CN107109465A - 初期糖尿病的诊断和治疗 - Google Patents

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Abstract

描述了通过生成个体的磷酸酶时间分布曲线来预测初期糖尿病、代谢紊乱或代谢综合征的方法，通过在单个时间点或在多个时间点测量粪便中的磷酸酶含量而产生该磷酸酶时间分布曲线。磷酸酶时间分布曲线还可用于诊断其他初期或显性疾病(如代谢综合征、冠心病、非酒精性脂肪肝疾病、癌症)、其他慢性或急性疾病或感染性疾病和确定这些疾病的预后。还描述了用于初期糖尿病和其他初期或显性疾病中的治疗用途的磷酸酶的特定剂量。

Description

初期糖尿病的诊断和治疗
背景技术
2型糖尿病(T2DM)的特征在于高血糖，这是一个主要的全球健康问题，影响着近5.3％的世界人口，在医疗保健成本、发病率和死亡率方面具有毁灭性的后果(美国糖尿病协会，糖尿病的诊断和分类，糖尿病护理，2014年1月；37(增刊)1：S81-90；Abdullah等人，国际内分泌学(Int J Endocrinol)，2014：593982(American DiabetesAssociation.Diagnosis and classification of diabetes mellitus.DiabetesCare.2014Jan；37Suppl 1:S81-90；Abdullah et al.Int J Endocrinol.2014:593982)；国际糖尿病联合会，国际糖尿病联盟(IDF)糖尿病地图，2012，http://www.idf.org/diabetesatlas。http://www.idf.org/diabetesatlas/update-2014；http://www.idf.org/diabetesatlas；http://www.idf.org/diabetesatlas/update-2014；美国糖尿病协会，2012年美国糖尿病的经济成本，糖尿病护理2013；36：1033-1046(AmericanDiabetes Association.Economic costs of diabetes in the U.S.in 2012.DiabetesCare2013；36:1033-104))。
T2DM通过测量血糖水平进行诊断，空腹血糖(FPG)水平大于7.0毫摩尔/升(mmol/l)(126毫克/分升(mg/dl))被诊断为T2DM。高血糖与已形成的T2DM或T2DM发展的终末期相关。因此，测量FPG不能提前很早(以年计)预测一个人是否患有初期糖尿病，这意味着即使目前的FPG值正常，该人将来会发展为糖尿病。因此，需要预测初期糖尿病和/或其他疾病的诊断方案。此外，这些初期或显性疾病的治疗干预以及确定疾病的预后至关重要。
发明内容
根据本公开，与对照非糖尿病健康受试者相比，T2DM患者的粪便中的刷状缘酶肠碱性磷酸酶(IAP)(brush-border enzyme intestinal alkaline phosphatase)的量较少。本文公开了一种用于通过生成人类和其他动物(如牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠(rats)、小鼠(mice)、鸡、火鸡(turkeys)等)的粪便IAP水平的时间分布曲线(temporal profile)，来诊断初期糖尿病和其他代谢紊乱(例如心血管疾病(cardiovascular diseases)(冠心病(coronary heart disease))、脑血管疾病(cerebrovascular disease)(中风(stroke))、外周血管疾病(peripheral vasculardisease)、非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease)等)和代谢综合征(例如，肥胖症、高血糖(hyperglycemia)、胰岛素抵抗(insulin resistance)、高胰岛素血症(hyperinsulinemia)、血脂异常(dyslipidemia)、高胆固醇血症(hypercholesterolemia)、高甘油三酯血症(hypertriglyceridemia)、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压、脂肪肝等)的方案。IAP的时间分布曲线由在单个时间点或多个时间点确定的IAP含量组成。低IAP水平或从健康受试者中的以前高水平的IAP的持续丧失表明初期糖尿病、其他代谢紊乱或代谢综合征。还公开了使用IAP的时间分布曲线来诊断或预后代谢疾病、急性或慢性疾病或感染性疾病，包括但不限于心肌梗死、癌症、肺结核、沙门氏菌病、艾滋病、肝炎、急性或慢性肾脏损伤。还公开了正常健康受试者的个人粪便IAP分布曲线可以用作参考IAP分布曲线以供将来使用。
还公开了作为口服补充剂的IAP的特定剂量可以施用于哺乳动物以降低初期糖尿病、其他代谢紊乱或代谢综合征的风险。粪便中的IAP水平因个体而有极大差异。在对照健康人群中，低于平均IAP水平的个体(使用本文公开的实验条件约为65U/gm粪便)可以立即被提供IAP补充，而具有较高水平IAP的个体可以进一步研究，允许用于生成包含多个时间点的IAP水平的时间分布曲线。还公开了IAP可以施用于哺乳动物用于治疗代谢性疾病，急性或慢性疾病或感染性疾病，包括但不限于心肌梗死，癌症，结核病，沙门氏菌病，艾滋病，肝炎，急性或慢性肾损伤。
在说明性实施例中，用于诊断或确定初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的预后的方法包括测量哺乳动物粪便中磷酸酶的含量，并将该含量与正常含量范围进行比较。
在另一说明性实施例中，方法还包括通过在单个时间点或多个时间点测量磷酸酶的含量来生成时间分布曲线。
在另一说明性实施例中，磷酸酶是肠碱性磷酸酶(intestinal alkalinephosphatase)、胎盘碱性磷酸酶(placental alkaline phosphatase)、组织非特异性碱性磷酸酶(tissue nonspecific alkaline phosphatase)(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶(germ cell alkaline phosphatase)、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶(neutrophilalkaline phosphatase)、哺乳动物碱性磷酸酶、细菌碱性磷酸酶、真菌碱性磷酸酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽。
在另一说明性实施例中，除了测量粪便样品中磷酸酶的含量之外，还可以分析唾液、尿液、血液、血浆、血清、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液或体腔液的样品。
在另一说明性实施例中，初期糖尿病或糖尿病是2型糖尿病、妊娠糖尿病、尿崩症或1型糖尿病。
在另一说明性实施例中，初期代谢疾病或代谢疾病是心血管疾病、冠心病、脑血管疾病、中风、外周血管疾病、非酒精性脂肪肝疾病、视网膜病变、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、关节炎、湿疹或牛皮癣。
在另一说明性实施例中，初期代谢综合征或代谢综合征是肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压或脂肪肝。
在一个说明性的实施例中，用于降低初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的风险或治疗其的方法包括向有需要的哺乳动物施用有效量的磷酸酶。
在另一说明性实施例中，磷酸酶是肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、碱性磷酸酶、哺乳动物碱性磷酸酶、细菌碱性磷酸酶、真菌碱性磷酸酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽。
在另一说明性实施例中，磷酸酶是天然的或重组同种型的肠碱性磷酸酶。
在另一说明性实施例中，磷酸酶是突变体同种型的肠碱性磷酸酶。
在另一说明性实施例中，磷酸酶是天然人体肠碱性磷酸酶的肠碱性磷酸酶。
在另一说明性实施例中，磷酸酶是重组人体肠碱性磷酸酶的肠碱性磷酸酶。
在另一说明性实施例中，磷酸酶是天然小牛或牛肠碱性磷酸酶的肠碱性磷酸酶。
在另一说明性实施例中，磷酸酶是重组小牛或牛肠碱性磷酸酶的肠碱性磷酸酶。
在另一说明性实施例中，磷酸酶通过口服、局部、皮下、皮内、肌肉内、静脉内、阴道或直肠给药。
在另一说明性实施例中，磷酸酶通过口服、鼻、皮肤、阴道或直肠喷雾给药。
在另一说明性实施例中，磷酸酶在膳食之前、期间或之后给药。
在另一说明性实施例中，以有效实现预防(即降低风险)、姑息治疗或治愈终点的治疗目标的量进行磷酸酶给药。
在进一步的说明性实施例中，以有效维持粪便中肠碱性磷酸酶的稳态水平的量进行磷酸酶给药。
在另一说明性实施例中，以有效维持使用本文所述的碱性磷酸酶测定法测量的每克粪便中1至650单位之间肠碱性磷酸酶的稳态水平的量，优选以有效维持使用本文所述的碱性磷酸酶测定法测量的每克粪便中65单位肠碱性磷酸酶的稳态水平的量，进行磷酸酶给药
在另一说明性实施例中，磷酸酶的量为每剂量1至6,500单位的磷酸酶。
在另一说明性实施例中，磷酸酶被配制在片剂、凝胶、胶囊、液体或半固体口香糖中。
在另一说明性实施例中，磷酸酶被配制在牛奶、食品或饮料中。
在另一说明性实施例中，磷酸酶被配制以抗糖尿病、抗高血压、抗胆固醇、抗抑郁或抗生素组成的组中的其他药物。
在另一说明性实施例中，磷酸酶被配制以包括但不限于丁酸钠、甲状腺激素、姜黄素、ω-3脂肪酸或其组合的IAP上调节剂(up-regulator)组成的组中的其他药物。
在另一说明性实施例中，磷酸酶被配制以包括但不限于蛋白质或肽、优选β-内酰胺酶的抗菌群失调因子(anti-dysbiosis)组成的组中的其他药物。
在另一说明性实施例中，磷酸酶被配制以益生菌组成的组中的其它药物。
在另一说明性实施例中，磷酸酶是高度纯化、部分纯化或未纯化的肠碱性磷酸酶。
在另一说明性实施例中，磷酸酶被给药于受试者，其中受试者是人。
在另一说明性实施例中，磷酸酶被给药于受试者，其中受试者是奶牛、猪、绵羊、狗、猫、马、猴、牛、鸡、火鸡、大鼠、小鼠、鸟或哺乳动物。
在说明性实施例中，用于诊断或确定慢性疾病、急性疾病、感染性疾病、紊乱(disorder)或综合征的预后的方法包括测量哺乳动物粪便中磷酸酶的含量并将该含量与正常含量范围进行比较。
在进一步说明性的实施例中，用于降低慢性疾病、急性疾病、感染性疾病、紊乱或综合征的风险或用于治疗慢性疾病、急性疾病、紊乱或综合征的方法包括向有需要的哺乳动物给药有效量的磷酸酶。
在另一说明性实施例中，慢性疾病是痤疮、艾滋病(AIDS)、强直性脊柱炎、哮喘、艾迪生氏病(Addison’s disease)、过敏性鼻炎、阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化(ALS，LouGehrig’s disease)、再生障碍性贫血、关节炎、动脉粥样硬化、注意力缺陷多动障碍(ADHD、ADD)、自闭症谱系障碍(Autism Spectrum Disorder)、良性前列腺肥大、双相情感障碍、支气管扩张症、癌症、心力衰竭(Cardiac Failure)、心肌病、慢性酒精中毒、慢性贫血、慢性肝炎(Chronic hepatitis)、慢性阿米巴病(Chronic Amebiasis)、慢性阻塞性肺病(Chronicobstructive pulmonary disorder)、慢性胃炎、慢性食管炎、慢性口腔疾病、慢性中毒、慢性肾脏疾病、胶原性疾病(Collagen diseases)、克罗恩氏病(Crohn’s disease)、库兴氏病(Cushing’s diseases)、囊性纤维化、痴呆、皮肌炎、抑郁症、节律障碍、饮食紊乱(神经性厌食症、神经性贪食、暴食)、湿疹、子宫内膜异位症、癫痫、纤维化肺泡炎、胃食管反流性疾病(GERD)、青光眼、痛风、格雷夫斯病(Graves Disease)、血友病、高脂血症、垂体机能亢进症(Hyperpituitarism)，垂体功能减退症(Hypopituitarism)、垂体腺瘤(HypophysealAdenoma)、甲状腺机能减退症(Hypothyroidism)、特发性血小板减少性紫癜(IdiopathicThrombocytopenic Purpura)、更年期、偏头痛、运动神经元疾病、多发性硬化症、肌营养不良症、重症肌无力、肌病、神经病、肥胖症、强迫症、骨关节炎、骨质疏松症、麻痹症(截瘫、四肢麻痹症)、帕金森病、佩吉特氏病(Paget’s disease)、结节性多动脉炎(PolyarteritisNodosa)、多囊性卵巢疾病、牛皮癣、银屑病关节炎、肺间质纤维化、反射性交感神经营养不良(RSD)综合征、类风湿关节炎、硬皮病、精神分裂症、干燥综合征、吸烟和烟草相关疾病(Smoking and Tobacco-related Diseases)、系统性红斑狼疮、三叉神经痛、结核病、溃疡性结肠炎或尿失禁。
在另一说明性实施例中，急性疾病是急性酒精中毒、急性阿米巴病、急性听觉疾病、急性脑疾病、急性癌症、急性心血管疾病、急性牙科疾病、急性皮肤病、急性食管疾病、急性胃肠疾病、急性肾脏疾病、急性肝病、急性肌肉疾病、急性眼部疾病、急性中毒、急性口腔疾病、急性骨关节炎、急性咽部疾病、急性前列腺疾病、急性物理性损伤(创伤)、急性腹膜疾病、急性呼吸道疾病或急性泌尿生殖系疾病。
在另一说明性实施例中，感染性疾病是由炭疽芽孢杆菌、百日咳博德特氏菌、布氏疏螺旋体、流产布鲁氏菌(Brucella abortus)、犬布氏杆菌(Brucella canis)、羊布鲁氏菌(Brucella melitensis)、猪布鲁氏菌(Brucella suis)、空肠弯曲杆菌、肺炎衣原体、沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体、肉毒杆菌、艰难梭菌、产气荚膜梭菌、破伤风杆菌、白喉棒状杆菌、痢疾阿米巴、粪链球菌、粪肠球菌、大肠杆菌、肠毒素大肠杆菌、肠致病性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌0157：H7、土拉弗朗西斯菌、真菌(白色念珠菌)、流行性感冒嗜血杆菌(Haemophilus influenza)、幽门螺杆菌、利什曼原虫(黑热病(Kala Azar))、嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)、问号钩端螺旋体(Leptospira interrogans)、问号钩端螺旋体、单核细胞增生李斯特氏菌、麻风分枝杆菌、结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)、肺炎支原体、淋病奈瑟氏球菌、脑膜炎奈瑟氏菌、寄生虫(原生动物、寄生蠕虫、皮外寄生虫)、疟原虫(疟疾)、铜绿假单胞菌、立克次体(Rickettsia rickettsia)、沙门氏菌亚种(Salmonella enterica subsp)、肠道沙门菌(Enterica)、鼠伤寒沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌、苍白密螺旋体、霍乱弧菌或鼠疫耶尔森氏菌引起的。
在另一说明性实施例中，感染性疾病是由腺病毒、柯萨奇病毒、登革热病毒、埃博拉病毒、EB病毒(Epstein-Barr virus)、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、流感病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、人乳头瘤病毒、人类副流感病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病病毒、人类呼吸道合胞病毒、风疹病毒、严重急性呼吸器官综合征(SARS)冠状病毒、水痘带状疱疹病毒或黄热病毒引起的。
在一个说明性实施例中，存在用于确定粪便中磷酸酶含量的试剂盒，其中试剂盒包含用于测量限定量的粪便的工具、粪便稀释缓冲液或水、磷酸酶底物和磷酸酶测定缓冲液。用于测量限定量的粪便的工具可以是例如具有预定体积的汤匙(spoon)或勺(scoop)。磷酸酶的含量使用分光光度计、生化分析仪、高效液相色谱(HPLC)机、色度计、光度计或者机械、生化、电气或电子设备来测量。
在一个说明性实施例中，存在用于确定粪便中磷酸酶含量的试剂盒，其中试剂盒包含用于测量限定量的粪便的工具(例如具有预定体积的汤匙或勺)、磷酸酶底物和磷酸酶测定缓冲液。粪便样品被溶解在粪便稀释缓冲液或水中。然后将过滤或未过滤的粪便悬浮液与磷酸酶底物混合，等待指定的时间段以允许颜色显现，将显现的颜色与标准照片进行比较并定量生物样品中的碱性磷酸酶的量。作为通过将显现的颜色与标准照片进行比较来定量碱性磷酸酶的量的替代方法，可以通过计数照片的像素来进行定量。
在另一说明性实施例中，磷酸酶是肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、碱性磷酸酶、哺乳动物碱性磷酸酶、细菌碱性磷酸酶、真菌碱性磷酸酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽。
在另一说明性实施例中，用于磷酸酶的底物以液体或固体形式提供。
在另一说明性实施例中，用于磷酸酶的底物附着到包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、珠或载玻片的固体介质上。
在另一说明性实施例中，存在用于定量粪便中的肠碱性磷酸酶的酶联免疫吸附测定(ELISA)系统。
在另一说明性实施例中，存在用于定量粪便中的肠碱性磷酸酶的基于CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺[1,2-二氧杂环丁烷-3,2’(5’-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)的发光磷酸酶测定系统(CDP-star substrate(2-chloro-5-(4-methoxyspiro{1,2-dioxetane-3,2'(5'-chloro)-tricyclo[3.3.1.13.7]decan}-4-yl)-l-phenyl phosphate disodium salt)-based luminescent phosphatase assaysystem)。
在另一说明性实施例中，存在用于定量粪便中的肠碱性磷酸酶的基于孔雀石绿的磷酸盐检测系统。
在另一说明性实施例中，用于诊断或确定初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的预后的方法包括提供含有磷酸酶底物的固体或液体介质，将生物样品(优选粪便样品)与固体或液体介质接触，等待指定的时间段以允许颜色显现，将显现的颜色与标准照片进行比较并定量生物样品中的碱性磷酸酶的量。作为通过将显现的颜色与标准照片进行比较来定量碱性磷酸酶的量的替代方法，可以通过计数照片的像素来进行定量。
在另一说明性实施例中，用于诊断或确定初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的预后的方法包括提供用于附着生物样品(优选粪便样品)的固体介质，将磷酸酶底物与固体介质接触，等待指定的时间段以允许颜色显现，比较显现的颜色和标准照片，并定量生物样品中的碱性磷酸酶的量。作为通过将显现的颜色与标准照片进行比较来定量碱性磷酸酶的量的替代方法，可以通过计数照片的像素来进行定量。
在另一说明性实施例中，用于诊断或确定初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的预后的方法包括将磷酸酶底物与生物样品(优选粪便样品)混合，等待指定的时间段以允许颜色显现，将显现的颜色与标准照片进行比较并定量生物样品中的碱性磷酸酶的量。作为通过将显现的颜色与标准照片进行比较来定量碱性磷酸酶的量的替代方法，可以通过计数照片的像素来进行定量。
在另一说明性实施例中，预期IAP的缺乏可能与血清内毒素(脂多糖(LPS)、淋巴毒素(LTA)等)、促炎核苷酸(proinflammatory nucleotide)(尿苷二磷酸(UDP)、腺苷三磷酸(ATP)等)、细胞因子(白细胞介素IL-1至IL-36；肿瘤坏死因子TNF-α、β和γ；干扰素INF-α、β和γ；转化生长因子TGF-β；IFN-g(干扰素-g)诱导因子(IGIF)等)、趋化因子(CXCL-8、CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCL11、CXCL10、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)等)和细胞因子受体的拮抗剂的增加相关。此外，预期IAP的缺乏也可能与抗炎因子(如白细胞介素受体、肿瘤坏死因子(TNF)和干扰素(INF)以及一些具有双重促发炎和消炎功能的白细胞介素(IL-4、IL-6、IL-10、IL-11、IL-13等)的减少相关。
附图说明
图1是示出了用于确定粪便中肠碱性磷酸酶(IAP)含量的步骤的流程图；
图2A-C是示出了粪便碱性磷酸酶活性主要是由肠碱性磷酸酶(IAP)引起的图；
图3A-C是示出了2型糖尿病(T2DM)患者在其粪便中具有低水平的肠碱性磷酸酶(IAP)的图；
图4是示出了在所有百分位点的T2DM患者中粪便IAP水平低的图；
图5是示出了高水平的粪便IAP对T2DM保护作用的图，其与体重指数(BMI)无关。
具体实施方式
2型糖尿病：2型糖尿病(T2DM)的特征在于由胰岛素分泌、胰岛素作用或两者的缺陷导致的高血糖。具有大于7.0mmol/l(126mg/dl)的空腹血糖(FPG)水平或者在通过摄取75gm葡萄糖进行并以特定的时间间隔(min)测量血糖水平的口服葡萄糖耐量试验(OGTT)期间大于11.1mmol/l(200mg/dl)的血糖水平被诊断为T2DM。T2DM造成对不同器官(特别是眼睛、肾脏、神经、心脏和血管)的长期的损害、功能障碍和衰竭(美国糖尿病协会，糖尿病的诊断和分类，糖尿病护理，2014年1月；37(增刊)1：S81-90)。这是一个全球性的重大问题，2014年全球影响3.87亿人，花费6120亿美元(Abdullah等人，Int J Endocrinol(国际内分泌杂志).2014：593982；国际糖尿病联合会，IDF糖尿病地图，2012，http：//www.idf.org/diabetesatlas；http://www.idf.org/diabetesatlas/update-2014)。在美国，2013年大约有2440万人(9.2％人口)患有糖尿病，花费3060亿美元(http://www.idf.org/diabetesatlas；http://www.idf.org/diabetesatlas/update-2014；Abdullah等人，Int JEndocrinol.2014：593982)。美国糖尿病协会估计，2012年诊断糖尿病的总成本为2450亿美元，其中包括1760亿美元的直接医疗费用和690亿美元的降低的生产力(美国糖尿病协会，2012年美国糖尿病的经济成本。糖尿病护理2013；36：1033-1046)。
从病因学角度来看，各种因素被认为参与T2DM的发展，如自身免疫力、代谢综合征、饮食、肥胖症、感染、种族、遗传多态性和易感性、药物、压力、久坐不动的生活方式、怀孕等(Kahn等人，柳叶刀(Lancet)2014；383(9922)：1068-83；Stumvoll等人，Lancet 2005；365(9467)：1333-46；Pietropaolo等人，糖尿病(Diabetes)2007；56(5)：1189-97；Bakker等人，欧洲内分泌学杂志(Eur J Endocrinol)2013；169(5)：R99-R114；Lin和Sun.J Endocrinol(内分泌学杂志)2009；204(1)：1-11；Leahy.Arm Med Res(医学研究)2005；36(3)：197-209；DeFronzo的Med Clin North Am(北美内科临床杂志)2004；88(4)：787-835；Holt的Br JPsychiatry Suppl(精神病学增刊)2004年4月；47：S55-63)。
最近，由血液(代谢性内毒素血症)中内毒素脂多糖(LPS)的持续增加的水平引起的低度系统炎症已经被认为是最终导致T2DM的代谢综合征的病因学因素(Cam等人，Diabetes(糖尿病)2007；56(7)：1761-72)。我们已经证明，缺少刷状缘酶肠碱性磷酸酶(IAP)的小鼠发展为T2DM(Kaliannan等人，美国国家科学院研究期刊(Proc Natl Acad SciUSA)2013；110(17)：7003-8)。我们还证明，IAP能使LPS解毒并降低代谢性内毒素血症，并且口服IAP补充剂不仅可以预防，而且可以治愈野生型小鼠T2DM中高脂肪饮食诱导的代谢综合征和T2DM(Kaliannan等人Proc Natl Acad Sci USA(美国科学院院刊)2013；110(17)：7003-8)。我们假设肠腔的内低水平的IAP可能与人类的T2DM有关，因此，我们决定确定糖尿病和健康非糖尿病人群粪便中的IAP水平。在本发明中，我们报告说，与健康的非糖尿病人群相比，糖尿病患者的粪便中的IAP量实际上较少。基于这一观察，我们建议生成在粪便中IAP水平的个人时间分布曲线，并且如果健康人的分布曲线表明IAP水平是低的和/或快速降低，那么我们可以预测该人最可能患有初期糖尿病。我们预期粪便中IAP水平的个人时间分布曲线对于诊断、治疗和评估任何疾病的预后将是非常有价值的。
目前患有初期糖尿病的患者的FPG值在正常范围内，但存在基于低含量磷酸酶或随时间持续下降的磷酸酶含量以及其他已知危险因素发生糖尿病的风险。
代谢综合征：代谢综合征由一组相关疾病组成，包括肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常(脂质异常)、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压和脂肪肝(Kaliannan等人，Proc Natl AcadSci USA 2013；110(17)：7003-8；Grundy等人，血液循环(Circulation)2004年1月27日；109(3)：433-8；Hotamisligil，自然(Nature)444(7121)：860-867)。“显性”代谢综合征被定义为包含肥胖症(体重指数(BMI)>30.0千克/平方米(kg/m2))、高血糖(FPG>5.5mmol/l)、高血压(收缩压>130毫米汞柱(mmHg)或舒张压>85mnHg)、高甘油三酯血症(>150mg/dl)和低水平高密度脂蛋白(HDL)(男性<40mg/dl或女性<50mg/dl)的5项标准中至少3项共同存在(HuangPL.代谢综合征的综合定义，Dis Model Mech(疾病模型与诊断)2009；2(5-6)：231-7)。国际糖尿病联合会估计，世界人口中约有25％具有代谢综合征(Kaur.的Cardiol Res Pract(心脏病学研究与实践)2014；2014：943162；http://www.idf.org/metabolic-syndrome)。约有40％的美国人患有该综合征(Kaliannand等人，Proc Natl Acad Sci USA 2013；110(17)：7003-8；Ford.糖尿病护理2005 11月；28(11)：2745-9)。代谢综合征导致T2DM、心血管疾病(冠心病)、脑血管病(中风)、非酒精性脂肪性肝病等代谢疾病。代谢综合征已经成为美国的一种流行病，在医疗支出、发病率和死亡率方面具有破坏性后果(Kaliannan等人，ProcNatl Acad Sci USA 2013；110(17)：7003-8；Malik等人，Circulation(循环).2004年9月7日；110(10)：1245-50)。
代谢综合征的发病机制了解甚少；然而，Cam等人最近的工作(Diabete2007；56：1761-1772)认为“代谢性内毒素血症”对代谢综合征的发展起着至关重要的作用。内毒素(也称为脂多糖(LPS))是革兰氏阴性细菌(Gram-negative bacteria)的细胞壁组分。代谢性内毒素血症定义为与正常水平相比血液循环中二至三倍内毒素水平的持续增加(Cam等人Diabetes 2007；56：1761-1772；Kaliannan等人，Proc Natl Acad Sci USA2013；110(17)：7003-8)。代谢性内毒素血症引起低度系统性炎症，如白细胞介素(IL)-1、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的血清水平升高所证明的(Cani等人，Diabetes 2007；56：1761-1772；Kaliannan等人，Proc Natl Acad Sci USA，2013，110(17)：7003-8)。另一方面，慢性炎症不利地影响胰腺β细胞(Hohmeier等人，Int J Obes Relat Metab Disord(肥胖和相关代谢紊乱期刊)27(Suppl 3)：S12-S16)、肝细胞(Gieling等人，美国生理学杂志——胃肠和肝脏生理(Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol)296(6)：G1324-G1331)和血管内皮细胞(Hansson，新英格兰医学杂志(N Engl J Med)352(16)：1685-1695)的功能，并且认识到这些细胞的功能障碍有助于代谢综合征。
抗生素相关性菌群失调有时会导致艰难梭菌(Clostridium difficile)感染以及代谢综合征(Alam等人，Ann Surg.(外科学年鉴)2014年4月；259(4)：715-22；Kaliannan等人，Proc Natl Acad Sci USA2013；110(17)：7003-8；Parekh等人，Clin TranslGastroenterol.(临床和转化胃肠病学)2015年6月18日；6：e91)。已经表明β-内酰胺酶可以预防与少数特异性抗生素相关的菌群失调(dysbiosis)(Goldberg等人，Am J Health SystPharm.(美国卫生系统药学杂志)2015年6月15日；72(12)：1007-12)。
如上所述，我们已经证明，IAP基因敲除小鼠产生最终导致T2DM的代谢综合征。我们还证明口服IAP补充剂可以预防和治疗高脂肪饮食诱导的代谢综合征。
具有初期代谢综合征的人目前对于葡萄糖、胰岛素、胆固醇、脂质、血压、肝脏脂肪、BMI等具有正常或异常的值，但是基于低含量磷酸酶或随着时间以及其他已知的危险因素而持续下降的磷酸酶含量而具有发生代谢综合征的风险。
具有初期代谢综合征的人还包括至少具有如上定义的“显性”代谢综合征的一个标准的具有前代谢综合征的人。
具有初期代谢疾病的人目前具有不同器官(例如肝、肺、肾、胰腺、脑、肌肉、肾上腺、心脏、皮肤等)的正常或异常的代谢功能，但是基于低含量磷酸酶或随着时间以及其他已知的危险因素而持续下降的磷酸酶含量而具有发生代谢疾病的风险。
肠碱性磷酸酶：肠碱性磷酸酶(IAP)是一种膜结合的糖蛋白(glycoprotein)，其仅在近端小肠的绒毛相关肠上皮细胞中表达，因此被认为是肠上皮细胞分化标记(Hodin等人，Am J Physiol.K 1995年8月；269(2Pt 1)：C385-91；Eliakim等人，生化生物物理学报(Biochim Biophys Acta)1991年1月10日；1091(1)：1-8)。顾名思义，IAP在高pH下最佳地起作用，并且它水解单磷酸酯，表明其在脂肪和磷酸盐代谢中的重要作用(Malo等人，Am JPhysiol Gastrointest Liver Physiol.2006年4月；290(4)：G737-46及其中的参考文献)。从肠上皮细胞中，酶双向分泌到肠腔以及体循环中(Eliakim等人，Biochim BiophysActa.1991年1月10日；1091(1)：1-8)。肠腔内的IAP从近端小肠向下行进到远端大肠，然后通过粪便排出(Malo等人，Gut(内脏)2010；59：1476-1484)。IAP在物种之间是严格保守的(Goldstein等人，Proc Natl Acad Sci U S A.1980年5月；77(5)：2857-60)，表明了IAP的基本生理作用。存在碱性磷酸酶(AP)的各种同功酶，它们包括IAP、胎盘AP、组织非特异性(肝/骨/肾/嗜中性粒细胞)AP和生殖细胞AP。这些各种AP酶具有显著的结构同源性和功能相似性(Kaliannan等人，Proc Natl Acad Sci USA2013；110(17)：7003-8；Goldstein等人，Proc Natl Acad Sci US A.1980年5月；77(5)：2857-60)。IAP蛋白是表面活性剂样颗粒(SLP)、与脂肪吸收过程相关并从肠上皮细胞的顶端表面分泌的单层分泌膜的组分(Malo等人，Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol.2006年4月；290(4)：G737-46；Mahmood等人，Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol.2003年8月；285(2)：G433-41)。
在生理上，IAP关于其在腔细菌环境中的存在发挥两个非常重要的功能：一是保持肠道微生物群体的正常体内平衡，二是对细菌毒素进行解毒。我们已经证明，与其野生型同窝仔鼠相比，IAP基因敲除小鼠的细菌数量减少(Malo等人，Gut 2010；59：1476-1484)，并且IAP通过减少对细菌生长具有毒性作用的肠内核苷酸三磷酸的含量来促进肠细菌生长(Malo等人，Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol.2014年5月15日；306(10)：G826-38)。我们和其他人已经证明，IAP解毒各种细菌毒素，如脂多糖(LPS)、胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸DNA(CpG DNA)、鞭毛蛋白(flagellin)和尿苷二磷酸(UDP)，并且IAP可能通过去磷酸化(磷酸水解)破坏这些目标(Poelstra等人，美国专利与商标局(USPTO)专利号6，290，952，2001年9月；Bentala等人，Shock(休克)，2002年12月；18(6)：561-6；Chen等人，Am JPhysiol Gastrointest Liver Physiol.2010年8月；299(2)：G467-75；莫斯等人，Am JPhysiol Gastrointest Liver Physiol.2013 3月15日；304(6)：G597-604；马洛等人，Am JPhysiol Gastrointest Liver Physiol.2014年5月15日；306(10)：G826-38)。最近，使用IAP缺陷(IAP基因敲除)的小鼠Narisawa等人(Mol Cell Biol.(分子细胞生物学)2003年11月；23(21)：7525-30)表明IAP限制脂肪吸收，并且当喂食高脂肪饮食时，IAP基因敲除小鼠变得肥胖。
在药理上，IAP的各种治疗用途已经在不同的动物模型以及人类中进行了描述。在小鼠(mouse)模型中，我们已经证明IAP口服补充剂可预防对肠内病原菌(entericpathogens)(例如鼠伤寒沙门氏菌和艰难梭菌)的抗生素诱导的易感性(Malo等人，Gut.2010；59：1476-1484；Alam等人，Ann Surg.2014年4月；259(4)：715-22)。我们已经证明口服IAP补充剂不仅可以预防而且还可以治愈小鼠中高脂肪饮食诱导的代谢综合征(Kaliannan等人，Proc Natl Acad Sci USA 2013；110(17)：7003-8)。Kiss最近在USPTO专利申请中声称使用IAP来修正的胰岛素抵抗、高胰岛素血症和血脂异常(Kiss，USPTO专利申请号：US 2013/0251701Al，2013年9月26日)。Kiss以前也声称使用IAP来治疗肥胖症、糖尿病和癌症(USPTO专利号7,858,085；8,603,464和7,943,606)。
Lukas等人证明IAP治疗人体溃疡性结肠炎的有效性(Lucas等人，Inflamm BowelDis.2010年7月；16(7)：1180-6)。在小鼠模型中，我们还证明IAP对治疗慢性结肠炎具有有益作用(Ramasamy等人，Intlamm Bowel Dis.(炎症性肠病)2011年2月；17(2)：532-42)。Whitehouse等人报道了肠碱性磷酸酶在坏死性小肠结肠炎中的保护作用(Whitehouse等人，外科研究杂志(J Surg Res)2010年9月；163(1)：79-85)。Van Veen等人证明牛肠碱性磷酸酶减弱小鼠继发性腹膜炎的炎症反应(van Veen等人，传染与免疫(Infect Immun)2005年7月；73(7)：4309-14)。我们已经证明使用IAP进行局部腹膜灌洗(peritonealirrigation)可以预防小鼠腹膜炎(Ebrahimi等人，J Gastrointest Surg.(胃肠外科杂志)2011年5月；15(5)：860-9)。
研究方法
参与者：使用病例对照研究来评估糖尿病患者和对照非糖尿病健康人群的粪便中IAP含量的差异。年龄在30-70岁(yr.)的参与者通过当地政要、医院、诊所和医生办公室的广告，从孟加拉国达卡的郊区社区招募。根据初步数据(未发表)，计算每组的样本量，以达到80％以上的统计学功效(连续端点(continuous endpoint)，a＝0.05)。该研究包括202例相同种族的糖尿病病例(63名男性和139名女性)和445名健康对照者(114名男性和331名女性)。这项研究包括的女性比男性多，因为女性参与者的可采性更高。T2DM患者在招募前至少6个月由医生诊断，并且服用口服抗高血糖药和/或胰岛素药物。新诊断的高血糖患者(FPG>7.0mmol/l)也包括在糖尿病患者组中(见下文)。所有参与者都是无限制饮食。任何患有急性疾病的人都被排除在研究之外。孕妇、1型糖尿病患者和癌症病史被排除在外。所有参与者均进行肾、肝、心血管疾病检查，并且排除了具有临床显著性肾、肝、心血管疾病的参与者。参与者没有任何慢性酒精消费史。体重不足人群(体重指数(BMI)<18.5kg/m2)也被排除在外。
研究批准：每位参与者签署了参加研究的知情同意书。哈佛生物技术有限公司(Harvard Biotech BD Ltd.)(孟加拉国达卡)机构审查委员会(Institutional ReviewBoard(IRB))审议通过了这项研究。
实验室试验(Laboratory test)、身体检查和社会医学史：使用市售的生化测定试剂盒(Linear Chemicals SL，Barcelona，Spain)和自动生化分析仪(中国江苏南京英诺华医疗技术有限公司(Sinnowa Medical Science&Technology Co.，Ltd，Nanjing，Jiangsu，China)；型号：Sinnolab MT 5000，版本5.00)进行实验室试验。通过测量空腹(至少10小时)血糖(FPG)来确定每个参与者(糖尿病患者和对照者)的糖尿病状况。FPG水平>7.0mmol/l(126mg/dl,毫克/分升)被认为是糖尿病诊断(美国糖尿病协会，2014)，任何新诊断的糖尿病患者(FPG>7.0mmol/l)都包括在糖尿病患者组中。所有参与者还对胆固醇、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、甘油三酯、肌酐和ALT(谷丙转氨酶)进行血清生化检测。测量每个参与者的身高和体重，以计算体重指数(BMI)，BMI定义为以kg为单位的体重除以以米为单位的身高的平方(kg/m2)。询问了参与者的酒精消费的历史。病史用于发现患有肾、肝、心脏疾病的参与者。还通过测量血压来评估心血管疾病的状况。
粪便均质化：将均质化的粪便悬浮液的上清液用于IAP测定。测量少量粪便(毫克)，然后加入定量比例的“粪便稀释缓冲液”(10mM(毫摩尔)三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris-HCl)，pH8.0，1mM氯化镁，10微摩尔(微摩尔)氯化锌)。通常，将50μl(微升)的粪便稀释缓冲液加入1mg粪便中。将样品剧烈涡旋搅拌以制备均匀的粪便悬浮液，然后将其以10,000重力加速度(g)离心20分钟，收集含有IAP的上清液并测定IAP含量。替代地，粪便可以悬浮在水中，然而，与悬浮在粪便稀释缓冲液中的粪便相比，悬浮在水中的粪便显示出较低的IAP活性。
碱性磷酸酶测定：使用上述自动生化分析仪(中国，南京，江苏)，按照已确立的方案测定粪便上清液中的碱性磷酸酶(AP)。简言之，将20μl上清液加入到含有10mM对硝基苯基磷酸(p-nitrophenyl phosphate(pNPP))的1ml酶测定缓冲液(1.25M二乙醇胺(diethanolamine(DEA))缓冲液，pH 10.2，0.6mM氯化镁)中，并将反应混合物在37℃下温育1分钟，然后用AP标准品预先校准的分析仪测量AP含量。为了确定粪便AP中的主要同种型，在测定AP活性之前，将等份的粪便样品用L-苯丙氨酸(L-phenylalanine(L-Phe，10mM最终浓度))、IAP的特异性抑制剂处理10分钟，并且将另一等份用L-高精氨酸(L-homoarginine(L-Arg，10mM最终浓度))、组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)的抑制剂处理。然后将每个用抑制剂处理的等份试样与含有相同浓度(10mM)的相应抑制剂的反应缓冲液混合，并使用分析仪测定AP活性。由于粪便中的大多数AP活性是由于IAP，所以粪便AP值表示为IAP/g粪便的单位。所有AP测定由单个实验室技术人员进行，该技术人员对参与者的诊断不知情。
统计分析：SAS系统(SAS公司，凯里，北卡罗来纳州(SAS Institute，Cary，NorthCarolina))用于统计分析。计算根据性别分层的T2DM病例和非T2DM对照者的平均值和标准误差。通过根据性别和T2DM状况(T2DM和非T2DM对照者)分层的皮尔森相关系数(Pearsoncorrelation coefficient)评估IAP水平与T2DM的各种危险因子之间的相关性。通过控制年龄、性别、FPG和BMI对IAP水平和T2DM状况的影响的线性回归模型(linear regressionmodels)评估T2DM病例和非T2DM对照者之间的IAP水平的平均差。在SAS中使用GLM(广义线性模型)程序通过III型平方和评估与自变量相关的方差的统计学显著性。使用SAS中的过程逻辑程序(Proc Logist procedure)进行多重逻辑回归分析，评估了T2DM病例与独立危险因子(包括IAP)之间的关联。回归系数和比值比用于评估IAP对T2DM状况的独立风险贡献。两组之间差异的统计学显著性使用受损双尾t检验来确定。当p值<0.05时，两组之间的差异被认为是显著的。t检验是使用微软Excel(Microsoft Excel)程序执行的。使用在线程序执行两个独立组的事后统计功效分析(http://clincalc.com/Stats/Power.aspx)。
示例
提供以下示例以进一步描述本发明；然而，这些示例不限制权利要求限定的本发明的范围。
示例1：示出了用于确定粪便中肠碱性磷酸酶(IAP)含量的步骤的流程图。
已经表明缺乏肠碱性磷酸酶(IAP-基因敲除)的小鼠发展为2型糖尿病(T2DM)。基于这一观察，我们假设T2DM患者粪便中的IAP量可能较少。因此，我们计划测量T2DM患者和对照健康参与者的粪便中的IAP含量。图1中提供了确定粪便中的IAP的方案的示意图。
示例2：粪便碱性磷酸酶活性主要是由肠碱性磷酸酶引起的。
IAP基因敲除(Akp3-/-)小鼠发展为T2DM，并且根据这一观察，我们假设T2DM患者可能具有IAP缺陷。因此，我们决定测量糖尿病患者和对照非糖尿病健康人的粪便中的IAP含量。然而，考虑到碱性磷酸酶(AP)的不同同种型与人类T2DM的可能关联，我们首先决定确定糖尿病和对照健康人群粪便中主要AP同种型的性质。将非糖尿病健康对照者和T2DM患者的粪便样品在粪便稀释缓冲液中匀浆，然后离心并收集上清液。在L-苯丙氨酸(L-Phe，IAP的特异性抑制剂)和L-高精氨酸(L-Arg，TNAP的特异性抑制剂)的存在下，在粪便样品上清液的各等份试样上进行AP测定。
图2是示出了粪便碱性磷酸酶活性主要由肠碱性磷酸酶(IAP)引起的图。L-Phe抑制在总健康人群的粪便中约80％的AP活性，在总糖尿病人群中的抑制率约为70％，然而差异是有统计学显著性的(p＝1.4E-04)(图2A)。另一方面，L-Arg对任一组的粪便AP活性均无抑制作用。性别匹配分布也表明了L-Phe在对照组和糖尿病组的男性(图2B)和女性(图2C)中的相似的AP抑制作用。这个结果表明大部分的粪便AP活性是由IAP引起的，因此，我们决定在以下各节中将粪便AP称为IAP，因为它是适用的。
图2：粪便碱性磷酸酶活性主要是由肠碱性磷酸酶(IAP)引起的。将非糖尿病健康对照组和T2DM患者的粪便样品在粪便稀释缓冲液中匀浆，然后离心收集上清液。在L-苯丙氨酸(L-Phe)(IAP的特异性抑制剂)的存在下以及在L-高精氨酸(L-Arg)(组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)的特异性抑制剂)的存在下，使用自动生化分析仪来测定上清液中的碱性磷酸酶(AP)含量。(A)AP抑制剂对总体对照和糖尿病患者的粪便中的AP活性的影响。(B)AP抑制剂对男性对照和糖尿病患者的粪便中的AP活性的影响。(C)AP抑制剂对女性对照和糖尿病患者的粪便中的AP活性的影响。统计：值表示为平均值±SEM(标准误)。使用非配对双尾t检验来测试两组之间差异的统计学显著性。p<0.05被认为是显著的。**，p<0.01；***，p<0.001。
示例3：与健康对照相比，糖尿病患者粪便中的肠碱性磷酸酶(IAP)水平较低。
表1示出了糖尿病患者和健康人群中IAP含量的一些重要特征。该研究包括202名糖尿病患者(T2DM)和445名对照健康受试者。糖尿病组包括63名男性和139名女性，而对照组包括114名男性和331名女性。参与者的年龄在30至70岁之间。提供了糖尿病患者和健康参与者的IAP值的比较分析。显然，与总健康人群相比，总体糖尿病患者的粪便IAP减少了47.6％(平均值±SEM：分别为67.4±3.2与35.3±2.5单位/克粪便；p＝5.6E-10)。与健康男性相比，糖尿病男性的IAP减少了51.6％(分别为57.1±4.5与27.7±3.2单位/克粪便，p＝1.1E-05)。类似地，与健康女性相比，糖尿病女性的IAP减少了45.3％(分别为71.0±4.0对38.8±3.3单位/克粪便，p＝1.6E-06)。健康对照男性的IAP水平似乎比健康女性低19.5％，但是差异不显著(p-0.061)。另一方面，与糖尿病女性相比，糖尿病男性的IAP水平降低了28.7％，并且差异具有统计学显著性(p＝0.041)。值得注意的是，样品的IAP含量的数值根据不同的碱性磷酸酶测定和/或测定条件的不同而变化。
表格1健康对照参与者和T2DM患者的特征。
注意：参与者是从孟加拉国达卡的郊区招募的。所有参与者进行整夜(10小时)禁食，并对上述所有物理和生化测试进行了调查。统计：值表示为平均值±SEM。使用非配对双尾t检验来测试两组之间差异的统计学显著性。p<0.05被认为是显著的。***，p<0.001。与健康对照相比，T2DM患者中IAP的百分比损失：总计47.6％；男，51.6％；女，45.3％。
表2示出了健康对照和糖尿病人群中粪便IAP水平的年龄组和性别匹配分布。显然，与非糖尿病组相比，T2DM患者平均粪便IAP减少约35-60％，两组之间的差异具有统计学显著性。在40-49岁的糖尿病女性中观察到IAP水平的最小减少(36.8％)，而在60-70岁的男性糖尿病患者中，最高的减少(59.0％)被证实。然而，相同人群的较年轻组和较年老组之间的IAP水平差异无统计学显著性。
表2IAP的年龄组和性别匹配分布以及T2DM的一些关键参数。
统计：值表示为平均值±SEM。使用非配对双尾t检验来测试两组之间差异的统计学显著性。p<0.05被认为是显著的。*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001。NA，不适用。
图3是示出了与健康对照相比，糖尿病患者的粪便中IAP水平较低的图。
对照健康人群和糖尿病患者之间的IAP水平的比较表明，平均而言，整个(总体)糖尿病人群的粪便中的IAP要少得多(图3A)。性别匹配的分布表明，与健康对照组相比，男性和女性糖尿病患者二者的粪便IAP较少(图3A)。IAP的年龄组和性别匹配分布也表明，在非糖尿病和糖尿病人群的男性(图3B)和女性(图3C)中，酶随着年龄明显降低。
图3：2型糖尿病(T2DM)患者的粪便中肠碱性磷酸酶(IAP)水平较低。使用自动生化分析仪来测定健康参与者和T2DM患者的粪便样品的IAP含量(参见图2)。(A)非糖尿病健康对照组和糖尿病人群粪便中的IAP含量。(B)男性对照组和糖尿病人群中IAP含量的年龄依赖性分布。(C)女性对照组和糖尿病人群中IAP含量的年龄依赖性分布。统计：值表示为平均值±SEM。使用非配对双尾t检验来测试两组之间差异的统计学显著性。p<0.05被认为是显著的。*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001。事后统计功效分析表明，总体、男组和女组的功效分别为100％、100％和100％，以验证各自样品量的功效的充裕度(通常为a＝0.05时的功效>80％)。相同人群(糖尿病患者或非糖尿病患者)的较年轻组和较年老组之间的IAP值差异无统计学显著性。
图4是示出了在所有百分位点的T2DM患者中IAP水平低的图。
考虑到如上所述(如图3A所示)IAP水平的平均值(平均值(mean))中“异常值”(与大多数值相比，具有极高或极低的个体值)的任何影响，我们进一步验证了糖尿病患者和非糖尿病患者组的IAP水平在不同的百分点处的差异。我们评估了202例T2DM患者和445例健康对照者中IAP值的百分比分布。我们将每个组(糖尿病患者或非糖尿病患者)的个体IAP值从最低到最高进行组织，然后计算每10个百分点部分的平均IAP值。显然，在所有百分位点上，与健康人群相比，T2DM患者的IAP值较低，并且差异非常显著。IAP水平的百分比分布证实，T2DM患者与对照组相比确实具有较低的IAP水平。
图4：所有百分位点的T2DM患者的IAP水平均较低。将每组(健康对照组或T2DM患者)的个体IAP值从最低到最高排列，然后计算每10个百分位点内的平均IAP值(对于T2DM患者，每10个百分位点内n＝20，对于健康对照组，每10个百分位点内n＝44)。绘制相应百分位点的平均值。统计：值表示为平均值±SEM。使用非配对双尾t检验来测试两组之间差异的统计学显著性。p<0.05被认为是显著的。***，p<0.001。
示例4：IAP缺陷与T2DM相关。
表3示出了IAP水平与年龄、性别、FPG、BMI、ALT、血清肌酐、血压和脂质参数(lipidparameters)之间的皮尔森相关系数分析。显然，IAP与上述T2DM危险因子之间无相关性。
表3示出了IAP水平与不同T2DM危险因子无相关性的皮尔森相关系数
注意：接近+1或-1的皮尔森相关系数表示两个变量是高度相关的(分别为正或负)。0和+0.30之间或0和-0.30之间的相关系数被认为在两个变量之间没有相关性。
表4示出了预测IAP与T2DM强关联的广义线性回归模型。还预测IAP与年龄的轻度关联，这可以验证IAP随年龄的增长而下降的观测(见图3B和图3C)。
表4广义线性回归模型预测IAP与T2DM的关联。
源 DF 类型IIISS F值 Pr＞F
糖尿病 1 81665.00 23.3 0.0001
性别 1 12309.33 3.51 0.0614
FPG(mmol/l) 1 180.46 0.05 0.8206
BMI(kg/m2) 1 5335.29 1.52 0.2177
年龄 1 23707.51 6.76 0.0095
注意：该模型预测IAP与T2DM的强关联。还预测IAP与年龄的轻度关联(IAP水平随年龄逐渐降低；见图3B和图3C)。
表5示出了预测IAP水平与糖尿病状况之间独立的反比关系的多重逻辑回归分析。我们进行了针对年龄、FPG、BMI、ALT、血清肌酐、血压和脂质参数进行控制的多重逻辑回归分析。数据表明IAP水平与糖尿病状况之间存在独立的反比关系(表5)。粪便IAP每减少25U/g(单位/克)，糖尿病风险增加35％。我们得出结论，IAP缺乏与其他已知的糖尿病风险因子独立地与糖尿病相关。
表5多重逻辑回归分析预测IAP缺乏与T2DM的关联。
注意：随着粪便IAP水平中的每个U/g的降低，糖尿病诊断的概率增加1.4％。例如，如果IAP水平降低25U/g，糖尿病风险将增加35％。统计：使用过程逻辑程序(SAS)进行多重逻辑回归分析，以确定T2DM与独立危险因素(包括IAP)之间的关联。
示例5：高血糖和正常血糖T2DM患者具有相似的粪便IAP水平
T2DM患者依靠严格的抗糖尿病药物和生活方式的变化往往会达到正常血糖状况(FPG<7.0mmol/l)。我们有兴趣知道糖尿病患者的血糖状况是否对粪便IAP水平有影响。
表6示出了高血糖(FPG>7.0mmol/l)和正常血糖糖尿病患者二者的粪便中IAP水平相似，并且两组之间值的差异无统计学显著性。
表6高血糖和正常血糖糖尿病患者具有类似的粪便IAP水平。
注意：糖尿病患者分为高血糖(FPG>7.0mmol/l)和正常血糖(FPG<7.0mmol/l)组，并且将各自粪便IAP水平进行比较。统计：值表示为平均值±SEM。使用非配对双尾t检验来测试两组之间差异的统计学显著性。
p<0.05被认为是显著的。***，p<0.001。
示例6：不论体重指数(BMI)如何，高水平的IAP均可预防糖尿病。
众所周知，超重(BMI>25.0kg/m2)和肥胖(BMI>30.0kg/m2)的人群比正常体重的人群(BMI<25.0-18.5kg/m2)更容易发展为T2DM。我们将这项研究的糖尿病患者和健康对照者分为两组，一组为BMI>25.0kg/m2，另一组为BMI<25.0kg/m2。
表7示出了无论体重指数(BMI)如何，高水平的IAP均可预防糖尿病。显然，与健康对照组相比，两组糖尿病患者(BMI>25.0kg/m2，BMI<25.0kg/m2)的IAP量显著降低。这些数据表明，IAP对T2DM的发展起着保护作用。具有高IAP的肥胖或超重者不会发展为T2DM。两组糖尿病患者的IAP水平相似，并且差异无统计学显著性(p＝0.77)。我们还观察到两组健康对照者的IAP水平相似，并且差异无统计学显著性(p＝0.29)。
表7无论体重指数(BMI)如何，高水平的IAP都能预防糖尿病。
注意：高BMI的健康对照组和低BMI的健康对照组之间的IAP水平无显著性差异，并且高BMI糖尿病患者组和低BMI糖尿病患者组之间的IAP水平无显著性差异。具有高粪便IAP的肥胖者不会发展为T2DM。统计：值表示为平均值±SEM。使用非配对双尾t检验来测试两组之间差异的统计学显著性。p<0.05被认为是显著的。*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001。NA，不适用。
图5是示出了如表7所示的具有高和低体重指数(BMI)的糖尿病患者和健康对照受试者的IAP分布的图。
图5：不论体重指数(BMI)如何，高水平的IAP均可预防T2DM。使用自动生化分析仪来测定健康参与者和T2DM患者的粪便样品的IAP含量(见图3)。健康对照组和T2DM患者被分为两组，一组为高BMI(>25.0kg/m2)，另一组为低BMI(<25.0kg/m2)。统计：值表示为平均值±SEM。使用非配对双尾t检验来测试两组之间差异的统计学显著性。p<0.05被认为是显著的。*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001。注意：高BMI的健康对照组和低BMI的健康对照组之间的IAP水平无显著性差异，并且高BMI糖尿病患者组和低BMI糖尿病患者组之间的IAP水平无显著性差异。具有高粪便IAP的肥胖者没有T2DM。
示例7：大多数人群具有初期代谢综合征。
IAP缺乏导致小鼠代谢综合征(Kaliannan等人，Proc Natl Acad Sci U S A2013；110(17)：7003-8)。因此，我们预测，IAP缺乏与T2DM在人体中的关联对于查出具有“初期代谢综合征”的人群是有用的，这样的人群表面健康，然而由于IAP缺乏，不久的将来将容易发展为代谢综合征。“初期代谢综合征”的受害者应包括患有“初期”糖尿病、心脏病、非酒精性脂肪肝、高血压和其他代谢紊乱的人。我们观察到健康人群的平均IAP水平约为67.4±3.2U/g粪便(表1)，因此我们认为使用当前的测定条件，IAP水平低于65.0U/g的健康人应被视为具有“初期代谢综合征”(其应该包括“初期糖尿病”和“前代谢综合征(pre-metabolicsyndrome)(表现出至少一种代谢综合征标准)”。值得注意的是，每克(gm)粪便的65.0U磷酸酶的含量数值将根据不同的碱性磷酸酶(AP)测定以及测定条件(例如pH、时间、温度、底物浓度等的变化)而变化。
表8示出了约65％的健康人群具有粪便IAP水平<65.0U/g的“初期代谢综合征”。这种患病率与前代谢综合征(表现出至少一种代谢综合征标准)的71％的患病率一致(Al-Qahtani DA，Imtiaz ML.沙特阿拉伯成年士兵代谢综合征患病率(Prevalence ofmetabolic syndrome in Saudi adult soldiers)，Saudi Med J(沙特阿拉伯医学杂志)2005；26(9)：1360-6)。此外，据报道，巴基斯坦68-81％的人口具有低水平的HDL-胆固醇，这是代谢综合征的一个标准(Basit A，Shera AS.2008.巴基斯坦代谢综合征患病率(Prevalence of metabolic syndrome in Pakistan)，Metab Syndr Relat Disord(代谢综合征和相关障碍)6(3)：171-5)。我们计算出约40％的健康受试者具有小于糖尿病组(35.0U/g粪便)的平均IAP值的IAP量。预计这些人有“严重的初期代谢综合征”，并且在几年内极易发展为T2DM或其他代谢紊乱。有趣的是，“显性”代谢综合征的患病率(代谢综合征3个标准共存；Huang PL.代谢综合征的详尽的定义(A comprehensive definition formetabolic syndrome)，Dis Model Mech(疾病模型与诊断)2009；2(5-6)：231-7)也是40％(Kaliannan等人，Proc Natl Acad Sci USA2013；110(17)：7003-8；Ford.糖尿病护理(Diabetes Care)2005年11月；28(11)：2745-9)。
另外，一些T2DM患者(约15％)具有粪便IAP水平>67.0U/g(健康对照的平均值)，并且该观察意味着IAP与这些特定患者的T2DM发病机制无关，或者从以前的高水平持续损失IAP也可能导致T2DM。损失约50％的IAP活性可能对造成T2DM有重要意义，原因在于糖尿病患者的平均IAP与健康对照组相比减少了约50％(见表1和图3)。因此，看来初期糖尿病患者的独特人群也可能具有较高的IAP水平。
初期糖尿病人是一种表面健康的人，其粪便IAP水平使用本文公开的测定条件得出低于65.0U/gm粪便或先前具有较高IAP水平但目前经历持续损失50％IAP活性。
表8大多数人群具有初期的代谢综合征。
注意：根据健康对照中平均IAP值为67.4±3.2U/g粪便，患有“初期代谢综合征”的健康人定义为具有粪便IAP水平<65.0U/g的粪便。初期代谢综合征也应包括“初期糖尿病”。

Claims (350)

1.一种用于生成粪便中磷酸酶的时间分布曲线的方法，包含测量来自受试者的粪便样品中磷酸酶含量，其中所述粪便样品在单个时间点或在多个时间点收集。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述多个时间点包含每天、每周、每月或每年。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与粪便样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述粪便样品中的所述磷酸酶含量。
5.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与粪便样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述粪便样品中的所述磷酸酶含量。
6.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与粪便样品接触；
等待指定的时间段以允许发生酶反应；并使用分光光度计、生化分析仪、高效液相色谱(HPLC)机、色度计、光度计或者机械、生化、电气或电子设备来定量所述粪便样品中的所述磷酸酶含量。
7.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与粪便样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述粪便样品中的所述磷酸酶含量。
8.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与粪便样品接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述粪便样品中的所述磷酸酶含量。
9.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供用于将粪便样品附着到其上的固体介质；
将所述粪便样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述粪便样品中的所述磷酸酶含量。
10.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供用于将粪便样品附着到其上的固体介质；
将所述粪便样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述粪便样品中的所述磷酸酶含量。
11.根据权利要求7-10中任一项所述的方法，其中所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
12.根据权利要求4-11中任一项的方法，其中所述磷酸酶底物包含磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系(5-Bromo-4-chloro-3-indolylphosphate/nitro blue tetrazolium substrate system)、固红(Fast Red TR)/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3，2’(5’-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
13.权利要求1-12中任一项的方法，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
14.根据权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述粪便样品被包含唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液的生物样品所取代。
15.一种用于诊断初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的方法，包含测量来自受试者的生物样品中磷酸酶含量并将所述含量与平均正常含量值进行比较。
16.根据权利要求15所述的方法，其中，比平均正常值小1％-100％的磷酸酶含量表示初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征。
17.根据权利要求15或16所述的方法，进一步包含生成磷酸酶时间分布曲线，所述生成包含测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中的所述磷酸酶含量，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
18.根据权利要求17所述的方法，其中所述多个时间点包含每天、每周、每月或每年。
19.根据权利要求17或18所述的方法，其中包含随时间而持续减少的磷酸酶含量的所述磷酸酶时间分布曲线表示初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征。
20.根据权利要求19所述的方法，其中所述持续减少与先前测量的含量相比减少约50％。
21.根据权利要求15-20中任一项所述的方法，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
22.根据权利要求15-21中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
23.根据权利要求15-21中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
24.根据权利要求15-21中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许发生酶反应；并使用分光光度计、生化分析仪、高效液相色谱(HPLC)机、色度计、光度计或者机械、生化、电气或电子设备来定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
25.根据权利要求15-21中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
26.根据权利要求15-21中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
27.根据权利要求15-21中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
28.根据权利要求15-21中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
29.根据权利要求25-28中任一项所述的方法，其中所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
30.根据权利要求22-28中任一项所述的方法，其中所述磷酸酶底物包含磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系、固红/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3，2’(5’-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
31.根据权利要求15-30中任一项所述的方法，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
32.根据权利要求15-30中任一项所述的方法，其中所述生物样品包括粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液，优选是粪便样品。
33.根据权利要求15-32中任一项所述的方法，进一步包含测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中的血清内毒素、促炎核苷酸、细胞因子、趋化因子、细胞因子受体的拮抗剂或抗炎因子中的一种或多种的含量，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
34.根据权利要求15-33中任一项所述的方法，其中所述初期糖尿病或糖尿病包含2型糖尿病、妊娠糖尿病或尿崩症。
35.根据权利要求15-33中任一项所述的方法，其中所述初期代谢疾病或代谢疾病包含心血管疾病、冠心病、脑血管疾病、中风、外周血管疾病、非酒精性脂肪肝疾病、视网膜病变、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、关节炎、湿疹或牛皮癣。
36.根据权利要求15-33中任一项所述的方法，其中所述初期代谢综合征或代谢综合征包含肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压、脂肪肝或者它们的组合。
37.用于生成磷酸酶时间分布曲线的磷酸酶底物的用途，包含测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中的磷酸酶含量，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
38.根据权利要求37所述的用途，其中所述多个时间点包含每日、每周、每月或每年。
39.权利要求37或38所述的用途，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
40.根据权利要求37-39中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
41.根据权利要求37-39中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
42.根据权利要求37-39中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许发生酶反应；并使用分光光度计、生化分析仪、高效液相色谱(HPLC)机、色度计、光度计或者机械、生化、电气或电子设备来定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
43.根据权利要求37-39中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
44.根据权利要求37-39中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
45.根据权利要求37-39中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
46.根据权利要求37-39中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的计数与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
47.根据权利要求43-46中任一项所述的用途，其中所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
48.权利要求40-46中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶底物包含磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系、固红/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3，2’(5’-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
49.权利要求37-48中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
50.根据权利要求37-49中任一项所述的用途，其中所述生物样品包含粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液，优选是粪便样品。
51.用于检测初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的磷酸酶底物的用途，包含测量来自受试者的生物样品中磷酸酶含量，并将所述含量与平均正常含量值进行比较。
52.根据权利要求51所述的用途，其中，比平均正常值小1％-100％的磷酸酶含量表示初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征。
53.根据权利要求51或52所述的用途，进一步包含生成磷酸酶时间分布曲线，所述生成包含测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中的所述磷酸酶含量，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
54.根据权利要求53所述的用途，其中所述多个时间点包含每天、每周、每月或每年。
55.根据权利要求53或54所述的用途，其中包含随时间而持续减少的磷酸酶含量的所述磷酸酶时间分布曲线表示初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征。
56.根据权利要求55所述的用途，其中所述持续减少与先前测量的含量相比减少约50％。
57.根据权利要求51-56中任一项所述的用途，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
58.根据权利要求51-57中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
59.根据权利要求51-57中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
60.根据权利要求51-57中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许发生酶反应；并使用分光光度计、生化分析仪、高效液相色谱(HPLC)机、色度计、光度计或者机械、生化、电气或电子设备来定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
61.根据权利要求51-57中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
62.根据权利要求51-57中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
63.根据权利要求51-57中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
64.根据权利要求51-57中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
65.根据权利要求61-64中任一项所述的用途，其中所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
66.根据权利要求51-65中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶底物包含磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系、固红/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3，2’(5’-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
67.根据权利要求51-66中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
68.根据权利要求51-67中任一项所述的用途，其中所述生物样品包含粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液，优选是粪便样品。
69.根据权利要求51至68中任一项所述的用途，进一步包含测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中血清内毒素、促炎核苷酸、细胞因子、趋化因子、细胞因子受体的拮抗剂或抗炎因子中的一种或多种的含量，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
70.根据权利要求51-69中任一项所述的用途，其中所述初期糖尿病或糖尿病包含2型糖尿病、妊娠糖尿病或尿崩症。
71.根据权利要求51-69中任一项所述的用途，其中所述初期代谢疾病或代谢疾病包含心血管疾病、冠心病、脑血管疾病、中风、外周血管疾病、非酒精性脂肪肝疾病、视网膜病变、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、关节炎、湿疹或牛皮癣。
72.根据权利要求51-69中任一项所述的用途，其中所述初期代谢综合征或代谢综合征包含肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压、脂肪肝或者它们的组合。
73.一种降低初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的风险的或治疗初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的方法，包含向有需要的受试者施用药学有效量的磷酸酶。
74.根据权利要求73所述的方法，其中所述有需要的受试者具有比平均正常值小1％-100％的磷酸酶含量。
75.根据权利要求73所述的方法，其中所述有需要的受试者具有包含磷酸酶含量随时间持续减少的磷酸酶时间分布曲线。
76.根据权利要求75所述的方法，其中所述持续减少与先前测量的含量相比减少约50％。
77.根据权利要求73-76中任一项所述的方法，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
78.根据权利要求73-77中任一项所述的方法，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、哺乳动物碱性磷酸酶、细菌碱性磷酸酶、真菌碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
79.根据权利要求73-78中任一项所述的方法，其中所述磷酸酶包含天然肠碱性磷酸酶、重组肠碱性磷酸酶、突变型肠碱性磷酸酶、具有肠碱性磷酸酶活性的肽、具有肠碱性磷酸酶活性的重组肽、天然人肠道碱性磷酸酶、重组人肠碱性磷酸酶、天然小牛肠碱性磷酸酶或重组小牛肠碱性磷酸酶。
80.根据权利要求73-79中任一项所述的方法，其中所述磷酸酶通过口服、局部、皮下、皮内、肌肉内、静脉内、阴道或直肠给药。
81.根据权利要求73-80中任一项所述的方法，其中所述磷酸酶在膳食之前、期间或之后给药。
82.根据权利要求73-81中任一项所述的方法，其中以有效维持在65-650U/克粪便的正常范围内磷酸酶的稳态水平的量进行所述磷酸酶给药。
83.根据权利要求73-82中任一项所述的方法，其中以有效维持在每克粪便65单位和650单位磷酸酶之间的稳态水平的量进行所述磷酸酶给药。
84.根据权利要求73-83中任一项所述的方法，其中以有效维持在每克粪便大约65单位或者更多磷酸酶的稳态水平的量进行所述磷酸酶给药。
85.根据权利要求73-84中任一项所述的方法，其中以每剂量1至6,500单位磷酸酶的量进行所述磷酸酶给药。
86.根据权利要求73-85中任一项所述的方法，其中所述磷酸酶被配制成片剂、凝胶、胶囊、液体或半固体口香糖。
87.根据权利要求73-86中任一项所述的方法，其中所述磷酸酶被配制在食品或饮料中，其中所述饮料优选是牛奶。
88.根据权利要求73-87中任一项所述的方法，其中所述磷酸酶被配制以包含抗糖尿病药物、抗高血压药物、抗胆固醇药物、抗抑郁药物、抗生素、益生菌、丁酸钠、甲状腺激素、姜黄素、ω-3脂肪酸、β-内酰胺酶、蛋白质、肽或者它们的组合的一种或多种药物。
89.根据权利要求73-88中任一项所述的方法，其中所述初期糖尿病或糖尿病包含2型糖尿病、妊娠糖尿病或尿崩症。
90.根据权利要求73-88中任一项所述的方法，其中所述初期代谢疾病或代谢疾病包含心血管疾病、冠心病、脑血管疾病、中风、外周血管疾病、非酒精性脂肪肝疾病、视网膜病变、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、关节炎、湿疹或牛皮癣。
91.根据权利要求73-88中任一项所述的方法，其中所述初期代谢综合征或代谢综合征包含肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压、脂肪肝或者它们的组合。
92.用于降低初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的风险或治疗初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的磷酸酶的用途。
93.根据权利要求92所述的用途，其中所述初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的特征在于受试者具有比平均正常值小1％至100％的磷酸酶含量。
94.根据权利要求92所述的用途，其中所述初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的特征在于受试者具有包含磷酸酶含量随时间持续减少的磷酸酶时间分布曲线。
95.根据权利要求94所述的用途，其中所述持续减少与先前测量的含量相比减少约50％。
96.根据权利要求93-95中任一项所述的用途，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
97.根据权利要求92-96中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、哺乳动物碱性磷酸酶、细菌碱性磷酸酶、真菌碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
98.根据权利要求92-97中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶包含天然肠碱性磷酸酶、重组肠碱性磷酸酶、突变型肠碱性磷酸酶、具有肠碱性磷酸酶活性的肽、具有肠碱性磷酸酶活性的重组肽、天然人肠道碱性磷酸酶、重组人肠碱性磷酸酶、天然小牛肠碱性磷酸酶或重组小牛肠碱性磷酸酶。
99.根据权利要求92-98中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶用于口服、局部、皮下、皮内、肌肉内、静脉内、阴道或直肠给药。
100.根据权利要求99所述的用途，其中所述给药是在膳食之前、期间或之后。
101.根据权利要求99或100所述的用途，其中以有效维持在65-650U/克粪便的正常范围内磷酸酶的稳态水平的量进行所述给药。
102.根据权利要求99-101中任一项所述的用途，其中以有效维持在每克粪便65单位和650单位磷酸酶之间的稳态水平的量进行所述给药。
103.根据权利要求99-102中任一项所述的用途，其中以有效维持在每克粪便大约65单位或者更多磷酸酶的稳态水平的量进行所述给药。
104.根据权利要求99-103中任一项所述的用途。其中以每剂量1至6,500单位磷酸酶的量进行所述给药。
105.根据权利要求92-104中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶被配制成片剂、凝胶、胶囊、液体或半固体口香糖。
106.根据权利要求92-105中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶被配制在食品或饮料中，其中所述饮料优选是牛奶。
107.根据权利要求92-106中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶被配制以包含抗糖尿病药物、抗高血压药物、抗胆固醇药物、抗抑郁药物、抗生素、益生菌、丁酸钠、甲状腺激素、姜黄素、ω-3脂肪酸、β-内酰胺酶、蛋白质、肽或者它们的组合的一种或多种药物。
108.根据权利要求92-107中任一项所述的用途，其中所述初期糖尿病或糖尿病包含2型糖尿病、妊娠糖尿病或尿崩症。
109.根据权利要求92-107中任一项所述的用途，其中所述初期代谢疾病或代谢疾病包含心血管疾病、冠心病、脑血管疾病、中风、外周血管疾病、非酒精性脂肪肝疾病、视网膜病变、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、关节炎、湿疹或牛皮癣。
110.根据权利要求92-107中任一项所述的用途，其中所述初期代谢综合征或代谢综合征包含肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压、脂肪肝或者它们的组合。
111.一种药物组合物，所述药物组合物包含用于降低初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的风险或用于治疗初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的磷酸酶。
112.根据权利要求111所述的药物组合物，其中所述初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的特征在于受试者具有比平均正常值小1％至100％的磷酸酶含量。
113.根据权利要求111所述的药物组合物，其中所述初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的特征在于受试者具有包含磷酸酶含量随时间持续减少的磷酸酶时间分布曲线。
114.根据权利要求113所述的药物组合物，其中所述持续减少与先前测量的含量相比减少约50％。
115.根据权利要求112-114中任一项所述的药物组合物，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
116.根据权利要求111-115中任一项的药物组合物，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、哺乳动物碱性磷酸酶、细菌碱性磷酸酶、真菌碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
117.根据权利要求111-116中任一项所述的药物组合物，其中所述磷酸酶包含天然肠碱性磷酸酶、重组肠碱性磷酸酶、突变型肠碱性磷酸酶、具有肠碱性磷酸酶活性的肽、具有肠碱性磷酸酶活性的重组肽、天然人肠道碱性磷酸酶、重组人肠碱性磷酸酶、天然小牛肠碱性磷酸酶或重组小牛肠碱性磷酸酶。
118.根据权利要求111-117中任一项所述的药物组合物，其中所述磷酸酶用于口服、局部、皮下、皮内、肌肉内、静脉内、阴道或直肠给药。
119.根据权利要求118所述的药物组合物，其中所述给药是在膳食之前、期间或之后。
120.根据权利要求118或119所述的药物组合物，其中以有效维持在65-650U/克粪便的正常范围内磷酸酶的稳态水平的量进行所述给药。
121.根据权利要求118-120中任一项所述的药物组合物，其中以有效维持在每克粪便65单位和650单位磷酸酶之间的稳态水平的量进行所述给药。
122.根据权利要求118-121中任一项所述的药物组合物，其中以有效维持在每克粪便大约65单位或者更多磷酸酶的稳态水平的量进行所述给药。
123.根据权利要求118-122中任一项所述的药物组合物，其中以每剂量1至6,500单位磷酸酶的量进行所述给药。
124.根据权利要求121-1123中任一项所述的药物组合物，其中所述磷酸酶被配制成片剂、凝胶、胶囊、液体或半固体口香糖。
125.根据权利要求121-124中任一项所述的药物组合物，其中所述磷酸酶被配制在食品或饮料中，其中所述饮料优选是牛奶。
126.根据权利要求121-125中任一项所述的药物组合物，其中所述磷酸酶被配制以包含抗糖尿病药物、抗高血压药物、抗胆固醇药物、抗抑郁药物、抗生素、益生菌、丁酸钠、甲状腺激素、姜黄素、ω-3脂肪酸、β-内酰胺酶、蛋白质、肽或者它们的组合的一种或多种药物。
127.根据权利要求121～126中任一项所述的药物组合物，其中，所述初期糖尿病或糖尿病包含2型糖尿病、妊娠糖尿病或尿崩症。
128.根据权利要求121-126中任一项所述的药物组合物，其中所述初期代谢疾病或代谢疾病包含心血管疾病、冠心病、脑血管疾病、中风、外周血管疾病、非酒精性脂肪肝疾病、视网膜病变、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、关节炎、湿疹或牛皮癣。
129.根据权利要求121-126中任一项所述的药物组合物，其中所述初期代谢综合征或代谢综合征包含肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压、脂肪肝或者它们的组合。
130.磷酸酶在制备用于降低初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的风险或治疗初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的药物中的用途。
131.根据权利要求130所述的用途，其中所述初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的特征在于受试者具有比平均正常值小1％至100％的磷酸酶含量。
132.根据权利要求130所述的用途，其中所述初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的特征在于受试者具有包含磷酸酶含量随时间持续减少的磷酸酶时间分布曲线。
133.根据权利要求132所述的用途，其中所述持续减少与先前测量的含量相比减少约50％。
134.根据权利要求131-133中任一项所述的用途，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
135.根据权利要求130-134所述的用途，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、哺乳动物碱性磷酸酶、细菌碱性磷酸酶、真菌碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
136.根据权利要求130-135中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶包天然肠碱性磷酸酶、重组肠碱性磷酸酶、突变型肠碱性磷酸酶、具有肠碱性磷酸酶活性的肽、具有肠碱性磷酸酶活性的重组肽、天然人肠道碱性磷酸酶、重组人肠碱性磷酸酶、天然小牛肠碱性磷酸酶或重组小牛肠碱性磷酸酶。
137.根据权利要求130-136中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶用于口服、局部、皮下、皮内、肌肉内、静脉内、阴道或直肠给药。
138.根据权利要求137所述的用途，其中所述给药是在膳食之前、期间或之后。
139.根据权利要求137或138所述的用途，其中以有效维持在65-650U/克粪便的正常范围内磷酸酶的稳态水平的量进行所述给药。
140.根据权利要求137-139中任一项所述的用途，其中以有效维持在每克粪便65单位和650单位磷酸酶之间的稳态水平的量进行所述给药。
141.根据权利要求137-140中任一项所述的用途，其中以有效地维持每克粪便约65单位或更多磷酸酶的稳态水平的量进行所述给药。
142.根据权利要求137-141中任一项所述的用途，其中以每剂量1至6,500单位磷酸酶的量进行所述给药。
143.根据权利要求130-142中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶被配制成片剂、凝胶、胶囊、液体或半固体口香糖。
144.根据权利要求130-143中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶被配制在食品或饮料中，其中所述饮料优选是牛奶。
145.根据权利要求130-144中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶被配制以包含抗糖尿病药物、抗高血压药物、抗胆固醇药物、抗抑郁药物、抗生素、益生菌、丁酸钠、甲状腺激素、姜黄素、ω-3脂肪酸、β-内酰胺酶、蛋白质、肽或者它们的组合的一种或多种药物。
146.根据权利要求130-145中任一项所述的用途，其中所述初期糖尿病或糖尿病包含2型糖尿病、妊娠糖尿病或尿崩症。
147.根据权利要求130-145中任一项所述的用途，其中所述初期代谢疾病或代谢疾病包含心血管疾病、冠心病、脑血管疾病、中风、外周血管疾病、非酒精性脂肪肝疾病、视网膜病变、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、关节炎、湿疹或牛皮癣。
148.根据权利要求130-145中任一项所述的用途，其中所述初期代谢综合征或代谢综合征包含肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压、脂肪肝或者它们的组合。
149.一种用于测定粪便中磷酸酶含量的试剂盒，其中所述试剂盒包含用于测量限定量的粪便的工具、粪便稀释缓冲液或水、磷酸酶底物和磷酸酶测定缓冲液。
150.根据权利要求149所述的试剂盒，其中所述磷酸酶底物包含磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系、固红/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3,2'(5'-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
151.根据权利要求149或150所述的试剂盒，其中所述磷酸酶底物以固体或液体形式设置或附着于固体介质，所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是纸或管。
152.根据权利要求149-151中任一项所述的试剂盒，其中所述粪便样品附着于固体介质，所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
153.根据权利要求149-152中任一项所述的试剂盒，其中所述试剂盒包含用于测量限定量的粪便的工具、装有过滤装置的瓶或管、以及含有与磷酸酶测定缓冲液混合的磷酸酶底物的管。
154.根据权利要求149-153中任一项所述的试剂盒，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
155.根据权利要求149-154中任一项所述的试剂盒，其中粪便被包含唾液、尿液、血液、血浆、血清、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液或体腔液的生物样品所取代。
156.用于测定粪便样品中磷酸酶含量的试剂盒的用途，其中所述试剂盒包含用于测量限定量的粪便的工具、粪便稀释缓冲液、磷酸酶底物和磷酸酶测定缓冲液。
157.根据权利要求156所述的用途，其中所述磷酸酶底物包含磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系、Fast Red TR/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3,2'(5'-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
158.根据权利要求156或157所述的用途，其中所述磷酸酶底物以固体或液体形式设置或附着于固体介质，所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是纸或管。
159.根据权利要求156-158中任一项所述的用途，其中所述粪便样品附着于固体介质，所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
160.根据权利要求156-159中任一项所述的用途，其中所述试剂盒包含用于测量限定量的粪便的工具、装有过滤装置的瓶或管、以及含有与磷酸酶测定缓冲液混合的磷酸酶底物的管。
161.根据权利要求156-160中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
162.根据权利要求156-161中任一项所述的用途，其中所述粪便被包含唾液、尿液、血液、血浆、血清、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液或体腔液的生物样品所取代。
163.一种用于检测初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的试剂盒，其中所述试剂盒包含用于测量限定量的粪便的工具、粪便稀释缓冲液、磷酸酶底物和磷酸酶测定缓冲液。
164.根据权利要求163所述的试剂盒，其中所述初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的特征在于受试者具有比平均正常值小1％至100％的磷酸酶含量。
165.根据权利要求163所述的试剂盒，其中所述初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的特征在于受试者具有包含磷酸酶含量随时间持续减少的磷酸酶时间分布曲线。
166.根据权利要求165所述的试剂盒，其中所述持续减少与先前测量的含量相比减少约50％。
167.根据权利要求163-166中任一项所述的试剂盒，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
168.根据权利要求163-167中任一项所述的试剂盒，其中所述磷酸酶底物包含磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系、固红/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3,2'(5'-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
169.根据权利要求163-168中任一项所述的试剂盒，其中所述磷酸酶底物以固体或液体形式设置或附着于固体介质，所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是纸或管。
170.根据权利要求163至169中任一项所述的试剂盒，其中所述粪便样品附着于固体介质，所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
171.根据权利要求163-170中任一项所述的试剂盒，其中所述试剂盒包含用于测量限定量的粪便的工具、装有过滤装置的瓶或管、以及含有与磷酸酶测定缓冲液混合的磷酸酶底物的管。
172.根据权利要求163-171中任一项所述的试剂盒，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
173.根据权利要求163-172中任一项所述的试剂盒，其中所述受试者提供包含粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液的生物样品，优选是粪便样品。
174.根据权利要求163-173中任一项所述的试剂盒，其中所述试剂盒进一步包含用于测量来自受试者的一个或多于一个的生物样品中的血清内毒素、促炎核苷酸、细胞因子、趋化因子、细胞因子受体拮抗剂或抗炎因子中的一种或多种的含量的装置，其中所述一个或多于一个的生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
175.根据权利要求163-174中任一项所述的试剂盒，其中所述初期糖尿病或糖尿病包含2型糖尿病、妊娠糖尿病或尿崩症。
176.根据权利要求163-174中任一项所述的试剂盒，其中所述初期代谢疾病或代谢疾病包含心血管疾病、冠心病、脑血管疾病、中风、外周血管疾病、非酒精性脂肪肝疾病、视网膜病变、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、关节炎、湿疹或牛皮癣。
177.根据权利要求163-174中任一项所述的试剂盒，其中所述初期代谢综合征或代谢综合征包含肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压、脂肪肝或者它们的组合。
178.用于检测初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的试剂盒的用途，其中所述试剂盒包含用于测量限定量的粪便的工具、粪便稀释缓冲液、磷酸酶底物和磷酸酶测定缓冲液。
179.根据权利要求178所述的用途，其中所述初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的特征在于受试者具有比平均正常值小1％至100％的磷酸酶含量。
180.根据权利要求178所述的用途，其中所述初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的特征在于受试者具有包含磷酸酶含量随时间持续减少的磷酸酶时间分布曲线。
181.根据权利要求180所述的用途，其中所述持续减少与先前测量的含量相比减少约50％。
182.根据权利要求179-181中任一项所述的用途，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
183.根据权利要求178-182中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶底物包括磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系、固红/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3,2'(5'-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
184.根据权利要求178-183中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶底物以固体或液体形式设置或附着于固体介质，所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是纸或管。
185.根据权利要求178-184中任一项所述的用途，其中所述粪便样品附着于固体介质，所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
186.根据权利要求178-185中任一项所述的用途，其中所述试剂盒包含用于测量限定量的粪便的工具、装有过滤装置的瓶或管、以及含有与磷酸酶测定缓冲液混合的磷酸酶底物的管。
187.根据权利要求178-186中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶包括碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
188.根据权利要求178-187中任一项所述的用途，其中所述受试者提供包含粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液的生物样品，优选是粪便样品。
189.根据权利要求178至188中任一项所述的用途，其中所述试剂盒进一步包含用于测量来自受试者的一个或多于一个的生物样品中的血清内毒素、促炎核苷酸、细胞因子、趋化因子、细胞因子受体拮抗剂或抗炎因子中的一种或多种的含量的装置，其中所述一个或多于一个的生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
190.根据权利要求178-189中任一项所述的用途，其中所述初期糖尿病或糖尿病包含2型糖尿病、妊娠糖尿病或尿崩症。
191.根据权利要求178-189中任一项所述的用途，其中所述初期代谢疾病或代谢疾病包含心血管疾病、冠心病、脑血管疾病、中风、外周血管疾病、非酒精性脂肪肝疾病、视网膜病变、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、关节炎、湿疹或牛皮癣。
192.根据权利要求178-189中任一项所述的用途，其中所述初期代谢综合征或代谢综合征包含肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压、脂肪肝或者它们的组合。
193.一种用于确定初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的预后的方法，包含生成磷酸酶时间分布曲线，所述生成包含测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中的所述磷酸酶含量，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
194.根据权利要求193所述的方法，其中所述多个时间点包含每天、每周、每月或每年。
195.根据权利要求193或194所述的方法，其中包含磷酸酶含量随时间增加的磷酸酶时间分布曲线表示减轻初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的症状或降低初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的风险的良好预后，以及包含磷酸酶含量随时间减少的磷酸酶时间分布曲线表示减轻初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的症状或降低初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的风险的不良预后。
196.根据权利要求195所述的方法，其中所述增加或减少是与先前测量的含量相比大约50％的变化。
197.根据权利要求195所述的方法，其中所述增加是达到约65-650U/克粪便的正常范围内磷酸酶含量。
198.根据权利要求195所述的方法，其中所述减少是达到比平均正常值小1％-100％的磷酸酶含量。
199.根据权利要求193-198中任一项所述的方法，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
200.根据权利要求193-199中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
201.根据权利要求193-199中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
202.根据权利要求193-199中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许发生酶反应；并使用分光光度计、生化分析仪、高效液相色谱(HPLC)机、色度计、光度计或者机械、生化、电气或电子设备来定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
203.根据权利要求193-199中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
204.根据权利要求193-199中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
205.根据权利要求193-199中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
206.根据权利要求193-199中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
207.根据权利要求203-206中任一项所述的方法，其中所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
208.根据权利要求200-207中任一项的方法，其中所述磷酸酶底物包含磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系、固红/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3，2’(5’-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
209.根据权利要求193-208中任一项所述的方法，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
210.根据权利要求193-209中任一项所述的方法，其中所述生物样品包含粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液，优选是粪便样品。
211.根据权利要求193-210中任一项所述的方法，进一步包含测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中的血清内毒素、促炎核苷酸、细胞因子、趋化因子、细胞因子受体的拮抗剂或抗炎因子的含量，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
212.根据权利要求193-211中任一项所述的方法，其中所述初期糖尿病或糖尿病包括2型糖尿病、妊娠糖尿病或尿崩症。
213.根据权利要求193-211中任一项所述的方法，其中所述初期代谢疾病或代谢疾病包含心血管疾病、冠心病、脑血管疾病、中风、外周血管疾病、非酒精性脂肪肝疾病、视网膜病变、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、关节炎、湿疹或牛皮癣。
214.根据权利要求193-211中任一项所述的方法，其中所述初期代谢综合征或代谢综合征包括肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压、脂肪肝或者它们的组合。
215.用于确定初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的预后的磷酸酶底物的用途，包括生成磷酸酶时间分布曲线，所述生成包含测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中磷酸酶含量，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
216.根据权利要求215所述的用途，其中所述多个时间点包含每天、每周、每月或每年。
217.根据权利要求215或216所述的用途，其中包含磷酸酶含量随时间的增加的磷酸酶时间分布曲线表示减轻初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的症状或降低初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的风险的良好预后，以及包含磷酸酶含量随时间的减少的磷酸酶时间分布曲线表示减轻初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的症状或降低初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的风险的不良预后。
218.根据权利要求217所述的用途，其中所述增加或减少是与先前测量的含量相比大约50％的变化。
219.根据权利要求217所述的用途，其中所述增加是达到大约在65-650U/克粪便的正常范围内的磷酸酶含量。
220.根据权利要求217所述的用途，其中所述减少是达到比平均正常值小1％-100％的磷酸酶含量。
221.根据权利要求215-220中任一项所述的用途，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
222.根据权利要求215-221中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
223.根据权利要求215-221中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
224.根据权利要求215-221中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许发生酶反应；并使用分光光度计、生化分析仪、高效液相色谱(HPLC)机、色度计、光度计或者机械、生化、电气或电子设备来定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
225.根据权利要求215-221中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
226.根据权利要求215-221中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
227.根据权利要求215-221中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
228.根据权利要求215-221中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
229.根据权利要求225-228所述的用途，其中所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
230.根据权利要求215-229中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶底物包含磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系、固红/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3，2’(5’-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
231.根据权利要求215-230中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
232.根据权利要求215-231中任一项所述的用途，其中所述生物样品包含粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液，优选是粪便样品。
233.根据权利要求215-232中任一项所述的用途，进一步包含测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中血清内毒素、促炎核苷酸、细胞因子、趋化因子、细胞因子受体的拮抗剂或抗炎因子的含量，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
234.根据权利要求215-233中任一项所述的用途，其中所述初期糖尿病或糖尿病包括2型糖尿病、妊娠糖尿病或尿崩症。
235.根据权利要求215-233中任一项所述的用途，其中所述初期代谢疾病或代谢疾病包含心血管疾病、冠心病、脑血管疾病、中风、外周血管疾病、非酒精性脂肪肝疾病、视网膜病变、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、关节炎、湿疹或牛皮癣。
236.根据权利要求215-233中任一项所述的用途，其中所述初期代谢综合征或代谢综合征包含肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压、脂肪肝或者它们的组合。
237.用于检测初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的磷酸酶时间分布曲线的用途，包含测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中的所述磷酸酶含量，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
238.根据权利要求237所述的用途，其中所述多个时间点包含每天、每周、每月或每年。
239.根据权利要求237或238所述的用途，其中比平均正常值小1％-100％的磷酸酶含量表示初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征。
240.根据权利要求237或238所述的用途，其中包含随时间而持续减少的磷酸酶含量的所述磷酸酶时间分布曲线表示初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征。
241.根据权利要求240所述的用途，其中所述持续减少与先前测量的含量相比减少约50％。
242.根据权利要求237-241中任一项所述的用途，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
243.根据权利要求237-242中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
244.根据权利要求237-242中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
245.根据权利要求237-242中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许发生酶反应；并使用分光光度计、生化分析仪、高效液相色谱(HPLC)机、色度计、光度计或者机械、生化、电气或电子设备来定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
246.根据权利要求237-242中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
247.根据权利要求237-242中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
248.根据权利要求237-242中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
249.根据权利要求237-242中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
250.根据权利要求246-249所述的用途，其中所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
251.根据权利要求243-250中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶底物包含磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系、固红/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3，2’(5’-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
252.根据权利要求237-251中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
253.根据权利要求237-252中任一项所述的用途，其中所述生物样品包含粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液，优选是粪便样品。
254.根据权利要求237-253中任一项所述的用途，进一步包含测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中血清内毒素、促炎核苷酸、细胞因子、趋化因子、细胞因子受体的拮抗剂或抗炎因子中的含量，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
255.根据权利要求237-254中任一项所述的用途，其中所述初期糖尿病或糖尿病包括2型糖尿病、妊娠糖尿病或尿崩症。
256.根据权利要求237-254中任一项所述的用途，其中所述初期代谢疾病或代谢疾病包含心血管疾病、冠心病、脑血管疾病、中风、外周血管疾病、非酒精性脂肪肝疾病、视网膜病变、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、关节炎、湿疹或牛皮癣。
257.根据权利要求237-254中任一项所述的用途，其中所述初期代谢综合征或代谢综合征包含肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压、脂肪肝或者它们的组合。
258.一种用于诊断慢性疾病、急性疾病、感染性疾病、紊乱或综合征或确定慢性疾病、急性疾病、感染性疾病、紊乱或综合征的预后的方法，包含生成磷酸酶时间分布曲线，所述生成包含测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中的所述磷酸酶含量，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
259.根据权利要求258所述的方法，其中所述多个时间点包含每天、每周、每月或每年。
260.根据权利要求258或259所述的方法，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
261.根据权利要求258-260中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
262.根据权利要求258-260中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
263.根据权利要求258-260中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许发生酶反应；并使用分光光度计、生化分析仪、高效液相色谱(HPLC)机、色度计、光度计或者机械、生化、电气或电子设备来定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
264.根据权利要求258-260中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
265.根据权利要求258-260中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
266.根据权利要求258-260中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
267.根据权利要求258-260中任一项所述的方法，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
268.根据权利要求264-267所述的方法，其中所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
269.根据权利要求261-268中任一项所述的方法，其中所述磷酸酶底物包含磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系、固红/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3，2’(5’-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
270.根据权利要求258-269中任一项所述的方法，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
271.根据权利要求258-270中任一项所述的方法，其中所述生物样品包含粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液，优选是粪便样品。
272.根据权利要求258-271中任一项所述的方法，其中所述慢性疾病包含痤疮、艾滋病、强直性脊柱炎、哮喘、艾迪生氏病、过敏性鼻炎、阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化(ALS，路格里克氏病)、再生障碍性贫血、关节炎、动脉粥样硬化、注意力缺陷多动障碍(ADHD，ADD)、自闭症谱系障碍、良性前列腺肥大、双相情感障碍、支气管扩张症、癌症、心力衰竭、心肌病、慢性酒精中毒、慢性贫血、慢性肝炎、慢性阿米巴病、慢性阻塞性肺病、慢性胃炎、慢性食管炎、慢性口腔疾病、慢性中毒、慢性肾脏疾病、胶原性疾病、克罗恩氏病、库兴氏病、囊性纤维化、痴呆、皮肌炎、抑郁症、节律障碍、饮食紊乱(神经性厌食症、神经性贪食、暴食)、湿疹、子宫内膜异位症、癫痫、纤维化肺泡炎、胃食管反流性疾病(GERD)、青光眼、痛风、格雷夫斯病、血友病、高脂血症、垂体机能亢进症，垂体功能减退症、垂体腺瘤、甲状腺机能减退症、特发性血小板减少性紫癜、更年期、偏头痛、运动神经元疾病、多发性硬化症、肌营养不良症、重症肌无力、肌病、神经病、肥胖症、强迫症、骨关节炎、骨质疏松症、麻痹症(截瘫、四肢麻痹症)、帕金森病、佩吉特氏病、结节性多动脉炎、多囊性卵巢疾病、牛皮癣、银屑病关节炎、肺间质纤维化、反射性交感神经营养不良(RSD)综合征、类风湿关节炎、硬皮病、精神分裂症、干燥综合征、吸烟和烟草相关疾病、系统性红斑狼疮、三叉神经痛、结核病、溃疡性结肠炎或尿失禁。
273.根据权利要求258-271中任一项所述的方法，其中所述急性疾病包含急性酒精中毒、急性阿米巴病、急性听觉疾病、急性脑疾病、急性癌症、急性心血管疾病、急性牙科疾病、急性皮肤病、急性食管疾病、急性胃肠疾病、急性肾脏疾病、急性肝病、急性肌肉疾病、急性眼部疾病、急性中毒、急性口腔疾病、急性骨关节炎、急性咽部疾病、急性前列腺疾病、急性物理性损伤(创伤)、急性腹膜疾病、急性呼吸道疾病或急性泌尿生殖系疾病。
274.根据权利要求258-271中任一项所述的方法，其中所述感染性疾病是由包含炭疽芽孢杆菌、百日咳博德特氏菌、布氏疏螺旋体、流产布鲁氏菌、犬布氏杆菌、羊布鲁氏菌、猪布鲁氏菌、空肠弯曲杆菌、肺炎衣原体、沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体、肉毒杆菌、艰难梭菌、产气荚膜梭菌、破伤风杆菌、白喉棒状杆菌、痢疾阿米巴、粪链球菌、粪肠球菌、大肠杆菌、肠毒素大肠杆菌、肠致病性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌0157：H7、土拉弗朗西斯菌、真菌(白色念珠菌)、流行性感冒嗜血杆菌、幽门螺杆菌、利什曼原虫(黑热病)、嗜肺军团菌、问号钩端螺旋体、单核细胞增生李斯特氏菌、麻风分枝杆菌、结核分枝杆菌、肺炎支原体、淋病奈瑟氏球菌、脑膜炎奈瑟氏菌、寄生虫(原生动物、寄生蠕虫、皮外寄生虫)、疟原虫(疟疾)、铜绿假单胞菌、立克次体、沙门氏菌亚种、肠道沙门菌、鼠伤寒沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌、苍白密螺旋体、霍乱弧菌或鼠疫耶尔森氏菌的有机组织引起的。
275.根据权利要求258-271中任一项所述的方法，其中所述感染性疾病是由包含腺病毒、柯萨奇病毒、登革热病毒、埃博拉病毒、EB病毒(Epstein-Barr virus)、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、流感病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、人乳头瘤病毒、人类副流感病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病病毒、人类呼吸道合胞病毒、风疹病毒、水痘带状疱疹病毒或黄热病毒的有机组织引起的。
276.用于检测慢性疾病、急性疾病、感染性疾病、紊乱或综合征的磷酸酶底物的用途，包含生成磷酸酶时间分布曲线，所述生成包含测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中的所述磷酸酶含量，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
277.根据权利要求276所述的用途，其中所述多个时间点包含每天、每周、每月或每年。
278.根据权利要求276或277的用途，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
279.根据权利要求276-278中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
280.根据权利要求276-278中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
281.根据权利要求276-278中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许发生酶反应；并使用分光光度计、生化分析仪、高效液相色谱(HPLC)机、色度计、光度计或者机械、生化、电气或电子设备来定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
282.根据权利要求276-278中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
283.根据权利要求276-278中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
284.根据权利要求276-278中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
285.根据权利要求276-278中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
286.根据权利要求282-285所述的用途，其中所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
287.根据权利要求279-286中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶底物包含磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系、固红/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3，2’(5’-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
288.根据权利要求276-287中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
289.根据权利要求276-288中任一项所述的用途，其中所述生物样品包含粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液，优选是粪便样品。
290.根据权利要求276-289中任一项所述的用途，其中所述慢性疾病包含痤疮、艾滋病、强直性脊柱炎、哮喘、艾迪生氏病、过敏性鼻炎、阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化(ALS，路格里克氏病)、再生障碍性贫血、关节炎、动脉粥样硬化、注意力缺陷多动障碍(ADHD，ADD)、自闭症谱系障碍、良性前列腺肥大、双相情感障碍、支气管扩张症、癌症、心力衰竭、心肌病、慢性酒精中毒、慢性贫血、慢性肝炎、慢性阿米巴病、慢性阻塞性肺病、慢性胃炎、慢性食管炎、慢性口腔疾病、慢性中毒、慢性肾脏疾病、胶原性疾病、克罗恩氏病、库兴氏病、囊性纤维化、痴呆、皮肌炎、抑郁症、节律障碍、饮食紊乱(神经性厌食症、神经性贪食、暴食)、湿疹、子宫内膜异位症、癫痫、纤维化肺泡炎、胃食管反流性疾病(GERD)、青光眼、痛风、格雷夫斯病、血友病、高脂血症、垂体机能亢进症，垂体功能减退症、垂体腺瘤、甲状腺机能减退症、特发性血小板减少性紫癜、更年期、偏头痛、运动神经元疾病、多发性硬化症、肌营养不良症、重症肌无力、肌病、神经病、肥胖症、强迫症、骨关节炎、骨质疏松症、麻痹症(截瘫、四肢麻痹症)、帕金森病、佩吉特氏病、结节性多动脉炎、多囊性卵巢疾病、牛皮癣、银屑病关节炎、肺间质纤维化、反射性交感神经营养不良(RSD)综合征、类风湿关节炎、硬皮病、精神分裂症、干燥综合征、吸烟和烟草相关疾病、系统性红斑狼疮、三叉神经痛、结核病、溃疡性结肠炎或尿失禁。
291.根据权利要求276-289中任一项所述的用途，其中所述急性疾病包含急性酒精中毒、急性阿米巴病、急性听觉疾病、急性脑疾病、急性癌症、急性心血管疾病、急性牙科疾病、急性皮肤病、急性食管疾病、急性胃肠疾病、急性肾脏疾病、急性肝病、急性肌肉疾病、急性眼部疾病、急性中毒、急性口腔疾病、急性骨关节炎、急性咽部疾病、急性前列腺疾病、急性物理性损伤(创伤)、急性腹膜疾病、急性呼吸道疾病或急性泌尿生殖系疾病。
292.根据权利要求276-289中任一项所述的用途，其中所述感染性疾病是由包含炭疽芽孢杆菌、百日咳博德特氏菌、布氏疏螺旋体、流产布鲁氏菌、犬布氏杆菌、羊布鲁氏菌、猪布鲁氏菌、空肠弯曲杆菌、肺炎衣原体、沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体、肉毒杆菌、艰难梭菌、产气荚膜梭菌、破伤风杆菌、白喉棒状杆菌、痢疾阿米巴、粪链球菌、粪肠球菌、大肠杆菌、肠毒素大肠杆菌、肠致病性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌0157：H7、土拉弗朗西斯菌、真菌(白色念珠菌)、流行性感冒嗜血杆菌、幽门螺杆菌、利什曼原虫(黑热病)、嗜肺军团菌、问号钩端螺旋体、单核细胞增生李斯特氏菌、麻风分枝杆菌、结核分枝杆菌、肺炎支原体、淋病奈瑟氏球菌、脑膜炎奈瑟氏菌、寄生虫(原生动物、寄生蠕虫、皮外寄生虫)、疟原虫(疟疾)、铜绿假单胞菌、立克次体、沙门氏菌亚种、肠道沙门菌、鼠伤寒沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌、苍白密螺旋体、霍乱弧菌或鼠疫耶尔森氏菌的有机组织引起的。
293.根据权利要求276-289中任一项所述的用途，其中所述感染性疾病是由包含腺病毒、柯萨奇病毒、登革热病毒、埃博拉病毒、EB病毒(Epstein-Barr virus)、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、流感病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、人乳头瘤病毒、人类副流感病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病病毒、人类呼吸道合胞病毒、风疹病毒、水痘带状疱疹病毒或黄热病毒的有机组织引起的。
294.用于检测慢性疾病、急性疾病、感染性疾病、紊乱或综合征的试剂盒的用途，其中所述试剂盒包含用于测量限定量的粪便的工具、生物样品稀释缓冲液、磷酸酶底物和磷酸酶测定缓冲液。
295.根据权利要求294所述的用途，其中所述磷酸酶底物包含磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系、固红/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3，2’(5’-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
296.根据权利要求294或295所述的用途，其中所述磷酸酶的底物附着于固体介质上，所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
297.根据权利要求294-296中任一项所述的用途，其中所述检测包含测量来自受试者的生物样品中磷酸酶含量。
298.根据权利要求297所述的用途，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
299.根据权利要求297或298所述的用途，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
300.根据权利要求297-299中任一项所述的用途，其中所述生物样品包含粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液，优选是粪便样品。
301.根据权利要求294-300中任一项所述的用途，其中所述慢性疾病包含痤疮、艾滋病、强直性脊柱炎、哮喘、艾迪生氏病、过敏性鼻炎、阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化(ALS，路格里克氏病)、再生障碍性贫血、关节炎、动脉粥样硬化、注意力缺陷多动障碍(ADHD，ADD)、自闭症谱系障碍、良性前列腺肥大、双相情感障碍、支气管扩张症、癌症、心力衰竭、心肌病、慢性酒精中毒、慢性贫血、慢性肝炎、慢性阿米巴病、慢性阻塞性肺病、慢性胃炎、慢性食管炎、慢性口腔疾病、慢性中毒、慢性肾脏疾病、胶原性疾病、克罗恩氏病、库兴氏病、囊性纤维化、痴呆、皮肌炎、抑郁症、节律障碍、饮食紊乱(神经性厌食症、神经性贪食、暴食)、湿疹、子宫内膜异位症、癫痫、纤维化肺泡炎、胃食管反流性疾病(GERD)、青光眼、痛风、格雷夫斯病、血友病、高脂血症、垂体机能亢进症，垂体功能减退症、垂体腺瘤、甲状腺机能减退症、特发性血小板减少性紫癜、更年期、偏头痛、运动神经元疾病、多发性硬化症、肌营养不良症、重症肌无力、肌病、神经病、肥胖症、强迫症、骨关节炎、骨质疏松症、麻痹症(截瘫、四肢麻痹症)、帕金森病、佩吉特氏病、结节性多动脉炎、多囊性卵巢疾病、牛皮癣、银屑病关节炎、肺间质纤维化、反射性交感神经营养不良(RSD)综合征、类风湿关节炎、硬皮病、精神分裂症、干燥综合征、吸烟和烟草相关疾病、系统性红斑狼疮、三叉神经痛、结核病、溃疡性结肠炎或尿失禁。
302.根据权利要求294-300中任一项所述的用途，其中所述急性疾病包含急性酒精中毒、急性阿米巴病、急性听觉疾病、急性脑疾病、急性癌症、急性心血管疾病、急性牙科疾病、急性皮肤病、急性食管疾病、急性胃肠疾病、急性肾脏疾病、急性肝病、急性肌肉疾病、急性眼部疾病、急性中毒、急性口腔疾病、急性骨关节炎、急性咽部疾病、急性前列腺疾病、急性物理性损伤(创伤)、急性腹膜疾病、急性呼吸道疾病或急性泌尿生殖系疾病。
303.根据权利要求294-300中任一项所述的用途，其中所述感染性疾病是由包含炭疽芽孢杆菌、百日咳博德特氏菌、布氏疏螺旋体、流产布鲁氏菌、犬布氏杆菌、羊布鲁氏菌、猪布鲁氏菌、空肠弯曲杆菌、肺炎衣原体、沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体、肉毒杆菌、艰难梭菌、产气荚膜梭菌、破伤风杆菌、白喉棒状杆菌、痢疾阿米巴、粪链球菌、粪肠球菌、大肠杆菌、肠毒素大肠杆菌、肠致病性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌0157：H7、土拉弗朗西斯菌、真菌(白色念珠菌)、流行性感冒嗜血杆菌、幽门螺杆菌、利什曼原虫(黑热病)、嗜肺军团菌、问号钩端螺旋体、单核细胞增生李斯特氏菌、麻风分枝杆菌、结核分枝杆菌、肺炎支原体、淋病奈瑟氏球菌、脑膜炎奈瑟氏菌、寄生虫(原生动物、寄生蠕虫、皮外寄生虫)、疟原虫(疟疾)、铜绿假单胞菌、立克次体、沙门氏菌亚种、肠道沙门菌、鼠伤寒沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌、苍白密螺旋体、霍乱弧菌或鼠疫耶尔森氏菌的有机组织引起的。
304.根据权利要求294-300中任一项所述的用途，其中所述感染性疾病是由包含腺病毒、柯萨奇病毒、登革热病毒、埃博拉病毒、EB病毒(Epstein-Barr virus)、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、流感病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、人乳头瘤病毒、人类副流感病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病病毒、人类呼吸道合胞病毒、风疹病毒、水痘带状疱疹病毒或黄热病毒的有机组织引起的。
305.用于检测慢性疾病、急性疾病、感染性疾病、紊乱或综合征的磷酸酶时间分布曲线的用途，包含测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中磷酸酶含量，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
306.根据权利要求305所述的用途，其中所述多个时间点包含每天、每周、每月或每年。
307.根据权利要求305或306所述的用途，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
308.根据权利要求305-307中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
309.根据权利要求305-307中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
310.根据权利要求305-307中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供固体或液体形式的磷酸酶底物；
将所述磷酸酶底物与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许发生酶反应；并使用分光光度计、生化分析仪、高效液相色谱(HPLC)机、色度计、光度计或者机械、生化、电气或电子设备来定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
311.根据权利要求305-307中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
312.根据权利要求305-307中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供具有附着于其上的磷酸酶底物的固体介质；
使所述固体介质与生物样品接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
313.根据权利要求305-307中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许颜色显现；
将所述显现的颜色与标准照片进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
314.根据权利要求305-307中任一项所述的用途，其中所述测量包含：
提供用于将生物样品附着到其上的固体介质；
将所述生物样品附着到所述固体介质上；
使所述固体介质与磷酸酶底物接触；
等待指定的时间段以允许像素化的颜色图案显现；
计数照片的像素；
将所述像素的数量与标准进行比较；以及
定量所述生物样品中的所述磷酸酶含量。
315.根据权利要求311-314所述的用途，其中所述固体介质包含膜、纸、棒、玻璃、塑料、木材、珠、管、瓶、载玻片或拭子，优选是尼龙或硝酸纤维素膜。
316.根据权利要求308-315中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶底物包含磷酸对硝基苯酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐/硝基四氮唑蓝底物系、固红/萘酚底物系、CDP-STAR底物(2-氯-5-(4-甲氧基螺{1,2-二氧杂环丁烷-3，2’(5’-氯)-三环[3.3.1.13.7]癸烷}-4-基)-1-苯基磷酸二钠盐)或者它们的组合。
317.根据权利要求305-316中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
318.根据权利要求305-317中任一项所述的用途，其中所述生物样品包含粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液，优选是粪便样品。
319.根据权利要求305-318中任一项所述的用途，其中所述慢性疾病包含痤疮、艾滋病、强直性脊柱炎、哮喘、艾迪生氏病、过敏性鼻炎、阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化(ALS，路格里克氏病)、再生障碍性贫血、关节炎、动脉粥样硬化、注意力缺陷多动障碍(ADHD，ADD)、自闭症谱系障碍、良性前列腺肥大、双相情感障碍、支气管扩张症、癌症、心力衰竭、心肌病、慢性酒精中毒、慢性贫血、慢性肝炎、慢性阿米巴病、慢性阻塞性肺病、慢性胃炎、慢性食管炎、慢性口腔疾病、慢性中毒、慢性肾脏疾病、胶原性疾病、克罗恩氏病、库兴氏病、囊性纤维化、痴呆、皮肌炎、抑郁症、节律障碍、饮食紊乱(神经性厌食症、神经性贪食、暴食)、湿疹、子宫内膜异位症、癫痫、纤维化肺泡炎、胃食管反流性疾病(GERD)、青光眼、痛风、格雷夫斯病、血友病、高脂血症、垂体机能亢进症，垂体功能减退症、垂体腺瘤、甲状腺机能减退症、特发性血小板减少性紫癜、更年期、偏头痛、运动神经元疾病、多发性硬化症、肌营养不良症、重症肌无力、肌病、神经病、肥胖症、强迫症、骨关节炎、骨质疏松症、麻痹症(截瘫、四肢麻痹症)、帕金森病、佩吉特氏病、结节性多动脉炎、多囊性卵巢疾病、牛皮癣、银屑病关节炎、肺间质纤维化、反射性交感神经营养不良(RSD)综合征、类风湿关节炎、硬皮病、精神分裂症、干燥综合征、吸烟和烟草相关疾病、系统性红斑狼疮、三叉神经痛、结核病、溃疡性结肠炎或尿失禁。
320.根据权利要求305-318中任一项所述的用途，其中所述急性疾病包含急性酒精中毒、急性阿米巴病、急性听觉疾病、急性脑疾病、急性癌症、急性心血管疾病、急性牙科疾病、急性皮肤病、急性食管疾病、急性胃肠疾病、急性肾脏疾病、急性肝病、急性肌肉疾病、急性眼部疾病、急性中毒、急性口腔疾病、急性骨关节炎、急性咽部疾病、急性前列腺疾病、急性物理性损伤(创伤)、急性腹膜疾病、急性呼吸道疾病或急性泌尿生殖系疾病。
321.根据权利要求305-318中任一项所述的用途，其中所述感染性疾病是由包含炭疽芽孢杆菌、百日咳博德特氏菌、布氏疏螺旋体、流产布鲁氏菌、犬布氏杆菌、羊布鲁氏菌、猪布鲁氏菌、空肠弯曲杆菌、肺炎衣原体、沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体、肉毒杆菌、艰难梭菌、产气荚膜梭菌、破伤风杆菌、白喉棒状杆菌、痢疾阿米巴、粪链球菌、粪肠球菌、大肠杆菌、肠毒素大肠杆菌、肠致病性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌0157：H7、土拉弗朗西斯菌、真菌(白色念珠菌)、流行性感冒嗜血杆菌、幽门螺杆菌、利什曼原虫(黑热病)、嗜肺军团菌、问号钩端螺旋体、单核细胞增生李斯特氏菌、麻风分枝杆菌、结核分枝杆菌、肺炎支原体、淋病奈瑟氏球菌、脑膜炎奈瑟氏菌、寄生虫(原生动物、寄生蠕虫、皮外寄生虫)、疟原虫(疟疾)、铜绿假单胞菌、立克次体、沙门氏菌亚种、肠道沙门菌、鼠伤寒沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌、苍白密螺旋体、霍乱弧菌或鼠疫耶尔森氏菌的有机组织引起的。
322.根据权利要求305-318中任一项所述的用途，其中所述感染性疾病是由包含腺病毒、柯萨奇病毒、登革热病毒、埃博拉病毒、EB病毒(Epstein-Barr virus)、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、流感病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、人乳头瘤病毒、人类副流感病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病病毒、人类呼吸道合胞病毒、风疹病毒、水痘带状疱疹病毒或黄热病毒的有机组织引起的。
323.一种用于确定生物样品中磷酸酶含量的酶联免疫吸附测定(ELISA)系统，包含固相支持系统、特异性结合磷酸酶的初级和/或二级抗体、特异性结合所述初级和/或二级抗体的辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)标记的抗体、以及用于HRP或AP的显色底物。
324.根据权利要求323所述的系统，其中所述生物样品包含粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液，优选是粪便样品。
325.用于确定生物样品中磷酸酶含量的酶联免疫吸附测定(ELISA)系统的用途，所述系统包含固相支持系统、特异性结合磷酸酶的初级和/或二级抗体、特异性结合所述初级和/或二级抗体的辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)标记的抗体、以及用于HRP或AP的显色底物。
326.根据权利要求325所述的用途，其中所述生物样品包含粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液，优选是粪便样品。
327.用于检测初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的酶联免疫吸附测定(ELISA)系统，其中所述系统包含固相支持系统、特异性结合磷酸酶的初级和/或二级抗体、特异性结合所述初级和/或二级抗体的辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)标记的抗体、以及用于HRP或AP的显色底物。
328.根据权利要求327所述的系统，其中所述初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的特征在于受试者具有比平均正常值小1％至100％的磷酸酶含量。
329.根据权利要求327所述的系统，其中所述初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的特征在于受试者具有包含磷酸酶含量随时间持续减少的磷酸酶时间分布曲线。
330.根据权利要求329所述的系统，其中所述持续减少与先前测量的含量相比减少约50％。
331.根据权利要求328-330中任一项所述的系统，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
332.根据权利要求327-331中任一项所述的系统，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
333.根据权利要求328-332中任一项所述的系统，其中所述受试者提供包含粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液的生物样品，优选是粪便样品。
334.根据权利要求327-333中任一项所述的系统，其中所述系统进一步包含用于测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中血清内毒素、促炎核苷酸、细胞因子、趋化因子、细胞因子受体的拮抗剂或抗炎因子中的一种或多种的含量的装置，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
335.根据权利要求327-334中任一项所述的系统，其中所述初期糖尿病或糖尿病包含2型糖尿病、妊娠糖尿病或尿崩症。
336.根据权利要求327-334中任一项所述的系统，其中所述初期代谢疾病或代谢疾病包含心血管疾病、冠心病、脑血管疾病、中风、外周血管疾病、非酒精性脂肪肝疾病、视网膜病变、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、关节炎、湿疹或牛皮癣。
337.根据权利要求327-334中任一项所述的系统，其中所述初期代谢综合征或代谢综合征包含肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压、脂肪肝或者它们的组合。
338.用于检测初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的酶联免疫吸附测定(ELISA)系统的用途，其中该系统包含固相支持系统、特异性结合磷酸酶的初级和/或二级抗体、特异性结合所述初级和/或二级抗体的辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)标记的抗体、以及用于HRP或AP的显色底物。
339.根据权利要求338所述的用途，其中所述初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的特征在于受试者具有比平均正常值小1％至100％的磷酸酶含量。
340.根据权利要求338所述的用途，其中所述初期糖尿病、初期代谢疾病、初期代谢综合征、糖尿病、代谢疾病或代谢综合征的特征在于受试者具有包含磷酸酶含量随时间持续减少的磷酸酶时间分布曲线。
341.根据权利要求340所述的用途，其中所述持续减少与先前测量的含量相比减少约50％。
342.根据权利要求339-341中任一项所述的用途，其中所述受试者是人、牛、猪、绵羊、山羊、奶牛、马、狗、猫、猴、兔、大鼠、小鼠、鸡或火鸡，优选是人。
343.根据权利要求338-342中任一项所述的用途，其中所述磷酸酶包含碱性磷酸酶、肠碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶、组织非特异性碱性磷酸酶(肝/骨/肾碱性磷酸酶)、生殖细胞碱性磷酸酶、嗜中性粒细胞碱性磷酸酶、酸性磷酸酶或具有磷酸酶活性的肽，优选是肠碱性磷酸酶。
344.根据权利要求339-343中任一项所述的用途，其中所述受试者提供包粪便、唾液、尿液、血液、血浆、血清、泪液、汗液、脓液、胃液、肠液、眼液、腹膜液、阴道液、脑脊液或体腔液的生物样品，优选是粪便样品。
345.根据权利要求338-344中任一项所述的用途，其中所述系统进一步包含用于测量来自受试者的一个或多于一个生物样品中血清内毒素、促炎核苷酸、细胞因子、趋化因子、细胞因子受体的拮抗剂或抗炎因子中的一种或多种的含量的装置，其中所述一个或多于一个生物样品在单个时间点或在多个时间点收集。
346.根据权利要求338-345中任一项所述的用途，其中所述初期糖尿病或糖尿病包含2型糖尿病、妊娠糖尿病或尿崩症。
347.根据权利要求338-345中任一项所述的用途，其中所述初期代谢疾病或代谢疾病包含心血管疾病、冠心病、脑血管疾病、中风、外周血管疾病、非酒精性脂肪肝疾病、视网膜病变、哮喘、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、阿尔茨海默病、关节炎、湿疹或牛皮癣。
348.根据权利要求338-345中任一项所述的用途，其中所述初期代谢综合征或代谢综合征包含肥胖症、高血糖症、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血脂异常、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低水平高密度脂蛋白(HDL)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高血压、脂肪肝或者它们的组合。
349.一种定量粪便样品中的碱性磷酸酶的方法，包含：
使所述粪便样品与磷酸酶底物接触；
使所述粪便样品中所含有的碱性磷酸酶水解所述磷酸酶底物以释放无机磷酸盐；
用孔雀石绿钼酸盐处理所述无机磷酸盐以形成绿色钼磷酸复合物；并且
定量所述复合物的含量；
其中所述复合物的含量与所述粪便样品中的所述碱性磷酸酶的含量成比例。
350.基于孔雀石绿的磷酸盐定量测定的用途，其中所述测定包含：
使所述粪便样品与磷酸酶底物接触；
使所述粪便样品中含有的碱性磷酸酶水解所述磷酸酶底物以释放无机磷酸盐；
用孔雀石绿钼酸盐处理所述无机磷酸盐以形成绿色钼磷酸复合物；并且
定量所述复合物的含量；
其中所述复合物的含量与所述粪便样品中所述碱性磷酸酶的含量成比例。
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