CN107095309B - 海洋生物复合钙粉制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种海洋生物复合钙粉制备方法,包括下列步骤:(1)水产品下脚料清洗;(2)破碎;(3)微生物发酵;(4)酶解和酸解;(5)复配;(6)干燥;(7)超微粉碎。本发明利用虾壳、蟹壳、鱼骨等海洋生物资源,通过酶解、有机酸、氨基酸复配的制备工艺,制得海洋生物钙粉,其生物利用率高,具有良好的应用前景。本发明在制备工艺中,增加发酵环节,同时采用酶解和酸解相互交替进行的步骤,可以大大提高生物钙粉的提取率和生物利用率。
Description
技术领域
本发明涉及一种海洋生物复合钙粉制备方法,属于生物技术领域。
背景技术
钙是人体必不可少的元素,膳食中钙营养状况与人体生长发育、心血管疾病以及慢性病密切相关,摄入足量的钙对改善骨质疏松症状具有重要的作用,目前钙剂产品主要分为无机钙、有机酸钙、氨基酸钙等类别,研究发现钙的来源不同、存在形式不同对钙的利用率有较大差异,例如王晓峰(2010)等对8种钙制剂在大鼠中的钙吸收情况对比发现,鱼骨钙组制剂的表观吸收率可达93%,优于动物钙制品;张文静(2015)等发现从虾壳中制取的PHC-Ca有促进钙吸收的效果,其生物利用率优于相同钙含量的柠檬酸钙以及虾壳粉,因此利用海洋生物资源制备钙类产品成为发展的趋势。
浙江省是海洋大省,也是国家蓝色海洋经济战略步骤的重要实施地之一,“蓝色粮仓”战略是浙江省食品保障的重要途径。浙江沿海海洋资源丰富,特别是虾类、蟹类、鱼类产量较大,然而每年虾壳、蟹壳、鱼骨等下脚料没有进行有效的综合利用,造成资源的巨大浪费。目前市场上生物活性钙产品较少,并没有形成规模,而且海洋生物钙的利用更差。
浙江有多数虾、蟹类、鱼类水产加工企业的下脚料虾壳、蟹壳、鱼骨数量非常多,目前下脚料主要以废弃物或者低值鱼粉的形式处理,造成资源的巨大浪费甚至污染环境,本发明开展虾蟹壳海洋生物钙的提取、产品开发等研究,对浙江省打造“蓝色粮仓”、提升海洋资源利用率和水产加工可持续发展具有重要意义:(1)可以提高海洋资源的综合利用率;(2)丰富目前海洋生物钙产品种类,优化钙剂消费市场;(3)提升水产加工钙源下脚料的高值化。本项目符合海洋精深加工产业的战略,对当前水产加工产业结构的建设具有重要意义,同时可为同行业、类似行业的精深加工利用的研发和技术推广起到示范和带动作用,必将产生巨大的经济、社会效益。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是:提供一种海洋生物复合钙粉制备方法。
本发明提供的海洋生物复合钙粉制备方法,包括下列步骤:
(1)水产品下脚料清洗:用清水将水产品下脚料清洗2-3次,然后烘干。
(2)破碎:将烘干的水产品下脚料进行破碎处理,获得10-30目的粉末。
(3)微生物发酵:将100重量份数的粉末放入3-5倍重量的水中,煮沸1-2h;冷却到30-35℃,加入米曲霉菌种和乳酸菌菌种各0.03-0.06份,充分拌匀,升温到35-40℃,发酵3-5天。
与现有的钙粉制备方法不同,本发明在制备过程中,加入发酵环节,通过微生物的发酵,将虾壳、蟹壳、鱼骨等待提取物料进行生物自然降解,利于后期的酶解和酸解的进行。
发酵的时间不能过长,否则,虾壳、蟹壳、鱼骨中的钙元素会大量被微生物吸收,不利于后期的进一步提取。
(4)酶解和酸解:发酵后的物料中加入组织蛋白酶和木瓜蛋白酶,组织蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量分别为物料重量的0.5-2%和1.5-3%;温度维持在30-50℃,并不断搅拌;然后升温到80-90℃,加入15-20重量份的有机酸,维持3-4h;迅速冷却至30℃,用5mol/LNaOH调pH至中性。
重复上述步骤1-3次,进行多次酶解和酸解;酶解和酸解结束后,升温到40℃维持30-50min,然后离心,收集上清液。
(5)复配:将得到的上清液加入3-5倍的水和3-5倍的复合酸,升温到40-60℃,同时超声波处理2-3h。复配的作用是将提取的钙转换成易吸收的活性状态。
(6)干燥:将步骤(5)的物料采用真空浓缩干燥,绝对压力为0.06-0.2MPa,温度为95-100℃,干燥2-3小时;
(7)超微粉碎,粉碎成200目的颗粒,然后筛分包装。
优选的,步骤(5)复配中用的复合酸包括柠檬酸、乳酸、L-天门冬氨酸和甘氨酸,四种酸的重量比是1:3-6:1-3:3-4。本发明选择用有机酸和氨基酸结合的方式,将钙转化成多种形式的酸-钙形式,提高生物利用率。
本发明中,水产品下脚料包括虾壳、蟹壳、鱼骨等海洋生物资源。
本发明的有益效果是:
本发明利用虾壳、蟹壳、鱼骨等海洋生物资源,通过酶解、有机酸、氨基酸复配的制备工艺,制得海洋生物钙粉,其生物利用率高,具有良好的应用前景。
本发明在制备工艺中,增加发酵环节,同时采用酶解和酸解相互交替进行的步骤,可以大大提高生物钙粉的提取率和生物利用率。
具体实施方式
实施例1
本实施例提供海洋生物复合钙粉制备方法,包括下列步骤:
(1)水产品下脚料清洗:用清水将水产品下脚料清洗3次,然后烘干。
(2)破碎:将烘干的水产品下脚料进行破碎处理,获得30目的粉末。
(3)微生物发酵:将100重量份数的粉末放入5倍重量的水中,煮沸2h;冷却到35℃,加入米曲霉菌种和乳酸菌菌种各0.06份,充分拌匀,升温到40℃,发酵5天。
(4)酶解和酸解:发酵后的物料中加入组织蛋白酶和木瓜蛋白酶,组织蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量分别为物料重量的2%和3%;温度维持在50℃,并不断搅拌;然后升温到90℃,加入20重量份的有机酸,维持4h;迅速冷却至30℃,用5mol/LNaOH调pH至中性。
重复上述步骤3次,进行多次酶解和酸解;酶解和酸解结束后,升温到40℃维持50min,然后离心,收集上清液。
(5)复配:将得到的上清液加入5倍的水和5倍的复合酸,升温到60℃,同时超声波处理3h。
(6)干燥:将步骤(5)的物料采用真空浓缩干燥,绝对压力为0.2MPa,温度为100℃,干燥3小时;
(7)超微粉碎,粉碎成200目的颗粒,然后筛分包装。
步骤(5)复配中用的复合酸包括柠檬酸、乳酸、L-天门冬氨酸和甘氨酸,四种酸的重量比是1:6:2:3。
本实施例中,水产品下脚料选用虾壳。
利用火焰原子吸收法测定本实施例产品的钙含量,复合钙粉主要成分中钙含量达到28.8%,总氨基酸量达到21.6%。
实施例2
本实施例提供海洋生物复合钙粉制备方法,包括下列步骤:
(1)水产品下脚料清洗:用清水将水产品下脚料清洗2次,然后烘干。
(2)破碎:将烘干的水产品下脚料进行破碎处理,获得10目的粉末。
(3)微生物发酵:将100重量份数的粉末放入3倍重量的水中,煮沸1h;冷却到30℃,加入米曲霉菌种和乳酸菌菌种各0.03份,充分拌匀,升温到35℃,发酵3天。
(4)酶解和酸解:发酵后的物料中加入组织蛋白酶和木瓜蛋白酶,组织蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量分别为物料重量的0.5%和1.5%;温度维持在30℃,并不断搅拌;然后升温到80℃,加入15重量份的有机酸,维持3h;迅速冷却至30℃,用5mol/LNaOH调pH至中性。
重复上述步骤2次,进行多次酶解和酸解;酶解和酸解结束后,升温到40℃维持30min,然后离心,收集上清液和沉淀物。
(5)复配:将得到的上清液加入3倍的水和3倍的复合酸,升温到40℃,同时超声波处理2h。
(6)干燥:将步骤(5)的物料采用真空浓缩干燥,绝对压力为0.06MPa,温度为95℃,干燥2小时;
(7)超微粉碎,粉碎成200目的颗粒,然后筛分包装。
步骤(5)复配中用的复合酸包括柠檬酸、乳酸、L-天门冬氨酸和甘氨酸,四种酸的重量比是1:3:1:3。
本实施例中,水产品下脚料选用鱼骨。
利用火焰原子吸收法测定本实施例产品的钙含量,复合钙粉主要成分中钙含量达到26.2%,总氨基酸量达到20.7%。
实施例3本发明制备的生物复合钙的生物吸收利用测定:
利用实施例1制备的复合钙粉进行测定。本发明的生物吸收利用率测定按照现有技术中的报道进行,为增强本发明与现有技术的对比效果,严格按照张文静等在食品科学发表的《虾壳中复合钙粉的制备工艺优化及大鼠对其吸收效果的评价》。
具体实验步骤如下:
3.1大鼠组别
4周龄断奶大鼠,平均重量为85g,以基础饲料适应性喂养1周后,称重量后挑选体重量无显著性差异的大鼠100只。按照本发明复合钙粉和碳酸钙中的钙含量计算各组钙剂用量,随机分成5组:低钙对照组,碳酸钙对照组,复合钙粉低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组20只。
3.2大鼠喂养方式
低钙对照组以低钙饲料喂养(低钙饲料配方:酪蛋白19.4%、玉米淀粉39.4%、大豆油10%、麦芽糊精13.6%、蔗糖8.7%、纤维素5%、混合维生素1%、DL-蛋氨酸0.1%、酒石酸胆碱0.25%、特丁基对苯二酚0.002%、矿物质混合物2.5%、钙0.1%)。
低、中、高剂量组在大鼠饲喂低钙饲料的基础上,每日灌胃低、中、高剂量钙的复合钙粉。
灌胃剂量参照:800mg(成人体重量60kg)换算成13.3mg/(kg·d),低、中、高剂量为人体剂量的2、5、10倍。即对应大鼠灌胃钙剂量为26.6、66.5、133mg/(kg·d)(以钙含量及大鼠体重量计)。各组大鼠在相同环境下喂养,自由进食,每周称1次体重量。各组大鼠在相同环境下喂养,自由进食,每周称1次体重量。
3.3大鼠摄入复合钙粉对其生长及钙吸收效果的评价
饲养期间,实验动物未出现疾病和死亡。实验初期各组大鼠体质量、身长无明显差异。喂养3周后,复合钙粉各剂量大鼠生长情况良好。复合钙粉各剂量组大鼠体质量均显著高于低钙对照组。低钙对照组大鼠生长指标明显低于其他剂量组,此时大鼠毛色暗淡无光泽,倦怠行动迟缓。具体如表1复合钙粉对大鼠生长的影响。
表1复合钙粉对大鼠生长的影响
Claims (1)
1.一种海洋生物复合钙粉的制备方法,其特征在于,包括下列步骤:
(1)水产品下脚料清洗:用清水将水产品下脚料清洗3次,然后烘干;
(2)破碎:将烘干的水产品下脚料进行破碎处理,获得30目的粉末;
(3)微生物发酵:将100重量份数的粉末放入5倍重量的水中,煮沸2h;冷却到35℃,加入米曲霉菌种和乳酸菌菌种各0.06份,充分拌匀,升温到40℃,发酵5天;
(4)酶解和酸解:发酵后的物料中加入组织蛋白酶和木瓜蛋白酶,组织蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量分别为物料重量的2%和3%;温度维持在50℃,并不断搅拌;然后升温到90℃,加入20重量份的有机酸,维持4h;迅速冷却至30℃,用5mol/L NaOH调pH至中性;重复上述步骤3次,进行多次酶解和酸解;酶解和酸解结束后,升温到40℃维持50min, 然后离心,收集上清液;
(5)复配:将得到的上清液加入5倍的水和5倍的复合酸,升温到60℃,同时超声波 处理3h;
(6)干燥:将步骤(5)的物料采用真空浓缩干燥,绝对压力为0.2MPa,温度为100℃,干燥3小时;
(7)超微粉碎,粉碎成200目的颗粒,然后筛分包装;
步骤(5)复配中用的复合酸包括柠檬酸、乳酸、L-天门冬氨酸和甘氨酸,四种酸的重量比是1:6:2:3。
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