CN107810887A - 一种白斑乌贼催熟方法及专有试剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种白斑乌贼催熟方法及专有试剂，催熟方法为：将白斑乌贼进行活体浸泡麻醉；用灭菌的解剖刀剖开乌贼眼下的眼窝窦，将催熟专有试剂植入眼窝窦，采用外敷愈合剂涂覆在伤口上，使伤口愈合。催熟专有试剂为缓释包埋剂，其成分及其重量份为：血清素0.06‑0.08份、绒毛膜促性腺激素0.01‑0.012份、促黄体生成素释放素类似物0.13‑0.15份、脑垂体器提取物0.004‑0.006份、花生四烯酸0.011‑0.013份、聚乳酸‑羟基乙酸共聚物1‑2份。有益效果为：本发明催熟方法能快速催熟，安全无害，操作简单，不必再依靠其自然繁殖和产卵；催熟专有试剂具有较高的稳定性、缓释或控释性能。
Description
技术领域
本发明涉及水产养殖技术领域，尤其是涉及一种白斑乌贼催熟方法及专有试剂。
背景技术
白斑乌贼(Sepia latimanus)头足纲Cephalopoda，乌贼科Sepiidae。胴部盾形，胴长约为胴宽的2倍。胴背中央区有很多大小相间的灰白色斑，两侧具一些短的横条纹，记录最大胴长0.5m，最大体重10kg，为乌贼科中体型最大的种类，分布在西北太平洋沿岸海域，主要作业渔场在琉球群岛和中国广东沿岸海域。可鲜食和干制。白斑乌贼是近年来才得以繁育成功及增养殖开发的种类，每年头足类的增养殖需要大量的受精卵，但当前白斑乌贼繁育主要靠人工养殖条件下的自然产卵，产卵量低，每头雌体产卵量仅500多粒,且高度不同步，影响白斑乌贼规模化繁育，因此开发出有效的白斑乌贼催熟和催产方法至关重要。血清素是重要的软体动物神经递质，对软体动物的性成熟和产卵具有重要的促进作用。体内注射血清素可有效促进软体动物的快速成熟及产卵。现已发现血清素对白斑乌贼促熟和产卵具有重要的作用。
现有技术如授权公告号为CN 102919182 B的中国发明专利，公开了曼氏无针乌贼扩繁方法，属于海水养殖技术领域。其包括：1）亲本的挑选和配组；2）亲本暂养；3）收集受精卵；4）人工孵化；5）幼苗培育。上述的曼氏无针乌贼扩繁方法，设计合理，步骤简单，可操作性强，通过人工调控曼氏无针乌贼亲本投喂量、投喂时间、投喂量、繁殖条件等等，得到一批优质的受精卵，然后通过人工调控曼氏无针乌贼苗种投喂量、投喂时间、投喂量、生长条件等等，形成了稳定、批量的苗种，受精卵达到95%以上，孵化率达到92%以上，成活率达到90%以上，并且最后得到的曼氏无针乌贼产品中还有大量的微量元素，提高了营养。但是该方法属于自然繁殖，使白斑乌贼规模化繁育和养殖相对困难。
发明内容
本发明的目的之一在于提供一种能快速催熟、安全无害、操作简单的白斑乌贼催熟方法。
本发明的目的之二在于提供一种各成分能发挥相互协同作用，促使乌贼性腺发育和成熟，具有较高的药物稳定性和缓释或控释性能的白斑乌贼催熟专有试剂。
本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：
一种白斑乌贼催熟方法，其具体步骤为：
采集性成熟白斑乌贼成体；将白斑乌贼放入含1.7-2.0% MgCl2和0.3-0.6%异丁香酚的海水中浸泡100-120s，进行活体浸泡麻醉；用灭菌的解剖刀剖开乌贼眼下的眼窝窦，将催熟专有试剂植入眼窝窦，植入量为70-80ug/g，采用外敷愈合剂涂覆在伤口上，使伤口愈合。上述外敷愈合剂的成分及其重量份为：尿囊素18-22份、海藻酸盐3-7份、桐油0.7-1.3份份、维生素C 0.3-0.5份、蜂蜜12-15份。该方法可快速加深曼氏无针乌贼全身麻醉，使曼氏无针乌贼迅速地进入麻醉诱导期，麻醉维持时间长，降低应激性，且还有一定的镇痛效果，为视神经的破坏供了良好的条件，此外异丁香酚及其代谢物可以从血液和组织中快速排出，不会在机体内产生有毒或突变物质，该方法简单，对乌贼的伤害最小，能将乌贼快速催熟，安全无害。
一种白斑乌贼催熟专有试剂，该催熟试剂为缓释包埋剂，催熟专有试剂的成分及其重量份为：血清素0.06-0.08份、绒毛膜促性腺激素0.01-0.012份、促黄体生成素释放素类似物0.13-0.15份、脑垂体器提取物0.004-0.006份、花生四烯酸0.011-0.013份、聚乳酸-羟基乙酸共聚物1-2份。该催熟制剂各成分能发挥相互协同作用，刺激脑或者胸神经节或者其他尚未发现的组织器官释放间接性的调控卵巢发育，同时配合催熟方法，促使乌贼性腺发育和成熟，能使成熟的卵子脱离卵巢滤泡膜顺利排入卵巢腔中，但不产出体外，大大缩短繁殖周期，且能使乌贼的雌雄鱼同步成熟，产卵排精，卵子和精子质量好，提高受精率和受精率的成活率。
一种白斑乌贼催熟专有试剂，其制备方法为：
核心制备：将血清素、绒毛膜促性腺激素、促黄体生成素释放素类似物、鱼性腺提取物、脑垂体器提取物和10~30%聚乳酸-羟基乙酸共聚物混合均匀，加入原料重量0.1-0.4%碳酸二甲酯，在温度为130-140℃、转速为12-15rpm下加热搅拌挤压，降温制成聚合物核心，该步骤不破坏各成分的结构，仍能保持其活性，聚乳酸-羟基乙酸共聚物和碳酸二甲酯的加入能够保护活性物质，缓释时有助于活性物质发挥作用；
聚合物套制备：往剩余聚乳酸-羟基乙酸共聚物中加入原料重量0.1-0.3%的三乙醇胺和0.2-0.5%的尼泊金乙酯，在温度为140-150℃、转速为2-6rpm下加热搅拌挤压，切割挤成空心开口方形，该步骤所得聚合物套具有缓释时间长、对生物刺激小的特点，在水存在下通过酯键的水解而降解，水解产物对乌贼无不良影响；
催熟专有制剂制备：将聚合物核心置于空心开口方形套中，在25kGy以上进行γ-照射，即得催熟专有制剂，该制备方法可使催熟专有制剂释放活性延长，对减少突释、提高包封率、保留活性均具有重要意义，具有较大的市场潜力，该制备得到的催熟专有制剂具有较高的药物稳定性，药效高，具有缓释或控释性能，延长药效的作用时间，以促进卵细胞和精子最后成熟，达到促进乌贼性成熟的目的。
与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明催熟方法是将催熟专有试剂植入白斑乌贼眼窝窦内，达到催熟的目的，这种人工催熟方法具有能快速催熟、安全无害、操作简单的优势，使得乌贼不必再依靠其自然繁殖和产卵；本发明催熟专有试剂具有较高的药物稳定性，药效高，具有缓释或控释性能，延长药效的作用时间，以促进卵细胞和精子最后成熟，达到促进乌贼性成熟的目的；该催熟专有制剂释放活性延长，对减少突释、提高包封率、保留活性均具有重要意义，具有较大的市场潜力。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：
实施例1：
一种白斑乌贼催熟方法，其具体步骤为：
采集性成熟白斑乌贼成体；将白斑乌贼放入含1.7-2.0% MgCl2和0.3-0.6%异丁香酚的海水中浸泡100-120s，进行活体浸泡麻醉；用灭菌的解剖刀剖开乌贼眼下的眼窝窦，将催熟专有试剂植入眼窝窦，植入量为70-80ug/g，采用外敷愈合剂涂覆在伤口上，使伤口愈合。上述外敷愈合剂的成分及其重量份为：尿囊素18-22份、海藻酸盐3-7份、桐油0.7-1.3份份、维生素C 0.3-0.5份、蜂蜜12-15份。
一种白斑乌贼催熟专有试剂，该催熟试剂为缓释包埋剂，催熟专有试剂的成分及其重量份为：血清素0.06-0.08份、绒毛膜促性腺激素0.01-0.012份、促黄体生成素释放素类似物0.13-0.15份、脑垂体器提取物0.004-0.006份、花生四烯酸0.011-0.013份、聚乳酸-羟基乙酸共聚物1-2份。
一种白斑乌贼催熟专有试剂，其制备方法为：
1）核心制备：将血清素、绒毛膜促性腺激素、促黄体生成素释放素类似物、鱼性腺提取物、脑垂体器提取物和10~30%聚乳酸-羟基乙酸共聚物混合均匀，加入原料重量0.1-0.4%碳酸二甲酯，在温度为130-140℃、转速为12-15rpm下加热搅拌挤压，降温制成聚合物核心；
2）聚合物套制备：往剩余聚乳酸-羟基乙酸共聚物中加入原料重量0.1-0.3%的三乙醇胺和0.2-0.5%的尼泊金乙酯，在温度为140-150℃、转速为2-6rpm下加热搅拌挤压，切割挤成空心开口方形；
3）催熟专有制剂制备：将聚合物核心置于空心开口方形套中，在25kGy以上进行γ-照射，即得催熟专有制剂。
实施例2：
一种白斑乌贼催熟方法，其具体步骤为：
采集性成熟白斑乌贼成体；将白斑乌贼放入含1.7% MgCl2和0.4%异丁香酚的海水中浸泡120s，进行活体浸泡麻醉；用灭菌的解剖刀剖开乌贼眼下的眼窝窦，将催熟专有试剂植入眼窝窦，植入量为80ug/g，采用外敷愈合剂涂覆在伤口上，使伤口愈合。上述外敷愈合剂的成分及其重量份为：尿囊素22份、海藻酸盐4份、桐油1.1份份、维生素C 0.35份、蜂蜜14份，维生素C中L-抗坏血酸和D-抗坏血酸的重量比为100:0.38-0.42，该D-抗坏血酸的加入可提高外敷愈合剂的活性，更易于被机体吸收，利于细胞的再生，促使伤口愈合，也能增强机体抵抗力和活力，防止伤口感染，最大限度地降低对乌贼的伤害。
一种白斑乌贼催熟专有试剂，该催熟试剂为缓释包埋剂，催熟专有试剂的成分及其重量份为：血清素0.08份、绒毛膜促性腺激素0.01份、促黄体生成素释放素类似物0.15份、脑垂体器提取物0.004份、花生四烯酸0.013份、聚乳酸-羟基乙酸共聚物1.7份。
一种白斑乌贼催熟专有试剂，其制备方法为：
1）核心制备：将血清素、绒毛膜促性腺激素、促黄体生成素释放素类似物、鱼性腺提取物、脑垂体器提取物和30%聚乳酸-羟基乙酸共聚物混合均匀，加入原料重量0.1%碳酸二甲酯，在温度为140℃、转速为15rpm下加热搅拌挤压，降温制成聚合物核心；
2）聚合物套制备：往剩余聚乳酸-羟基乙酸共聚物中加入原料重量0.3%的三乙醇胺和0.2%的尼泊金乙酯，在温度为150℃、转速为2rpm下加热搅拌挤压，切割挤成空心开口方形；
3）催熟专有制剂制备：将聚合物核心置于空心开口方形套中，在25kGy以上进行γ-照射，即得催熟专有制剂。
实施例3：
一种白斑乌贼催熟方法，其具体步骤为：
采集性成熟白斑乌贼成体；将白斑乌贼放入含1.8% MgCl2和0.5%异丁香酚的海水中浸泡110s，进行活体浸泡麻醉；用灭菌的解剖刀剖开乌贼眼下的眼窝窦，将催熟专有试剂植入眼窝窦，植入量为75ug/g，采用外敷愈合剂涂覆在伤口上，使伤口愈合。上述外敷愈合剂的成分及其重量份为：尿囊素20份、海藻酸盐5份、桐油1.0份份、维生素C 0.4份、蜂蜜13份。
一种白斑乌贼催熟专有试剂，该催熟试剂为缓释包埋剂，催熟专有试剂的成分及其重量份为：血清素0.078份、绒毛膜促性腺激素0.011份、促黄体生成素释放素类似物0.14份、脑垂体器提取物0.005份、花生四烯酸0.012份、聚乳酸-羟基乙酸共聚物1.5份。
一种白斑乌贼催熟专有试剂，其制备方法为：
1）核心制备：将血清素、绒毛膜促性腺激素、促黄体生成素释放素类似物、鱼性腺提取物、脑垂体器提取物和20%聚乳酸-羟基乙酸共聚物混合均匀，加入原料重量0.2%碳酸二甲酯，在温度为135℃、转速为14rpm下加热搅拌挤压，降温制成聚合物核心；
2）聚合物套制备：往剩余聚乳酸-羟基乙酸共聚物中加入原料重量0.2%的三乙醇胺和0.4%的尼泊金乙酯，在温度为145℃、转速为4rpm下加热搅拌挤压，切割挤成空心开口方形；
3）催熟专有制剂制备：将聚合物核心置于空心开口方形套中，在25kGy以上进行γ-照射，即得催熟专有制剂。
本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种白斑乌贼催熟方法，其特征在于：所述催熟方法为：将性成熟白斑乌贼成体麻醉，将催熟试剂的植入眼窝窦，伤口愈合。
2. 根据权利要求1所述的一种白斑乌贼催熟方法，其特征在于：所述麻醉为：将白斑乌贼放入含1.7-2.0% MgCl2和0.3-0.6%异丁香酚的海水中，麻醉浸泡100-120s。
3.根据权利要求1所述的一种白斑乌贼催熟方法，其特征在于：所述植入用灭菌的解剖刀剖开乌贼眼下的眼窝窦，将催熟试剂的植入眼窝窦。
4.根据权利要求1所述的一种白斑乌贼催熟方法，其特征在于：所述催熟试剂植入量为70-80ug/g。
5. 根据权利要求1所述的一种白斑乌贼催熟方法，其特征在于：所述伤口愈合采用外敷愈合剂涂覆在伤口上，所述外敷愈合剂的成分及其重量份为：尿囊素18-22份、海藻酸盐3-7份、桐油0.7-1.3份份、维生素C 0.3-0.5份、蜂蜜12-15份。
6.一种白斑乌贼催熟专有试剂，其特征在于：所述催熟试剂为缓释包埋剂。
7.根据权利要求6所述的一种白斑乌贼催熟专有试剂，其特征在于：所述催熟专有试剂的成分及其重量份为：血清素0.06-0.08份、绒毛膜促性腺激素0.01-0.012份、促黄体生成素释放素类似物0.13-0.15份、脑垂体器提取物0.004-0.006份、花生四烯酸0.011-0.013份、聚乳酸-羟基乙酸共聚物1-2份。
8.根据权利要求6所述的一种白斑乌贼催熟专有试剂，其特征在于：所述试剂的制备方法为：
1）核心制备：将血清素、绒毛膜促性腺激素、促黄体生成素释放素类似物、鱼性腺提取物、脑垂体器提取物和10~30%聚乳酸-羟基乙酸共聚物混合均匀，加入碳酸二甲酯，加热搅拌挤压，降温制成聚合物核心；
2）聚合物套制备：往剩余聚乳酸-羟基乙酸共聚物中加入三乙醇胺和尼泊金乙酯，加热搅拌挤压，并切割挤成空心开口方形；
3）专有制剂制备：将聚合物核心置于空心开口方形套中，在25kGy以上进行γ-照射，即得催熟专有试剂。
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