CN107668074B

CN107668074B - 一种天牛的生物防控方法

Info

Publication number: CN107668074B
Application number: CN201710833306.9A
Authority: CN
Inventors: 李军; 韩诗畴
Original assignee: Institute of Zoology of Guangdong Academy of Sciences
Current assignee: Institute of Zoology of Guangdong Academy of Sciences
Priority date: 2017-09-15
Filing date: 2017-09-15
Publication date: 2020-12-01
Anticipated expiration: 2037-09-15
Also published as: CN107668074A

Abstract

本发明公开了一种天牛的生物防控方法。它是将含有病原微生物的防治天牛的药剂溶于水中制成水分散剂，然后使天牛沾染水分散剂；所述的含有病原微生物的防治天牛的药剂，包括白僵菌和氯化钠，白僵菌孢子的个数与氯化钠的克数比为：(1～8)×200亿个：2.9～7.5g。本发明通过试验发现，白僵菌和氯化钠复配有显著的增效作用，防治效果非常好，针对目前发生较为严重的单从茶天牛的防控作用显著，同时具有对环境友好，对土壤及地下水资源无污染的特点，使用方法简单，易于推广应用，从而既提高了病原微生物的杀虫效果，又使得茶叶无污染。

Description

一种天牛的生物防控方法

技术领域：

本发明属于天牛的防控领域，具体涉及一种天牛的生物防控方法。

背景技术：

白僵菌：白僵菌是一种子囊菌类的虫生真菌，白僵菌高孢粉无毒无味，无环境污染，对害虫具有持续感染力，害虫一经感染可连续浸染传播。无农残，即使施用白僵菌后立刻收获产品也不会造成任何农药残留；无抗性，白僵菌通过在自然条件下与害虫的体壁接触感染致死，害虫不会对其产生任何抗性，连年使用，效果反而越来越高；再生长性，白僵菌新型生物农药含有活体真菌及孢子，施入田间后，借助适宜的温度、湿度，可以继续繁殖生长，增强杀虫效果；高选择性，不同于化学农药不分敌我的将益虫、害虫尽数毒杀，白僵菌专一性强，对非靶标生物如瓢虫、草蛉和食蚜虻等益虫影响较小。白僵菌因以上特性而被人们公认为21世纪的绿色农药、理想农药。因此，开发、生产生物农药无疑成为一种兼具社会效益和经济效益的超前行为。研制利用生物制剂防治茶树害虫茶天牛既可以安全有效的控制害虫，又可以保护茶叶及生态环境免遭污染破坏。

氯化钠(Sodium chloride)：氯化钠是一种无色立方结晶或细小结晶粉末，外观呈白色晶体状，主要来源于海水，是食盐的主要成分。氯化钠水溶液呈中性，在空气中稳定性比较好，医疗上用来配置生理盐水，生活上可用于调味品，工业上一般采用电解饱和氯化钠溶液的方法来生产氢气、氯气和烧碱(氢氧化钠)及其他化工产品(一般称为氯碱工业)，也可用于矿石冶炼(电解熔融的氯化钠晶体生产活泼金属钠)。因此，如能将氯化钠作为增效剂加入生物药剂中有诸多优点，首先，氯化钠对人畜具有很高的安全性，对施药操作人员和施药区居民安全，而且不会对茶天牛造成驱辟性。其次，氯化钠对环境安全，不会污染空气，对环境造成的影响很小。最后，氯化钠对鱼类和其它水生生物基本上没有影响。

国内外的生防学者在利用真菌防治天牛方面做了大量的试验，有些还取得了较好的效果。吕昌仁曾试用白僵菌防治杨树天牛，取得了较理想的结果。张波等(1999)利用带菌无纺布防治光肩星天牛成虫并分析了影响防治效果的因子。日本学者Shimazu等(1995)利用带菌(球抱白僵菌)无纺布防治松褐天牛幼虫，平均致死率达80％，最高达100％。然是由于白僵菌在野外应用时，由于温度，湿度，紫外光等环境条件的限制，使得孢子的萌发率较低，以至影响了白僵菌的杀虫活性，因此，单独施用病原微生物白僵菌防治天牛的速度相对较慢。而通过两种或两种以上组分的药物制剂混配组分能够有效克服以上缺点。同时，利用两种药物组分混配所产生的增效作用，可以提高防效，减少施工次数，节约成本，加快害虫有效得以控制的速度。

至今未见白僵菌与氯化钠组合的杀虫剂在防控天牛上应用的报道。

发明内容：

本发明的目的是提供一种安全、高效的天牛的生物防控方法。该防控方法能解决在防治天牛的时候，病原微生物在实际使用中的不足，针对目前发生较为严重的单从茶天牛的防控作用显著，同时具有对环境友好，对土壤及地下水资源无污染的特点，使用方法简单，易于推广应用,从而既提高了病原微生物的杀虫效果，又使得茶叶无污染。

本发明的天牛的生物防控方法，其特征在，将含有病原微生物的防治天牛的药剂溶于水中制成水分散剂，然后使天牛沾染水分散剂；

所述的含有病原微生物的防治天牛的药剂，包括白僵菌和氯化钠，白僵菌孢子的个数与氯化钠的克数比为：(1～8)×200亿个：2.9～7.5g。

所述的含有病原微生物的防治天牛的药剂，优选为水分散性粒剂，按质量分数100％计，包括白僵菌粉剂和氯化钠的总质量分数为30％，白僵菌粉剂和氯化钠质量比为5：4.0～7.5g，所述的白僵菌粉剂含有白僵菌孢子200亿个/g、湿润剂拉开粉8％、分散剂木质素磺酸钠18％、崩解剂氯化钙5％、稳定剂磷酸氢二钠2％、黏结剂聚丙烯酸钠5％和载体硅藻土32％。

优选，所述的白僵菌孢子的个数与氯化钠的克数比为：5×200亿个：2.92～7.30g。进一步优选为：5×200亿个：7.30g。

所述的将含有病原微生物的防治天牛的药剂溶于水中制成水分散剂是将白僵菌孢子和氯化钠溶于水中，使白僵菌孢子的个数为1×10⁸个/mL^-1和氯化钠为50～125mmol/L。

本发明通过试验发现，白僵菌和氯化钠复配有显著的增效作用，防治效果非常好，针对目前发生较为严重的单从茶天牛的防控作用显著，同时具有对环境友好，对土壤及地下水资源无污染的特点，使用方法简单，易于推广应用，从而既提高了病原微生物的杀虫效果，又使得茶叶无污染。

附图说明：

图1是实施例1不同浓度药物作用下360h后茶天牛累计死亡率图，其中白僵菌：白僵菌5g/L水溶液；第2-10根柱子分别表示：白僵菌+25mmol/L NaCl；白僵菌+50mmol/LNaCl；白僵菌+75mmol/L NaCl；白僵菌+100mmol/L NaCl；白僵菌+125mmol/L NaCl；白僵菌+150mmol/L NaCl；6：白僵菌+200mmol/L NaCl；白僵菌+250mmol/L NaCl；白僵菌+300mmol/LNaCl；白僵菌+400mmol/L NaCl。CK：无菌水；NaCl：125mmol/L NaCl水溶液。

图2是实施例2不同白僵菌氯化钠水分散剂作用下360h后茶天牛累计死亡率图，其中白僵菌：白僵菌组；第2-10根柱子分别表示：白僵菌+25mmol/L NaCl+辅料；白僵菌+50mmol/L NaCl+辅料；白僵菌+75mmol/L NaCl+辅料；白僵菌+100mmol/L NaCl+辅料；白僵菌+125mmol/L NaCl+辅料；白僵菌+150mmol/L NaCl+辅料；白僵菌+200mmol/L NaCl+辅料；白僵菌+250mmol/L NaCl+辅料；白僵菌+300mmol/L NaCl+辅料；白僵菌+400mmol/L NaCl+辅料。CK：无菌水+辅料；NaCl：125mmol/L NaCl水溶液+辅料。

具体实施方式：

白僵菌是应用较多的一类昆虫病原真菌，各大菌种保藏中心都有销售，如广东省微生物菌种保藏中心，因此本领域技术人员可以去各大菌种保藏中心购买，也可以去商业生产白僵菌的公司购买，如江西天人生态股份有限公司。

以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。

实施例1：白僵菌与氯化钠复配对天牛的室内毒力测定实验

室内毒力测定时，称取白僵菌粉剂10g溶于2L水中，混合均匀，获得白僵菌溶液。所用白僵菌粉剂含白僵菌孢子200亿个/g。从2L白僵菌溶液中量取11份各100ml的白僵菌溶液，然后分别往里面分别加NaCl，使得9份白僵菌溶液中NaCl的浓度分别为：0mmol/L,25mmol/L,50mmol/L,75mmol/L,100mmol/L,125mmol/L,150mmol/L,200mmol/L,250mmol/L,300mmol/L，400mmol/L，顺序得到白僵菌·氯化钠水分散溶液，其中白僵菌的孢子浓度为1×10⁸个/mL^-1。

分别测定白僵菌溶液、白僵菌·氯化钠水分散溶液、氯化钠溶液(125mmol/L)和无菌水对健康茶天牛幼虫的毒力。每个处理3次重复，每个重复1个培养皿，每个培养皿放30头茶天牛幼虫。首先将茶天牛幼虫浸入药液约5s后取出，在室内晾干后放入钻有虫道的茶树枝中，将树枝放置在饲养箱内，置于26±1℃，湿度70-90％，光周期24L/0hD条件下饲养，于药后360h观察产天牛幼虫的存活情况，计算死亡率。数据统计采用SPSS13.0软件，用Duncan’s法对各样品间进行显著性检验，不同小写字母表示处理后茶天牛幼虫的累积死亡率差异显著(P＜0.05)。

结果如图1所示，从图1可以看出，当单独使用NaCl时茶天牛360h后的累积死亡率与空白对照相比结果差异不显著，既没有任何杀灭效果，当单独使用白僵菌时茶天牛360h后的累积死亡率与单独使用NaCl和空白对照差异显著，说明单独使用白僵菌具有一定的杀虫活性，然而当氯化钠以50mmol/L,75mmol/L,100mmol/L,125mmol/L的浓度与白僵菌混合时，茶天牛360h后累计死亡率与单独使用白僵菌和单独使用NaCl后茶天牛幼虫的累积死亡率差异显著，说明当氯化钠和白僵菌以一定比例混合后使用的杀虫效果与单独氯化钠或白僵菌使用时具有明显的增效作用。

本发明人以氯化钙，氯化钾，氯化镁，硫酸铵，氯化铁代替氯化钠做上述相同的实验，结果发现，氯化钙，氯化钾，氯化镁，硫酸铵，氯化铁不具有增效效果，其加与不加对白僵菌的杀茶天牛的效果影响不大，不具有显著性差异。

实施例2：白僵菌氯化钠水分散剂对茶天牛的室内毒力测定实验

称取白僵菌粉剂和氯化钠共计30g(其中白僵菌粉剂和氯化钠质量比分别为：5:1.46；5:2.92；5:4.38；5:5.84；5:7.30；5:8.77；5:11.69；5:14.61g；5:17.53；5:23.38，所用白僵菌粉剂含白僵菌孢子200亿个/g。)、湿润剂拉开粉8g、分散剂木质素磺酸钠18g、崩解剂氯化钙5g、稳定剂磷酸氢二钠2g、黏结剂聚丙烯酸钠5g、载体硅藻土32g，以上原料按水分散性粒剂的制备方法投入混合(1、按照配方将原料混合均匀；2、混合均匀后经砂磨机砂磨并检测合格后进行喷雾造粒；3、喷雾造粒后经过振动筛进行筛分，外形不合格品返回到砂磨机重新砂磨，外形合格品再进一步质量检测，若质量不合格品亦返回砂磨机重新砂磨；4、检测质量合格品，进行包装；5、包装好的该水分散粒剂进行入库)，最终制得质量分数30％白僵菌·氯化钠水分散剂。

将上述白僵菌·氯化钠水分散剂加入到水中，得到白僵菌·氯化钠水分散剂溶液。使各白僵菌·氯化钠水分散剂溶液中白僵菌的孢子浓度是1×10⁸个/mL^-1，NaCl的浓度分别为：25mmol/L[对应图2中的B+NaCl(25mmol/L)]，50mmol/L[对应图2中的B+NaCl(50mmol/L)]，75mmol/L[对应图2中的B+NaCl(75mmol/L)],100mmol/L[对应图2中的B+NaCl(100mmol/L)],125mmol/L[对应图2中的B+NaCl(125mmol/L)],150mmol/L[对应图2中的B+NaCl(150mmol/L)],200mmol/L[对应图2中的B+NaCl(200mmol/L)],250mmol/L[对应图2中的B+NaCl(250mmol/L)]，300mmol/L[对应图2中的B+NaCl(300mmol/L)],400mmol/L[对应图2中的B+NaCl(400mmol/L)]。

以含1×10⁸个mL^-1白僵菌孢子的水溶液(白僵菌溶液)作为对照，水溶液中还含有与上述实验组相同浓度的辅料(湿润剂拉开粉、分散剂木质素磺酸钠、崩解剂氯化钙、稳定剂磷酸氢二钠、黏结剂聚丙烯酸钠、载体硅藻土)，命名为白僵菌组(对应图2中的白僵菌)。

以浓度为125mmol/L氯化钠水溶液作为对照，水溶液中还含有与上述实验组相同浓度的辅料(湿润剂拉开粉、分散剂木质素磺酸钠、崩解剂氯化钙、稳定剂磷酸氢二钠、黏结剂聚丙烯酸钠、载体硅藻土)。命名为NaCl组(对应图2中的NaCl)。

以及单独的无菌水作为对照(CK)，水中还含有与上述实验组相同浓度的辅料(湿润剂拉开粉、分散剂木质素磺酸钠、崩解剂氯化钙、稳定剂磷酸氢二钠、黏结剂聚丙烯酸钠、载体硅藻土)，命名为CK组(对应图2中的CK)。

分别测定白僵菌溶液(白僵菌组)、白僵菌·氯化钠水分散剂溶液、氯化钠溶液(NaCl组)和无菌水(CK)对健康茶天牛幼虫的毒力。每个处理3次重复，每个重复1个培养皿，每个培养皿放30头茶天牛幼虫。首先将茶天牛幼虫浸入药液约5s后取出，在室内晾干后放入钻有虫道的茶树枝中，将树枝放置在饲养箱内，置于26±1℃，湿度70-90％，光周期24L/0hD条件下饲养，于药后360h观察产天牛幼虫的存活情况，计算死亡率。数据统计采用SPSS13.0软件，用Duncan’s法对各样品间进行显著性检验，不同小写字母表示处理后茶天牛幼虫的累积死亡率差异显著(P＜0.05)。

结果如图2所示，从图2可以看出，当单独使用NaCl时茶天牛360h后的累积死亡率与空白对照相比结果差异不显著，既没有任何杀灭效果，当单独使用白僵菌时茶天牛360h后的累积死亡率与单独使用NaCl和空白对照差异显著，说明单独使用白僵菌具有一定的杀虫活性，然而当氯化钠以50mmol/L,75mmol/L,100mmol/L,125mmol/L的浓度与白僵菌混合时，茶天牛360h后累计死亡率达与单独使用白僵菌和单独使用NaCl后茶天牛幼虫的累积死亡率差异显著，说明当氯化钠和白僵菌以一定比例混合后使用的杀虫效果与单独氯化钠或白僵菌使用时具有明显的增效作用。

另外从图2可以看出，白僵菌、氯化钠与辅料制成白僵菌·氯化钠水分散剂的杀虫效果与不加辅料的白僵菌·氯化钠水分散溶液效果相当。

实施例3：

室内毒力测定时，称取白僵菌粉剂1g和氯化钠7.5g溶于1L水中，混合均匀，获得白僵菌溶液。所用白僵菌粉剂含白僵菌孢子200亿个/g。

按照实施例1的方法进行室内毒力测定，结果表明，本实施例的白僵菌溶液对茶天牛具有较好的杀灭效果。

实施例4：

室内毒力测定时，称取白僵菌粉剂8g和氯化钠2.9g溶于1L水中，混合均匀，获得白僵菌溶液。所用白僵菌粉剂含白僵菌孢子200亿个/g。

按照实施例1的方法进行室内毒力测定，结果表明，其对茶天牛具有较好的杀灭效果。

Claims

1.一种天牛的生物防控方法，其特征在，将含有病原微生物的防治天牛的药剂溶于水中制成水分散剂，然后使天牛沾染水分散剂；

2.根据权利要求1所述的天牛的生物防控方法，其特征在于，所述的含有病原微生物的防治天牛的药剂为水分散性粒剂，按质量分数100％计，包括白僵菌粉剂和氯化钠的总质量分数为30％，白僵菌粉剂和氯化钠质量比为5：4.0～7.5g，所述的白僵菌粉剂含有白僵菌孢子200亿个/g、湿润剂拉开粉8％、分散剂木质素磺酸钠18％、崩解剂氯化钙5％、稳定剂磷酸氢二钠2％、黏结剂聚丙烯酸钠5％和载体硅藻土32％。

3.根据权利要求1或2所述的天牛的生物防控方法，其特征在于，所述的白僵菌孢子的个数与氯化钠的克数比为：5×200亿个：2.92～7.30g。

4.根据权利要求3所述的天牛的生物防控方法，其特征在于，所述的白僵菌孢子的个数与氯化钠的克数比为：5×200亿个：7.30g。

5.根据权利要求1所述的天牛的生物防控方法，其特征在于，所述的将含有病原微生物的防治天牛的药剂溶于水中制成水分散剂是将白僵菌孢子和氯化钠溶于水中，使白僵菌孢子的个数为1×10⁸个/mL^-1和氯化钠为50～125mmol/L。