CN107586310B - 一种黄霉素的提取工艺 - Google Patents
一种黄霉素的提取工艺 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107586310B CN107586310B CN201710837706.7A CN201710837706A CN107586310B CN 107586310 B CN107586310 B CN 107586310B CN 201710837706 A CN201710837706 A CN 201710837706A CN 107586310 B CN107586310 B CN 107586310B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- flavomycin
- extracting
- filtrate
- water
- value
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- PERZMHJGZKHNGU-JGYWJTCASA-N bambermycin Chemical compound O([C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O1)CO[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H](O)[C@H]1NC(C)=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)C(=O)NC=1C(CCC=1O)=O)O)C)[C@H]1[C@@H](OP(O)(=O)OC[C@@H](OC\C=C(/C)CC\C=C\C(C)(C)CCC(=C)C\C=C(/C)CCC=C(C)C)C(O)=O)O[C@H](C(O)=O)[C@@](C)(O)[C@@H]1OC(N)=O PERZMHJGZKHNGU-JGYWJTCASA-N 0.000 title claims abstract description 119
- 235000019374 flavomycin Nutrition 0.000 title claims abstract description 113
- 239000004181 Flavomycin Substances 0.000 title claims abstract description 112
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims abstract description 48
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims abstract description 61
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 58
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 58
- 238000001728 nano-filtration Methods 0.000 claims abstract description 42
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 33
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims abstract description 26
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 68
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 53
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 51
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 48
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 45
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 40
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 31
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 29
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 22
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 22
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 16
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 14
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 13
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 10
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 10
- 239000000049 pigment Substances 0.000 claims description 10
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 claims description 10
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 claims description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 238000004042 decolorization Methods 0.000 claims description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000010451 perlite Substances 0.000 claims description 5
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 5
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 4
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 claims description 4
- 230000003113 alkalizing effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 9
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 3
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract description 2
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 53
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 22
- 239000000047 product Substances 0.000 description 21
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 15
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 11
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 10
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 8
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 7
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 7
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 6
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 5
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 4
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 3
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 3
- 238000000622 liquid--liquid extraction Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 2
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 2
- DCKVNWZUADLDEH-UHFFFAOYSA-N sec-butyl acetate Chemical compound CCC(C)OC(C)=O DCKVNWZUADLDEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000012895 Gastric disease Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- 229950007118 bambermycin Drugs 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 208000021760 high fever Diseases 0.000 description 1
- 239000001023 inorganic pigment Substances 0.000 description 1
- 239000003049 inorganic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000391 magnesium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052919 magnesium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019792 magnesium silicate Nutrition 0.000 description 1
- ZADYMNAVLSWLEQ-UHFFFAOYSA-N magnesium;oxygen(2-);silicon(4+) Chemical compound [O-2].[O-2].[O-2].[Mg+2].[Si+4] ZADYMNAVLSWLEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940105082 medicinal charcoal Drugs 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000012860 organic pigment Substances 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 238000005373 pervaporation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000011085 pressure filtration Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000956 solid--liquid extraction Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000010887 waste solvent Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明公开了一种从黄霉素发酵液中工业化提取生产黄霉素的工艺。本发明以黄霉素的发酵液为起始原料，经过发酵液预处理及过滤，收集富含黄霉素的滤液,再经非极性或弱极性有机溶剂萃取、反萃取、脱色、纳滤、喷干等步骤，获得白色至类白色生物效价1200‑1600 u/mg的黄霉素精品。生产总收率80%以上。本发明使用常用工业原料和设备，工艺简单，收率高，成本低，适合连续化工业生产。
Description
技术领域
本发明属于生物工程下游的提取纯化技术领域，尤其是涉及一种从发酵液中提取黄霉素精品的提取工艺。
背景技术
黄霉素(Flavomycin)又称莫诺霉素(moenomycin)、斑驳霉素(bambermycin)、黄磷脂素(flavophospholipol)，是一种多组分的动物用抗生素，有五个主要组分A、A12、C1、C3、C4，商品黄霉素中A组分含量比例最大，一般在60-80％之间。
黄霉素A的经验分子式为：C69H107N4O35P，分子量为1582g/mol。黄霉素的化学结构式：
目前黄霉素的生产企业都是生产含黄霉素20-250u/mg(相当于含量2-25％)的粗品，然后再添加辅料配成含量为4％、8％、12％的兽用预混剂使用。由于粗品中含有微生物长期培养发酵产生的大量代谢副产物，杂质成分复杂，稳定性差，人在生产过程中接触黄霉素粗品易产生咳嗽、高烧、腹泻等不良过敏反应，但机理不明。黄霉素精品本身的毒性小，精品配制成的预混剂，给动物饲用可改善口感，更会显著减少毒副作用，促生长效率更高，是以后兽用预混剂的发展趋势。专利US6077830报道，黄霉素的锚盐可以治疗和预防胃病，提示黄霉素精品将来也可以用于人类用药；而黄霉素精品大规模生产的工艺尚未见报道。
国内专利CN1683549A公开了一种莫诺霉素(即黄霉素)的提取方法即从发酵菌丝体中用甲醇等极性溶剂提取后，再用硅胶柱和硅酸镁及Rp-18柱层析进行三步色谱分离纯化的在实验室中制备标准品的方法，该方法中大量使用甲醇、石油醚、丁醇、乙腈等溶剂或其混合物进行除盐、脱色、梯度洗脱或洗涤、层析等纯化方式，不适合进行大规模工业化生产。国内外其他专利则主要是关于默诺霉素A或默诺霉醇从多组分混合物中分离纯化的方法，工艺也都是采用极性溶剂进行固液提取和多种色谱柱或离子交换树脂或大孔树脂等联合使用进行分离纯化的方式，也只能在实验室少量制备，分离的效率和收率更低，生产成本更高，不适合大规模工业化生产。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明提供一种可以连续化大生产，生产过程简单，提取收率高，产品纯度高的黄霉素的提取工艺。
本发明解决技术问题所采用的技术方案是：一种黄霉素的提取工艺，包括以下步骤：
1)预处理：取黄霉素发酵液，碱化至pH值为8-12，过滤发酵液后收集获得富含黄霉素的滤液A；
2)溶媒萃取：向滤液A中加入有机溶剂，调节至pH值为1-4，间歇搅拌萃取，静置分层，将下层水相分离获得萃取液B；
3)反萃取、洗涤：向萃取液B中加入水或氯化钠溶液搅拌混合洗涤，静置分层，除去含有色素和杂质的水层，加入等体积无盐水，调节至pH值为6-12，继续间歇搅拌12-18分钟进行反萃取，静置分层，获得富含黄霉素的水层提取液，向水层提取液中添加有机溶媒，搅拌洗涤除杂，静置分层，获得下层的富含黄霉素的水层提取液C；
4)纳滤、喷干：水层提取液C用纳滤膜纳滤截留获得富含黄霉素的浓缩液，浓缩液喷雾干燥获得白色或类白色的黄霉素。
作为优选，所述步骤1)发酵液经碱化至pH值为8.5-9.5，采用固体氢氧化钠，或采用固体氢氧化钠配成的溶液，或采用工业液碱，或采用工业液碱配成的稀溶液。
进一步的，氢氧化钠溶液的浓度为20-30％。
作为优选，向所述步骤1)中碱化后的发酵液添加助滤剂，使用板框过滤，助滤剂为硅藻土、珍珠岩、有机絮凝剂或无机絮凝剂中的一种或几种。
进一步的，助滤剂为0.5-2％；用压榨板框过滤发酵液，过滤后顶少量水进一步将残留在菌丝体中的黄霉素顶出并过滤到滤液中。
作为优选，在所述步骤1)中碱化后的发酵液使用陶瓷膜过滤。若用陶瓷膜过滤，不用添加硅藻土或珍珠岩等固体助滤剂；用陶瓷膜过滤滤液质量好，萃取时不宜乳化。
所述步骤1)中所有的利用搅拌混合萃取或洗涤，静止分层的步骤，在生产规模放大后，都可以用碟片式高速离心萃取机替代，替代后所有料液都可以连续进出和自动化控制，分离效果更好，效率更高。
作为优选，所述步骤2)向滤液A中加入的有机溶剂为与水混合后可分层的弱极性或非极性溶剂。
作为优选，所述步骤2)向滤液A中加入的有机溶剂为乙酸丁酯或乙酸乙酯或两者的组合。
作为优选，所述步骤2)中萃取方式为少量多次，其pH值为1-3。
作为优选，所述步骤2)和步骤3)中利用10-25％的硫酸溶液调节pH值。当然也可以使用盐酸、醋酸、磷酸等酸或其稀溶液。
进一步的，所述步骤2)中间歇搅拌萃取时间为15分钟；若萃取收率低，可以再萃取一次或少量多次萃取。
步骤2)和步骤3)中分出的废水，残留有少量有机溶媒，可以通过蒸馏回收有机溶媒后再排放，也可以使用成本更低效果更好的新技术-渗透汽化膜回收废水中的有机溶媒。这样即可更彻底回收溶媒降低成本，也可减少废溶媒的排放，有利于环境保护并减少环保治理费用。
作为优选，所述步骤2)向滤液A中加入破乳剂。破乳剂可以是食盐。
作为优选，所述步骤2)中滤液A和有机溶剂的体积比为1:0.5-2。
作为优选，所述步骤3)向萃取液B中加入的水的pH值为2；向萃取液B中加入的氯化钠溶液的pH值为2；所述步骤3)中在pH值为7-8的条件下进行反萃取。步骤3)中有机萃取液加水洗涤目的是洗去残留的无机、有机杂质和色素等，加入的水或食盐水可加少量酸调节PH值2左右，以防止黄霉素溶解到水层流失。
反萃取剩下的上层有机萃余液和水提液洗涤分出的上层有机洗涤液合并，可用于下批滤液的萃取，反复使用。
进一步的，所述步骤3)中氯化钠溶液的质量分数为10-30％；间歇搅拌时间为15分钟。
作为优选，在纳滤、喷干步骤之前增加脱色，向水层提取液C中加入活性炭搅拌脱色0.8-1.5h，压滤获得脱色液。
作为优选，所述脱色用炭可以用药用或糖用的粉状碳，也可用颗粒炭，其中，优选粉状药用碳脱色。脱色后的废碳，还有一定的脱色能力，也可以选择回用，加到下批发酵液中，兼做脱色和过滤助剂。
作为优选，所述活性炭的加入量为水层提取液C体积的0.2-0.5％。
进一步的，活性炭为药用732#，搅拌脱色时间为1小时，抽滤，抽干后加入少量无盐水顶洗活性炭，抽滤出的顶洗水合并到脱色液D后备用。
作为优选，所述步骤4)中获得的纳滤浓缩液可以直接喷雾干燥获得成品，也可以选择进一步减压浓缩干燥或冷冻干燥,大生产首选喷雾干燥。
步骤4)中使用纳滤，一方面可以浓缩，浓缩倍数可以尽量高些，以达到节能的目的，特别是后续采用浓缩干燥和冷冻干燥时，另一方面纳滤也可以滤除脱色液中部分色素和杂质，纳滤透过液基本不含黄霉素，只含有小分子量的有机和无机杂质，可部分套用于下批发酵液过滤中的顶水，以减少废水的排放。
作为优选，所述步骤4)中利用压力式喷雾干燥塔进行喷雾干燥时，控制进风温度为150-165℃，出风温度为65-75℃。
本发明公布了一种从黄霉素的发酵液中，通过预处理和过滤，获取黄霉素滤液，再采用滤液-非极性有机溶剂-水的液-液萃取、反萃取的方式生产黄霉素精品的工艺。
本发明通过调整黄霉素发酵液的pH值呈碱性，将黄霉素从菌丝体中充分释放到滤液中，再过滤发酵液除掉菌丝体，收集到富含黄霉素的滤液，滤液采用有机溶剂萃取和水反萃取两步液-液萃取工艺使黄霉素与滤液中大量杂质分离，获得高纯度的黄霉素水提液，水提液再通过活性炭脱色及纳滤进一步除杂和浓缩，获得纳滤浓缩液，浓缩液喷干即可获得白色或类白色黄霉素精品，总收率80％以上，精品效价用国家标准品和国家法定的生物检测方法检测1200-1600u/mg。如表1、表2所示，产品中的五个主要组分的比例恒定且和发酵液各组分的比例相似。
表1黄霉素发酵液五个组分的相对含量
表2黄霉素成品五个组分的相对含量
本发明利用实验得出的黄霉素具有在碱性条件下易溶于水，酸性条件下易溶于有机溶剂的特点；将黄霉素先转入滤液，再用乙酸丁酯等有机溶剂萃取和水反萃取两步液-液萃取简单的工艺分离获得了高纯度的黄霉素水提液。使用乙酸丁酯等萃取，萃取收率高，提纯效果好。经过一次反萃取即可除掉绝大部分色素和蛋白等杂质。乙酸丁酯等是一个廉价的大众化工业原料，与水的互溶度低，消耗少，易回收。工艺中的有机萃取剂、洗涤剂、纳滤透过液等都可回收循环套用，外排废水少，有利于环保，生产成本低。
脱色后的水提取液采用纳滤浓缩，除可以减少惯用的升温浓缩导致的黄霉素长期高温破坏和易生成色素杂质及浓缩过程易起泡沫造成的浓缩困难和易跑料外，还可以兼顾进一步除掉水提液残留的小分子无机和有机色素杂质等。
本发明的有益效果是：不采用其他专利普遍使用的耗时长，成本高、不宜放大生产的离子交换、多级硅胶色谱等复杂工艺，不大量使用多种无机、有机溶剂或其混合液进行除杂、吸附、洗脱、梯度洗脱等耗时长成本高难以放大生产的步骤，工艺简单、环保，易于连续化大生产；设备投资少、环保治理投资和生产过程中的环保治理费用低。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好的理解本发明方案，下面将对发明实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
实施例1
1)发酵液的预处理：取1.5吨发酵罐培养的周期为200小时的黄霉素发酵液1000升，效价15300U/mL，搅拌下慢慢加入浓度为30％的工业液碱溶液，碱化发酵液pH值9.5,再搅拌30分钟以上，使黄霉素从菌丝体内充分溶解到培养液中，在搅拌过程中，pH值会缓慢降低，当pH值降到8以下时，补加液碱使pH值保持在8以上。
2)发酵液的过滤：向罐中加入珍珠岩15kg,搅拌下，将发酵液缓慢打入1台15m2的隔膜式压滤机中过滤，打完发酵液，再打入约200升自来水顶洗菌丝体，打开挤压空气阀门使隔膜板框升压到4-8kg/cm2挤压，保持40-60分钟，进一步挤干残留在菌丝体中的液体到滤液中。拆板框，收集板框中的湿菌丝体约200-300kg(闪蒸干燥后可用于制备4％或8％黄霉素预混剂)。收集富含黄霉素的滤液A1000升，效价14570u/mL,用于制备黄霉素精品，发酵液过滤收率95.23％
3)溶媒萃取：获得的黄霉素滤液A按照滤液：乙酸丁酯体积比1：1的比例，加入等体积的乙酸丁酯1000升，搅拌下，通入20％的硫酸溶液，逐步调整到滤液pH值为1.5-2.0，继续间歇搅拌15分钟萃取，静止40分钟分层，分除下层的废滤液(萃取分出的废滤液蒸馏回收溶媒后外排，回收的乙酸丁酯可作为新鲜丁酯补充使用)。收集获得富含黄霉素的上层乙酸丁酯萃取液B为970升。
4)洗涤：向乙酸丁酯萃取液B中加入100升用硫酸调pH值1.5-2.0含2％的氯化钠溶液，间歇搅拌混合15分钟洗涤，静止30分钟，分层后分掉含有色素和杂质的废水层(可以和废滤液一起回收溶媒后外排)。
5)反萃取：向洗后乙酸丁酯提取液中加入无盐水970升，搅拌下再慢慢加入20-30％的氢氧化钠溶液调节水相pH值7.5后,再间歇搅拌混合15分钟萃取，静止45分钟，分层后分出下层的富含黄霉素的水提取液C为980升。
6)洗涤：向水提取液C中加入100升新鲜乙酸丁酯间歇搅拌10-15分钟洗涤除杂，分层后分出下层的富含黄霉素的洗后水提液待用。剩下的上层乙酸丁酯洗涤液和上步萃余的上层乙酸丁酯有机相合并，可用于下批滤液的萃取，反复使用。
7)脱色：向上步获得的洗后水提液中加入药用732#活性炭3kg搅拌脱色1小时，打入压滤器滤压滤，压干后继续打入60升无盐水顶洗活性炭，继续压干至无洗水流出，获得脱色液D为975升，效价13376u/mL；从滤液到脱色液收率89.5％。
8)纳滤：将脱色液D用泵打入纳滤的料液储罐，进入储罐前先通过一个100目的Y型管道过滤器过滤，开启纳滤装置进行纳滤，纳滤约2小时，收集纳滤膜截留的富含黄霉素的浓缩液425升，效价29960u/mL，纳滤收率97.6％。
9)喷干：上述纳滤截留的425升黄霉素浓缩液，用蒸发能力为40升/h的压力喷干塔喷雾干燥，进风温度150-165℃；出风温度65-75℃，收集获得类白色的黄霉素精品共9480g，效价1305u/mg.喷干收率97.16％；从发酵液到精品的总收率80.8％。
实施例2
1)发酵液的预处理：取1.5吨发酵罐培养的周期为207小时的黄霉素发酵液900升，效价15700U/mL，搅拌下慢慢加入浓度为30％的工业液碱溶液，碱化发酵液pH值10.5,再搅拌30分钟以上，使黄霉素从菌丝体内充分溶解到培养液中，在搅拌过程中，pH值会缓慢降低，当pH值降到9以下时，补加液碱使pH值保持在9以上。
2)发酵液的过滤：向罐中加入珍珠岩12kg,搅拌下，将发酵液缓慢打入1台15m2的隔膜式压滤机中过滤，过滤到基本不出滤液时，再打入约200升自来水顶洗菌丝体，打开挤压空气阀门使隔膜板框升压到4-8kg/cm2挤压，保持40-60分钟，进一步挤干残留在菌丝体中的液体到滤液中。拆板框，收集板框中的湿菌丝体约200-300kg(闪蒸干燥后可用于制备4％或8％黄霉素预混剂)。收集富含黄霉素的滤液A为1050升，效价13300u/mL,用于制备黄霉素精品，发酵液过滤收率98.83％
3)溶媒萃取：获得的黄霉素滤液A按照滤液：乙酸乙酯体积比1：0.5的比例，加入等体积的乙酸乙酯525升，搅拌下，通入25％的硫酸溶液，逐步调整到滤液pH值为2.0，继续间歇搅拌15分钟萃取，静止40分钟分层，收集分出的下层的滤液，再按照滤液：乙酸乙酯体积比1：0.5的比例入乙酸乙酯525升，搅拌通入10-25％的硫酸溶液，调整滤液pH值为1.5，间歇搅拌15分钟进行第二次萃取，分层后分除下层滤液。收集获得富含黄霉素的上层乙酸乙酯萃取液和第一次的萃取液合并，获得乙酸乙酯萃取液B为990升。
4)洗涤：向乙酸乙酯萃取液B中加入100升用硫酸调pH值1.5-2.0含2％的氯化钠溶液，间歇搅拌混合15分钟洗涤，静止30分钟，分层后分掉含有色素和杂质的废水层。
5)反萃取：向洗后乙酸乙酯提取液中加入无盐水990升，搅拌下再慢慢加入30-30％的氢氧化钠溶液调节水相pH值8.5后,再间歇搅拌混合15分钟萃取，静置45分钟，分层后分出下层的富含黄霉素的水提取液C为1000升。
6)洗涤：向水提取液C中加入100升新鲜乙酸乙酯间歇搅拌10-15分钟洗涤除杂，分层后分出下层的富含黄霉素的洗后水提液待用。剩下的上层乙酸乙酯洗涤液和上步萃余的上层乙酸乙酯有机相合并，可用于下批滤液的萃取，反复使用。
7)脱色：向洗后水提液中加入糖用活性炭2.5kg搅拌脱色1小时，打入压滤器滤压滤，压干后继续打入60升无盐水顶洗活性炭，继续压干至无洗水流出，获得脱色液D为980升，效价13560u/ml；从滤液到脱色液收率95.16％。
8)纳滤：将脱色液D用泵打入纳滤的料液储罐，进入储罐前先通过一个100目的Y型管道过滤器过滤，开启纳滤装置进行纳滤，纳滤约2小时，收集纳滤膜截留的富含黄霉素的浓缩液530升，效价24790u/mL，纳滤收率98.87％。
9)喷干：上述纳滤截留的530升黄霉素浓缩液，用蒸发能力为40升/h的压力喷干塔喷雾干燥，进风温度155-165℃；出风温度55-70℃，收集获得类白色的黄霉素精品共9433g，效价1266u/mg.喷干收率90.89％；从发酵液到精品的总收率84.5％。
实施例3
1)发酵液的预处理：取1.5吨发酵罐培养的周期为210小时的黄霉素发酵液1100升，效价16030U/mL，搅拌下慢慢加入浓度为20％的工业液碱溶液，碱化发酵液pH值10,再搅拌30分钟以上，使黄霉素从菌丝体内充分溶解到培养液中，在搅拌过程中，pH值会缓慢降低，当pH值降到8.5以下时，补加液碱使pH值保持在8.5以上。
2)发酵液的过滤：向罐中加入硅藻土15kg,搅拌下，将发酵液缓慢打入1台15m2的隔膜式压滤机中过滤，打完发酵液，再打入约300升自来水顶洗菌丝体，打开挤压空气阀门使隔膜板框升压到4-8kg/cm2挤压，保持40-60分钟，进一步挤干残留在菌丝体中的液体到滤液中。拆板框，收集板框中的湿菌丝体约200-300kg(闪蒸干燥后可用于制备4％或8％黄霉素预混剂)。收集富含黄霉素的滤液A为1350升，效价12450u/mL,用于制备黄霉素精品，发酵液过滤收率95.32％
3)溶媒萃取：获得的黄霉素滤液A按照滤液：乙酸乙酯：丁醇体积比1：1：0.5的比例，加入乙酸乙酯1350升，丁醇620升，搅拌下，通入10-25％的硫酸溶液，逐步调整到滤液pH值为1.7，继续间歇搅拌15分钟萃取，静止40分钟分层，分出下层的废滤液(萃取后的废滤液回收溶媒后外排，回收的乙酸乙酯和丁醇的混合物可套用到下批使用)。收集获得富含黄霉素的上层有机萃取液B为1750升。
4)洗涤：向萃取液B中加入150升用硫酸调pH值2.0含2％的氯化钠溶液，间歇搅拌混合15分钟洗涤，静止30分钟，分层后分掉含有色素和杂质的废水层(可以和废滤液一起回收溶媒后外排)。
5)反萃取：向洗后溶媒提取液中加入无盐水1500升，搅拌下再慢慢加入20-30％的氢氧化钠溶液调节水相pH值8.0后,再间歇搅拌混合15分钟萃取，静置45分钟，分层后分出下层的富含黄霉素的水提取液C为1550升。
6)洗涤：向水提取液C中加入100升新鲜乙酸乙酯间歇搅拌10-15分钟洗涤除杂，分层后分出下层的富含黄霉素的洗后水提液待用。剩下的上层乙酸乙酯洗涤液和上步萃余的上层有机相合并，可用于下批滤液的萃取，反复使用。
7)脱色：向洗后水提液中加入药用732#活性炭2kg搅拌脱色1小时，打入压滤器滤压滤，压干后继续打入100升无盐水顶洗活性炭，继续压干至无洗水流出，获得脱色液D为1600升，效价10050u/ml；从滤液到脱色液收率95.67％。
8)纳滤：将脱色液D用泵打入纳滤的料液储罐，进入储罐前先通过一个100目的Y型管道过滤器过滤，开启纳滤装置进行纳滤，纳滤约2.5小时，收集纳滤膜截留的富含黄霉素的浓缩液500升，效价30550u/mL，纳滤收率95.0％。
9)喷干：上述纳滤截留的500升黄霉素浓缩液，用蒸发能力为40升/h的压力喷干塔喷雾干燥，进风温度150-165℃；出风温度65-75℃，收集获得类白色的黄霉素精品共9690g，效价1497u/mg.喷干收率94.96％；从发酵液到精品的总收率82.3％。
实施例4
1)发酵液的预处理：取15吨发酵罐培养的周期为207小时的黄霉素发酵液12000升，效价14010U/mL，搅拌下慢慢加入浓度为30％的工业液碱溶液，碱化发酵液pH值10.5.再搅拌30分钟以上，使黄霉素从菌丝体内充分溶解到培养液中，在搅拌过程中，pH值会缓慢降低，当pH值降到8.0以下时，补加液碱使pH值保持在8.0以上。
2)发酵液的过滤：将发酵液打入1台过滤面积为36m2的陶瓷膜系统循环过滤，当发酵液体积降为3-4吨时，补充自来水维持体积3-4吨继续过滤，直到滤液出口效价降为700u/mL时停止过滤，收集富含黄霉素的陶瓷膜透过滤液A 19000升，效价8600u/mL,用于制备黄霉素精品，发酵液过滤收率97.19％
3)溶媒萃取：获得的黄霉素滤液A按照滤液：乙酸丁酯体积比1：0.5的比例，加入乙酸丁酯9500升，搅拌下，通入20％的硫酸溶液，逐步调整到滤液pH值为1.5-2.0，继续间歇搅拌15分钟萃取，静止40分钟分层，分出下层的废滤液再按照滤液：乙酸丁酯体积比1：0.5的比例，加入乙酸丁酯9500升同方法进行再次提取，分掉下层的废滤液(萃取分出的废滤液蒸馏回收溶媒后外排，回收的乙酸丁酯可作为新鲜丁酯补充使用)。合并两次富含黄霉素的上层乙酸丁酯萃取液B为18200升。
4)洗涤：向乙酸丁酯萃取液B中加入1200升用硫酸调pH值1.5-2.0含2％的氯化钠溶液，间歇搅拌混合15分钟洗涤，静止30分钟，分层后分掉含有色素和杂质的废水层(可以和废滤液一起回收溶媒后外排)。
5)反萃取：向洗后乙酸丁酯提取液中加入无盐水18000升，搅拌下再慢慢加入20-30％的氢氧化钠溶液调节水相pH值8.0后,再间歇搅拌混合15分钟萃取，静止45分钟，分层后分出下层的富含黄霉素的水提取液C为18300升。
6)洗涤：向水提取液C中加入2000升新鲜乙酸丁酯间歇搅拌10-15分钟洗涤除杂，分层后分出下层的富含黄霉素的洗后水提液待用。剩下的上层乙酸丁酯洗涤液和上步萃余的上层乙酸丁酯有机相合并，可用于下批滤液的萃取，反复使用。
7)脱色：向上步获得的洗后水提液中加入药用732#活性炭35kg搅拌脱色1小时，打入板框压滤器滤压滤，打完料后继续打入500升无盐水顶洗活性炭，继续过滤至无洗水流出，获得脱色液D为18700升，效价8370u/mL；从滤液到脱色液收率95.79％。
8)纳滤：将脱色液D用泵打入纳滤的料液储罐，进入储罐前先通过一个100目的Y型管道过滤器过滤，开启纳滤装置进行纳滤，纳滤约24小时，收集纳滤膜截留的富含黄霉素的浓缩液4900升，效价31050u/mL，纳滤收率97.2％。
9)喷干：上述纳滤截留的4900升黄霉素浓缩液，用蒸发能力为200升/h的压力喷干塔喷雾干燥，进风温度150-165℃；出风温度65-75℃，收集获得类白色的黄霉素精品共103.8kg，效价1365u/mg.喷干收率93.13％；从发酵液到精品的总收率84.28％。
上述具体实施方式用来解释说明本发明，而不是对本发明进行限制，在本发明的精神和权利要求的保护范围内，对本发明作出的任何修改和改变，都落入本发明的保护范围。
Claims (12)
1.一种黄霉素的提取工艺，其特征在于包括以下步骤：
1)预处理：取黄霉素发酵液，碱化至pH值为8-12，过滤发酵液后收集获得富含黄霉素的滤液A；
2)溶媒萃取：向滤液A中加入破乳剂，调节至pH值为1-4，间歇搅拌萃取，静置分层，将下层水相分离获得萃取液B；
3)反萃取、洗涤：向萃取液B中加入水或氯化钠溶液搅拌混合洗涤，静置分层，除去含有色素和杂质的水层，加入等体积无盐水，调节至pH值为6-12，继续间歇搅拌12-18分钟进行反萃取，静置分层，获得富含黄霉素的水层提取液，向水层提取液中添加有机溶媒，搅拌洗涤除杂，静置分层，获得下层的富含黄霉素的水层提取液C；
4)纳滤、喷干：水层提取液C用纳滤膜纳滤截留获得富含黄霉素的浓缩液，浓缩液喷雾干燥获得白色或类白色的黄霉素。
2.根据权利要求1所述的黄霉素的提取工艺，其特征在于：所述步骤1)发酵液经碱化至pH值为8.5-9.5，采用固体氢氧化钠，或采用固体氢氧化钠配成的溶液，或采用工业液碱，或采用工业液碱配成的稀溶液。
3.根据权利要求1所述的黄霉素的提取工艺，其特征在于：向所述步骤1)中碱化后的发酵液添加助滤剂，使用板框过滤，助滤剂为硅藻土、珍珠岩、有机絮凝剂或无机絮凝剂中的一种或几种。
4.根据权利要求1所述的黄霉素的提取工艺，其特征在于：在所述步骤1)中碱化后的发酵液使用陶瓷膜过滤。
5.根据权利要求1所述的黄霉素的提取工艺，其特征在于：所述步骤2)向滤液A中加入的有机溶剂为与水混合后可分层的弱极性或非极性溶剂。
6.根据权利要求5所述的黄霉素的提取工艺，其特征在于：所述步骤2)向滤液A中加入的有机溶剂为乙酸丁酯或乙酸乙酯或两者的组合。
7.根据权利要求1所述的黄霉素的提取工艺，其特征在于：所述步骤2)和步骤3)中利用10-25％的硫酸溶液调节pH值。
8.根据权利要求1所述的黄霉素的提取工艺，其特征在于：所述步骤2)中滤液A和有机溶剂的体积比为1:0.5-2。
9.根据权利要求1所述的黄霉素的提取工艺，其特征在于：所述步骤3)向萃取液B中加入的水的pH值为2；向萃取液B中加入的氯化钠溶液的pH值为2；所述步骤3)中在pH值为7-8的条件下进行反萃取。
10.根据权利要求1所述的黄霉素的提取工艺，其特征在于：在纳滤、喷干步骤之前增加脱色，向水层提取液C中加入活性炭搅拌脱色0.8-1.5h，压滤获得脱色液。
11.根据权利要求10所述的黄霉素的提取工艺，其特征在于：所述活性炭的加入量为水层提取液C体积的0.2-0.5％。
12.根据权利要求1所述的黄霉素的提取工艺，其特征在于：所述步骤4)中利用压力式喷雾干燥塔进行喷雾干燥时，控制进风温度为150-165℃，出风温度为65-75℃。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710837706.7A CN107586310B (zh) | 2017-09-15 | 2017-09-15 | 一种黄霉素的提取工艺 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710837706.7A CN107586310B (zh) | 2017-09-15 | 2017-09-15 | 一种黄霉素的提取工艺 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107586310A CN107586310A (zh) | 2018-01-16 |
| CN107586310B true CN107586310B (zh) | 2020-04-14 |
Family
ID=61047050
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710837706.7A Active CN107586310B (zh) | 2017-09-15 | 2017-09-15 | 一种黄霉素的提取工艺 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107586310B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108168975A (zh) * | 2017-12-29 | 2018-06-15 | 浦城正大生化有限公司 | 一种含盐霉素发酵液的预处理方法和盐霉素化学效价的测定方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3660569A (en) * | 1964-09-21 | 1972-05-02 | Hoechst Ag | Process for separating moenomycin |
| US5986089A (en) * | 1997-04-17 | 1999-11-16 | Hoechst Aktiengesellschaft | Process for the preparation of moenomycin A |
| CN105037451A (zh) * | 2015-07-22 | 2015-11-11 | 西北大学 | 一种超滤处理黄霉素发酵液的方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1290853C (zh) * | 2005-03-09 | 2006-12-20 | 中牧实业股份有限公司 | 默诺霉素的纯化方法 |
-
2017
- 2017-09-15 CN CN201710837706.7A patent/CN107586310B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3660569A (en) * | 1964-09-21 | 1972-05-02 | Hoechst Ag | Process for separating moenomycin |
| US5986089A (en) * | 1997-04-17 | 1999-11-16 | Hoechst Aktiengesellschaft | Process for the preparation of moenomycin A |
| CN105037451A (zh) * | 2015-07-22 | 2015-11-11 | 西北大学 | 一种超滤处理黄霉素发酵液的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN107586310A (zh) | 2018-01-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109593034B (zh) | 一种从银杏叶提取废液中制备莽草酸的方法 | |
| CN100457765C (zh) | 水苏糖的生产方法及利用地黄生产水苏糖和梓醇的方法 | |
| WO2017211079A1 (zh) | 一种从罗汉果中提取高纯度罗汉果苷v的方法 | |
| CN101691349B (zh) | 一种从发酵液中提取色氨酸的工艺 | |
| CN108822163B (zh) | 一种d-氨基葡萄糖盐酸盐的综合循环生产方法 | |
| CN108752231B (zh) | 从甜茶中提取茶氨酸以及同时提取甜茶苷和茶多酚的方法 | |
| CN105777603B (zh) | 一种从l-羟脯氨酸发酵液中提取l-羟脯氨酸的方法 | |
| CN103923140A (zh) | 一种酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素的制备方法 | |
| CN102603478B (zh) | 从赤藓糖醇多次结晶后的母液中分离提纯赤藓糖醇的方法 | |
| CN103524327A (zh) | 一种使用电渗析法从丁二酸发酵液中提取丁二酸的方法 | |
| CN102558254B (zh) | 柳皮或柳枝的提取物及水杨苷的制备方法 | |
| CN106631852A (zh) | 一种从l‑鸟氨酸发酵液中提取l‑鸟氨酸盐酸盐的方法 | |
| CN101492408A (zh) | 一种从发酵液分离色氨酸的方法 | |
| CN103232362B (zh) | 一种l-谷氨酰胺提取的工艺 | |
| CN109553645B (zh) | 一种提取发酵溶液中低含量红霉素a的方法 | |
| CN101759580B (zh) | 一种由苏氨酸发酵液制备苏氨酸结晶的方法 | |
| CN107586310B (zh) | 一种黄霉素的提取工艺 | |
| CN103420826A (zh) | 从发酵液中提取丁二酸的方法 | |
| CN111362860B (zh) | 一种从发酵液中提取色氨酸的方法 | |
| CN106279197B (zh) | 异山梨醇反应溶液的纯化及结晶工艺 | |
| CN102391117B (zh) | 一种利用杜仲叶制备绿原酸的方法 | |
| CN102146052A (zh) | 一种制备色氨酸的方法 | |
| CN107129456B (zh) | 一种从发酵液中提取l-色氨酸的生产工艺 | |
| CN101693732B (zh) | 一种纳他霉素的提取纯化方法 | |
| CN115232002B (zh) | 全水相提取莽草酸的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CB02 | Change of applicant information | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: 310000 Room F, 9/F, Building A, Paradise Software Park, No. 3 Xidoumen Road, Xihu District, Hangzhou City, Zhejiang Province Applicant after: ZHEJIANG ZHEJIANG UNIVERSITY SUNSHINE TECHNOLOGY CO.,LTD. Applicant after: Xinjiang Zheda sunshine Biotechnology Co.,Ltd. Address before: 310012 room F, block A, block A, No. 3, Paradise Software Park, West Dou Gate Road, Xihu District, Hangzhou, Zhejiang Applicant before: ZHEJIANG ZHEJIANG UNIVERSITY SUNSHINE TECHNOLOGY Co.,Ltd. Applicant before: XINJIANG TIANFU YANGGUANG BIOLOGICAL SCIENCE & TECHNOLOGY Co.,Ltd. |
|
| CP01 | Change in the name or title of a patent holder |
Address after: 310000 Room F, 9/F, Building A, Paradise Software Park, No. 3 Xidoumen Road, Xihu District, Hangzhou City, Zhejiang Province Patentee after: ZHEJIANG ZHEJIANG UNIVERSITY SUNSHINE TECHNOLOGY Co.,Ltd. Patentee after: Xinjiang Shangni Biotechnology Co.,Ltd. Address before: 310000 Room F, 9/F, Building A, Paradise Software Park, No. 3 Xidoumen Road, Xihu District, Hangzhou City, Zhejiang Province Patentee before: ZHEJIANG ZHEJIANG UNIVERSITY SUNSHINE TECHNOLOGY Co.,Ltd. Patentee before: Xinjiang Zheda sunshine Biotechnology Co.,Ltd. |
|
| CP01 | Change in the name or title of a patent holder | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20210901 Address after: 310000 block a, 9 / F, building a, Paradise Software Park, No. 3, xidoumen Road, Xihu District, Hangzhou City, Zhejiang Province Patentee after: Hangzhou Shangni Biotechnology Co.,Ltd. Patentee after: Xinjiang Shangni Biotechnology Co.,Ltd. Address before: 310000 Room F, 9/F, Building A, Paradise Software Park, No. 3 Xidoumen Road, Xihu District, Hangzhou City, Zhejiang Province Patentee before: ZHEJIANG ZHEJIANG UNIVERSITY SUNSHINE TECHNOLOGY Co.,Ltd. Patentee before: Xinjiang Shangni Biotechnology Co.,Ltd. |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| CP01 | Change in the name or title of a patent holder |
Address after: 310000 block a, 9 / F, building a, Paradise Software Park, No. 3, xidoumen Road, Xihu District, Hangzhou City, Zhejiang Province Patentee after: Hangzhou Shangni Biotechnology Co.,Ltd. Patentee after: Xinjiang Shangni Biotechnology Co.,Ltd. Address before: 310000 block a, 9 / F, building a, Paradise Software Park, No. 3, xidoumen Road, Xihu District, Hangzhou City, Zhejiang Province Patentee before: Hangzhou Shangni Biotechnology Co.,Ltd. Patentee before: Xinjiang Shangni Biotechnology Co.,Ltd. |
|
| CP01 | Change in the name or title of a patent holder |