CN107281001A - 一种含透明质酸的活性调理喷雾及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种含透明质酸的活性调理喷雾，该活性调理喷雾由如下重量比的物质组成：1.5％‑5.0％的透明质酸协同物；0.5％‑5.0％的植物调理剂；0.05％‑0.5％的抗敏剂；12.0％‑30.0％的基质辅料；60.0％‑85.95％天然矿泉水；所述的透明质酸协同物包含透明质酸、聚谷氨酸和麦芽多糖。该喷雾除了能够对肌肤进行随时随地的补水滋润外；还能调节肌肤水油平衡，舒缓肌肤压力，抵抗过敏现象，增加肌肤的天然保护功能；同时一些活性成分还能快速高效的被皮肤吸收，为真皮层胶原蛋白和弹性纤维的合成提供优越的外部环境，帮助肌肤呈现持久光滑和弹性。

Description

一种含透明质酸的活性调理喷雾及其制备方法

技术领域

本发明涉及日用化工领域，特别涉及一种含透明质酸的活性调理喷雾及其制备方法。

背景技术

随着生活越来越忙，我们也越来越没有时间和精力仔仔细细地给肌肤进行全套护理，有什么是又轻松又有效的护肤手段呢？喷雾类护肤品，就是这么一种为“懒人”而设计的护肤品。手指轻轻一按，无论是保湿，芳香，防晒，去痘，美丽手到擒来。通过在脸部、身上喷洒，细细的水珠在肌肤上形成丝般保护膜，在护肤保养的同时还隔离了外界阳光和污染对肌肤的伤害。喷嘴设计，更可以避免护肤品使用中的二次污染。

市面上的喷雾式化妆水可分成两类，一类是把化妆水以喷雾形式呈现，好处是用量省，免沾手也比较清洁；另一类属于矿泉水，以镇静、舒缓为诉求。目前一些喷雾会添加保湿成分，但成分较单一，效果有限；而以矿泉水为主要成分的喷雾，仅适合临时补水，并不具有长效保湿特性，在一天内需要经常性补水；甚至一些矿泉水因含矿物质成分过高，多次使用后会因矿物质成分在脸上残留浓度过高，反而夺取皮肤中的水分，越用皮肤越干。因此，研发一款更为安全舒缓、持久保湿、多效调理的喷雾尤为迫切。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明是这样实现的：

一种含透明质酸的活性调理喷雾，该活性调理喷雾由如下重量比的物质组成：

所述的透明质酸协同物包含透明质酸、聚谷氨酸和麦芽多糖。

透明质酸协同物：由透明质酸、聚谷氨酸和麦芽多糖按照一定比例和方法搭配使用，不仅具有一定的协同保湿性，还具有高效的透皮吸收性，可以深层修复和滋养肌肤。

透明质酸：是一种小分子酸性粘多糖，可以直接高效渗透至皮肤黏膜并且可以在进入皮肤黏膜后，为真皮层胶原蛋白和弹性纤维的合成提供优越的外部环境，帮助皮肤恢复原有的光滑和弹性，修复皮肤和黏膜保护屏障，进而起到修复滋养的功效。

聚谷氨酸：据了解，聚谷氨酸(γ-PGA)是一种水溶性、生物降解、不含毒性的使用微生物发酵法制得的生物高分子，它是一种有粘性的物质，在“纳豆”中被首次发现。γ-PGA是一种特殊的阴离子自然聚合物，是以左、右旋光性的谷氨酸为单元体，在α-氨基和γ-羧基之间经酰胺键结所构成的同型聚酰胺多肽，γ-PGA的分子量从5万到2百万道尔顿不等。特殊的分子结构，使其具有极强的保湿能力，能有效地增加皮肤的保湿能力，促进皮肤健康，其超强的保湿能力更优于常见的保湿成分，为新一代的生物科技保湿剂。同时γ-PGA还具有超强的吸附性和生物可降解性，降解产物为无公害的谷氨酸，是一种优良的环保型高分子材料，可作为保水剂、重金属离子吸附剂、絮凝剂、缓释剂以及药物载体等，在化妆品、食品、医药等产业均有很大的商业价值和社会价值。

麦芽多糖：是无色粘稠状液体，又叫麦芽寡糖基糖苷氢化淀粉水解产物，是由淀粉衍生出的碳水化合物糖浆，含有各种糖类，添加到皮肤护理产品中对优化护肤产品的吸湿平衡具有独特的辅助作用，可保持皮肤的柔软度，改善产品的质地和光滑度，为无刺激成分，尤其适合添加到专为敏感皮肤设计的配方产品中，可缓解刺激作用。

优选地，所述的植物调理剂包括复活草植物调理剂、草莓果植物调理剂、益母草植物调理剂、芦荟丝滑素植物调理剂、问荆植物调理剂。

进一步地，所述的植物调理剂经提取复活草、草莓果、益母草、芦荟丝滑素、问荆中的有效成分制备而成，各组分物质的基料重量比为复活草:草莓果:益母草:芦荟丝滑素:问荆＝1-2:2-3:1-3:3-5:1-3。

更进一步地，所述的植物调理剂经提取复活草、草莓果、益母草、芦荟丝滑素、问荆中的有效成分制备而成，各组分物质的基料重量比为复活草:草莓果:益母草:芦荟丝滑素:问荆＝1:2.5:1.5:4:1。

植物调理剂：由复活草、草莓果、益母草、芦荟丝滑素和问荆五种活性植物调理剂按照一定比例混合提取所得，该活性植物调理剂结合配方中的其他有效成分可以高效保湿锁水、调节皮肤水油平衡、镇静舒缓、消炎抑菌、抗氧化、抗衰老等达到深层调理肌肤的作用。

复活草提取物：植物学家远赴约旦沙漠，破译神奇复活草遇水重生的储水力，并升级注入多种植物精粹合成天然保湿因子的造水力，集合天然矿泉水的修护力，深度修护保湿屏障，形成源源水循环，深谙天然水通道肌密，从根源解决肌肤吸收难题，重塑肌底保湿机能，拯救干涸肌肤的缺水危机，肌肤迅速满水赋活，呈现生机勃勃。

草莓果提取物：草莓提取物中含有天冬氨酸，可以自然平和的清除体内的重量金属离子，在美容方面，除了含有左旋C能改善黯沉、温和美白肤色外，并蕴含的类黄酮及鞣花酸等成分，能预防肌肤老化并防止斑点的形成，富含草莓多酚具有抗氧化、加强肌肤明亮的效果，此外，草莓萃取物中的天然果酸，还具有净化毛孔以及软化角质缩小紧致毛孔的功效，可令肌肤嫩滑并更具光泽，给肌肤绝对的滋润与呵护，常用来加到抗氧化清除自由基和抗衰焕颜系列中。

益母草提取物对天然保湿因子生成有很好的促进作用，对皮肤有保湿作用；对B-16细胞有很好的抑制率，因此可用于防治雀斑、皮肤色素沉着；具有抗氧化性，结合对谷胱甘肽还原酶的活化作用，可以认为其抗衰。

芦荟丝滑素：营养保湿芦荟中和复合多糖物质构成了天然保湿因素(NMF)，它可以补充皮肤中损失的水分，恢复胶原蛋白的功能，防止面部皱纹，保持皮肤柔润、光滑、富有弹性。它含有组织胺及前列腺素抑制剂、乳酸铁、B族维生素及酶等成分，能防止肌肤发炎过敏，细菌生长，促进细胞新陈代谢和皮肤再生，减轻疼痛和瘙痒，对面疱、青春痘、过敏、红肿均有疗效；美白、祛斑芦荟中所含有抑制黑色素生成物，可以使皮肤变白，还可以有效的去除痤疮、青春痘、黄褐斑及雀斑，使现代女性永保青春靓丽。

问荆提取物在细胞培养中显示可适度促进干扰素-γ的分泌，干扰素对抑制性皮炎、增强皮肤的新陈代谢等有作用，因此有抗炎功能；对毛细血管的收缩作用表面，它是一种血管强化剂，可防止毛细血管出血和毛细血管过度扩张，防止皮肤的紫斑；同时可用作活肤抗衰剂、保湿剂和抑臭剂。

优选地，所述的抗敏剂选自尿囊素、甘草酸二钾、水溶性红没药醇、水溶性维生素E、燕麦β-葡聚糖中的一种或两种以上。这些成分主要做皮肤调理剂、防护剂使用，能够帮助皮肤抗炎、抗过敏、舒缓并促进细胞修复；成分稳定性好，和皮肤有很好的相容性，降低皮肤炎症，减轻皮肤粉刺，防止暗疮产生，提高皮肤的抗刺激能力。

优选地，所述的基质辅料包括甜菜碱、甘油聚醚-26、对羟基苯乙酮、1,2-己二醇、PEG-40氢化蓖麻油、氢氧化钾、EDTA-二钠、去离子水。用于产品赋形及其他作用。

优选地，所述的天然矿泉水选自阿尔卑斯山冰川水、长白山天然矿泉水、俄罗斯高加索山矿泉水、阿勒瓦尔温泉水、加拿大海泥矿物质水中的一种或两种以上。

天然矿泉水中含有丰富的偏硅酸、锶、氡、锌、氟、碘、硒、锰、硅、铜、钙、镁等必需微量元素、矿物质和组分，这些物质都是人体必须的元素，能够深层对肌肤进行调理，维持肌肤最佳的健康状态。偏硅酸是人体皮肤结缔组织、关节软骨和关节结缔组织中必需的元素，具有增加皮肤弹性，保持弹性纤维周围组织完整性的功能，经常饮用或使用富含偏硅酸的矿泉水，可使皮肤保持光泽、白皙、细嫩、紧致；锶是人体必需的微量元素，但含量很少，锶与心血管的功能及构造有关，锶在人体内有强壮骨骼、防治心血管疾病的功效，内部调理机体健康；氡能促使机体的胶原代谢降低，阻抑体内成纤维细胞增生，从而可起到皮肤瘢痕抑制的作用；锌能增强肌体免疫力和性功能，还能增强创伤组织再生能力，使受伤和手术部位愈合加快，使皮肤更健美；适量的氟可降低机体脂褐素的产生及蓄积，提高机体的抗氧化能力，具有抗衰老和保护血管的作用；碘有促进蛋白合成，活化多种酶，调节能量转换，加速生长发育，促进伤口愈合，保持正常新陈代谢的重要生理作用；硒可刺激免疫球蛋白及抗体的产生，增强体液和细胞免疫力，硒还有抗氧化作用，使体内氧化物脱氧，具有解毒作用，能抵抗和减低汞、镉、砷的毒性；硅对机体皮肤有良好的洗涤、消退及清洁等效用；矿泉中含有的铜也具有维持皮肤健康的重要作用，如果缺乏铜将影响机体对铁的吸收及利用，从而引起皮肤干燥、粗糙；钙是组成人体骨骼的必需元素，对青少年的生长发育起着主要控制作用；镁是一种催化剂，促使人体中各种酶的形成，具有强心镇静的作用。

进一步地，透明质酸协同物各组分的重量比为透明质酸:聚谷氨酸:麦芽多糖＝3-10:0.5-2:15-30。

更进一步地，透明质酸协同物各组分的重量比为透明质酸:聚谷氨酸:麦芽多糖＝5:1:20。

上述的含透明质酸的活性调理喷雾的制备方法，包括如下步骤：

1)透明质酸溶液的制备：取透明质酸于35℃-40℃溶于1.0％的氯化钠溶液中，1000r/min-3000r/min搅拌3h-4h，调pH至5.0-5.6，加去离子水配成浓度范围在4.5％-9.0％的透明质酸溶液；

2)透明质酸协同液：先用10倍-20倍去离子水在30℃-50℃下溶解聚谷氨酸，再加入步骤1)制备的透明质酸溶液混合均匀，降温后加入麦芽多糖，混合均匀即为透明质酸协同液；

3)植物调理剂清膏的制备：将复活草、草莓果、益母草、芦荟丝滑素、问荆混合粉碎，加10倍量水，水煮2小时，过滤处理；滤渣加8倍量水，水煮1小时，过滤处理；滤渣再加8倍量的水，水煮1小时，过滤处理；将滤液合并，于50℃下减压浓缩至相对密度为1.0g/ml的清膏，加乙醇使含醇量达60％；静置24小时，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至无醇味，即制得植物调理剂清膏；

上述有些植物调理剂不太容易提取，工艺要求高。本发明用的是水提醇沉的方法提取植物调理剂中的有效成分，在提取过程中三次水分递减水煮能有效提高提取率；

4)透明质酸协同液—植物调理剂溶液的制备：将步骤2)制备的透明质酸协同液与步骤3)制备的植物调理剂清膏进行混合，并将混合液置于30℃-50℃、60HZ-80HZ的超声环境下超声处理20min-50min；

5)活性调理喷雾的制备：将步骤4)制备的透明质酸协同液—植物调理剂溶液与抗敏剂、基质辅料、天然矿泉水混合均匀，并调节PH至6.0-7.2。

本发明的有益效果在于：

本发明是一款活性调理喷雾，主要是由透明质酸-聚谷氨酸-麦芽多糖协同物、植物调理剂及天然矿泉水组合构成。该喷雾除了能够对肌肤进行随时随地的补水滋润外；还能调节肌肤水油平衡，舒缓肌肤压力，抵抗过敏现象，增加肌肤的天然保护功能；同时一些活性成分还能快速高效的被皮肤吸收，为真皮层胶原蛋白和弹性纤维的合成提供优越的外部环境，帮助肌肤呈现持久光滑和弹性；喷雾中的矿泉水含有适量的矿物质和微量元素可以对肌肤进行深层调理和滋养，修复肌肤和黏膜保护屏障。该喷雾是一款理想的活性调理喷雾，使用时可以在早晚洁肤之后直接喷洒在脸部，进一步完善清洁步骤，更可以随时使用，尤其在夏季天气炎热，肌肤感觉燥热不适时，轻轻一喷，立即感受到清爽和畅快。另外也可以在秋冬季使用对抗肌肤干燥，让肌肤随时随地喝饱水，随时随地进行调理。

附图说明

图1为透皮吸收性实验结果图。

具体实施方式

为详细说明本发明的技术内容、构造特征、所实现目的及效果，以下结合实施方式并配合附图详予说明。

实施例1

(一)活性调理喷雾配方(重量比例)

(二)制作方法

1)取透明质酸于35℃溶于50g的钠盐溶液中，1000r/min搅拌3h，调pH5.5，其余为去离子水混合均匀，制备成浓度5.0％透明质酸溶液，保存备用；

2)按重量比5:1:20分别称取透明质酸、聚谷氨酸和麦芽多糖共2.6克，先用20倍去离子水45℃溶解聚谷氨酸，再加入相应重量的5.0％透明质酸溶液混合均匀，降温后加入麦芽多糖，混合均匀呈透明溶液，即为透明质酸协同液，备用；

3)取植物调理剂按重量比1:2.5:1.5:4：1分别称取复活草100克、草莓果250克、益母草150克、芦荟丝滑素400克、问荆100克，混合粉碎成1000克粗粉，加10倍量水，水煮2小时，过滤处理，滤渣加8倍量水，水煮1小时，过滤处理；滤渣再加8倍量的水，水煮1小时，过滤处理，滤液合并，于50℃下减压浓缩至相对密度为1.0g/ml的清膏，加乙醇使含醇量达60％，静置24小时，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至无醇味，备用；

4)取上述透明质酸协同液，温度控制在45℃加入3.0克植物调理剂清膏在70HZ下超声处理30min，使得混合溶液呈现粘稠状；

5)将上述溶液缓慢逐滴加入到预先用甜菜碱、甘油聚醚-26、甘草酸二钾、燕麦β-葡聚糖、对羟基苯乙酮、1,2-己二醇、PEG-40氢化蓖麻油、氢氧化钾、EDTA-二钠、阿尔卑斯山冰川水、去离子水配置好的剂型中，轻轻搅拌使其完全分散；调节pH6.6，制成化妆水配合相应喷剂包材备用。

实施例2

(一)活性调理喷雾配方(重量比例)

(二)制作方法

1)取透明质酸于40℃溶于50g的钠盐溶液中，2500r/min搅拌3.5h，调pH5.5，其余为去离子水混合均匀，制备成浓度8.0％透明质酸溶液，保存备用；

2)按重量比5:1:20分别称取透明质酸、聚谷氨酸和麦芽多糖共1.5克，先用20倍去离子水50℃溶解聚谷氨酸，再加入相应重量的8.0％透明质酸溶液混合均匀，降温后加入麦芽多糖，混合均匀呈透明溶液，即为透明质酸协同液，备用；

3)取植物调理剂按重量比1:2.5:1.5:4：1分别称取复活草100克、草莓果250克、益母草150克、芦荟丝滑素400克、问荆100克，混合粉碎成1000克粗粉，加10倍量水，水煮2小时，过滤处理，滤渣加8倍量水，水煮1小时，过滤处理；滤渣再加8倍量的水，水煮1小时，过滤处理，滤液合并，于50℃下减压浓缩至相对密度为1.0g/ml的清膏，加乙醇使含醇量达60％，静置24小时，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至无醇味，备用；

4)取上述透明质酸协同液，温度控制在50℃加入1.5克植物调理剂清膏在80HZ下超声处理45min，使得混合溶液呈现粘稠状；

5)将上述溶液缓慢逐滴加入到预先用甜菜碱、甘油聚醚-26、甘草酸二钾、燕麦β-葡聚糖、对羟基苯乙酮、1,2-己二醇、PEG-40氢化蓖麻油、氢氧化钾、EDTA-二钠、长白山天然矿泉水、去离子水配置好的剂型中，轻轻搅拌使其完全分散；节pH6.6，制成化妆水配合相应喷剂包材备用。

实施例3

(一)活性调理喷雾配方(重量比例)

(二)制作方法

1)取透明质酸于40℃溶于50g的钠盐溶液中，2500r/min搅拌3.5h，调pH5.5，其余为去离子水混合均匀，制备成浓度8.0％透明质酸溶液，保存备用；

2)按重量比5:1:20分别称取透明质酸、聚谷氨酸和麦芽多糖共5.0克，先用20倍去离子水50℃溶解聚谷氨酸，再加入相应重量的8.0％透明质酸溶液混合均匀，降温后加入麦芽多糖，混合均匀呈透明溶液，即为透明质酸协同液，备用；

3)取植物调理剂按重量比1:2.5:1.5:4：1分别称取复活草100克、草莓果250克、益母草150克、芦荟丝滑素400克、问荆100克，混合粉碎成1000克粗粉，加10倍量水，水煮2小时，过滤处理，滤渣加8倍量水，水煮1小时，过滤处理；滤渣再加8倍量的水，水煮1小时，过滤处理，滤液合并，于50℃下减压浓缩至相对密度为1.0g/ml的清膏，加乙醇使含醇量达60％，静置24小时，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至无醇味，备用；

4)取上述透明质酸协同液，温度控制在45℃加入5.0克植物调理剂清膏在75HZ下超声处理50min，使得混合溶液呈现粘稠状；

5)将上述溶液缓慢逐滴加入到预先用甜菜碱、甘油聚醚-26、甘草酸二钾、燕麦β-葡聚糖、对羟基苯乙酮、1,2-己二醇、PEG-40氢化蓖麻油、氢氧化钾、EDTA-二钠、俄罗斯高加索山矿泉水、去离子水配置好的剂型中，轻轻搅拌使其完全分散；调节pH6.6，制成化妆水配合相应喷剂包材备用。

实施例4

(一)活性调理喷雾配方(重量比例)

(二)制作方法

1)取透明质酸于35℃溶于50g的钠盐溶液中，1500r/min搅拌3.5h，调pH5.5，其余为去离子水混合均匀，制备成浓度6.0％透明质酸溶液，保存备用；

2)按重量比5:1:20分别称取透明质酸、聚谷氨酸和麦芽多糖共1.5克，先用20倍去离子水50℃溶解聚谷氨酸，再加入相应重量的6.0％透明质酸溶液混合均匀，降温后加入麦芽多糖，混合均匀呈透明溶液，即为透明质酸协同液，备用；

3)取植物调理剂按重量比1:2.5:1.5:4：1分别称取复活草100克、草莓果250克、益母草150克、芦荟丝滑素400克、问荆100克，混合粉碎成1000克粗粉，加10倍量水，水煮2小时，过滤处理，滤渣加8倍量水，水煮1小时，过滤处理；滤渣再加8倍量的水，水煮1小时，过滤处理，滤液合并，于50℃下减压浓缩至相对密度为1.0g/ml的清膏，加乙醇使含醇量达60％，静置24小时，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至无醇味，备用；

4)取上述透明质酸协同液，温度控制在35℃加入0.5克植物调理剂清膏在60HZ下超声处理40min，使得混合溶液呈现粘稠状；

5)将上述溶液缓慢逐滴加入到预先用甜菜碱、甘油聚醚-26、甘草酸二钾、燕麦β-葡聚糖、对羟基苯乙酮、1,2-己二醇、PEG-40氢化蓖麻油、氢氧化钾、EDTA-二钠、加拿大海泥矿物质水、去离子水配置好的剂型中，轻轻搅拌使其完全分散；调节pH6.6，制成化妆水配合相应喷剂包材备用。

实施例5

功效实验

一、保湿性实验

实验选择能够完全受到试验结果影响的没有皮肤疾病的男女20名(男5名，女15名)为对象进行实验，以测试活性调理喷雾的保湿效果。具体方法如下：各个实验对象在试样前，先用水清洗实验部位后，再适应外部环境30分钟。实验的环境条件是：保持室内温度22-24℃，室内湿度45-50％，并在同一场所进行实验。在手臂内侧以2*2cm²喷洒样品喷雾如表1所示各10ul，并干燥1分钟。然后在喷洒的部位再各喷上20ul的超纯水，用毛巾擦干水分后以1分为间隔(0分钟、1分钟、2分钟、3分钟、4分钟、5分钟、6分钟、7分钟、8分钟、9分钟、10分钟)，用Corneometer CM 825对每个喷洒部位的皮肤表面水分进行测定保湿效果。测量结果如表2所示，单位是Corneometer value(Cv)。

表1各样品喷雾成分组成情况如下：

注：“-”表示未添加。

表2各样品喷雾保湿效果测定结果如下：

	0分	2	4	6	8	10
							样品1	175.8	84.5	72.3	58.9	56.7	55.4
样品2	187.8	87.5	75.8	69.5	64.1	63.8
							样品3	190.5	92.6	78.3	72.5	68.2	67.5
样品4	167.3	79.8	66.9	57.4	52.3	52.0
							样品5	168.9	79.9	67.5	57.6	53.5	52.5
样品6	164.4	75.4	64.6	55.6	50.9	50.1
							样品7	166.8	78.4	66.7	57.2	51.8	51.5
样品8	166.6	78.8	67.1	56.9	51.6	50.9
							样品9	167.5	79.7	67.3	56.8	52.7	51.8
样品10	168.0	80.2	67.9	57.8	53.7	52.6
							样品11	168.5	80.9	68.4	58.3	55.9	55.1
对照组1	156.6	66.5	58.8	50.2	48.7	46.3
							对照组2	160.9	72.9	62.5	53.4	51.2	49.5
对照组3	144.4	60.6	51.5	43.9	42.1	40.5

结论：

(1)由表1、2可知，透明质酸、聚谷氨酸和麦芽多糖三者按一定比例组成的喷雾比单一透明质酸、聚谷氨酸、麦芽多糖的喷雾保湿效果更好，说明透明质酸、聚谷氨酸和麦芽多糖三者组合使用在保湿效果方面具有明显的协同增强作用；

(2)由表1、2可知，透明质酸、聚谷氨酸、麦芽多糖三者重量比在3-10：0.5-2：15-30范围内保湿效果均具有协同增强作用，当三者重量比为5:1:20时，这种保湿协同增强作用最显著；

(3)对比样品1-3可知，透明质酸、聚谷氨酸、麦芽多糖三者按重量比5:1:20分别添加0.5％、0.1％、2.0％时，保湿协同增强作用最合理，低于这个值保湿效果不够，高于这个值保湿效果增幅变缓而出现料体浪费、成本增加等问题。

二、透皮吸收性实验

依据体外透皮吸收试验将处理好的鼠皮角质层向上固定于Franz扩散池上，在接收池中加入30％乙醇-生理盐水，置于恒温水浴的智能透皮试验仪中，设定温度(37.0±0.5)℃，转速200r·min^－1。平衡1h，排尽接收池内的气泡后加入样品。扩散池供给面积上均匀喷洒样品喷雾如表3所示各1g，每组平行3次，分别在0、0.1、0.3、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0时吸取接收液1mL，并补入同温同体积的接收液。吸取的接收液经过滤后加入试管，再准确加入2mLCTAB试液，自加入时开始计时，轻轻振动摇晃足够长时间，期间尽量避免反应液产生泡沫，静置至接近10min，然后将反应液倒入1cm比色皿中，10min时测定波长在400nm时的吸光度(A₄₀₀)，根据透明质酸在该波长下的标准曲线得到透明质酸的透皮吸收率。

表3各样品喷雾成分组成情况如下:

注：“-”表示未添加。

结论：以透明质酸透皮吸收率为纵坐标，时间(t)为横坐标，绘制透明质酸透皮吸收率-时间曲线，见图1，结果显示12h内透明质酸的吸收率为样品一＞样品三＞样品二＞对照组，表明透明质酸、聚谷氨酸和麦芽多糖三者按一定比例组成的协同物可显著提高透明质酸的透皮吸收率；结果显示0.5h内皮肤对透明质酸的吸收最快，该透明质酸协同物在0.5h内对透明质酸的透皮吸收率影响最显著；实验通过对透明质酸透皮吸收率的研究表明该透明质酸协同物具有一定的促渗吸收功效。

三、研究活性调理喷雾的复合配方实验

现采用人体实验的方法检测含透明质酸的活性调理喷雾在人体的生物活性，即镇定舒缓、抗炎修复、滋养调理活性，研究该活性调理喷雾以预防和调理皮肤不适。

本实验所有试验者均为不同程度的皮肤不适者，各样品喷雾成分组成如表4所示，实验组1采用透明质酸协同物2.6％+植物调理剂3.0％+矿泉水70.0％组合的喷雾每晚睡前喷洒1次；实验组2采用透明质酸协同物2.6％+植物调理剂3.0％组合的喷雾每晚睡前喷洒1次；实验组3采用透明质酸协同物2.6％+矿泉水70.0％组合的喷雾每晚睡前喷洒1次；阳性对照采用透明质酸协同物2.6％组合的喷雾每晚睡前喷洒1次；阴性对照采用生理盐水每晚睡前喷洒1次；比较五组调理7天后症状改善情况。

表4各实验组样品喷雾成分组成情况如下:

注：“-”表示未添加。

皮肤感觉不适、过敏、炎症、异味、污渍等症状评价：

显效：症状显著改善或消失，试验者满意；有效：症状有改善或减轻，试验者仍有不适，要求继续调理；无效：症状无明显减轻，试验者不满意。

统计学方法：采用SPSS12.0统计学软件进行统计学处理，计量和计数资料组间比较采用t检验和x²检验，以p<0.05为有统计学意义差异。

结果如下：

如表5所示，第8天症状改善情况：实验组1显效10例，总有效率100％；实验组2显效8例，有效1例，无效1例，总有效率90％，显效率与实验组1比较P<0.01；实验组3显效6例，有效3例，无效1例，总有效率90％，显效率与实验组1比较P<0.01；阳性对照显效2例，有效4例，无效4例，总有效率20％，显效率与实验组1比较P<0.01。

表5第8天各组试验者症状改善情况比较如下：

组别	样本数	显效	有效	无效	总有效率(％)
						实验组1	10	10	0	0	100
实验组2	10	8	1	1	90
						实验组3	10	6	3	1	90
阳性对照	10	2	4	4	60
						阴性对照	10	0	0	10	0

结论：

实验组1(透明质酸协同物2.6％+植物调理剂3.0％+矿泉水70.0％组合的喷雾)明显比实验组2(透明质酸协同物2.6％+植物调理剂3.0％组合的喷雾)、实验组3(透明质酸协同物2.6％+矿泉水70.0％组合的喷雾)、阳性对照有效。本发明含透明质酸的活性调理喷雾用人体实验表明(1)透明质酸协同物、植物调理剂和矿泉水三者组合的喷雾对预防和调理皮肤不适效果显著；(2)透明质酸协同物、植物调理剂和矿泉水三者组合的喷雾在短期内镇定舒缓、抗炎修复、滋养调理皮肤问题有一定功效，长期使用效果会更佳；(3)透明质酸协同物、植物调理剂和矿泉水三者组合的喷雾在预防和调理皮肤不适方面有明显的协同增强作用。

四、研究活性调理喷雾复合配方的最佳配比实验

分别将配比1.5％、2.6％、5.0％的透明质酸协同物，配比1.5％、3.0％、4.5％的植物调理剂，配比60.0％、70.0％、80.0％的矿泉水配制成活性调理喷雾，其他成分为抗敏剂和相关基质辅料，所有成分质量百分比总和100％。本实验所有试验者均为不同程度的皮肤不适者，实验1-27以透明质酸协同物、植物调理剂和矿泉水三者组合的不同配比的喷雾每天早晚喷洒2次进行三因素三水平的正交实验，观察调理后的情况；阳性对照28-30分别采用配比0.3％、0.5％、1.0％的透明质酸的喷雾每天早晚喷洒2次，观察调理后的情况；31为阴性对照使用生理盐水每天早晚喷洒2次，观察调理后的情况；每组5个病人，比较调理7天后症状改善情况。

表6正交实验因素表：

皮肤感觉不适、过敏、炎症、异味、污渍等症状评价标准同上。

统计学方法：采用SPSS12.0统计学软件进行统计学处理，计量和计数资料组间比较采用t检验和x²检验，以p<0.05为有统计学意义差异。

表7第8天各组试验者症状改善情况比较如下：

结论：

经人体使用实验，结果表明使用配比1.5％、2.6％、5.0％的透明质酸协同物，配比1.5％、3.0％、4.5％的植物调理剂，配比60.0％、70.0％、80.0％的矿泉水配制成的活性调理喷雾在镇定舒缓、抗炎修复、滋养调理皮肤问题方面均有一定的功效，但不局限此范围。

五、抑菌实验

取临床分离菌株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌少许，分别接种于肉汤培养基中，于37℃下培养18h。(绿脓杆菌肉汤培养基中添加20％的小牛血清)取18h培养的各菌株营养肉汤培养物，将其制成菌悬液用于实验。分别取灭菌试管11支，第1支加入营养肉汤液体培养基9ml，第2-10支加入5ml，第11支加入10ml，分别取样品喷雾如表8所示1ml加入第1支试管，混合均匀后取5ml加入第2支，依次稀释至第10支，第11支不加样品做为对照。每管加入大肠杆菌悬液0.1ml，37℃的温度下培养24h，取出观察细菌生长情况。金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌同上述实验观察生长情况。如试管变浑浊，即表示细菌生长，样品无抑菌作用；如试管清亮则表示细菌生长受到抑制。实验结果如表9所示，本发明含透明质酸的活性调理喷雾对临床分离菌株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌均有较强的抑菌作用。

表8抑菌实验各样品喷雾成分组成

	透明质酸协同物	植物调理剂	矿泉水	抗敏剂	基质辅料
						样品1	2.6％	3.0％	70.0％	0.3％	至100
样品2	2.6％	3.0％	-	0.3％	至100
						样品3	2.6％	-	70.0％	0.3％	至100
样品4	-	3.0％	70.0％	0.3％	至100
						样品5	2.6％	-	-	0.3％	至100
样品6	-	3.0％	-	0.3％	至100
						样品7	-	-	70.0％	0.3％	至100

注：“-”表示未添加。

表9各样品喷雾对应抑菌试验中最后清亮的试管编号

	大肠杆菌	金黄色葡萄球菌	绿脓杆菌	白色念珠菌
					样品1	7	6	6	7
样品2	5	4	4	5
					样品3	2	2	1	2
样品4	4	3	3	3
					样品5	2	1	-	-
样品6	3	2	1	2
					样品7	-	-	-	-

注：“-”表示未清亮。

将按照一定比例稀释后的上述清亮的肉汤试管和对照组转种肉汤琼脂平板，观察24h，无细菌生长的最小浓度即为杀菌浓度，记为C，单位为mg/mL，结果如表10所示，说明本发明含透明质酸的活性调理喷雾对临床分离常见的皮肤致病菌株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌均有较强的杀菌作用，可以有效抑制这些皮肤致病菌的活性以预防和调理皮肤不适；同时通过对比可以看出，含有透明质酸的活性调理喷雾在抑菌方面各组分还具有协同作用。

表10各样品喷雾杀菌情况

注：“-”表示无杀菌性。

六、急性经口毒性实验

根据检验依据《消毒技术规范》(第三版)第一分册实验技术规范之3.4(卫法监发[1999]第448号)。将动物(普通级NIH小鼠20只，雌雄各半，体重18～22g)供水禁食12小时，蒸馏水为溶剂，受试物(透明质酸协同物2.6％、植物调理剂3.0％、矿泉水70.0％、抗敏剂0.3％、基质辅料补至100％，组合配制成的活性调理喷雾)设剂量为5500mg/kg，按0.2ml/20g体重用灌胃针头将受试物一次灌给动物。给药后立即观察并记录动物的中毒表现、死亡数和死亡时间，每天观察二次，观察期两周。根据急性毒性分级标准进行毒性分级。实验结果：观察期内，受试小鼠未出现明显症状，无死亡发生。

表11受试物对NIH小鼠急性经口毒性试验结果

性别	剂量(mg/kg)	动物数(只)	死亡数(只)	死亡率(％)
					雌	5500	10	0	0
雄	5500	10	0	0

结论：本发明含透明质酸的活性调理喷雾对NIH小鼠的急性经LD50＞5000mg/kg，属实际无毒级。

以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利保护范围，凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims (10)

1.一种含透明质酸的活性调理喷雾，其特征在于，该活性调理喷雾由如下重量比的物质组成：

所述的透明质酸协同物包含透明质酸、聚谷氨酸和麦芽多糖。

2.如权利要求1所述的含透明质酸的活性调理喷雾，其特征在于，所述的植物调理剂包括复活草植物调理剂、草莓果植物调理剂、益母草植物调理剂、芦荟丝滑素植物调理剂、问荆植物调理剂。

3.如权利要求2所述的含透明质酸的活性调理喷雾，其特征在于，所述的植物调理剂经提取复活草、草莓果、益母草、芦荟丝滑素、问荆中的有效成分制备而成，各组分物质的基料重量比为复活草:草莓果:益母草:芦荟丝滑素:问荆＝1-2:2-3:1-3:3-5:1-3。

4.如权利要求3所述的含透明质酸的活性调理喷雾，其特征在于，所述的植物调理剂经提取复活草、草莓果、益母草、芦荟丝滑素、问荆中的有效成分制备而成，各组分物质的基料重量比为复活草:草莓果:益母草:芦荟丝滑素:问荆＝1:2.5:1.5:4:1。

5.如权利要求1所述的含透明质酸的活性调理喷雾，其特征在于，所述的抗敏剂选自尿囊素、甘草酸二钾、水溶性红没药醇、水溶性维生素E、燕麦β-葡聚糖中的一种或两种以上。

6.如权利要求1所述的含透明质酸的活性调理喷雾，其特征在于，所述的基质辅料包括甜菜碱、甘油聚醚-26、对羟基苯乙酮、1,2-己二醇、PEG-40氢化蓖麻油、氢氧化钾、EDTA-二钠、去离子水。

7.如权利要求1所述的含透明质酸的活性调理喷雾，其特征在于，所述的天然矿泉水选自阿尔卑斯山冰川水、长白山天然矿泉水、俄罗斯高加索山矿泉水、阿勒瓦尔温泉水、加拿大海泥矿物质水中的一种或两种以上。

8.如权利要求1所述的含透明质酸的活性调理喷雾，其特征在于，透明质酸协同物各组分的重量比为透明质酸:聚谷氨酸:麦芽多糖＝3-10:0.5-2:15-30。

9.如权利要求8所述的含透明质酸的活性调理喷雾，其特征在于，透明质酸协同物各组分的重量比为透明质酸:聚谷氨酸:麦芽多糖＝5:1:20。

10.如权利要求1至9任一所述的含透明质酸的活性调理喷雾的制备方法，包括如下步骤：

1)透明质酸溶液的制备：取透明质酸于35℃-40℃溶于1.0％的氯化钠溶液中，1000r/min-3000r/min搅拌3h-4h，调pH至5.0-5.6，加去离子水配成浓度范围在4.5％-9.0％的透明质酸溶液；

2)透明质酸协同液：先用10倍-20倍去离子水在30℃-50℃下溶解聚谷氨酸，再加入步骤1)制备的透明质酸溶液混合均匀，降温后加入麦芽多糖，混合均匀即为透明质酸协同液；

3)植物调理剂清膏的制备：将复活草、草莓果、益母草、芦荟丝滑素、问荆混合粉碎，加10倍量水，水煮2小时，过滤处理；滤渣加8倍量水，水煮1小时，过滤处理；滤渣再加8倍量的水，水煮1小时，过滤处理；将滤液合并，于50℃下减压浓缩至相对密度为1.0g/ml的清膏，加乙醇使含醇量达60％；静置24小时，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至无醇味，即制得植物调理剂清膏；

4)透明质酸协同液—植物调理剂溶液的制备：将步骤2)制备的透明质酸协同液与步骤3)制备的植物调理剂清膏进行混合，并将混合液置于30℃-50℃、60HZ-80HZ的超声环境下超声处理20min-50min；

5)活性调理喷雾的制备：将步骤4)制备的透明质酸协同液—植物调理剂溶液与抗敏剂、基质辅料、天然矿泉水混合均匀，并调节PH至6.0-7.2。