CN107177009A - 超声辅助酶法制备肝素钠工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了生物制药领域的一种超声辅助酶法制备肝素钠工艺,主要由蛋白酶水解蛋白质进行肝素钠的提取,其特征在于:在小肠粘膜处理阶段控制其含盐量为小肠粘膜质量的2-5%,并添加碱剂,调其pH值为9;在所述蛋白酶水解蛋白质提取肝素钠的过程中,同时辅助超声波。本发明主要是采用超声波的介入,用超声波作用于液体介质时除产生空化作用、热效应、并赋予液体分子动量外,还加速传质和传热的速率,对溶质的溶解度及溶解速度产生的影响,提高肝素钠的收率及弥补本发明盐度较低降低生产效率的缺陷。实现了高收率、高效且绿色环保,减少废水排放的生产方式。
Description
技术领域
本发明涉及生物制药领域的一种肝素钠的蛋白酶水解工艺,具体是一种超声辅助酶法制备肝素钠工艺。
背景技术
肝素钠是一种由动物结缔组织的肥大细胞产生的粘多糖 , 是一种天然抗凝血物质, 它在抗凝血 ,促进脂蛋白酶释放和补体溶细胞体系等方面具有活性 , 被广泛用于治疗血栓塞、暴发性流脑、败血症、肾炎、急性心肌梗塞、动脉硬化等疾病 , 还具有澄清血浆脂质, 降低胆固醇等作用。在机体内它与蛋白质结合成复合物存在于肥大细胞中, 可被蛋白 酶解离出来,因此,目前的动物小肠内的肝素钠一般都是采用蛋白酶水解工艺制作,但是, 由于简单的水解工艺制得的肝素钠速度慢、提取率低,该技术有待进一步地提升。
发明内容
本发明的目的是提供一种肝素钠的蛋白酶水解工艺,具体是一种提取率高、提 取速度快的肝素钠的蛋白酶水解工艺。
本发明是通过以下技术方案实现的:
一种超声辅助酶法制备肝素钠工艺,其特 征在于:主要由蛋白酶水解蛋白质进行肝素钠的提取,在小肠粘膜处理阶段控制其含盐量为小肠粘膜质量的 2-5%,并添加碱剂,调其 pH 值为 9 ;在所述蛋白酶水解蛋白质提取肝素钠的过程中,同时辅助超声波。
2.根据权利要求1 所述超声辅助酶法制备肝素钠工艺,其特征在于:超声波的波长在25Hz, 功率密度 0.4-1 W/cm2 的超声波,在酶解的首尾各介入一次次,每次处理0.5h。
本发明的优点在于:由于食盐可促进脂肪的分解 , 对蛋白质的分解具有抑制作用,因 此在肝素钠的提取上,不宜过量使用食盐。但是目前普遍存在提取肝素钠超量使用食盐的 现象,主要是因为食盐量的增加会加快肝素钠的提取速度,缺点是原料浪费大、废水污染严 重,由于没有找到合适的即能提高生产效率,又能环保、高效且提高收率的方法,因此,一直 被延续。
本发明主要是采用超声波的介入,用超声波作用于液体介质时除产生空化作用、热效应、并赋予液体分子动量外 , 还加速传质和传热的速率,对溶质的溶解度及溶解速度产生的影响,提高肝素钠的收率及弥补本发明盐度较低降低生产效率的缺陷。实现了高收率、高效且绿色环保,减少废水排放的生产方式。
具体实施方式
实施例 1
选取含盐度为 4 度的猪小肠粘膜液 500g,加入 NAOH,调其 pH 值为 9,搅拌升温至55℃, 保温 30 分钟后,按小肠粘膜:碱性蛋白酶重量比为 500 :0.1 加入碱性蛋白酶,保温 2 小时, 在加入碱性蛋白酶后,介入超声波,具体为:超声波的波长在25Hz,功率密度0.4-1 W/cm2 的超声波,在酶解的首尾各介入一次,每次处理 0.5h。酶解后是常规的树脂吸附、洗脱、醇淀、烘干得收率为 90%, 效价为 105U/mg 的肝素钠,且在该生产中,由于减少了 NaCl 的用量, 其废水量每处理 1T 小肠减少 200 g,实现了高效、高收率、环保的生产目的。
实施例 2
在 1000 升的反应釜中抽含盐度为 3.5 度的 200 付猪小肠粘膜和水,猪小肠和水的重量 比为 3:1,加入 NAOH,调其 pH 值为 9,搅拌升温至 55℃,保温 30 分钟后,按小肠粘膜:碱性蛋 白酶重量比为 500g :0.1 加入碱性蛋白酶,保温 2 小时,在加入碱性蛋白酶后,介入超声波, 具体为:超声波的波长在25Hz,功率密度0.5 W/cm2 的超声波,在酶解的首尾各介入一次,每 次处理 0.5h。酶解后是常规的树脂吸附、洗脱、醇淀、烘干得收率为 91%、效价为 106U/mg 的 肝素钠,且在该生产中,由于减少了NaCl 的用量,其废水量每处理1T 小肠减少300g,实现了 高效、高收率、环保的生产目的。
Claims (2)
1.一种超声辅助酶法制备肝素钠工艺,其特 征在于:主要由蛋白酶水解蛋白质进行肝素钠的提取,在小肠粘膜处理阶段控制其含盐量为小肠粘膜质量的 2-5%,并添加碱剂,调其 pH 值为 9 ;在所述蛋白酶水解蛋白质提取肝素钠的过程中,同时辅助超声波。
2.根据权利要求1 所述超声辅助酶法制备肝素钠工艺,其特征在于:超声波的波长在25Hz, 功率密度 0.4-1 W/cm2 的超声波,在酶解的首尾各介入一次次,每次处理 0.5h。
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