CN107603276A

CN107603276A - 一种稳定的生物染色剂及其制备方法

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Publication number: CN107603276A
Application number: CN201710824478.XA
Authority: CN
Inventors: 井政; 郑超; 郑一超; 常婕
Original assignee: Zhengzhou Leye Biological Technology Co Ltd
Current assignee: Zhengzhou Leye Biological Technology Co Ltd
Priority date: 2017-09-14
Filing date: 2017-09-14
Publication date: 2018-01-19

Abstract

本发明公开了一种稳定的生物染色剂及其制备方法，该生物染色剂，由以下按照质量百分比的原料组成：三硝基苯酚1‑15%、过硫酸钠2‑30%、丙烯酸酯3‑25%、医用级醋酸1‑15%、5,6,7,8‑四氢叶酸0.5‑15%、辣根过氧化酶0.1‑5%、福尔马林1‑10%、乙醇1‑30%，余量为去离子水。取三硝基苯酚、过硫酸钠、医用级醋酸与去离子水充分混合，静置沉淀，取上层清液；再与丙烯酸酯、5,6,7,8‑四氢叶酸、辣根过氧化酶、乙醇混合均匀，将其置于温度为30℃‑80℃的环境下进行水浴加热5‑50min，在水浴加热过程中添加福尔马林；搅拌均匀即得。本发明用量少，着色效果好，颜色清晰，后期易洗脱，样品硬度不变，样品的完整性高。在生物医学的解剖学中，样品能够快速、高效、准确的显示。

Description

一种稳定的生物染色剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及化学染色剂技术领域，具体是一种稳定的生物染色剂及其制备方法。

背景技术

近年来，随着医学的发展和病理研究的深入，人类需要大量的解剖实验去进行分析和检测，以供为进一步病理分析作参考，那么当进行生物医学的解剖实验时，对样品进行染色能够很好地观察到解剖结构。一般情况下，生物医学的解剖实验以分析组织形态为主，主要通过对整个组织进行染色，使得脱落组织在显微镜下能够清楚地被观察到。现有常用的染色方法都具有较强地主观性，容易导致分析不够准确，并且多数组织含水量大、透光性强、幼嫩、质地柔软，直接肉眼观察或者体视镜观察都不易看清其结构特征，结果准确性较差。

发明内容

本发明的目的在于提供一种稳定的生物染色剂及其制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种稳定的生物染色剂，由以下按照质量百分比的原料组成：三硝基苯酚1-15%、过硫酸钠2-30%、丙烯酸酯3-25%、医用级醋酸1-15%、5,6,7,8-四氢叶酸0.5-15%、辣根过氧化酶0.1-5%、福尔马林1-10%、乙醇1-30%，余量为去离子水。

作为本发明进一步的方案：所述稳定的生物染色剂，由以下按照质量百分比的原料组成：三硝基苯酚2-12%、过硫酸钠4-25%、丙烯酸酯5-22%、医用级醋酸2-12%、5,6,7,8-四氢叶酸1-12%、辣根过氧化酶0.5-4%、福尔马林2-8%、乙醇2-25%，余量为去离子水。

作为本发明进一步的方案：所述稳定的生物染色剂，由以下按照质量百分比的原料组成：三硝基苯酚4-10%、过硫酸钠5-22%、丙烯酸酯7-20%、医用级醋酸4-10%、5,6,7,8-四氢叶酸2-10%、辣根过氧化酶0.8-3%、福尔马林3-7%、乙醇5-20%，余量为去离子水。

作为本发明进一步的方案：福尔马林中甲醛质量含量为1-5%。

一种稳定的生物染色剂的制备方法，包括以下步骤：

1）取三硝基苯酚、过硫酸钠、医用级醋酸与去离子水充分混合，静置沉淀，取上层清液，制得混合物A；

2）将混合物A与丙烯酸酯、5,6,7,8-四氢叶酸、辣根过氧化酶、乙醇混合均匀，将其置于温度为30℃-80℃的环境下进行水浴加热5-50min，在水浴加热过程中添加福尔马林；搅拌均匀，即得生物染色剂。

作为本发明进一步的方案：步骤1）中，静置时间为1-24h。

作为本发明进一步的方案：步骤1）中，取上层清液采用滤纸进行过滤。

作为本发明进一步的方案：滤纸采用定性滤纸。

作为本发明进一步的方案：步骤2）中，将其置于温度为40℃-70℃的环境下进行水浴加热8-40min。

作为本发明进一步的方案：步骤2）中，搅拌速度为60-300r/min。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明制得的生物染色剂用量少，着色效果好，颜色清晰，后期易洗脱，样品硬度不变，样品的完整性高。在生物医学的解剖学中，样品能够快速、高效、准确的显示。本发明能够显著地提高动物解剖结构的观察效果，改善观察者容易视觉疲劳的状况。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

本发明实施例中，一种稳定的生物染色剂，由以下按照质量百分比的原料组成：三硝基苯酚1%、过硫酸钠30%、丙烯酸酯3%、医用级醋酸15%、5,6,7,8-四氢叶酸0.5%、辣根过氧化酶5%、福尔马林1%、乙醇30%，余量为去离子水。

福尔马林中甲醛质量含量为1%。

它的制备方法，包括以下步骤：

1）取三硝基苯酚、过硫酸钠、医用级醋酸与去离子水充分混合，静置沉淀1h，取上层清液，且是采用定性滤纸进行过滤，制得混合物A。

2）将混合物A与丙烯酸酯、5,6,7,8-四氢叶酸、辣根过氧化酶、乙醇混合均匀，将其置于温度为30℃的环境下进行水浴加热5min，在水浴加热过程中添加福尔马林；以60r/min的搅拌速度搅拌均匀，即得生物染色剂。

实施例2

本发明实施例中，一种稳定的生物染色剂，由以下按照质量百分比的原料组成：三硝基苯酚15%、过硫酸钠2%、丙烯酸酯25%、医用级醋酸1%、5,6,7,8-四氢叶酸15%、辣根过氧化酶0.1%、福尔马林10%、乙醇1%，余量为去离子水。

福尔马林中甲醛质量含量为5%。

它的制备方法，包括以下步骤：

1）取三硝基苯酚、过硫酸钠、医用级醋酸与去离子水充分混合，静置沉淀24h，取上层清液，且是采用定性滤纸进行过滤，制得混合物A。

2）将混合物A与丙烯酸酯、5,6,7,8-四氢叶酸、辣根过氧化酶、乙醇混合均匀，将其置于温度为80℃的环境下进行水浴加热50min，在水浴加热过程中添加福尔马林；以300r/min的搅拌速度搅拌均匀，即得生物染色剂。

实施例3

本发明实施例中，一种稳定的生物染色剂，由以下按照质量百分比的原料组成：三硝基苯酚2%、过硫酸钠25%、丙烯酸酯5%、医用级醋酸12%、5,6,7,8-四氢叶酸1%、辣根过氧化酶4%、福尔马林2%、乙醇25%，余量为去离子水。

福尔马林中甲醛质量含量为2%。

它的制备方法，包括以下步骤：

1）取三硝基苯酚、过硫酸钠、医用级醋酸与去离子水充分混合，静置沉淀4h，取上层清液，且是采用定性滤纸进行过滤，制得混合物A。

2）将混合物A与丙烯酸酯、5,6,7,8-四氢叶酸、辣根过氧化酶、乙醇混合均匀，将其置于温度为40℃的环境下进行水浴加热8min，在水浴加热过程中添加福尔马林；以100r/min的搅拌速度搅拌均匀，即得生物染色剂。

实施例4

本发明实施例中，一种稳定的生物染色剂，由以下按照质量百分比的原料组成：三硝基苯酚12%、过硫酸钠4%、丙烯酸酯22%、医用级醋酸2%、5,6,7,8-四氢叶酸12%、辣根过氧化酶0.5%、福尔马林8%、乙醇2%，余量为去离子水。

福尔马林中甲醛质量含量为4%。

它的制备方法，包括以下步骤：

1）取三硝基苯酚、过硫酸钠、医用级醋酸与去离子水充分混合，静置沉淀20h，取上层清液，且是采用定性滤纸进行过滤，制得混合物A。

2）将混合物A与丙烯酸酯、5,6,7,8-四氢叶酸、辣根过氧化酶、乙醇混合均匀，将其置于温度为70℃的环境下进行水浴加热40min，在水浴加热过程中添加福尔马林；以250r/min的搅拌速度搅拌均匀，即得生物染色剂。

实施例5

本发明实施例中，一种稳定的生物染色剂，由以下按照质量百分比的原料组成：三硝基苯酚4%、过硫酸钠22%、丙烯酸酯7%、医用级醋酸10%、5,6,7,8-四氢叶酸2%、辣根过氧化酶3%、福尔马林3%、乙醇20%，余量为去离子水。

福尔马林中甲醛质量含量为2%。

它的制备方法，包括以下步骤：

1）取三硝基苯酚、过硫酸钠、医用级醋酸与去离子水充分混合，静置沉淀12h，取上层清液，且是采用定性滤纸进行过滤，制得混合物A。

2）将混合物A与丙烯酸酯、5,6,7,8-四氢叶酸、辣根过氧化酶、乙醇混合均匀，将其置于温度为50℃的环境下进行水浴加热20min，在水浴加热过程中添加福尔马林；以150r/min的搅拌速度搅拌均匀，即得生物染色剂。

实施例6

本发明实施例中，一种稳定的生物染色剂，由以下按照质量百分比的原料组成：三硝基苯酚10%、过硫酸钠5%、丙烯酸酯20%、医用级醋酸4%、5,6,7,8-四氢叶酸10%、辣根过氧化酶0.8%、福尔马林7%、乙醇5%，余量为去离子水。

福尔马林中甲醛质量含量为3%。

它的制备方法，包括以下步骤：

1）取三硝基苯酚、过硫酸钠、医用级醋酸与去离子水充分混合，静置沉淀18h，取上层清液，且是采用定性滤纸进行过滤，制得混合物A。

2）将混合物A与丙烯酸酯、5,6,7,8-四氢叶酸、辣根过氧化酶、乙醇混合均匀，将其置于温度为60℃的环境下进行水浴加热30min，在水浴加热过程中添加福尔马林；以200r/min的搅拌速度搅拌均匀，即得生物染色剂。

将上述实施例1-6制得的生物染色剂应用于观察兔眼角膜内皮细胞；观察结果：兔眼角膜内皮细胞的包膜不完整，胞浆内有空泡形成，内质网扩张，核肿胀变形。实施例5-6的观察结果最清晰。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims

1.一种稳定的生物染色剂，其特征在于，由以下按照质量百分比的原料组成：三硝基苯酚1-15%、过硫酸钠2-30%、丙烯酸酯3-25%、医用级醋酸1-15%、5,6,7,8-四氢叶酸0.5-15%、辣根过氧化酶0.1-5%、福尔马林1-10%、乙醇1-30%，余量为去离子水。

2.根据权利要求1所述的稳定的生物染色剂，其特征在于，由以下按照质量百分比的原料组成：三硝基苯酚2-12%、过硫酸钠4-25%、丙烯酸酯5-22%、医用级醋酸2-12%、5,6,7,8-四氢叶酸1-12%、辣根过氧化酶0.5-4%、福尔马林2-8%、乙醇2-25%，余量为去离子水。

3.根据权利要求2所述的稳定的生物染色剂，其特征在于，由以下按照质量百分比的原料组成：三硝基苯酚4-10%、过硫酸钠5-22%、丙烯酸酯7-20%、医用级醋酸4-10%、5,6,7,8-四氢叶酸2-10%、辣根过氧化酶0.8-3%、福尔马林3-7%、乙醇5-20%，余量为去离子水。

4.根据权利要求1-3任一所述的稳定的生物染色剂，其特征在于，福尔马林中甲醛质量含量为1-5%。

5.一种如权利要求1-4任一所述的稳定的生物染色剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

6.根据权利要求5所述的稳定的生物染色剂的制备方法，其特征在于，步骤1）中，静置时间为1-24h。

7.根据权利要求5所述的稳定的生物染色剂的制备方法，其特征在于，步骤1）中，取上层清液采用滤纸进行过滤。

8.根据权利要求7所述的稳定的生物染色剂的制备方法，其特征在于，滤纸采用定性滤纸。

9.根据权利要求5所述的稳定的生物染色剂的制备方法，其特征在于，步骤2）中，将其置于温度为40℃-70℃的环境下进行水浴加热8-40min。

10.根据权利要求5所述的稳定的生物染色剂的制备方法，其特征在于，步骤2）中，搅拌速度为60-300r/min。