CN107296835A - 一种适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方及其制备方法和应用。本发明所提供的中草药复方配方由黄连、黄芩、大黄、五味子和沙棘构成。本发明配方能有效的抑制导致细菌性妇科疾病的主要病原细菌的生长，表现出很强的抑菌、杀菌特性。本发明配方能够更有效的治愈患有细菌性妇科疾病的患者，为今后细菌性妇科疾病的治疗提供了相应的理论依据和完善的方法体系。

Description

一种适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方及其制备方法 和应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方。

背景技术

近几年来，随着抗生素及皮质类固醇药物的普遍应用，细菌性妇科疾病的发病率在世界各地呈明显上升趋势，严重影响妇女的工作及生活，给妇女的身体和精神造成了很大的痛苦。

目前，针对细菌性妇科疾病的临床治疗中，抗生素药物如：氟康唑、硝酸咪康唑等仍占据主导地位。但是，患者长期使用这些抗生素药物，导致致病菌株的耐药性增强，致使病情反复发作，使得患者长期饱受病痛折磨。因此迫切需要一种能够有效抑制细菌性妇科疾病病原菌的中草药复方配方，从根本上治疗该类疾病，缓解病患的痛苦。

发明内容

本发明的目的是提供一种适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方。

本发明采用的技术方案是：一种适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方，所述的中草药复方配方由黄连、黄芩、大黄、五味子和沙棘构成。

上述的一种适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方，按重量份配比组成为，黄连1-3份、黄芩1-4份、大黄3-4份、五味子2-4份、沙棘3-4份。优选的，黄连2份、黄芩1份、大黄4份、五味子4份、沙棘4份。

一种适用于细菌性妇科疾病的中草药复方制剂，是将上述的中草药复方配方制成水剂型。优选的，复方制剂可以是涂抹型、膏型、发泡型等。

上述的一种适用于细菌性妇科疾病的中草药复方制剂的制备方法，方法如下：

1)按上述的中草药复方配方，称取中草药，按料液比1:13-17加水浸泡2-3h；

2)大火煮沸，文火煮至敖干，再按料液比1:13-17加水煮沸，文火煮1-1.5h，冷却；

3)于12000rmp离心20min，取上清液，将上清液浓缩，灭菌备用。

上述的中草药复方配方在制备治疗细菌性妇科疾病药物中的应用。所述的细菌性妇科疾病由细菌致病菌和/或真菌致病菌引起。所述的细菌致病菌包括：变异微球菌、鲁氏不动杆菌、大肠粪球菌、鹌鸡肠球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、克雷伯氏肺炎菌、产酸克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌。所述的真菌致病菌包括：热带假丝酵母、克柔假丝酵母、光滑假丝酵母、白色念球菌

本发明的有益效果是：

1.本发明，研制的适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方能有效的抑制常见的诱发细菌性妇科疾病的致病菌的生长。

2.本发明，研制的适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方由黄连、黄芩、大黄、五味子、沙棘构成。

3.本发明，研制的适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方，能够有效抑制常见的引起细菌性妇科疾病的致病菌株，这些菌株包括：变异微球菌、鲁氏不动杆菌、大肠粪球菌、鹌鸡肠球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、克雷伯氏肺炎菌、产酸克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌、热带假丝酵母、克柔假丝酵母、光滑假丝酵母、白色念球菌等。

4.本发明，研制的适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方，能够有效缓解由常见致病菌引起的细菌性妇科病所带来的病痛，并且可以替代抗生素，从根本上减缓病患病痛，并为解决抗生素污染做出了必要的贡献。

具体实施方式

下面的实施例将对本发明予以进一步的说明，但并不因此而限制本发明。

实施例1原料药的筛选

(一)细菌性妇科疾病致病菌的分离纯化鉴定

1.样品采集：针对患有细菌性妇科疾病的患者，用无菌拭子对其患处进行样本采集。

2.菌株纯化分离：将采好的样本在固体培养基上进行划线分离，然后至于37℃培养箱中培养24h，24h后挑取形态各异的菌落进行分离纯化培养，每个菌株至少分离纯化3-4次，共分离纯化出13株菌株。

3.菌株分离鉴定：将分离纯化好的13株菌株利用16S rDNA基因测序进行菌株的鉴定，鉴定结果如表1。

表1

(二)中草药的筛选

1、中草药的选择

选取12味中草药做相关抑菌实验，分别为黄连、黄芩、大黄、木通、五味子、荆芥、蛇床子、苦参、栀子、藿香、车前子、沙棘。

2、单方中草药液的熬制

2.1)分别称取60g中草药，分别用至少900mL蒸馏水浸泡2h；(料液比为1:15)

2.2)大火煮沸，文火煮至敖干，再加900mL水煮至250mL左右，冷却后，待离心；

2.3)12000rmp离心20min，取上清(最少2次)；

2.4)将上清液浓缩至60ml，分别得到单方中草药液；

2.5)灭菌备用。

3、单方中草药抑菌实验

用牛津杯法验证各单方中草药对各致病菌的抑菌作用，筛选抑菌效果较好的单方中草药用以中草药复方配方的制备。

3.1)准备各致病菌株的液体摇瓶待用；

3.2)先用固体培养基铺满培养皿底部；

3.3)将含有菌株的液体培养基倒入温度适宜的半固体培养基中，并将菌株和培养基混匀，混匀过程中不要有气泡产生；

3.4)将含有菌株的半固体培养基倒入已凝固的固体培养基上，待培养基凝固后，放置13(12味单方加1个阳性抗生素对照)个已灭过菌的牛津杯中；

3.5)在每个牛津杯中加入150μl的单方中草药液；

3.6)放置37℃培养箱过夜培养，第二天观赏并记录抑菌圈结果。结果如表2所示。

表2

如表2所示，根据单方抑菌实验，确定有效配方原料药为黄连、黄芩、大黄、五味子、沙棘。

实施例3适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方

根据实施例2确定的黄连、黄芩、大黄、五味子、沙棘五味原料药，通过正交试验进一步确定中草药复方配方的最佳抑菌效果的浓度。

按表3-表11中的重量比例，分别称取黄连、黄芩、大黄、五味子和沙棘，总计60g，按料液比1:15，加入900mL水，浸泡2h；大火煮沸，文火煮至敖干，再加入900mL水，煮至250mL左右，冷却后，12000rmp离心20min，取上清，将上清液浓缩至60mL，灭菌备用。

将黄连、黄芩、大黄、五味子、沙棘五味中草药，按照正交水平表分别配制各组分浓度不同的中草药复方配方，而后做关于诱发细菌性妇科疾病的致病菌的抑菌实验，观察其抑菌效果以确定最佳中草药复方配方的最佳抑菌浓度，对于各细菌性致病菌株的抑菌结果如表3-表11所示。

(一)大肠粪球菌

表3

由表3可见，针对于大肠粪球菌，中草药复方配方的最佳抑菌浓度为：按重量比，黄连3份、黄芩4份、大黄3份、五味子2份、沙棘4份，其中五味子对实验结果的影响最大。

(二)表皮葡萄球菌

表4

由表4可见，针对于表皮葡萄球菌，中草药复方配方的最佳抑菌浓度为：按重量比，黄连2份、黄芩4份、大黄3份、五味子2份、沙棘4份，其中沙棘对实验结果的影响最大。

(三)鹌鸡肠球菌

表5

由表5可见，针对于表鹌鸡肠球菌，中草药复方配方的最佳抑菌浓度为：按重量比，黄连2份、黄芩2份、大黄4份、五味子4份、沙棘4份，其中五味子对实验结果的影响最大。

(四)变异微球菌

表6

由表6可见，针对于变异微球菌，中草药复方配方的最佳抑菌浓度为：按重量比，黄连3份、黄芩1份、大黄4份、五味子4份、沙棘4份，其中五味子对实验结果的影响最大。

(五)产酸克雷伯杆菌

表7

由表7可见，针对于产酸克雷伯杆菌，中草药复方配方的最佳抑菌浓度为：按重量比，黄连2份、黄芩1份、大黄3份、五味子4份、沙棘4份，其中五味子对实验结果的影响最大。

(六)克雷伯氏肺炎菌

表8

由表8可见，针对于克雷伯氏肺炎菌，中草药复方配方的最佳抑菌浓度为：按重量比，黄连3份、黄芩4份、大黄4份、五味子4份、沙棘4份，其中五味子对实验结果的影响最大。

(七)金黄色葡萄球菌

表9

由表9可见，针对于金黄色葡萄球菌，中草药复方配方的最佳抑菌浓度为：按重量比，黄连2份、黄芩1份、大黄4份、五味子4份、沙棘3份，其中五味子对实验结果的影响最大。

(八)溶血葡萄球菌

表10

由表10可见，针对于溶血葡萄球菌，中草药复方配方的最佳抑菌浓度为：按重量比，黄连1份、黄芩2份、大黄4份、五味子4份、沙棘4份，其中沙棘对实验结果的影响最大。

(九)鲁氏不动杆菌

表11

由表11可见，针对于鲁氏不动杆菌，中草药复方配方的最佳抑菌浓度为：按重量比，黄连3份、黄芩4份、大黄3份、五味子4份、沙棘4份，其中五味子对实验结果的影响最大。

综上，根据以上实验结果最终选取用于治愈细菌性妇科疾病的复方中草药最佳抑菌配方为黄连2份、黄芩1份、大黄4份、五味子4份、沙棘4份。

(十)真菌性致病菌的抑菌实验

以黄连2份、黄芩1份、大黄4份、五味子4份、沙棘4份的中草药复方配方对热带假丝酵母、克柔假丝酵母、光滑假丝酵母、白色念球菌4株真菌性致病菌进行牛津杯抑菌试验，效果明显。

(十一)最佳抑菌浓度的验证

根据以上实验结果，确定黄连2份、黄芩1份、大黄4份、五味子4份、沙棘4份为治愈细菌性妇科疾病的最佳抑菌配方，并针对各致病菌株对该抑菌最佳配方进行抑菌效果的验证，具体验证过程如下：

1.普通验证

取两培养皿，分别标为对照组和实验组，对照组为牛肉膏蛋白胨培养基(牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH 7.0～7.2)，实验组则在牛肉膏蛋白胨培养基中加入最佳抑菌配方的中草药复方配方(使中草药浓缩液在培养基中的浓度为1g/ml)，然后在两培养基相同的位置排放牛津杯，在牛津杯内分别加入不同的菌液，并做好标记，观察致病菌在不同培养基上的生长状态。

(1)细菌抑菌结果：

9种细菌性致病菌，培养24小时后，除了大肠粪球菌和鲁氏不动杆菌在对照培养基和实验培养基都生长外，其他菌株均只在对照培养基上生长，实验培养基上未生长，故证明该浓度的中草药复方配方对细菌性致病菌有明显抑菌和杀菌作用。

(2)真菌抑菌结果：

4种真菌性致病菌，培养24小时后，光滑假丝酵母和克柔假丝酵母在实验培养基上生长，而白色念球菌和热带假丝酵母则未生长，说明该浓度的中草药复方配方对真菌性致病菌有一定的抑菌和杀菌作用。

2.特殊验证

针对普通验证24h后在实验培养基上生长的两种真菌性致病菌(克柔假丝酵母和光滑假丝酵母)和两种细菌性致病菌(大肠粪球菌和鲁氏不动杆菌)进行特殊的验证，旨在观察实验组对致病菌的有抑菌作用的时间，结果如下：

(1)在接菌3，5，8小时后，发现大肠粪球菌和鲁氏不动杆菌在实验培养基上均未生长，而在对照培养基上生长，24小时后，在两种培养基上均有生长，但实验培养基上的菌明显少于对照培养基。所以该中草药复方配方对这两株细菌性致病菌有一定的抑菌效果。

(2)在接菌3小时和5小时后，克柔假丝酵母在实验和对照组上均未生长，8小时后克柔假丝酵母在实验培养基上未生长，而在对照培养基上生长了，24小时后，在两种培养基上均有生长，但实验培养基上的菌明显少于对照培养基。所以该中草药复方配方对克柔假丝酵母也有一定的抑菌效果。

(3)在接菌3，5，8，24小时后，光滑假丝酵母在实验培养基和对照培养基上均有生长，但实验培养基上的菌明显少于对照培养基。所以该中草药复方配方对光滑假丝酵母也有一定的抑菌效果。

Claims (9)

1.一种适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方，其特征在于：所述的中草药复方配方由黄连、黄芩、大黄、五味子和沙棘构成。

2.根据权利要求1所述的一种适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方，其特征在于：按重量份配比组成为，黄连1-3份、黄芩1-4份、大黄3-4份、五味子2-4份、沙棘3-4份。

3.根据权利要求2所述的一种适用于细菌性妇科疾病的中草药复方配方，其特征在于：按重量份配比组成为，黄连2份、黄芩1份、大黄4份、五味子4份、沙棘4份。

4.一种适用于细菌性妇科疾病的中草药复方制剂，其特征在于，将权利要求1、2或3所述的中草药复方配方制成水剂型。

5.权利要求4所述的一种适用于细菌性妇科疾病的中草药复方制剂的制备方法，其特征在于，方法如下：

1)按权利要求1、2或3所述的中草药复方配方，称取中草药，按料液比1:13-17加水浸泡2-3h；

2)大火煮沸，文火煮至敖干，再按料液比1:13-17加水煮沸，文火煮1-1.5h，冷却；

3)于12000rmp离心20min，取上清液，将上清液浓缩，灭菌备用。

6.权利要求1、2或3所述的中草药复方配方在制备治疗细菌性妇科疾病药物中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的细菌性妇科疾病由细菌致病菌和/或真菌致病菌引起。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的细菌致病菌包括：变异微球菌、鲁氏不动杆菌、大肠粪球菌、鹌鸡肠球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、克雷伯氏肺炎菌、产酸克雷伯杆菌和金黄色葡萄球菌。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的真菌致病菌包括：热带假丝酵母、克柔假丝酵母、光滑假丝酵母和白色念球菌。