CN107936139A - 一种硫酸皮肤素的制备工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种硫酸皮肤素的制备工艺，具体步骤如下：(1)将肝素副产物加入纯化水中溶解成质量浓度为100g/L的溶液，加入蛋白酶并保持PH为7～10、温度40～70℃，并搅拌2～5h；(2)将所得的酶解液降至室温后用阴离子交换树脂吸附；(3)用质量浓度为20～30g/L的盐水对树脂进行洗涤；(4)再用质量浓度为40～60g/L的盐水对树脂进行洗脱并收集洗脱液；(5)将洗脱液用纳滤膜过滤；(6)向浓缩液中加入乙醇至浓度达到40～60％，静置1～2h，待上清液澄清后，抽去上清液，沉淀加入1.5倍乙醇脱水用过滤器抽滤除尽乙醇；(7)将硫酸皮肤素干燥。本发明采用无毒无害的方法从肝素副产物中纯化硫酸皮肤素，并且生产工艺简单，产品收率高。
Description
技术领域
本发明涉及一种硫酸皮肤素的制备工艺，尤其涉及一种从肝素副产物制取硫酸皮肤素的工艺。
背景技术
硫酸皮肤素为二糖聚合物，是动物体内分布最广泛的一种细胞外基质糖胺多糖，为血管壁蛋白多糖的主要成份。硫酸皮肤素是糖胺聚糖的一种，由D-葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖以α-1，4-糖苷键连接而成的重复二糖单位组成的多糖，并在N-乙酰氨基半乳糖的C-4位或C-6位羟基上发生硫酸酯化。由于含有硫酸基团，整个cs分子呈现很强的负电性，易与蛋白质共价结合组成蛋白聚糖，同时也是其发挥生物学作用的重要基础。硫酸皮肤素作为结缔组织的重要组成部分，具有多种药理作用与生理功能，可用作药物和保健食品，主要用于骨关节炎和冠状动脉粥样硬化性心脏病。
长期以来，动物皮层是制备硫酸皮肤素的主要原料，早在60年代，Clifonelli·J·A和Roden·L等人就曾利用猪皮为原料制备硫酸皮肤素，但是该方法耗时耗力，耗费试剂，而且操作复杂收得的硫酸皮肤素的纯度不高。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种生产工艺简单、生产成本低、所得硫酸皮肤素纯度高的硫酸皮肤素的制备工艺，本发明采用超滤膜技术对洗脱液进行浓缩，去盐，简化了工艺步骤，缩短了工期。
为了解决上述技术问题，本发明提供一种硫酸皮肤素的制备工艺，具体步骤如下：
(1)将肝素副产物放入纯化水中溶解成质量浓度为100g/L的溶液，在溶有肝素副产物的溶液中加入一定量的蛋白酶并保持溶液的PH为7～10，将溶有肝素副产物和蛋白酶的溶液升温至40～70℃并搅拌2～5h，即得酶解液；
(2)将步骤(1)中所得的酶解液冷却至室温后用阴离子交换树脂吸附8～10h，吸附过后用80目尼龙布过滤袋将阴离子交换树脂滤出；
(3)将收集在80目尼龙布过滤袋中的阴离子交换树脂用质量浓度为20～30g/L、流速为0.4～0.6Bv的盐水对阴离子交换树脂进行洗涤2～3次，洗涤液的用量为2～3个体积；
(4)将洗涤后的阴离子交换树脂再用质量浓度为40～60g/L的盐水对80目尼龙布过滤袋中的阴离子交换树脂进行洗脱并收集洗脱液，洗脱液的用量为4～6倍柱体积；
(5)将步骤(4)中所得的洗脱液用纳滤膜过滤除去盐的同时还将对洗脱液进行浓缩，将浓缩压力控制到3kg时停止浓缩，即得浓缩液；
(6)向步骤(5)中所得的浓缩液中加入乙醇并搅拌至乙醇浓度达到40～60％，静置1～2h，待上清液澄清后抽去上清液，再向沉淀中加入1.5倍乙醇脱水后用过滤器抽滤除尽乙醇，即得硫酸皮肤素沉淀；
(7)将步骤(6)中所得的硫酸皮肤素沉淀置于50～60℃的条件下干燥5～8h，即得硫酸皮肤素。
进一步地，所述步骤(1)中加入的蛋白酶为2709蛋白水解酶，加入的2709蛋白水解酶的量是肝素副产物的0.1％～1％。
进一步地，所述步骤(1)中在溶有肝素副产物的溶液中加入一定量的蛋白酶并调节溶液的PH为9，并将溶有肝素副产物和蛋白酶的溶液升温至45℃并搅拌5h。
进一步地，所述步骤(3)中用质量浓度为20g/L、流速为0.5Bv的盐水对阴离子交换树脂进行洗涤3次，洗涤液的用量为2个体积。
进一步地，所述步骤(4)中用质量浓度为60g/L的盐水对阴离子交换树脂进行洗脱并收集洗脱液，洗脱液的用量为5倍柱体积。
进一步地，所述步骤(5)中的纳滤膜选择孔径小于1000Da分子量。
进一步地，所述步骤(6)中向所得的浓缩液中加入乙醇并搅拌至乙醇浓度达到45％，静置2h。
进一步地，所述步骤(7)中的硫酸皮肤素沉淀置于55℃的条件下干燥8h。
与现有技术相比，本发明所达到的有益效果：
(1)本发明中在溶有肝素副产物的溶液中加入2709碱性蛋白水解酶，并将溶有肝素副产物和2709碱性蛋白酶的溶液升温至45℃并搅拌5h，加入的2709碱性蛋白水解酶不但能将大分子的蛋白质水解成游离的氨基酸等产物，还能调节溶液的PH，将溶液升温至45℃并搅拌是为了促进酶的水解反应。
(2)本发明中用质量浓度为20g/L、流速为0.5Bv的盐水对阴离子交换树脂进行洗涤3次，用盐水洗涤是为了抑制弱碱阴离子交换树脂中性盐的分解。
(3)本发明中采用超滤膜技术对洗脱液进行除盐的同时还对洗脱液进行了浓缩，这种超滤膜技术在常温下就可以达到浓缩提纯硫酸皮肤素的目的，不造成有效成分的破坏，简化了工艺步骤，缩短了生产工期。
(4)本发明中在所得的浓缩液中加入乙醇并搅拌至乙醇浓度达到40～60％，在乙醇浓度达到40～60％时，沉淀质量最大，沉淀出的硫酸皮肤素纯度最高。
(5)本发明中所使用的原料来源广泛，节约了成本，同时本发明的操作方法较为简单。
综上所述，本发明提供的制备硫酸皮肤素的工艺不仅绿色无污染，简单易行，能有效分离肝素钠与硫酸皮肤素，而且生产工艺简单，生产成本低，经济效益好。
具体实施方式
以下实施例仅用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1
一种硫酸皮肤素的制备工艺，具体步骤如下：
(1)将100g肝素副产物放入纯化水中溶解成质量浓度为100g/L的溶液，在溶有肝素副产物的溶液中加入0.5g蛋白酶并保持溶液的PH为9，将溶有肝素副产物和蛋白酶的溶液升温至45℃并搅拌5h，即得酶解液；
(2)将步骤(1)中所得的酶解液冷却至室温后用阴离子交换树脂吸附8h，吸附过后用80目尼龙布过滤袋将阴离子交换树脂滤出；
(3)将收集在80目尼龙布过滤袋中的阴离子交换树脂用质量浓度为20g/L、流速为0.5Bv的盐水对阴离子交换树脂进行洗涤3次，洗涤液的用量为2个体积；
(4)将洗涤后的阴离子交换树脂再用质量浓度为60g/L的盐水对80目尼龙布过滤袋中的阴离子交换树脂进行洗脱并收集洗脱液，洗脱液的用量为4倍柱体积；
(5)将步骤(4)中所得的洗脱液用纳滤膜过滤除去盐的同时还将对洗脱液进行浓缩，将浓缩压力控制到3kg时停止浓缩，即得浓缩液；
(6)向步骤(5)中所得的浓缩液中加入乙醇并搅拌至乙醇浓度达到45％，静置2h，待上清液澄清后抽去上清液，再向沉淀中加入1.5倍乙醇脱水后用过滤器抽滤除尽乙醇，即得硫酸皮肤素沉淀；
(7)将步骤(6)中所得的硫酸皮肤素沉淀置于55℃的条件下干燥8h，即得硫酸皮肤素。
实施例2
(1)将150g肝素副产物放入纯化水中溶解成质量浓度为100g/L的溶液，在溶有肝素副产物的溶液中加入1.5g蛋白酶并保持溶液的PH为10，将溶有肝素副产物和蛋白酶的溶液升温至60℃并搅拌2h，即得酶解液；
(2)将步骤(1)中所得的酶解液冷却至室温后用阴离子交换树脂吸附10h，吸附过后用80目尼龙布过滤袋将阴离子交换树脂滤出；
(3)将收集在80目尼龙布过滤袋中的阴离子交换树脂用质量浓度为30g/L、流速0.4Bv的盐水对阴离子交换树脂进行洗涤2次，洗涤液的用量为3个体积；
(4)将洗涤后的阴离子交换树脂再用质量浓度为50g/L的盐水对80目尼龙布过滤袋中的阴离子交换树脂进行洗脱并收集洗脱液，洗脱液的用量为5倍柱体积；
(5)将步骤(4)中所得的洗脱液用纳滤膜过滤除去盐的同时还将对洗脱液进行浓缩，将浓缩压力控制到3kg时停止浓缩，即得浓缩液；
(6)向步骤(5)中所得的浓缩液中加入乙醇并搅拌至乙醇浓度达到50％，静置1h，待上清液澄清后抽去上清液，再向沉淀中加入1.5倍乙醇脱水后用过滤器抽滤除尽乙醇，即得硫酸皮肤素沉淀；
(7)将步骤(6)中所得的硫酸皮肤素沉淀置于60℃的条件下干燥6h，即得硫酸皮肤素。
实施例3
(1)将200g肝素副产物放入纯化水中溶解成质量浓度为100g/L的溶液，在溶有肝素副产物的溶液中加入0.2g蛋白酶并保持溶液的PH为8，将溶有肝素副产物和蛋白酶的溶液升温至55℃并搅拌4h，即得酶解液；
(2)将步骤(1)中所得的酶解液冷却至室温后用阴离子交换树脂吸附9h，吸附过后用80目尼龙布过滤袋将阴离子交换树脂滤出；
(3)将收集在80目尼龙布过滤袋中的阴离子交换树脂用质量浓度为30g/L、流速为0.4Bv的盐水对阴离子交换树脂进行洗涤3次，洗涤液的用量为3个体积；
(4)将洗涤后的阴离子交换树脂再用质量浓度为45g/L的盐水对80目尼龙布过滤袋中的阴离子交换树脂进行洗脱并收集洗脱液，洗脱液的用量为6倍柱体积；
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(6)向步骤(5)中所得的浓缩液中加入乙醇并搅拌至乙醇浓度达到55％，静置2h，待上清液澄清后抽去上清液，再向沉淀中加入1.5倍乙醇脱水后用过滤器抽滤除尽乙醇，即得硫酸皮肤素沉淀；
(7)将步骤(6)中所得的硫酸皮肤素沉淀置于60℃的条件下干燥6h，即得硫酸皮肤素。
与现有技术相比，本发明采用无毒无害的方法从肝素副产物中纯化硫酸皮肤素，并且采用了超滤膜技术对洗脱液进行除盐的同时还对洗脱液进行了浓缩，这种超滤膜技术在常温下就可以达到浓缩提纯的目的，不但产品收率高，还缩短了生产工期。
综上所述，上述实施方式并非是本发明的限制性实施方式，凡本领域的技术人员在发明的实质内容的基础上所进行的修饰或者等效变形，均在本发明的技术范畴。
Claims (8)
1.一种硫酸皮肤素的制备工艺，其特征在于：具体步骤如下：
(1)将肝素副产物放入纯化水中溶解成质量浓度为100g/L的溶液，在溶有肝素副产物的溶液中加入一定量的蛋白酶并保持溶液的PH为7～10，将溶有肝素副产物和蛋白酶的溶液升温至40～70℃并搅拌2～5h，即得酶解液；
(2)将步骤(1)中所得的酶解液冷却至室温后用阴离子交换树脂吸附8～10h，吸附过后用80目尼龙布过滤袋将阴离子交换树脂滤出；
(3)将收集在80目尼龙布过滤袋中的阴离子交换树脂用质量浓度为20～30g/L、流速为0.4～0.6Bv的盐水对阴离子交换树脂进行洗涤2～3次，洗涤液的用量为2～3个体积；
(4)将洗涤后的阴离子交换树脂再用质量浓度为40～60g/L的盐水对80目尼龙布过滤袋中的阴离子交换树脂进行洗脱并收集洗脱液，洗脱液的用量为4～6倍柱体积；
(5)将步骤(4)中所得的洗脱液用纳滤膜过滤除去盐的同时还将对洗脱液进行浓缩，将浓缩压力控制到3kg时停止浓缩，即得浓缩液；
(6)向步骤(5)中所得的浓缩液中加入乙醇并搅拌至乙醇浓度达到40～60％，静置1～2h，待上清液澄清后抽去上清液，再向沉淀中加入1.5倍乙醇脱水后用过滤器抽滤除尽乙醇，即得硫酸皮肤素沉淀；
(7)将步骤(6)中所得的硫酸皮肤素沉淀置于50～60℃的条件下干燥5～8h，即得硫酸皮肤素。
2.根据权利要求1所述的一种硫酸皮肤素的制备工艺，其特征在于：所述步骤(1)中加入的蛋白酶为2709蛋白水解酶，加入的2709蛋白水解酶的量是肝素副产物的0.1％～1％。
3.根据权利要求1所述的一种硫酸皮肤素的制备工艺，其特征在于：所述步骤(1)中在溶有肝素副产物的溶液中加入一定量的蛋白酶并调节溶液的PH为9，并将溶有肝素副产物和蛋白酶的溶液升温至45℃并搅拌5h。
4.根据权利要求1所述的一种硫酸皮肤素的制备工艺，其特征在于：所述步骤(3)中用质量浓度为20g/L、流速为0.5Bv的盐水对阴离子交换树脂进行洗涤3次，洗涤液的用量为2个体积。
5.根据权利要求1所述的一种硫酸皮肤素的制备工艺，其特征在于：所述步骤(4)中用质量浓度为60g/L的盐水对阴离子交换树脂进行洗脱并收集洗脱液，洗脱液的用量为5倍柱体积。
6.根据权利要求1所述的一种硫酸皮肤素的制备工艺，其特征在于：所述步骤(5)中的纳滤膜选择孔径小于1000Da分子量。
7.根据权利要求1所述的一种硫酸皮肤素的制备工艺，其特征在于：所述步骤(6)中向所得的浓缩液中加入乙醇并搅拌至乙醇浓度达到45％，静置2h。
8.根据权利要求1所述的一种硫酸皮肤素的制备工艺，其特征在于：所述步骤(7)中的硫酸皮肤素沉淀置于55℃的条件下干燥8h。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109384861A (zh) * | 2018-09-30 | 2019-02-26 | 临沂新程金锣肉制品集团有限公司 | 一种肝素钠废液提取硫酸皮肤素的方法 |
| CN111040047A (zh) * | 2019-12-11 | 2020-04-21 | 东营天东制药有限公司 | 一种酶-超滤法精制低分子硫酸皮肤素的工艺、应用 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1513471A (zh) * | 2003-05-07 | 2004-07-21 | 毅 汤 | 低分子量硫酸软骨素注射剂及其制备方法 |
| CN1513883A (zh) * | 2003-05-07 | 2004-07-21 | 毅 汤 | 一种制备中、低分子量硫酸软骨素的方法及所得产物 |
| CN101885782A (zh) * | 2009-05-11 | 2010-11-17 | 深圳市海普瑞药业股份有限公司 | 一种从肝素副产物纯化硫酸皮肤素的方法 |
| CN102533915A (zh) * | 2011-12-31 | 2012-07-04 | 浙江工业大学 | 一种利用动物软骨制备硫酸软骨素和胶原蛋白多肽的方法 |
| CN104119457A (zh) * | 2014-07-07 | 2014-10-29 | 广元市海天实业有限责任公司 | 一种联产肝素钠和硫酸皮肤素的工艺 |
| CN104448040A (zh) * | 2014-12-24 | 2015-03-25 | 青岛九龙生物医药有限公司 | 硫酸软骨素的制备方法 |
| CN104530260A (zh) * | 2014-12-10 | 2015-04-22 | 重庆都好生物科技有限公司 | 利用猪肺联产高纯度肝素钠和硫酸皮肤素的方法 |
| CN105461828A (zh) * | 2015-12-23 | 2016-04-06 | 青岛九龙生物医药有限公司 | 制备高纯度依诺肝素方法 |
-
2016
- 2016-10-12 CN CN201610921428.9A patent/CN107936139A/zh active Pending
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1513471A (zh) * | 2003-05-07 | 2004-07-21 | 毅 汤 | 低分子量硫酸软骨素注射剂及其制备方法 |
| CN1513883A (zh) * | 2003-05-07 | 2004-07-21 | 毅 汤 | 一种制备中、低分子量硫酸软骨素的方法及所得产物 |
| CN101885782A (zh) * | 2009-05-11 | 2010-11-17 | 深圳市海普瑞药业股份有限公司 | 一种从肝素副产物纯化硫酸皮肤素的方法 |
| CN102533915A (zh) * | 2011-12-31 | 2012-07-04 | 浙江工业大学 | 一种利用动物软骨制备硫酸软骨素和胶原蛋白多肽的方法 |
| CN104119457A (zh) * | 2014-07-07 | 2014-10-29 | 广元市海天实业有限责任公司 | 一种联产肝素钠和硫酸皮肤素的工艺 |
| CN104530260A (zh) * | 2014-12-10 | 2015-04-22 | 重庆都好生物科技有限公司 | 利用猪肺联产高纯度肝素钠和硫酸皮肤素的方法 |
| CN104448040A (zh) * | 2014-12-24 | 2015-03-25 | 青岛九龙生物医药有限公司 | 硫酸软骨素的制备方法 |
| CN105461828A (zh) * | 2015-12-23 | 2016-04-06 | 青岛九龙生物医药有限公司 | 制备高纯度依诺肝素方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 刘正超编著: "《染化药剂 上》", 30 June 1959 * |
| 汤彬彩等: "从肝素副产物废蛋白中提取类肝素工艺研究"", 《现代化工》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109384861A (zh) * | 2018-09-30 | 2019-02-26 | 临沂新程金锣肉制品集团有限公司 | 一种肝素钠废液提取硫酸皮肤素的方法 |
| CN111040047A (zh) * | 2019-12-11 | 2020-04-21 | 东营天东制药有限公司 | 一种酶-超滤法精制低分子硫酸皮肤素的工艺、应用 |
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