CN107278590A - 提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的方法 - Google Patents

提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的方法，在田七采收前2‑10天，用茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液交替喷施田七植株。本发明通过在田七采收前用茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液交替喷施田七的叶片，以诱导栽培田七中人参皂苷Rb1代谢关键酶基因的高表达，从而在短期内快速提高人参皂苷Rb1的含量。

Description

提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的方法
技术领域
本发明涉及中药栽培领域。更具体地说，本发明涉及一种提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的方法。
背景技术
田七[Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen]，为五加科人参属多年生草本植物，是我国著名的传统中药，主要以根和根茎入药，性温、味甘、微苦，具有散瘀止血，消肿定痛之功效。田七为著名的云南白药、复方丹参片(滴丸)、漳州片仔癀、血栓(塞)通、东北红药等中成药的主要原料。人参皂苷Rb1是田七中的主要活性成分之一，Rb1对脑、心、肺等器官缺血性损伤均有保护作用，能促进周围神经细胞再生，改善学习记忆功能，Rb1多方面的生物学活性使其在防治缺血性疾病和老年痴呆等方面有极大的应用价值。因此，提高田七中人参皂苷Rb1的含量则会使得田七的价值更高。目前传统的栽培、育种等方式虽能在一定程度上提高田七的产量，但栽培田七中人参皂苷Rb1含量低，而且传统育种周期长、难度大，难以快速地提高栽培田七中人参皂苷Rb1的含量。现有技术没有提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的报道。
发明内容
本发明的一个目的是解决传统栽培难以快速提高栽培田七中人参皂苷Rb1的含量的问题，并提供至少后面将说明的优点。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的方法，在田七采收前2-10天，用茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液交替喷施田七植株。
优选的是，所述茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液的浓度分别为620-1000μmol/L和540-800μmol/L。
优选的是，喷施方法为：早、中、晚均用所述茉莉酸甲酯溶液和所述水杨酸溶液交替喷施田七植株的叶片表面1次，每次喷施所述茉莉酸甲酯溶液和所述水杨酸溶液均至叶面滴水为止。
优选的是，还包括在田七籽条移栽前，用UV-B辐射处理籽条，所述UV-B辐射剂量为3-5kj.m-2.d-1，处理时间为3-5d。
优选的是，在田七幼苗移栽前，用浓度为540-800μmol/L的水杨酸溶液浸泡幼苗的根部，浸泡时间为10-20min。
优选的是，取重量份数如下的原料：硅藻土60-80份、园褐固氮菌0.1-0.5份、巨大芽孢杆菌0.1-0.3份、农杆菌A4 0.1-0.3份、鱼骨粉10-20份、花生麸20-30份，将上述原料混合后，均匀抛洒至田七种植地中，且在种植地中放养蚯蚓，再移栽田七幼苗。
优选的是，在田七籽条经过UV-B辐射后，再将田七籽条放于硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液中浸泡，且在浸泡过程中，将硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液放于磁场强度为200-250mT的磁场中处理6-8min，其中硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液中硫酸铜的浓度为0.1-0.3mmol/L，吲哚乙酸的质量浓度为0.005-0.015％。
优选的是，所述田七植株为3年生的田七植株。
本发明至少包括以下有益效果：
(1)本发明通过在田七采收前用茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液交替喷施田七的叶片，以诱导栽培田七中人参皂苷Rb1代谢关键酶(如鲨烯合酶、鲨烯环氧酶、葡萄糖基转移酶和细胞色素P450酶等)基因的高表达，从而在短期内快速提高人参皂苷Rb1的含量；
(2)本发明对田七籽条进行UV-B辐射处理，可以进一步诱导块根中人参皂苷Rb1代谢关键酶基因的高表达，进而提高栽培田七植株中人参皂苷Rb1的含量；
(3)用水杨酸浸泡田七幼苗的根部，可以诱导田七根部的相关酶，促进人参皂苷Rb1的合成；在田七种植地里抛洒硅藻土、园褐固氮菌、巨大芽孢杆菌、农杆菌、鱼骨粉、花生麸混合物，不但为田七生长创造了有机质环境，添加的园褐固氮菌、巨大芽孢杆菌、农杆菌也能促进田七根部对营养的吸收，促进田七的生长，进而提高栽培田七植株中人参皂苷Rb1的含量，硅藻土的存在也为田七生长创造良好的环境，放养蚯蚓于田七种植地中，可以增加土壤中的氧含量，更适合田七生长；
(4)本发明操作简便，成本低，对环境友好，适于规模化生产，具有较强的实用性和推广价值。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例1：
在田七籽条移栽前，用UV-B辐射处理籽条，UV-B辐射剂量为5kj.m-2.d-1，处理时间为3d，处理完后将田七籽条移栽到种植地中。在田七采收前10天，早、中、晚均用茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液交替喷施田七植株的叶片表面1次，每次喷施茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液均至叶面滴水为止，其中茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液的浓度分别为620μmol/L和800μmol/L，田七植株为3年生的田七植株。
实施例2：
在田七籽条移栽前，用UV-B辐射处理籽条，UV-B辐射剂量为3kj.m-2.d-1，处理时间为5d，处理完后将田七籽条移栽到种植地中。在田七采收前7天，早、中、晚均用茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液交替喷施田七植株的叶片表面1次，每次喷施茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液均至叶面滴水为止，其中茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液的浓度分别为810μmol/L和680μmol/L，田七植株为3年生的田七植株。
实施例3：
在田七籽条移栽前，用UV-B辐射处理籽条，UV-B辐射剂量为4kj.m-2.d-1，处理时间为4d，处理完后将田七籽条移栽到种植地中。在田七采收前2天，早、中、晚均用茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液交替喷施田七植株的叶片表面1次，每次喷施茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液均至叶面滴水为止，其中茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液的浓度分别为1000μmol/L和540μmol/L，田七植株为3年生的田七植株。
实施例4：
在田七籽条移栽前，用UV-B辐射处理籽条，UV-B辐射剂量为3kj.m-2.d-1，处理时间为5d。在田七籽条经过UV-B辐射后，再将田七籽条放于硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液中浸泡，且在浸泡过程中，将硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液放于磁场强度为200mT的磁场中处理8min，其中硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液中硫酸铜的浓度为0.1mmol/L，吲哚乙酸的质量浓度为0.005％，处理完后将田七籽条移栽到种植地中。田七籽条发芽产生幼苗，幼苗生长到一定程度时，在田七幼苗定植前，用浓度为620μmol/L的水杨酸溶液浸泡幼苗的根部，浸泡时间为14min。取重量份数如下的原料：硅藻土80份、园褐固氮菌0.5份、巨大芽孢杆菌0.3份、农杆菌A4 0.3份、鱼骨粉10份、花生麸26份，将上述原料混合后，均匀抛洒至田七种植地中，与田七种植地表层的土壤混合均匀，且在种植地中放养蚯蚓，再移栽处理后的田七幼苗。在田七采收前7天，早、中、晚均用茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液交替喷施田七植株的叶片表面1次，每次喷施茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液均至叶面滴水为止，其中茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液的浓度分别为900μmol/L和620μmol/L，田七植株为3年生的田七植株。
实施例5：
在田七籽条移栽前，用UV-B辐射处理籽条，UV-B辐射剂量为3.5kj.m-2.d-1，处理时间为4d。在田七籽条经过UV-B辐射后，再将田七籽条放于硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液中浸泡，且在浸泡过程中，将硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液放于磁场强度为250mT的磁场中处理6min，其中硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液中硫酸铜的浓度为0.3mmol/L，吲哚乙酸的质量浓度为0.01％，处理完后将田七籽条移栽到种植地中。田七籽条发芽产生幼苗，幼苗生长到一定程度时，在田七幼苗定植前，用浓度为750μmol/L的水杨酸溶液浸泡幼苗的根部，浸泡时间为20min。取重量份数如下的原料：硅藻土70份、园褐固氮菌0.4份、巨大芽孢杆菌0.2份、农杆菌A4 0.1份、鱼骨粉20份、花生麸20份，将上述原料混合后，均匀抛洒至田七种植地中，与田七种植地表层的土壤混合均匀，且在种植地中放养蚯蚓，再移栽处理后的田七幼苗。在田七采收前7天，早、中、晚均用茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液交替喷施田七植株的叶片表面1次，每次喷施茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液均至叶面滴水为止，其中茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液的浓度分别为630μmol/L和750μmol/L，田七植株为3年生的田七植株。
实施例6：
在田七籽条移栽前，用UV-B辐射处理籽条，UV-B辐射剂量为4kj.m-2.d-1，处理时间为4d。在田七籽条经过UV-B辐射后，再将田七籽条放于硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液中浸泡，且在浸泡过程中，将硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液放于磁场强度为220mT的磁场中处理7min，其中硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液中硫酸铜的浓度为0.2mmol/L，吲哚乙酸的质量浓度为0.015％，处理完后将田七籽条移栽到种植地中。田七籽条发芽产生幼苗，幼苗生长到一定程度时，在田七幼苗定植前，用浓度为800μmol/L的水杨酸溶液浸泡幼苗的根部，浸泡时间为20min。取重量份数如下的原料：硅藻土60份、园褐固氮菌0.1份、巨大芽孢杆菌0.1份、农杆菌A4 0.2份、鱼骨粉18份、花生麸30份，将上述原料混合后，均匀抛洒至田七种植地中，与田七种植地表层的土壤混合均匀，且在种植地中放养蚯蚓，再移栽处理后的田七幼苗。在田七采收前7天，早、中、晚均用茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液交替喷施田七植株的叶片表面1次，每次喷施茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液均至叶面滴水为止，其中茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液的浓度分别为730μmol/L和800μmol/L，田七植株为3年生的田七植株。
将实施例1、实施例4采收的田七根部以及常规的方法栽培的田七根部分别取6组，每组500g，根据《中国药典》第一部“田七”药材【含量测定】项下的方法，用甲醇提取各组人参皂苷Rb1，高效液相色谱法测定各组人参皂苷Rb1含量，然后求平均值，得到的实验结果如表1所示：
表1
实验组 实施例1 实施例4 常规方法
人参皂苷Rb1含量 3.34％ 3.42％ 2.82％
由表1可以看出，实施例1和实施例4相对于常规方法栽培的田七中的人参皂苷Rb1含量分别提高了18.4％和21.3％，因此田七中的有效成分也得到了提高，故本发明对提高田七的药用价值具有重要的意义。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。

Claims (8)

1.一种提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的方法，其特征在于，在田七采收前2-10天，用茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液交替喷施田七植株。
2.如权利要求1所述的提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的方法，其特征在于，所述茉莉酸甲酯溶液和水杨酸溶液的浓度分别为620-1000μmol/L和540-800μmol/L。
3.如权利要求1所述的提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的方法，其特征在于，喷施方法为：早、中、晚均用所述茉莉酸甲酯溶液和所述水杨酸溶液交替喷施田七植株的叶片表面1次，每次喷施所述茉莉酸甲酯溶液和所述水杨酸溶液均至叶面滴水为止。
4.如权利要求1所述的提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的方法，其特征在于，还包括在田七籽条移栽前，用UV-B辐射处理籽条，所述UV-B辐射剂量为3-5kj.m-2.d-1，处理时间为3-5d。
5.如权利要求1所述的提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的方法，其特征在于，在田七幼苗移栽前，用浓度为540-800μmol/L的水杨酸溶液浸泡幼苗的根部，浸泡时间为10-20min。
6.如权利要求1所述的提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的方法，其特征在于，取重量份数如下的原料：硅藻土60-80份、园褐固氮菌0.1-0.5份、巨大芽孢杆菌0.1-0.3份、农杆菌A40.1-0.3份、鱼骨粉10-20份、花生麸20-30份，将上述原料混合后，均匀抛洒至田七种植地中，且在种植地中放养蚯蚓，再移栽田七幼苗。
7.如权利要求4所述的提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的方法，其特征在于，在田七籽条经过UV-B辐射后，再将田七籽条放于硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液中浸泡，且在浸泡过程中，将硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液放于磁场强度为200-250mT的磁场中处理6-8min，其中硫酸铜和吲哚乙酸的混合溶液中硫酸铜的浓度为0.1-0.3mmol/L，吲哚乙酸的质量浓度为0.005-0.015％。
8.如权利要求1所述的提高栽培田七中人参皂苷Rb1含量的方法，其特征在于，所述田七植株为3年生的田七植株。
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