CN107502583A

CN107502583A - 一种组合光合菌菌剂及其制备方法

Info

Publication number: CN107502583A
Application number: CN201710944019.5A
Authority: CN
Inventors: 杨建设; 胡志军; 杨海澎; 李少杰; 符云鹏; 宋林森; 张龙雨; 符新妍
Original assignee: Hebi Runtitan Biological Technology Co Ltd
Current assignee: Hebi Runtitan Biological Technology Co Ltd
Priority date: 2017-10-12
Filing date: 2017-10-12
Publication date: 2017-12-22

Abstract

本发明公开一种组合光合菌菌剂及其制备方法，涉及光合菌培养技术领域，包括以下步骤：A，制取培养基，然后将培养基投入液体发酵罐中，并进行灭菌处理；B，待A步骤所得的液体发酵罐中的温度下降至30‑35℃后，接种组合菌种，保持温度30‑35℃；C，将B步骤所得的液体发酵罐置于暗光环境，同时通入氧气，持续6‑8h，期间控制温度为30‑35℃；D，将C步骤所得的液体发酵罐置于光照环境，停止通入氧气，培养3‑7d，期间控制温度为30‑35℃，至菌剂呈紫红色，既得组合光合菌菌剂，菌种生命力强、菌液含菌量高、能够防治烟草气候性斑点病害。

Description

一种组合光合菌菌剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及光合菌培养技术领域，尤其涉及一种用于提升作物光合作用的组合光合菌菌剂及其制备方法。

背景技术

光合菌(简称PSB)是地球上出现最早、自然界中普遍存在、具有原始光能合成体系的原核生物，是在厌氧条件下进行不放氧光合作用的菌类的总称，是一类没有形成芽孢能力的革兰氏阴性菌，是一类以光作为能源、能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然界中的有机物、硫化物、氨等作为供氢体兼碳源进行光合作用的微生物。光合菌广泛分布于自然界的土壤、水田、沼泽、湖泊、江海等处，主要分布于水生环境中光线能透射到的缺氧区。

现有的光合菌主要包括蓝色细菌和紫色细菌，在培养的过程中多为单独培养，单独培养的光合菌菌液含菌量低，但在使用时效果不理想。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种细菌生命力强、菌液含菌量高的组合光合菌菌剂及其制备方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：一种组合光合菌菌剂的制备方法，包括以下步骤：

A，制取培养基，然后将培养基投入液体发酵罐中，并进行灭菌处理，；

B，待A步骤所得的液体发酵罐中的温度下降至30-35℃后，接种组合菌种，保持温度30-35℃；

C，将B步骤所得的液体发酵罐置于暗光环境，同时通入氧气，持续6-8h，期间控制温度为30-35℃；

D，将C步骤所得的液体发酵罐置于光照环境，停止通入氧气，培养3-7d，期间控制温度为30-35℃，至菌剂呈紫红色，既得组合光合菌菌剂，

其中组合菌种由荚膜光合菌、耐氨光合菌、红假单胞光合菌组成，

所述培养基由以下重量百分比的原料制成：乙酸钠0.3-0.35wt%、酵母膏0.1-0.12wt%、红糖0.1-0.12wt%、氯化铵0.08-0.1 wt%、磷酸二氢钾0.02-0.04wt%、氯化镁0.001-0.002 wt%、氯化钙0.001-0.0015wt%、硫酸镁0.02-0.03 wt%、氯化钠0.1-0.15 wt%、碳酸氢钠0.08-0.1 wt%、氢氧化钠0.01-0.02 wt%、土豆黄豆芽水煮滤液10 wt%，余量为水。

进一步地，所述培养基由以下重量百分比的原料制成：乙酸钠0.35wt%、酵母膏0.1wt%、红糖0.1 wt%、氯化铵0.1 wt%、磷酸二氢钾0.04wt%、氯化镁0.001 wt%、氯化钙0.001wt%、硫酸镁0.02 wt%、氯化钠0.1 wt%、碳酸氢钠0.1 wt%、氢氧化钠0.01 wt%、土豆黄豆芽水煮滤液10 wt%，余量为水。

进一步地，所述组合菌种各组分的含量百分比为：荚膜光合菌35-40%、耐氨光合菌30-35%红假单胞光合菌30-35%。

进一步地，所述组合菌种各组分的含量百分比为：荚膜光合菌40%、耐氨光合菌30%、红假单胞光合菌30%。

进一步地，所述暗光环境的光照度低于100Lx，所述光照环境的光照度为4000-5000Lx。

进一步地，所述土豆黄豆芽水煮滤液的制备方法如下：

第一步，按重量比6-7：3称取土豆和黄豆芽，加水加热；

第二步，至水沸腾30-40分钟后冷却至30-35℃，过滤，取滤液，既得土豆黄豆芽水煮滤液。

本发明的有益效果在于：本发明所得的组合光合菌菌剂菌液含菌量高；三种光合菌为兼性光能有机异氧型，通过暗光和光照两个步骤，既能得到高浓度的菌体，含菌量为200亿/ml以上，也能得到较多的细菌叶绿素和胡萝卜素；增加土豆黄豆芽水煮滤液，含有大量的淀粉、蛋白质、维生素，为菌种的生长增值提供营养。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明的技术方案进行说明。

以下各实施例中，红假单胞光合菌呈螺旋状，鞭毛为极生，二等分裂的方式进行增殖，适宜在低盐度的环境中生存，也适合Ph值稍低，偏酸的土壤中营生；耐氨光合菌呈卵球状，鞭毛为周生，出牙生殖的方式进行增殖，适宜在广盐性环境中生存，在离子失调、水型复杂、盐碱土壤中营生；荚膜光合菌呈柱状或卵球型，鞭毛为根生，二等分裂或出牙生殖的方式进行增殖，适宜在高盐度的环境中生存，也适合盐碱地、高碳酸盐土壤中营生。

实施例1

一种组合光合菌菌剂的制备方法，包括以下步骤：

A，制取培养基，将配置好的培养基投入液体发酵罐中，进行高压灭菌处理，并向液体发酵罐中滴入微量元素营养液，微量元素营养液与培养基的重量比为1:10000；

B，待A步骤所得的液体发酵罐中的温度下降至35℃后，接种组合菌种，保持温度35℃；

C，将B步骤所得的液体发酵罐置于暗光环境，同时通入氧气，持续8h，期间控制温度为30℃；

D，将C步骤所得的液体发酵罐置于光照环境，停止通入氧气，培养3-7d，期间控制温度为30℃，至菌剂呈紫红色，既得组合光合菌菌剂，

其中组合菌种由荚膜光合菌、耐氨光合菌、红假单胞光合菌组成，各组分的含量百分比为：荚膜光合菌35%、耐氨光合菌35%、红假单胞光合菌30%

培养基由以下重量百分比的原料制成：乙酸钠0.3wt%、酵母膏0.1 wt%、红糖0.12wt%、氯化铵0.08 wt%、磷酸二氢钾0.04wt%、氯化镁0.001 wt%、氯化钙0.0015wt%、硫酸镁0.02wt%、氯化钠0.1 wt%、碳酸氢钠0.1 wt%、氢氧化钠0.01wt%、土豆黄豆芽水煮滤液10 wt%，余量为水。

其中土豆黄豆芽水煮滤液的制备方法如下：

第一步，按重量比2：1称取土豆和黄豆芽，加水加热；

第二步，至水沸腾30min后冷却至30℃，过滤，取滤液，既得土豆黄豆芽水煮滤液。

其中暗光环境的光照度低于100Lx，光照环境的光照度为4000Lx。

实施例2

一种组合光合菌菌剂的制备方法，包括以下步骤：

A，制取培养基，将配置好的培养基投入液体发酵罐中，进行高压灭菌处理，并向液体发酵罐中滴入微量元素营养液，微量元素营养液与培养基的重量比为2:10000；

B，待A步骤所得的液体发酵罐中的温度下降至30℃后，接种组合菌种，加热并保持温度35℃；

C，将B步骤所得的液体发酵罐置于暗光环境，同时通入氧气，持续6h，期间控制温度为35℃；

D，将C步骤所得的液体发酵罐置于光照环境，停止通入氧气，培养3-7d，期间控制温度为35℃，至菌剂呈紫红色，既得组合光合菌菌剂，

其中组合菌种由荚膜光合菌、耐氨光合菌、红假单胞光合菌组成，各组分的含量百分比为：荚膜光合菌40%、耐氨光合菌30%、红假单胞光合菌30%

培养基由以下重量百分比的原料制成：乙酸钠0.35wt%、酵母膏0.12 wt%、红糖0.1wt%、氯化铵0.1 wt%、磷酸二氢钾0.02wt%、氯化镁0.002 wt%、氯化钙0.001wt%、硫酸镁0.03wt%、氯化钠0.15 wt%、碳酸氢钠0.08wt%、氢氧化钠0.01wt%、土豆黄豆芽水煮滤液10 wt%，余量为水。

其中土豆黄豆芽水煮滤液的制备方法如下：

第一步，按重量比7：3称取土豆和黄豆芽，加水加热；

第二步，至水沸腾40min后冷却至30℃，过滤，取滤液，既得土豆黄豆芽水煮滤液。

其中暗光环境的光照度低于100Lx，光照环境的光照度为5000Lx。

实施例1-2所得的组合光合菌菌剂使用方法如下：

步骤1，浸种，将烟草种子投入600倍稀释的组合光合菌菌剂中，浸泡6h，取出，阴干、播种；

步骤2，喷施，将组合光合菌菌剂800倍稀释，制成喷雾，在烟草生育期内喷洒2-3次，能够防治烟草气候性斑点病害。

本发明利用光合菌在光照、厌氧条件下进行光合作用，属于光能异养型，为紫色的细菌；而在黑暗有氧条件下也可以CO2及H2S作电子受体或利用有机化合物为碳源，营化能自养或化能异养，但是无色细菌。利用光合菌在黑暗有氧条件利用有机化合物的条件，让它们在液体发酵罐培养6-8小时，大量增殖，然后转入厌氧、光照环境（光照度4000LX）,培养3-7天，变为紫色细菌，即为复合光合菌，同时活菌平板计数达到100亿/ml以上。

通过本发方法得到的组合光合菌菌剂，能够降解虫菊酯类农药，从而降低土壤和植株的农药残留量，刺激植株自行分泌氨基乙酰丙酸物质，刺激植物根际生长，增强植株的光合作用，促进植株对营养物质的吸收，可生成氨基酸和核苷酸等各种副产物，分泌至土壤中能为植物根系吸收利用，同时可降低作物中的硝酸盐含量，提高Vc和总糖含量，改善作物品质，使用后，土壤中的优势种群优势地位，还能促进土壤固氮菌、放线菌等益生菌的增值，改善土壤N、P、有机质等营养条件和理化性质，使团粒结构变得良好，同时还可富集P，固定碳素。

Claims

1.一种组合光合菌菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种组合光合菌菌剂的制备方法，其特征在于，所述培养基由以下重量百分比的原料制成：乙酸钠0.35wt%、酵母膏0.1 wt%、红糖0.1 wt%、氯化铵0.1wt%、磷酸二氢钾0.04wt%、氯化镁0.001 wt%、氯化钙0.001 wt%、硫酸镁0.02 wt%、氯化钠0.1 wt%、碳酸氢钠0.1 wt%、氢氧化钠0.01 wt%、土豆黄豆芽水煮滤液10 wt%，余量为水。

3.根据权利要求1所述的一种组合光合菌菌剂的制备方法，其特征在于，所述组合菌种各组分的含量百分比为：荚膜光合菌35-40%、耐氨光合菌30-35%、红假单胞光合菌30-35%。

4.根据权利要求3所述的一种组合光合菌菌剂的制备方法，其特征在于，所述组合菌种各组分的含量百分比为：荚膜光合菌40%、耐氨光合菌30%红假单胞光合菌30%。

5.根据权利要求1所述的一种组合光合菌菌剂的制备方法，其特征在于，所述暗光环境的光照度低于100Lx，所述光照环境的光照度为4000-5000Lx。

6.根据权利要求1所述的一种组合光合菌菌剂的制备方法，其特征在于，所述土豆黄豆芽水煮滤液的制备方法如下：

第一步，按重量比6-7：3称取土豆和黄豆芽，加水加热；

第二步，至水沸腾30-40min后冷却至30℃，过滤，取滤液，既得土豆黄豆芽水煮滤液。