CN107182513A - 冬瓜耐寒性鉴定方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种冬瓜耐寒性鉴定方法，取苗龄为2片真叶期的冬瓜苗置于10℃下处理4天，观察出现冬瓜冷害的冬瓜株数，根据冬瓜冷害分级进行分级，然后计算冬瓜的冷害指数，再按照以下冬瓜耐寒性分级标准判断冬瓜耐寒性：极耐寒型品种：冷害指数≤10％；耐寒型品种：10％＜冷害指数≤30％；中间型品种：30％＜冷害指数≤70％；冷敏型品种：70％＜冷害指数≤90％；极冷敏型品种：冷害指数＞90％。该方法在不受气候影响的情况下可对冬瓜种质资源进行耐寒性鉴定，筛选出耐寒冬瓜种质，开展冬瓜耐寒育种，培育耐寒冬瓜新品种，满足冬瓜产业的需求。

Description

冬瓜耐寒性鉴定方法

技术领域

本发明涉及冬瓜耐寒性的鉴定方法。

背景技术

冬瓜(Benincasa hispida Cogn.)是我国最重要的瓜类蔬菜之一，在全国范围内广泛栽培，年播种面积25万公顷。冬瓜产量高，货架期长，耐贮运，具有稳定菜价和度淡的作用。冬瓜是一种典型的喜温作物，生产过程中，低温是一个很重要的非生物障碍因子，严重影响冬瓜早期的生长发育,已成为冬瓜北方地区保护地栽培和南方提早栽培的限制因素。市场上需要耐寒的冬瓜品种，然而，迄今为止，尚未见冬瓜耐寒鉴定方法的相关报道，冬瓜耐寒育种尚处起步阶段。

在以往，发明人开展冬瓜耐寒鉴定时，都是采用自然鉴定的，即在冬、春季将冬瓜鉴定材料放置露天场地，当自然温度在10℃左右时，每天调查一次冷害指数，至少连续调查1个月。可是这种鉴定方法操作性低，因为出现低温的时间不确定，低温程度难以预知；从播种至鉴定出最终结果至少2个月，操作时间长，效率低；开展实验时间短，每年能开展耐寒试验的时间只有在冬春季。

发明内容

本发明的目的在于提供一种冬瓜耐寒性鉴定方法，在不受气候影响的情况下可对冬瓜种质资源进行耐寒性鉴定，筛选出耐寒冬瓜种质，开展冬瓜耐寒育种，培育耐寒冬瓜新品种，满足冬瓜产业的需求。

本发明实现目的的技术方案如下：一种冬瓜耐寒性鉴定方法，取苗龄为2片真叶期的冬瓜苗置于10℃下处理4天，观察出现冬瓜冷害的冬瓜株数，根据冬瓜冷害分级进行分级，然后计算冬瓜的冷害指数，再按照以下冬瓜耐寒性分级标准判断冬瓜耐寒性：

极耐寒型品种：冷害指数≤10％；

耐寒型品种：10％＜冷害指数≤30％；

中间型品种：30％＜冷害指数≤70％；

冷敏型品种：70％＜冷害指数≤90％；

极冷敏型品种：冷害指数＞90％。

本发明中冷害指数通过以下式一的公式模型计算：

其中，S₀～S₅为冬瓜苗发生1～5级冷害的处理株数，N为总处理株数。其中，冬瓜冷害分级如下：

0级：叶片正常，翠绿色，叶缘光滑平整，无任何伤害；

1级：叶片仅有轻度褪绿，叶缘上有褐色散点状斑点，损伤面积≤10％；

2级：叶片褪绿颜色变浅黄,但叶片未完全黄化，叶缘略微卷曲，叶周缘出现白灰色损伤斑纹，10％<损伤面积≤20％；

3级：叶片褪绿情况明显，叶片黄化，叶前缘水渍状褐化，脱水斑严重，20％<褐化面积≤50％；

4级：植株叶片褪色，变脆变薄，叶片卷曲，枯萎褐化严重，50％<褐化面积≤70％；

5级：叶片褪绿，叶前缘褐化严重，叶片软化萎缩，重量、面积缩减，褐化面积>70％。

本发明与现有技术相比，具有以下的优点：

1.本发明提供的鉴定方法能有效地鉴定冬瓜不同品种的耐寒性。

2.本发明提供的鉴定方法不受环境和气候影响，在人工气候室对冬瓜幼苗进行低温处理即可获得鉴定结果。

3.本发明提供的鉴定方法与自然鉴定法相比，操作时间短、速度快，结果准确，非常具有操作性。

附图说明

图1是冬瓜冷害分级图。

具体实施方式

第一部分：冬瓜耐寒鉴定方法的建立

冬瓜是喜温植物，其生长发育最适宜温度18-32℃，在35℃以上仍能生长正常，对低温极敏感，5℃以下会冻死。幼苗期能忍受较低温，15℃左右生长缓慢，10℃就易产生冻害。结合我国冬瓜播种的实际情况，晚冬早春，冬瓜正处于幼苗期，因此，冷害也主要发生在幼苗期。因此，建立冬瓜耐寒鉴定方法主要有三个参数：低温程度、幼苗大小、处理天数。

本发明中选择了三个时期冬瓜幼苗进行试验：子叶期、1片真期(或1心1叶期)、2片真期(或1心2叶期)。

1.试验材料

冬瓜耐寒材料B274和冷敏感材料B281分别来自广西南宁和广东广州的黑皮冬瓜纯合自交系。

2.试验方法

2.1试验材料种植

营养土按草炭﹕珍珠岩﹕蛭石＝3﹕1﹕1配制，各品种冬瓜种子手工破壳、经常规浸种、催芽后，种植在装好营养土的48孔穴盘中，浇水后，放至人工气候室培养，光强为12000lx，白天(12h)温度为28℃，晚上(12h)温度为25℃，空气湿度为60％。

2.2冬瓜耐寒性鉴定方法的建立

采用三因素三水平正交实验法，以处理温度、处理时长、处理生长点为三个因素，分别设置三个因素的三个不同水平：处理温度8℃、10℃、12℃，处理时长2d、4d、6d，处理生长点子叶期、1片真叶期、2片真叶期。在各个因素的不同水平下对B274与B281进行胁迫处理，通过观察受伤程度的表型，来探索能够最大程度区分两个品种的各因素水平。

2.3结果与分析

2.3.1冬瓜冷害等级划分标准

2.3.1.1冬瓜冷害分级:

冬瓜冷害分级：

0级：叶片正常，翠绿色，叶缘光滑平整，无任何伤害；

1级：叶片仅有轻度褪绿，叶缘上有褐色散点状斑点，损伤面积≤10％；

2级：叶片褪绿颜色变浅黄,但叶片未完全黄化，叶缘略微卷曲，叶周缘出现白灰色损伤斑纹，10％<损伤面积≤20％；

3级：叶片褪绿情况明显，叶片黄化，叶前缘水渍状褐化，脱水斑严重，20％<褐化面积≤50％；

4级：植株叶片褪色，变脆变薄，叶片卷曲，枯萎褐化严重，50％<褐化面积≤70％；

5级：叶片褪绿，叶前缘褐化严重，叶片软化萎缩，重量、面积缩减，褐化面积>70％。

根据上述冬瓜冷害分级建立冷害指数模型公式：

其中，S₀～S₅为冬瓜苗发生1～5级冷害的处理株数，N为总处理株数。

2.3.1.2冬瓜耐寒性分级标准：

极耐寒型品种：冷害指数≤10％；

耐寒型品种：10％＜冷害指数≤30％；

中间型品种：30％＜冷害指数≤70％。

冷敏型品种：70％＜冷害指数≤90％；

极冷敏型品种：冷害指数＞90％。

2.3.2正交实验各处理的冷寒指数分析

表1：正交实验各处理的冷寒指数

2.3.2.1在8℃条件下，苗龄、处理时间对品种耐寒性的影响

表2：8℃条件下，不同苗龄耐寒性差异分析

苗龄	平均冷害指数％	差异性
			子叶期	66.12	A
1片真叶期	65.33	A
			2片真叶期	74	A

表3：8℃条件下，不同处理天数耐寒性差异分析

表4：8℃条件下，不同品种的耐寒性差异分析

品种	平均冷害指数％	差异性
			B274	63.41	A
B281	73.56	A

由表1-4所示，在8℃条件下，随着处理时间的延长，冷害指数显著增加。但可以发现两个品种都严重受冻，冷害指数都很高，两者之间差异不显著，说明8℃不适合冬瓜耐寒鉴定实验。

2.3.2.2在12℃条件下，苗龄、处理时间对品种耐寒性的影响

表5：12℃条件下，不同苗龄耐寒性差异分析

苗龄	平均冷害指数％	差异性
			子叶期	22.00	A
1片真叶期	18.33	A
			2片真叶期	25.55	A

表6：12℃条件下，不同处理天数耐寒性差异分析

处理天数	平均冷害指数％	差异性
			2d	13.22	C
4d	22.45	B
			6d	30.22	A

表7：12℃条件下，不同品种的耐寒性差异分析

品种	平均冷害指数％	差异性
			B274	19.26	A
B281	24.67	A

由表5-7所示，在12℃条件下，尽管随着处理时间的延长，冷害指数显著增加。但可以发现两个品种受冻都不严重，冷害指数较低，两者之间差异不显著，说明12℃不适合冬瓜耐寒鉴定实验。

2.3.2.3在10℃条件下，苗龄、处理时间对品种耐寒性的影响

表8：10℃条件下，不同品种的耐寒性差异分析

品种	平均冷害指数％	差异性
			B274	41.33	B
B281	67.78	A

可见，在10℃条件下，两个品种的冷害指数存在显著差异，能较好地区分耐寒品种与冷敏感品种。说明10℃适合冬瓜耐寒鉴定实验。

表9：10℃条件下，不同苗龄耐寒性差异分析

苗龄	平均冷害指数％	差异性
			子叶期	52.33	A
1片真叶期	58.67	A
			2片真叶期	52.67	A

从表9中见，不同苗龄，其耐寒指数有差异。进一步分析，10℃时两品种在子叶期、1片真叶期、2片真叶期的冷害指数差分别为28.67、21.33、31.33，两品种冷害指数差越大，说明越容易区分两品种的耐寒性，因此，2片真叶期优于1片真叶期和子叶期。

表10：10℃条件下，不同处理天数耐寒性差异分析

处理天数	平均冷害指数％	差异性
			2d	38.67	B
4d	56.67	AB
			6d	68.33	A

从表10中可以发现不同的处理天数对冷害指数影响显著。进一步分析，如表11所示，10℃时两品种在处理2天、处理4天、处理6天的冷害指数差分别为26.67、29.33、23.33，两品种冷害指数差越大，说明越容易区分两品种的耐寒性，因此，处理4天优于处理2天和处理6天。

表11：10℃条件下，不同处理天数耐寒性差异分析

综上所述，2片真叶期低温10℃处理4天为冬瓜耐寒性最佳鉴定方法。

第二部分25份冬瓜核心种质耐寒性的鉴定

(一)试验材料

25份冬瓜核心种质由广东省蔬菜种质库存提供，来自3个国家、11个省份。

(二)试验方法

每份材料各100粒种子，分为均等两份，分别用于本发明的鉴定方法与自然低温鉴定。

用温水浸泡种子8小时后，捞出滤干明水，用湿润毛巾包裹放至30℃的恒温箱进行催芽，每天用自来水清洗一次，3天后出芽，分别播种至育苗盘(48孔)。按正常幼苗管理技术进行管理。

25天后幼苗长至2片真叶，把用于本发明的鉴定方法的材料放至人工气候室培养，光强为12 000lx，温度为10℃，空气湿度为60％。四天后调查各材料的冷害指数。

自然低温鉴定的材料放至露地，当气温高于10℃时，不盖薄膜，当气温低于10℃时，盖薄膜以免冬瓜幼苗被冻。当出现低温(10℃左右)时，每天调查一次冷害指数，连续调查1个月。

冬瓜冷害分级：

0级：叶片正常，翠绿色，叶缘光滑平整，无任何伤害；

1级：叶片仅有轻度褪绿，叶缘上有褐色长条状斑点，损伤面积<10％；

2级：叶片褪绿颜色变浅黄，但叶片未完全黄化，叶缘略微卷曲，叶周缘出现白灰色损伤斑纹，损伤面积<20％；

3级：叶片褪绿情况明显，叶片黄化，叶前缘水渍状褐化，脱水斑严重，30％<褐化面积<60％；

4级：植株叶片褪色，变脆变薄，叶片卷曲，枯萎褐化严重，50％<褐化面积<70％；

5级：叶前缘褐化严重，叶片软化萎缩，重量、面积缩减，褐化面积>70％。

根据上述冬瓜冷害分级建立冷害指数模型公式：

其中，S₀～S₅为冬瓜苗发生1～5级冷害的处理株数，N为总处理株数。

冬瓜耐寒性分级标准：

极耐寒型品种：冷害指数≤10％；

耐寒型品种：10％＜冷害指数≤30％；

中间型品种：30％＜冷害指数≤70％。

冷敏型品种：70％＜冷害指数≤90％；

极冷敏型品种：冷害指数＞90％。

(三)结果与分析

表12：试验材料耐寒性人工鉴定结果与自然低温鉴定结果对比

从表11中可见，本发明的鉴定方法与自然低温鉴定结果吻合，只有个别品种在冷害程度上有点差异，如B281，本发明的鉴定方法鉴定为极冷敏感型，而自然低温鉴定为冷敏感型，不过结果也较为接近。由此可见，本发明提供的鉴定方法是能有效地鉴定冬瓜的耐寒性能的。

Claims (3)

1.一种冬瓜耐寒性鉴定方法，其特征是，取苗龄为2片真叶期的冬瓜苗置于10℃下处理4天，观察出现冬瓜冷害的冬瓜株数，根据冬瓜冷害分级进行分级，然后计算冬瓜的冷害指数，再按照以下冬瓜耐寒性分级标准判断冬瓜耐寒性：

极耐寒型品种：冷害指数≤10％；

耐寒型品种：10％＜冷害指数≤30％；

中间型品种：30％＜冷害指数≤70％；

冷敏型品种：70％＜冷害指数≤90％；

极冷敏型品种：冷害指数＞90％。

2.根据权利要求1所述的冬瓜耐寒性鉴定方法，其特征是，所述冷害指数通过以下式一计算：

其中，S₀～S₅为冬瓜苗发生0～5级冷害的处理株数，N为总处理株数。

3.根据权利要求1所述的冬瓜耐寒性鉴定方法，其特征是，冬瓜冷害分级如下：

0级：叶片正常，翠绿色，叶缘光滑平整，无任何伤害；

1级：叶片仅有轻度褪绿，叶缘上有褐色散点状斑点，损伤面积≤10％；

2级：叶片褪绿颜色变浅黄,但叶片未完全黄化，叶缘略微卷曲，叶周缘出现白灰色损伤斑纹，10％<损伤面积≤20％；

3级：叶片褪绿情况明显，叶片黄化，叶前缘水渍状褐化，脱水斑严重，20％<褐化面积≤50％；

4级：植株叶片褪色，变脆变薄，叶片卷曲，枯萎褐化严重，50％<褐化面积≤70％；

5级：叶片褪绿，叶前缘褐化严重，叶片软化萎缩，重量、面积缩减，褐化面积>70％。