CN107404903A - 使用鲜肉或冻肉改善动物诸如狗的食品效率的方法和组合物 - Google Patents

使用鲜肉或冻肉改善动物诸如狗的食品效率的方法和组合物 Download PDF

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Abstract

本发明公开了改善氨基酸和脂肪酸可用性的方法和组合物，例如通过实现限制性氨基酸诸如精氨酸和赖氨酸以及必需脂肪酸诸如亚油酸的更好的血液富集来改善氨基酸和脂肪酸可用性。当宠物食品中的炼制肉粉被替代为新鲜肉浆或冷冻肉浆时观察到更高的脂肪消化率。浆料能够通过对鲜肉或冻肉进行粉碎、用直接蒸汽喷射进行烹饪以增加所述肉的水分并且乳化所述喷射蒸汽的肉来制备；并且所述浆料能够被添加至预处理器中的干混物中，所述干混物包含肉粉、谷物、植物蛋白质、纤维、维生素、矿物质或脂肪中的一种或多种。通过将所述浆料添加至所述干混物中而形成的混合物能够被挤出烹饪、切割成片并且干燥以形成干燥宠物食品粗磨食物。

Description

使用鲜肉或冻肉改善动物诸如狗的食品效率的方法和组合物
相关申请的交叉引用
本申请要求提交于2015年3月23日的美国临时申请No.62/136,701的优先权，该美国临时申请的公开内容以引用方式并入本文。
背景技术
本公开整体涉及宠物食品产品以及用于制备宠物食品产品的方法。更具体地，本公开涉及改善氨基酸和脂肪酸的可用性的方法和组合物。
需要膳食蛋白质来提供必需氨基酸和氮以合成非必需氨基酸、内源性蛋白质、其它含氮化合物，并且还需要膳食蛋白质来提供能量。合适水平的高质量蛋白质对于犬科动物的健康必不可少：增强肌肉，并且帮助维持瘦体重，获得健康皮肤和皮毛，支持免疫系统和所有重要器官功能。
在妊娠期和哺乳期，雌狗的营养和能量需求大大增加。事实上，雌狗在哺乳期间的能量需求高于其生命中的任何其它时间。哺乳期内通常体重减少，并且雌狗的体况评分可能下降几个点。为满足增加的营养物质和能量需求，建议采用高质量饮食。
动物肉和动物副产品诸如生羊肉、碎牛肉或鸡肉粉是宠物食品制造商常用的蛋白质源，因为它们具有高消化率和适口性。在宠物食品行业中，通常通过挤出加工利用干燥或干化的成分来生产干燥宠物食品。通过共混、加热和干燥方法炼制生动物肉、骨和副产物以制备干燥的富含蛋白质的粗粉。
与这些炼制粉相比，将生动物副产品添加到宠物食品配方中在可加工性方面增加了复杂性和成本。例如，家禽副产物粉由供应商以干燥材料的形式提供，并且可直接掺入到干混物中，该干混物被挤出以形成宠物食品。相比之下，烹饪生鸡胴体对于宠物食品制造商来说耗费时间与空间。因此，用生动物蛋白质源生产宠物食品比不用此类成分生产宠物食品更昂贵，因此市售宠物食品通常基于炼制粉作为蛋白质源。
发明内容
本公开涉及用于改善氨基酸和脂肪酸可用性的方法和组合物，该方法和组合物导致限制性氨基酸诸如精氨酸和赖氨酸以及必需脂肪酸诸如亚油酸的血液富集更好。本发明人出乎意料地发现，当宠物食品中的炼制肉粉被替代为新鲜肉浆或冷冻肉浆时获得了更高的脂肪消化率。据本发明人所知，该效应在先前的出版物中未见报道。当食品中的炼制肉粉被替代为最多20％的新鲜肉浆或冷冻肉浆时，观察到小狗的生长速率更快并且成年犬的体重保持更好。
如本文所示的实验证据所详述，本发明人能够在喂食试验期间测得以下健康益处：(i)暴露于极低温度时，喂食包含20％肉浆的产品或包含14％肉浆的产品的狗相对于喂食具有相同的总蛋白质但不含肉浆的产品的狗具有更好的体重保持的趋势；(ii)喂食包含14％肉浆的小狗饮食与喂食具有相同的总蛋白质但不含肉浆的小狗饮食相比，妊娠期和哺乳期雌狗获得了更好的体重保持；(iii)喂食14％肉浆饮食与喂食具有相同的总蛋白质但其内不含肉浆的饮食相比，雌狗的哺乳期小狗的生长速率更快；(iv)喂食14％肉浆饮食与喂食具有相同的总蛋白质但其内不含肉浆的饮食相比，雌狗的乳蛋白含量更高；(v)喂食其中包含14％肉浆的饮食的雌狗的必需氨基酸及非必需氨基酸在乳汁内的富集程度更高；并且(vi)在提升高乳质方面的饮食效率更高，体现在相比于14％肉浆饮食中饮食必需氨基酸的含量，乳汁中包含更高水平的必需氨基酸。不受理论的约束，本发明人认为这些效应是由于用肉浆配制的饮食中的必需氨基酸和必需脂肪酸的可用性更高。
因此，在一般实施方案中，提供了生产食品组合物的方法。该方法包括：由鲜肉或冻肉形成肉浆；将肉浆添加至成分的干混物中以形成混合物，其中肉浆占该混合物的约14％至约30％；对该混合物进行挤出烹饪以形成挤出物；并且加工该挤出物以形成食品组合物。
在实施方案中，肉浆的形成包括对鲜肉或冻肉进行粉碎并且用直接蒸汽喷射在约71℃或更低温度下烹饪粉碎的鲜肉或冻肉。肉浆的形成可包括乳化喷射蒸汽的肉。
在实施方案中，混合物包含约18％至约30％的蛋白质。
在实施方案中，干混物包含全谷物。
在实施方案中，干混物包含纤维。
在实施方案中，在预处理器中将肉浆添加至成分的干混物中，并且将混合物从预处理器给料至执行挤出烹饪的挤出机。挤出烹饪可在挤出机中于105℃至130℃的温度、250psi至500psi的压力下执行小于40秒的时间段。
在实施方案中，挤出物的加工包括将挤出物切割成片并且干燥这些片。干燥片可将片的含水量减少至约6％至约9％的水分。挤出物的加工包括用动物脂肪或动物消化物中的至少一者涂覆干燥的片。
在另一个实施方案中，本公开提供了干燥宠物食品组合物。该组合物包含约14％至约30％的并非肉粉的肉。
在实施方案中，干燥宠物食品组合物具有约18％至约30％的蛋白质含量。蛋白质含量可完全由肉浆和选自植物蛋白质、肉粉以及它们的组合的蛋白质源提供。
在实施方案中，并非肉粉的肉通过由包括下列步骤的方法制备干燥宠物食品组合物来提供：对鲜肉或冻肉进行粉碎，用直接蒸汽喷射烹饪粉碎的鲜肉或冻肉，乳化喷射蒸汽的肉以形成浆料，并且将浆料添加至一种或多种其它成分中。
在另一个实施方案中，本公开提供了相对于初始干燥宠物食品配制物而言改善必需脂肪酸或必需氨基酸中的至少一者的生物利用率的方法，初始干燥宠物食品配制物包含肉粉，该肉粉提供了初始干燥宠物食品配制物的至少一部分蛋白质含量。该方法包括：调整初始干燥宠物食品配制物以将至少一部分肉粉替代为由并非肉粉的肉提供的肉，经调整的干燥宠物食品配制物具有的蛋白质含量约等于初始干燥宠物食品配制物的蛋白质含量；并且生产经调整的干燥宠物食品配制物的粗磨食物。
在实施方案中，初始干燥宠物食品配制物包含非肉成分，并且经调整的干燥宠物食品配制物相对于初始干燥宠物食品配制物具有相同量的非肉成分。
在另一个实施方案中，本公开提供了改善出生后两年期间的狗的生长的方法。该方法包括在狗妈妈孕育狗期间向其施用包含约14％至约30％的并非肉粉的肉的干燥食品组合物。
在另一个实施方案中，本公开提供了改善小狗的生长的方法。该方法包括通过向小狗的哺乳期妈妈施用包含约14％至约30％的并非肉粉的肉的干燥食品组合物来向小狗施用必需氨基酸和必需脂肪酸。
在另一个实施方案中，本公开提供了改善妊娠期和/或哺乳期狗的体重保持的方法。该方法包括向妊娠期或哺乳期狗施用包含约14％至约30％的并非肉粉的肉的干燥食品组合物。
本公开的优点是提供以完全保持氨基酸在蛋白质合成中的可用性的成分配制的宠物食品。
本公开的优点是提供以带来高质量蛋白质和高水平必需脂肪酸的成分配制的宠物食品。
本公开的另一个优点是提供以被证明为易消化的成分配制的宠物食品。
本公开的另一个优点是提供以有助于在苛刻环境下防止重量减轻的成分配制的宠物食品。
本公开的另一个优点是提供以被证明为提供优异的营养以实现长期健康影响的成分配制的宠物食品。
本公开的另一个优点是提供以有助于保持在狗舍中生活的狗的体况的成分配制的宠物食品。
本公开的另一个优点是提供以有助于保持健康成年犬的体重的成分配制的宠物食品。
本公开的另一个优点是提供以提供作为高质量蛋白质和脂肪源的关键营养益处的成分配制的宠物食品。
本公开的优点是提供以作为必需氨基酸和必需脂肪酸的改善的来源来哺育出强壮的小狗的成分配制的宠物食品。
本公开的另一个优点是提供有助于哺育出强壮且健康的幼崽的宠物食品产品。
本公开的又一优点是提供用于强壮且健康的生长的高质量动物蛋白质源。
本公开的再一优点是改善宠物食品中必需营养物质的可用性。
本公开的另一个优点是有助于使妊娠期/哺乳期雌狗保持健康的体重。
本公开的又一优点是提供包含妊娠期/哺乳期雌狗哺育出强壮的小狗所需的所有营养物质的宠物食品。
本公开的再一优点是提供包含小狗长成强壮的成年犬所需的所有营养物质的宠物食品。
本公开的又一优点是提供使哺乳雌狗乳汁中的必需氨基酸实现高可用性的宠物食品。
本文描述了额外的特征和优点，并且根据以下具体实施方式和附图，这些特征和优点将显而易见。
附图说明
图1A为示出实施例1研究中得到的赖氨酸的血浆浓度随时间变化的图。
图1B为示出实施例1研究中得到的精氨酸的血浆浓度随时间变化的图。
图2为示出由实施例2研究中三种研究饮食得到的脂肪酸分布的图。
图3为示出由实施例2研究中三种研究饮食得到的氨基酸分布的图。
图4为示出由实施例2研究中三种研究饮食得到的消化率的图。
图5为示出由实施例2研究中三种研究饮食得到的亚油酸表观吸收的图。
图6为示出由实施例2研究中三种研究饮食得到的赖氨酸富集的图。
图7为示出由实施例2研究中三种研究饮食得到的精氨酸富集的图。
图8为示出喂食实施例2研究中三种研究饮食的狗在极端天气条件下体重减轻的图。
图9为示出实施例3研究中，两种研究饮食的产品消化率的图。
图10A和图10B为示出喂食实施例3研究中两种研究饮食的母亲在妊娠后期和哺乳后期的体重变化的图。
图11为示出喂食实施例3研究中研究饮食A的边境牧羊犬母亲在妊娠后期和哺乳后期的体重变化的照片。
图12A和图12B为示出喂食实施例3研究中两种研究饮食的小狗在哺乳期的生长的图。
图13为示出喂食实施例3研究中两种研究饮食的小狗在哺乳期的食品效率的图。
图14A和图14B为示出喂食实施例3研究中两种研究饮食的法国斗牛犬小狗在哺乳期的生长的图。
图15A-15C和图16为示出由饲养员评级的喂食实施例3研究中的两种研究饮食的哺乳期雌狗的乳质的图。
图17为示出喂食实施例3研究中的两种研究饮食的哺乳期雌狗的乳蛋白含量的图。
图18为示出喂食实施例3研究中的两种研究饮食的哺乳期雌斗牛犬的乳蛋白含量以及公开的有关米格鲁猎犬的数据的图。
图19为示出喂食饮食A和饮食B的狗的乳汁中的氨基酸分布的图。
图20A、图20B和图20C为哺乳早期、哺乳中期和哺乳后期喂食饮食A和饮食B的狗的乳汁中的氨基酸富集与膳食氨基酸水平之间的相关性的图。
具体实施方式
如在本公开和所附权利要求中所用，单数形式“一个”、“一种”、“该”和“所述”包括复数指代物，除非上下文另外明确规定。因此，例如，提及“浆料”或“该浆料”包括两种或更多种浆料。在“X和/或Y”的上下文中使用的术语“和/或”应被解释为“X”或“Y”或“X和Y”。相似地，表述“X或Y中的至少一者”应被解释为“X”或“Y”或“X和Y”。当在本文中使用时，尤其是后跟一列术语时，术语“示例”仅是示例性和例示性的，并且不应被视为排他性或全面性的。
如本文所用，“约”应理解为是指某一数值范围内的数字，例如该所提及数字的-10％至+10％，优选地在该所提及数字的-5％至+5％的范围内，更优选地在该所提及数字的-1％至+1％的范围内，最优选地在该所提及数字的-0.1％至+0.1％的范围内。此外，本文中的所有数值范围都应理解为包含该范围内的所有整数或分数。另外，这些数值范围应理解为对涉及该范围内任何数值或数值子集的权利要求提供支持。例如，公开的从1到10的范围应理解为支持从1到8、从3到7、从1到9、从3.6到4.6、从3.5到9.9等的范围。
本文中表示的所有百分比均以占组合物总重量的重量计，除非另有表示。提及pH时，其值对应于使用标准设备在25℃下测量的pH。
术语“食品”、“食品产品”和“食品组合物”意指旨在供动物(包括人类)摄食并且为动物提供至少一种营养物质的产品或组合物。术语“宠物食品”是指用来供宠物食用的任何食品组合物。术语“宠物”是指可得益于或享用本公开所提供组合物的任何动物。例如，宠物可以是鸟类动物、牛类动物、犬科动物、马类动物、猫科动物、山羊类动物、狼类动物、鼠科动物、绵羊类动物或猪类动物，但宠物也可以是任何合适的动物。术语“伴侣动物”是指狗或猫。不同种类幼犬的成熟以不同的比率发生，但是本文所用的术语“小狗”是指出生后前两年的狗，优选地出生后18个月的狗，更优选地出生后一年的狗。
“干燥”食品组合物具有少于10％的水分和/或小于0.65的水活度，优选两者兼有。“粗磨食物”是干燥宠物食品块，其可具有球丸形状或任何其他形状。粗磨食物的非限制性示例包括：颗粒；球丸；宠物食品块、脱水肉、仿肉产品、蔬菜，以及它们的组合；以及宠物零食，诸如肉干或蔬菜干、生皮以及饼干。本公开不限于特定形式的粗磨食物。
如本文所用，“肉粉”是已经被干燥并研磨以形成基本上均匀尺寸的颗粒的肉。例如，美国饲料管理协会(AAFCO)将“肉粉”定义为来自哺乳动物组织的炼制产品，不包括任何额外的血液、毛发、蹄、角、皮屑、粪肥、胃和瘤胃内容物(除了不可避免地可能出现在良好加工实践中的此类量)，并且不应含有本定义未提供的外来材料。
本文所公开的组合物可不含本文未具体公开的任何要素。因此，使用术语“包括/包含”的实施方案的公开内容包括“基本上由所指明的组分组成”的实施方案和“由所指明的组分组成”的实施方案的公开内容。类似地，本文所公开的方法可不含本文没有具体描述的任何步骤。因此，使用术语“包括/包含”的实施方案的公开内容包括“基本上由所指明的步骤组成”的实施方案和“由所指明的步骤组成”的实施方案的公开内容。本文所公开的任何实施方案可与本文所公开的任何其它实施方案组合。
在本公开的方面，食品组合物包含最多约30％的并非肉粉的肉。优选地，食品组合物为干燥食品组合物。食品组合物可为宠物食品，例如针对狗配制的食品组合物。在实施方案中，并非肉粉的肉的量为食品组合物的约14％至约30％，例如约16％。食品组合物优选地具有约18％至约30％、优选地约25％至约30％(例如约25％)的蛋白质含量。在实施方案中，食品组合物具有约10％至约20％、优选地约15％至约17％的脂肪含量。食品组合物优选地具有约6％至约8％的灰分含量。
食品组合物优选地通过包括制备鲜肉或冻肉的浆料的方法制得。例如，可对鲜肉或冻肉进行粉碎、用直接蒸汽喷射烹饪以提高肉的水分并且乳化以形成浆料。合适的肉的非限制性示例包括鸡肉、牛肉、猪肉、羊羔肉、火鸡肉、兔肉、鸭肉、鹅肉和鱼肉诸如鲑鱼、金枪鱼、鲭鱼、鳕鱼、鳕鱼类、大比目鱼、龙利鱼和黑线鳕。鲜肉或冻肉可为一种类型的肉或两种或更多种类型的肉的组合。
直接蒸汽喷射优选地通过向每100kg肉中添加5kg至15kg热水/蒸汽来增加肉的水分。在实施方案中，浆料的温度为约71℃，但是在一些实施方案中可使用更低的温度。优选地，所得浆料具有的粘度不影响浆料通过注射器被泵送至预处理器中，挤出前，在预处理器中对材料进行水合和混合。
浆料制备的具体非限制性示例提供于下文中。可将冻肉块送至预粉碎机以便开始将冻肉块粉碎成大小一般为5cm至15cm的块。这些肉块可被输送至绞肉机，用于将其粉碎成其最长侧为6mm或8mm的片。如果除冻肉之外或另选地使用鲜肉，则鲜肉可直接加入绞肉机中。可通过直接蒸汽喷射将碎肉蒸煮至约71℃的温度、保持5-15秒以形成浆料，优选地在不断搅拌下通过加热及任何后续的保持来实现。浆料可经过最终粉碎，并且在浆料温度保持在约71℃或更低时使用标准乳化器将其乳化。最终粉碎和乳化能够允许在挤出-烹饪之前将材料泵送并且喷射预处理器中。
为生产食品组合物，可将浆料添加至干燥成分的共混物中。在实施方案中，将浆料添加至预处理器中干燥成分的共混物的至少一部分中，并且将该混合物从预处理器给料至挤出机。
浆料的量可基于最终食品组合物中期望的量来确定，优选地为食品组合物的约14％至约29％。通过将浆料添加至干混物中而形成的混合物中成分的浓度可与最终组合物中的浓度基本上相同(除含水量以外)，但是由于在预处理器中添加水分，其中一部分水分保留在最终组合物中，因此通常混合物中的浓度将略低于最终组合物中的浓度。此外，加入产品配方中的浆料的量优选地为浆料中期望的肉量的105％-115％，因为在烹饪肉的过程中加入了热水/蒸汽。从而，对于需要14％鸡肉的配方，当将10kg水加入到100kg鸡肉中以使温度升至高达约71℃时，应加入的鸡肉浆料的量为约15.4％。
干混物可包含肉粉、谷物、植物蛋白质、纤维、维生素、矿物质和脂肪中的一种或多种。适用于本文所公开的组合物的肉粉的非限制性示例包括牛肉粉、家禽肉粉、猪肉粉、火鸡肉粉、鱼肉粉以及它们的组合。为保持产品中期望水平的总蛋白质，浆料含量的增加伴随着存在的任何骨粉的量的减少。在实施方案中，浆料的量大于任何肉粉的量，但是其它实施方案中具有的肉粉的量大于浆料的量。
合适的谷物的非限制性示例包括玉米、大米、小麦、大麦、燕麦、大豆、高粱、小米、黑小麦、黑麦以及它们的混合物，优选地为全谷物形式。在实施方案中，所使用的谷物的量使得最终食品组合物包含20-55％的谷物。
合适的植物蛋白质的非限制性示例包括小麦蛋白(例如，全谷物小麦或面筋诸如谷朊粉)、玉米蛋白(例如，玉米粉或玉米麸质)、大豆蛋白(例如，大豆粉、大豆浓缩物或大豆分离物)、大米蛋白(例如，米粉或米蛋白)、棉籽、花生粉、豌豆蛋白以及它们的组合。一些材料同时为植物蛋白质和谷物。在实施方案中，所使用的植物蛋白质的量使得最终食品组合物包含5-20％的植物蛋白质。
可以使用可溶性纤维和/或不可溶性纤维。合适的纤维源的非限制性示例包括菊苣、纤维素、甜菜粕(来源于甜菜)、阿拉伯树胶、塔尔哈型树胶、车前子、米糠、角豆胶、柑橘渣、果胶、低聚果糖、短链低聚果糖、甘露低聚果糖、大豆纤维、阿拉伯半乳聚糖、低聚半乳糖、阿拉伯糖基木聚糖以及它们的混合物。在实施方案中，所使用的纤维的量使得最终食品组合物包含1-10％的纤维。
该纤维源可以是可发酵纤维。可发酵纤维先前曾被描述为有益于伴侣动物的免疫系统。技术人员应当知道，提供益生元促进肠内益生菌成长的可发酵纤维或其他组合物可掺入干燥宠物食物中。
合适的脂肪的非限制性示例包括动物脂肪和植物脂肪。优选地，脂肪源为动物脂肪源，诸如牛脂或油脂。除此之外或另选地，可使用植物油，诸如玉米油、葵花油、红花油、菜籽油、大豆油、橄榄油以及其它富含单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸的油。在一些实施方案中，包括ω-3脂肪酸的来源，诸如鱼油、磷虾油、亚麻籽油、核桃油或藻油中的一种或多种。
合适的维生素的非限制性示例包括维生素A、任一种维生素B、维生素C、维生素D、维生素E和维生素K，包括前述物质的各种盐、酯或其他衍生物。合适的矿物质的非限制性示例包括钙、磷、钾、钠、铁、氯、硼、铜、锌、镁、锰、碘、硒等。
干混物可包含其它的附加组分，诸如防腐剂、着色剂或适口剂中的一种或多种。合适的防腐剂的非限制性示例包括山梨酸钾、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯钠、丙酸钙、丙酸及它们的组合。合适的着色剂的非限制性示例包括FD&C色素，诸如蓝色1号、蓝色2号、绿色3号、红色3号、红色40号、黄色5号、黄色6号等；天然色素，诸如烤麦芽粉、焦糖色素、胭脂树红、叶绿酸、胭脂虫红、甜菜苷、姜黄、藏红花、辣椒粉、番茄红素、接骨木汁、班兰、蝶豆花等；二氧化钛；以及技术人员已知的任何适宜的食物着色剂。合适的适口剂的非限制性示例包括酵母、牛脂、提炼的骨粉(例如，家禽肉、牛肉、羊羔肉和猪肉)、风味提取物或共混物(例如，烤牛肉)、动物消化物等。
使用浆料生产食品组合物的方法的非限制性示例如下文所述。使用鸡肉、火鸡肉、牛肉、羊羔肉或鲑鱼肉中的一种或多种的肉浆的干燥宠物食品可通过将约14％至约30％的肉浆例如约16％的肉浆加入到碎干混物中来制成。碎干混物可包含约10％至约30％的家禽粉和/或来源于其它动物的粗粉，例如约20％的骨粉；约20％至约55％的全谷物混合物，例如约46％的全谷物混合物，该全谷物混合物包含玉米、小麦和精米；约5％至约35％的植物蛋白质混合物，例如约10％的植物蛋白质混合物，该植物蛋白质混合物包含大豆、玉米麸质和面筋；约1％至约15％的纤维混合物，例如约6％的纤维混合物，该纤维混合物包含菊苣、纤维素和甜菜粕；约0.5％至约2.0％的维生素和矿物质，例如约1.0％的维生素和矿物质；以及约0.1％至约3.0％的鱼油，例如约1.0％的鱼油。
肉浆可在连续搅拌下加入到预处理器中的干混物中，并且通过蒸汽喷射使其温度升高至80℃-85℃的温度。可以将经过预处理的混合物给料至挤出机-蒸煮机，并且在105℃-130℃的温度和250psi-500psi的压力下处理不到40秒的时间段以形成成型的膨胀绳状物。该绳状物可切割为适当尺寸的片。这些片可干燥至6％-9％的水分以形成粗磨食物，并且该粗磨食物可涂覆以约8％的动物脂肪和消化物。
在本公开的另一方面，提供了给宠物提供营养物的方法。该宠物可为伴侣动物，优选地为狗，更优选地为妊娠期和/或哺乳期雌狗。该方法包括施用本文所公开的宠物食品产品的实施方案中的任一者。在优选的实施方案中，在妊娠期和/或哺乳期内，每天将宠物食品产品施用于妊娠期和/或哺乳期狗以改善小狗的生长或支持母亲的体重保持。
实施例
下列非限制性示例示出使用鲜肉或冻肉改善氨基酸和脂肪酸的可用性的概念。
实施例1
对成分鸡胴体(CC)和家禽副产物粉(PBPM)的蛋白质质量进行广泛的研究。分析CC和PBPM的(i)化学组成；(ii)分析体外蛋白质消化率；以及(iii)包括在狗饮食中，并且评估餐后氨基酸(AA)血浆外观和表观全消化道消化率。基于后者的结果，估算回肠AA消化率并且将其与餐后AA血浆外观相关联。所有实验的实验成分来自相同批次。
化学表征
分析CC和PBPM中的水分、粗蛋白(CP)、粗脂肪、粗纤维、灰分和总能量(GE)。按照欧盟法规要求，用茚三酮试剂进行柱后衍生化后，通过离子交换色谱法和比色检测法对实验饮食和成分中的蛋氨酸砜、蛋氨酸亚砜和半胱氨酸进行测量。此外，估算CC、PBPM、CC饮食和PBPM饮食的非反应性赖氨酸。
使用包含硫酸和氢氧化钾的方法分析实验成分和实验饮食中的胶原蛋白。分析用于狗的CC饮食和PBPM饮食中的水分、CP、粗脂肪、粗纤维、灰分和总能量(GE)。并且分析必需氨基酸(EAA)。此外，使用Lareal/Boisen方法评估CC和PBPM的体外蛋白质消化率。
表1：实验狗饮食的成分组成
动物蛋白质源 CC饮食 PBPM饮食
成分(％)
鸡胴体 28.13 -
家禽副产物 - 6.42
肥猪肉肾脏脂肪 2.00 5.00
普通玉米粒 72.03 73.50
谷蛋白玉米粗粉 11.60 11.50
鸡肉消化物 2.00 2.00
矿物质 5.10 5.71
维生素 0.34 0.35
抗氧化剂 0.0016 0.0040
表2：实验狗饮食的化学组成
表3：鸡胴体和家禽副产物粉的化学组成
狗测定
研究使用各种品种、性别和灭菌状况的十六只狗：7只米格鲁猎犬、2只凯安犬、2只达克斯猎犬、4只狐狸犬和1只迷你雪纳瑞犬。这些狗(年龄4.92±2.92岁；体重9.0±2.3公斤)被单独安置在室内犬舍内，随时可以自由进入大的外院。设施内的室温保持在18℃和24℃之间，具有12h亮/12h暗循环。在整个实验中，所有狗均喂食饮食以保持体重。饮食于早上9点在单一的位置提供。狗随时可以饮水。
饮食被配制为满足或超过由欧洲宠物食品工业联合会(FEDIAF)制定的成年犬的最低要求。两种饮食的成分组成报告于上文表1中。值以基于干物质(DM)的形式呈现。饮食组成的差别在于动物蛋白的唯一来源不同。CC和PBPM分别为CC饮食和PBPM饮食中动物蛋白的唯一来源。在两种饮食中，将CC和PBPM对CP的贡献配制为相同的，为约25％。大约73％的蛋白质由玉米粒和谷蛋白玉米粗粉提供。饮食被配制为(基于DM)包含类似比例的CP、脂肪、粗纤维、碳水化合物(无氮提出物，NFE)和灰分(表2)。冷冻保存CC，然后在70℃/80℃下碾磨和烹饪12min。由该方法得到的产物称为浆料，然后将浆料与其它成分一起掺入到挤出机中。饮食通过挤出机挤出，在110℃下干燥约20/25min至8％DM的目标，然后粗磨。
每天由当地兽医、动物行为主义者和/或看守人员监测狗的健康和行为。如果需要，施用医疗。基于体检和临床实验室检查结果，所有狗均被视为健康的。
采用交叉设计，将研究进行26天。在第一时期期间，向第一组8只狗喂食CC饮食，而向另一组8只狗喂食PBPM饮食。在第二时期期间，向第一组狗喂食PBPM饮食，而向第二组喂食CC饮食。在每个时期，狗均有7天的适应期，然后进行6天的总粪便采集以用于确定营养物质消化率。每天测量摄食量。在采集时，将湿粪便保存于-20℃下，直至完成7天采集期，并且在采集期结束时称重。分析饮食和粪便样本中的水分、CP、粗脂肪、粗纤维、灰分和总能量(GE)。总消化道营养物质消化率计算如下：【营养物质摄入量(总克数/7天)-营养物质输出量(总克数/7天)】/营养物质摄入量(总克数/7天)。
在每天餐前和餐后，对采用消化率测试的狗进行采血。按饮食选择16只狗中的12只狗，这些狗能够在短时间内饮食。在每次粪便采集期间，对每只狗进行一次AA吸收率测试。使用1”×20g针，通过头针导管将血液样本(3mL)采集到两个2.5mL注射器中。在即将采集3mL血液样本之前，采集0.5mL血液并且弃去以除去导管中残留的抗凝血剂。在喂食(时间0)前0.5h以及喂食时间后1h、2h、3h、5h和8h采集血液。在采集后，将血液立即转移至5mL肝素钠管中。在每次采集后，提供1.0mL体积的肝素化盐水(10U肝素/mL盐水)以冲洗导管。采集8h样本后，取下导管，并且通过颈静脉的静脉穿刺采集24h样本。总而言之，在每个时期，采集24.5mL血液，该体积小于GIRCOR(跨专业研究反思与交流小组)的建议值。在室温下，于临床用离心机中将血液以4000×g离心5min。去除获得的上清液级分，然后保存在-80℃下直至进行氨基酸分析。通过Biochrom氨基酸分析仪，使用经典的离子交换液相色谱与柱后茚三酮衍生化和光度检测法，对血浆AA浓度进行测定。使用梯形规则计算24小时内曲线下面积(AUC)：AUC＝∫b af(x)dx。
测试变量的正态性，并且看起来遵循正态分布。利用成对t检验来测试表观全消化道消化率的显著性。当该检验的p值小于0.05时，认为差值明显不同。统计检验均为双尾。通过方差分析来分析曲线下面积。结果以平均值±SD来表示。
结果
对CC和PBPM中的体外蛋白质消化率和胶原蛋白含量进行分析。在生产的饮食上进行狗测定以获得CC和PBPM的相对质量的信息。最后，向狗喂食饮食以便获得包括单一氨基酸消化率数据在内的表观全消化道营养物质消化率。比较这些估计的回肠AA消化率与餐后血浆富集的EAA，以便就AA吸收率对两种饮食进行定性比较。这些体内数据以及两种成分和饮食的分析表征应当允许推断蛋白质源的质量，并很好地估计它们在狗体内的EAA可用性。
化学表征实验成分的化学组成示于上表3中。非反应性赖氨酸比率在实验成分和实验饮食之间是类似的，值在14.8％和18％之间变化(表4)。仅PBPM具有的半胱氨酸和蛋氨酸亚砜的量高于分析检测阈值(50mg/kg)，它们的量分别为133mg/kg和105mg/kg。此外，在PBPM和饮食PBPM中测得更高含量的非反应性赖氨酸。
表4：实验成分和饮食的非反应性赖氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸砜、蛋氨酸亚砜
体外蛋白质消化率：实验成分的分析表明，CC的回肠体外蛋白质消化率高4.1％(表5)。
表5：实验成分的体外蛋白质消化率
体外蛋白质消化率(％)
CC 93.1
PBPM 89.0
表观全消化道消化率：在狗测定中，在干物质(DM)、有机物质(OM)、灰分和总能量(GE)方面未观察到表观全消化道消化率的差异。在两种实验饮食之间，CP(p值＝0.037)和脂肪(p值＝0.001)的表观全消化道消化率明显不同，CC组相比于PBPM组具有更高的值(表6)。
两种饮食的氨基酸表观全消化道消化率之间未观察到差异。然而，一个趋势是亮氨酸(p值＝0.085)和甘氨酸(p值＝0.070)血浆浓度在两组狗之间不同。
计算校正后的氨基酸消化率(表7)。
AA吸收率测试：测量除半胱氨酸以外的所有狗EAA的氨基酸吸收动力学。喂食两种饮食后，大多数情况均相同，即进食后快速上升，并且逐渐恢复至吸收后状态的基线水平。赖氨酸是餐后下降至基线水平以下的唯一氨基酸。图1A和图1B分别为示出赖氨酸和精氨酸的血浆浓度随时间变化的图。值为12只狗的平均值+SD。
时间对所有AA的血浆氨基酸浓度和针对Lys/TEAA比例的血浆氨基酸浓度具有显著影响。在一定时间内，当两种饮食之间表现出显著差异时，观察对应的p值。
表6：实验饮食的表观全消化道近似值和氨基酸消化率(％)
CC饮食 PBPM饮食 p值
DM 84.96±1.42 84.96±1.6 0.999
OM 89.00±1.13 88.61±1.28 0.532
CP 88.14±1.68 86.10±1.85 0.037
脂肪 96.59±0.97 94.35±1.07 0.001
灰分 35.21±5.44 37.97±6.56 0.377
GE 89.25±1.12 88.42±1.23 0.182
校正后的CP回肠消化率1 84.06±3.43 79.91±3.77 0.037
1使用Hendrik等人(2012)开发的公式校正的CP回肠消化率
表7：氨基酸的曲线下面积及相关联的p值
2方差分析，以AUC作为因变量，并且以饮食、组别以及交互作用饮食*组别作为自变量。
曲线下面积对精氨酸和亮氨酸的吸收具有显著影响。组别和饮食对赖氨酸、酪氨酸和Lys/TEEA的比例具有显著的交互作用影响。
讨论
化学表征
原材料的来源(头部、脚部、内脏)是影响CC和PBPM质量的主要因素。羟脯氨酸是胶原蛋白中特征在于对胰蛋白酶水解不敏感的主要组分，防止蛋白质展开并且降低其它酶的可接近性。在该研究中，对于CC饮食，12.2％的CP级分为胶原蛋白，而对于PBPM饮食，则有10.0％的CP级分为胶原蛋白。然而，CC体外消化率比PBPM高4.1％，两者的体外CP消化率为93.1％和89.0％。因此，胶原蛋白可能并非为衡量蛋白质源的质量的准确因素。
实验成分在氧化的含硫氨基酸的量方面不同。氧化的氨基酸对于估计蛋白质质量是重要的；例如，蛋氨酸砜和半胱氨酸无法由离乳大鼠利用，但是蛋氨酸亚砜可被部分利用。PBPM具有更高的半胱氨酸和蛋氨酸亚砜水平，其可以由炼制过程中使用的高温来解释。然而，该差异在饮食中并未测出，因为半胱氨酸、蛋氨酸砜和蛋氨酸亚砜的含量全部低于50mg/kg。
对实验饮食进行非反应性赖氨酸测定，以了解蛋白质源在质量方面是否可能不同；反应性赖氨酸对于准确测定湿猫粮和干燥猫粮中的赖氨酸消化率是重要的。结果发现，两种成分具有大致相同比例的非反应性赖氨酸，这表明生产粗粉的炼制方法可能并不如预期那样强效。将PBPM粉碎并且在约30min至40min内加热至120℃至140℃的温度。然后将产物干燥并且再次粉碎成细颗粒以制备PBPM。因此，该过程在温度和持续时间方面是强效的，可以更轻松地通过美拉德反应诱导赖氨酸的ε-氨基酸基团的反应。然而，掺入的蛋白质源中所含的百分比较低的还原糖可能限制了该反应。
CC方法首先是在仅12min内将冷冻的CC烹饪至约80℃的步骤。然后，在70℃将肉浆粉碎以容纳于挤出机中。因此，尽管CC方法所需的温度和时间小于PBPM方法，但是CC饮食并不包含更低的非反应性赖氨酸含量。
狗测定
在第一时期，测定两组8只不同的狗之间的消化率结果。
表观全消化道近似消化率：将饮食配制为CP和脂肪的目标百分比分别为18％和9％。两种实验饮食具有相同量(基于DM)的粗蛋白并且还是等能的。作为目标，实验成分贡献25％的总粗蛋白。为达到该比例，两种饮食中的CP含量为约18％，其接近FEDIAF推荐的最低量。较低比例的膳食蛋白质可能有助于显示限制性氨基酸。
CC饮食的CP和脂肪的表观消化率明显高于PBP粗粉。
为获得净摄入量，采用每天进食1000千卡并且体重为15kg的狗作为示例。按照下式得到的计算结果如表9所示：
平均摄入量(CP的克数)＝(CP的膳食量)*(GE)*(进食1000千卡的净CP摄入量)*(校正后的回肠N消化率)
去除平均氧化量后的可用CP＝按代谢体重计的CP摄入量-平均氧化量
表8：净摄入量计算
Humbert等人(2001)报道每天体内蛋白质氧化值为3.93g/kg BW^0,75。两种饮食均超过了该基础蛋白质氧化，CC和PBPM饮食分别为5.98g/kg BW^0,75和5.63g/kg BW^0,75。然而，相比于PBPM饮食，CC饮食提供多于该最低要求20％的蛋白质(分别为2.05g/kg BW^0,75与1.7g/kg BW^0,75)。在了解两种饮食均满足最低要求的情况下，该差异可能很小，但是在长期维持瘦体重方面可表现出营养优势，对于单位代谢体重需求较高的动物如生长期动物、妊娠/哺乳期雌狗或工作犬而言尤其如此。
氨基酸吸收测试：AA水平受到餐后采样时间的严重影响。所有氨基酸浓度均在餐后增加，在进食后3h和5h之间达到峰值。氨基酸吸收的餐后动力学表明，在餐后状态的前2-3小时期间，绝大多数必需氨基酸显著增加，反映出两种饮食中均观察到良好的蛋白质消化率。
然而，对于赖氨酸，未观察到高于基线的增加，表明赖氨酸是饮食中最具限制性的氨基酸(图1A)。这种观察结果并不奇怪，因为两种饮食均配制为接近FEDIAF所提出的最低推荐允许值。赖氨酸对热处理非常敏感，通过形成不可用的美拉德化合物而降低了其可用性。该结果强化了这一事实：蛋白质质量是确保在较低蛋白质摄入量下满足赖氨酸要求的关键。即使并不重要，但是在CC饮食中存在更高的曲线下面积的趋势，表明赖氨酸在CC饮食中比PBPM饮食中的限制性更低。
另一种在文献中称为“限制性”的氨基酸在两种饮食之间表现出显著差异：与PBPM饮食相比，CC饮食中精氨酸的富集量明显更高(图1B)。喂食CC饮食的狗延迟表现出更高的血浆精氨酸值，在进食后1小时和2小时非常明显，表明CC饮食中精氨酸的可用性更高。精氨酸的总体AUC在CC中还显著高于PBPM饮食。这一发现特别有意义，因为精氨酸被认为是尿素循环和蛋白质合成途径中的关键氨基酸。精氨酸是尿素循环的中间组分，并且被称为尿素解毒的别构激活剂。此外，精氨酸以其对激素如胰岛素和生长激素的促分泌作用而被熟知为合成代谢氨基酸。这种更好的精氨酸状态与更高的赖氨酸回肠消化率可导致在餐后状态期间得到更高的蛋白质合成能力。
结论
总体而言，该研究中所进行的分析和试验的结果能够更好地估计两种实验饮食的相对膳食蛋白质质量。由于CC饮食的表观全消化道CP消化率显著高于PBPM饮食，因此CC的蛋白质质量可能优于PBPM。CC的更高的体外蛋白质消化率可表示更高的回肠消化率，并由此可解释观察到的全消化道CP消化率的差异。
氨基酸吸收测试表明，赖氨酸是第一限制性氨基酸，并且显示出喂食CC饮食的狗的赖氨酸存在较高曲线下面积的趋势。该差异对于精氨酸甚至更大，精氨酸是蛋白质代谢和合成中的另一种关键的限制性氨基酸。精氨酸在CC饮食中的可用性更高，如明显更高的血浆状态所示。
因此，总而言之，膳食CC蛋白质相比于膳食PBPM蛋白质可能具有更高的生物利用率。
实施例2
基于实施例1的研究结果，进行了第二项研究以验证在具有更高脂肪和蛋白质含量(100克最终产品中包含25％蛋白质、15％脂肪)的产品之间是否也能够观察到消化率和血液富集的差异。
三种饮食被制成在其配方中具有不同量的真肉。第一种饮食包含20％的真肉，第二种饮食包含14％的真肉(在允许“富含真肉”的权利要求的配方中真肉的最低量为14％)，并且第三种饮食不含真肉。这三种饮食包含作为动物蛋白质源的肉粉。饮食被配制为满足或超过FEDIAF制定的成年犬的最低要求。饮食被制成包含相同比例(基于干物质(DM))的粗蛋白(CP)、脂肪、粗纤维、碳水化合物(CHO)和灰分。三种饮食之间的唯一差别在于动物蛋白质源中真肉的量。
表1：三种饮食的组成
饮食 1 2 3
％真肉 20％ 14％ 0％
主要成分 鸡肉 家禽粉 家禽粉
干物质(％) 92.5 92.4 92.2
水分(％) 7.5 7.6 7.8
蛋白质(％) 25.3 25.2 25.2
来自100g产品中真肉的蛋白质(％) 3.9 2.5 0.0
真肉对总蛋白质的贡献(％) 15.5 10.1 0.0
脂肪(％) 14.9 14.9 15.0
灰分(％) 7.5 7.4 7.2
粗纤维(％) 2.1 2.1 2.1
碳水化合物(％) 42.7 42.9 42.7
将十二只各种品种、性别和灭菌状况的狗用于研究。狗被单独安置在室内犬舍内，其随时可以自由进入大的外院。饮食于早上9点在单一的位置提供。狗随时可以饮水。基于体检和临床实验室检查结果，所有狗均被视为健康的。
十二只狗被分为三组，每组四只狗，它们具有类似的年龄和品种分布。该研究为30天的交叉研究，其分为每时期十天的三个时期，因此在研究结束时，采用三种饮食中的每种饮食对每只狗进行测试。
表2：交叉研究设计
组别 时期1 时期2 时期3
组1 饮食1 饮食2 饮食3
组2 饮食2 饮食3 饮食1
组3 饮食3 饮食1 饮食2
将10天时间分成两部分；前四天为仅评估每日食品消耗和粪便一致性时的适应部分，并且剩下的六天为除了每日食品消耗和粪便一致性的评估之外，还要采集粪便、称重并保存于-20℃下的测试部分。还对餐后氨基酸血液富集进行评估。
分析饮食中完整的AA和脂肪酸分布。分析饮食和粪便中的水分、CP、粗脂肪、粗纤维、灰分和CE。
总消化道营养物质消化率计算如下：
【营养物质摄入量(总克数/7天)-营养物质输出量(总克数/7天)】/营养物质摄入量(总克数/7天)
亚油酸脂肪酸的净摄入量计算如下：
【每日食品摄入量(总克数/7天)*饮食中脂肪酸的浓度(％)*脂肪酸的消化率(％)*亚油酸脂肪酸对总脂肪酸分布的贡献(％)】
使用1”×20g针，通过头针导管将血液样本(5mL)采集到两个2.5mL注射器中。在即将采集5mL血液样本之前，采集0.5mL血液并且弃去以除去导管中残留的抗凝血剂。在喂食前0.5小时采集血液，并且在进食后1h、2h、3h、5h采集血液。采集后，将一半血液立即转移至5mL肝素钠管中，并且将另一半转移至3mL干燥管中。总的来说，每个时期采集20mL血液(占血液总体积的2.35％)，其低于GIRCOR建议值。
在室温下，于临床用离心机将中将血液以3000×g离心10min。分别提取得自肝素钠管和干燥管的血浆和血清，然后于-80℃保存以备分析。
通过Biochrom氨基酸分析仪，使用经典的离子交换液相色谱与柱后茚三酮衍生化和光度检测法，对血浆样本中的AA浓度(赖氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、精氨酸、谷氨酰胺)进行测定。使用梯形规则计算各种氨基酸和饮食的曲线下面积，并采用基础值进行调整。
对各种饮食之间的粗蛋白、CHO、脂肪、灰分、GC消化率进行成对T检验。对胰岛素血和AA浓度进行方差分析(ANOVA)以测试时间、饮食、时期、组别以及饮食和组别之间的交互作用的影响。对于各种氨基酸，使用成对T检验对曲线下面积进行比较。
结果与讨论
饮食分析：将饮食配制为包含相同比例的粗蛋白和脂肪，但是它们被配制为具有不同量的真肉(20％、14％或0％)，导致三种饮食之间的脂肪酸分布差异(图2)。增加粗磨食物中的真肉浓度导致PUFA对总脂肪酸分布的贡献更高、对SFA耗用的贡献更高。如果将亚油酸脂肪酸和硬脂酸肪酸对总脂肪酸分布的贡献合计，则发现三种饮食的结果相同。这清楚地证明炼制过程将亚油酸转化为它的主要氢化形式：硬脂酸脂肪酸。
如图3所示，各种饮食之间的氨基酸分布存在非常高的相似度。该发现可以解释为三种饮食中真肉对总蛋白质含量的贡献分别为15.5％、10.6％和0％。
如图4所示，观察到三种饮食的CP、脂肪、CHO和GE的消化率较高，证明三种饮食的质量较高。就CP的消化率而言，三种饮食中的各种饮食之间未观察到显著差异。然而，随着饮食中真肉的量的提高，观察到CP消化率具有增加的趋势。在使用预测回肠消化率的Hendricks公式时，该增加甚至更大。
就脂肪的消化率而言，三种饮食中的各种饮食之间未观察到显著差异。在本研究中，不含真肉的饮食中饱和脂肪酸(硬脂酸脂肪酸)的增加对脂肪消化率无负面影响，可能是由于三种饮食之间的脂肪酸分布差异较小。就CHO、灰分和GE的消化率而言，三种饮食中的各种饮食之间未观察到显著差异。
如图5所示，由真肉制成的饮食相比于不含真肉的饮食，亚油酸脂肪酸的净摄入量明显更高。这一结果是合理的，因为用真肉制成的饮食中具有更高浓度的亚油酸脂肪酸。
对于这三种饮食，氨基酸浓度在餐后期间显示出明显增加，确认了观察到良好的蛋白质消化率。然而，未观察到饮食对不同氨基酸的血液浓度的影响。
将使用包含18％蛋白质的饮食的第一项研究(实施例1)的结果与使用包含25％蛋白质的饮食的本研究的结果进行比较，得到了有关在饮食中增加的蛋白质含量的益处的有价值的结果。实际上，如图6和图7所示，可以观察到两项研究中饮食之间的富集模式非常不同。喂食包含25％蛋白质的饮食的狗表现出更高的蛋氨酸、赖氨酸和精氨酸的血液富集，确认更高的蛋白质摄入量导致更高的AA吸收率。然而，AA中的血液富集与AA供给的水平无直接关系。实际上，在喂食包含18％蛋白质的饮食的狗中，曲线仅显示精氨酸和蛋氨酸略有增加并且赖氨酸减少，而在喂食包含25％蛋白质的饮食的狗中，曲线表现出大幅增加。这一发现可以通过以下事实来解释：与喂食包含25％蛋白质的饮食的狗相比，喂食包含18％蛋白质的饮食的狗中的AA供给较低，同时在餐后期间对这些必需氨基酸的需求可能具有相同的幅度。因此，就包含18％的蛋白质的饮食而言，利用氨基酸库进行蛋白质合成的这一需求就蛋氨酸和精氨酸而言几乎未通过供应而得到补偿或者就赖氨酸而言未通过供应而得到补偿。
其中进行第二项研究的时期与其中进行研究的区域的极冷天气的时期一致。由于这些极端天气条件，狗难以保持体重。相比于喂食0％鸡肉的狗，在喂食14％和20％鸡肉的狗中观察到更好的体重保持(图8)。
结论
用来自第一项研究(实施例1)的真肉制成的粗磨食物中较高的蛋白质和脂肪消化率的相关观察结果在本研究中并不显著；这可能是由于真肉对总脂肪和蛋白质含量的贡献较少。然而，本研究表明，使用真肉允许更高的亚油酸脂肪酸摄入量，极有可能带来健康益处。
对前两项研究的结果的比较表明，提高粗磨食物中的蛋白质含量允许广泛地补偿餐后时期蛋白质合成对氨基酸的需求，因此以包含25％蛋白质的粗磨食物喂食狗可以确保在餐后时期实现更高的蛋白质合成，并更好地长期保持肌肉质量。
实施例3
前两项研究(实施例1和实施例2)的结果给出这样的视角：粗磨食物中总体蛋白质和脂肪质量的增加以及真肉含量的增加。这种质量的增加导致餐后时期用于蛋白质合成的氨基酸的消化率更高且利用率更高。
第三项研究的目的是评估由真肉制成的饮食的蛋白质和脂肪以及亚油酸脂肪酸含量的更高的消化率能否在两个需求非常高的时期期间提供健康益处：雌狗的妊娠期和哺乳期。
使用两种饮食对饲养员的妊娠期和哺乳期雌狗进行研究；一种饮食包含真肉作为动物蛋白质源，另一种饮食仅包含肉粉作为动物蛋白质源。利用健康参数间接测量饮食的质量。
在研究中生产两种饮食，它们的配方具有不同量的真肉。第一种饮食(饮食A)的100g产品中包含14％的真肉，第二种饮食(饮食B)不含真肉。
表1：饮食的组成
饮食被配制为满足或超过由FEDIAF指南制定的妊娠期、哺乳期和生长期的最低要求。饮食被配制成包含相同量(基于DM)的CP、脂肪、粗纤维、碳水化合物(CHO)和灰分。
在不同品种的研究中包括十二只雌狗(法国斗牛犬、卡林犬、英国斗牛犬、拉布拉多犬、狐狸犬)。该研究中使用的雌狗来自饲养员。它们大于一岁并且处于其第二发情期中。
测试设计基于美国饲料管理协会(AAFCO)的方案以证明妊娠期/哺乳期权利要求。将十二只雌狗分为两组，它们具有类似的年龄和品种分布；每组从妊娠第五周至哺乳期第一个月末喂食两种饮食中的一种，共持续两个月。在整个测试过程中，饮食是唯一的食品来源。
分别使用氧化水解和氨基酸分析仪分析饮食的完整AA和脂肪酸分布。
饲养员被要求每天跟踪其雌狗的食品消耗量，并且计算食品配给量以满足能量需求。饲养员被要求每周跟踪他们的雌狗的体重变化及粪便一致性，由此向他们提供了四点量表。分娩后，饲养员被要求每周跟踪幼崽小狗的体重变化。
评估的主要参数为：(a)BW变化(雌狗和小狗)，(b)食品摄入量(雌狗)，(c)哺乳期食品效率对小狗生长的影响，以及(d)乳汁组成(蛋白质，AA)。
表1：饮食分析
如图9所示，饮食之间的产品消化率未观察到显著的差异。
动物：采用5只雌狗完成试验(2只法国斗牛犬、1只边境牧羊犬、1只拉布拉多犬、1只长须Tchec犬)。饮食A组的产仔数为11只小狗(法国斗牛犬：7只小狗，边境牧羊犬：4只小狗)。饮食B组的产仔数为14只小狗(法国斗牛犬：4只小狗，拉布拉多犬：9只小狗，Tchec长须犬：1只小狗)。
妊娠后期的母亲体重(BW)变化在图10A和图10B所示。在数据处理中将Tchec长须犬排除在外，因为产仔数被认为过低(1只小狗)并且考虑到品种大小(大狗)在体重保持方面的“挑战性”不足。喂食饮食A的雌狗就体重保持而言，易于更好地应付妊娠晚期和哺乳晚期(例如，图11)。
如图12A和图12B所示，喂食饮食A时，小狗在哺乳期的生长速率更高。如图13所示，当小狗的体重增量相对于母亲的食品摄入量进行归一化时，饮食A更高效地促进体重增加，在哺乳后期尤其如此。
饮食A更有效地促进了小狗在哺乳期的生长。还存在的趋势是喂食饮食A时，妊娠期/哺乳期雌狗具有更好的体重保持。该结果可能是由于来自浆料的必需脂肪酸的含量更高，但是氨基酸的可用性也可能发挥一定作用。
考虑到研究涉及的雌狗的数量有限且品种和体重多样，因此需要谨慎对待这些结果。然而，在仅考虑来自同一饲养员的两只法国斗牛犬时，观察到相同的差异(图14A和图14B)。
饲养员使用三个参数对哺乳期雌狗的乳汁进行感官分析：半透明度、数量和总体质量(图15A-15C和图16)。饲养员对喂食饮食A的哺乳期雌狗的乳质评级更高。
为测定哺乳期雌狗的乳蛋白含量，饲养员在三个不同时期采集乳汁样本(第一周、哺乳中期和哺乳后期)。如图17所示，进食饮食A的哺乳期雌狗的蛋白质含量更高。
在仅关注来自同一畜舍的两只法国斗牛犬时，观察到乳蛋白含量存在明显差异。如图18所示，喂食饮食A的哺乳期雌性法国斗牛犬产生的乳汁中的蛋白质含量较高，而喂食饮食B的哺乳期雌性法国斗牛犬产生的乳汁中的蛋白质含量与公布的数据相一致，其中十只哺乳期比格犬在整个哺乳期中产生的乳蛋白在6.7％-9.6％范围内。进食饮食A的法国斗牛犬的这一更高的蛋白质含量可以解释小狗更快的生长速率。
如图19所示，喂食饮食A的雌狗的平均乳汁氨基酸分布明显不同于喂食饮食B的雌狗的分布，喂食14％浆料的雌狗中几种氨基酸的含量更高。乳汁中的氨基酸模式与饮食之间的相关性是饮食氨基酸可用性的间接征象。如图20A-20C所示，在不同的哺乳期，乳汁与饮食A之间的相关性很高(0.94至0.96)，说明来自饮食的氨基酸具有高可用性。在类似的膳食氨基酸分布下，饮食A比饮食B更高效地促进高质量乳汁，如相同膳食氨基酸含量下更高的乳汁氨基酸含量所示。这些相关性确认了第一项研究(实施例1)的结果，表明相比于家禽粉，浆料中蛋白质的质量更高并且氨基酸的可用性更好。
结论
该第三项研究确认以肉浆配制的狗粮比不用浆料配制的饮食具有更好的营养性能。在具有挑战性的长期喂食试验中，基于浆料的饮食在乳汁生产量和质量、哺乳期雌狗的体重保持以及哺乳小狗的良好生长速率方面表现出更出色的性能。这些效应最有可能是由亚油酸和必需氨基酸均具有高可用性引起的。
应当理解，对本文所述的目前优选的实施方案作出的各种改变和修改对于本领域的技术人员将是显而易见的。可在不脱离本发明主题的实质和范围且不削弱其预期优点的前提下作出这些改变和修改。因此，这些改变和修改旨在由所附权利要求书涵盖。

Claims (20)

1.生产食品组合物的方法，所述方法包括：
由鲜肉或冻肉形成肉浆；
将所述肉浆添加至成分的干混物中以形成混合物，其中所述肉浆占所述混合物的约14％至约30％；
对所述混合物进行挤出烹饪以形成挤出物；以及
加工所述挤出物以形成所述食品组合物。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述肉浆的形成包括对所述鲜肉或冻肉进行粉碎并且用直接蒸汽喷射在约71℃或更低温度下烹饪所述粉碎的鲜肉或冻肉。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述肉浆的形成包括乳化喷射蒸汽的肉。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述混合物包含约18％至约30％的蛋白质。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述干混物包含全谷物。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述干混物包含纤维。
7.根据权利要求1所述的方法，其中在预处理器中将所述肉浆添加至所述的成分的干混物中，并且将所述混合物从所述预处理器给料至执行所述挤出烹饪的挤出机。
8.根据权利要求7所述的方法，其中所述挤出烹饪在所述挤出机中于105℃至130℃的温度、250psi至500psi的压力下执行小于40秒的时间段。
9.根据权利要求1所述的方法，其中所述挤出物的所述加工包括将所述挤出物切割成片并且干燥所述片。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述片的所述干燥将所述片的含水量减少至约6％至约9％的水分。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述挤出物的所述加工包括用动物脂肪或动物消化物中的至少一者涂覆所述干燥的片。
12.干燥宠物食品组合物，所述干燥宠物食品组合物包含约14％至约30％的并非肉粉的肉。
13.根据权利要求12所述的干燥宠物食品组合物，所述干燥宠物食品组合物具有约18％至约30％的蛋白质含量。
14.根据权利要求13所述的干燥宠物食品组合物，其中所述蛋白质含量完全由所述肉浆和选自植物蛋白质、肉粉以及它们的组合的蛋白质源提供。
15.根据权利要求12所述的干燥宠物食品组合物，其中所述并非肉粉的肉通过由包括下列步骤的方法制备所述干燥宠物食品组合物来提供：对鲜肉或冻肉进行粉碎，用直接蒸汽喷射烹饪所述粉碎的鲜肉或冻肉，乳化所述喷射蒸汽的肉以形成浆料，并且将所述浆料添加至一种或多种其它成分中。
16.相对于初始干燥宠物食品配制物而言改善必需脂肪酸或必需氨基酸中的至少一者的生物利用率的方法，所述初始干燥宠物食品配制物包含肉粉，所述肉粉提供所述初始干燥宠物食品配制物的蛋白质含量的至少一部分，所述方法包括：
调整初始干燥宠物食品配制物以将所述肉粉的至少一部分替代为由并非肉粉的肉提供的肉，经调整的干燥宠物食品配制物具有的蛋白质含量约等于所述初始干燥宠物食品配制物的蛋白质含量；以及
生产经调整的干燥宠物食品配制物的粗磨食物。
17.根据权利要求16所述的方法，其中所述初始干燥宠物食品配制物包含非肉成分，并且所述经调整的干燥宠物食品配制物相对于所述初始干燥宠物食品配制物具有相同量的所述非肉成分。
18.改善出生后两年期间狗的生长的方法，所述方法包括在狗妈妈孕育所述狗期间向所述狗妈妈施用包含约14％至约30％的并非肉粉的肉的干燥食品组合物。
19.改善小狗的生长的方法，所述方法包括通过向所述小狗的哺乳期妈妈施用包含约14％至约30％的并非肉粉的肉的干燥食品组合物而向所述小狗施用必需氨基酸和必需脂肪酸。
20.改善妊娠期和/或哺乳期狗的体重保持的方法，所述方法包括向所述妊娠期或哺乳期狗施用包含约14％至约30％的并非肉粉的肉的干燥食品组合物。
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