CN107046998A - 一种烟草品种耐旱性快速鉴定方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种烟草品种耐旱性快速鉴定方法，具体为：1）在培养皿中加入灭菌过的河沙，河沙高度不超过培养皿高度的1/3，再加入15% PEG溶液，同时以蒸馏水作对照；2）在河沙表面铺一层滤纸，在滤纸上点消毒过的烟草种子，盖上培养皿盖，密封，放入培养箱常规培养；3）每天调查发芽率，于第14天调查完后计算发芽指数，测量根长和茎高，并称量鲜重，分别计算相对发芽指数A、相对根长B、相对茎高C和相对鲜重D，取上述A、B、C和D的平均值，即为该烟草品种的干旱胁迫指数：干旱胁迫指数越大，说明该品种耐旱性越强。该方法试验方便简捷，又不受试验人员和场地限制，适宜大批量烟草种质资源的耐旱性鉴定。

Description

一种烟草品种耐旱性快速鉴定方法

技术领域

本发明属于烟草鉴定处理技术领域，具体涉及一种烟草品种耐旱性快速鉴定方法。

背景技术

烟草是重要的经济作物之一，尤其是烤烟，我国的烤烟面积和产量均居世界第一。目前我国烟区主要集中在灌溉条件较差的丘陵山地，水资源短缺和不平衡是制约现代烟草农业发展的一个重要因素，不同烤烟品种的耐旱能力不同，受干旱的影响程度也不同。因此，筛选耐旱品种尤为重要。

耐旱鉴定技术在其它作物如小麦、玉米等中研究较多。由于作物不同，鉴定方法差异很大。目前烟草耐旱鉴定技术一直不成熟。主要表现在：1）现有烟草品种耐旱性鉴定多采用盆栽控水试验，虽然结果可靠，但周期长，费时费力，仅适合个别品种耐旱性鉴定，不适宜大批量试验。2）王仁刚等公开了一种“苗期鉴定烟草抗旱性的方法（CN201110106454.3）” ，其较大田鉴定相对快速省力，但需要在温室里进行，也有一定局限性：①需要特殊的设施和场地；②需要人为观察烟苗干旱情况，每个人判断萎蔫情况有差异，因此，复水时间不好掌握；③需要反复控水、复水，需要大量人力物力，也不适宜大批量鉴定烟草品种耐旱性。3耐旱鉴定方法多、指标多，没有统一的鉴定标准。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术缺陷，提供一种烟草品种耐旱性快速鉴定方法，该方法在试验过程中一次加入PEG溶液、后续无需补充，试验方便简捷，又不受试验人员和场地限制，适宜大批量烟草种质资源的耐旱性鉴定。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

1）选择干净无污染的河沙，用清水冲洗干净，121℃高压灭菌；

2）在培养皿中加入灭菌过的河沙，河沙高度不超过培养皿高度的1/3，再加入15% PEG（聚乙二醇）溶液，每8ml PEG溶液添加22－24g河沙；同时以蒸馏水作对照；

3）在河沙表面铺一层滤纸，要求滤纸直径与培养皿大小一致，在滤纸上点消毒过的烟草种子（9cm的滤纸上约可点100粒烟草种子），盖上培养皿盖，用封口膜密封，放入培养箱常规培养；

4）每天调查发芽率，每天调查后用封口膜密封，于第14天调查完后计算发芽指数GI、及相对发芽指数A：

GI = ∑（Gt/Dt），式中Gt为第t天的发芽种子数，Dt 为调查天数；

A = 15% PEG处理的发芽指数/正常条件下发芽指数；

5）同时于第14天取代表性幼苗，测量根长和茎高，并称量鲜重；

计算相对根长B：B = 15%PEG处理的根长/正常条件下根长；

计算相对茎高C：C = 15%PEG处理的茎高/正常条件下茎高；

计算相对鲜重D：D = 15%PEG处理的鲜重/正常条件下鲜重；

6）取上述相对发芽指数A、相对根长B、相对茎高C和相对鲜重D的平均值，即为该烟草品种的干旱胁迫指数，干旱胁迫指数越大，说明该烟草品种的耐旱性越强。为了保证不同批次试验结果的可比性，试验过程中也可以选用耐旱烟草品种“牛津26”或“农大202”作为对照品种。

优选的，步骤1）中河沙粒径为0.2－2mm。

本发明主要解决快速鉴定烟草品种耐旱性问题，本发明方法采用15%PEG溶液对烟草品种进行耐旱性鉴定，适合批量种质资源筛选。本发明中，发芽床定量加入河沙和PEG溶液，保证试验条件的一致性；试验过程中无需补充PEG溶液，试验方便简捷。此外，本发明为了消除种子之间的自然差异，用蒸馏水作对照，选用发芽指数、根长、茎高和苗鲜重四个指标的相对值来鉴定品种耐旱性，和大田表现高度相关，鉴定结果准确可靠。

和现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

1）本发明主要解决速鉴定烟草品种耐旱性问题，与盆栽控水鉴定和温室控水复水鉴定相比，本发明方法更加方便快捷，适合批量种质资源的筛选鉴定；

2）本发明与纸床做发芽床相比，河沙具有良好的蓄水保水功能，能够一次性加入足够量PEG高渗溶液，无需后期补加溶液，试验更简便；

3）本发明用蒸馏水作对照，消除了种子之间的自然差异，选用发芽指数、茎高、根长和苗鲜重等四个指标的相对值来鉴定品种耐旱性，和大田表现高度相关，鉴定结果准确可靠。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明的技术方案作进一步地详细介绍，但本发明的保护范围并不局限于此。

实施例采用15%PEG溶液鉴定烟草品种的耐旱性。

1、PEG溶液配制

采用PEG-6000作为处理剂，用蒸馏水作溶剂，按照15%的质量浓度进行配制，形成一定渗透势的干旱胁迫处理。

2、发芽床的制备：

1）选择干净无污染的河沙（粒径0.2-2mm），用清水冲洗干净，于121℃高压灭菌；

2）选用直径9cm的培养皿，在培养皿中定量加入24g灭菌过的河沙。平行摇动培养皿，使沙子均匀平铺培养皿底部；

3）定量加入8ml 15%PEG溶液，同时用8ml 的蒸馏水作对照；

4）15%PEG溶液完全浸润河沙后，在河沙表面铺一张直径9.0cm的定性滤纸。

3、种子干旱胁迫处理

试验选用烤烟品种“豫烟13号”、“中烟100”、 “豫烟9号”、“牛津26”和“农大202”。种子预先用75%酒精消毒后用清水洗3次，播于发芽床（即将烟草种子点在滤纸上，每一个烟草品种点100粒种子）。种子置床后，盖上培养皿盖，用封口膜密封培养皿。置于人工光照培养箱中培养，黑暗20˚C（12h），光照30˚C（12h），恒温培养14天，逐日调查发芽率（每日调查结束后用封口膜密封培养皿），于第14天调查结束后计算发芽指数，并取50株代表性幼苗，测量根长和茎高，及称量鲜重，计算出相对发芽指数A、相对根长B、相对茎高C和相对鲜重D。试验重复三次，每次重复100粒。结果见表1至4。

4、试验结果。

4.1不同品种发芽指数比较

表1不同烤烟品种的发芽指数比较

表1显示，15%PEG处理下五个品种发芽指数差异较大，牛津26相对发芽指数最高，中烟100最低。

4.2 不同品种幼苗根长和茎高比较

表2 不同烤烟品种茎高比较

表2的结果显示：15%PEG处理下五个品种茎高受影响程度不同，其中，中烟100受影响程度最大，农大202、豫烟9号和牛津26的茎高生长受影响程度较小。

表3 不同烤烟品种根长比较

表3的结果显示：15%PEG处理下五个品种根长受影响程度不同，其中，中烟100受影响程度最大，豫烟13号根系生长受影响程度较小。

4.3不同品种幼苗鲜重比较

表4不同烤烟品种幼苗鲜重比较

表4的结果显示：15%PEG处理下五个品种幼苗鲜重受影响程度不同，其中，中烟100受影响程度最大，豫烟9号幼苗鲜重受影响程度较小。

为了消除种子本身发芽率的误差，对相对发芽指数、相对根长、相对茎高和相对苗鲜重四个指标进行分析，并取四个指标的平均值作为该品种的干旱胁迫指数。经计算获知：豫烟13号、中烟100、豫烟9号、农大202和牛津26的干旱胁迫指数分别为73.78%，62.45%、79.47%、78.99%和78.71%。说明牛津26、豫烟9号和农大202耐旱性较强，其次为豫烟13号，中烟100耐旱性相对较差。该试验结果与前人研究结论及大田表现结果一致。

本试验结果说明，用PEG能够对不同烟草品种进行耐旱鉴定，且试验简捷，可用于快速筛选耐旱种质资源，尤其适合大批量烟草种质资源的耐旱性鉴定。

Claims (2)

1.一种烟草品种耐旱性快速鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）选择干净无污染的河沙，用清水冲洗干净，121℃高压灭菌；

2）在培养皿中加入灭菌过的河沙，河沙高度不超过培养皿高度的1/3，再加入15% PEG溶液，每8ml PEG溶液添加22－24g河沙；同时以蒸馏水作对照；

3）在河沙表面铺一层滤纸，滤纸直径与培养皿大小一致，在滤纸上点消毒过的烟草种子，盖上培养皿盖，密封，放入培养箱常规培养；

4）每天调查发芽率，每天调查后密封，于第14天调查完后计算发芽指数GI、及相对发芽指数A：

GI = ∑（Gt/Dt），式中Gt为第t天的发芽种子数，Dt 为调查天数；

A = 15% PEG处理的发芽指数/正常条件下发芽指数；

5）同时于第14天取代表性幼苗，测量根长和茎高，并称量鲜重；

计算相对根长B：B = 15%PEG处理的根长/正常条件下根长；

计算相对茎高C：C = 15%PEG处理的茎高/正常条件下茎高；

计算相对鲜重D：D = 15%PEG处理的鲜重/正常条件下鲜重；

6）取上述相对发芽指数A、相对根长B、相对茎高C和相对鲜重D的平均值，即为该烟草品种的干旱胁迫指数，干旱胁迫指数越大，说明该烟草品种耐旱性越强。

2.如权利要求1所述的烟草品种耐旱性快速鉴定方法，其特征在于，步骤1）中河沙粒径为0.2－2mm。