CN107789394A - 一种用于治疗畜禽腹泻的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种畜禽用药。该兽药扭肚藤10～60份，救必应10～40份，田基黄5～40份和猴耳环5～30份制成。优选配比为：扭肚藤30份，救必应20份，田基黄25份，猴耳环15份。所述的畜禽包括猪、牛或鸡等。发明与现有技术相比，具有如下优点：(1)安全，本发明原料为天然中药，无毒副作用小，无残留，无食源性抗生素耐药性。(2)疗效显著效，止泻作用优于盐酸小檗碱，优选配方的总体有效率可高达95.5％，说明本组合物各组分在治疗畜禽腹泻中具有协同作用。

Description

一种用于治疗畜禽腹泻的组合物

技术领域

本发明涉及一种畜禽用药。

背景技术

在规模化的畜禽养殖场中，幼年畜禽腹泻率较高。据统计，规模化猪场中，仔猪腹泻的发病率可达50％，其中以出生后至28日龄的哺乳期仔猪发病最为频繁。3-5日内的死亡率可达50％，对养猪业造成了巨大的经济损失。犊牛腹泻则发病率高达80％。病牛常表现为精神抑郁、废食、体温升高、呼吸急促，急性期可出现大量水泻便，是造成犊牛生长发育不良和危害犊牛性命的严重疾病之一。鸡腹泻会导致鸡食欲减退、营养不良、生长受阻甚至完全停滞，部分蛋鸡可出现产蛋量下降或产蛋重量明显下降。

扭肚藤为木犀科植物扭肚藤(Jasminum elongatum(Bergius)Willd.)的全株，又名白花茶，分布于广东、广西、海南、云南等地，具有清热，利湿，解毒之功效，常用于湿热痢疾，腹痛里急后重，风湿热痹，四肢肿痛，瘰疬，疥疮。救必应为冬青科植物铁冬青的干燥树皮，具有清热解毒，利湿止痛的功效。田基黄为藤黄科植物地耳草的干燥全草，有清热利湿，散瘀消肿的作用。猴耳环，为豆科植物围涎树的枝叶，性味苦涩寒，功效清热解毒、收湿敛疮，是治疗多种热毒症候独特的南方药材。本发明的中药配方中以扭肚藤、救必应、田基黄，三者清热利湿，行气止痛，为主药，辅以猴耳环涩而收敛，用于治疗畜禽腹泻，合用具有良好的治疗胃肠炎，控制腹泻症状的作用。

发明内容

本发明提供了一种安全、高效、质量可控，不易耐药的兽药。

该兽药是一种治疗畜禽腹泻的组合物，由下列重量份的原料制成：扭肚藤10～60份，救必应10～40份，田基黄5～40份，猴耳环5～30份。

优选配比为：扭肚藤30份，救必应20份，田基黄25份，猴耳环15份。

治疗针对非细菌感染性畜禽腹泻优选配比为：扭肚藤30～60份，救必应20～40份，田基黄5～25份，猴耳环5～15份。

治疗由产ESBL大肠杆菌导致畜禽腹泻的优选配比为：扭肚藤10～30份，救必应10～20份，田基黄25～40份，猴耳环15～30份。

所述的畜禽包括猪、牛或鸡等。可根据需要将组合物制成口服液、散剂、颗粒剂或片剂等剂型。

发明与现有技术相比，具有如下优点：(1)安全，本发明原料为天然中药，无毒副作用小，无残留，没有食源性抗生素耐药性。(2)疗效显著效，止泻作用优于阳性盐酸小檗碱，优选配方的总体有效率可高达95.5％，说明本组合物各组分在治疗畜禽腹泻中具有协同作用。

具体实施方式：

实施例1：本发明中药配方组合1及其实验样品的制备

将扭肚藤60份，救必应40份，田基黄5份，猴耳环5份。四味中药共同加饮用水提取两次，每次加水10倍量，提取2小时，合并药液，过滤，滤液浓缩至相对密度1.18-1.20的浸膏，灭菌，即得。

实施例2：本发明中药配方组合2及其实验样品的制备

将扭肚藤30份，救必应20份，田基黄15份，猴耳环10份。四味中药共同加饮用水提取两次，每次加水10倍量，提取2小时，合并药液，过滤，滤液浓缩至相对密度1.18-1.20的浸膏，灭菌，即得。

实施例3：本发明中药配方组合3及其实验样品的制备

将扭肚藤30份，救必应20份，田基黄25份，猴耳环15份。四味中药共同加饮用水提取两次，每次加水10倍量，提取2小时，合并药液，过滤，滤液浓缩至相对密度1.18-1.20的浸膏，灭菌，即得。

实施例4：本发明中药配方组合4及其实验样品的制备

将扭肚藤10份，救必应10份，田基黄40份，猴耳环30份。四味中药共同加饮用水提取两次，每次加水10倍量，提取2小时，合并药液，过滤，滤液浓缩至相对密度1.18-1.20的浸膏，灭菌，即得。

实施例5：本发明中药配方的抗腹泻实验

1.实验动物：BALB/c小鼠60只，雌雄各半，体重(15.0～25.0)g，广东省医学实验动物中心。实验前将动物称重，编号，随机分为正常对照组、盐酸小檗碱对照组、扭肚藤对照组、救必应对照组、田基黄对照组、猴耳环对照组、本发明中药配方组合1、2、3和4组，一共10组，每组10只。

2.样品处理：

(1)盐酸小檗碱药液：取盐酸小檗碱，用蒸馏水配制成浓度为0.022g/ml，作为阳性对照盐酸小檗碱溶液。

(2)扭肚藤提取液：取扭肚藤60份，加饮用水提取两次，每次加水10倍量，提取2小时，合并药液，过滤，滤液浓缩后用蒸馏水配制成含生药量为0.55g/ml，即得。

(3)救必应提取液：取救必应60份，加饮用水提取两次，每次加水10倍量，提取2小时，合并药液，过滤，滤液浓缩后用蒸馏水配制成含生药量为0.55g/ml，即得。

(4)田基黄提取液：取田基黄40份，加饮用水提取两次，每次加水10倍量，提取2小时，合并药液，过滤，滤液浓缩后用蒸馏水配制成含生药量为0.55g/ml，即得。

(5)猴耳环提取液：取猴耳环30份，加饮用水提取两次，每次加水10倍量，提取2小时，合并药液，过滤，滤液浓缩后用蒸馏水配制成含生药量为0.55g/ml，即得。

(6)本发明中药配方组合1药液：按实施例1制备中药配方组合1药液，再用蒸馏水配制成含生药量为0.55g/ml，即得。

(7)本发明中药配方组合2药液：按实施例2制备中药配方组合2药液，再用蒸馏水配制成含生药量为0.55g/ml，即得。

(8)本发明中药配方组合3药液：按实施例3制备中药配方组合3药液，再用蒸馏水配制成含生药量为0.55g/ml，即得。

(9)本发明中药配方组合4药液：按实施例4制备中药配方组合4药液，再用蒸馏水配制成含生药量为0.55g/ml，即得。

3.实验方法：选用番泻叶来引起腹泻，再给药观察各组药物对番泻叶所致小鼠腹泻的抑制作用，通过在一定时间内观察湿粪的总粒数作为研究指标。

4.实验过程：各组动物均按照0.2ml/20g体重灌服相应药液，其中正常对照组灌服等体积蒸馏水。给药后1h，每只小鼠按30ml/kg体重灌服番泻叶浸出液，然后每只小鼠单笼观察，笼内铺吸水纸供湿粪计数，以湿粪排出的多少表示腹泻程度，及时更换吸水纸，记录各鼠灌服番泻叶后4h内湿粪总数，并计算各组药物对番泻叶所致的小鼠腹泻的抑制率。腹泻抑制率计算公式如下：

5.实验结果：本发明田基黄提取液和猴耳环提取液对番泻叶引起的小鼠腹泻无抑制作用，而扭肚藤提取液、救必应提取液、中药配方组合1、2、3、4和盐酸小檗碱对番泻叶引起的小鼠腹泻均有显著的抑制作用。本发明中药配方组合1、2、3的和单味药材提取液，说明本发明中药配方组合1、2、3疗效显著，具有良好的止泻作用。而中药配方组合1、2、3的止泻作用相互之间并没有统计学差异，说明中药配方组合1、2、3均可用于控制番泻叶引起的腹泻。各样品组腹泻情况见表1。

表1.各组样品的止泻效果

实施例6：本发明中药配方的体外抑菌实验

1.实验菌株：产ESBL大肠杆菌(ECO，编号E1-E20)20株；大肠杆菌质控菌株(ECO，ATCC25922)均由中山大学附属第一医院检验医学部临床微生物检验室提供，经中山大学附属第一医院临床微生物检验室检测确定其耐药性。

2.样品处理：

(1)扭肚藤提取液：按实施例5制备扭肚藤提取液，再用蒸馏水配制成含生药量为0.64g/ml，即得。

(2)救必应提取液：按实施例5制备救必应提取液，再用蒸馏水配制成含生药量为0.64g/ml，即得。

(3)田基黄提取液：按实施例5制备田基黄提取液，再用蒸馏水配制成含生药量为0.64g/ml，即得。

(4)猴耳环提取液：按实施例5制备猴耳环提取液，再用蒸馏水配制成含生药量为0.64g/ml，即得。

(5)本发明中药配方组合1药液：按实施例1制备中药配方组合1药液，再用蒸馏水配制成含生药量为0.64g/ml，即得。

(6)本发明中药配方组合2药液：按实施例2制备中药配方组合2药液，再用蒸馏水配制成含生药量为0.64g/ml，即得。

(7)本发明中药配方组合3药液：按实施例3制备中药配方组合3药液，再用蒸馏水配制成含生药量为0.64g/ml，即得。

(8)本发明中药配方组合4药液：按实施例4制备中药配方组合4药液，再用蒸馏水配制成含生药量为0.64g/ml，即得。

3.实验方法：采用微量肉汤稀释法测定各组药物对产ESBL大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。

4.实验过程：

(1)最低抑菌浓度的测定：取各组药液、诺氟沙星(NFX)和复方新诺明(SXT)分别在MH肉汤培养基中进行一系列倍比稀释，每孔50μl，调节接种菌为1.0×10⁶CFU/ml，每孔50μl菌液。35℃培养24h，无沉淀出现的最低抗菌药物的浓度为其最低抑菌浓度(MIC)。

(2)最低杀菌浓度的测定：从(1)项无菌生长的孔中吸取50μl菌液至血平板上，均匀涂布，35℃培养24h，进行菌落计数，使最初的实验活菌数减少99.9％或以上所需要的最低抗菌药物的浓度为其最低杀菌浓度(MBC)。

5.实验结果：经统计，各样品组对产ESBL大肠杆菌的体外抑菌试验结果见表2；各组样品对产ESBL大肠杆菌的体外杀菌试验结果见表3

表2.各组样品的对产ESBL大肠杆菌的体外抑菌试验结果

表3.各组样品的对产ESBL大肠杆菌的体外杀菌试验结果

实验结果表明：扭肚藤提取液和救必应提取液对产ESBL大肠杆菌几乎无抑制作用；田基黄提取液对产ESBL大肠杆菌的MIC₅₀为80mg/ml，MIC₉₀为80mg/ml，MBC₅₀为160mg/ml，MBC₉₀为160mg/ml；猴耳环提取液对产ESBL大肠杆菌的MIC₅₀为80mg/ml，MIC₉₀为80mg/ml，MBC₅₀为160mg/ml，MBC₉₀为160mg/ml；本发明中药配方组合1对产ESBL大肠杆菌的MIC₅₀为40mg/ml，MIC₉₀为40mg/ml，MBC₅₀为80mg/ml，MBC₉₀为80mg/ml；中药配方组合2对产ESBL大肠杆菌的MIC₅₀为20mg/ml，MIC₉₀为20mg/ml，MBC₅₀为40mg/ml，MBC₉₀为40mg/ml；中药配方组合3对产ESBL大肠杆菌的MIC₅₀为10mg/ml，MIC₉₀为10mg/ml，MBC₅₀为20mg/ml，MBC₉₀为20mg/ml；中药配方组合4对产ESBL大肠杆菌的MIC₅₀为10mg/ml，MIC₉₀为10mg/ml，MBC₅₀为20mg/ml，MBC₉₀为20mg/ml。说明中药配方组合3和4体外抑制和杀灭大肠杆菌的效果最佳。

实施例7：本发明中药配方治疗仔猪腹泻的疗效观察

1.样品处理：

(1)盐酸小檗碱药液：取盐酸小檗碱，用蒸馏水配制成浓度为0.017g/ml作为阳性对照盐酸小檗碱溶液；

(2)烟酸诺氟沙星药液：取烟酸诺氟沙星适量，用蒸馏水配制成浓度为0.02g/ml作为烟酸诺氟沙星溶液；

(3)蒙脱石散：取蒙脱石散适量，用蒸馏水配制浓度为1.5mg/ml作为蒙脱石散药液；

(4)肠胃宁药液：取肠胃宁胶囊适量，手动除去囊壳，研细，用蒸馏水配制成浓度为0.05g/ml作为肠胃宁药液；

(5)腹可安药液：取腹可安片适量，研碎，用蒸馏水配制成浓度为0.03g/ml作为腹可安药液；

(6)扭肚藤提取液：同实施例5制成含生药量为0.41g/ml溶液即得；

(7)救必应提取液：同实施例5制成含生药量为0.41g/ml溶液即得；

(8)田基黄提取液：同实施例5制成含生药量为0.41g/ml溶液即得；

(9)猴耳环提取液：同实施例5制成含生药量为0.41g/ml溶液即得；

(10)本发明中药配方组合3药液：同实施例3制成含生药量为0.41g/ml溶液即得。

2.实验方法：除正常对照组外，其余各组分别灌胃上述药液，观察其对哺乳期仔猪腹泻的疗效。

3.实验过程：选取哺乳期仔猪腹泻发病率高的规范化猪场进行药效学的验证。发现呕吐、腹泻仔猪立即统计该窝仔猪患病数量，随后进行用药治疗。每组预留3窝进行实验，给药量均为1ml/kg，一日2次，连用3天。第5天统计经治疗后各组仔猪的治愈头数、有效头数和死亡头数，并计算各组药物的有效率(治愈头数和有效头数均用于有效率的计算)。

4.判定标准：治愈：仔猪大便成形，精神良好，吮乳正常，皮毛干净光洁，肛门锁紧。

有效：仔猪大便浓稠糊状，精神趋于正常，能吮乳，皮毛干净，肛门周围无明显大便。

无效：仔猪大便呈稀粥状，体型消瘦，出现无神或脱水症状，肛门周围污秽，肛门松弛发红。

死亡：治疗开始至一周内死亡的全部病例，或一周后不能吮奶的仔猪均列为死亡。

5.实验结果：

由表4可见，本发明中药配方组合3总体有效率高达95.5％，与空白对照组相比，有效率提高了81.2％，说明中药配方组合3对仔猪腹泻有显著的治疗作用。

使用SPSS13.0软件对试验数据进行统计分析，本发明中药配方组合3优于对照药盐酸小檗碱、诺氟沙星、蒙脱石散、肠胃宁片和腹可安片等制剂，也显著优于本发明中药配方组合中的四味药材扭肚藤、救必应、田基黄和猴耳环，说明本发明中药配方组合3效果显著，扭肚藤、救必应、田基黄和猴耳环四味中药合用，对仔猪腹泻的治疗具有协同作用。

表4.对仔猪腹泻的疗效观察

实施例8：本发明中药配方抗鸡腹泻的疗效观察

实验方法：取180～200日龄患有自然腹泻的京红1号蛋鸡1200只。随机分为8组，分别为空白对照组、本发明中药配方组合3组、阿莫西林可溶性粉组、蒙脱石散组、肠胃宁组、腹可安对照组、扭肚藤组、救必应组、田基黄组、猴耳环组，每组120只。所有鸡于发病初发生典型水样腹泻，产蛋率下降，出现薄壳蛋、砂壳蛋等现象，有的出现蛋壳变白，鸡体消瘦，羽毛蓬松，两翅下垂，精神变差。剖检可见患鸡肠道内容物水样，色呈浅绿色，十二指肠和空肠前段出现细颈状，空肠后段和盲肠膨气，泄殖腔充盈水样粪便。各组患鸡于出现特征性腹泻症状的第2天用药。阿莫西林可溶性粉组按说明书使用，100g拌料300kg；其他各给药组按饲料1％的百分比添加药物；空白对照组用普通饲料喂养。连续用药治疗5天，观察用药结束后25天内鸡的死亡只数和痊愈只数。

实验结果：由表5可见，本发明中药配方组合3的治愈率高达95％，死亡率为0％，提示本发明中药配方组合3对鸡腹泻有显著的治疗作用。

使用SPSS13.0软件对试验数据进行统计分析，本发明中药配方组合3优于对照药阿莫西林可溶性粉、蒙脱石散、肠胃宁片、腹可安片、扭肚藤、救必应、田基黄和猴耳环，说明本发明中药配方组合3效果显著，扭肚藤、救必应、田基黄和猴耳环四味中药合用，对鸡腹泻的治疗具有协同作用。

表5.对鸡腹泻的疗效观察

实施例9：本发明中药配方抗犊牛腹泻的疗效观察

1、样品处理：

(1)盐酸小檗碱药液：取盐酸小檗碱，用蒸馏水配制成浓度为0.009g/ml作为阳性对照盐酸小檗碱溶液；

(2)腹可安药液：取腹可安片适量，研碎，用蒸馏水配制成浓度为0.016g/ml作为腹可安药液；

(3)扭肚藤提取液：同实施例5制成含生药量为0.22g/ml溶液即得；

(4)救必应提取液：同实施例5制成含生药量为0.22g/ml溶液即得；

(5)田基黄提取液：同实施例5制成含生药量为0.22g/ml溶液即得；

(6)猴耳环提取液：同实施例5制成含生药量为0.22g/ml溶液即得；

(7)本发明中药配方组合3药液：同实施例3制成含生药量为0.22g/ml溶液即得(结合实施例5和6发现中药配方组合3的抗腹泻和体外抑菌杀菌实验药效最佳)。

2、实验方法：

取某奶牛场自然发病的腹泻新生母犊，3～10日龄，分栏圈养，共270头。随机分为9组，分别为空白对照组、本发明中药配方组合3组、乙酰甲喹注射液组、腹可安对照组、扭肚藤组、救必应组、田基黄组、猴耳环组，每组30只。发病犊牛病初临床症状表现为体温升高，精神倦怠，食欲减退或废绝，饮水增加，喜卧、不愿走动，弓腰努责，排少量未消化完全的乳白色粪便。腹泻较长时间者眼窝凹陷，粪便呈灰白色、水样、含有未消化的凝乳块、腥臭或黄绿色；心跳加快，呼吸缓慢；体温降至35.0～36.5℃；耳鼻四肢发凉，反刍废绝。各组犊牛于出现特征性腹泻症状的当天即开始用药。乙酰甲喹注射液组按每千克体重4mg剂量肌肉注射，每日2次。其他给药组灌服中药提取液，给药量均为1ml/kg，每日2次。连用给药治疗4天，观察记录粪便性状、次数和精神、食欲的变化及转归情况。疗效判断标准：(1)治愈：精神、饮食均恢复正常，粪便软硬适中，鼻镜湿润，体温正常，腹泻症状消失；(2)显效：腹泻症状明显减轻或消失，饮食和其他症状有所好转，但在第4天尚未完全康复；(3)无效：患病犊牛所有症状在治疗第4天未见明显改善，甚至病情加重导致犊牛死亡。有效数为治愈数和显效数的总和。

3、实验结果：

由表6可见，本发明中药配方组合3的治愈率高达95％，有效率达到93.3％，提示本发明中药配方组合3对犊牛腹泻有显著的治疗作用。使用SPSS13.0软件对试验数据进行统计分析，本发明中药配方组合3优于对照药乙酰甲喹注射液、盐酸小檗碱、腹可安片、扭肚藤、救必应、田基黄和猴耳环，说明本发明中药配方组合3效果显著，扭肚藤、救必应、田基黄和猴耳环四味中药合用，对犊牛腹泻的治疗具有协同作用。

表6.对犊牛腹泻的疗效观察

实施例10：本发明制备散剂

将实施例3中的四味药材，粉碎成细粉，即得。

实施例11：本发明口服液的制备

将实施例3中的四味药材，共同加饮用水提取两次，每次加水10倍量，提取2小时，合并药液，过滤，滤液浓缩至相对密度1.18-1.20的浸膏，灭菌，即得。

Claims (5)

1.一种治疗畜禽腹泻的组合物，其特征在于，由下列重量份的原料制成：扭肚藤10～60份，救必应10～40份，田基黄5～40份，猴耳环5～30份。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述原料重量份为扭肚藤30份，救必应20份，田基黄25份，猴耳环15份。

3.一种治疗非细菌感染性畜禽腹泻的组合物，其特征在于，所述原料重量份为扭肚藤30～60份，救必应20～40份，田基黄5～25份，猴耳环5～15份。

4.一种治疗由产ESBL大肠杆菌导致畜禽腹泻的组合物，其特征在于，所述原料重量份为扭肚藤10～30份，救必应10～20份，田基黄25～40份，猴耳环15～30份。

5.如权利要求1或2或3或4所述的组合物，其特征在于，所述的畜禽包括猪、牛或鸡。