CN107072188A - 一种用于细胞保存的包含作为活性成分的植物源重组人血清白蛋白和植物肽的组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种用于保存细胞的组合物和保存细胞的方法，更具体地，涉及一种用于保存细胞的组合物，其以植物来源的重组人血清白蛋白和植物肽作为活性成分，其中，所述组合物使细胞维持高存活率，同时可以保持无动物因子(animal‑free)和无异源性成分(xeno‑free)特性，并且对于保存时间较短的细胞，例如干细胞或原代培养细胞，可以使其细胞形态或表面表达因子保持稳定，而不发生变化；本发明还涉及一种通过使用该组合物保存细胞的方法。

Description

一种用于细胞保存的包含作为活性成分的植物源重组人血清 白蛋白和植物肽的组合物
技术领域
本发明涉及一种用于细胞保存的组合物，该组合物含有作为活性成分的植物源重组人血清白蛋白和植物肽，并且使仅能短时间保存的干细胞或原代细胞在室温或低温下依然维持无异源性成分(xeno-free)和无动物成分(animal-free)的组合物，并涉及其用途。
背景技术
目前，细胞治疗技术已经发展到，利用动物组织中分离的细胞或干细胞治疗各种疾病。干细胞是可以在未分化状态下无限增殖并在提供特定环境和条件时分化成具有特定功能和形状的细胞。人胚胎干细胞可以在合适的体外培养条件下进行连续自我更新，并具有分化成构成身体的所有细胞类型的多能性。因此，对人胚胎干细胞的研究结果的应用范围正在扩展到各方面，例如：认识人体发育、分化和生长的基本知识，研制关于人体各种损伤或疾病基础治疗的细胞疗法产品，筛选各种新型候选药物的疗效，确定病因，研制治疗策略等。
通常，采用含有动物血清(胎牛血清)的培养基培养人类干细胞，但是，在这种情况下，尽管细胞培养在被动物血清清洗过的胎牛血清中，但是依然有相当数量的胎牛血清保留在细胞中，成为强异源抗原，而且胎牛血清可能携带有动物源性疾病而造成感染，如狂犬病。因此，美国禁止在无法确认胎牛血清是否残留的情况下，进行人类细胞移植。Pittenger等人(Science 284：143-147,1997)和van et al。(J Clin Invest 58：699-704,1976)在公开文献中提出，从人骨髓分离间充质干细胞的方法和从脂肪组织分离间充质干细胞的方法，文献中表明，α-MEM或DMEM培养基和10-20％的胎牛血清用于细胞培养。然而，这些培养基由于使用动物血清(胎牛血清)而在人类细胞移植中引发了许多安全问题。为了克服这些问题，目前已经尝试在常规细胞培养基中使用人血清代替胎牛血清(Kuznetsov SA，等人，Transplantation.2000Dec 27；70(12)：1780-7)，但是由于干细胞的特性丧失，例如干细胞的增殖能力和分化能力的降低或促进向骨细胞的分化，因此，难以直接使用一般的人血清细胞培养溶液。最近，几个无异物的培养基已经被全球跨国公司商业化，并且吸引了许多研究者和投资者的注意。然而，无异种培养基仍然有许多亟需解决的问题，例如比使用胎牛血清的现有培养基更低的细胞生长速率，培养时多次传代的数量限制，以及基础干细胞特性(如：分化效能)的恶化等。
另外，近年来，医疗官员主导的治疗措施也在增多，包括原代细胞或干细胞从组织中提取并立即移植到人体中，以及细胞治疗药物的积极研制，即便如此，细胞移植前的储存溶液也是亟待解决的问题之一。在以往的多数情况下，收集的细胞浸泡在基础培养基、盐水溶液或缓冲溶液中进行低温储存或运输，但是存在细胞大量死亡或丧失特性的严重问题。因此，为了优化干细胞的组织再生能力，需要开发用于在干细胞移植时增加细胞活力，优化移植效果和激活干细胞的技术，但是该技术尚未得到充分发展。同时，由于原代细胞是未经免疫的正常细胞，其主要由动物组织或官方部门直接培养并及时从活细胞提取获得。原代细胞已经被开发为细胞治疗剂，并且由于具有与真实生物反应特性相似的优点，而被用于生物药物等的生产。
为了在临床试验和细胞治疗剂中使用此类干细胞或原代细胞，亟需开发一种不使用动物提取物的细胞保护性防腐剂，并能使组织中提取细胞和干细胞保持活力，可以使成人和人胚胎干细胞保持未分化的特性，并且在移植入活体之前具有的良好的预期保护性防腐效果。由于，用于细胞保存的组合物中所含成分的种类和组成比依据需要根据所要保存的细胞种类而确定，因此还需要对保存用组合物的组成比进行研究。
由于-196℃极低温度下的冷冻保存能够稳定和安全的保持细胞活力和特性，因此常被用于保存细胞。活细胞按需要通过快速解冻冷冻细胞就可以获得。然而，由于冰晶的形成以及离子不平衡和渗透压会无法避免地导致细胞损伤(其基本上伴随冷冻和解冻)，因此细胞活力随冷冻和解冻后的时间演变而逐渐降低。因此，实际上很难采用冷冻法进行数小时至数天，甚至长期的细胞运输与储存。
发明内容
[技术问题]
对于持续几小时或几天的细胞运输与储存，除了用于长期保存的冷冻法之外，还有一种采用保护性防腐剂作为动物细胞培养基的暂时保存方法。然而，大多数此类培养基属于不含血清等成分的基础培养基或盐溶液或缓冲溶液中，容易导致细胞死亡、细胞活力降低和细胞变形。因此，需要研究一种可安全保存干细胞或原代细胞，并能充分确保室温或低温细胞储存的存活率的细胞保护性防腐剂。因此，本发明的目的是开发一种用于细胞保存的组合物，其使用无动物成分和无异源性成分的物质作为活性成分，并且具有室温或低温下可有效储存干细胞或原代细胞的组合物构成比。
[技术方案]
本发明一方面提供一种用于细胞保存的组合物，其包含作为活性成为的植物源(plant-derived)重组人血清白蛋白和植物肽作为活性成分，
另一方面提供一种使用所述组合物进行细胞保存方法。
[有益效果]
根据本发明提出的组合物和方法，在室温或低温短期细胞保存时，即使不采用动物提取因子，细胞活力也可以维持在高水平，并可实现室温或低温下无细胞变形的稳定保存。因此，本发明可将要求无动物因子和无异源性成分特性的干细胞或原代细胞在相关药物或医药工业领域进行有利应用。
附图说明
图1是通过细胞计数确认UCMSC在低温储存后的存活率的图；
图2是通过细胞计数确认ADMSC在低温储存后的存活率的图；
图3是通过细胞计数确认BMMSC在低温储存后的存活率的图；
图4是通过细胞计数确认作为原代细胞的人二倍体成纤维细胞(HDF)在低温储存后的存活率的图；
图5显示通过显微镜确认UCMSC在低温储存并再培养24小时后的存活率和粘附度的图像；
图6和图7显示了使用本发明实施例的细胞保存用组合物(CEFO-vive)处理UCMSC，在低温下储存后，通过流式细胞仪确认UCMSC的细胞表面因子CD31在低温保存后的储存天的变化的结果图；
图8和图9显示了使用本发明实施例的细胞保存用组合物(CEFO-vive)处理UCMSC，在低温下储存后，通过流式细胞仪确认UCMSC的细胞表面因子CD73的变化的结果图；
图10和图11显示使用本发明实施例的细胞保存用组合物(CEFO-vive)处理UCMSC，在低温下储存后，通过流式细胞仪确认UCMSC的细胞表面因子CD105的变化的结果图；
图12和图13显示使用本发明实施例的细胞保存用组合物(CEFO-vive)处理UCMSC，在低温下储存后，通过流式细胞仪确认UCMSC的细胞表面因子CD146的变化的结果图；
图14和图9显示使用本发明实施例的细胞保存用组合物(CEFO-vive)处理UCMSC，在室温下储存后，通过流式细胞仪确认UCMSC的细胞表面因子CD31的变化的结果图；
图15显示使用本发明实施例的细胞保存用组合物(CEFO-vive)处理UCMSC，在室温下储存后，通过流式细胞仪确认UCMSC的细胞表面因子CD73在不同储存天数的变化的结果图；
图16显示使用本发明实施例的细胞保存用组合物(CEFO-vive)处理UCMSC，在室温下储存后，通过流式细胞仪确认UCMSC的细胞表面因子CD105在不同储存天数的变化的结果图；
图17显示使用本发明实施例的细胞保存用组合物(CEFO-vive)处理UCMSC，在室温下储存后，通过流式细胞仪确认UCMSC的细胞表面因子CD146在不同储存天数的变化的结果图。
本发明的最优实施方式
在下文中，将参考以下实施例详细描述本发明。然而，本发明可以以各种不同的形式实现，因此本发明不限于本文所描述的实施例。
一个方面，本发明涉及一种用于保存细胞的组合物，其包含作为活性成分的植物源(plant-derived)重组人血清白蛋白和植物肽。
在本发明的实施例中，本发明的用于细胞保存的组合物是指在进行某些实验，手术操作或细胞治疗之前能够对所使用的细胞进行数小时至数天的保护和储存的组合物。本发明提供的组合物不同于普通的动物细胞培养基，普通的动物细胞培养基是根据其组成成分、含量和使用目的而最佳地用于特定细胞的培养和增殖。换句话说，普通的动物细胞培养基是针对每种特定类型的细胞进行优化而用于该特定细胞的培养基，而本发明提供的组合物仅适合用于细胞在室温和低温下存储时用于增加细胞活力、防止细胞变形的保护性防腐液，而不适用于作为细胞培养基。
在一个实施例中，本发明的细胞保存用组合物可以是基于总计100重量份的组合物，包含0.1-20重量份的植物源重组人血清白蛋白。当以植物源重组人血清白蛋白和植物肽作为活性成分时，本发明的细胞保存用组合物可以是基于总计100重量份的组合物，含有0.1-10重量份的植物源重组人血清白蛋白和0.1-10重量份的植物肽。更优选地，本发明的细胞保存用组合物可以含有0.5-5重量份的植物源重组人血清白蛋白和1-5重量份的植物肽。最优选地，本发明的细胞保存用组合物可以包含1重量份的植物源重组人血清白蛋白和5重量份的植物肽。
在一个实施例中，细胞可以是干细胞或原代细胞，并且干细胞可以是脐带间充质干细胞(UCMSC)，脂肪来源的间充质干细胞(ADMSC)或骨髓来源的间充质干细胞(BMMSC)。
在本发明的一个实施方案中，本发明的细胞保存用组合物可以是无异源的和无动物成分的，因为其不含动物来源的成分。
本发明提供的用于细胞保存的组合物可以用于保存动物细胞。优选地，本发明的组合物用于干细胞的保存，更优选的，本发明的组合物用于成体干细胞的保存。由于本发明的提供的用于细胞保存的组合物中不含有动物因子，而是含有植物源重组人血清白蛋白和植物肽，可以保持该组合物的无异物性，使干细胞或原代细胞保存中感染朊病毒的风险降低，因此，本发明的组合物可以安全的使用。
在本发明的一个实施方案中，植物源重组人血清白蛋白可以来源于水稻，植物肽来源于大豆。
本发明的组合物还可以含有无机盐，维生素和核酸，其中，矿物质和维生素可以起到去除细胞产生有毒物质功能的作用(例如，抗氧化作用)，从而增加细胞活力。
本文中使用的术语“植物源重组人血清白蛋白”是指根据人血清白蛋白的全部或部分具有生物活性的氨基酸序列，由植物细胞转化而获得的蛋白质。在保存干细胞或原代细胞时，本发明的提供的人血清白蛋白等同于或优于血清的无动物因子替代品使用，并且可以加入到用于保存干细胞或原代细胞的组合物中，从而使细胞稳定。由于本发明提供的由植物(例如水稻)中产生的重组人血清白蛋白具有使细胞保存过程中动物或病毒感染风险最小化的优点，因此本发明的组合物可用于干细胞或原代细胞的保存，特别是可以用作治疗剂。另外，由于本发明的组合物中所含的重组人血清白蛋白由植物转化获得，因而相对于来源于动物细胞或血清的人血清白蛋白，其具有变异率极低的优点。
本文中使用的术语“植物肽”是指从植物提取的肽。为实现本发明的技术目的，本发明所提供的植物肽没有特别限制，只要其含有能够减少细胞保存过程中的细胞损伤的氨基酸即可。在本发明的一个实施例中，所述植物肽可以使用从大豆提取的植物肽。由于植物肽无动物性质，而且感染朊病毒蛋白的风险低，可以是细胞保持无异物性，此外，由于其含有必需氨基酸和/或非必需氨基酸，因此还可用作基本能源。因此，使用本发明提供的含有植物肽的组合物在进行细胞保存时，可以向干细胞或原代细胞提供营养物并增强细胞的活性，有助于增加细胞活力。
本文中使用的术语“干细胞”是指具有自我更新和分化能力的未分化细胞。根据其分化潜能，干细胞包括全能性干细胞，多能性干细胞和单能性干细胞。全能性(Pluripotent)干细胞是指具有分化为构成活生物体的所有组织或细胞的能力的细胞，多能性(multipotent)干细胞是指不具有分化为所有种类，而是分化为多种组织或细胞的能力的细胞。单能干细胞是指具有分化成特定组织或细胞的能力的细胞。全能性干细胞可以包括胚胎干细胞(ES细胞)，胚胎生殖细胞(EG细胞)，诱导多能干细胞(iPS细胞)等。多能性干细胞可以包括成体干细胞，例如间充质干细胞(来源于脂肪，骨髓，脐带血或脐带等)，造血干细胞(来源于骨髓或外周血)，神经干细胞细胞，生殖干细胞等。单能干细胞可包括用于肝细胞的定向干细胞，其通常是具有较低的自我更新能力的静止状态，但在激活后可有力地分化成肝细胞。在本发明的实施例中，证实了本发明的组合物可以安全且稳定地用于保存在室温或低温条件下的骨髓来源间充质干细胞，脂肪来源干细胞和脐带来源干细胞。
本文中使用的术语“原代细胞”是指从人体的组织中分离出的没有进行任何遗传操作等处理的细胞，其代表活生物体的器官/组织的功能。原代细胞从皮肤，血管内皮，骨髓，脂肪，软骨等中分离，并用于研究相应的组织和细胞的功能或用作重建缺损组织的细胞治疗剂。
干细胞或原代细胞的来源没有特别限制，只要在室温或低温下能够通过本发明的组合物稳定地保存细胞即可。其实例可包括来自人，猴，猪，马，牛，绵羊，狗，猫，小鼠或兔的细胞。干细胞或原代细胞优选为人干细胞或原代细胞，但不限于此。
另一方面，本发明涉及一种用于保存细胞的方法，所述方法包括用本发明提供的用于细胞保存的组合物对细胞进行处理。
在一个实施方案中，用本发明的细胞保存组合物处理的细胞可以在30℃或更低温度下保存，优选在室温或0℃至10℃的低温下保存，最优选在4℃下保存。
本文中使用的术语“室温”是指18℃至27℃。
本发明通过以下实施例更详细地描述本发明。然而，所提供的以下实施例仅用于说明本发明而不限制本发明的范围。
本发明的实施方式
实施例制备用于细胞保存的无动物因子和无异源性成分的组合物
为了制备在室温或低温下保存细胞的组合物，所述组合物能够以无异源的方式稳定保存干细胞或原代细胞，从水稻提取的人重组白蛋白(rAlbumin ACF，Sheffield Bio-Science，USA)和从作为活性成分的大豆(UltraPep TM Soy，Sheffield Bio-Science，USA)提取的植物肽与不含酚红的基础培养基混合，制备用于细胞保存的组合物，称为CEFO-vive。在制备的用于细胞保存的组合物中，使用1wt％的人重组白蛋白和5wt％的植物肽。植物肽具有如表1所示的氨基酸组成。此外，将用于细胞保存的组合物CEFO-vivo的无机盐，氨基酸，维生素，核酸成分和其它成分的具体含量列于表中2，3，4，5和6。
表1
表2
无机盐 mg/L
CaCl2(anhyd.) 200.0
KCl 400.0
MgSO4(anhyd.) 98.0
NaCl 15，300.0
NaH2PO4H2O 140.0
表3
氨基酸(植物a.a) mg/L
L-Alanine 1，390.0
L-arginine·HCl 877.0
L-asparagine·H2O 2，645.0
L-asparticacid 1，360.0
L-cysteine·HCl 31.0
L-cysteine·HCl·H2O 100.0
L-glutamic acid 1，863.0
L-glutamine 292.0
Glycine 1，350.0
L-histidine·HCl·H2O 292.0
L-isoleucine 652.0
L-leucine 52.0
L-lysine·HCl 1，073.0
L-methionine 215.0
L-phenylalanine 657.0
L-proline 1，715.0
L-serine 1，800.0
L-tryptophan 610.0
L-tyrosine(disodium Salt) 452.0
L-valine 1，846.0
表4
维生素(Vitamin) mg/L
L-ascorbic acid 100.0
Biotin 0.1
D-Ca pantothenate 101.0
Choline chloride 101.0
Folic acid 101.0
i-inositol 202.0
Niacinamide 101.0
Pyridoxal HCl 101.0
Riboflavin 10.1
Thiamine HCl 101.0
Vitamin B12 1.4
表5
核苷(Nucleoside) mg/L
Adenosine 10.0
Cytidine 10.0
Guanosine 10.0
Uridine 10.0
2′Deoxyadenosine 10.0
2′Deoxycytidine·HCl 11.0
2′Deoxyguanosine 10.0
Thymidine 10.0
表6
其它成分(otheringredients) mg/L
Human recombinant albumin(Plant-derived) 10，000.0
D-Glucose 1，000.0
Lipoic acid 0.2
Sodium pyruvate 110.0
试验例1用于细胞保存的组合物的细胞活力的验证
干细胞或原代细胞的制备
分别从患者捐赠的脐带，脂肪和骨髓中直接提取脐带间充质干细胞(UCMSC)，脂肪来源的间充质干细胞(ADMSCs)和骨髓来源的间充质干细胞(BMMSC)。使用CEFOgroTM UCMSC，CEFOgroTM ADMSC和CEFOgroTM BMMSC培养基(基础培养基)作为干细胞的培养基。人二倍体成纤维细胞(HDF)用作原代细胞，并在CEFOgroTM HF培养基中培养。将这些细胞在37℃和5％CO2的条件下在培养箱中培养，并且每3天更换培养基。本发明的所有测试由CEFO有限公司的生物伦理机构审查委员会(Institutional Bioethics Review Board)核准，符合并通过了生物伦理学和安全法案(Bioethics and Safety Act)的程序和方法。
低温保存后细胞计数
将干细胞UCMSC，ADMSC和BMMSC在其各自的基础培养基中培养，然后用胰蛋白酶处理，然后单独收集细胞。将单独收集的细胞分别放入上述实施例的细胞保存用组合物(CEFO-vive)，基础培养基和盐水溶液中，并储存在冰箱(4℃)中。然后，通过每天三个小瓶来监测细胞活力，并进行活细胞计数直到储存的第6天。结果证实，与基础培养基或盐水溶液不同，CEFO产品甚至在储存的第6天显示出70％或更高的平均细胞活力(图1,2和3)。此外，作为原代细胞的人二倍体成纤维细胞(HDF)在CEFOgroTM HF培养基中培养，然后用胰蛋白酶处理，然后收集。将收集的细胞分别放入上述实施例的细胞保存用组合物(CEFO-vive)，基础培养基或盐水溶液中，并储存在冰箱(4℃)中。然后，通过每天三个小瓶来监测细胞活力，并进行活细胞计数，直到储存的第6天。结果证实，即使在储存第5天，CEFO-vive显示90％或更高的平均细胞活力，但是在基础培养基或盐水溶液中储存后第2天，细胞活力快速降低(图4)。
低温保存后细胞计数
将干细胞UCMSC，ADMSC和BMMSC在其各自的基础培养基中培养，然后用胰蛋白酶处理，然后单独收集细胞。将单独收集的细胞分别放入上述实施例的细胞保存用组合物(CEFO-vive)，基础培养基或盐水溶液中，并储存在冰箱(4℃)中。然后，通过每天三个小瓶来监测细胞活力，并进行活细胞计数，直到储存的第6天。结果证实，与基础培养基或盐水溶液不同，CEFO产品甚至在储存的第6天依然显示出70％或更高的平均细胞活力(图1,2和3)。此外，作为原代细胞的人二倍体成纤维细胞(HDF)在CEFOgroTM HF培养基中培养，然后用胰蛋白酶处理，然后收集。将收集的细胞分别放入上述实施例的细胞保存用组合物(CEFO-vive)，基础培养基或盐水溶液中，并储存在冰箱(4℃)中。然后，通过每天三个小瓶来监测细胞活力，并进行活细胞计数，直到储存的第6天。结果证实，即使在储存第5天，CEFO-vive显示90％或更高的平均细胞活力，但是在基础培养基或盐水溶液中储存后第2天，细胞活力快速降低(图4)。
观察低温细胞保存后培养的细胞
将UCMSC在CEFOgroTM UCMSC中培养，然后用胰蛋白酶处理，随后单独收集。将收集的细胞分别放入上述实施例的细胞保存用组合物(CEFO-vive)，基础培养基或盐水溶液中，并储存在冰箱(4℃)中。然后，通过每天三个小瓶来监测细胞活力，并将细胞接种在培养皿中并在CEFOgro TM UCMSC培养基中培养。细胞培养24小时后，使用显微镜观察细胞。结果证实，放入到CEFO-vive中的细胞，即便储存在冰箱的第5天进行再培养，依然可以顺利的接种在培养皿上，但是对于基础培养基或盐水溶液的细胞很难适应培养皿，而且在冰箱储存的第2天就死亡(图5)。
低温保存后细胞表面因子的验证
UCMSC在CEFOgro TM UCMSC中培养，然后用胰蛋白酶处理，随后单独收集。将收集的细胞分别放入上述实施例的细胞保存用组合物(CEFO-vive)，基础培养基或盐水溶液中，并储存在冰箱(4℃)中。然后，每天取三个小瓶，将细胞接种在培养皿中并在CEFOgroTMUCMSC培养基中培养4天。然后，收集各细胞，使用流式细胞仪研究已知为间充质干细胞的细胞表面因子的CD标记(CD31，CD73，CD105和CD146)的变化。然而，除了在CEFO-vive中保存的细胞之外，使用基础培养基或盐溶液的细胞，培养4天后均不能产生与可用于分析的细胞一样多的细胞。因此，仅对保留在CEFO-vive中的细胞组进行流式细胞术。结果为，第1天，第2天，第3天，第4天和第5天依次显示为CD31(-)，CD73(+)，CD105(+)和CD146(+)，并且这些结果表明存在在CEFO-vive中的干细胞在冷藏储存中，细胞形态或细胞表面蛋白表达没有变化(如图6和7,8和9,10和11以及12和13所示)。
室温保存后细胞表面因子的验证
UCMSC在CEFOgro TM UCMSC中培养，然后用胰蛋白酶处理，随后单独收集。将收集的细胞分别置于上述实施例的CEFO-Vive，基础培养基或盐水溶液中，并在室温(25℃)下储存。然后，在第1或3天取三个小瓶，将细胞接种在培养皿中并在CEFOgroTM UCMSC培养基中培养4天。然后，收集各细胞，使用流式细胞仪研究已知为间充质干细胞的细胞表面因子的CD标记(CD31，CD73，CD105和CD146)的变化。然而，除了在CEFO-vive中保存的细胞之外，在使用基础培养基或盐溶液的细胞的情况下，4天的培养均不能给出与可用于分析的细胞一样多的细胞，尽管是室温保存。因此，仅使保留在CEFO-vive中的细胞组进行流式细胞术。结果显示，在第1天和第3天分别显示为CD31(-)，CD73(+)，CD105(+)和CD146(+)，这些结果表明在CEFO-vive中的干细胞在室温的冷藏储存条件下，细胞形态或细胞表面蛋白表达没有变化，(图14,15,16和17)。
从上述结果可以看出，将本发明提供的无动物和无异源性成分的，包含作为活性成分的植物源重组人血清白蛋白和植物肽的组合物，用于细胞保存，确保了细胞存活并使细胞在室温或低温下进行保存时，其细胞形态或表面表达因子依然不发生改变。

Claims (10)

1.一种用于细胞保存的组合物，所述组合物含有作为活性成分的植物源重组人血清白蛋白或者植物源重组人血清白蛋白和植物肽。
2.如权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物含有作为活性成分的植物源重组人血清白蛋白，在100重量份的组合物中，植物源重组人血清白蛋白含量为0.1-20重量份。
3.如权利要求1所述的组合物，其中，所述含有作为活性成分的植物源(plant-derived)重组人血清白蛋白和植物肽，在100重量份的组合物中，所述植物源重组人血清白蛋白含量为0.1-10重量份，所述植物肽的含量为0.1-10重量份。
4.如权利要求1所述的组合物，其中，所述细胞包括干细胞或原代细胞。
5.如权利要求4所述的组合物，其中，所述干细胞包括脐带间充质干细胞，脂肪间充质干细胞或骨髓间充质干细胞。
6.如权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物为无异源性成分和无动物成分的组合物。
7.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述植物源重组人血清白蛋白来源于水稻，所述植物肽来源于大豆。
8.一种保存细胞的方法，所述方法包括用权利要求1至7中任一项所述的细胞保存用组合物对细胞进行处理。
9.如权利要求8所述的方法，其中，所述方法包括利用保存细胞的组合物处理细胞并在30℃以下保存细胞。
10.如权利要求8所述的方法，其中，所述方法包括用所述用于细胞保存的组合物处理细胞并在0℃至10℃保存细胞。
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