CN107206034A - 包含双歧杆菌的免疫调节组合物 - Google Patents

包含双歧杆菌的免疫调节组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN107206034A
CN107206034A CN201680007471.2A CN201680007471A CN107206034A CN 107206034 A CN107206034 A CN 107206034A CN 201680007471 A CN201680007471 A CN 201680007471A CN 107206034 A CN107206034 A CN 107206034A
Authority
CN
China
Prior art keywords
composition
bifidobacterium
virus
subject
purposes according
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201680007471.2A
Other languages
English (en)
Inventor
M.勒廷恩
S.拉廷恩
R.B.图纳
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
DuPont Nutrition Biosciences ApS
Danisco US Inc
Original Assignee
Danisco US Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Danisco US Inc filed Critical Danisco US Inc
Publication of CN107206034A publication Critical patent/CN107206034A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/745—Bifidobacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56983—Viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/314—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on lung or respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/51—Bifidobacterium
    • A23V2400/515—Animalis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/51—Bifidobacterium
    • A23V2400/531—Lactis
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/52—Assays involving cytokines

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及可源自于双歧杆菌的组合物、其方法和用途，用于通过影响受试者中的病毒作用和/或病毒效应来调节所述受试者中的免疫系统。此外，所述组合物还可以用于降低受试者中慢性呼吸道疾病例如哮喘和COPD的发展和恶化的风险；优选地通过影响所述受试者中的病毒作用和/或病毒效应来调节该受试者的免疫系统。

Description

包含双歧杆菌的免疫调节组合物
技术领域
本发明涉及可源自于双歧杆菌的组合物及其方法和用途，其中所述组合物调节免疫系统。具体地，所述组合物影响病毒作用并减少病毒效应。例如，减轻由病毒感染引起的炎症和抑制病毒复制。
此外，本发明降低了发展的风险，并且降低了慢性呼吸道疾病(例如哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD))恶化的严重性和发生率。
背景
在出生时，新生儿暴露于母亲的微生物群和来自环境的微生物，这些微生物开始在消化道、呼吸道和泌尿生殖道中以及皮肤的粘膜表面的定植(Calder 2013)。该过程开启免疫系统的成熟。定植的微生物群和肠道免疫系统相互作用以建立彼此之间的终身容忍和共生(Tourneur&Chassin 2013)。这种双向互动性是影响我们的免疫系统和健康的功能和内稳态的一个终身过程。因此，该微生物群的组成和代谢对我们从出生到死亡的免疫健康具有直接影响(Maynard等人，2012)。因此，经由引入益生菌菌株调节固有的肠道微生物群可能在预防保健和在特定条件的管理中起着重要作用。(Wall等人，2009)益生菌最普遍接受的定义是由FAO/WHO工作组提出的：“Live microorganisms which when administeredin adequate amounts confer a health benefit on the host”(FAO/WHO.Guidelinesfor the evaluation of probiotics in food 2001.Food and AgricultureOrganization of the United Nations(FAO).2001)[“活体微生物当以足够的量给予时对宿主赋予健康益处”(FAO/WHO，食品中益生菌评估指南2001，联合国粮食与农业组织(FAO)，2001)]。最常使用的益生菌是乳酸菌，例如属于乳杆菌属(Lactobacillus)和双歧杆菌属(Bifidobacterium)的乳酸菌。
致病性病毒具有许多形式，并且可以引起许多效应和症状。此外，尽管存在病毒感染的普遍性，但是在大多数情况下很少进行治疗。
人类鼻病毒(HRV)感染是感冒的原因，并且这种疾病对社会造成巨大的健康和经济负担(Heikkinen T，A.2003)。
儿童每年平均有6-8次感冒，成年人有1-4次，其中大约一半是由鼻病毒引起的(Heikkinen T，A.2003)。
通常，感冒本身是一种自限性疾病，并且不通过任何药物处理就会痊愈。然而，症状令人不悦，并且可能持续从数天至数周。
鼻病毒(和许多其他病毒)通常通过自身接种(例如通过触摸鼻孔)从环境中捕获。HRV然后通过鼻粘液并感染气道的上皮细胞。上皮和先天免疫细胞的反应引起炎症性反应和炎症性介质(例如细胞因子和趋化因子，例如IL-1β、IL-6、RANTES(CCL5)、GM-CSF、IP-10)和鼻IL-8的分泌。这些细胞因子介导免疫细胞对引起感冒症状的病毒感染细胞的攻击。在健康受试者中，HRV引起炎症性反应和感冒症状，其不通过任何治疗就会痊愈。类似的免疫反应响应于其他病毒感染而发生。
HRV感染与患有哮喘、COPD和特发性肺纤维化(IPF)的受试者中的这些病症的恶化有关(Saraya等人，2014)。在大约26％-36％的哮喘、3％-27％的COPD、和5％的IPF病例中，已经发现HRV感染引起恶化(Saraya等人，2014；表1)。而且其他病毒像呼吸道合胞病毒(RSV)和流感与该病因学有关(Gunawardana等人，2014，抗病毒研究)。此外，HRV感染与RSV和偏肺病毒一起与儿童喘息发作(细支气管炎)的早期发病有关(Saglani 2014)。大约三分之一的在三岁内喘息的儿童在以后的生活中继续喘息，因此由病毒感染或感冒引起的喘息是发展哮喘的风险因素(Sigurs等人，2010；Jackson等人，2012)。
在哮喘患者中，已知炎症性细胞因子(包括IL-8)会恶化病理状态，并且观察到哮喘患者具有气道高反应性和气道重构特征的嗜中性粒细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞炎症(Wark等人，2002；Proud 2011)。在哮喘患者中，已经发现一种缺陷型抗病毒机制(Contoli2006)，并且已经证明鼻内接种的HRV在哮喘患者中诱导与病毒载量和气道炎症相关的临床疾病(Message等人，2008)。
关于常见的呼吸道疾病症状，有几项安慰剂对照临床研究已经检查了益生菌的功效(Hao 2011；Kang 2014)。这些研究表明，与安慰剂补充剂相比，益生菌补充剂可能会降低疾病的发生率和持续时间(Hao 2011 Kang 2014)。然而，这些研究仅研究了呼吸道疾病的症状，而不是病原体像病毒。
临床试验研究了益生菌对儿童哮喘发展的功效，但没有一项研究着眼于鼻病毒与哮喘发展的关系(Azad 2013；Elazab 2013)。
在COPD受试者中，研究已经发现炎症介质在恶化中的作用，并且与病毒感染存在明显关联(Gunawardana等人，2014)。一个研究团队在实验性鼻病毒模型中测试了具有轻度COPD的患者，在该实验性鼻病毒模型中将HRV接种到许多志愿者的鼻子中；接着测试病毒滴度和炎症(Mallia等人，2013)。他们证实COPD患者中的IL-8水平高于健康对照中的水平。此外，发现在COPD患者的鼻腔灌洗液中病毒滴度高于健康对照(Gunawardana等人，2014)，表明在COPD患者中的抗病毒防御机制有缺陷。因此，在COPD患者中炎症(由IL-8指示)和病毒滴度更高。
诸位发明人令人惊奇地发现，使用双歧杆菌调节免疫系统不仅影响病毒作用，而且还减少病毒效应例如炎症。此外，在具有这种作用的情况下，本发明的组合物有助于减轻哮喘和COPD恶化，并且还降低在易感个体中使受试者偏向于发展哮喘或COPD的病毒感染(例如HRV感染)的风险。
概述
本发明基于诸位发明人令人惊奇地发现：使用双歧杆菌(即双歧杆菌属物种)调节免疫系统。具体地，这些益生菌影响病毒作用和病毒效应(包括病毒复制)，和/或减轻由病毒感染引起的炎症。
诸位发明人已经发现向受试者给予双歧杆菌导致病毒复制的抑制和炎症反应的降低。
诸位发明人已经进一步发现向受试者给予双歧杆菌调节在病毒感染期间的适应性免疫反应。具体地，这在鼻病毒感染中发生。
因此，在本发明的一个方面，提供了可源自于双歧杆菌的组合物，用于通过影响受试者中的病毒作用和/或病毒效应来调节所述受试者中的免疫系统。
在本发明的另一方面，提供了通过影响受试者中的病毒作用和/或病毒效应来调节所述受试者中的免疫系统的方法，该方法包括使用将向所述受试者给予和/或被其吸收的组合物；并且其中所述组合物可源自于双歧杆菌。
在另外的方面，提供了可源自于双歧杆菌的组合物在制造用于通过影响受试者中的病毒作用和/或病毒效应来调节所述受试者中的免疫系统的组合物的用途。
本文还提供了可源自于双歧杆菌的组合物，该组合物用于降低受试者中慢性呼吸道疾病的发展和恶化的风险；优选地通过影响受试者中的病毒作用和/或病毒效应来调节所述受试者中的免疫系统。
优选地，本发明的所述组合物是药物、食物产品或膳食补充剂。
在另一个方面，本文提供了可源自于双歧杆菌的用于调节受试者中的免疫系统的组合物，或所述组合物的方法或用途，其中该免疫系统的调节调节受试者中的生物标志物水平，优选地降低受试者中的生物标志物水平。优选地，所述生物标志物是细胞因子和/或趋化因子。最优选地，所述生物标志物是IL-8和/或IL-1β和/或MCP-1。
优选地，所述组合物、方法或用途调节先天免疫系统、适应性免疫系统或两者。
在本发明的另外的方面，提供了可源自于双歧杆菌的用于降低受试者中慢性呼吸道疾病的发展和恶化的风险的组合物。优选地慢性呼吸道疾病的发展和恶化的风险由于通过影响所述受试者中的病毒作用和/或病毒效应来调节免疫系统而降低；优选地抑制病毒复制和/或减轻由病毒感染引起的炎症。
优选地，本发明的组合物降低哮喘和/或COPD的发展和恶化的风险。
具体地，本文提供了降低儿童哮喘的发展和恶化的风险的组合物。
在本文使用的一个实例中，所述组合物可源自于双歧杆菌，优选双歧杆菌属，优选动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种(即乳酸双歧杆菌(Bifidobacterium lactis))，更优选乳酸双歧杆菌BL-04。
因此，优选所述组合物可源自于双歧杆菌。
因此，优选所述组合物可源自于动物双歧杆菌。
因此，优选所述组合物可源自于动物双歧杆菌乳酸亚种。
因此，优选所述组合物可源自于乳酸双歧杆菌BL-04-其有时被称为乳酸双歧杆菌乳酸亚种BL-04。这两个术语是可互换的。
对于一些实施例，根据本发明使用的双歧杆菌在酸性pH条件下对胃蛋白酶具有良好的抗性，对胰液素具有良好的抗性和/或对胆汁盐具有良好的耐受性。
应当理解的是，根据本发明的组合物可以被配制成药物、食物产品或膳食补充剂。在优选的实施例中，将组合物配制成膳食补充剂。
有利地，当该产品是食品时，双歧杆菌和/或双歧杆菌的发酵产物和/或双歧杆菌的细胞裂解物通过正常的“最迟销售”日期或“截止”日期(在该日期期间食物产品由零售商出售)保持有效(例如细菌保持存活力)。优选地，有效时间应当超过这样的日期，直到当食品腐败变得明显时的正常新鲜期结束。期望的时间长度和正常保质期将随食品而变化，并且本领域普通技术人员将认识到，保质期时间取决于食品的种类、食品的大小、储存温度、加工条件、包装材料和包装设备而变化。
详细说明
本发明的详细方面如下所述。在详细方面的一些部分将在单独的部分进行讨论。这是为了便于参考，并且绝对不是限制性的。下面描述的所有实施例同样适用于本发明的所有方面，除非上下文另有具体规定。
在以下文本中，术语“包含”(comprising)涵盖“含有”(including)以及“由......组成”(consisting)，例如“包含”X的组合物可以仅由X组成，或者可以含有另外的某物例如X+Y。
词语“实质上”不排除“完全”，例如，“实质上不含”Y的组合物可以完全不含Y。在适当或必要的情况下，可以从本发明的定义中省略词语“实质上”。
关于数值z的术语“约”是任选的，并且意指例如z±20％，优选z±15％、优选z±10％、优选z±5％。
术语“一个/一种”(a)包括单数和复数。
本发明在一个实施例中提供了可源自于双歧杆菌的组合物，其用于通过影响受试者中的病毒作用和/或病毒效应来调节所述受试者中的免疫系统。
如本文中所使用，术语“病毒”在本领域中具有其正常的含义，因此通常是指仅由遗传物质、蛋白质外壳和任选地在所述蛋白质外壳周围的脂质包膜组成的病原(diseaseagent)。
病毒的实例包括鼻病毒、冠状病毒、副流感病毒、腺病毒、肠病毒或呼吸道合胞病毒。
如本文中所使用，术语“鼻病毒”是指感冒的致病因子。该术语涵盖病毒的肠病毒属和小RNA病毒科的鼻病毒物种的任何菌株。该术语包括鼻病毒A、B和C。
“人类鼻病毒”在本文中也称为“HRV”。
如本文中所使用，术语“病毒感染”是指病毒在受试者中存在并繁殖的状态。病毒感染可能在受试者中引起症状和疾病，或者可能作为亚临床感染存在而不会在受试者中引起症状和疾病。
鼻病毒感染的症状包括咽喉疼痛、打喷嚏、鼻塞、发热、流鼻涕、咳嗽、咳嗽伴有胸闷、和咳嗽伴有气喘。
此外，鼻病毒感染可能引起呼吸道炎症。
所述炎症可能存在于下呼吸道或上呼吸道中。
如本文中所使用，术语“炎症”涵盖与病毒感染相关的任何炎症，包括例如扁桃体炎、中耳炎、鼻炎(鼻粘膜炎症)；鼻窦炎或窦炎(鼻孔和鼻旁窦包括额部、筛骨、上颌骨和蝶骨的炎症)；鼻咽炎(nasopharyngitis)、鼻咽炎(rhinopharyngitis)(鼻孔、咽、下咽部、悬雍垂和扁桃体的炎症)；咽炎(咽、下咽部、悬雍垂和扁桃体的炎症)；会厌炎或声门上喉炎(喉部和声门上区的上部的炎症)；喉炎(喉的炎症)；喉气管炎(喉、气管和声门下区的炎症)；气管炎(气管和声门下区的炎症)；支气管炎(支气管的炎症)、细支气管炎、急性支气管炎和病毒性或细菌性肺炎。
如本文中所使用，术语“病毒性效应”和“病毒效应”可互换使用，并且是指遭受病毒感染的受试者可能经历的任何一种或多种症状，特别是上述讨论的那些症状，例如咽喉疼痛、打喷嚏、鼻塞、发热、流鼻涕、咳嗽、咳嗽伴有胸闷、和咳嗽伴有气喘、疲劳或任何炎症。
如本文中所使用，术语“疾病”(illness和disease)是指由一组特征性症状和体征显现的任何身体部位、器官或系统的正常结构和/或功能的任何偏离或中断。该术语涵盖具有已知或未知病因学和/或病理学的病症。
如本文中所使用，术语“呼吸道疾病”或“呼吸道感染”是指影响呼吸道的任何疾病，包括上呼吸道和下呼吸道的两种疾病。
在一个实施例中，呼吸道疾病是上呼吸道疾病。
呼吸道疾病可能是由病毒感染例如鼻病毒感染引起的，并且可能诱导上述病毒感染或病毒效应的任何一种或多种症状。
呼吸道疾病可能是暂时性的/急性的或慢性的和/或复发的。
呼吸道疾病可能由环境的、过敏反应的或遗传的因素(包括细菌或病毒感染)或这些因素的任何组合引起。
在一个实施例中，根据本发明的组合物可以用于治疗或预防病毒效应。在优选的实施例中，根据本发明的组合物可以用于治疗或预防由病毒感染(特别是鼻病毒感染)引起的炎症。在一个实施例中，呼吸道疾病是下呼吸道疾病。
如本文中所使用，术语“病毒性作用”或“病毒作用”可互换使用，并且意指病毒本身进行的任何活动，例如感染受试者或复制。
在一个实施例中，本发明涉及减少一种或多种发生率，和/或病毒感染的持续时间或严重性，优选病毒感染的发生率。具体地，这在COPD和/或哮喘患者中发生。最优选地，病毒感染是鼻病毒感染。
在一个实施例中，本发明涉及在易患哮喘的受试者中(特别是当这些受试者是儿童时)减少发生率和/或病毒感染的持续时间或严重性中的一者或多者。最优选地，病毒感染是鼻病毒感染。
在另一个实施例中，本发明涉及降低由受试者经历的病毒效应的发生率、持续时间或严重性(优选发生率)。具体地，减少由病毒感染引起的呼吸道炎症。
优选地，与不给予源自于双歧杆菌的组合物的对比受试者中病毒感染的发生率(数量或频率)、持续时间或严重性或病毒感染的症状相比，在给予源自于双歧杆菌的组合物之后，病毒感染的发生率(数量或频率)、持续时间或严重性分别降低或由病毒感染引起的病毒性炎症减轻。
如本文中所使用，术语“可源自”意指从来源获得或产生。术语“可源自”包括术语“源自”。本发明的组合物可源自于完整的双歧杆菌、和/或双歧杆菌的发酵产物和/或双歧杆菌的细胞裂解物。
慢性呼吸道疾病
在本发明的一个方面，提供了可源自于双歧杆菌的用于降低受试者中慢性呼吸道疾病(特别是哮喘和COPD)的发展和恶化的风险的组合物。
在一个优选实施例中，该受试者是人类受试者。在最优选的实施例中，该受试者是人类儿童，最优选年龄在16岁以下。对于一些实施例，该人类儿童年龄在10岁以下。对于一些实施例，该人类儿童年龄在8岁以下。对于一些实施例，该人类儿童年龄在6岁以下。对于一些实施例，该人类儿童年龄在4岁以下。对于一些实施例，该人类儿童为约3岁或更小的年龄。
此外，本发明提供了减少受试者中慢性呼吸道疾病发展和恶化的风险的方法，所述方法包括向所述受试者给予可源自于双歧杆菌的组合物。
在另外的实施例中，本发明提供了可源自于双歧杆菌的组合物在制造用于降低受试者中慢性呼吸道疾病发展和恶化的风险的组合物的用途。
术语“慢性呼吸道疾病”是指呼吸道疾病以及任何其他呼吸系统疾病，包括肺部疾病，这些疾病在受试者的整个生命中不断持续或复发。
慢性呼吸道疾病包括COPD、哮喘、慢性支气管炎、囊性纤维化、肺气肿和特发性肺纤维化。
病毒感染以及特别是鼻病毒感染，可能增加发展慢性呼吸道疾病和加重现有的慢性呼吸道疾病的可能性(Saraya等人，(2014))。因此，本发明有利地通过抑制鼻病毒感染和/或减轻由鼻病毒感染引起的炎症来降低慢性呼吸道疾病的风险和/或减轻其恶化。
具体地，在一个实施例中，本发明减少与鼻病毒感染相关的呼吸道炎症。
COPD
慢性阻塞性肺病(COPD)是一种肺部疾病，其特征是干扰正常呼吸的肺部气流的慢性阻塞，并且不是完全可逆的。根据世界卫生组织(WHO)的定义，术语‘慢性支气管炎’和‘肺气肿’现已纳入COPD诊断。
COPD诊断通过称为呼吸量测定法的简单测试来确认，该呼吸量测定法测量人的呼吸程度如何以及空气能够多快地进出肺部。在任何具有咳嗽、痰液产生或呼吸困难(难以呼吸或呼吸费力)的症状的患者和/或具有暴露于该疾病的风险因素的病史的患者应考虑进行这样的诊断。在肺呼吸量测定法不可用的情况下，可以使用其他工具进行COPD诊断。
临床症状和体征例如呼吸异常短促和强制呼气时间增加可以用于辅助诊断。低的峰流量与COPD一致，慢性咳嗽和痰液产生也是如此。
哮喘
哮喘是一种慢性疾病，其特征是复发性发作的呼吸急促、咳嗽和气喘，其严重性和频率因人而异。
在受影响个体中，症状在一天或一周中可能发生若干次，并且对于有些人在身体活动期间或在晚上变得更糟。
在哮喘发作期间，支气管的衬里膨胀，导致气道变窄并且减少空气流入和流出肺部。复发性哮喘症状经常导致失眠、日间疲劳、活动水平降低、以及学校和工作缺席。
急性哮喘症状的治疗通常是吸入短效β-2激动剂(如沙丁胺醇(salbutamol))和口服皮质类固醇。在非常严重的情况下，可以使用静脉内皮质类固醇。
双歧杆菌
本发明适用于双歧杆菌的任何成员，例如双歧杆菌属的任何成员-其是通常从胃肠道菌群分离的革兰氏阳性厌氧细菌。
虽然本发明不旨在限于任何特定的双歧杆菌物种，但是在一些特别优选的实施例中，双歧杆菌优选是动物双歧杆菌，更优选是来自动物双歧杆菌乳酸亚种(即，乳酸双歧杆菌)，更优选地乳酸双歧杆菌BL-04可用于本发明。该术语旨在包括已经被重新分类的物种(例如，由于遗传和其他调查的结果导致的生物体的物种形成的变化)或为营销和/或其他目的而更名的物种。
乳酸双歧杆菌BL-04
乳酸双歧杆菌BL-04(本文也称为“BL-04”和“Bl-04”)也称为动物双歧杆菌乳酸菌亚种BL-04-这些术语在本文中可互换使用。乳酸双歧杆菌BL-04也被称为DGCC2908和RB4825。
乳酸双歧杆菌BL-04最初从健康成年人的粪便样品中分离出，并且是已经在美国典型培养物保藏中心(ATCC)安全储存库作为菌株SD5219使用和储存的商业菌株(参见Barrangou R.，等天；J.Bacteriol.191：4144-4151(2009))。这是一种公开可获得的菌株(可获得自杜邦公司(DuPont))。
如本文中所使用，术语“双歧杆菌的发酵产物”意指从在合适的培养基中培养(例如发酵)双歧杆菌而产生的组合物；或其上清液或级分或组分。在一个实施例中，双歧杆菌的发酵产物是从在合适的培养基中培养(例如发酵)双歧杆菌而产生的全部组合物。发酵产物可以在使用前进行干燥。
在一个实施例中，双歧杆菌的发酵产物可以包含有活力的双歧杆菌。在另一个实施例中，双歧杆菌的发酵产物可以是无细胞的发酵产物。无细胞的发酵产物可以是从在合适的培养基中培养(例如发酵)双歧杆菌而产生的双歧杆菌的发酵产物，其已经被修饰以去除细菌细胞和/或使其无活性以提供无细胞的发酵物。在另一个实施例中，双歧杆菌的发酵产物可以包含非有活力的双歧杆菌，其可能是完整的或裂解的。
如本文中所使用，术语“无细胞的”意指发酵产物(优选发酵物)实质上不含有活力的细菌细胞，通常含有小于约105个有活力的细菌细胞/mL发酵产物、小于约104个有活力的细菌细胞/mL发酵产物、小于约103个有活力的细菌细胞/mL发酵产物、小于约102个有活力的细菌细胞/mL发酵产物、或小于约10个有活力的细菌细胞/mL发酵产物。优选地，发酵产物实质上不含细胞，通常含有少于约105个细胞/mL发酵产物、小于约104个细胞/mL发酵产物、小于约103个细胞/mL发酵产物、小于约102个细胞/mL发酵产物、或小于约10个细胞/mL发酵产物。
在一个方面，可以从发酵产物(例如发酵物)中分离一种或多种细胞。这样的分离可以通过本领域已知的任何手段(包括通过离心和/或过滤)实现。例如，可以将发酵产物过滤(在多步骤过程中一次或多次)以除去诸如微粒物质、细胞等的组分。可替代地或另外，可以通过离心从发酵产物(例如发酵物)中分离出一个或多个细胞和/或一个或多个孢子，从而产生上清液。取决于离心的速度和持续时间，上清液可以是无细胞的(即，无细胞的上清液)，或者上清液可以含有细胞，其可以被过滤或进一步离心以提供无细胞的上清液。
在一些方面，双歧杆菌的发酵产物可以是培养基的粗提取物。
在一些方面，双歧杆菌的发酵产物可以包括在双歧杆菌的培养之后(例如在最后)存在的成分的混合物。因此，除了活性成分之外，术语发酵产物可以包含其他组分例如微粒物质、固体、在培养期间未使用的底物、碎片、培养基和细胞废物。
如本文中所使用，术语“双歧杆菌的细胞裂解物”意指通过裂解一种或多种双歧杆菌细胞产生的细胞碎片和流体。优选地，该一种或多种双歧杆菌细胞在裂解前分离。
优选地，该双歧杆菌细胞通过以下方法裂解：在补充有0.05％半胱氨酸的MRS(或另一种合适的培养基)中，在37℃下厌氧培养双歧杆菌；通过离心(6000rpm/5min)收获细菌细胞；吸出上清液并将沉淀任选地冷冻在-70℃；向1.5ml细菌细胞培养物的沉淀中添加150μl的T10E1(10mM Tris-HCl，pH 7.5；1mM EDTA)并涡旋以重悬细胞沉淀；向每个重悬的细菌沉淀中(来自1至1.5ml培养物)添加1μl的Ready-LyseTM溶菌酶(Epicentre公司，Vol 10，No.3，2003)；在37℃下孵育30分钟至过夜；对于每个1至1.5ml的沉淀的培养物，将1μl的蛋白酶K(50μg/μl)稀释至150μl的2X T&C裂解溶液中(两者均在MasterPure DNA纯化试剂盒中提供，或单独出售)；将150μl的蛋白酶K/裂解溶液添加到样品中并且充分混合；在65℃至70℃下孵育15分钟，每5分钟短暂旋涡；将样品冷却至37℃；向每个样品中添加1μl的RNA酶A(5μg/μl，在试剂盒中提供，或单独出售)，并且充分混合；在37℃下孵育30分钟；将样品置于冰上。
用于革兰氏阳性细菌的替代性裂解方法可以用于裂解双歧杆菌-这是本领域技术人员已知的。
合适地，双歧杆菌的发酵产物可以是存在于从在以下条件下培养的双歧杆菌的培养物中分离的上清液相中的发酵产物：在补充有0.05％半胱氨酸的MRS(或另一种合适的培养基)中在37℃下厌氧培养。
在一个实施例中，通过在培养基中培养细菌直到培养物在λ600处的OD达到至少0.6，优选0.6至1.5，可能可获得(优选获得)发酵产物；任选地通过离心和/或过滤(例如像在25℃、3000g下离心5min和/或无菌过滤)除去细菌以产生包含一种或多种活性成分的无细胞发酵产物。
合适地，使用具有1.0％糖或不具有糖的MRS培养基可获得(优选获得)发酵产物。合适地，通过在37℃下培养细菌可获得(优选获得)发酵产物。合适地，通过厌氧培养细菌可获得(优选获得)发酵产物。
双歧杆菌的培养可以在从约1至约72小时(h)、从约5至约60h、或从约10至约54h或从24至48h内发生。
在一个方面，可以进行培养直到营养物耗尽(优选全部营养物)发生。
在一个方面，培养持续有效达到细菌生长的稳定期的时间。
在培养期间的温度可以为从约30℃至约50℃、从约32℃至约40℃、或从约34℃至约38℃、或在约37℃。
在培养期间的pH可以为从约5至约9、从约5至约6、从约6至约7、从约7至约8的pH。
在一个方面，培养优选在通气下发生。
分批培养和连续培养是本领域普通技术人员已知的。本发明的发酵产物可以使用分批培养或连续培养来制备。
合适地，可以在培养过程期间或结束时收获发酵产物。
在一个方面，本发明的发酵产物在指数期期间或结束时收获。
在一个方面，本发明的发酵产物在稳定期时或期间收获。
在本发明的一个方面，发酵产物可以在商业条件下在大桶中生产。
在一个方面，在培养期间(例如在发酵期间)搅动和/或搅拌培养物。
在一个方面，在培养期间监测和/或控制氧化作用的水平。
合适地，包含根据本发明的双歧杆菌的组合物或双歧杆菌的发酵产物或双歧杆菌的细胞裂解物可以是在冷冻之前或之后处于细菌悬浮液形式，或处于浓缩物的形式，以干燥的、冻干的或冻结的形式。无论使用什么形式，都可以将菌株冷冻。
在一个实施例中，包含根据本发明的双歧杆菌的组合物不包含另外的微生物，例如，不包含另外的益生细菌。
在一个实施例中，根据本发明的组合物由双歧杆菌，例如连同赋形剂、稀释剂或载体一起组成。
合适地，根据本发明的包含双歧杆菌和/或双歧杆菌的发酵产物和/或双歧杆菌的细胞裂解物的组合物可以含有一种或多种添加剂。合适地，可以在组合物的干燥期间和/或冻干期间添加添加剂。
在一个实施例中，优选本发明的组合物和/或发酵产物中的双歧杆菌是有活力的。
术语“有活力的”意指微生物(细菌)具有代谢活性或能够分化。
在优选的实施例中，组合物包含有活力的双歧杆菌。
在一些实施例中，在形成包含本发明的双歧杆菌的组合物之前，双歧杆菌(例如有活力的细胞)从培养它的培养基中或从发酵产物中分离。
剂量
根据本发明使用的源自于双歧杆菌的组合物可以包含从106至1012CFU的细菌/g组合物，并且更具体地从108至1012CFU的细菌/g组合物，优选对于冻干形式109至1012CFU/g。
合适地，根据本发明使用的源自于双歧杆菌的组合物可以以从约106至约1012CFU的双歧杆菌/剂量，优选约108至约1012CFU的双歧杆菌/剂量的剂量给予。术语“每剂量”意指每天或每次摄入(优选每天)向受试者提供这种量的双歧杆菌。例如，如果双歧杆菌将在食物(例如在酸奶中)中给予，则酸奶将优选包含约108至1012CFU的双歧杆菌。然而，可替代地，这种量的双歧杆菌可以分成多次给予，每次给予由较小量的微生物负荷组成-只要受试者在任何特定时间(例如每24小时期间)接受的双歧杆菌的总量是从约106至约1012CFU的双歧杆菌，优选108至约1012CFU的乳酸双歧杆菌BL-04。
根据本发明，有效量的双歧杆菌可以是至少106CFU的微生物/剂量，优选从约106至约1012CFU的微生物/剂量，优选约108至约1012CFU的微生物/剂量。
在一个实施例中，优选地，根据本发明使用的双歧杆菌能以从约106至约1012CFU的微生物/天，优选约108至约1012CFU的微生物/天的剂量给予。因此，在本实施例中的有效量可以为从约106至约1012CFU的微生物/天，优选约108至约1012CFU的微生物/天。
在一个实施例中，优选地根据本发明使用的双歧杆菌以从约108至约1010CFU/天，优选约1x 109至3x 109CFU/天，例如约2x 109CFU的微生物/天的剂量给予。CFU代表“菌落形成单位”。
药物修改
在一个实施例中，可源自于根据本发明的双歧杆菌和/或双歧杆菌的发酵产物和/或双歧杆菌的细胞裂解物的组合物可以用于修改受试者摄取的药物(例如哮喘/COPD缓解或预防药物)。
在一个实施例中，术语“修改”意指“减少”。
药物的修改和/或减少意指与安慰剂对照相比的修改或减少。
安慰剂对照没有给予可源自于根据本发明的双歧杆菌和/或双歧杆菌的发酵产物和/或双歧杆菌的细胞裂解物的组合物。安慰剂对照可以给予蔗糖。
术语“药物”可包含用于治疗和减轻慢性呼吸道疾病例如哮喘和COPD的症状的药物。这可包含一种或多种以下类型的药物：吸入短效β-2激动剂(例如沙丁胺醇)、抗组胺药、免疫调节剂、口服皮质类固醇和静脉内皮质类固醇。
可源自于根据本发明的双歧杆菌和/或双歧杆菌的发酵产物和/或双歧杆菌的细胞裂解物的组合物能以或作为食物产品给予或可以作为药学上可接受的组合物给予。
另外的微生物
在本发明的一个实施例中，可源自于根据本发明的双歧杆菌和/或双歧杆菌的发酵产物和/或双歧杆菌的细胞裂解物的组合物可以包含至少一种另外的益生菌微生物，优选至少一种另外的益生菌细菌。
在本说明书中，术语‘益生菌微生物’被定义为涵盖任何非致病微生物，当以足够量的活的(例如有活力的)给予时，对宿主赋予健康益处。这些益生菌菌株通常具有通过消化道上部存活的能力。它们是非致病性的、无毒的，并且一方面经由与消化道中的驻留菌群的生态相互作用以及另一方面经由“GALT”(肠道相关淋巴组织)以积极的方式影响免疫系统的能力对健康行使有益效果。根据益生菌的定义，这些微生物当以足够数量给予时具有通过肠进行生活的能力，然而它们不穿越肠屏障，因此它们的主要作用在胃肠道的内腔和/或壁中被诱导。然后它们在给予期间形成驻留菌群的一部分。这种定植(或临时定植)允许益生菌微生物行使有益效果，例如抑制存在于菌群中的潜在致病性微生物以及与肠的免疫系统相互作用。
在某些实施例中，另外的益生菌微生物是一种细菌，优选是益生乳酸杆菌和/或另一种益生双歧杆菌，优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种(即“乳酸双歧杆菌”)，更优选乳酸双歧杆菌BL-04。
在一些实施例中，细菌可以是来自以下一个或多个属的细菌：乳球菌属(Lactococcus)、链球菌属(Streptococcus)、小球菌属(Pediococcus)、肠球菌属(Enterococcus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、肉杆菌属(Carnobacterium)、丙酸杆菌属(Propionibacterium)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)、乳杆菌属(Lactobacillus)、短杆菌属(Brevibacterium)和漫游球菌属(Vagococcus)。在一个实施例中，至少一种另外的益生菌微生物选自乳杆菌属、链球菌属、肠球菌属、双歧杆菌属和酵母属(Saccharomyces)。
根据本发明使用的另外的微生物可以是通常被认为是安全的并且优选是GRAS认可的微生物。
本领域技术人员将容易地知道来自本文所述属中的特定微生物物种和/或菌株，其用于食品和/或农业工业中并且其通常被认为适合于人类和/或动物消费。
因此，本发明的组合物可以含有另外的微生物(菌株)。根据本发明使用的另外的微生物是适合于人类和/或动物消费的微生物。
在一个实施例中，另外的微生物来自乳杆菌属或双歧杆菌属或其混合物。
另外或可替代地，另外的微生物可以是来自物种嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、弯曲乳杆菌(L.curvatus)、鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)、干酪乳杆菌(L.casei)、副干酪乳杆菌(L.paracasei)、唾液乳杆菌(L.salivarius)、乳酸双歧杆菌(B.lactis)、动物双歧杆菌(Banimalis)、长双歧杆菌(B.longum)和/或两歧双歧杆菌(B.bifidum)的菌株。
在一个实施例中，另外的微生物可以是来自嗜酸乳杆菌、弯曲乳杆菌、唾液乳杆菌和/或乳酸双歧杆菌的菌株。
在一个实施例中，优选地，微生物来自链球菌属。
在一个实施例中，优选地，微生物来自肠球菌属。
优选地，微生物可以是来自物种乳酸双歧杆菌的菌株(例如乳酸双歧杆菌420或乳酸双歧杆菌HN019)。
对于一些实施例，另外的微生物可以是多于一种益生菌微生物(优选多于一种益生细菌)的混合物；多于一种双歧杆菌的混合物；或一种或多种益生菌微生物(优选益生细菌)和任选地一种或多种乳酸杆菌的混合物。例如，混合物可以包含来自双歧杆菌属物种的一种或多种菌株和任选地一种或多种另外的菌株-例如乳杆菌属物种的菌株。另外的菌株可以是具有同型发酵代谢引起乳酸产生的过氧化氢酶阴性菌株，或者可能产生对其他微生物有活性的细菌素，例如像乳链球菌素。另外的微生物可以是例如根据本发明使用的乳杆菌属物种，例如嗜酸乳杆菌、唾液乳杆菌和弯曲乳杆菌，优选是革兰氏阳性菌株。
根据本发明使用的双歧杆菌和/或另外的菌株-例如乳杆菌属物种，例如嗜酸乳杆菌、唾液乳杆菌和弯曲乳杆菌，在酸性pH条件下对胃蛋白酶具有良好的抗性，对胰液素具有良好的抗性和/或对胆汁盐具有良好的耐受性。
在一个实施例中，另外的菌株可以是根据本发明的一种微生物，优选乳杆菌属物种，例如嗜酸乳杆菌，例如其可以被描述为“疏水性的”，即对极性或非极性疏水性有机溶剂(例如像正癸烷、氯仿、十六烷或二甲苯)具有强亲和力的一种。根据本发明的嗜酸乳杆菌可以是嗜酸乳杆菌PTA-4797。该嗜酸乳杆菌菌株已经由Rhodia Chimie，26，quai AlphonseLe Gallo，92 512 BOULOGNE-BILLANCOURT Cedex France，根据美国典型培养物保藏中心(ATCC)的布达佩斯条约(Budapest Treaty)注册，其记录在登记号PTA-4797下。
免疫系统
如本文中所使用，术语“细胞因子”是指由细胞释放的小蛋白(约5-20KDa)，其对细胞之间的相互作用、细胞之间的通信或细胞的行为有影响。细胞因子包括白介素、淋巴因子和细胞信号分子，例如肿瘤坏死因子和干扰素。细胞因子量的变化可能引发反应，例如炎症和对身体感染的免疫反应。如本文中所使用，术语“趋化因子”是指具有在附近的反应性细胞中诱导定向趋化性(生物体响应于化学刺激的运动)的能力的一种小细胞因子类型。
如本文中所使用，术语“生物标志物”是指可以精确和可重复地测量的广泛的医学体征子类别。它们被用作从患者外部观察到的医学状态的客观指示。生物标志物可以作为正常生物学过程、致病性过程或对治疗干预的药理学应答的指标来测量和评估。细胞因子和趋化因子两者均可以用作生物标志物。生物标志物可以在例如呼吸道、鼻腔通道、鼻腔灌洗液或血液或脑液中测量。生物标志物的测量可以在体内和体外发生。
如本文中所使用，“调节”意指改变或变化。调节免疫系统可以包括增加或减少或改变免疫系统的任何方面的量或水平。具体地，如本文中所使用，调节免疫系统可以是指与对照或安慰剂相比存在的细胞因子或趋化因子的量。在一个实施例中，细胞因子或趋化因子存在于呼吸道、鼻腔通道、鼻腔灌洗液或血液中。在一个实施例中，一种或多种细胞因子或趋化因子的量减少了。在另一个实施例中，一种或多种细胞因子或趋化因子的量被影响，例如被减少。
在本发明的一个实施例中，免疫系统的调节降低受试者中至少一种炎症性生物标志物的水平。优选地，所述生物标志物包括至少一种细胞因子或趋化因子。
优选地，细胞因子是介导炎症性反应的细胞因子。
优选地，趋化因子是介导炎症性反应的趋化因子。
优选地，趋化因子是吸引炎症性细胞到气道中的炎症性趋化因子。这包括但不限于IL-8、MCP-1 IP-10、GM-CSF、MIP-3α和G-CSF。
优选地，细胞因子包括但不限于TNF-α、IL-1β和IL-6。
一些细胞因子和趋化因子可能具有细胞因子和趋化因子功能两者。这包括但不限于IL-8。
最优选地，本发明的方法和用途降低了受试者中存在的至少一种生物标志物的水平。最优选地，所述生物标志物是趋化因子和/或细胞因子，最优选地是炎症性细胞因子和/或炎症性趋化因子。在优选的实施例中，细胞因子和/或趋化因子的水平在下呼吸道中减少。细胞因子和/或趋化因子可以从例如支气管肺泡灌洗液或鼻腔灌洗液中测量。最优选地，测量的细胞因子是IL-8。由于这种细胞因子与炎症有关，所以IL-8水平的降低表明受试者中的炎症减少。
生物标志物可以存在于受试者的任何地方，并且可以在任何地方进行测量，例如在呼吸道、鼻腔通道、鼻腔灌洗液或血液或脑液中。生物标志物的测量可以在体内和体外发生。
优选地，在本发明中，细胞因子和/或趋化因子的水平降低导致呼出的硝酸氧(eNO)降低。测量eNO的量可以用于测量下气道中的炎症。
最具体地，本发明的方法和用途降低IL-8的水平。
在另一个实施例中，本发明的方法和用途降低MCP-1的水平。
在另一个实施例中，本发明的方法和用途降低IL-1β的水平。
在另一个实施例中，本发明的方法和用途降低IL-8、MCP-1和IL-1β中任何一种或两种或全部的水平。
IL-8是炎症性标志物。已知其调变具有气道高反应性和气道重构的嗜中性粒细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞炎症，它们是哮喘的标志(Wark等人，2002；Proud 2011)。
先天免疫系统负责在感染前4天期间产生炎症性细胞因子和趋化因子(Proud2011)。因此，IL-8是先天免疫系统功能的标志物。
术语“先天免疫系统”是指由于人的遗传构成或生理学的结果而自然发生并且不是从以前的感染或疫苗接种产生的免疫系统的方面。具体地，在本发明的上下文中，先天免疫系统包括对病毒感染作出反应的免疫系统的方面，并且产生启动抗病毒防御并警告先天免疫细胞的细胞因子，且诱导适应性免疫反应。
适应性免疫系统(或特异性免疫反应)由抗体反应和细胞介导的反应组成，该抗体反应和细胞介导的反应分别由不同的淋巴细胞、B细胞和T细胞进行。
适应性免疫对病原体产生特异的和强烈的反应，并且包括各种细胞类型。
分化簇(CD)是鉴定不同细胞类型的分类。
CD抗原位于细胞的表面，并且可以通过使用抗体和流式细胞仪鉴定。CD+表示存在抗原，CD-表示不存在抗原。
适应性免疫反应是由向淋巴细胞(CD3+细胞)呈递抗原的树突细胞引发。
淋巴细胞的亚群被称为T辅助细胞(CD3+CD4+)，其是免疫系统的一部分。如果这些细胞不是单核细胞(CD14-)、不是B细胞(CD19-)，并且是CD3+CD4+，则它们可以从血液中鉴定。
可以通过使用加载有HRV39特异性肽的MHC-II四聚体(“HRV39特异的”)来鉴定对鼻病毒阳性的T辅助细胞。
趋化因子受体CCR5将T辅助细胞靶向来自血液的感染位点，包括呼吸道。
在优选的实施例中，CD3+CD4+CD14-CD19-四聚体+细胞(“HRV39特异性T辅助细胞”)和CD3+CD4+CD14-CD19-四聚体+CCR5+细胞(“HRV39特异性CCR5+T辅助细胞”)可以从受试者的血液样品中鉴定。
在优选的实施例中，与安慰剂相比，本发明的组合物、方法和用途导致受试者中病毒特异性T辅助细胞的增加。在最优选的实施例中，与安慰剂相比，在受试者中存在对鼻病毒阳性的T辅助细胞的增加。已知此类细胞迁移到病毒感染位点，例如呼吸道粘膜。此外，此类细胞赋予对未来鼻病毒感染的保护。
受试者
如本文中所使用的术语“受试者”意指动物。优选地，该受试者是哺乳动物，包括例如家畜(包括牛、马、猪、鸡和羊)和人类。在本发明的某些方面，该动物是陪伴动物(包括宠物)，例如像狗或猫。在本发明的一些方面，该受试者可以合适地是人类。
在一个实施例中，该受试者是人类。
在一个实施例中，该受试者可以是雌性。
在一个实施例中，该受试者可以是雄性。
在一个实施例中，该受试者是儿童。如本文中所使用的术语“儿童”意指年龄为16岁以下的人类。
在一个实施例中，该受试者是年龄为16岁或以上的人类。
在一个实施例中，该受试者是年龄为18岁或以上的人类。
在一个实施例中，该受试者不是免疫功能不全的受试者。
在一个实施例中，该受试者是健康的受试者。
在一个实施例中，该受试者具有完全发育和不缺乏抵抗力的免疫系统。
在一个实施例中，该受试者患有慢性呼吸道疾病。
在一个实施例中，该受试者患有哮喘。
在另外的实施例中，该受试者患有COPD。
在另外的实施例中，该受试者易感哮喘或COPD。这可能是由于一些原因，包括一种或多种遗传学因素、暴露于病原体、暴露于毒物和暴露于香烟烟雾。
优点
诸位发明人令人惊奇地发现，当与健康成年人中的安慰剂相比时，使用双歧杆菌显著降低病毒效应的发生率、持续时间和/或严重性，特别是由病毒感染引起的炎症。这表明双歧杆菌可以调节健康成年人的先天免疫反应。这已经通过IL-8、IL-1β、MCP-1中的特异性细胞因子的减少证明
此外，诸位发明人已经发现，使用源自于双歧杆菌的组合物显著抑制病毒的复制并减轻由病毒感染引起的炎症。这降低了慢性呼吸道疾病例如哮喘和COPD发展和恶化的风险。
具体地，使用源自于双歧杆菌的组合物显著降低与鼻病毒感染相关的哮喘和COPD的发展和恶化的风险。由于这些疾病可能对受试者的生活质量具有长期的影响，包括增加发病率，所以本发明是非常有利的。
令人惊奇地，诸位发明人已经发现，源自于双歧杆菌的组合物对适应性免疫系统有影响。
具体地，所述组合物增加作用于迁移到病毒感染位点例如呼吸道粘膜的HRV39特异性CCR5+T辅助细胞的数量。随着初次感染后21天观察到增加，增加数量的HRV39特异性CCR5+T辅助细胞对随后的HRV感染赋予更好的保护作用。HRV感染的减少降低了慢性呼吸道疾病例如哮喘和COPD发展和恶化的机会，因为已知这些疾病与HRV感染有关(Saraya等人，2014)。
令人惊奇地，在组合物中使用双歧杆菌的单一菌株，优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04(单独的或不具有另外的微生物的)，已经发现有这种效果。
本发明的一个优点是使用本发明的组合物和方法显著降低病毒感染症状的发生率、持续时间和/或严重性。这适用于健康个体以及患有慢性呼吸道疾病的个体或易感慢性呼吸道疾病的个体。
诸位发明人已经发现，使用单独的一种双歧杆菌菌株可以获得本文中观察到的有益效果。这可以产生许多优点，包括简化补充剂的生产和/或降低补充剂的制造和补充剂本身的成本。
另外的优点是可以使用一种双歧杆菌菌株而不需要另外的益生细菌-这具有以下优点：它简化了关于补充剂的稳定性问题。因此，本发明的一个优点在于，源自于双歧杆菌菌株(例如单独的或不存在另一种微生物)的组合物更容易稳定，因为本领域技术人员仅关注单一细菌的稳定性而不是多于一种细菌的稳定性。
另外或可替代地，在组合物中使用单一细菌菌株可以具有与混合菌株组合物相比降低组合物的使用成本的优点。
本发明的进一步显著的优点在于诸位发明人令人惊奇地发现，可以使用源自于根据本发明的双歧杆菌的组合物来修改或减少受试者(特别是患有慢性呼吸道疾病的受试者)的药物摄取。
药物
如本文中所使用的，关于本发明的术语“药物”涵盖在人类和兽医学中供人类和动物两者使用的药物。此外，如本文中所使用的术语“药物”意指提供治疗和/或有益效果的任何物质。如本文中所使用的术语“药物”不一定限于需要上市许可证(Marketing Approval)的物质，而是可以包括可以用于化妆品、保健营养品、食物(包括例如饲料和饮料)和天然补救剂的物质。
处理
应当理解，本文中所有涉及治疗的引用包括姑息治疗和预防治疗。
实质上纯的形式和/或分离的形式
对于一些方面，根据本发明的微生物和/或发酵产物和/或细胞裂解物可以是实质上纯的形式或可以是分离的形式。
术语“实质上纯的形式”用于表示根据本发明的微生物和/或发酵产物和/或细胞裂解物以高水平存在。当微生物和/或发酵产物和/或细胞裂解物处于实质上纯的形式时，微生物和/或发酵产物和/或细胞裂解物理想地是存在于组合物中的主要成分。优选其以多于30％、多于50％、多于75％、多于90％、或甚至多于95％的水平存在，所述水平关于正在考虑的总体组合物以干重/干重进行确定。
在非常高的水平(例如多于90％、多于95％或多于99％的水平)下，微生物和/或发酵产物和/或细胞裂解物可以被认为是被“分离的”。
本发明的生物活性物质(包括多肽、核酸分子、经由筛选鉴定/可鉴定的碳水化合物、经由筛选鉴定/可鉴定的脂质、经由筛选鉴定/可鉴定的部分等)能以实质上不含一种或多种该物质可能与之相关联的污染物的形式提供。因此，例如，它们可实质上不含一种或多种潜在污染性的多肽和/或核酸分子。它们能以实质上不含其他细胞组分(例如细胞膜、细胞质等的)的形式提供。当组合物实质上不含给定的污染物时，污染物将处于很低的水平(例如，以如上所述的干重/干重计小于10％、小于5％或小于1％的水平)。
与其他组分的组合
双歧杆菌，优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种、更优选乳酸双歧杆菌BL-04和/或其发酵产物和/或其细胞裂解物可以与其他成分组合使用。因此，本发明还涉及这些组合。双歧杆菌，优选来自双歧杆菌属(Bifidobacterium)，更优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04和/或其发酵产物和/或其细胞裂解物在本文中可以被称为“本发明的组合物”。
本发明的组合包含本发明的组合物和适合于动物或人类消费且能够为消费者提供医学或生理学益处的另一组分。
本发明的组合的其他组分包括聚右旋糖(例如)和/或麦芽糖糊精和/或乳糖醇。可以任选地将这些其他组分添加到组合物中以辅助干燥过程并辅助微生物的存活。
其他合适的组分的另外的实例包括以下各项中的一种或多种：增稠剂、胶凝剂、乳化剂、粘合剂、晶体改性剂、甜味剂(包括人造甜味剂)、流变改性剂、稳定剂、抗氧化剂、染料、酶、载体、运载体、赋形剂、稀释剂、润滑剂、调味剂、着色物质、悬浮剂、崩解剂、制粒粘合剂等。这些其他组分可以是天然的。这些其他的组分可通过使用化学和/或酶学技术来制备。
在一个实施例中，微生物和/或其发酵产物和/或其细胞裂解物可以被包封。
在一个优选实施例中，用于本发明中的微生物和/或其发酵产物和/或其细胞裂解物可以与一种或多种脂质组合使用。
例如，用于本发明中的微生物和/或其发酵产物和/或其细胞裂解物可以与一种或多种脂质微团组合使用。该脂质微团可以是简单的脂质微团或复合的脂质微团。
该脂质微团可以是两亲物质的取向分子的聚集体。
该脂质微团可以是两亲物质的取向分子的、具有胶体尺寸的聚集体，其存在于具有从其形成的化学物质的溶液中的平衡状态中。微团通常带电。在水溶液中，微团聚集体的各个分子被取向使得其极性基团指向水性介质且其疏水部分朝向微团的中心。脂质微团可以包含脂质和/或油。
如本文中所使用的术语“增稠剂或胶凝剂”是指通过减慢或防止粒子的移动而防止分离的产品，该粒子为不混溶液体小滴、空气或不溶性固体。当单独的水合分子引起粘度增加时，发生增稠，减慢分离。当水合分子连接以形成捕获粒子的三维网络时，发生凝胶化，从而使它们固定。
如本文中所使用的术语“稳定剂”被定义为防止产品(例如食物产品)随时间而变化的成分或成分组合。
如本文中所使用的术语“乳化剂”是指防止乳液分离的成分(例如食物产品成分)。乳液是两种不混溶的物质，一种以小滴形式存在，包含于另一者中。乳液可以由水包油或油包水组成，在水包油中液滴或分散相是油且连续相是水，在油包水中水变成分散相且连续相是油。也可通过使用乳化剂而使泡沫(即气体分散于液体中)和悬浮液(即固体分散于液体中)稳定。通气可以发生在三相系统中，其中空气被液体油截留，然后通过用乳化剂稳定的聚集的脂肪晶体稳定。乳化剂具有对水有亲和力的极性基团(亲水的)和吸引到油的非极性基团(亲脂的)。它们被吸附在两种物质的界面处，提供了用于稳定乳剂的界面膜。乳化剂的亲水/亲脂性质受分子的结构影响。这些性质通过亲水/亲脂平衡(HLB)值来鉴定。低HLB值表示更大的亲脂倾向，其用于稳定油包水乳剂。将高HLB值分配给亲水乳化剂，通常用于水包油乳剂中。这些值来源于简单的系统。因为食物通常含有影响乳化性质的其他成分，所以HLB值可能并不总是乳化剂选择的可靠指南。
如本文中所使用的术语“粘合剂”是指通过物理或化学反应将产品粘合在一起的成分(例如食品成分)。例如，在“胶凝化”期间，水被吸收，从而提供结合效果。然而，粘合剂可以吸收其他液体(例如油)，从而将它们保持在产品中。在本发明上下文中，粘合剂将通常用于固体或低水分产品(例如烘焙产品：甜点、甜甜圈、面包等)中。
如本文中所使用的术语“晶体改性剂”是指影响脂肪或水的结晶的成分(例如食品成分)。冰晶的稳定很重要是因为两个原因。第一个是从分离的立场直接关系到产品的稳定性。产品遇到的冻/融循环越多，冰晶变得越大。这些大的晶体可能会破坏产品结构，该结构是天然存在的(例如在细胞壁的情况下)或者是由“高涨”(elation)所造成的。因为水不再固定，产品在解冻后可能会出现脱水收缩或滴水。第二，在冷冻消费的产品的情况下，这些大的晶体产生不希望的、粗糙的口感。
“载体”或“运载体”意指适合于化合物给予的材料，并且包括本领域已知的任何无毒且不会以有害方式与组合物的任何组分发生相互作用的这样的材料，例如像任何液体、凝胶、溶剂、液体稀释剂、增溶剂或类似物。
营养上可接受的载体的实例包括(例如)水、盐溶液、醇、硅酮、蜡类、凡士林、植物油、聚乙二醇、丙二醇、脂质体、糖类、明胶、乳糖、直链淀粉、硬脂酸镁、滑石粉、表面活性剂、硅酸、粘性石蜡、芳香油、脂肪酸甘油单酯和脂肪酸甘油二酯、石油醚(petroethral)脂肪酸酯、羟甲基-纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等等。
赋形剂的实例包括如下中的一种或多种：微晶纤维素和其他纤维素、乳糖(lactose)、柠檬酸钠、碳酸钙、二碱式磷酸钙、甘氨酸、淀粉、乳糖(milk sugar)和高分子量聚乙二醇。
崩解剂的实例包括如下中的一种或多种：淀粉(优选玉米、马铃薯或木薯淀粉)、淀粉乙醇酸钠、交联羧甲基纤维素钠和某些复合硅酸盐。
制粒粘合剂的实例包括以下各项中的一种或多种：聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基纤维素(HPC)、蔗糖、麦芽糖、明胶和阿拉伯树胶。
润滑剂的实例包括如下中的一种或多种：硬脂酸镁、硬脂酸、山嵛酸甘油酯和滑石。
稀释剂的实例包括如下中的一种或多种：水、乙醇、丙二醇和丙三醇及其组合。
其他的组分可同时使用(例如当它们混合在一起时或者甚至当它们通过不同的途径递送时)或者依序使用(例如它们可通过不同的途径递送)。
优选地，当本发明的组合物与任何其他组分混合时，微生物保持存活。
如本文中所使用的术语“适合于动物或人类消费的组分”意指作为补充剂被添加到或可以添加到本发明的组合物中的化合物，该补充剂可以具有营养益处、可以是纤维替代物、或对消费者具有一般有益效果。这些成分可以用于多种产品中，这些产品需要胶凝化、结构化、稳定化、悬浮化、成膜化和结构化，保持多汁性，而不增加不必要的粘度。优选地，这些成分将能够改善有活力的培养物的保质期和稳定性。
这些组分可以是益生元例如藻酸盐、黄原胶、果胶、刺槐豆胶(LBG)、菊粉、瓜尔豆胶、半乳寡糖(GOS)、果寡糖(FOS)、聚右旋糖(即)、乳糖醇、乳蔗糖、大豆寡糖、帕拉金糖(palatinose)、异麦芽寡糖、葡寡糖和木寡糖。
待用于本发明的组合中的组合物的最佳量将取决于待处理的产品和/或使产品与组合物接触的方法和/或其预期用途。用于组合物中的有活力的微生物的量应当是在改善含有所述组合物的食物产品的香气、风味、温和性、稠度、质地、主体、口感、粘度、结构和/或感官特性、营养和/或健康益处中有效并且保持足够有效的足够的量。对于有效的此时间长度应当延长至至少该产品的使用时间。
浓缩物
用于本发明的组合物可以是处于浓缩物的形式。
通常，这些浓缩物包含实质上高浓度的双歧杆菌，优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04和/或其发酵产物和/或其细胞裂解物。
处于浓缩物形式的粉剂、颗粒剂和液体组合物可以用水稀释或重悬于水或其他合适的稀释剂中，例如合适的生长培养基例如牛奶或矿物油或植物油，以给出准备使用的组合物。
处于浓缩物形式的本发明的组合可以根据本领域已知的方法制备。
在本发明的一个方面，产品以浓缩物形式与组合物接触。优选地，产品与喷雾干燥和/或再悬浮的组合物接触。
本发明的组合物可以是粉剂形式。
本发明的组合物可以是干燥的-例如通过本领域已知的方法喷雾干燥或冷冻干燥的。
使用喷雾干燥过程制造粒子的典型过程涉及溶解于适当的溶剂(例如发酵培养基中的微生物培养物)中的固体材料。可替代地，可以将该材料悬浮于或乳化在非溶剂中以形成悬浮液或乳剂。可以任选地在此阶段添加其他成分(如上所讨论的)或组分例如抗微生物剂、稳定剂、染料和辅助干燥过程的试剂(有时称为干燥剂)。
然后将溶液雾化以形成细小的雾滴。液滴立即进入干燥室，在其中它们接触干燥气体。将溶剂从液滴蒸发到干燥气体中以固化液滴，从而形成粒子。然后从干燥气体中分离并收集粒子。
产物
可以从组合物中获益的任何产品都可以用于本发明。这些包括但不限于乳制品和乳制品衍生的产品，膳食补充剂和药物产品。
举例来说，本发明的组合物可以用作软饮料、果汁或饮料的成分，所述软饮料、果汁或饮料包含乳清蛋白、健康茶、可可饮料、乳饮料、双歧杆菌产品、乳酸菌饮料、酸奶和饮用酸奶、奶酪、冰淇淋、冰糕和甜点、糕点糖果、饼干蛋糕和蛋糕混合物、休闲食品、平衡食品和饮料、水果馅料、保健釉、巧克力面包馅料、奶酪蛋糕口味馅料、水果风味蛋糕馅料、蛋糕和甜甜圈糖衣、即时烘焙填充奶油、饼干馅料、即食面包馅料、低热量馅料、成人营养饮料、酸化大豆/果汁饮料、无菌/蒸馏巧克力饮料、酒吧混合物、饮料粉剂、钙强化大豆/酸奶和巧克力奶、钙强化咖啡饮料。
该组合物可以进一步用作以下食物产品中的成分：例如美国奶酪酱、用于磨碎和切碎的干酪的抗结块剂、点心盘、奶油干酪、干混鞭打无脂肪酸奶油、冷冻/解冻乳制品鲜奶油、冷冻/解冻稳定的喷射奶油、低脂肪和清淡的自然切达干酪、低脂瑞士式酸奶、充气冷冻甜点、硬盒冰淇淋、标签友好的改善经济和放纵的硬盒冰淇淋、低脂冰淇淋：软冰淇淋、烧烤酱、奶酪蘸酱、松软干酪敷料、干混阿尔弗雷多(Alfredo)酱、混合奶酪酱、干混番茄酱等。
对于某些方面，优选地，本发明可以用于有关酸奶生产中，例如发酵的酸奶饮料、酸奶、饮用酸奶、奶酪、发酵奶油、基于乳的甜点等。
合适地，组合物可以进一步用作一种或多种乳酪应用、肉类应用、或包含保护性培养物的应用中的成分。
本发明还提供了制备食品或食品成分的方法，该方法包括将根据本发明的组合物与另一种食物成分混合。
有利地，本发明涉及已经与本发明的组合物(以及任选地与其他组分/成分)接触的产品，其中该组合物以能够改善该产品的营养和/或健康益处的量使用。
如本文中所使用的术语“接触”是指将本发明的组合物间接或直接应用到该产品中。可使用的应用方法的实例包括但不限于：在包含组合物的材料中处理产品、通过将组合物与产品混合而直接应用、将组合物喷洒至产品表面上或将产品浸入组合物的制剂中。
在本发明的产品是食品的情况下，本发明的组合物优选与该产品混合。可替代地，可以在食品的乳剂或原始成分中包含组合物。在另外的替代性方案中，组合物可以作为调味料、釉料、着色剂混合物等应用。
对于一些应用而言，重要的是，使组合物在待影响/处理的产品表面上可用或可用于待影响/处理的产品表面。这允许组合物给予如下有利特性中的一种或多种：营养和/或健康益处。
本发明的组合物可以用受控量的有活力的微生物应用于点缀、包衣和/或浸渍产品。
食物
本发明的组合物可以用作-或者可以用于制备-食物。此处，术语“食物”以广义使用-并且涵盖用于人类的食物以及用于动物的食物(即饲料)。在一个优选的方面，该食物用于人类消费。
食物可以是处于溶液的形式或作为固体-取决于用途和/或应用模式和/或给予模式。
当本发明的组合物用作-或用于制备-食物(例如功能性食物)时，该组合物可以与以下各项中一种或多种结合使用：营养上可接受的载体、营养上可接受的稀释剂、营养上可接受的赋形剂、营养上可接受的佐剂、营养活性成分。
优选地，将组合物用于发酵乳或蔗糖强化乳或具有蔗糖和/或麦芽糖的培养基，其中所得到含有全部组合物成分的-即根据本发明的所述微生物-的培养基可以作为成分以合适的浓度-例如像以在最终产品中提供106-1010cfu的日剂量的浓度-添加到酸奶中。根据本发明的微生物可以在酸奶发酵之前或之后使用。
对于一些方面，根据本发明的微生物或根据本发明的组合物用作-或用于制备-动物饲料，例如家畜饲料，特别是家禽(例如小鸡)饲料或宠物食物。
食物成分
本发明的组合物可以用作食物成分和/或饲料成分。
如本文中所使用，术语“食物成分”或“饲料成分”包括作为营养补充剂被添加到或可以添加到功能性食物或食品中的配制品。
食物成分可以是处于溶液的形式或作为固体-取决于用途和/或应用模式和/或给予模式。
食物补充剂
本发明的组合物可以是-或可以添加到-食物补充剂例如膳食补充剂中。
功能性食物
本发明的组合物可以是-或可以添加到-功能性食物中。
如本文中所使用，术语“功能性食物”意指不仅能够提供营养效果，还能够向消费者递送另外的有益效果的食物。
因此，功能性食物是具有掺入其中的组分或成分(例如本文所述的那些)的普通食物，其赋予食物特定的功能性效果-例如医学或生理学益处-而不是纯粹的营养效果。
虽然对于功能性食物没有法律定义，大多数关注此领域的各方都同意它们是作为具有超过基本营养效果的特定健康效果而面市的食物。
一些功能性食物是保健营养品。此处，术语“保健营养品”意指不仅能够向消费者提供营养效果和/或口味满足感，而且还能够向消费者递送治疗(或其他有益)效果的食物。保健营养品跨越了在食品和药物之间的传统分界线。
益生菌
对于一些应用，据信在本发明的组合物中的有活力的双歧杆菌，优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04可以发挥益生菌培养效果。向本发明的组合物中添加另外的益生菌(probiotic)和/或益生元(prebiotic)也在本发明的范围之内。此处，益生元是：“通过选择性地刺激一种或有限数量的有益细菌的生长和/或活性来有益地影响宿主的不可消化食物成分”。
如本文中所使用，术语“益生菌培养物”定义了当例如以足够数量摄取或局部应用时，有益地影响宿主生物体(即通过赋予宿主生物体一个或多个可证明的健康益处)的活的微生物(包括例如细菌或酵母)。益生菌可以改善一个或多个粘膜表面的微生物平衡。例如，粘膜表面可以是肠、泌尿道、呼吸道或皮肤。如本文中所使用，术语“益生菌”还涵盖可以刺激免疫系统的有益分支并同时减少在粘膜表面(例如肠)中的炎症反应的活的微生物。
虽然没有益生菌摄入的下限或上限，但是已经表明，至少106-1012，优选至少106-1010，优选108-109cfu作为日剂量将在宿主生物体(例如人类)中有效地实现有益的健康效果。
除了根据本发明的微生物可以具有的益生菌效应之外，提供作为可以与组合物一起包含在组合中的其他化合物的益生元也在本发明的范围之内。包含本发明组合物的组合的益生元组分的特征在于在大肠中缓慢发酵。这样的益生元可以对肠道菌群发挥积极作用，特别是在结肠的左侧，这是尤其易于发生特定肠癌和溃疡性结肠炎失调的肠道区域。
益生元通常是不可消化的碳水化合物(寡糖或多糖)或不在上消化道中降解或吸收的糖醇。用于商业产品且根据本发明有用的已知益生元包括菊糖(果寡糖，或FOS)和半乳寡糖(GOS)和转半乳寡糖(TOS)。其他合适的益生元包括帕拉金糖寡糖、大豆寡糖、龙胆寡糖、低聚木糖(xylooligomers)、非降解淀粉，乳糖蔗糖、乳果糖、乳糖醇、麦芽糖醇、聚右旋糖(即)或类似物。
在一个实施例中，本发明涉及根据本发明的双歧杆菌，优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04和/或其发酵产物和/或其细胞裂解物与益生元的组合。
益生元可以与根据本发明的微生物和/或其发酵产物和/或其细胞裂解物同时(例如，在添加物中一起或通过相同或不同途径同时递送)或依次(例如通过相同或不同的途径)给予。
合生元
本发明还考虑使用益生元和益生菌两者作为与本发明的组合物组合的成分，当它们组合时变成合生元。其目的是结合有益细菌的作用和身体自身有益细菌的刺激。开发和消费此类混合物的潜力很大，因为这些混合物中的一些很可能表现出强大的协同营养和/或健康效应。
因此，本发明的组合物可以被特别设计成含有可以为消费者提供合生元作用的不同组分。
药物
本发明的组合物可以用作-或者用于制备-药物。此处，术语“药物”以广义使用-并且涵盖用于人类的药物以及用于动物的药物(即兽医应用)。在优选的方面，该药物用于人类使用和/或用于畜牧业。
药物可以用于治疗目的-其本质上可以是治疗的或姑息的或预防的。药物甚至可能用于诊断目的。
当用作-或用于制备-药物时，本发明的组合物可以与以下各项中的一种或多种结合使用：药学上可接受的载体、药学上可接受的稀释剂、药学上可接受的赋形剂、药学上可接受的佐剂、药学活性成分。
药物可以是处于溶液的形式或作为固体-取决于用途和/或应用模式和/或给予模式。
药物成分
本发明的微生物可以用作药物成分。此处，组合物可以是唯一的活性组分，或者它可以是许多种(即2种或更多种)活性组分中的至少一种。
药物成分可以是处于溶液的形式或作为固体-取决于用途和/或应用模式和/或给予模式。
形式
本发明的微生物和/或其发酵产物和/或其细胞裂解物能以任何合适的形式使用-不论是单独使用还是与其他组分或成分组合存在时。同样地，包含本发明的组合物和其他组分和/或成分(即成分-例如食物成分、功能性食物成分或药物成分)的组合能以任何合适的形式使用。
本发明的微生物或本发明的组合物能以固体或液体制剂的形式或其替代形式使用。固体制剂的实例包括但不限于可以是可湿润的、喷雾干燥的或冷冻干燥的片剂、胶囊剂、尘剂、颗粒剂和粉剂。液体制剂的实例包括但不限于水性、有机或水性-有机溶液、悬浮液和乳剂。
针对速释型、迟释型、调释型、缓释型、脉冲释放型或控制释放型应用，形式的合适的实例包括片剂、丸剂、胶囊剂、珠剂、溶液或悬浮液中的一种或多种，其可包含调味剂或染色剂。
举例来说，如果本发明的组合物以片剂形式使用-例如用作功能性成分-那么这些片剂也可以包含以下各项中的一种或多种：辅料，例如微晶纤维素、乳糖、柠檬酸钠、碳酸钙、磷酸氢钙和甘氨酸；崩解剂，例如淀粉(优选是玉米、马铃薯、木薯淀粉)、乙醇酸淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠和某些复杂的硅酸盐；造粒粘结剂，例如聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基纤维素(HPC)、蔗糖、明胶和阿拉伯树胶；润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸、山嵛酸甘油酯和滑石可以包括在内。
用于制备这些形式的营养上可接受的载体的实例包括(例如)水、盐溶液、醇、硅酮、蜡类、凡士林、植物油、聚乙二醇、丙二醇、脂质体、糖类、明胶、乳糖、直链淀粉、硬脂酸镁、滑石粉、表面活性剂、硅酸、粘性石蜡、芳香油、脂肪酸甘油单酯和脂肪酸甘油二酯、石油醚(petroethral)脂肪酸酯、羟甲基-纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等等。
用于这些形式的优选赋形剂包括乳糖、淀粉、纤维素、牛奶糖或高分子量聚乙二醇。
对于水性悬浮液和/或酏剂，可将本发明的组合物与不同的甜味剂或调味剂、调色物质或染料进行组合，与乳剂和/或悬浮剂进行组合，以及与稀释剂(例如水、丙二醇和甘油及其组合))进行组合。
形式还可以包括明胶胶囊；纤维胶囊、纤维片剂等；或甚至纤维饮料。
另外的实例是处于例如乳霜的形式。对于一些方面，例如，微生物和/或其代谢物可以包括在药物和/或化妆品乳霜中，例如像防晒乳霜和/或晒后乳霜。
在一个方面，根据本发明的组合物能以气溶胶的形式给予，例如通过鼻腔喷雾的方式，例如用于给予至呼吸道。
本发明的方面现将通过段落编号的方式进行描述。
1.一种可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的组合物，用于通过影响受试者中的病毒作用和/或病毒效应来调节所述受试者中的免疫系统。
2.用于根据段落1所述的用途的组合物，其中可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的该组合物是包含双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)和/或双歧杆菌(优选双歧杆菌乳酸菌，更优选乳酸双歧杆菌BL04)的发酵产物和/或双歧杆菌(优选双歧杆菌乳酸菌，更优选乳酸双歧杆菌BL04)的细胞裂解物的组合物。
3.用于根据段落1或段落2所述的用途的组合物，其中影响病毒作用和/或病毒效应包括抑制病毒复制和/或减轻由病毒感染引起的炎症。
4.用于根据段落1至3中任一项所述的用途的组合物，其中所述病毒是鼻病毒、冠状病毒、副流感病毒、腺病毒、肠病毒或呼吸道合胞病毒中的一种或多种，优选至少是人类鼻病毒(HRV)。
5.用于根据段落1至4中任一项所述的用途的组合物，其中该免疫系统的调节调节受试者中的生物标志物水平，优选降低受试者中的生物标志物水平。
6.用于根据段落5所述的用途的组合物，其中所述生物标志物是细胞因子和/或趋化因子。
7.用于根据段落5至6中任一项所述的用途的组合物，其中所述生物标志物是IL-8和/或IL-1β和/或MCP-1。
8.用于根据段落1至7中任一项所述的用途的组合物，其中该免疫系统的调节涉及先天免疫系统、适应性免疫系统或两者的调节。
9.用于根据段落1至8中任一项所述的用途的组合物，其中该免疫系统的调节增加病毒特异性T辅助细胞的数量。
10.用于根据段落1至9中任一项所述的用途的组合物，其中该免疫系统的调节降低IL-8和/或IL-1β和/或MCP-1的水平。
11.用于根据段落1至10中任一项所述的用途的组合物，其中该受试者是人类受试者。
12.用于根据段落1至11中任一项所述的用途的组合物，其中该受试者是人类儿童。
13.用于根据段落1至11中任一项所述的用途的组合物，其中影响病毒作用和/或病毒效应包括减轻由病毒感染引起的炎症，并且导致病毒感染症状的减轻，该病毒感染症状包括下组中的一种或多种，该组由以下各项组成：呼吸道炎症、咽喉疼痛、打喷嚏、鼻塞、流鼻涕、咳嗽、咳嗽伴有胸闷、和咳嗽伴有气喘。
14.用于根据前述段落中任一项所述的用途的组合物，其中该使用是预防性的。
15.用于根据前述段落中任一项所述的用途的组合物，其中可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的该组合物是以108至1012CFU的双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)/天的剂量配制，优选地其中所述组合物是以约或为2x109CFU的双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)/天的剂量配制。
16.用于根据前述段落中任一项所述的用途的组合物，该组合物包含至少一种另外的益生菌微生物。
17.用于根据段落16所述的用途的组合物，其中该至少一种另外的益生菌微生物选自乳杆菌属、链球菌属、肠球菌属、另一种双歧杆菌和酵母属。
18.用于根据前述段落中任一项所述的用途的组合物，其中所述组合物是药物、食物产品或膳食补充剂。
19.用于根据前述段落中任一项所述的用途的组合物，其中该细菌被配制为膳食补充剂。
20.一种通过影响受试者中的病毒作用和/或病毒效应来调节所述受试者中的免疫系统的方法，该方法包括使用待向所述受试者给予的组合物和/或被所述受试者摄取的组合物；所述组合物可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)；优选地，其中可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的该组合物是包含双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)和/或双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的发酵产物和/或双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的细胞裂解物的组合物；和/或优选地其中影响病毒作用和/或病毒效应包括抑制病毒复制和/或减轻由病毒感染引起的炎症。
21.根据段落20所述的方法，其中所述病毒是鼻病毒、冠状病毒、副流感病毒、腺病毒、肠病毒或呼吸道合胞病毒。
22.根据段落20所述的方法，其中所述病毒是鼻病毒，优选是人类鼻病毒(HRV)。
23.根据段落20至22中任一项所述的方法，其中该免疫系统的调节调节该受试者中的生物标志物水平，优选降低该受试者中的生物标志物水平。
24.根据段落23所述的方法，其中所述生物标志物是细胞因子和/或趋化因子。
25.根据段落23至24中任一项所述的方法，其中所述生物标志物是IL-8和/或IL-1β和/或MCP-1。
26.根据段落20至25中任一项所述的方法，其中该免疫系统的调节涉及先天免疫系统、适应性免疫系统或两者的调节。
27.根据段落20至26中任一项所述的方法，其中该免疫系统的调节增加病毒特异性T辅助细胞的数量。
28.根据段落20至27中任一项所述的方法，其中该免疫系统的调节降低IL-8和/或IL-1β和/或MCP-1的水平。
29.根据段落20至28中任一项所述的方法，其中该受试者是人类受试者。
30.根据段落20至29中任一项所述的方法，其中该受试者是人类儿童。
31.根据段落20至30中任一项所述的方法，其中减轻由病毒感染引起的炎症导致病毒感染症状的减轻，该病毒感染症状包括下组中的一种或多种，该组由以下各项组成：呼吸道炎症、咽喉疼痛、打喷嚏、鼻塞、流鼻涕、咳嗽、咳嗽伴有胸闷、和咳嗽伴有气喘。
32.根据段落20至31中任一项所述的方法，其中该方法是预防性的。
33.根据段落20至32中任一项所述的方法，其中可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的该组合物是以108至1012CFU的双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)/天的剂量配制。
34.根据段落33所述的方法，其中可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的该组合物是以约或为2x109CFU的双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)/天的剂量配制。
35.根据段落20至34中任一项所述的方法，该方法包括给予和/或摄取至少一种另外的益生菌微生物。
36.根据段落35所述的方法，其中该至少一种另外的益生菌微生物选自乳杆菌属、链球菌属、肠球菌属、另一种双歧杆菌和酵母属。
37.根据段落20至36中任一项所述的方法，其中该组合物被配制为药物、食物产品或膳食补充剂。
38.根据段落20至37中任一项所述的方法，其中该组合物被配制为膳食补充剂。
39.可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的该组合物在制造用于通过影响受试者中的病毒作用和/或病毒效应来调节所述受试者中的免疫系统的组合物的用途；优选其中可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的该组合物是包含双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)和/或双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的发酵产物和/或双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的细胞裂解物的组合物；和/或优选地其中影响病毒作用和/或病毒效应包括抑制病毒复制和/或减轻由病毒感染引起的炎症。
40.根据段落39所述的用途，其中所述病毒是鼻病毒、冠状病毒、副流感病毒、腺病毒、肠病毒或呼吸道合胞病毒。
41.根据段落39所述的用途，其中所述病毒是鼻病毒，优选是人类鼻病毒(HRV)。
42.根据段落39至41中任一项所述的用途，其中该免疫系统的调节调节该受试者中的生物标志物水平，优选降低该受试者中的生物标志物水平。
43.根据段落42所述的用途，其中所述生物标志物是细胞因子和/或趋化因子。
44.根据段落39至43中任一项所述的用途，其中所述生物标志物是IL-8和/或IL-1β和/或MCP-1。
45.根据段落39至44中任一项所述的用途，其中该免疫系统的调节涉及先天免疫系统、适应性免疫系统或两者的调节。
46.根据段落39至45中任一项所述的用途，其中该免疫系统的调节增加病毒特异性T辅助细胞的数量。
47.根据段落39至46中任一项所述的用途，其中该免疫系统的调节降低IL-8和/或IL-1β和/或MCP-1的水平。
48.根据段落39至47中任一项所述的用途，其中该受试者是人类受试者。
49.根据段落39至48中任一项所述的用途，其中该受试者是人类儿童。
50.根据段落39至49中任一项所述的用途，其中减轻由病毒感染引起的炎症导致病毒感染症状的减轻，该病毒感染症状包括下组中的一种或多种，该组由以下各项组成：呼吸道炎症、咽喉疼痛、打喷嚏、鼻塞、流鼻涕、咳嗽、咳嗽伴有胸闷、和咳嗽伴有气喘。
51.根据段落39至50中任一项所述的用途，其中该用途是预防性的。
52.根据段落39至51中任一项所述的用途，其中包含双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的该组合物是以108至1012CFU的双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)/天的剂量配制。
53.根据段落52所述的用途，其中所述组合物是以约或为2x 109CFU的双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)/天的剂量配制。
54.根据段落39至53中任一项所述的用途，其中该组合物包含至少一种另外的益生菌微生物。
55.根据段落54所述的用途，其中该至少一种另外的益生菌微生物选自乳杆菌属、链球菌属、肠球菌属、另一种双歧杆菌和酵母属。
56.根据段落39至55中任一项所述的用途，其中所述组合物是药物、食物产品或膳食补充剂。
57.根据段落39至56中任一项所述的用途，其中该细菌被配制为膳食补充剂。
58.一种可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的组合物，用于降低受试者中慢性呼吸道疾病的发展和恶化的风险；优选其中可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的该组合物是包含双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)和/或双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的发酵产物和/或双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的细胞裂解物的组合物。
59.用于根据段落58所述的用途的组合物，其中慢性呼吸道疾病的发展和恶化的风险由于免疫系统的调节而降低，该免疫系统的调节是通过影响病毒作用和/或病毒效应；优选地抑制病毒复制和/或减轻由病毒感染引起的炎症进行。
60.用于根据段落58或段落59所述的用途的组合物，其中所述慢性呼吸道疾病是哮喘和/或COPD。
61.用于根据段落58-60中任一项所述的用途的组合物，其中所述病毒是鼻病毒、冠状病毒、副流感病毒、腺病毒、肠病毒或呼吸道合胞病毒。
62.用于根据段落61所述的用途的组合物，其中所述病毒是鼻病毒，优选是人类鼻病毒(HRV)。
63.用于根据段落59至62中任一项所述的用途的组合物，其中该免疫系统的调节调节受试者中的生物标志物水平，优选降低受试者中的生物标志物水平。
64.用于根据段落63所述的用途的组合物，其中所述生物标志物是细胞因子和/或趋化因子。
65.用于根据段落63至64中任一项所述的用途的组合物，其中所述生物标志物是IL-8和/或IL-1β和/或MCP-1。
66.用于根据段落59至65中任一项所述的用途的组合物，其中该免疫系统的调节涉及先天免疫系统、适应性免疫系统或两者的调节。
67.用于根据段落59至66中任一项所述的用途的组合物，其中该免疫系统的调节增加病毒特异性T辅助细胞的数量。
68.用于根据段落59至67中任一项所述的用途的组合物，其中该免疫系统的调节降低IL-8和/或IL-1β和/或MCP-1的水平。
69.用于根据段落58至68中任一项所述的用途的组合物，其中该受试者是人类受试者。
70.用于根据段落58至69中任一项所述的用途的组合物，其中该受试者是人类儿童。
71.用于根据段落58至70中任一项所述的用途的组合物，其中减轻由病毒感染引起的炎症导致病毒感染症状的减轻，该病毒感染症状包括下组中的一种或多种，该组由以下各项组成：呼吸道炎症、咽喉疼痛、打喷嚏、鼻塞、流鼻涕、咳嗽、咳嗽伴有胸闷、和咳嗽伴有气喘。
72.用于根据段落58至71中任一项所述的用途的组合物，其中该用途是预防性的。
73.用于根据段落58至72中任一项所述的用途的组合物，其中可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的该组合物是以108至1012CFU的双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)/天的剂量配制。
74.用于根据段落73所述的用途的组合物，其中所述组合物是以约或为2x 109CFU的双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)/天的剂量配制。
75.用于根据段落58至74中任一项所述的用途的组合物，该组合物包含至少一种另外的益生菌微生物。
76.用于根据段落75所述的用途的组合物，其中该至少一种另外的益生菌微生物选自乳杆菌属、链球菌属、肠球菌属、另一种双歧杆菌和酵母属。
77.用于根据段落58至76中任一项所述的用途的组合物，其中所述组合物是药物、食物产品或膳食补充剂。
78.用于根据段落58至77中任一项所述的用途的组合物，其中该细菌被配制为膳食补充剂。
79.一种降低受试者中慢性呼吸道疾病发展和恶化的风险的方法，所述方法包括向所述受试者给予和/或被所述受试者摄取可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的组合物；优选地，其中可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的所述组合物是包含双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)和/或双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的发酵产物和/或双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的细胞裂解物的组合物。
80.如段落79所述的方法，其中慢性呼吸道疾病的发展和恶化的风险由于免疫系统的调节而降低，该免疫系统的调节是通过影响病毒作用和/或病毒效应进行；优选地其中影响病毒作用和/或病毒效应包括抑制病毒复制和/或减轻由病毒感染引起的炎症。
81.根据段落79或80所述的方法，其中所述慢性呼吸道疾病是哮喘和/或COPD。
82.根据段落79至81中任一项所述的方法，其中所述病毒是鼻病毒、冠状病毒、副流感病毒、腺病毒、肠病毒或呼吸道合胞病毒。
83.根据段落82所述的方法，其中所述病毒是鼻病毒，优选是人类鼻病毒(HRV)。
84.根据段落80至83中任一项所述的方法，其中该免疫系统的调节调节该受试者中的生物标志物水平，优选降低该受试者中的生物标志物水平。
85.根据段落84所述的方法，其中所述生物标志物是细胞因子和/或趋化因子。
86.根据段落84至85中任一项所述的方法，其中所述生物标志物是IL-8和/或IL-1β和/或MCP-1。
87.根据段落80至86中任一项所述的方法，其中该免疫系统的调节涉及先天免疫系统、适应性免疫系统或两者的调节。
88.根据段落80至87中任一项所述的方法，其中该免疫系统的调节增加病毒特异性T辅助细胞的数量。
89.根据段落80至88中任一项所述的方法，其中该免疫系统的调节降低IL-8和/或IL-1β和/或MCP-1的水平。
90.根据段落79至89中任一项所述的方法，其中该受试者是人类受试者。
91.根据段落79至90中任一项所述的方法，其中该受试者是人类儿童。
92.根据段落79至91中任一项所述的方法，其中减轻由病毒感染引起的炎症导致慢性呼吸道疾病的症状的减轻，该慢性呼吸道疾病的症状包括下组中的一种或多种，该组由以下各项组成：呼吸道炎症、咽喉疼痛、打喷嚏、鼻塞、流鼻涕、咳嗽、咳嗽伴有胸闷、和咳嗽伴有气喘。
93.根据段落79至92中任一项所述的方法，其中该方法是预防性的。
94.根据段落79至93中任一项所述的方法，其中可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的该组合物是以108至1012CFU的双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)/天的剂量配制。
95.根据段落94所述的方法，其中所述组合物是以约或为2x 109CFU的双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)/天的剂量配制。
96.根据段落79至95中任一项所述的方法，该方法包括给予或摄取至少一种另外的益生菌微生物。
97.根据段落96所述的方法，其中该至少一种另外的益生菌微生物选自乳杆菌属、链球菌属、肠球菌属、另一种双歧杆菌和酵母属。
98.根据段落79至97中任一项所述的方法，其中该组合物被配制为药物、食物产品或膳食补充剂。
99.根据段落79至98中任一项所述的方法，其中该组合物被配制为膳食补充剂。
100.可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的组合物在制造用于降低受试者中慢性呼吸道疾病的发展和恶化的风险的组合物的用途；优选地，其中可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的所述组合物是包含双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)和/或双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的发酵产物和/或双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的细胞裂解物的组合物。
101.如段落100所述的用途，其中慢性呼吸道疾病的发展和恶化的风险由于免疫系统的调节而降低，该免疫系统的调节是通过影响病毒作用和/或病毒效应进行；优选地其中影响病毒作用和/或病毒效应包括抑制病毒复制和/或减轻由病毒感染引起的炎症。
102.根据段落100或101所述的用途，其中所述慢性呼吸道疾病是哮喘和/或COPD。
103.根据段落100至102中任一项所述的用途，其中所述病毒是鼻病毒、冠状病毒、副流感病毒、腺病毒、肠病毒或呼吸道合胞病毒。
104.根据段落103所述的用途，其中所述病毒是鼻病毒，优选是人类鼻病毒(HRV)。
105.根据段落101至104中任一项所述的用途，其中该免疫系统的调节调节该受试者中的生物标志物水平，优选降低该受试者中的生物标志物水平。
106.根据段落105所述的用途，其中所述生物标志物是细胞因子和/或趋化因子。
107.根据段落105至106中任一项所述的用途，其中所述生物标志物是IL-8和/或IL-1β和/或MCP-1。
108.根据段落101至107中任一项所述的用途，其中该免疫系统的调节涉及先天免疫系统、适应性免疫系统或两者的调节。
109.根据段落101至108中任一项所述的用途，其中该免疫系统的调节增加病毒特异性T辅助细胞的数量。
110.根据段落101至109中任一项所述的用途，其中该免疫系统的调节降低IL-8和/或IL-1β和/或MCP-1的水平。
111.根据段落100至110中任一项所述的用途，其中该受试者是人类受试者。
112.根据段落100至111中任一项所述的用途，其中该受试者是人类儿童。
113.根据段落100至112中任一项所述的用途，其中减轻由病毒感染引起的炎症导致慢性呼吸道疾病的症状的减轻，该慢性呼吸道疾病的症状包括下组中的一种或多种，该组由以下各项组成：呼吸道炎症、咽喉疼痛、打喷嚏、鼻塞、流鼻涕、咳嗽、咳嗽伴有胸闷、和咳嗽伴有气喘。
114.根据段落100至113中任一项所述的用途，其中该用途是预防性的。
115.根据段落100至114中任一项所述的用途，其中可源自于双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)的该组合物是以108至1012CFU的双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)/天的剂量配制。
116.根据段落115所述的用途，其中所述组合物是以约或为2x 109CFU的双歧杆菌(优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04)/天的剂量配制。
117.根据段落100至116中任一项所述的用途，其中该组合物包含至少一种另外的益生菌微生物。
118.根据段落117所述的用途，其中该至少一种另外的益生菌微生物选自乳杆菌属、链球菌属、肠球菌属、另一种双歧杆菌和酵母属。
119.根据段落100至118中任一项所述的用途，其中所述组合物是药物、食物产品或膳食补充剂。
120.根据段落100至119中任一项所述的用途，其中该细菌被配制为膳食补充剂。
121.一种组合物或一种方法或一种用途，其中所述组合物还包含抗微生物剂、稳定剂、染料和干燥剂中的一种或多种或由其组成。
122.参考实例和附图的、如本文中总体教导的方法、用途或组合物。
附图
图1显示了通过实例1的研究详细描述受试者的流程的流程图。
图2显示了仅在鼻病毒感染的受试者亚组中分析鼻腔洗涤液中IL8水平的图示。
图3显示了鼻腔洗涤液细胞因子分析的图示。第0天和第4天细胞因子对G-CSF(A)、IL-1β(B)、IL-6(C)、IP-10(D)、和MCP-1(E)的反应。红线(实线)识别了第0天至第4天细胞因子反应的平均轨迹。
图4显示了在研究第1、2、3、4和5天鼻病毒滴度载量的图示。圆圈识别了几何平均鼻病毒病毒载量估计，且垂直线识别了95％置信区间。
图5显示了病毒脱落的时间的图示。标记有-o-的线是益生菌组，且上面标记有-Δ-的线是安慰剂组。
图6显示了HRV39特异性CCR5+T辅助细胞的倍数变化。
图7显示在第56天小鼠(对照组与益生菌组)的表型
图8显示了小鼠(对照组和益生菌组)的肺中的流感病毒滴度
图9显示了支气管肺泡灌洗液(“BALF”)中的淋巴细胞计数和比例
图10显示了BALF中的巨噬细胞计数和比例
实例
将参考以下实例进一步描述本发明
实例1-在健康成年人中使用BL-04
研究设计和流程
根据临床研究方案选择健康成年志愿者参与随机的、双盲的、安慰剂对照研究。在鼻内接种人类鼻病毒(HRV)之前，给予益生菌Bl-04或安慰剂28天。感染后每天取得鼻腔灌洗液多达5天以分析病毒载量和炎症标志物IL-8。
这项研究是一项随机的、双盲的、安慰剂对照试验，用于评估口服摄取益生菌对宿主对实验性鼻病毒感染的反应的影响。病毒激发日是研究第0天。在收集了基线血液和鼻腔灌洗标本之后，在研究第-28天健康的年轻的成年志愿者开始接受Bl-04或安慰剂。指示受试者每天消费一小袋研究产品，并且在研究中心在研究第-21、-14和-7天进行观察以重新供给研究产品并确保合规。继续研究产品的消费直到研究第5天。
在研究第0天，在病毒接种之前，收集血液和鼻腔灌洗液用于研究测定。然后在接下来的5天内每天观察志愿者以记录症状和不良事件并且收集鼻腔灌洗液用于病毒培养。
在研究第0、5和21天，采集血液以通过流式细胞仪分析适应性免疫细胞。
受试者：为了参加试验，七百八十九(789)名受试者签署了同意书。研究以三个组群进行，两个在2013年春季以及一个在2013年秋季进行。研究中受试者的流程在图1中示出。
将一百九十(190)名受试者随机分组进行治疗，在退出和按照方案排除之后，在活性组有115名和58名以及在安慰剂组有57名可用于分析。研究的计划分析样本大小为120。研究的关键分析是如在统计计划中所描述的，在感染有鼻病毒的受试者(活性组中51名受试者和安慰剂组中55名受试者)上进行。我们注意到，由于禁止食物(例如其他益生菌)的消费和志愿者退出，研究中有大量排除(参见图1)。
研究人群主要从UVa学生群体中抽取，并且研究的人口统计资料反映了该群体。为所测量的人口统计资料适当地平衡研究臂(study arm)。研究受试者的人口统计资料的详情在下表1中给出。
表1.研究人口统计资料。
在志愿者已经消费研究治疗28天之后和在用病毒激发之前，对受试者盲法对研究治疗的有效性进行了评估(参见下表2)。在两个治疗组中的大多数志愿者相信他们正在服用安慰剂制剂，但没有破盲的证据(似然比卡方检验：P＝0.56)。
表2.盲法评估。
在研究期间没有严重的不良事件。
结果
本研究的总体目的是为了解决以下假设：用益生菌双歧杆菌，优选动物双歧杆菌，更优选来自动物双歧杆菌乳酸亚种，更优选乳酸双歧杆菌BL-04进行的人类志愿者的预防将抑制由例如IL-8表征的病毒诱导的先天炎症性反应，同时增强适应性宿主反应，例如抗体产生。该研究提出以下具体的结果测量：
临床研究的主要终点
1)如由鼻腔灌洗液中的IL-8水平表征的在鼻腔粘膜中的炎症性反应
通过比较观察72小时的浓度从基线值的变化(72小时测量值减去0小时测量值)来评估鼻腔灌洗液IL-8浓度。在研究第0天和第3天之间的IL-8浓度的增加在益生菌组和安慰剂组之间没有显著差异(几何平均值比，在第3天对于浓度变化的活性：安慰剂＝0.69，p＝0.14)(表3，第3天行；图2)。然而，在病毒激发后5天的时间内，对病毒感染反应的IL-8的变化存在显著差异(几何平均比(A∶P)＝0.65，p＝0.03)(表3，所有天数行；图2)，表明在感染期间益生菌组的总体炎症较少。当研究治疗开始时，在第-28日时IL-8浓度没有任何差异。然而，在激发前的第0天，来自安慰剂治疗的志愿者的灌洗液中的IL-8浓度从第-28天显著降低，并且显著低于活性物治疗组(表4)。在病毒感染后鼻腔灌洗液中IL-8的浓度增加，但这些增加在活性物治疗组中无统计学意义。在研究第3、4和5天，在安慰剂组中IL-8浓度的增加具有统计学意义(表5；图1)。
表3.当表达为几何平均值的比时，从第0天起在感染期间IL-8浓度变化的组间对比调整了基线(第-28天)。
表4.在益生菌补充28天之后第0天IL-8浓度(loge[pg/mL])的分析的总结。
表5.当表达为几何平均值的比时，从第0天(即基线)起在感染期间(第1-5天)IL-8浓度变化的未调整估计值。
次要终点
1，鼻腔粘膜生物标志物反应
使用多重ELISA测定法从鼻腔灌洗液测量生物标记物(细胞因子和趋化因子)特征曲线。关于病毒激发，在第-28、0、1、2和4天分析了以下生物标志物：TGF-β1、G-CSF、GM-CSF、IFN-γ、IL-1α、IL-12p70、IL-15、MIP-3α、IL-1β、IL-6、IL-10、IP-10、MCP-1、MIP-1α、RANTES和TNF-α(三聚体)。许多这些分析物的浓度太低而不允许有效的分析。G-CSF、MIP-3α、IL-1β、IL-6、IP-10和MCP-1的结果被认为对分析是有效的。注意到先天炎症性标记物在感染后如预期增加。在治疗组之间不存在显著差异。然而，当分析从第0天(感染)到第4天反应的变化时，对于安慰剂组，在鼻腔灌洗液中存在较高的IL-1β(p＝0.071)和MCP-1(p＝0.075)的趋势(图3；表6)。该结果支持IL-8的结果，因为IL-1β和MCP-1两者都是炎症性细胞因子。因此，可以看出炎症降低了。
表6
2.鼻病毒复制
通过标准培养方法在鼻腔灌洗液中测量鼻病毒数量。在安慰剂治疗的受试者中比在益生菌治疗的受试者中的鼻腔灌洗液病毒滴度通常更大，然而，这种差异没有统计学意义(p＝0.1)(表7，图4)。如果对Bl-04的抗病毒功效进行了假设，并且使用的治疗意向群体包括那些尽管接种了HRV但是没未患临床感冒的人，那么在益生菌组中的受试者的鼻腔灌洗液中存在统计学上更少的鼻病毒(p＝0.026)(表8)。使用对数秩检验，事后分析(无邦费罗尼校正)发现，在益生菌治疗组中病毒脱落的时间更长(p＝0.02)(图5)并且具有病毒脱落的受试者的比例更低(p＝0.04)(图5)。因此，在益生菌治疗的受试者中，鼻病毒复制受损。
表7
表8
在DR4+受试者亚组中循环的RV特异性T细胞的数量：两个HRV39肽/MHC II四聚体将用于使用PBMC标本对循环的HRV39特异性CD4+T细胞频率进行的直接离体定量分析。已经发现在第21天在益生菌组中HRV39特异性CCR5+T辅助细胞的倍数变化更大(p＝0.042)(图6)。
图6的结果如下：
结果表明，在感染后，针对HRV39的适应性免疫反应得到改善，因此Bl-04补充可以为HRV的再感染提供益处。
实例1的结果表明，在实验性鼻病毒感染模型中Bl-04的预防性使用降低了鼻腔灌洗液中的炎症性IL-8细胞因子水平。由Bl-04引起的HRV感染的降低的炎症性反应通过炎症性细胞因子IL-1β和MCP-1在安慰剂组的较高诱导的趋势、而在益生菌组中无该趋势得到支持。这些结果表明，Bl-04的消费可以减轻气道中的炎症性反应。另外，上述结果表明，Bl-04消费在健康受试者中对于对抗HRV复制有效。这也表明Bl-04可以预防婴儿和/或儿童的哮喘发展，并且有利于预防与鼻病毒感染相关的哮喘和COPD恶化。
实例2-慢性呼吸道疾病
介绍
上述研究显示，益生菌乳酸双歧杆菌Bl-04在人类的HRV感染期间减少鼻病毒脱落和IL-8水平，分别表明益生菌的抗病毒和抗炎症作用。
不希望受理论束缚，我们认为Bl-04的给予可以降低哮喘或COPD恶化的风险(抗病毒效应)或严重性(抗炎症作用)。为了测试这一点，使用已经制得的易感人类鼻病毒的小鼠模型(Bartlett等人，2008)来测试Bl-04补充对哮喘或COPD恶化的功效。
在用卵清蛋白(模型过敏原)致敏的小鼠中研究哮喘，并且在长期暴露于香烟烟雾的小鼠中研究COPD(Stevenson和Birrell 2011)。任选地，使用具有轻度和稳定疾病的哮喘或COPD人类受试者，在实验性鼻病毒激发模型中预防性给予益生菌Bl-04(Del Vecchio等人，2015；Contoli等人，2007；Cheung等人，1995)。
动物研究
HRV感染的动物模型
通过使用次要群体鼻病毒感染的小鼠或在人类中充当人类主要群体鼻病毒天然受体(例如Bartlett 2008 Nat Med)的人类ICAM-1受体的转基因小鼠，在小鼠中研究了Bl-04补充对鼻病毒的影响。将该模型用于研究Bl-04对HRV感染的影响。当与下面解释的其他特定模型组合时，可以研究(i)哮喘发展风险的降低，(ii)哮喘恶化风险的降低，以及(iii)COPD恶化风险的降低。在动物实验中益生菌的剂量
在HRV感染之前，Bl-04优选以2*109CFU/天的剂量喂食2周。益生菌通过管饲法施用给予或通过混合到少量饲料或液体中给予以确保摄取的剂量。
益生菌Bl-04对哮喘发展的影响
在出生后第7天使它们暴露于HRV、RSV或安慰剂感染之前，将HRV易感小鼠给予Bl-04或安慰剂1周(Schneider 2012)。激发是以50％的感染剂量进行。RSV包含的基本原理是，Bl-04也可能对除了HRV之外的其他哮喘素因性病毒具有潜在有效性(Schwarze等人，1997)。RSV比HRV导致更频繁的气喘。我们在感染期间监测气道的炎症和小鼠中的病毒滴度。Bl-04对HRV和IL-8水平具有拮抗作用。
在HRV感染之后，用模型抗原卵清蛋白(OVA)进一步使小鼠致敏，该模型抗原卵清蛋白可以通过使用明矾作为佐剂的连续三次剂量用于在气道中诱导哮喘样症状。通过标准组织学和分子方法监测气道的炎症和气道高反应性的发展。早期生活或出生后Bl-04补充和在感染期间HRV病理学和炎症的减少在成年小鼠稍后的生活中降低炎症和哮喘病理学。
益生菌Bl-04对哮喘恶化的影响
使用卵清蛋白与明矾佐剂或PBS作为对照使HRV易感小鼠致敏。连续三天给予OVA以诱导气道炎症。HRV易感小鼠的补充如上所述以Bl-04或安慰剂开始。在Bl-04补充2周后，向小鼠给予50％感染剂量的HRV激发，并且从小鼠分析气道灌洗液中的气道的炎症(例如IL-8)和鼻病毒滴度。此外，组织学监测气道病理学。在Bl-04组中，炎症、HRV滴度和病理学减轻，并且HRV的感染性潜在地降低了。
益生菌Bl-04对COPD恶化的影响
将HRV易感小鼠暴露于香烟烟雾至少1个月(或在安慰剂组的情况下不暴露)，以诱导在COPD中观察到的免疫学和病理学变化(Stevenson 2007)。在已经发生慢性COPD样变化之后，开始向小鼠补充Bl-04或安慰剂2周。然后用50％感染剂量的HRV接种小鼠以诱导急性病毒诱导的恶化。分析炎症(包括IL-8)、HRV滴度和肺部病理学。在Bl-04组中，炎症、HRV滴度和病理学减轻，并且HRV的感染性潜在地降低了。
实例3-Bl-04对哮喘恶化的影响
研究设计
治疗组：
1.阴性对照组。用运载体(H2O)治疗。
2.用Bl-04治疗。
每组小鼠的数量＝15。
屋尘螨(HDM)诱发的哮喘恶化：
第0-28天：每个鼻腔每周三次给予在30ul PBS中的HDM。
第28-49天：通过谷物零食(cereal treat)每日给予Bl-04或运载体(H2O)。
第49天：每个鼻腔给予亚致死剂量的流感病毒(PR8)。
第52天：处死每组5只动物用于分析。
第54天：处死每组5只动物用于分析。
第56天：处死每组5只动物用于分析。
使用8周龄的BALB/c小鼠用于研究。饮用水和食物可随意使用。
在第0至28天，每周三次给予动物每个鼻腔15μg的HDM(在30μl PBS体积中)。将小鼠通过腹膜内注射9.75mg Xylasol和48.75mg Ketasol/kg麻醉，并且给予每个鼻腔15μg的HDM(在30μl PBS体积中)。
在第28至49天，动物通过口服管饲法(1x 109CFU/天)和通过谷物零食(1x 109CFU/天/谷物)给予运载体(水，第1组)或Bl-04(第2组)。
将200μl的水或Bl-04(以5x 109CFU/ml的浓度重构于水中)置于单片谷物(由Kellogg’s公司制造的‘Special K’)上。给予的每天，新鲜制备益生菌治疗。将每只笼子中每只小鼠一片谷物置于笼子内部的补料托盘上，并且小鼠能够在日间食用。
在同一天，通过口服管饲法向小鼠给予200μl的水或重构的益生菌。
在第49天，用亚致死剂量的甲型流感病毒(每个鼻腔250PFU；流感病毒株H1N1 PR/8/34)接种小鼠。将病毒材料储存于-75℃±10℃，并且在给予之前解冻。一旦解冻，将材料稀释在冷的PBS(4℃)中，对于A/PR/8/34对应于250PFU/50μl。将稀释的病毒保持在冰上直到给予至小鼠。
动物通过腹膜内注射9.75mg Xylasol和48.75mg Ketasol/kg体重来进行麻醉，并且每只动物通过鼻内接种接受50μl病毒溶液。
在第52、54和56天，每组五只动物通过致死腹膜内注射五巴比妥(pentabarbitol)处死，紧接着是在500μl的盐水中进行支气管肺泡灌洗(BAL)和组织分离(肺)。
从BAL液中分离细胞，并且进行差异细胞计数(200个细胞计数/样品)。使用库尔特(Coulter)计数器(瑞士巴塞尔IG仪器有限公司(IG Instrumenten-Gesellschaft AG，Basel，Switzerland))确定支气管肺泡灌洗(BAL)液中的总细胞数。基于标准形态学和细胞化学标准，在用Diff-Quik溶液(Dade Behring，伊利诺伊州迪尔菲尔德市西门子医疗诊断公司(Siemens Healthcare Diagnostics，Deerfield，IL))染色的细胞离心涂片上进行差异细胞计数(200个细胞计数/样品)。
分离肺叶用于通过定量PCR对肺组织中的病毒载量进行定量。将肺叶小心分离并置于含有1ml的TRI-Reagent(分子研究中心公司(Molecular Research Center Inc.)，目录编号：TR 118)的Eppendorf管中，并且在干冰中快速冷冻。然后将样品储存在-80℃下直到处理。
在TRI-Reagent中保存的肺叶在室温下缓慢解冻。将无菌的、不锈钢珠粒(凯杰公司(Qiagen)，目录编号：69989)置于每个样品管中，并且使用TissueLyser(凯杰公司，目录编号：85220)在25Hz的频率下持续3分钟使肺均质化。
按照制造商的说明使用TRI-Reagent(分子研究中心公司(Molecular ResearchCenter Inc.)，目录编号：TR 118)完成RNA提取(http：//mrcgene.com/wp-content/uploads/2014/06/TRIMay2014.pdf)。
使用Thermo Scientific NanoDropTM 1000分光光度计(赛默飞世尔科技公司(Thermo Fisher Scientific))测量每个样品中的RNA浓度。在通过逆转录将RNA转化为cDNA和通过实时PCR定量cDNA之前，用DNA酶(英杰公司(Invitrogen))处理RNA以避免基因组DNA污染。根据β-肌动蛋白表达水平对样品进行归一化。
在一步RT-PCR中，在10μl的最终反应体积下扩增样品，该最终反应体积含有5μl的iTaq通用SYBR Green反应混合物(伯乐实验室公司(BIO-RAD Laboratories)，目录编号172-5150)、0.125μl的iScript逆转录酶(伯乐公司，目录编号：172-5150)、0.5μl的流感PR8Matrix蛋白质正向和反向引物(5_-GGACTGCAGCGTAGACGCTT-3_和5_-CATCCTGTATATGAGGCCCAT-3)或β-肌动蛋白(5_-GATCAAGATCATTGCTCCTCCTGA-3_和5_-CAGCTCAGTAACAGTCCGCC-3_)、0.375μl的无RNA酶的水(伯乐公司，目录编号：172-5150)、以及4μl的125ng/μl的RNA。
使用以下方案在CFX-96实时PCR系统(伯乐公司(BIO-RAD))中进行热循环：逆转录反应：在50℃下10min，然后聚合酶活化和DNA变性：在95℃下1min，然后变性：95℃持续10sec，然后退火/延伸+板读数：在60℃下30sec，持续共40个循环。
图表和统计分析。
统计学作为非配对t检验(肺组织中病毒滴度的定量)或单因素ANOVA进行。附图中的误差条代表平均值的标准误差(SEM)。
结果
小鼠对益生菌的给予耐受良好。小鼠通过管饲法接受益生菌，其确保所有小鼠暴露于细菌，并且，另外，笼子中的谷物浸泡有益生菌并且每天被小鼠迅速食用。在组内没有观察到实质变化，该实质变化将表明一些小鼠比其他小鼠消费更多的浸泡细菌的谷物。
用HDM处理小鼠在小鼠中引入哮喘样病症。在用益生菌或运载体处理之后，小鼠被感染上流感病毒。益生菌处理的小鼠的外观显著不同，且益生菌小鼠似乎具有更少的发病率。这一观察结果表明，益生菌处理的小鼠可能已被保护免受初始过敏性哮喘反应，和/或益生细菌在病毒感染期间可以防止发病(和潜在的死亡)。因此，小鼠的总体健康似乎有所增加(图7)。这也通过在用益生菌处理的小鼠中的病毒感染趋势低于用运载体处理的小鼠的趋势进行说明(图8)。
在患有“哮喘”的小鼠中对流感感染的免疫反应的主要测量显示Bl-04可以在流感感染期间调节肺中的免疫反应的趋势。通过显微镜定量气道的主要免疫细胞成分，即淋巴细胞、巨噬细胞和嗜中性粒细胞。在第56天的巨噬细胞的数量和在第54天的气道中的淋巴细胞数量在用益生菌处理的小鼠中比接受运载体的小鼠显著更高(图9和图10)。巨噬细胞是维持组织内稳态和控制感染的关键因素，因此在本模型的背景下，在第56天巨噬细胞数量的增加将被预期是有益的现象(Tate等人，2013)。类似地，淋巴细胞对于病毒清除是重要的，并且其存在增加也将被认为是积极的效果。
来自对肺组织病毒载量的定量测定的结果可以参见下表9和图8。这些结果表明，与对照组相比，在益生菌组在第54天流感病毒滴度(如通过参考β-肌动蛋白水平归一化的)显著更低，支持了益生菌处理可以减少病毒载量和/或在病毒清除中起作用的立场。
表9
在健康成年人中的人类临床研究表明，Bl-04可以调节可能已经抑制鼻腔粘膜中鼻病毒脱落的先天免疫反应(测量为IL-8)。在HDM小鼠模型中，观察到Bl-04对免疫调节的作用的支持性证据，因为在BALF中检测到巨噬细胞和淋巴细胞数量增加。这些免疫调节变化可以解释与人类鼻病毒滴度的降低一致的小鼠改善的健康和小鼠肺中病毒滴度潜在的降低。因此，Bl-04似乎改善对健康成年人中的鼻病毒和哮喘小鼠中的流感病毒的抗病毒免疫力。总的来说，结果表明，Bl-04可以应用于患有哮喘的人类，用于预防或减轻病毒诱导的哮喘恶化。
实例4-人类临床研究
成年人中哮喘和COPD的恶化
使用与本发明中描述的相似的关于实例1中的实验性鼻病毒感染模型的方案来研究Bl-04补充对哮喘和COPD恶化的影响(Del Vecchio 2015)。通过使用标准临床标准，使用具有轻度至中度疾病的哮喘患者和COPD患者代替健康受试者。
Bl-04对预防和减轻由HRV诱导的哮喘恶化的影响
研究产品
在HRV激发之前和感染后4天，将益生菌Bl-04或安慰剂混合在饮料中以2x109CFU/天的剂量给予28天。
研究设计
随机的、双盲的、安慰剂对照的
研究终点
使用呼气流量峰值(PEF)测量受试者的气流阻塞。这是一个人的最大呼气速度，如用峰值流量计测量的。还测量了在预测的(预测的FEV 1％)一秒内的用力呼气量或需要任何其他气流量度。在第-28、0、1、2天和在第4天的研究结束时测量PEF和预测的FEV 1％。
根据实例1使用eNO测量以及还通过在支气管肺泡灌洗中测量IL-8来测量气道炎症。这些测量是在第-28、0、1、2和4天进行的。
使用在第-28、0、1、2、3和4天的调查(优选使用问卷和FEV)来测量呼吸道症状。
根据实例1测量支气管肺泡和鼻腔灌洗中的病毒滴度。
入选标准
基于PEF、预测的FEV 1％和症状频率的轻度或中度哮喘(Yawn.2008)
年龄为18-65岁
未怀孕
排除标准
抗炎症药物的使用
其他慢性疾病
定期的益生菌消费
抗生素治疗
Bl-04对预防和减轻由HRV诱导的COPD恶化的影响
按照上文所述的哮喘研究进行相同的研究，但在这种情况下，受试者具有轻度或中度COPD而不是哮喘(Vestbo.2013)。
儿童哮喘的发展
Bl-04对预防儿童哮喘的影响
将具有特应性(即过敏性超敏反应，已知与发展哮喘的可能性增加有关(Elward等人，2010))倾向的怀孕母亲和她们的宝贝招募到研究中。向从出生到年龄为12岁的婴幼儿给予益生菌Bl-04。通过访问儿科医生监测在生命第一年内病毒感染的发生率，并且通过标准实验室技术发现病因学。另外，通过分析Th2细胞因子、IgE，以及使用PEF、FEV 1％、皮肤点刺试验和潜在的用于特应性和哮喘的其他诊断措施来监测免疫系统和发生特应性的发展直到3岁的年龄。
研究产品
从出生开始并且直到12个月龄，将益生菌Bl-04或安慰剂混合在乳中以2x109CFU/天的剂量给予。
研究设计
随机的、双盲的、安慰剂对照的
研究终点
除了如上所述测量的气流阻塞之外，进行以下测量：-
皮肤点刺试验(测量皮肤对过敏原的反应)
由父母使用问卷记录呼吸道症状
HRV和RSV感染的发生率由父母和医师调查来测量。
入选标准
父母的特应性倾向
健康新生儿
排除标准
抗生素治疗
出生时的其他先天性异常
上述说明书中提及的所有出版物通过引用结合在此。在不背离本发明的范围和精神的情况下，本发明的所描述的方法和系统的各种修改和变化对本领域的技术人员将是显而易见的。尽管本发明已经结合特定的优选实施例进行了说明，但应该理解要求保护的本发明不应该不当地受限于此类特定的实施例。实际上，对于微生物学、生物化学和分子生物学或相关领域的技术人员而言显而易见的、用于执行本发明的所描述的模式的各种修改旨在落入以下权利要求书的范围之内。
参考文献
Azad MB，Coneys JG，Kozyrskyj AL，Field CJ，Ramsey CD，Becker AB，FriesenC，Abou-Setta AM，Zarychanski R.Probiotic supplementation during pregnancy orinfancy for the prevention of asthma and wheeze：systematic review and meta-analysis.BMJ.2013Dec 4；347：f6471.doi：10.1136/bmj.f6471。
Barrangou R.，Briczinski EP，Traeger LL，Loquasto JR，Richards M，HorvathP，-Monvoisin AC，Leyer G，Rendulic S，Steele JL，Broadbent JR，Oberg T，DudleyEG，Schuster S，Romero DA，Roberts RF.Comparison of the complete genomesequences of Bifidobacterium animalis subsp.lactis DSM 10140and Bl-04J.Bacteriol.2009191∶4144-4151
Bartlett NW，Walton RP，Edwards MR，Aniscenko J，Caramori G，Zhu J，Glanville N，Choy KJ，Jourdan P，Burnet J，Tuthill TJ，Pedrick MS，Hurle MJ，Plumpton C，Sharp NA，Bussell JN，Swallow DM，Schwarze J，Guy B，Almond JW，JefferyPK，Lloyd CM，Papi A，Killington RA，Rowlands DJ，Blair ED，Clarke NJ，JohnstonSL.Mouse models of rhinovirus-induced disease and exacerbation of allergicairway inflammation.Nat Med.2008Feb；14(2)：199-204.doi：10.1038/nm1713.Epub2008Feb 3
Calder，PC 2013.Feeding the immune system.Proc Nutr Soc 72(3)：299-309。
Cheung D，Dick EC，Timmers MC，de Klerk EP，Spaan WJ，Sterk PJ.Rhinovirusinhalation causes long-lasting excessive airway narrowing in response tomethacholine in asthmatic subjects in vivo.Am J Respir Crit Care Med.1995Nov；152(5Pt 1)：1490-6。
Contoli M，Message SD，Laza-Stanca V，Edwards MR，Wark PA，Bartlett NW，Kebadze T，Mallia P，Stanciu LA，Parker HL，Slater L，Lewis-Antes A，Kon OM，HolgateST，Davies DE，Kotenko SV，Papi A，Johnston SL.Role of deficient type IIIinterferon-lambda production in asthma exacerbations.Nat Med.2006 Sep；12(9)：1023-6.Epub 2006Aug 13。
Contoli M，Caramori G，Mallia P，Papi A，Johnston SL.A human rhinovirusmodel of chronic obstructive pulmonary disease exacerbations.ContribMicrobiol.2007；14：101-12.Review。
Del Vecchio AM，Branigan PJ，Barnathan ES，Flavin SK，Silkoff PE，TurnerRB.(2015)Utility of animal and in vivo experimental infection of humans withrhinoviruses in the development of therapeutic agents for viral exacerbationsof asthma and chronic obstructive pulmonary disease.Pulm Pharmacol Ther.2014Nov 13；30C：32-43.doi：10.1016/j.pupt.2014.10.005.[Epub ahead of print]PMID：25445932[PubMed-as supplied by publisher]
Elazab N，Mendy A，Gasana J，Vieira ER，Quizon A，Forno E.Probioticadministration in early life，atopy，and asthma：a meta-analysis of clinicaltrials.Pediatrics.2013Sep；132(3)：e666-76.doi：10.1542/peds.2013-0246.Epub 2013Aug 19。
Elward，Graham Douglas，Kurtis S.(2010).Asthma.London：Manson Pub.pp.27-29.ISBN 978-1-84076-513-7。
FAO/WHO.Guidelines for the evaluation of probiotics in food 2001.Foodand Agriculture Organization of the United Nations(FAO).2001.Health andNutritional Properties of Probiotics in Food including Powder Milk with LiveLactic Acid Bacteria，http：//www.who.int/foodsafety/publications/fs_ management/en/probiotics.pdf
Gunawardana N，Finney L，Johnston SL，Mallia P.Experimental rhinovirusinfection in COPD：implications for antiviral therapies.Antiviral Res.2014Feb；102∶95-105.doi：10.1016/j.antiviral.2013.12.006.Epub 2013 Dec 24.Review。
Hao Q，Lu Z，Dong BR，Huang CQ，Wu T.Probiotics for preventing acuteupper respiratory tract infections.Cochrane Database Syst Rev.2011 Sep 7；(9)：CD006895.doi：10.1002/14651858.CD006895.pub2.Review。
Heikkinen T，A.The Common Cold.Lancet.2003 Jan 4；361(9351)：51-9.Review。
Jackson DJ，Evans MD，Gangnon RE，Tisler CJ，Pappas TE，Lee WM，Gern JE，Lemanske RF Jr.Evidence for a causal relationship between allergicsensitization and rhinovirus wheezing in early life.Am J Respir Crit CareMed.2012 Feb 1；185(3)：281-5.doi：10.1164/rccm.201104-0660OC.Epub 2011 Sep 29。
Kang EJ，Kim SY，Hwang IH，Ji YJ.The effect of probiotics on preventionof common cold：a meta-analysis of randomized controlled trial studies.KoreanJ Fam Med.2013 Jan；34(1)：2-10.doi：10.4082/kjfm.2013.34.1.2.Epub 2013 Jan 28。
Mallia P，Message SD，Contoli M，Gray KK，Telcian A，Laza-Stanca V，Papi A，Stanciu LA，Elkin S，Kon OM，Johnson M，Johnston SL.Neutrophil adhesion moleculesin experimental rhinovirus infection in COPD.Respir Res.2013 Jul 8；14：72.doi：10.1186/1465-9921-14-72。
Maynard，CL，Elson，CO，et al.2012.Reciprocal interactions of theintestinal microbiota and immune system.Nature 489(7415)：231-241。
Message SD，Laza-Stanca V，Mallia P，Parker HL，Zhu J，Kebadze T，ContoliM，Sanderson G，Kon OM，Papi A，Jeffery PK，Stanciu LA，Johnston SL.Rhinovirus-induced lower respiratory illness is increased in asthma and relatedto virusload and Th1/2 cytokine and IL-10 production.Proc Natl Acad Sci U S A.2008Sep 9；105(36)：13562-7.doi：10.1073/pnas.0804181105.Epub 2008 Sep 3。
Proud D.Role of rhinovirus infections in asthma.Asian Pac J AllergyImmunol.2011 Sep；29(3)：201-8.Review。
Saglani S.Innate immunity in paediatric viral wheezers is virusspecific and not interferon dependent.Thorax.2014 Oct；69(10)：887-8.doi：10.1136/thoraxjnl-2014-205561.Epub 2014 May 28.No abstract available 。
Saraya T，Kurai D，Ishii H，Ito A，Sasaki Y，Niwa S，Kiyota N，Tsukagoshi H，Kozawa K，Goto H，Takizawa H.Epidemiology of virus-induced asthmaexacerbations：with special reference to the role of human rhinovirus.FrontMicrobiol.2014 May 26；5∶226.doi：10.3389/fmicb.2014.00226.eCollection2014.Review。
Schneider D，Hong JY，Popova AP，Bowman ER，Linn MJ，McLean AM，Zhao Y，Sonstein J，Bentley JK，Weinberg JB，Lukacs NW，Curtis JL，Sajjan US，HershensonMB.Neonatal rhinovirus infection induces mucous metaplasia and airwayshyperresponsiveness.J Immunol.2012 Mar 15；188(6)：2894-904.doi：10.4049/jimmunol.1101391.Epub 2012 Feb 13
Schwarze J，Hamelmann E，Bradley KL，Takeda K，Gelfand EW.Respiratorysyncytial virus infection results in airway hyperresponsiveness and enhancedairway sensitization to allergen.J Clin Invest.1997 Jul 1；100(1)：226-33。
Sigurs N，Aljassim F，Kjellman B，Robinson PD，Sigurbergsson F，BjarnasonR，Gustafsson PM.Asthma and allergy patterns over 18 years after severe RSVbronchiolitis in the first year of life.Thorax.2010 Dec；65(12)：1045-52.doi：10.1136/thx.2009.121582.Epub 2010 Jun 27。
Stevenson CS，Docx C，Webster R，Battram C，Hynx D，Giddings J，Cooper PR，Chakravarty P，Rahman I，Marwick JA，Kirkham PA，Charman C，Richardson DL，NirmalaNR，Whittaker P，Butler K.Comprehensive gene expression profiling of rat lungreveals distinct acute and chronic responses to cigarette smoke inhalation.AmJ Physiol Lung Cell Mol Physiol.2007 Nov；293(5)：L1183-93.Epub 2007 Aug 24。
Stevenson CS，Birrell MA.Moving towards a new generation of animalmodels for asthma and COPD with improved clinical relevance.PharmacolTher.2011 May；130(2)：93-105.doi：10.1016/j.pharmthera.2010.10.008.Epub 2010Nov 11.Review.PMID：21074553[PubMed-indexed for MEDLINE]
Tate MD，Pickett DL，van Rooijen N，Brooks AG and Reading PC.Criticalrole of airway macrophages in modulating disease severity during influenzavirus infection of mice.J Virol 2010,84(15)，pp.7569-7580。
Tourneur，E and Chassin，C 2013.Neonatal immune adaptation of the gutand its role during infections.Clin Dev Immunol 2013：270301。
Vestbo，2013.″Diagnosis and Assessment″.Global Strategy for theDiagnosis，Management，and Prevention of Chronic Obstructive PulmonaryDisease.Global Initiative for Chronic Obstructive Lung Disease.pp.9-17
Wall，R，Ross，RP，et al.2009.Role of gut microbiota in early infantdevelopment.Clin Med Pediatr 3∶45-54。
Wark PA，Johnston SL，Simpson JL，Hensley MJ，Gibson PG.Chlamydiapneumoniae immunoglobulin A reactivation and airway inflammation in acuteasthma.Eur Respir J.2002 Oct；20(4)：834-40。
Yawn BP.Factors accounting for asthma variability：achieving optimalsymptom control for individual patients.Primary Care Respiratory Journal2008.17(3)：Sept：138-147。
序列表
<110> 杜邦营养生物科学有限公司（DuPont Nutrition Biosciences ApS）
<120> 组合物
<130> NB40880-PCT-US
<150> US 62/108260
<151> 2015-01-27
<160> 4
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 1
ggactgcagc gtagacgctt 20
<210> 2
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引物
<400> 2
catcctgtat atgaggccca t 21
<210> 3
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> β-肌动蛋白正向引物
<400> 3
gatcaagatc attgctcctc ctga 24
<210> 4
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> β-肌动蛋白反向引物
<400> 4
cagctcagta acagtccgcc 20

Claims (15)

1.一种可源自于双歧杆菌的组合物，该组合物用于通过影响受试者中的病毒作用和/或病毒效应来调节所述受试者中的免疫系统。
2.一种可源自于双歧杆菌的组合物，该组合物用于降低受试者中慢性呼吸道疾病的发展和恶化的风险；优选地通过经由影响该受试者中的病毒作用和/或病毒效应来调节所述受试者中的免疫系统来实现。
3.用于根据前述权利要求中任一项所述的用途的组合物，其中影响所述受试者中的病毒作用和/或病毒效应包括抑制病毒复制和/或减轻由病毒感染引起的炎症。
4.用于根据前述权利要求中任一项所述的用途的组合物，其中所述病毒是
(i)鼻病毒，优选人类鼻病毒(HRV)；或
(ii)流感病毒。
5.用于根据前述权利要求中任一项所述的用途的组合物，其中该免疫系统的调节涉及调节该受试者中的生物标志物水平，优选降低该受试者中的生物标志物水平。
6.用于根据权利要求5所述的用途的组合物，其中所述生物标志物是细胞因子和/或趋化因子例如IL-8和/或IL-1β和/或MCP-1。
7.用于根据前述权利要求中任一项所述的用途的组合物，其中该免疫系统的调节涉及先天免疫系统、适应性免疫系统或两者的调节。
8.用于根据前述权利要求中任一项所述的用途的组合物，其中该免疫系统的调节增加病毒特异性T辅助细胞的数量。
9.用于根据前述权利要求中任一项所述的用途的组合物，其中该组合物被配制为药物、食物产品或膳食补充剂。
10.用于根据前述权利要求中任一项所述的用途的组合物，其中所述受试者患有哮喘和/或COPD。
11.用于根据前述权利要求中任一项所述的用途的组合物，其中可源自于双歧杆菌的该组合物是可源自于动物双歧杆菌的组合物，例如可源自于动物双歧杆菌乳酸亚种的组合物，例如可源自于乳酸双歧杆菌BL-04的组合物。
12.用于根据前述权利要求中任一项所述的用途的组合物，其中所述组合物还包含至少一种另外的益生菌微生物。
13.用于根据前述权利要求中任一项所述的用途的组合物，其中所述组合物还包含抗微生物剂、稳定剂、染料和干燥剂中的一种或多种或由其组成。
14.用于根据前述权利要求中任一项所述的用途的组合物，其中该用途是预防性的。
15.参考实例和附图的、用于如本文中总体教导的用途的组合物。
CN201680007471.2A 2015-01-27 2016-01-27 包含双歧杆菌的免疫调节组合物 Pending CN107206034A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562108260P 2015-01-27 2015-01-27
US62/108260 2015-01-27
PCT/EP2016/051695 WO2016120320A1 (en) 2015-01-27 2016-01-27 Immunomodulatory composition comprising bifidobacteria

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN107206034A true CN107206034A (zh) 2017-09-26

Family

ID=55353174

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201680007471.2A Pending CN107206034A (zh) 2015-01-27 2016-01-27 包含双歧杆菌的免疫调节组合物

Country Status (12)

Country Link
US (1) US10668117B2 (zh)
EP (1) EP3250216B1 (zh)
JP (1) JP6867953B2 (zh)
KR (1) KR102442995B1 (zh)
CN (1) CN107206034A (zh)
AU (2) AU2016212100B2 (zh)
BR (1) BR112017013999B1 (zh)
CA (1) CA2969604C (zh)
DK (1) DK3250216T3 (zh)
FI (1) FI3250216T3 (zh)
RU (1) RU2755083C2 (zh)
WO (1) WO2016120320A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI709408B (zh) * 2018-08-16 2020-11-11 葡萄王生技股份有限公司 乳雙歧桿菌gkk2、含其之組合物及改善過敏性氣喘之用途

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX2019010143A (es) * 2017-02-28 2019-10-02 Alimentary Health Ltd Bifidobacterium longum capaz de modular beneficiosamente la respuesta inmune contra una infeccion respiratoria por virus.
CN110392734A (zh) * 2017-02-28 2019-10-29 营养健康有限公司 可以有益地调节针对呼吸道病毒感染的免疫应答的长双歧杆菌
WO2018209308A1 (en) * 2017-05-12 2018-11-15 The Regents Of The University Of California Treating and detecting dysbiosis
ES2783723A1 (es) * 2019-03-15 2020-09-17 Igen Biolab Group Ag Composicion obtenida de lisados bacterianos para modular el microbioma humano, formulacion terapeutica y suplemento alimenticio que comprenden la composicion, y usos de la composicion.
US11318174B2 (en) * 2020-07-09 2022-05-03 Dupont Nutrition Biosciences Aps Probiotics for use in the prevention or treatment of illness and/or symptoms associated with coronaviruses

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104168905A (zh) * 2011-06-10 2014-11-26 杜邦营养生物科学有限公司 使用乳双歧杆菌bl-04治疗呼吸道疾病

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2146935C1 (ru) 1996-04-24 2000-03-27 ЗИНЧЕНКО Владимир Борисович Сухой иммунопробиотический препарат для птицеводства
CN105288616B (zh) * 2010-10-15 2018-10-19 科.汉森有限公司 免疫佐剂

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104168905A (zh) * 2011-06-10 2014-11-26 杜邦营养生物科学有限公司 使用乳双歧杆菌bl-04治疗呼吸道疾病

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
TEEMU TAIPALE ET AL.: "bifidobacterium animalis subsp. lactis bb-12 in reducing the risk of infections in infancy", 《BRITISH JOURNAL OF NUTRITION》 *
WEST NICHOLAS P ET AL.: "probiotic supplementation for respiratory and gastrointestinal illness symptoms in healthy physically active individuals", 《CLINICAL NUTRITION》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI709408B (zh) * 2018-08-16 2020-11-11 葡萄王生技股份有限公司 乳雙歧桿菌gkk2、含其之組合物及改善過敏性氣喘之用途

Also Published As

Publication number Publication date
CA2969604A1 (en) 2016-08-04
FI3250216T3 (fi) 2024-02-02
RU2755083C2 (ru) 2021-09-15
WO2016120320A1 (en) 2016-08-04
EP3250216A1 (en) 2017-12-06
AU2019200846A1 (en) 2019-02-28
RU2017129693A3 (zh) 2019-08-12
AU2016212100A1 (en) 2017-06-22
BR112017013999A2 (pt) 2018-03-13
AU2016212100B2 (en) 2019-02-21
EP3250216B1 (en) 2023-11-08
KR20170105011A (ko) 2017-09-18
US20190099457A1 (en) 2019-04-04
US10668117B2 (en) 2020-06-02
JP6867953B2 (ja) 2021-05-12
DK3250216T3 (da) 2024-01-29
RU2017129693A (ru) 2019-03-01
CA2969604C (en) 2024-04-02
JP2018504460A (ja) 2018-02-15
BR112017013999B1 (pt) 2022-05-10
KR102442995B1 (ko) 2022-09-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20210379126A1 (en) Method of treatment
Bustamante et al. Probiotics and prebiotics potential for the care of skin, female urogenital tract, and respiratory tract
TWI374745B (en) Use of a combination of bifidobacterium lactis bb-12 and lactobacillus rhamnosus gg for preventing or treating respiratory infections and acute otitis media in infants
TW587098B (en) Immunity enhancing lactic acid bacteria
CN107206034A (zh) 包含双歧杆菌的免疫调节组合物
CN100421676C (zh) 乳酸产生细菌和肺功能
JP2019048857A (ja) 細菌株を含む組成物
JP2009506016A (ja) アトピー性皮膚炎の治療のためのシンバイオティック（ｓｙｍｂｉｏｔｉｃ）の使用
KR101474188B1 (ko) 질병의 발병률 및 지속기간의 감소에 사용하기 위한 프로바이오틱
JP6261688B2 (ja) Ｑｏｌ改善又は持続剤
JP2021529816A (ja) 細菌株を含む組成物
JP2023550962A (ja) アトピー性疾患を予防、遅延、又は改善する方法
EP2139502B1 (en) Lactobacillus and bifidobacterium against birch allergy

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination