CN107568112A

CN107568112A - 一种通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法

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Publication number: CN107568112A
Application number: CN201710818514.1A
Authority: CN
Inventors: 廖永岩; 徐淑庆; 张艳秋; 雷娟; 李健
Original assignee: Qinzhou University
Current assignee: Qinzhou University
Priority date: 2017-09-12
Filing date: 2017-09-12
Publication date: 2018-01-12

Abstract

本发明属于可口革囊星虫养殖技术领域，公开了一种通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法，胺菊酯安全浓度为0.0048g/L；96h，0.3125g/L胺菊酯浓度组存活率100％；胺菊酯对可口革囊星虫的48h LC₅₀、60h LC₅₀、72h LC₅₀、84h LC₅₀、96h LC₅₀分别为8.459g/L、6.746g/L、3.955g/L、2.066g/L、0.048g/L。本发明旨在找出可口革囊星虫对胺菊酯农药耐受性，及胺菊酯农药对可口革囊星虫的耐受浓度，有助于提高可口革囊星虫育苗率和养殖成功率。

Description

一种通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法

技术领域

本发明属于可口革囊星虫养殖技术领域，尤其涉及一种通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法。

背景技术

可口革囊星虫(Phasolosma esculenta)，又称泥丁，是穴居于中高潮滩涂中的低等无脊椎动物，隶属于星虫动物门(Sipuncula)、革囊星虫纲(Pha-scolosomatidea)，革囊星虫目(Phascoloso-maliformes)、革囊星虫科(Phascolosomati-dae)、革囊星虫属(Phascolosoma)。多是黄棕褐色，皮肤布满深棕色乳突，体前端有一能卷缩和外翻的有伸缩性的摄食和钻穴的辅助器官-吻，吻前是口，口四周有触手。吻后是躯干部。躯干前端腹面两个开口和背面中央开口分别是肾孔和肛门。广泛分布于浙江、福建、两广和海南等沿海地区，是我国南方沿海滩涂养殖的生物品种之一。可口革囊星虫的高蛋白、低脂肪、氨基酸构成合理、活性成分丰富，能抗疲劳、抗氧化、抗菌，具滋阴降火、清肺补虚、活血强身及补肾养颜之效，可治骨蒸潮热、阴虚盗汗、肺虚喘咳、胸闷痰多以及妇女产后乳汁稀少、肺痨咳嗽、神经衰弱、小儿脾虚与肾亏而夜尿频繁等，被誉为“海洋冬虫夏草”，其成品“沙虫干”“土蒜冻”被称为“海摊香肠”等。据《中华本草》记载，是海味珍品和高级补品，是我国食用星虫的主要品种。胺菊酯是一类含有苯氧烷基的环丙烷酯中的拟除虫菊酯。是继有机磷氯后的第三代农药，因具高效、低毒、低抗性、广谱性、低残留、对光稳定等众多优点，为世界卫生组织推荐用于公共卫生的主要杀虫剂之一，也用于防治棉田、菜地、果树和茶叶上的农业害虫及渔业上杀灭寄生虫，常作水产消毒剂，如在养殖波纹巴非蛤等经济贝类和杀灭蟹类养殖的寄生虫时，用来消毒养殖池塘，但鱼类等一些水生生物缺乏水解菊酯类农药酶系统而无法水解菊酯农药，从而干扰神经传导，抑制鳃组织中Na+-K+ATPase的活力，引起病变；引起蚤类、虾、鱼类等水生生物生长迟缓，组织病变及生化反应等亚致死效应，对藻类产生慢性毒性，其具有环境持久性，因此对水生系统危害较大，造成一些经济动物的毒性影响。菊酯类农药可从地表径流或土壤淋溶等多途径进入水环境，污染水体。目前，有关可口革囊星虫的毒性研究主要是重金属污染对可口革囊星虫的毒性效应，可口革囊星虫消化道的形态及组织学结构；可口革囊星虫药效学及营养成分等。在国内外已有大量的研究是关于拟除虫菊酯类对鱼类、藻类、贝类等的毒性，但胺菊酯对可口革囊星虫的研究尚未见报道。评价有毒化学物质对水生生物的危害最为重要的依据之一是急性毒性数据。

综上所述，现有技术存在的问题是：胺菊酯对可口革囊星虫的研究尚未见报道，导致若其污染水体，有可能影响可口革囊星虫生长，降低产量。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法。

本发明是这样实现的，一种通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法，所述通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法包括：

胺菊酯安全浓度为0.0048g/L；

96h，0.3125g/L胺菊酯浓度组存活率100％；

胺菊酯对可口革囊星虫的48h LC₅₀、60h LC₅₀、72h LC₅₀、84h LC₅₀、96h LC₅₀分别为8.459g/L、6.746g/L、3.955g/L、2.066g/L、0.048g/L。

进一步，所述通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法采用胺菊酯急性毒性试验和SPSS 17.0统计分析软件中的单因素方差分析检验其差异显著性；用最小显著极差法LSR法的多重极差法进行组间多重比较；Probit浓度对数-概率单位直线回归法求出12h LC₅₀、24h LC₅₀、36h LC₅₀、48h LC₅₀、60h LC₅₀、72h LC₅₀、84h LC₅₀、96h LC₅₀。

进一步，所述通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法1.2.4计算存活率公式如下：

S：存活率；a：各养殖罐中存活的可口革囊星虫数；b是各容器中可口革囊星虫总数；

不同时间段存活时间计算公式如下：

其中，H 12、H 24、H 36、H 48、H 60、H 72、H 84、H 96分别表示12h、24h、36h、48h、60h、72h、84h、96h可口革囊星虫数存活时间，a 12、a 24、a 36、a 48、a 60、a 72、a 84、a 96分别表示可口革囊星虫数在12h、24h、36h、48h、60h、72h、84h、96h的存活个数。

进一步，所述通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法不同时间段下不同浓度的胺菊酯溶液对可口革囊星虫的毒力回归方程为：

48h y＝7.871-0.931x；

60h y＝3.5-0.519x；

72h y＝1.135-0.287x；

84h y＝0.507-0.245x；

96h y＝0.010-0.219x。

本发明的优点及积极效果为：进行96h的胺菊酯对可口革囊星虫(约重3.339g，长6.394cm)的急性毒性试验，结果发现：96h，0.3125g/L胺菊酯浓度组存活率(100％)，与0.625g/L以上浓度组与对照组(0g/L)及丙酮助溶剂对照组差异显著(P<0.05)。胺菊酯对可口革囊星虫的48h LC₅₀、60h LC₅₀、72h LC₅₀、84h LC₅₀、96h LC₅₀分别为8.459g/L、6.746g/L、3.955g/L、2.066g/L、0.048g/L，安全浓度为0.0048g/L。96h内，0.3125g/L以下胺菊酯对可口革囊星虫的存活时间影响不显著。在浓度恢复48h中，0.3125g/L以下的胺菊酯浓度及助溶剂CK恢复到0g/L对可口革囊星虫的存活率和存活时间无显著影响，且可口革囊星虫的生命体征得以修复。在急性毒性试验和浓度恢复中，可口革囊星虫生命体征有所变化。本发明旨在为胺菊酯对可口革囊星虫生态毒理学的进一步提供基础数据，找出可口革囊星虫对胺菊酯农药的耐受性，及胺菊酯农药对可口革囊星虫的耐受浓度，有助于提高可口革囊星虫育苗率和养殖成功率。

附图说明

图1是本发明实施例提供的通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法流程图。

图2是本发明实施例提供的可口革囊星虫在不同浓度的胺菊酯溶液下的存活率示意图。

图3是本发明实施例提供的胺菊酯对可口革囊星虫的LC₅₀示意图。

图4是本发明实施例提供的不同浓度的胺菊酯对可口革囊星虫存活时间的影响示意图。

图5是本发明实施例提供的胺菊酯溶液浓度恢复后对可口革囊星虫存活率的影响示意图。

图6是本发明实施例提供的胺菊酯溶液浓度恢复后对可口革囊星虫存活时间的影响示意图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

下面结合附图对本发明的应用原理作详细的描述。

如图1所示，本发明实施例提供的通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法包括以下步骤：

S101：经预试验后，根据等对数间距设置正式试验浓度，设0g/L、0.3125g/L、0.625g/L、1.25g/L、2.5g/L、5g/L共6个胺菊酯浓度梯度和一个助溶剂对照组CK；每浓度设3个平行，每平行样放10只可口革囊星虫，共计210只可口革囊星虫；

S102：采用SPSS 17.0统计分析软件中的单因素方差分析检验其差异显著性；用最小显著极差法LSR法的多重极差法进行组间多重比较，用Probit浓度对数-概率单位直线回归法求出12h LC₅₀、24h LC₅₀、36h LC₅₀、48h LC₅₀、60h LC₅₀、72h LC₅₀、84h LC₅₀、96h LC₅₀；

S103：计算存活率、不同时间段存活时间。

下面结合试验对本发明的应用原理作进一步的描述。

1材料与方法

1材料

1.1.1可口革囊星虫

从钦州东风市场购买可口革囊星虫，选取生命状态良好且体型体重相近的个体，全长约6.394cm，体重约3.339g的可口革囊星虫。于20‰海水中暂养2天。

1.1.2养殖罐及人工海水配制

用5000ppm高锰酸钾浸泡规格为13.6cm×13.6cm×19cm的3.5L养殖罐和海水桶等1h，洗净晾干。

将适量海水晶(徐闻县“海龙”牌速溶海水晶2014-A型)溶于经400目筛绢网过滤并曝氧48h的去氯自来水中，配成PH约7.78，盐度是20‰的海水、并持续打氧曝气。

1.1.3药品及助溶剂

95％胺菊酯晶体(7696-12-0，购自湖北武汉远成有限公司)、分析纯丙酮(acetone)(来自北京化工厂)、分析纯吐温80(Tween 80)购自国药集团化学试剂有限公司。

1.1.4仪器工具

试验环境及仪器等：

电子天平1个、溶氧仪1个、pH计1个、海水储蓄桶1个，氧气泵1个，电动机1个，13.6cm×13.6cm×19cm的3.5L养殖罐21个，移液管、量筒、烧杯、容量瓶、直尺、玻璃分针、网捞，保鲜膜等。

1.2方法

1.2.1药品溶解方法

因胺菊酯有很强的亲脂性，所以用吐温-80和丙酮为助溶剂将其溶解。方法：称取适量胺菊酯于烧杯中，按比例先加入吐温-80搅匀成糊状，再加入丙酮使其溶解完全，海水定容至刻度。由于丙酮的易挥发性，溶液配制后和试验中，及时用保鲜膜等密封。

1.2.2胺菊酯急性毒性试验

经预试验后，根据等对数间距设置正式试验浓度，设0g/L、0.3125g/L、0.625g/L、1.25g/L、2.5g/L、5g/L共6个胺菊酯浓度梯度和一个助溶剂对照组CK(含13.5mL吐温80和129mL丙酮，是最大胺菊酯浓度梯度中助溶剂含量，CK死亡率低于10％时，试验结果方可信)。每浓度设3个平行，每平行样放10只可口革囊星虫，共计210只可口革囊星虫。

用移液管将需要取的母液体积加入养殖罐后再加2L海水，稀释至所需浓度，将挑选好的可口革囊星虫放入养殖罐中，迅速用保鲜膜封口。及时清理死亡星虫，死亡标准参照水生生物急性毒性试验方法，无活动能力，对外界刺激无反应且放置海水不能复活的则判断为死亡。并且每12h定时记录其中毒反应、存活率、存活时间及水温、pH值等。本试验采用96h半静水试验法，每24h定时换一次试验液。试验始终在不断供氧，不投饵的条件下进行。

试验进行96h后，把各组各平行样中存活下来的可口革囊星虫分别放于海水中再进行48h的恢复试验。

1.2.3统计分析

采用SPSS 17.0统计分析软件(SPSS for Windows)中的单因素方差分析(One-wayANOVA)检验其差异显著性；用最小显著极差法LSR法(least significant ranges)的多重极差法(Duncan法)进行组间多重比较，P<0.05为差异显著；用Probit浓度对数-概率单位直线回归法求出12h LC₅₀、24h LC₅₀、36h LC₅₀、48h LC₅₀、60h LC₅₀、72h LC₅₀、84h LC₅₀、96hLC₅₀；用Excel 2010软件进行绘图。

1.2.4计算方法

存活率计算公式如下：

S：存活率；a：各养殖罐中存活的可口革囊星虫数；b是各容器中可口革囊星虫总数。

不同时间段存活时间计算公式如下：

2结果与分析

2.1不同的胺菊酯浓度溶液对可口革囊星虫的影响

不同浓度的胺菊酯溶液对可口革囊星虫的影响，包括胺菊酯对可口革囊星虫存活率和存活时间的影响。

2.1.1不同浓度的胺菊酯溶液影响可口革囊星虫存活率

不同浓度的胺菊酯溶液对可口革囊星虫的影响明显，见表1

表1在不同时间段不同浓度的胺菊酯溶液下可口革囊星虫的存活率

对表1的数据进行One-way ANOVA统计分析见图2。

由图2可见，12h、24h、36h时，各胺菊酯浓度组可口革囊星虫存活率(100％)差异不显著(P>0.05)。48h时，5g/L浓度组与其他浓度组有显著差异(F(6，14)＝7.833，P<0.05)60h时，1.25g/L以下胺菊酯浓度组可口革囊星虫存活率与空白对照组和助溶剂对照组差异不显著(P>0.05)，但2.5g/L以上胺菊酯浓度组可口革囊星虫存活率(86.67％)与空白对照组和助溶剂对照组差异显著(F(6，14)＝32.44，P<0.05)。72h时，1.25g/L以下胺菊酯浓度组可口革囊星虫存活率与空白对照组和助溶剂对照组差异不显著(P>0.05)但2.5g/L以上胺菊酯浓度组可口革囊星虫存活率(70％)与空白对照组和助溶剂对照组(F(6，14)＝120.44，P<0.05)。从试验开始至84h，空白对照和助溶剂对照组与0.3125g/L组差异不显著(P>0.05)，但0.625g/L以上胺菊酯浓度组可口革囊星虫存活率(83.33％)与对照组差异显著(F(6.14)＝116.067，P<0.05)。96h时，0.3125g/L以下浓度组存活率均为(100％)差异不显著(P>0.05)，但0.625g/L以上浓度组存活率(76.67％)与对照组差异显著(F(6，14)＝131.286，P<0.05)。5g/L浓度组可口革囊星虫全部死亡，存活率为0。这说明，96h内的短时间胺菊酯暴露时，0.3125g/L以下的胺菊酯浓度，对可口革囊星虫存活影响不显著。

2.1.2Probit分析

用Probit浓度对数-概率单位直线回归分析，处理表1的数据，得出不同浓度的胺菊酯溶液在不同时间段下的毒力回归方程，见表2。

表2不同时间段下不同浓度的胺菊酯溶液对可口革囊星虫的毒力回归方程

将表1的数据进行Probit分析后，得出胺菊酯对可口革囊星虫的LC50如图3。

从图3可见，随着染毒时间的增加，胺菊酯对可口革囊星虫LC₅₀值逐渐降低，至96h，LC₅₀为0.048g/L。则胺菊酯对可口革囊星虫的安全浓度是0.0048g/L。

2.1.3胺菊酯溶液影响可口革囊星虫的存活时间

观察不同浓度的胺菊酯溶液对可口革囊星虫的存活时间的影响，结果见表3。

表3胺菊酯不同时间段可口革囊星虫的存活时间

对表3的数据进行One-way ANOVA统计分析结果见图4。

由图4可知，从试验开始至36h，各胺菊酯浓度组对可口革囊星虫的存活时间组间差异不显著(P>0.05)，这说明，从试验开始至36h，各胺菊酯浓度组对可口革囊星虫的存活时间无显著影响。48h，5g/L胺菊酯对可口革囊星虫的存活时间具有显著影响(F(6，14)＝7.833，P<0.05)：60h，2.5g/L以上浓度组对可口革囊星虫的存活时间具有显著影响(F(6，14)＝63，P<0.05)：1.25g/L以下胺菊酯浓度组组间差异不显著(P>0.05)，但与2.5g/L以上胺菊酯浓度组组间差异显著(F(6，14)＝63，P<0.05)，这说明，60h以内，胺菊酯浓度组小于等于1.25g/L时，对可口革囊星虫的存活时间影响不显著，2.5g/L以上胺菊酯浓度对可口革囊星虫存活不利。72h，0.625g/L以上胺菊酯对可口革囊星虫的存活时间影响显著(F(6，14)＝121.248，P<0.05)：0.625g/L以下胺菊酯浓度组组间差异不显著(P>0.05)，但与0.625g/L以上胺菊酯浓度组组间差异显著(F(6，14)＝121.248，P<0.05)，这说明，72h以内，0.625g/L以下胺菊酯浓度组对可口革囊星虫的存活时间无显著影响，0.625g/L以上胺菊酯浓度不利于可口革囊星虫存活。84h，0.3125g/L以下胺菊酯浓度组组间差异不显著(P>0.05)，0.625g/L以上胺菊酯浓度组与对照组组间差异显著(F(6，14)＝177.296，P<0.05)，说明84h内，0.3125g/L以下胺菊酯浓度对可口革囊星虫的存活时间无明显影响，0.625g/L以下则不利于可口革囊星虫存活。96h，0.3125g/L以下胺菊酯浓度组组间差异不显著(P>0.05)，0.625g/L以上胺菊酯浓度组与对照组组间差异显著(F(6，14)＝143.321，P<0.05)，说明96h以内，0.3125g/L以下胺菊酯浓度对可口革囊星虫的存活时间无影响，浓度超过0.3125g/L则不利于可口革囊星虫存活。

2.2胺菊酯溶液浓度恢复后对可口革囊星虫的影响

2.2.1胺菊酯溶液浓度恢复后对可口革囊星虫存活率的影响

胺菊酯恢复后，可口革囊星虫不同时间段的存活率见表4。

表4胺菊酯溶液浓度恢复后不同时间段可口革囊星虫的存活率

对表4数据进行统计分析得图5。

从图5发现，浓度恢复12h时，0.3125g/L以下的胺菊酯浓度恢复与对照组组间无显著差异(P>0.05)，但0.625g/L以上浓度恢复与对照组有显著差异(F(6，14)＝131.286，P<0.05)，说明，恢复12h时，胺菊酯浓度0.3125g/L以下，可口革囊星虫的活力得以恢复，对其存活率不影响，但浓度在0.625g/L以上，则可口革囊星虫活力的修复受不利影响。在浓度恢复24h、36h和48h时，0.3125g/L以下浓度恢复与空白对照组组间差异不显著(P>0.05)，但与助溶剂对照组有显著影响，但0.3125g/L以上的浓度恢复与对照组组间差异显著(F(6，14)＝192.467、F(6，14)＝231.933、F(6，14)＝221.056，P<0.05)，这说明，在浓度恢复48h内，0.3125g/L以下胺菊酯浓度，可口革囊星虫的活力得以修复，其存活率不受影响，但浓度在0.625g/L以上，则对可口革囊星虫的活力修复不利。

2.2.2胺菊酯溶液浓度恢复后对可口革囊星虫存活时间的影响

胺菊酯溶液浓度恢复后，可口革囊星虫不同时间段的存活时间见表5。

表5胺菊酯溶液浓度恢复后不同时间段可口革囊星虫的存活时间

对表5的数据进行统计分析见图6。

从图6发现，在恢复开始至48h，0.3125g/L以下的胺菊酯溶液浓度恢复组组间差异不显著(P>0.05)，但0.625g/L以上的胺菊酯浓度恢复组组间差异显著(F(6，14)＝131.286、F(6，14)＝178.873、F(6，14)＝204.583、F(6，14)＝229.293，P<0.05)，说明，在恢复48h前，0.3125g/L以下的胺菊酯浓度及助溶剂对照恢复到0g/L对可口革囊星虫的存活时间影响不显著。

2.3结论

通过研究不同浓度的胺菊酯对可口革囊星虫的存活率、存活时间、恢复后对可口革囊星虫的存活率、存活时间的影响，可得：

(1)各试验胺菊酯浓度在36h内，对可口革囊星虫存活率和存活时间无显著影响；在48h时，5g/L浓度组，对可口革囊星虫存活率及存活时间均有显著影响；至60h，1.25g/L以下胺菊酯浓度组对可口革囊星虫存活率和存活时间影响不显著，但2.5g/L以上的浓度组对可口革囊星虫的存活率和存活时间影响显著；96h时，5g/L的胺菊酯浓度组全部死亡，而5g/L以下的胺菊酯浓度组在96h内未完全死亡，这说明在96h内，5g/L的胺菊酯浓度为可口革囊星虫的最低致死质量浓度。

(2)当96h毒性试验结束后，0.3125g/L的胺菊酯浓度组可口革囊星虫都没有死亡，在0.625～2.5g/L的胺菊酯浓度范围的均有可口革囊星虫存活，5g/L的胺菊酯浓度组可口革囊星虫全部死亡，这说明在96h急性毒性试验中，0.3125g/L的胺菊酯浓度是可口革囊星虫的最高安全质量浓度。

(3)试验96h，胺菊酯的安全浓度为0.0048g/L，说明，胺菊酯浓度在0.0048g/L以下为可口革囊星虫可存活的浓度。

(4)胺菊酯恢复至48h时，0.3125g/L以下的浓度对可口革囊星虫存活率和存活时间影响不显著，而0.625g/L以上的浓度对可口革囊星虫存活率和存活时间均有显著影响。

3讨论

3.1胺菊酯对可口革囊星虫的毒性

毒性试验96h后，0.3125g/L以下的胺菊酯浓度组存活率100％；0.625g/L以上浓度组与对照组有显著差异(P<0.05)。48h LC₅₀、60h LC₅₀、72h LC₅₀、84h LC₅₀、96h LC₅₀分别为8.459g/L、6.746g/L、3.955g/L、2.066g/L、0.048g/L，安全浓度为0.0048g/L，随着染毒时间的增加，LC₅₀越小。药物的LC₅₀越小，毒性越大，LC₅₀大于10.0mg/L的为低毒农药，所以认为对可口革囊星虫而言，胺菊酯是低毒药物。在本试验中还发现，需要加入大量的丙酮和吐温80等助溶剂才能使胺菊酯溶解于水中，在没有助溶剂的条件下，胺菊酯几乎不溶于水。

3.2可口革囊星虫对胺菊酯的适应性

在本试验中，较高浓度的胺菊酯对可口革囊星虫的存活率及存活时间产生显著的影响(P<0.05)，胺菊酯浓度升高，可口革囊星虫的存活率降低，存活时间短。试验证明，试验至96h时，2.5g/L胺菊酯浓度组可口革囊星虫的存活率仅33％，平均存活时间77.2h，胺菊酯浓度在5g/L时，存活率为0，存活时间最高不超过60.8h。胺菊酯浓度在0～0.3125g/L时，可口革囊星虫的存活率最高，达100％，存活时间96h以上；Probit分析得出，毒性试验进行到96h时，胺菊酯的安全浓度为0.0048g/L，说明在0.0048g/L胺菊酯浓度下为可口革囊星虫在含胺菊酯环境中的可生存的浓度。可口革囊星虫在胺菊酯浓度0.0048g/L以下的环境中能安全生存，说明可口革囊星虫对胺菊酯浓度的适应上限较大，能在较高浓度的胺菊酯条件下，有较大存活的可能性，同时说明，可口革囊星虫相对其他海洋生物而言，对胺菊酯的耐受性较大。胺菊酯对可口革囊星虫的耐受浓度较大。

3.3胺菊酯溶液浓度恢复后对可口革囊星虫的影响

胺菊酯恢复后48h期间，0.3125g/L以下的浓度对可口革囊星虫存活率及存活时间没有显著影响(P>0.05)，而0.625g/L以上供试药物浓度组对可口革囊星虫的存活率及存活时间有著影响(P<0.05)，说明在0.625g/L以上供试药物浓度组中，可口革囊星虫在胺菊酯中毒恢复后的48h内毒性仍有残留。

3.4可口革囊星虫的中毒致死反应

在试验中发现：染毒初期，可口革囊星虫吻伸出摆动，卷在一起，有的身体会卷曲收缩，肠管从肛门或吻部排出；触碰时有些会喷射出体腔液，喷出体腔液后肠管从肛门或吻部排出，身体迅速变软变瘪。随着染毒时间和浓度的增加，身体变软，吻的收缩、运动频度和身体伸缩能力渐弱。有的身体渐变瘦，体壁弹性下降；有的个体身体严重变形，身体一部分吸水膨胀，体壁弹性下降，变的薄而透明，一部分身体收缩；也有的只是变瘦，吻细长，肠外排。有的完全舒张松弛，身体伸长，吻变细，肠外排，对外界刺激不作出反应。

有时会出现昏迷假死现象，当其适应环境或放入海水中，又缓慢恢复正常的生理机能，但有的身体机能状况越来越差，不可恢复，甚至死亡，高浓度组可口革囊星虫的中毒反应较明显迅速。

而可口革囊星虫在胺菊酯中毒后身体变软，说明胺菊酯对可口革囊星虫的毒性影响可能是使其身体变软，体壁弹性下降，身体膨胀或缩小等变形，吻伸出变长，未死时，会对外界刺激做出反应，有可能昏迷假死，肠从肛门或吻部排出。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法，其特征在于，所述通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法包括：

胺菊酯安全浓度为0.0048g/L；

96h，0.3125g/L胺菊酯浓度组存活率100％；

胺菊酯对可口革囊星虫的48h LC₅₀、60h LC₅₀、72h LC₅₀、84h LC₅₀、96hLC₅₀分别为8.459g/L、6.746g/L、3.955g/L、2.066g/L、0.048g/L。

2.如权利要求1所述的通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法，其特征在于，所述通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法采用胺菊酯急性毒性试验和SPSS 17.0统计分析软件中的单因素方差分析检验其差异显著性；用最小显著极差法LSR法的多重极差法进行组间多重比较；Probit浓度对数-概率单位直线回归法求出12h LC₅₀、24h LC₅₀、36h LC₅₀、48h LC₅₀、60h LC₅₀、72h LC₅₀、84h LC₅₀、96h LC₅₀。

3.如权利要求1所述的通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法，其特征在于，所述通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法1.2.4计算存活率公式如下：

不同时间段存活时间计算公式如下：

4.如权利要求1所述的通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法，其特征在于，所述通过控制胺菊酯浓度提高可口革囊星虫存活率的方法不同时间段下不同浓度的胺菊酯溶液对可口革囊星虫的毒力回归方程为：

48h y＝7.871-0.931x；

60h y＝3.5-0.519x；

72h y＝1.135-0.287x；

84h y＝0.507-0.245x；

96h y＝0.010-0.219x。