CN107525791B - 甲巯咪唑的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供的甲巯咪唑的检测方法,将甲巯咪唑与第一AuNPs溶液混合得到混合溶液,用紫外光照射所述混合溶液与第一荧光N/S‑CQDs溶液混合形成的第一混合溶液,以获取所述第一混合溶液的荧光光谱图,用紫外光照射第二AuNPs溶液与第二荧光N/S‑CQDs溶液混合形成的第二混合溶液,以获取所述第二混合溶液的荧光光谱图,再根据所述第一混合溶液的荧光光谱图及所述第二混合溶液的荧光光谱图获取所述甲巯咪唑的含量,本发明提供的甲巯咪唑的检测方法,以荧光N/S‑CQDs为能量供体,以AuNPs为能量受体,构建复合荧光探针,并通过复合荧光探针检测甲巯咪唑,相对于高效液相色谱法、流动注射分光光度法等,成本低廉,操作简便。
Description
技术领域
本发明涉及生物检测技术领域,特别涉及一种甲巯咪唑的检测方法。
背景技术
甲巯咪唑是一种抗甲状腺的药物,它能够减少甲状腺激素的合成,使免疫紊乱得到缓解,但是过量服用甲巯咪唑,会引起粒细胞减少、内脏功能受损等一系列疾病;甲巯咪唑常被非法用于动物饲养,增产增重,增加肉产量,谋取经济利益,通过这种手段,甲巯咪唑就会进入食物链,对人类的生命健康构成重大危害。因此,对于甲巯咪唑的检测尤为重要。
目前测定甲巯咪唑含量的方法有分光光度法、超临界流体色谱法、化学发光法、高效气液相色谱法等几种常见的方法。但是这些方法也有一些固有的缺点,如花费高、操作复杂等,因而限制了它们在检测领域的广泛使用。
发明内容
基于此,有必要提供一种成本低廉,操作简便的甲巯咪唑的检测方法。
为实现上述目的,本发明采用下述技术方案:
本发明提供的一种甲巯咪唑的检测方法,包括如下步骤:
将甲巯咪唑与第一AuNPs溶液混合得到混合溶液;
用紫外光照射所述混合溶液与第一荧光N/S-CQDs溶液混合形成的第一混合溶液,以获取所述第一混合溶液的荧光光谱图;
用紫外光照射第二AuNPs溶液与第二荧光N/S-CQDs溶液混合形成的第二混合溶液,以获取所述第二混合溶液的荧光光谱图;其中,所述第一AuNPs溶液与所述第二AuNPs溶液的浓度相同,所述第一荧光N/S-CQDs溶液与所述第二荧光N/S-CQDs溶液的浓度相同;及
根据所述第一混合溶液的荧光光谱图及所述第二混合溶液的荧光光谱图获取所述甲巯咪唑的含量。
在其中一些较佳实施例中,所述第一AuNPs溶液或所述第二AuNPs溶液通过下述方法制备而成:
将浓硝酸、浓盐酸、氯金酸、柠檬酸三钠及蒸馏水混合得到所述第一AuNPs溶液或所述第二AuNPs溶液。
在其中一些较佳实施例中,所述氯金酸、柠檬酸三钠及蒸馏水的体积百分比为1:2:99。
在其中一些较佳实施例中,所述浓硝酸的质量百分数为98%、所述浓盐酸的质量百分数为38%、所述柠檬酸三钠的质量百分数为98%。
在其中一些较佳实施例中,所述第一AuNPs溶液或第二AuNPs溶液的金纳米颗粒的大小为16.1±2.0nm。
在其中一些较佳实施例中,所述第一荧光N/S-CQDs溶液或所述第二荧光N/S-CQDs溶液通过下述方法制备而成,
将柠檬酸、谷胱甘肽、甲基硅油及蒸馏水通过微波辅助油浴法合成,得到所述第一荧光N/S-CQDs溶液或所述第二荧光N/S-CQDs溶液。
在其中一些较佳实施例中,所述柠檬酸、谷胱甘肽、蒸馏水的的质量百分比为10:1:200。
在其中一些较佳实施例中,所述第一荧光N/S-CQDs溶液或所述第二荧光N/S-CQDs溶液的量子产率为76.5%。
在其中一些较佳实施例中,所述紫外光由UV分光光度计提供。
本发明采用上述技术方案,其有益效果如下:
本发明提供的甲巯咪唑的检测方法,将甲巯咪唑与第一AuNPs溶液混合得到混合溶液,用紫外光照射所述混合溶液与第一荧光N/S-CQDs溶液混合形成的第一混合溶液,以获取所述第一混合溶液的荧光光谱图,用紫外光照射第二AuNPs溶液与第二荧光N/S-CQDs溶液混合形成的第二混合溶液,以获取所述第二混合溶液的荧光光谱图,再根据所述第一混合溶液的荧光光谱图及所述第二混合溶液的荧光光谱图获取所述甲巯咪唑的含量,本发明提供的甲巯咪唑的检测方法,以荧光N/S-CQDs为能量供体,以AuNPs为能量受体,构建复合荧光探针,并通过复合荧光探针检测甲巯咪唑,相对于高效液相色谱法、流动注射分光光度法等,成本低廉,操作简便。
附图说明
图1为一实施方式的甲巯咪唑的检测方法的流程图;
图2为本发明提供的基于FRET效应检测甲巯咪唑的实验原理图;
图3为本发明一实施例提供的AuNPs的浓度对FRET的影响示意图。
具体实施方式
为了便于理解本发明,下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。附图中给出了本发明的较佳的实施例。但是,本发明可以以许多不同的形式来实现,并不限于本文所描述的实施例。相反地,提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义,本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的,不是旨在于限制本发明。
如图1所示,一实施方式的甲巯咪唑的检测方法,包括如下步骤:
步骤S110:将甲巯咪唑与第一AuNPs溶液混合得到混合溶液。
步骤S120:用紫外光照射所述混合溶液与第一荧光N/S-CQDs溶液混合形成的第一混合溶液,以获取所述第一混合溶液的荧光光谱图;
在一些较佳的实施例中,所述第一AuNPs溶液通过下述方法制备而成:
将浓硝酸、浓盐酸、氯金酸、柠檬酸三钠及蒸馏水混合得到所述第一AuNPs溶液或所述第二AuNPs溶液,且所述第一AuNPs溶液金纳米颗粒的大小为16.1±2.0nm。
进一步地,所述氯金酸、柠檬酸三钠及蒸馏水的体积百分比为1:2:99。
更进一步地,所述浓硝酸的质量百分数为98%、所述浓盐酸的质量百分数为38%、所述柠檬酸三钠的质量百分数为98%。
可以理解,本发明上述实施例中提供制备第一AuNPs溶液的原料来源广泛,制备过程简单,成本低廉。
在一些较佳的实施例中,所述第一荧光N/S-CQDs溶液通过下述方法制备而成:
将柠檬酸、谷胱甘肽、甲基硅油及蒸馏水通过微波辅助油浴法合成,得到所述第一荧光N/S-CQDs溶液,所述第一荧光N/S-CQDs溶液的量子产率为76.5%。
进一步地,所述柠檬酸、谷胱甘肽及蒸馏水的的质量比为10:1:200。可以理解,甲基硅油在微波辅助油浴法加热上述液体。
可以理解,本发明上述实施例中提供制备第一荧光N/S-CQDs溶液的原料来源广泛,制备过程简单,成本低廉。
步骤S130:用紫外光照射第二AuNPs溶液与第二荧光N/S-CQDs溶液混合形成的第二混合溶液,以获取所述第二混合溶液的荧光光谱图;其中,所述第一AuNPs溶液与所述第二AuNPs溶液的浓度相同,所述第一荧光N/S-CQDs溶液与所述第二荧光N/S-CQDs溶液的浓度相同。
可以理解,本发明提供的第二AuNPs溶液、及第二荧光N/S-CQDs溶液的其制备方法与第一AuNPs溶液和第一荧光N/S-CQDs溶液相同。
可以理解,由于N/S-CQDs具有优异的抗光漂白性能,在激发光下持续照射30min,其荧光强度基本保持不变,N/S-CQDs的荧光强度在酸性和中性环境中几乎不随pH值的变化而改变,在碱性环境中荧光强度有稍许提高;此外,荧光N/S-CQDs还具有很好的耐盐性。因此,本发明以荧光N/S-CQDs为能量供体,具有重要的意义。
步骤S140:根据所述第一混合溶液的荧光光谱图及所述第二混合溶液的荧光光谱图获取所述甲巯咪唑的含量。
可以理解,荧光共振能量转移(resonance energy transfer,FRET)的产生需要具备两个条件:一是能量供体的激发光谱和能量受体的激发光谱要充分的分开;二是为了使能量共振转移更加容易发生,要求能量受体的的吸收光谱要尽可能与供体的发射光谱产生交叠。本发明作为能量供体的荧光N/S-CQDs的发射光谱较宽,发射峰在421nm左右,而AuNPs的吸收峰在522nm,吸收光谱范围较大,增大了与能量供体的发射谱重叠的范围。可见N/S-CQDs和AuNPs之间满足荧光共振能量转移的两个条件。
当AuNPs加入到荧光N/S-CQDs的溶液中,基于FRET效应,N/S-CQDs的荧光被淬灭。若先将甲巯咪唑加入到AuNPs溶液中,甲巯咪唑会在AuNPs表面与其结合,从而阻碍了N/S-CQDs与AuNPs的相互作用,由此导致N/S-CQDs荧光强度的提高,从而可以实现对甲巯咪唑的检测,请参阅图2,为本发明提供的基于FRET效应检测甲巯咪唑的实验原理图。
请参阅图3,为本发明一实施例提供的AuNPs的浓度对FRET的影响示意图。
从图3中可以看出,固定荧光N/S-CQDs(0.114mg/ml)和待测物甲巯咪唑的浓度(100μM),改变AuNPs的浓度。定义(F-F0)/F0为荧光转移效率,并以此为纵坐标,以AuNPs的浓度为横坐标,(其中F和F0表示在不同的AuNPs浓度下,存在或不存在甲巯咪唑时的荧光强度)。
由图3可知,(F-F0)/F0随着AuNPs浓度的升高而不断升高,当AuNPs的浓度为0.146nM时强度达到最大。超过这个值,荧光转移效率下降。这是因为过量的AuNPs不能被待测物甲巯咪唑包覆,那么荧光N/S-CQDs则有更多的机会和AuNPs交联,造成荧光淬灭。根据以上的分析可知,对于浓度为0.114mg/ml的N/S-CQDs来说,最适宜的AuNPs的浓度是0.146nM。
本发明提供的甲巯咪唑的检测方法,将甲巯咪唑与第一AuNPs溶液混合得到混合溶液,用紫外光照射所述混合溶液与第一荧光N/S-CQDs溶液混合形成的第一混合溶液,以获取所述第一混合溶液的荧光光谱图,用紫外光照射第二AuNPs溶液与第二荧光N/S-CQDs溶液混合形成的第二混合溶液,以获取所述第二混合溶液的荧光光谱图,再根据所述第一混合溶液的荧光光谱图及所述第二混合溶液的荧光光谱图获取所述甲巯咪唑的含量,本发明提供的甲巯咪唑的检测方法,以荧光N/S-CQDs为能量供体,以AuNPs为能量受体,构建复合荧光探针,并通过复合荧光探针检测甲巯咪唑,相对于高效液相色谱法、流动注射分光光度法等,成本低廉,操作简便。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合,为使描述简洁,未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述,然而,只要这些技术特征的组合不存在矛盾,都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (9)
1.一种甲巯咪唑的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
将甲巯咪唑与第一AuNPs溶液混合得到混合溶液;
用紫外光照射所述混合溶液与第一荧光N/S-CQDs溶液混合形成的第一混合溶液,以获取所述第一混合溶液的荧光光谱图;
用紫外光照射第二AuNPs溶液与第二荧光N/S-CQDs溶液混合形成的第二混合溶液,以获取所述第二混合溶液的荧光光谱图;其中,所述第一AuNPs溶液与所述第二AuNPs溶液的浓度相同,所述第一荧光N/S-CQDs溶液与所述第二荧光N/S-CQDs溶液的浓度相同;及
根据所述第一混合溶液的荧光光谱图及所述第二混合溶液的荧光光谱图获取所述甲巯咪唑的含量。
2.根据权利要求1所述的甲巯咪唑的检测方法,其特征在于,所述第一AuNPs溶液或所述第二AuNPs溶液通过下述方法制备而成:
将浓硝酸、浓盐酸、氯金酸、柠檬酸三钠及蒸馏水混合得到所述第一AuNPs溶液或所述第二AuNPs溶液。
3.根据权利要求2所述的甲巯咪唑的检测方法,其特征在于,所述氯金酸、柠檬酸三钠及蒸馏水的体积百分比为1:2:99。
4.根据权利要求2所述的甲巯咪唑的检测方法,其特征在于,所述浓硝酸的质量百分数为98%、所述浓盐酸的质量百分数为38%、所述柠檬酸三钠的质量百分数为98%。
5.根据权利要求2所述的甲巯咪唑的检测方法,其特征在于,所述第一AuNPs溶液或第二AuNPs溶液的金纳米颗粒的大小为16.1±2.0nm。
6.根据权利要求1所述的甲巯咪唑的检测方法,其特征在于,所述第一荧光N/S-CQDs溶液或所述第二荧光N/S-CQDs溶液通过下述方法制备而成,
将柠檬酸、谷胱甘肽、甲基硅油及蒸馏水通过微波辅助油浴法合成,得到所述第一荧光N/S-CQDs溶液或所述第二荧光N/S-CQDs溶液。
7.根据权利要求6所述的甲巯咪唑的检测方法,其特征在于,所述柠檬酸、谷胱甘肽、及蒸馏水的的质量比为10:1:200。
8.根据权利要求6所述的甲巯咪唑的检测方法,其特征在于,所述第一荧光N/S-CQDs溶液或所述第二荧光N/S-CQDs溶液的量子产率为76.5%。
9.根据权利要求1所述的甲巯咪唑的检测方法,其特征在于,所述紫外光由UV分光光度计提供。
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