CN107397805B - 改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物及制备方法，其中组合物，包括植物材料的活性提取物,所述活性提取物选自:马齿笕、傩公藤、蓝布正中的至少一种活性提取物，本发明的组合物对于口腔内的创口，炎症进行药物清创,抗创口处的口腔细菌感染，收敛和缩小创口或伤口，具有强力抗炎消肿,减少疼痛的作用。

Description

改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物及制备方法

技术领域

本发明涉及改善口腔卫生和预防和治疗口腔疾病的日化和医疗产品,如牙膏、凝胶、漱口液、牙线、口嚼胶(chewinggum)、口腔用药等领域,用于牙齿清洁和口腔疾病的预防及治疗，具体涉及改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物及制备方法。

背景技术

如下公开仅为帮助阅读者进行理解。所提供的信息或引用的参考文献均不视为本发明的现有技术。口腔健康包括口腔粘膜、牙龈、牙齿的健康,对人的全身健康非常重要。报道称,口腔健康不佳和全身疾病,如心脏病、糖尿病和一些呼吸道疾病存在密切相关。口腔疾病,包括蛀牙、口腔粘膜溃疡、糜烂、牙龈出血、牙龈炎、牙周炎、牙龈萎缩、和牙骨质流失等等。

龋齿(蛀牙)是仅次于感冒的最常见疾病之一,在中国,儿童患病率为80-90％,老年人患病率为90％以上。龋齿是一种口腔疾病,其中主要是变形链球菌(Streptococcusmutans)和乳酸杆菌(Lactobacillus)在内的致病细菌能够将残留在牙齿上的食物残渣中的碳水化合物代谢为弱酸,从而使牙齿脱钙,逐步分解坚硬的牙齿结构,导致龋齿。

口腔溃疡也是常见的口腔疾病,这通常由口腔创伤和微生物感染所致。口腔溃疡包括小(直径2-8mm)、大(直径>8mm)和疱疹样溃疡(多发性溃疡),口腔溃疡是常见的疾病,大约至少有20％的人群患此病。尽管大多数人只是偶尔患口腔溃疡,但有些人却患复发性口腔溃疡多年。

牙龈是牙齿周围的软组织,它呈珊瑚粉色,质地紧密并会紧密支撑和密封每颗牙齿。

牙龈出血,主要由在牙龈线上形成并累积硬化的牙菌斑(牙石)造成,用牙刷和牙线清洁牙齿不当也可导致牙龈出血。为预防和阻止牙龈出血,必须预防细菌生长,清除牙菌斑以及牙菌斑在牙齿和牙龈上的沉积。

牙骨质流失指牙齿骨质流失和牙槽骨质流失,这主要由牙龈疾病所致。

牙龈萎缩是40多岁以上成人常见的状况,通常由于使用牙刷或牙线不当或牙周疾病所致。细菌的繁殖会导致牙菌斑形成,并在牙齿之间积聚,使牙齿和牙龈之间形成楔子(wedge)。虽然预防及治疗牙龈萎缩对维持口腔卫生至关重要,然而现在没有任何产品可以使牙龈组织变强韧或再生来修复萎缩的牙龈。

发明内容

为了解决上述不足的缺陷，本发明提供了改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物及制备方法，可用于改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病。

本发明提供了改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物，包括植物材料的活性提取物,所述活性提取物选自:马齿笕、傩公藤、蓝布正中的至少一种活性提取物。

上述的组合物，其中，包括口腔用可接受的载体和植物材料的活性提取物,所述活性提取物选自:马齿笕、傩公藤、蓝布正。

上述的组合物，其中，所述口腔用可接受的载体包括霜类、膏类、凝胶、泡沫、粉末、溶液、喷雾、饮料、混合饮料、糖果、含片、漱口水、牙膏、含漱剂和胶类。

上述的组合物，其中，所述活性提取物通过低加成数脂肪醇溶剂进行提取。

上述的组合物，其中，用于龋齿、牙龈出血、口腔或牙龈肿痛、口腔炎症、口腔溃疡、牙龈炎或牙周炎、牙龈萎缩、口臭、牙及牙槽骨的骨质流失、牙齿松动或牙齿脱落的预防或治疗。

上述的组合物，其中，组合物的有效量范围在0.001～100mg/公斤体重/日；每周、每两周或每三周的施用药剂的剂量范围可为0.01-10000mg/公斤体重。

上述的组合物，包括马齿笕、傩公藤、蓝布正的活性提取物，其中组合物中含有马齿笕、傩公藤、蓝布正的活性提取物的重量比例为3:1:2。

上述的组合物，所述植物材料的活性提取物是该三种植物的低加成数脂肪醇溶剂提取物，其中低加成数脂肪醇有1-6个碳原子。

另一方面，本发明提出的改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物的制备方法，包括以下步骤：

马齿笕、蓝布正、傩公藤的活性提取物的分离；

将马齿笕、蓝布正、傩公藤分别经洗涤、干燥并切成小块；

将上述干燥之后的马齿笕、蓝布正、傩公藤分别在60℃浸泡于浓度70％以上的乙醇中，然后超生破壁1-5小时,再加入水使乙醇浓度达到50-70％；

在50-70℃再分别提取所述马齿笕、蓝布正、傩公藤达4-8小时,重复1-5次；

将提取液过滤,电喷雾干燥制备出从马齿笕、蓝布正、傩公藤提取的三种粉末即得到马齿笕、蓝布正、傩公藤的活性提取物；

将得到的马齿笕、蓝布正、傩公藤的活性提取物与口腔用可接受的载体进行混合即得到改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物。

本发明具有以下优点：1、本发明中三种可食用植物马齿笕、蓝布正、傩公藤的活性提取物,可有效地治疗多种口腔疾病；2、对于口腔内的创口，炎症进行药物清创,抗创口处的口腔细菌感染，收敛和缩小创口或伤口，强力抗炎消肿,减少疼痛。3、三种活性提取物的混合物具有比任何单一活性提取物，或者两种活性提取物的混合物都更有效地预防和治疗口腔疾病，更有效地治疗牙龈出血、口腔溃疡、牙龈炎、牙周炎、修复病变牙龈，改善牙龈萎缩，甚至使松动牙齿再固定，增强牙齿咀嚼力，以及增强健康牙龈组织的再生，并且对慢性咽喉炎，也有显著地疗效，甚至可以使衰老变软的悬雍垂重新恢复韧性和弹性。4、三种活性提取物的混合物可以比任何单一和两两组合物更有效地减少或消除牙菌斑，从而减少或消除口气和牙石的形成、预防并治疗龋齿、牙龈出血、口腔溃疡、牙龈肿痛、牙龈炎、牙周炎、牙龈萎缩和骨质流失，以及非常有效地治疗拔牙或者口腔外科手术或者外伤造成的口腔组织损伤。

具体实施方式

在下文的描述中，给出了大量具体的细节以便提供对本发明更为彻底的理解。然而，对于本领域技术人员而言显而易见的是，本发明可以无需一个或多个这些细节而得以实施。在其他的例子中，为了避免与本发明发生混淆，对于本领域公知的一些技术特征未进行描述。

为了彻底理解本发明，将在下列的描述中提出详细的步骤以及详细的结构，以便阐释本发明的技术方案。本发明的较佳实施例详细描述如下，然而除了这些详细描述外，本发明还可以具有其他实施方式。

应理解下文以各级细节描述本发明的某些方面、模式、实施方案、变化和特点,从而有助于实质性理解本发明。除非上下文另外说明,如下所述的术语可在全文使用。

如本文所用,给一或多名受试者“施用”药剂(agent)或药物,包括向受试者引入或递送一种化合物或化合物组合以发挥其预定功能的所有途径。施用可用任何合适途径进行,包括经口、鼻内、胃肠外(静脉内、肌内、腹腔内或皮下)、由直肠或局部。施用包括自我施用及由他人施用。

本文所用术语组合物的“有效量”、“药物有效量”或“治疗有效量”,是足以达到所需治疗和/或预防效果的量,例如,预防或减少所治疗疾病相关症状的量。给受试者施用的组合物量取决于疾病的类型和严重程度以及个体特征,如一般健康、年龄、性别、体重和耐药性。它还取决于疾病的程度、严重程度和类型。熟练的技术人员能够根据这些及其他因素来确定合适的剂量。本发明的组合物还可以结合一或多种其他治疗性化合物一起施用。

本文所用术语“疾病”或“医疗状况”可以互换使用,它们包括但不限于表现出一或多种希望能够治疗和/或预防的身体和/或心理症状的任何状况或疾病,其包括以前和新近发现的疾病和其他病症。例如,医疗状况可以是口腔疾病或状况,如牙龈炎、龋齿、口腔炎症、牙周炎、慢性咽喉炎或者悬雍垂退行性变。

本文所用术语“受试者”包括任何哺乳动物受试者,如人,但也可以是动物,例如家畜(如狗、猫等),农场动物(如牛、羊、猪、马等)和实验室动物(如猴子、大鼠、小鼠、兔子、豚鼠等)。

本文所用术语“治疗(treating)”、“处理(treatment)”或“缓和(alleviation)”既指治疗性处理也指预防性或预备性(preventative)措施,其目的是为了防止或减缓(减轻)目标病理状况或病症。如果根据本发明方法给予受试者治疗剂后,其特定疾病或状况的一或多种体征和症状出现可观察到和/或可测量的减轻或者不再存在的话,表明该受试者的病症得到了成功“治疗”。

本文所用的“预防”或“防止”病症或状况是指,在统计样本中,化合物使处理组样本的病症或状况发生率相对未经处理的对照样本下降,或相对未经处理的对照样品,使所述病症或状况的一或多种症状的发病推迟或严重程度下降。

本发明提供了用药剂和/或提取物以及化合物和这些化合物的衍生物治疗或预防口腔疾病或状况的方法,其来自各种植物材料,包括马齿笕、蓝布正、傩公藤。在一些实施方案中,所述药剂分别是马齿笕、蓝布正、傩公藤的有机提取物。在特定的实施方案中,所述药剂分别为马齿笕、蓝布正、傩公藤的甲醇或乙醇提取物或其活性级分(fraction)。本发明的药剂可能是含一或多种赋形剂、载体或填料的药物组合物的一部分。在一个实施方案中,该药物组合物包装在牙膏中。所述牙膏在给有需要的受试者施用时可有效改善多种口腔疾病或状况。

本发明提供了改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物，其中包含口腔用可接受的(orally acceptable)载体和有效量的植物材料的活性提取物,植物材料选自如下植物组成:马齿笕(PORTULACA OLERACEA)、傩公藤、蓝布正(Geumjaponicum thunb var.)的活性提取物。

在本发明而非限制性的实施例中，包括给有需要的受试者施用有效量的选自如下组成的植物材料的活性提取物的组合:马齿笕(PORTULACA OLERACEA)、傩公藤、蓝布正(Geumjaponicum thunb var.)的活性提取物。为了有效治疗或预防口腔疾病,我们从多种可食用植物和中草药中筛选出有效组分。

在本发明而非限制性的实施例中，包括以下三种可食用植物包括(1)：马齿笕、蓝布正、傩公藤的活性提取物,可有效地治疗多种口腔疾病；不受理论所限,该活性提取物可发挥多种强有力的作用:对于口腔内的创口，炎症进行药物清创,抗创口处的口腔细菌感染，收敛和缩小创口或伤口，强力抗炎消肿,减少疼痛。更重要的是,此三种活性提取物的一定比例混合物具有比任何单一活性提取物，或者两种活性提取物的混合物都更有效地预防和治疗口腔疾病，更有效地治疗牙龈出血、口腔溃疡、牙龈炎、牙周炎、修复病变牙龈，改善牙龈萎缩，甚至使松动牙齿再固定，增强牙齿咀嚼力，以及增强健康牙龈组织的再生，并且有效治疗慢性喉炎，或者恢复衰老引起的悬雍垂韧性和弹性降低。此三种活性提取物的比例混合物可以比任何单一和两两组合物更有效地减少或消除牙菌斑，从而减少或消除口气和牙石的形成、预防并治疗龋齿、牙龈出血、口腔溃疡、牙龈肿痛、牙龈炎、牙周炎、牙龈萎缩和骨质流失，以及非常有效地治疗拔牙或者口腔外科手术或者外伤造成的口腔组织损伤。

在本发明而非限制性的实施例中，口腔健康和口腔疾病治疗组合物包含口腔用可接受的载体和有效量的植物材料的活性提取物。在一个实施方案中,所述口腔用可接受的载体选自如下组成的组:霜类(cream)、膏类(ointment)、凝胶、泡沫、粉末、溶液、喷雾(spray)、饮料(drink)、混合饮料(drinkmix)、糖果、含片(lozenge)、漱口水(mouthwash)、牙膏、含漱剂(gargle)和胶类(gum)。在一个实施方案中,所述口腔用可接受的载体选自如下组成的组:漱口水、漱口剂(mouthrinse)、牙膏、口腔护理凝胶贴片(gelstrips)、含片、牙线和胶类。

在本发明而非限制性的实施例中，马齿笕、蓝布正、傩公藤的活性提取物分别是这些植物的低加成数脂肪醇溶剂提取物。在一个实施方案中,所述低加成数脂肪醇有1-6个碳原子。在一个实施方案中,所述溶剂是乙醇。在一个实施方案中,所述溶剂是甲醇。

在本发明而非限制性的实施例中，提供了预防或治疗口腔疾病或状况的方法,该方法包括给有需要的哺乳动物施用有效量的口腔用可接受的载体和植物材料的活性提取物,所述植物材料选自如下植物组成:马齿笕、蓝布正、傩公藤。在一个实施方案中,所述施用是口腔施用。

在本发明而非限制性的实施例中，口腔疾病或状况是龋齿。在一个实施方案中,所述口腔疾病或状况是牙龈出血。在一个实施方案中,所述口腔疾病或症状是牙龈和口腔或牙龈肿痛。在一个实施方案中,所述口腔疾病或状况是口腔炎症。在一个实施方案中,所述口腔疾病或状况是口腔溃疡。在一个实施方案中,所述口腔疾病或状况是牙龈炎或牙周炎。在一个实施方案中,所述口腔疾病或状况是牙龈萎缩。在一个实施方案中,所述口腔疾病或状况是口臭。在一个实施方案中,所述口腔疾病或状况是牙及牙槽骨的骨质流失。在一个实施方案中,所述口腔疾病或状况是年龄相关的牙齿松动或牙齿脱落。在一个实施方案中,所述疾病或状况是年龄相关的悬雍垂退行性变。在一个实施方案中,所述疾病或状况是慢性喉炎。

在本发明而非限制性的实施例中，马齿笕、蓝布正、傩公藤的活性提取物,以及药物或口腔用可接受的载体或赋形剂，包括但不限于,口腔用药和口腔护理产品,如漱口水、漱口剂(rinses)、牙膏、口腔护理凝胶贴片、牙科用胶(dentalgums)、药片、含片等。

在本发明而非限制性的实施例中，多个方面提供了提取物,以及预防或治疗口腔疾病的方法。提取物可配制成口腔护理产品。本发明还提供了提取物在制备药物配制剂和药物中的用途。

本发明的另一面，改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物的制备方法，包括以下步骤：

马齿笕、蓝布正、傩公藤的活性提取物的分离；

将马齿笕、蓝布正、傩公藤分别经洗涤、干燥并切成小块；

将上述干燥之后的马齿笕、蓝布正、傩公藤分别在60℃浸泡于浓度70％以上的乙醇中，然后超生破壁1-5小时,再加入水使乙醇浓度达到50-70％；

在50-70℃再分别提取所述马齿笕、蓝布正、傩公藤达4-8小时,重复1-5次；

将提取液过滤,电喷雾干燥制备出从马齿笕、蓝布正、傩公藤提取的三种粉末即得到马齿笕、蓝布正、傩公藤的活性提取物；

将得到的马齿笕、蓝布正、傩公藤的活性提取物与口腔用可接受的载体进行混合即得到改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物。

在本发明而非限制性的实施例中，上述的改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物的制备方法，具体包括：包括步骤(a)用选自由C1-C4醇类和水组成的醇水溶液(35-90％醇水溶液)在50-65摄氏度水浴下来分别提取植物。此步骤可以在室温重复1-5次。在进行步骤(a)前,植物材料可能被切成小块或者打成粉末。这些C1-C4醇类包括甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇和叔丁醇。通常,以待提取干燥植物重量的3-10倍来添加醇水溶液；

还可包括步骤(b)：将从步骤(a)获得的提取物喷雾干燥为粉末；步骤(c)：接着用C6烷烃、EtOAc和选自由C1-C4醇类组成的醇，在50-65摄氏度水浴下来提取自步骤(b)获得的粉末。所述C6烷烃包括有6个碳原子的环烷烃和非环烷烃,包括例如环己烷、正己烷和新己烷等。所述C1-C4醇类包括甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇和叔丁醇。所用有机溶剂量通常为要继续提取的粉末重量的3-10倍。

在本发明而非限制性的实施例中，还包括过滤所述提取物以去除任何其中的不溶性粉末。在降低的压力下,50-65摄氏度水浴下完成浓缩步骤，具体为通过用水和/或有机溶剂,从粗制植物材料,提取获得本发明的提取物和级分,其包括如下步骤:

通过将有机溶剂溶液分别加入干燥植物材料,浸渍(maceration)/浸滤(lixiviation)、超声破壁3小时,然后加入水达到所需要水-醇溶液的比例，如60％的醇-水溶液，来进行提取5个小时，3次，各步骤的温度均控制在60摄氏度；将粗提取物在60摄氏度下浓缩，然后电喷雾干燥成粉末；用石油醚、己烷或氯仿类溶剂将粉末进行脱脂(delipidation)；用正丁醇类有机溶剂回收的提取物；在低压、60摄氏度温度下浓缩；干燥成粉末(冻干，或者喷雾干燥)。

本领域的熟练技术人员可根据所需的纯化提取物性质,来选择最适当的一或多种溶剂。这些不同的提取物,即粗制或浓缩的,也落入本发明的范围。通过实施其他的分离步骤,可以分离富集了一或多种化合物的提取物。通过使用适当溶剂的混合物,根据适用于所需分离的比例,可在从粗制提取物富集的级分上或在粗制提取物自身上进行这些分离步骤。

本发明中提供了治疗或预防有需要的受试者的口腔疾病或状况的方法,其包括给所述受试者施用有效量的本文所述化合物、组合物、级分或提取物。一方面,预防或治疗口腔疾病或状况的方法包括给有需要的哺乳动物施用来自多种植物的级分、和/或提取物,所述植物包括马齿笕、蓝布正、傩公藤。在一些实施方案中,所述提取物是分别从马齿笕、蓝布正、傩公藤获得的有机提取物。

在多种实施方案中,给受试者施用含所述活性提取物的漱口水、漱口剂、牙膏、口腔护理凝胶贴片、含片、或胶类。例如,本发明的牙膏可以用于口腔和牙齿的方式来使用。用本发明牙膏刷牙可减少牙菌斑形成和牙龈炎的发生,并可用于治疗或预防本文公开的口腔疾病或状况。

在本发明的多种实施方案中,进行合适的体外或体内试验来测定本发明的药剂(提取物、级分和化合物)的作用,并确定其施用是否针对治疗或预防受试者的口腔疾病。在一些实施方案中,蛀牙的体内模型可用来评估药剂对受试者的作用。探究该药剂在介导动物受试者中的口腔疾病中的作用,并与合适对照进行比较。

本发明的组合物的配制和剂量

根据一个实施方案中,可将所述活性提取物掺入适于口腔施用的药物组合物。在一些实施方案中,所述药物组合物可包含马齿笕、蓝布正、傩公藤的纯化的或基本纯化的提取物以及药物可接受的载体,其呈适合施用给受试者的形式。在其他实施方案中,所述药物组合物可包含药物可接受的载体,这由所施用的特定组合物及用于施用该组合物的特定方法来部分决定。因此,施用所述化合物组合物的药物组合物有多种合适的配制剂(见例如Remington’sPharmaceuticalSciences,MackPublishingCo.,Easton,PA18thed.,1990)，术语“药物可接受的”、“生理耐受的”及其语法变体,在指组合物、载体、稀释剂和试剂时可交替使用,并表示所述材料能够施用给受试者,而不会使产生的不良生理效应达到禁止施用该组合物的程度。例如,“药物可接受的赋形剂”指赋形剂对于制备通常安全、无毒、理想的药物组合物是有用的,其包括对于兽医使用和人用药物用途可接受的赋形剂。这样的赋形剂可以是固态、液态、半固态、或对于气溶胶组合物而言的气态。“药物可接受的盐类和酯类”指药物可接受并具有理想药理特性的盐类和酯类。本发明指名的药剂可以不成盐或未酯化形式、或以成盐和/或酯化形式存在,并且此成盐的命名应包括原来的(不成盐和未酯化)化合物及其药物可接受的盐类和酯类。同时,本发明指名的某些药剂可以一种以上立体异构形式存在,而且所述药剂的命名应包括所有的单个立体异构体和这样的立体异构体的所有混合物(不管是外消旋还是其他)。本领域普通技术人员可毫不困难地决定施用本发明特定药物和组合物的适当时机、顺序和剂量。还可以用液体载体制备口腔用组合物作为漱口水,其中在液体载体中的所述化合物是经口应用并含漱(swish)并咯出(expectorate)或咽下。其中可以包含药物相容的粘结(binding)化合物和助剂材料作为组合物成分。药片、药丸、胶囊、锭剂(troche)等可以包含任何如下成分,或者性质相近的化合物:粘结剂如微晶纤维素、黄蓍胶(gumtragacanth)或明胶；赋形剂如淀粉或乳糖,崩解剂化合物如海藻酸、甘醇酸淀粉钠(Primogel)或玉米淀粉；润滑剂如硬脂酸镁或Sterotes；助流剂如胶体二氧化硅；甜味化合物如蔗糖或糖精；或调味化合物如薄荷味、水杨酸甲酯、或橙味调味品(orange flavoring)。

在一个实施方案中,所述活性提取物配制成牙膏。在本发明牙膏的配制过程中,将选自马齿笕、蓝布正、傩公藤组成的组的活性植物提取物掺入口腔用可接受的牙科载体,其可以是无水的但优选是含水的口腔用可接受的牙科载体。在一个实施方案中,将所述活性植物提取物掺入载体来形成可用作牙膏的存储稳定的半固体可挤出材料。常见的口腔用可接受的牙科载体包含粘结剂或增稠剂(thickener),如天然和合成的胶类(gums),例如黄原胶、卡拉胶(carageenates)、海藻酸盐、纤维素醚类和酯类、二氧化硅(silica)等。配制含水的口腔用可接受的牙科载体时,可应用合适的湿润剂(humectant),如甘油、山梨醇、丙二醇或聚乙二醇。另外,所述口腔用可接受的牙科载体可包括任选成分,如洗涤剂、维生素、调味剂、甜味剂、防牙菌斑药剂(anti-calculusagent)、牙齿脱敏剂、着色剂、防腐剂和色料(pigment)。有用的洗涤剂包括烷基部分有10-18个碳原子的烷基硫酸盐的水溶性盐,如十二烷基硫酸钠,但也可使用其它阴离子洗涤剂以及非离子的、两性离子的、阳离子的和两性的洗涤剂。有用的防牙菌斑药剂包括水溶性碱金属聚磷酸盐,如三聚磷酸钠等,以及需要的话,合成的阴离子线性聚合性聚羧酸盐,其分子量为约2000至约1000,000。本发明牙膏可制备为单色膏状或条状牙膏形式。

通常,足以实现治疗或预防效果的本发明组合物的有效量范围在约0.001～100mg/公斤体重/日。每周、每两周或每三周的施用药剂的剂量范围可为约0.01-1000mg/受试者公斤体重,更加常为0.1-10000mg/受试者公斤体重。施用剂量可随处理是预防还是治疗目的而改变。预防性应用中施用相对较低的剂量。治疗性应用中需要相对高的剂量,直至疾病进展(progression)减缓或终止,优选直至受试者表现出部分或完全的疾病症状改善。

本发明提供以下实施例来进一步阐述本发明。

实施例1.分离马齿笕、蓝布正、傩公藤的活性提取物；

对于在如下实施例公开的实验,从植物马齿笕、蓝布正、傩公藤获得活性提取物。所述植物在五月至九月间收集自中国山西省和贵州省,太白县。所述植物经洗涤、干燥(10kg)并切成小块。将这些植物的干燥小块在60℃浸泡于浓度大于98％乙醇中(60L)，超生破壁3小时,再加入适量的水使乙醇浓度达到60％(1:10w/v)。在60℃再提取所述植物达6小时,重复三次。将三次提取液过滤,电喷雾干燥制备出从上述三种植物提取的三种粉末,每种都用作活性成分来制备三种不同牙膏,或者分别两种不同的组合，或者三种不同比例的组合做成数种不同的牙膏，即用于试验的样本牙膏。

实施例2.活性提取物抑制或者对抗口腔细菌生长,从而有效预防龋齿发生的作用，口腔存在食物残渣、细胞碎片和排放物,从而可以提供多种口腔细菌生长繁殖的所需要的营养物质。细菌主要包括变形链球菌、乳酸杆菌、葡萄球菌、棒状杆菌和大量厌氧菌。龋齿主要由细菌如乳酸杆菌(Lactobacillusspp.)、变形链球菌、放线菌(Actinomycesspp.)的酸性代谢产物所引起。这些细菌通常生活在口腔中,靠碳水化合物为食。这些细菌在口腔里和牙齿上形成粘腻的生物膜包被层(牙菌斑)。在早上刷牙前很明显,会导致口臭。这层清晰可见粘腻的牙菌斑中包含这些产酸的细菌,使牙齿表面酸性物质沉积，达到高水平酸度。所述酸会破坏牙釉质，并使牙齿脱钙,导致龋齿。细菌培养抑菌实验表明以上三种提取物均有显著地抑制口腔细菌生长的作用，而三种活性提取物的比例混合((M321：马齿笕3，蓝布正2，傩公藤1)的抑菌效果最为显著，其中M321表示马齿笕、蓝布正、傩公藤的活性成分以3：2:1的比例进行混合的混合物。结果表明,组合物中含有0.1％的M321就能显著降低变形链球菌与牙齿表面的粘附。本研究测试了M321对口腔细菌生长的抑制作用。用在牙膏、洗发水、化妆品和身体护理产品中广泛应用的商业化防腐剂,比如0.2％苯甲酸、0.2％氯己定、0.4％对羟基苯甲酸酯、0.3％三氯生、0.15％山梨酸钾,用作阳性对照。

用牙科用牙签来收集取自牙间隙的口腔细菌样本,样本来自16名正常受试者(8男8女)。口腔中的人类口腔唾液是由水、氨基酸类、蛋白质类、脂质、碳水化合物和一些无机物组成,因此它适于细菌生长。在牙齿和牙龈表面形成的细菌斑主要包含厌氧性螺旋体细菌和弧菌(逗号形细菌)、葡萄球菌、乳酸杆菌、链球菌(特别是变形链球菌)和龋齿放线菌(Actinomycesodontolyticus)。本实验旨在探究M321对口腔细菌生长的抑制作用。将样品牙签分别无菌划线接种在甘露醇盐琼脂(MSA)平板上。在37℃培养接种的平板。

MSA平板只含上述防腐剂之一(0.2％氯己定、0.2％苯甲酸、0.4％对羟基苯甲酸酯、0.3％三氯生、0.15％山梨酸钾),其浓度是根据国家监管机关的推荐,用作阳性对照。对于每个培养受试对象,测定分批培养物中的M321的最大抑制稀释度(MID)。所有这五种防腐剂都已公开了其预防菌斑和抑制细菌的作用。因此,本研究的目的在于将这五种商业化的防腐剂与不同浓度的M321进行比较,比较它们对在龋齿和牙龈炎的发生中起重要作用的口腔细菌生长的抑制作用。

在37℃培养箱中培养样本培养物,把培养的细菌密度达到介于0.5x10⁹到1x10⁹细胞/ml的密度时,用于接种含各种防腐剂或多个浓度M321的次级培养物。通过分别计数培养平板上的细菌菌落,来确定现有的5种防腐剂和M321对于自不同受试者获得的口腔细菌的生长抑制作用。

如表1所示，结果显示,在M321的浓度为0.05％,其处理的培养物中观察到的细菌菌落数与在上述常用的5个防腐剂(在上述国家推荐浓度下)-处理的口腔细菌培养物中观察到的菌落数相当。然而，当M321浓度达到0.1％时,被处理的样本的菌落数减少了约50％。当用0.5％的M321处理培养物时,只观察到不足5个细菌菌落。当M321浓度为1％或更高时,几乎观察不到细菌菌落。而在含有国家推荐浓度的上述5种防腐剂的培养平板上,全视野中铺满了口腔细菌菌落。我们进一步测试了M321在液体细菌培养物中，对从患口腔炎的受试者获得的口腔细菌生长抑制作用。

表1

参照表1所示，显示了M321对人类口腔细菌生长的抑制作用。a-e为推荐浓度的五种所选防腐剂:0.2％氯己定(a)、0.2％苯甲酸(b)、0.4％对羟基苯甲酸酯(c)、0.3％三氯生(d)、0.15％山梨酸钾(e)。实验样分别含0.05％(i)、0.1％(ii)、或0.5％(iii)M321的培养基,显示M321对口腔细菌生长的较强的、剂量依赖性抑制作用，在M321的浓度为0.05％,其处理的培养物中观察到的细菌菌落数与在上述常用的5个防腐剂(在上述国家推荐浓度下)-处理的口腔细菌培养物中观察到的菌落数相当。然而，当M321浓度达到0.1％时,被处理的样本的菌落数减少了约50％。当用0.5％的M321处理培养物时,只观察到5个细菌菌落。当M321浓度为1％或更高时,几乎观察不到细菌菌落。而在含有国家推荐浓度的上述5种防腐剂的培养平板上,全视野中铺满了口腔细菌菌落。我们进一步测试了M321在液体细菌培养物中，对从患口腔炎的受试者获得的口腔细菌生长抑制作用。

参照表2-表7所示，患口腔炎症的受试者在晚上刷牙,并在转天早晨用含10％FBS的1640培养基漱口。将此漱口物质(rinse)转移到24孔培养平板上,每孔含1ml的漱口物质。将多种浓度的上述5种防腐剂和M321分别以三个平行孔的方式加入孔中,并在37℃温箱温育平板。在37℃培养18小时后,观察到M321(0.05％、0.1％、0.2％、0.5％和1％)对取样的口腔细菌生长有剂量依赖性抑制作用。与此相比,尽管观察到这些所选防腐剂(0.05-0.3％氯己定；0.05-0.3％苯甲酸；0.1-0.5％对羟基苯甲酸酯；0.05-0.4％三氯生和0.05-0.2％山梨酸钾)对口腔细菌生长有弱的剂量依赖性抑制作用,这些防腐剂对口腔病原菌的抑菌作用较弱,在国家推荐的防腐剂浓度下只达到15-30％的生长抑制作用。

表2 M321对取样的口腔细菌生长有剂量依赖性抑制作用情况

有效成份	抑制作用
		M3210.05％(i)	20％
M3210.1％(ii)	50％
		M3210.2％(iii)	70％
M3210.5％(iv)	90％
		M3211％(v)	95％
未处理的对照的培养基(vi)	0％

表3 氯己定对取样的口腔细菌生长有剂量依赖性抑制作用情况

有效成份	抑制作用
		氯己定0.05％(i)	12％
氯己定0.1％(ii)	15％
		氯己定0.15％(iii)	22％
氯己定0.2％(iv)	33％
		氯己定0.3％(v)	54％
未处理的对照的培养基(vi)	0％

表4 苯甲酸对取样的口腔细菌生长有剂量依赖性抑制作用情况

有效成份	抑制作用
		苯甲酸0.05％(i)	17％
苯甲酸0.1％(ii)	18％
		苯甲酸0.15％(iii)	28％
苯甲酸0.2％(iv)	37％
		苯甲酸0.3％(v)	46％
未处理的对照的培养基(vi)	0％

表5 对羟基苯甲酸酯对取样的口腔细菌生长有剂量依赖性抑制作用情况

有效成份	抑制作用
		对羟基苯甲酸酯0.1％(i)	6％
对羟基苯甲酸酯0.2％(ii)	17％
		对羟基苯甲酸酯0.3％(iii)	31％
对羟基苯甲酸酯0.4％(iv)	45％
		对羟基苯甲酸酯0.5％(v)	57％
未处理的对照的培养基(vi)	0％

表6 三氯生对取样的口腔细菌生长有剂量依赖性抑制作用情况

有效成份	抑制作用
		三氯生0.05％(i)	6％
三氯生0.1％(ii)	16％
		三氯生0.2％(iii)	25％
三氯生0.3％(iv)	37％
		三氯生0.4％(v)	45％
未处理的对照的培养基(vi)	0％

表7 山梨酸钾对取样的口腔细菌生长有剂量依赖性抑制作用情况

参照表2-表7所示，对比之下,尽管0.05％M321处理的细菌培养物对于培养物中的细菌生长只显示了约10-30％的抑制作用,效果相当于国家推荐浓度的所选防腐剂,而0.1-1％的M321抑制口腔病原菌的能力分别达到50％(0.1％的M321)、70％(0.2％的M321)、90％(0.6％的M321)以及95％以上(1％的M321)。此结果表明,M321对人类口腔细菌生长具有显著的抑制作用,其效果远远超过其它5种常用防腐剂。

众所周知防腐剂能引起多种副作用,因此在2009年,所包括的新国家标准只允许加入不超过0.3％的防腐剂。因此应优选浓度低但更有活性的防腐剂。M321是从天然可食用植物分级提取的,而且在较低浓度(0.03-0.1％)时就具有与上述推荐浓度的常用防腐剂相当的抑菌活性,以比被试常用防腐剂的国家推荐浓度低1/3-1/10的剂量就达到同等的抗口腔细菌效果,所以它被视为更安全的绿色抑菌剂。而且,当M321的浓度增加到上述常用防腐剂的国家推荐浓度的2/3或同等浓度时,其口腔细菌生长抑制效果比国家推荐浓度的被试防腐剂高3-10倍(表2所示)。这些结果提示,M321对人类口腔细菌生长有明显更强的抑制作用,与其它5种常用防腐剂相比更为安全。更重要的是,既然可食用植物的天然组合没改变,因此,含数百种不同天然化合物的浓度为0.1-1％的活性级分等同于浓度低数百倍的每种化合物。而且,所有可能的毒性试验都表明,给大鼠每日口腔施用500-5000mg/kg体重的M32160天,比0.5-5％M321牙膏的剂量高37500000-375000000倍,都不会对实验动物产生任何明显副作用。另外,我们还分别测试了含0.1-25％的M321的牙膏达1年以上,除了它对口腔疾病具有强力的多重治疗效果之外,未观察到任何不理想的或副作用。因此,M321牙膏不仅能替代不太有效的并易于产生可能的副作用的合成防腐剂,而且提供了对多种口腔疾病显著的治疗效果。

在本实施例中要说明的是：本实施例是组合物中含有马齿笕、蓝布正、傩公藤的活性提取物的重量比例为3:2:1，表示为M321，但是并不排除其他的配比方式，同理在本发明中其他的实施例也用该配比来说明。

实施例3.M321抑制口腔的牙菌斑形成

上述实施例2的体外研究证明了M321的口腔细菌生长抑制作用,这就预测了M321可能具有抑制牙菌斑形成的潜力。为证明这一点,募集20名受试者,在试验前除牙石并用橡胶轮给牙齿抛光,作为试验基线。在使用M321之前、当时(自使用牙膏起1-4周)及之后(牙膏用后6个月),分别给所有受试者都进行牙龈牙齿检查。每颗牙至少检查6个点。鉴于M321对除去牙上细菌斑并抑制菌斑形成的迅速作用,使用M321牙膏一周到六个月后,评价M321对去除菌斑和抗牙菌斑形成的有效性。菌斑指数(PLI)评价为0-5的等级(0＝无菌斑,1＝牙齿上散在的菌斑斑块,2＝薄而持续的菌斑带(band),3＝最多占牙三分之一的菌斑带,4＝最多覆盖牙三分之二的菌斑,5＝覆盖牙三分之二或更多牙冠的菌斑。菌斑记分＝所有记分总和除以(牙)记分的位点数。

被试组的人类受试者(n＝10,年龄为22-65岁)使用M321牙膏(2％)刷牙,而对照组的受试者(n＝10,年龄为23-61岁)使用相同但不含M321的牙膏刷牙,每日早晚各一次,每次刷牙至少3分钟。在应用被试牙膏前评价两组所有受试者的PLI,结果显示,PLI平均分别为约2.72±1.13(被试组)和2.68±1.16(对照组)(参照表8所示)。结果显示随着应用M321牙膏,被试组的PLI记分进行性下降(用后第1周为1.5±0.61,第2周为0.87±0.45,第4周为0.32±0.20)(p<0.001)。与此相比,对照组的PLI记分无显著改变(应用对照牙膏后第1周为2.60±1.18,第2周为2.43±1.23,第4周为2.39±1.09)。更显著的是,在应用所述牙膏2周后,当两组受试者在早晨刷牙前接受检查时,被试组的牙齿表面保持光滑,无明显菌膜形成,PLI约为1.02±0.54。鲜明对照是,发现对照组受试者的牙齿表面覆盖了薄而粗糙的菌膜,PLI约为3.98±1.76(p<0.001)。此薄而粗糙的牙菌薄膜包含了很多微生物,包括变形链球菌及多种其它细菌,它们发酵糖及其它碳水化合物来形成乳酸及其它酸类。产酸的重复循环可逐渐损坏牙釉质，并使牙齿脱钙,从而使牙齿坚硬组织出现不可逆的结构损害,伴有釉质表面下呈现不透明的白色或棕色点,随后导致龋齿。

表8

参照表8所示，M321对细菌生长具有抑制作用,因此对牙菌斑在牙表面形成的抑制作用,可有效地保护牙齿,避免口臭、龋齿和口腔炎症。

实施例4.M321对小鼠的实验性口腔溃疡的治疗效果

实验动物昆明种小鼠(6月龄)，雌雄不限，体重18～22克。用化学烧灼法建立口腔溃疡动物模型，小鼠在1％戊巴比妥钠(0.025g/kg)麻醉下，用NaOH固体在下唇靠口角黏膜处烧灼5秒，生理盐水冲洗，1天后形成溃疡。记录每只动物溃疡的大小。每只动物所建模型尽量在同一部位，大小、深度力求一致。小鼠分为被试和对照组。各组小鼠均可自由获取水和颗粒鼠粮(chow)。

制备浓度为每毫升含药材一克的M321供试液，小鼠分组给药。选取40只健康小鼠随机分为M321高、中、低剂量组，和模型对照组，每组10只。M321高、中、低剂量组每日给予M321供试液0.01、0.02、0.04g/g(体重)，模型对照组每日给相同体积的生理盐水，早晚各一次灌胃给药。连续给药2周，每日记录溃疡变化情况。

结果显示，各组小鼠建模时溃疡面积大小基本一致，建模后1天，各组溃疡面积均有所扩大。到第3天各组溃疡面积开始缩小，M321高、中、低剂量组与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.05)。治疗3-5天后，M321高、中、低剂量组溃疡基本愈合(表9)，而模型对照组的溃疡还没有完全愈合。

表9 各组小鼠不同时间溃疡面积比较 mm²

注：*表示与模型对照组比较，P＜0.05。

表10 M321处理预防老年小鼠的牙骨质流失

M321代表处理的12月龄昆明小鼠，牙面积代表牙根与牙槽骨的接触面积。

从上述表10结果可见，M321可显著预防老年小鼠牙骨质的流失,并有助于保持磨牙与牙槽骨的显著较大的接触面积。从而使牙更结实和稳固。

实施例5.M321对速衰小鼠的实验性牙周炎和老年性口腔状况的治疗效果

SAMP10速衰小鼠的平均生存时间为333天,人们经常用SAMP10小鼠作为衰老加速和与年龄相关性疾病的动物模型。除了最具特征的年龄相关性改变如脑萎缩外,这些小鼠可在牙科病症研究中用作衰老加速的模型。认为人类牙周炎和牙槽骨质流失是慢性疾病,它们会随年龄增长而变得更加普遍和严重。在本研究中,我们采用老年SAMP10小鼠模型,测试M321对与年龄相关性口腔病症的治疗效果。

方法.在通常条件用可任意采食的鼠粮饮食和自来水喂养SAMP10小鼠(n＝48)。当小鼠为12月龄时,给被试组小鼠(每组n＝8)分别喂食各含1％马齿笕提取物(第一组)，含1％蓝布正提取物(第二组)，含1％傩公藤提取物(第三组)，含1％M321(第四组)，含3％M321(第五组)常用小鼠鼠粮达3个月，喂食不含任何上述提取物的常用鼠粮的对照组(第六组)。处理3月后,给五个被试组小鼠喂食的含上述提取物的小鼠鼠粮分别替换为不含任何上述提取物的常用鼠粮。当小鼠为16月龄时,评价所有组小鼠的牙龈指数(GI)(该评估方法基于探测牙龈组织来肉眼观察牙龈,从而评估颜色、紧实度(firmness)和出血),然后处死实验小鼠。评价平均的牙槽骨质流失(mmSD),是通过沿每颗磨牙牙根的轴的牙尖端和牙槽骨之间的距离总和,从对侧值中减去。对所有组的动物进行形态测量学和组织学分析。

结果.以0-3等级系统来测量牙龈炎记分(GI)。即0＝无炎症；1＝轻度炎症-颜色轻微改变及质地几乎无改变；2＝中度炎症-探测发现有中度的发亮(glazing)、发红、水肿、肥大和出血倾向；3＝重度炎症-明显的发红、肥大和自发性出血倾向。GI记分＝GI记分总和除以记分的位点数(围绕牙齿的牙龈龈线)。

结果表明各处理组的GI记分(0.503-0.751±0.321)显著低于未处理的对照动物(1.312±0.397)(p<0.01)。所有提取物处理组相比未处理的对照组,都可显著预防牙槽骨质流失,并且牙槽骨和牙骨质都保存良好(p<0.05)。组织学检查显示,在未处理的对照动物观察到炎性反应,包括牙周组织的水肿和炎性细胞浸润,以及牙槽骨吸收。而且,未处理的对照动物牙周组织的紧实度和总体积显著下降。但在提取物处理的动物中,炎性反应却显著下降,伴有显著较少的水肿及炎性细胞浸润。观察结果提示所有三种提取物,特别是M321,不仅会抑制老龄小鼠牙周组织的炎性反应,包括水肿和炎性细胞浸润,以及牙槽骨吸收,而且会促进牙龈中新毛细血管和牙周组织的生长,从而显著改善牙龈炎、牙周炎和牙龈萎缩。其中M321组合比任何三种提取物的单一应用都更有效地预防、治疗、更显著地降低老龄相关性牙周炎性反应、牙龈炎、牙龈萎缩和牙槽骨吸收的进展。不希望受理论所限,所述提取物可刺激牙周组织微循环的重构,其中细胞通过生存、发挥功能并促进牙周组织生长来修复萎缩的牙龈。因此,本发明组合物可用于预防并治疗哺乳动物的牙周炎症、牙龈炎、牙龈退缩、牙龈萎缩(gumrecession)和牙槽骨吸收。

实施例6.M321改善牙龈萎缩、缩小老年人牙间距、和再固定松动牙齿

老年人由于牙龈的退行性变，往往会经历牙龈萎缩、牙间距增大、甚至牙齿松动。如果注意到有些牙齿松动，这是个很明确的信号，提示可能存在老年性牙龈疾病。当患者发现牙齿松动时,往往提示该松动的牙齿可能无法保留了。

牙龈疾病通常由正常存在口腔中的多种细菌造成。有些患者口腔中可能有更多种与侵袭性牙龈疾病有关的细菌。这些细菌容易积累在牙龈与牙齿的接合处。正常的健康牙龈有围绕牙齿的沟或小沟(1-3毫米深的sulcus)，当细菌感染牙龈时,牙龈可与牙齿脱离。当牙龈由于牙龈疾病而与牙齿脱离时,沟会形成一个“袋",其深度超过3毫米。然后引发牙龈疾病的细菌就会扩散到支撑牙齿的下层骨,随后会导致牙齿松动。如果牙龈疾病在早期阶段得不到适当处理,患者牙齿就可能脱落。我们测试了含M321牙膏对人类口腔疾病的治疗作用.受试者为20名,其中12有轻度牙龈萎缩(53-68岁),两名有牙齿松动(58-75岁),一名有重度牙龈萎缩和牙齿松动(49岁),他们接受每日两次使用含有5％M321的牙膏。使用受试牙膏前的测试发现,所有受试者都有较大牙间隙,提示受试者整体都存在牙龈萎缩。除了牙间隙变宽外,有两名受试者的下前部(左)和上前部(右)牙齿有牙齿松动,松动的牙齿呈深棕色达3-4年以上。所有有重度牙齿松动的受试者,松动的牙齿颜色都呈深棕色，牙齿的咬合能力严重下降。进一步检查发现,所有受试者的65％以上(前牙、上牙、下牙和后牙)的牙根都有因牙龈萎缩而暴露,并且其牙龈在探测或刷牙时容易出血,还伴有口臭,表明其患有牙龈炎和牙龈萎缩。

这些受试者每日早晚各用M321(5％)刷牙一次,每次至少3分钟。结果显示,用M3214周后,所有20名受试者均报告发现,应用该牙膏后,食物或食物纤维楔入牙齿间的发生率显著下降,提示牙间隙减小,这可能是由于变强韧的牙龈可以支撑牙齿处于较紧密的位置上，使牙间隙变小。经测试发现,所有受试者的牙间隙都比应用M321牙膏前缩小了约1/3。原来有牙齿松动的受试者的牙齿活动度下降,其松动牙齿的深棕色也变得接近正常牙齿颜色。大多数受试者的牙龈从发红变成了粉色,原有触痛和牙龈出血都得到显著改善。口臭也得到极大的改善。可能这是由于口腔细菌感染和炎症得到明显控制，病变的牙龈得到改善的缘故。继续应用M321牙膏2个月后发现,所有受试者都保持了已缩小的牙间隙。原来松动的牙齿已经再固定成正常,并且这些松动牙齿由于营养不良之前呈现的深棕色也转为接近正常牙齿的颜色,与所有其他正常牙齿一样。一些受试者的牙龈从发红变成了正常的珊瑚粉色,压痛和感染以及炎症都不再存在。由于口腔的细菌感染、炎症和口腔疾病所致的口臭已显著改善或完全消失。那些有重度牙龈萎缩和牙齿松动的受试者也有了显著改善,其所有松动牙齿的活动性都下降,而且其牙龈的发红、压痛和牙龈出血都显著减轻,其咀嚼能力也显著改善。所有上述实验结果都表明,M321可以显著地改善牙龈萎缩，使萎缩的牙龈变强韧，甚至诱导牙龈再生，从而可更强韧地支撑活动牙齿,并为牙齿提供良好营养。更令人兴奋的是在使用M321两个月后发现,这些牙龈萎缩的受试者中的一些,其先前暴露的牙根面积变小而且覆盖得较好，并且在有的受试者的牙和牙龈交界处可以观察到薄层淡粉色新生牙龈组织。

实施例7.M321对牙龈出血的作用

将3％的M321牙膏用于有急性或慢性牙龈出血的受试者(20人，年龄25-86)。发现用M321刷牙3分钟,每日早晚各一次,1-3天后，可使所有受试者的牙龈出血全部得到显著改善，或者完全停止牙龈出血。根据牙龈出血严重程度,停止牙龈出血所需天数为1-4天。其中10例中,用M321刷牙1天后牙龈出血即消失。另外8例中,用M321治疗3天后牙龈出血即停止。1周的刷牙时间足够长到可使剩下的2例严重牙龈出血得到显著治疗停止牙龈出血。而对照组20例牙龈出血患者，使用不含M321的对照牙膏过程中，仅有2例在刷牙1周后停止牙龈出血。

牙间出血指数(IBI)的测量是用出血的牙间隙数除以所研究的牙间隙数,得到最小值为0(无出血),最大值为1(出血)的记分。出血点数除以记分的牙间点数。使用牙膏前,对照组(n＝10)和M321组(n＝10)的IBI分别为0.376±0.293和0.381±0.288。然而,使用牙膏2周后,对照组和M321组的IBI平均值分别为0.369±0.286和0.096±0.076。

实施例8.M321对口腔溃疡的治疗效果

对曾患反复性口腔溃疡的4人(3女1男,年龄介于40-85岁)进行试验,使用M321(3％)刷牙每次至少3分钟,每日早晚各一次。所有四名受试者的口腔溃疡在1-5天的M321治疗后都完全消失。治疗口腔溃疡的持续天数介于一天到一周。根据溃疡的严重程度及牙膏所含的M321浓度,溃疡可在受试者出现轻度或意外性溃疡情况下于1-2天内愈合,对难治性、复发性口腔溃疡的溃疡愈合可能需要3-5天。正常情况下,牙膏所含M321浓度越高,口腔溃疡愈合得越快。与此相比,在对照组中,2名患偶发性口腔溃疡的受试者在用对照牙膏的第4-7天愈合，然而,该组中其他3名患复发性口腔溃疡的受试者未显示任何溃疡改善。

以上对本发明的较佳实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，其中未尽详细描述的设备和结构应该理解为用本领域中的普通方式予以实施；任何熟悉本领域的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围情况下，都可利用上述揭示的方法和技术内容对本发明技术方案做出许多可能的变动和修饰，或修改为等同变化的等效实施例，这并不影响本发明的实质内容。因此，凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化及修饰，均仍属于本发明技术方案保护的范围内。

Claims (4)

1.改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物，其特征在于，由植物材料的活性提取物制成，活性提取物由马齿苋、傩公藤、蓝布正组成，其中马齿苋、傩公藤、蓝布正的活性提取物的重量比例为3:1:2。

2.如权利要求1所述的改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物，其特征在于，含有口腔用可接受的载体。

3.如权利要求1或2所述的改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物，其特征在于，用于龋齿、牙龈出血、口腔或牙龈肿痛、口腔炎症、口腔溃疡、牙龈炎或牙周炎、牙龈萎缩、口臭、牙及牙槽骨的骨质流失、牙齿松动或牙齿脱落的预防或治疗。

4.如权利要求1-3任一项所述的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤（1）：马齿苋、蓝布正、傩公藤的活性提取物的分离：

将马齿苋、蓝布正、傩公藤分别经洗涤、干燥并切成小块；

将上述干燥之后的马齿苋、蓝布正、傩公藤分别在60℃浸泡于浓度70％以上的乙醇中，然后超声破壁1-5小时,再加入水使乙醇浓度达到50-70％；

在50-70℃再分别提取所述马齿苋、蓝布正、傩公藤达4-8小时,重复1-5次；

将提取液过滤,电喷雾干燥制备出从马齿苋、蓝布正、傩公藤提取的三种粉末即得到马齿苋、蓝布正、傩公藤的活性提取物；

步骤（2）：将得到的马齿苋、蓝布正、傩公藤的活性提取物与口腔用可接受的载体进行混合即得到改善口腔卫生、预防并治疗口腔疾病的组合物。