随着人们物质生活水平的提高，人们在满足物质方面的需求后，也越来越注意容颜的美丽和护理问题。眼睛是心灵的窗口，故眼部护理便是护肤中的重点部位，眼部皮肤是人体全身最薄的皮肤，随着年龄的增长，眼部最易产生黑眼圈、眼袋和皱纹等老化现象。
黑眼圈也是我们常说的“熊猫眼”，是由于经常熬夜，情绪不稳定，眼部疲劳、衰老，静脉血管血流速度过于缓慢，眼部皮肤红血球细胞供氧不足，静脉血管中二氧化碳及代谢废物积累过多，形成慢性缺氧，血液较暗并形成滞流以及造成眼部色素沉着。年纪愈大的人，眼睛周围的皮下脂肪变得愈薄，所以黑眼圈就更明显。黑眼圈其实分两种颜色，一种是青色黑眼圈，这是因为微血管的静脉血液滞留；另一种是茶色黑眼圈，因黑色素生成与代谢不全而产生，两种黑眼圈产生的原因完全不同。青黑色眼圈通常发生在20岁左右，生活作息不正常的人尤难避免。现在由于学生学习压力较大，年轻人熬夜已经成为家常便饭，所以出现黑眼圈的人群的年龄有下移的趋势，18岁以上的人群里黑眼圈就已经很普遍。因其微血管内血液流速缓慢，血液量增多而氧气消耗量提高，缺氧血红素大增的结果。从外表看来，皮肤就出现暗蓝色调。由于眼睛周围较多微血管，因此睡眠不足、眼睛疲劳、压力、贫血等因素，都会造成眼周肌肤淤血及浮肿现象。茶黑色眼圈的成因则和年龄增长息息相关，长期日晒造成色素沉淀在眼周，久而久之就会形成挥之不去的黑眼圈。
目前，市场上有许多用于眼部护理的产品，品种繁多，大部分的眼部护理液都是化学合成产品，虽然能暂时且快速地改善眼部健康问题，但使用一段时间后，就会出现各种各样的副作用，甚至有可能会对眼部造成更大的损害。
植物干细胞(plant stem cell)是未分化的细胞，具有很强的自我更新和持续分裂能力。研究表明，含有干细胞的护肤品可以刺激细胞更新，促进胶原蛋白分泌。使用干细胞的效果比一般的护肤品更快速有效。中国专利CN 102670438B公开了一种抗衰老美容护肤品，含有植物干细胞活性物0.001～3wt％，Dragosine肌肽0.01～3wt％，所述的植物干细胞活性物为PhytocelltecTMMalusDomestica苹果干细胞、PhytocelltecTMSolarVitis葡萄干细胞、PhytocelltecTMAlpRose玫瑰叶干细胞、PhytocelltecTM Arga n坚果干细胞、RegenistemRiceAp红米干细胞中的至少一种。该美容护肤品具有改善肤质，提高皮肤弹性的作用。
目前市面上还未出现使用植物干细胞用于祛黑眼圈的报道。
发明内容
本发明的目的在于克服上述问题而提供以中药为主要功效原料，各组分合理组合、配合共用，能够抵御外界刺激、减少黑色素、促进血液微循环，长期使用具有祛除黑眼圈的效果。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案是
本发明所用祛黑眼圈护肤品主要成分以及功效如下：
枸杞：含有丰富的胡萝卜素、多种维生素和钙、铁等健康眼睛的必需营养物质，故有明目之功，俗称“明眼子”。历代医家治疗肝血不足、肾阴亏虚引起的视物昏化和夜盲症，常常使用枸杞。并且，枸杞从诗经“集于苞杞”时起，便用于医药，迄今已有3000余年的历史，皮肤衰老主要是由于自由基氧化所造成，而枸杞中所含的枸杞多糖、B一胡萝卜素、黄酮类都是强力的抗氧化剂，再加上枸杞所含的微量元素硒和维生素E的协同作用，组成了强大的抗氧化部队；另外，维生素A可维持上皮组织的生长与分化，防止皮肤干燥和毛囊角化，从而起到美容养颜、滋润肌肤的作用。
本发明选用枸杞的干细胞为原料，植物干细胞包含有关于植物发育和生长的所有程式，拥有永恒生命力的细胞，是植物生命力的根源(origin)。植物干细胞存在于被称为分生组织的特殊构造内，具有非常惊人的再生能力。这些使得植物可以在数百年间不断生长，并生成全新的器官。植物干细胞是皮肤干细胞新陈代谢的主要原料和源泉，能快速激活休眠干细胞，促进干细胞自我修复更新，还原表皮干细胞初生活力，使皮肤细胞源源新生，从而达到提升、紧致皮肤、淡化眼部皱纹的抗衰老效果，同时能够更容易被皮肤吸收植物的营养成分；加快人体新陈代谢。
车前草：性味：甘；淡；性微寒。归经：归肺经；肝经；肾经；膀胱经。功能：清热利尿；渗湿止泻；明目；祛痰。主治：主小便不利；淋浊带下；水肿胀满；暑湿泻痢；目赤障翳；痰热咳喘。目前，未曾见到用于祛黑眼圈的报道。
毛活血丹：富含黄酮类物质，活血丹总黄酮对痒自由基和羟自由基均有很强的清除作用。
冬虫夏草：冬虫夏草，是麦角菌科真菌冬虫夏草寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，是一种传统的名贵滋补中药材，有调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗疲劳，降血脂等多种功效。药理学现代研究结果中，冬虫夏草含有虫草酸约7％，碳水化合物28.9％，脂肪约8.4％，蛋白质约25％，脂肪中82.2％为不饱和脂肪酸，此外，尚含有维生素B12、麦角脂醇、六碳糖醇、生物碱等。冬虫夏草提取物可以提高亚急性衰老小鼠红细胞，肝脏和脑中SOD活性，并提高血中过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性。
本发明的有益效果：本发明提供中药组合物经提取得到的中药提取物具有很好的促进微循环和抑制黑色素生成的功效，且制备方法简便，利用其制备得到的护肤制剂，所得产品绿色安全，功效显著，易吸收，本发明选用枸杞干细胞提取物为成分，利用枸杞的有效成分，能够活化细胞，清除自由基，紧致皮肤，采用枸杞的干细胞对人体具有良好的相容性，更易于被人体吸收，对皮肤细胞的生长具有良好的促进作用，可以加快细胞的新陈代谢，增强皮肤细胞的活力，同时添加车前草提取物、毛活血丹提取物、冬虫夏草提取物，与枸杞干细胞提取物发生协同作用，起到祛黑眼圈的增效协同作用，在多种中药提取物协同作用下，产品可以明显改善肤质，促进微循环，提高皮肤弹性，提高皮肤的增生能力，效果明显高于单独添加其中一种或两种提取物。
具体实施方式
为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。
一种含有枸杞干细胞提取物祛黑眼圈护肤品，含有以下重量份的成分，枸杞干细胞提取物1～3.5份、车前草提取物3～10份、毛活血丹提取物2.5～8份、冬虫夏草提取物5～15份，十六十八混合醇0.5～1份、硬脂酸甘油酯和PEG-100份0.5～1.5份、月见草油0.5～2份、茶花籽油1～2份、二甲基硅油2～3份、尼泊金甲酯0.1～0.5份、二叔丁基对甲酚0.01～0.05份、棕榈酸异辛酯2～3份、甘油5～10份、丙二醇2～8份、氨基酸保湿剂5～10份、羟乙基丙烯酸盐1～2份、去离子水50～80份。
本发明的十六十八混合醇、硬脂酸甘油酯和PEG-100份、月见草油、茶花籽油、二甲基硅油、尼泊金甲酯、二叔丁基对甲酚、棕榈酸异辛酯为油相组分；
甘油、丙二醇、氨基酸保湿剂为水相组分；
上述护肤品的制备方法，包括以下步骤：
1)枸杞干细胞提取物的制备：a)选择无化肥农药污染、绿色有机种植的枸杞，并按标准挑选十支10cm长的新生枝条，用无菌水冲洗枸杞枝条表面附着物15～20分钟，将新生枝条放进110mg/L的抗坏血酸中浸泡1min，再用75％的酒精进行表面消毒30秒，然后，用0.1％的升汞液消毒10～20分钟，最后用无菌水反复冲洗5次，洗去植物表面的升汞残液；b)将灭菌后的枸杞枝条用接种刀剥离形成层、韧皮部、皮质、和表皮组织，丢弃木质部和髓，将获得的组织接种至新鲜的诱导培养基中，以每1g组织接种10cm2的诱导培养基的密度进行接种，在受控的暗室内25℃连续培养10天，获得形成层组织；c)将再生的形成层组织与其他组织分开，以每1g组织接种固体培养基10cm2的诱导培养基的密度，将再生的形成组织接种至新鲜的诱导培养基中，在受控的暗室内25℃连续培养10天，获得愈伤组织；d)在1000ml的三角瓶中加入200ml增殖培养基、灭菌处理的20g、直径0.5cm的玻璃珠，将10g愈伤组织移至三角瓶中，将三角瓶置于25℃、120r/min的摇床上进行培养，每小时用20w的白炽灯进行照射10min，第七天，加入新鲜的400ml液体培养基至细胞密度为其中细胞密度的1×105/ml,然后继续培养7天，培养后用100目的不锈钢筛网过滤，除去细胞团、残渣等，得到枸杞细胞悬液；e)将枸杞细胞悬浮液移至20L生物反应器中进行大规模培养，生物反应器容纳5L的增殖培养基，培养第7天再加入10L的增殖培养基，继续培养后获得细胞悬浮液。f)收集步骤e)中获得枸杞干细胞悬液，用1um过滤器过滤，去掉培养基，收获截留的细胞；并将细胞放入-80℃的超低温冷冻2小时，然后取出解冻30分钟，重复上述操作5次，最后一次室温解冻后，用超声波破碎仪破碎细胞，过滤器过滤后，搜集滤液，于旋转式真空蒸发器内浓缩，即可获得枸杞干细胞提取物。
诱导培养基：NAA0.5mg/L+BA 2.0mg/L和水解酪蛋白1mg/L+MS固体培养基,pH值为6.0；增殖培养基：2,4-D 2.5mg/L+BA1.5mg/L+水解酪蛋白1mg/L和活性碳1mg/L+MS液体培养基；pH值为6.0。
2)将枸杞干细胞提取物、车前草提取物、毛活血丹提取物、冬虫夏草提取物、水相组分、去离子水加入水相锅中，加热升温至85～90℃，搅拌溶解，为水相；
4)将油性组分加入油相锅，搅拌加热至80-85℃，分散完全后抽入乳化锅，为油相；
5)把水相锅中的物料经过滤网缓慢抽入乳化锅内进行乳化，加入乳化剂羟乙基丙烯酸盐、乳化15-40分钟后停止均质，开循环水降温，保持搅拌和抽真空消泡；继续降温至36℃时，出料，即得成品。
实施例1
一种含有枸杞干细胞提取物祛黑眼圈护肤品，含有以下质量百分比的成分，枸杞干细胞提取物1份、车前草提取物3份、毛活血丹提取物2.5份、冬虫夏草提取物6份，十六十八混合醇0.5份、硬脂酸甘油酯和PEG-100份0.5份、月见草油0.6份、茶花籽油1份、二甲基硅油2份、尼泊金甲酯0.1份、二叔丁基对甲酚0.01份、棕榈酸异辛酯2份、甘油5份、丙二醇2份、氨基酸保湿剂5份、羟乙基丙烯酸盐1份、去离子水50份。
本实施例的制备方法如上述所述。
实施例2
一种含有枸杞干细胞提取物祛黑眼圈护肤品，含有以下质量百分比的成分，枸杞干细胞提取物1.5份、车前草提取物4份、毛活血丹提取物5份、冬虫夏草提取物5份，十六十八混合醇0.6份、硬脂酸甘油酯和PEG-100份0.6份、月见草油0.8份、茶花籽油1.2份、二甲基硅油2.2份、尼泊金甲酯0.15份、二叔丁基对甲酚0.02份、棕榈酸异辛酯2.2份、甘油6份、丙二醇2.5份、氨基酸保湿剂6份、羟乙基丙烯酸盐1.5份、去离子水60份。
本实施例的制备方法如上述所述。
实施例3
一种含有枸杞干细胞提取物祛黑眼圈护肤品，含有以下质量百分比的成分，枸杞干细胞提取物2份、车前草提取物5份、毛活血丹提取物3.5份、冬虫夏草提取物8份，十六十八混合醇0.7份、硬脂酸甘油酯和PEG-100份0.8份、月见草油1份、茶花籽油1.5份、二甲基硅油2.5份、尼泊金甲酯0.2份、二叔丁基对甲酚0.04份、棕榈酸异辛酯2.5份、甘油7份、丙二醇4份、氨基酸保湿剂6份、羟乙基丙烯酸盐1.4份、去离子水65份。
本实施例的制备方法如上述所述。
实施例4
一种含有枸杞干细胞提取物祛黑眼圈护肤品，含有以下质量百分比的成分，枸杞干细胞提取物2.5份、车前草提取物6份、毛活血丹提取物6份、冬虫夏草提取物10份，十六十八混合醇0.8份、硬脂酸甘油酯和PEG-100份1份、月见草油1.2份、茶花籽油1.8份、二甲基硅油2.3份、尼泊金甲酯0.3份、二叔丁基对甲酚0.02份、棕榈酸异辛酯2.2份、甘油6.5份、丙二醇5份、氨基酸保湿剂6.5份、羟乙基丙烯酸盐1.6份、去离子水70份。
本实施例的制备方法如上述所述。
实施例5
一种含有枸杞干细胞提取物祛黑眼圈护肤品，含有以下质量百分比的成分，枸杞干细胞提取物3份、车前草提取物7份、毛活血丹提取物6.5份、冬虫夏草提取物12份，十六十八混合醇1份、硬脂酸甘油酯和PEG-100份1.2份、月见草油1.5份、茶花籽油2份、二甲基硅油2.5份、尼泊金甲酯0.4份、二叔丁基对甲酚0.03份、棕榈酸异辛酯2.5份、甘油7份、丙二醇6份、氨基酸保湿剂7份、羟乙基丙烯酸盐1.8份、去离子水75份。
本实施例的制备方法如上述所述。
实施例6
一种含有枸杞干细胞提取物祛黑眼圈护肤品，含有以下质量百分比的成分，枸杞干细胞提取物3.2份、车前草提取物8份、毛活血丹提取物7份、冬虫夏草提取物13份，十六十八混合醇0.8份、硬脂酸甘油酯和PEG-100份1.5份、月见草油1.6份、茶花籽油1.5份、二甲基硅油2.8份、尼泊金甲酯0.5份、二叔丁基对甲酚0.04份、棕榈酸异辛酯2.8份、甘油7.5份、丙二醇6.5份、氨基酸保湿剂8份、羟乙基丙烯酸盐2份、去离子水80份。
本实施例的制备方法如上述所述。
实施例7
一种含有枸杞干细胞提取物祛黑眼圈护肤品，含有以下质量百分比的成分，枸杞干细胞提取物3.5份、车前草提取物10份、毛活血丹提取物8份、冬虫夏草提取物15份，十六十八混合醇0.6份、硬脂酸甘油酯和PEG-100份1.2份、月见草油2份、茶花籽油2份、二甲基硅油3份、尼泊金甲酯0.4份、二叔丁基对甲酚0.05份、棕榈酸异辛酯3份、甘油10份、丙二醇8份、氨基酸保湿剂10份、羟乙基丙烯酸盐1.5份、去离子水80份。
本实施例的制备方法如上述所述。
对照组
表1为对照组护肤品的中药成分和含量
对照组17采用市面上销售的百雀羚祛黑眼圈护肤品。
表1中列出的护肤品的为中药成分的含量，其余助剂的含量与成分与实施例3相同。
实验效果
1、豚鼠皮肤刺激实验
各取0.5g实施例1～7护肤品组合物，采用去离子水稀释至100g配置成受试样品。受试样品采用皮肤刺激性试验方法(《化妆品卫生规范》2007版毒理学试验方法)进行测试。
实验动物：豚鼠体重250g～300g。
实验结果：经14天皮肤刺激试验，未见刺激反应。
2、治疗效果
2.1试用例数：选有黑眼圈的人，25-55岁人群，分为24组，每组50例，男性25例，女性25例；
2.2使用方法：彻底清洁面部肌肤，以无名指将本产品轻轻涂抹于眉骨及眼部下方，待10-15分钟后，用湿润的软毛巾轻轻拭去，每三天1次，使用30天查看使用效果。
2.3使用结果
从表2可看出，使用本发明的祛黑眼圈护肤品，其有效率在86％以上，表明本发明产品对祛黑眼圈具有良好的治疗效果，其中实施例2至6均在90％以上。
对照组1～4为分别只使用枸杞干细胞提取物、车前草提取物、毛活血丹提取物、冬虫夏草提取物中的一种，其有效率在56％～60％之间，有一定的祛黑眼圈效果，但是效果不佳，对照组5～10为使用四种提取物中的任意两者组合制得护肤品，其有效率在62～68％之间，可看出，相对于一种提取物，其效果有提升，对照组11～14为使用四种提取物中任意三种组合，其有效率在65～70％之间，其与两者组合，相差不大，而本发明选用四种同时组合，其效果得到很大提升，说明只有在四种提取物共同协同作用下，才能发挥最佳效果。
对照组15～16为为在使用相同的组合物，相同的制备方法条件下，其配方比例在本发明的特定的比例范围外，其效果均远远不如本发明的效果，证明，本发明的组合物只有在特定比例内才能发挥显著的祛黑眼圈效果。对照组17为使用市售产品，可看出，效果不如本发明，说明本发明相对于，现有技术具有显著的祛痘效果。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明保护的范围之内。

Claims (10)

1.一种祛黑眼圈护肤品，其特征在于，含有以下重量份的成分，枸杞干细胞提取物1～3.5份、车前草提取物3～10份、毛活血丹提取物2.5～8份、冬虫夏草提取物5～15份。
2.根据权利要求1所述的祛黑眼圈护肤品，其特征在于，还含有以下重量份的成分，十六十八混合醇0.5～1份、硬脂酸甘油酯和PEG-100份0.5～1.5份、月见草油0.5～2份、茶花籽油1～2份、二甲基硅油2～3份、尼泊金甲酯0.1～0.5份、二叔丁基对甲酚0.01～0.05份、棕榈酸异辛酯2～3份、甘油5～10份、丙二醇2～8份、氨基酸保湿剂5～10份、羟乙基丙烯酸盐1～2份、去离子水50～80份。
3.根据权利要求1所述的的祛黑眼圈护肤品，其特征在于，含有以下重量份的成分，枸杞干细胞提取物1.5～3.2份、车前草提取物4～8份、毛活血丹提取物3～7份、冬虫夏草提取物5～13份。
4.根据权利要求1所述的的祛黑眼圈护肤品，其特征在于，含有以下重量份的成分，枸杞干细胞提取物1.5～3份、车前草提取物4～7份、毛活血丹提取物3～6.5份、冬虫夏草提取物5～12份。
5.根据权利要求1所述的的祛黑眼圈护肤品，其特征在于，含有以下重量份的成分，枸杞干细胞提取物2～3份、车前草提取物5～7份、毛活血丹提取物3.5～6.5份、冬虫夏草提取物8～12份。
6.根据权利要求1所述的的祛黑眼圈护肤品，其特征在于，含有以下重量份的成分，枸杞干细胞提取物2～2.5份、车前草提取物5～6份、毛活血丹提取物3.5～6份、冬虫夏草提取物8～10份。
7.根据权利要求1所述的的祛黑眼圈护肤品，其特征在于，含有以下重量份的成分，枸杞干细胞提取物2份、车前草提取物5份、毛活血丹提取物3.5份、冬虫夏草提取物8份。
8.根据权利要求1所述的的祛黑眼圈护肤品，其特征在于，含有以下重量份的成分，枸杞干细胞提取物2.5份、车前草提取物6份、毛活血丹提取物6份、冬虫夏草提取物10份。
9.根据权利要求1所述的的祛黑眼圈护肤品，其特征在于，含有以下重量份的成分，枸杞干细胞提取物3份、车前草提取物7份、毛活血丹提取物6.5份、冬虫夏草提取物12份。
10.一种如权利要求1至9任一项所述的祛黑眼圈护肤品，其特征在于，包括以下步骤：
1)所述枸杞干细胞提取物的制备：a)将枸杞新枝条杀菌、去除木质部和髓后，接种于诱导培养基，诱导培养基获得形成层细胞；b)形成层细胞经培养基经继代、接入增殖培养基、摇床培养获得单细胞；c)所述单细胞接种于增殖培养基经扩大培养，得到枸杞干细胞；d)所述扩增后的枸杞干细胞经冷冻破碎后浓缩，即收获枸杞干细胞提取物；
2)将所述枸杞干细胞提取物、车前草提取物、毛活血丹提取物、冬虫夏草提取物、甘油、丙二醇、氨基酸保湿剂、去离子水加入水相锅中，加热升温至85～90℃，搅拌溶解，为水相；
3)将所述十六十八混合醇、硬脂酸甘油酯和PEG-100份、月见草油、茶花籽油、二甲基硅油、尼泊金甲酯、二叔丁基对甲酚、棕榈酸异辛酯加入油相锅，搅拌加热至80-85℃，分散完全后抽入乳化锅；
4)把水相锅中的物料经过滤网缓慢抽入乳化锅内进行乳化，加入乳化剂羟乙基丙烯酸盐、乳化15-40分钟后停止均质，开循环水降温，保持搅拌和抽真空消泡；继续降温至36℃时，出料，即得成品。
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