CN106996951A - 一种进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸及其应用,所述试纸包括第一绝缘基片和第二绝缘基片、以及设置在第一绝缘基片和第二绝缘基片上的两个相互独立的检测体系,所述第一绝缘基片设有第一进样缺口,第二绝缘基片设有第二进样缺口,导液槽体设有第三进样缺口;第一进样缺口、第二进样缺口和第三进样缺口的形状和尺寸相同;第一绝缘基片、导液槽体、第二绝缘基片顺序层叠后,形成一个层叠进样缺口,层叠进样缺口进深方向的两侧端面,分别是第一进样口、第二进样口。该试纸通过层叠进样缺口,隔绝不同分析物反应体系间电流相互干扰,实现一片试纸一次进样精确检测两个或多个项目。
Description
技术领域
本发明属于生物传感精确检测技术领域,涉及一种进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸及其应用。
背景技术
在医疗机构和患者家庭,根据生物传感电化学技术生产的试纸和分析仪,可以快速检测人体血糖、酮体、尿糖、尿酸、胆固醇、甘油三酯、血红蛋白等化学标志物的浓度值。只需要采集微量血液或少量尿液样本,吸入生物传感电化学试纸并连接分析仪,很快就能获得检测结果。如公开号为CN1447113A公开的“血糖测试仪配套试纸及其制作方法”介绍,试纸主要包括:一个基片,基片上印有一个工作电极,一个参考电极,基片上印有接地电极,在基片的一端印有同读出仪表相连的导线,其特征在于,工作电极和参考电极分别是印在基片导电银层上形成的碳涂层,工作电极上喷涂有催化血液葡萄糖反应的生物酶,以及一种能在酶催化反应中心和电极之间进行电子传递的介质和黏合剂,如此构成一个电路回路。加样反应时,血样中葡萄糖浓度的高低,产生相应大小的电流信号,被测试仪检测读出。
这种单一检测项目试纸,每使用一次,获得一个生化标志物的检测结果。使用者如果需要测试两个或更多与疾病诊断相关的生化标志物项目,就要换用其它检测项目的试纸和分析仪,不仅需要重复采血,还成倍增加采购仪器和使用成本。
目前,市场上已有双参数或多参数分析仪,可以使用一台分析仪检测两个或更多的生化标志物。如血糖、尿糖双参数分析仪,血糖、尿糖、尿酸、胆固醇多参数分析仪等。这些仪器,是将多个生化标志物电流信号读取功能,集成到一台分析仪中。通过更换不同检测项目的试纸,完成不同分析物指标检测。为了避免重复采血,多数使用者加大针刺手指深度,或者用力挤压手指采血创口,以获得足够的血液样本。这种做法,使皮下细胞液渗出成分增加,血样暴露在空气中的时间延长,血样中还原性物质与空气中的氧离子结合发生氧化,无法保证检测结果的一致性和准确性。
有发明者设想,如果将两片生物传感试纸电极反应区相对叠加,共用进样口,就可以实现一片试纸同时检测两个不同分析物的目的。如公开号为CN102156154A公开的“具有相对电极的双腔多分析物测试条”介绍,血样从试纸进血口虹吸分流进入双腔,双腔电极各自产生电流信号,通过试纸座接转,测试仪读取后,即可以获得两个不同分析物的检测结果。
但是,该专利存在明显的缺陷,在具体实践中可能无法实现设计目的。因为,双腔电极共用回路,双腔导血槽共用进血口。在实际进样过程中,血样触及进血口在虹吸作用下进入双腔,此时进血口和导血槽内残留的血样,如同一根导线将双腔自动接通,因双腔电极共用回路,双腔电极被残留血样接通的情况下,互相独立的双腔设计已不存在,双腔电极各自产生的电流信号必然互相混合、叠加、干扰或抵消,分析仪读取的电流信号是两个分析物的合成结果,不可能准确有效。
发明内容
本发明的目的是针对上述情况提供一种进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸及其应用,配合智能多参数分析仪使用,这种同步多分析物传感试纸以精确计算的试纸进样缺口,自动隔绝试纸双反应区不同分析物之间可能产生的电流干扰,能解决相关现有技术存在的缺陷,避免不同分析物电极可能接通的隐患,使仅用一片试纸一次进样可以同步检测两个或多个项目成为现实。
实现本发明目的的技术方案如下:
一种进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,包括第一绝缘基片和第二绝缘基片、以及设置在第一绝缘基片和第二绝缘基片上的相互独立的电极检测体系;所述检测体系包括设置在第一绝缘基片和第二绝缘基片中的导液槽体,所述导液槽体设有独立的第一导液槽和第二导液槽,第一导液槽设有第一进样口,第二导液槽设有第二进样口;
与现有已公开技术不同的是,所述第一绝缘基片设有第一进样缺口,第二绝缘基片设有第二进样缺口,导液槽体设有第三进样缺口;所述第一进样缺口、第二进样缺口和第三进样缺口的形状和尺寸相同;第一绝缘基片、导液槽体、第二绝缘基片顺序层叠对齐后,形成一个层叠进样缺口,层叠进样缺口进深方向的两侧端面,分别是第一进样口、第二进样口;
层叠进样缺口开口宽度和垂直进深有比例约束,根据分析物滴加样本时体积容量进行设置;血液或尿液滴加样本量通常在1.5ul~30ul之间,层叠进样缺口开口宽度设置为0.5mm~5mm之间、垂直进深设置为1mm~10mm之间;本发明同步多分析物传感试纸滴加样本量3ul~5ul,层叠进样缺口宽度可设置为≥2mm,垂直进深可设置为≥5mm;层叠进样缺口呈长方形、U形或V形。层叠进样缺口的宽度和垂直进深经计算和实践验证,可以确保检测过程中层叠进样缺口、缺口两侧第一进样口、第二进样口之间无残留血样或尿样检测物,避免不同分析物电极之间被残留样本导通的可能,保证不同分析物检测电极各自产生的电流信号不受干扰。
所述通过进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,包括
位于第一绝缘基片上的第一导电膜层,所述第一导电膜层包括相互绝缘的第一反应物工作电极和第二反应物工作电极;
反应膜层,所述反应膜层包括第一反应膜和第二反应膜,第一反应膜覆盖于第一反应物工作电极上,第二反应膜覆盖于第二反应物工作电极上。
所述导液槽体设置在第一导电膜层上,所述导液槽体将第一反应膜和第二反应膜分隔在独立的导液槽内,导液槽体形成第一导液槽和第二导液槽,第一反应膜设置在第一导液槽内,第二反应膜设置在第二导液槽内,第一导液槽对应第一反应物工作电极,第二导液槽对应第二反应物工作电极。
所述的第一导液槽设有第一排气口,第二导液槽设有第二排气口。
所述第二绝缘基片的背面设有第二导电膜层,第二导电膜层包括第一反应物参比电极和第二反应物参比电极;
包括亲水膜层,所述亲水膜层包括第一亲水膜和第二亲水膜,第一亲水膜覆盖于第一反应物参比电极上,第二亲水膜覆盖于第二反应物参比电极上;
第二绝缘基片的背面与导液槽体、第一绝缘基片贴接,第一导液槽形成第一反应腔,第二导液槽形成第二反应腔,导液槽体将第一反应膜、第二反应膜分隔在独立的反应腔内;第一亲水膜与第一反应膜相对应,第二亲水膜与第二反应膜相对应。
包括第三导电膜层,所述第三导电膜层设置在第二绝缘基片的前面,第三导电膜层分别设有第一引脚和第二引脚;
第二绝缘基片设有第一导通孔、第二导通孔,第一导通孔使第一引脚与第一反应物参比电极形成电连接,第二导通孔使第二引脚与第二反应物参比电极形成电连接。
所述第二绝缘基片和第二导电膜层对应于第一亲水膜处设有第一进样观察窗,第二绝缘基片和第二导电膜层对应于第二亲水膜处设有第二进样观察窗。
所述第二绝缘基片的下部设有基片缺口,第一绝缘基片上的第一反应物工作电极和第二反应物工作电极从基片缺口露出。
所述的进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,在制备同步检测血液样本或尿液样本的乙酰氨基葡萄糖苷酶、胆汁酸、谷丙转氨酶、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、尿酸、尿糖、乳酸、血糖、酮体、血红蛋白或胆红素任意组合的两项或多项生化标志物检测试纸中的应用。
所述的同步多分析物传感试纸,配合智能多参数分析仪使用,可同步检测血液样本或尿液样本的乙酰氨基葡萄糖苷酶、胆汁酸、谷丙转氨酶、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、尿酸、尿糖、乳酸、血糖、酮体、血红蛋白或胆红素任意组合两项生化标志物,实现一片试纸一次进样精确检测两个或多个项目。
上述同步多分析物传感试纸第一反应物工作电极上可以固定与乙酰氨基葡萄糖苷酶、胆汁酸、谷丙转氨酶、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、尿酸、尿糖、乳酸、血糖、酮体、血红蛋白、胆红素等生化标志物中的一种进行反应的反应膜,第二反应物工作电极上可以固定与乙酰氨基葡萄糖苷酶、胆汁酸、谷丙转氨酶、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、尿酸、尿糖、乳酸、血糖、酮体、血红蛋白、胆红素等生化标志物中的与第一反应物工作电极测试项目不同的另一种进行反应的反应膜,从而实现一次进样,同步检测两个或多个分析物的目的。
与本发明同步多分析物传感试纸配合使用的智能化多参数分析仪,其液晶屏可显示多种分析物的检测数据结果;
与本发明同步多分析物传感试纸配合使用的电极信号处理器,包括多电极试纸插座、以及四核或八核芯片计算系统,该系统可同时读取四通道(含)至八通道生物传感电化学试纸加样反应产生的电流信号,换算为相应的生化标志物浓度值后,通过智能化多参数分析仪显示结果。
本发明所述的进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,当试纸层叠进样缺口接触被分析物血样或尿样滴加时,在毛细虹吸作用下,被分析物血样或尿样由层叠进样缺口分别通过第一进样口、第二进样口自动分流进入第一导液槽和第二导液槽,被分析物分别与第一反应膜及第二反应膜中的试剂反应,同时产生微弱电流,通过试纸座电极接转,将电流信号输入信号处理器,计算被分析物的浓度值,然后在多参数分析仪显示屏显示结果。
第一反应物工作电极及第二反应物工作电极的反应膜所测物质可以根据功能进行组合,比如,可以把血糖和尿酸组合在一起测试葡萄糖和尿酸,也可以把总胆固醇和甘油三酯组合在一起监测血酯,还可以把总胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇或者低密度脂蛋白胆固醇组合在一起测试胆固醇含量监测心血管功能。
与现有公开技术相比,本发明在第一绝缘基片上设有第一进样缺口,在第二绝缘基片上设有第二进样缺口,在导液槽体上设有第三进样缺口,进样缺口的形状相同,叠加贴合形成试纸一端的层叠进样缺口,层叠进样缺口开口宽度和垂直进深有比例约束,根据分析物样本量进行设置;血液或尿液样本量通常在1.5ul~30ul之间,进样缺口开口宽度设置为0.5mm~5mm之间、垂直进深设置为1mm~10mm之间;在一个具体实施方案中的同步多分析物传感试纸,进样缺口宽度优选地设置为1~3mm,垂直进深优选地设置为3~6mm;进样缺口呈长方形、U形或V形。当血样或尿样触及层叠进样缺口,层叠进样缺口两侧的第一进样口、第二进样口将检测样本虹吸进入两个检测区导液槽,加样完成后,空气压差会迅速填补两个进样口之间的空间,层叠进样缺口和第一进样口、第二进样口之间不会残留血样或尿样,保证两个不同分析物的电路系统不会联通,从而避免了现有公开技术“具有相对电极的双腔多分析物测试条”因忽略设置进样缺口,导致试纸进样口残留的血样如同导线般接通两个不同分析物的电路系统,产生电流的干扰,无法保证测试的准确度。
本发明所述的同步多分析物传感试纸工艺简单,适合批量生产,基本不增加产品成本。只需要一次进样就能得到两个或更多分析物的检测结果,不仅节约时间,提高诊断效率,也避免多次采血给患者带来的思想负担。
附图说明
图1为实施例中进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸的立体结构示意图;
图2为实施例中进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸的立体分解结构示意图;
图3为比较例中多分析物传感试纸的立体分解结构示意图;
图4为实施例中进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸的样品分布图;
图5为比较例中同步多分析物传感试纸的样品分布图。
图中,1.第一绝缘基片 1-1.第一进样缺口 2.第一导电膜层 2-1.第一反应物工作电极 2-2.第二反应物工作电极 3.反应膜层 3-1.第一反应膜 3-2.第二反应膜 4.导液槽体 4-1.第三进样缺口 4-2.第一进样口 4-3.第一导液槽 4-4.第一排气口 4-5.第二进样口 4-6.第二导液槽 4-7.第二排气口 5.亲水膜层 5-1.第一亲水膜 5-2.第二亲水膜6.第二导电膜层 6-1.第一反应物参比电极 6-2.第二反应物参比电极 6-3.第一进样观察窗 6-4.第二进样观察窗 7.第二绝缘基片 7-1.第二进样缺口 7-2.第一导通孔 7-3.第二导通孔 7-4.基片缺口 8.第三导电膜层 8-1.第一引脚 8-2.第二引脚 9.层叠进样缺口。
具体实施方式
结合实施例和附图,对本发明实施作进一步详细说明。在此,本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明。任何熟悉此项技术的人士可轻易做到的修饰及改变均包含于本案所附申请专利权利要求的范围内。
参照图1、图2,一种进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,包括第一绝缘基片1和第二绝缘基片7、以及设置在第一绝缘基片1和第二绝缘基片7上的两个相互独立的检测体系,所述检测体系包括设置在第一绝缘基片1和第二绝缘基片7中的导液槽体4,所述导液槽体4设有独立的第一导液槽4-3和第二导液槽4-6,第一导液槽4-3设有第一进样口4-2,第二导液槽4-6设有第二进样口4-5;
所述第一绝缘基片1设有第一进样缺口1-1、第二绝缘基片7设有第二进样缺口7-1、导液槽体4设有第三进样缺口4-1,所述第一进样缺口1-1、第二进样缺口7-1和第三进样缺口4-1形状和尺寸相同,第一绝缘基片1、导液槽体4、第二绝缘基片7顺序层叠后,形成一个层叠进样缺口9,所述层叠进样缺口9与第一进样口4-2、第二进样口4-5相连通。通过此层叠进样缺口9,测试时,当样品离开第一进样口4-2、第二进样口4-5后,将不会有样品残留在进样口,从而避免导通两个检测系统,不会产生电流干扰。
层叠进样缺口9开口宽度和垂直进深有比例约束,根据分析物样本量进行设置,血液或尿液样本量通常在1.5ul~30ul之间,层叠进样缺口9开口宽度设置为0.5mm~5mm、垂直进深设置为1mm~10mm,本实施例层叠进样缺口9宽度为2mm,深度为5mm。
所述的具有进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,包括
位于第一绝缘基片1上的第一导电膜层2,所述第一导电膜层2包括相互绝缘的第一反应物工作电极2-1和第二反应物工作电极2-2;
反应膜层3,所述反应膜层3包括第一反应膜3-1和第二反应膜3-2,第一反应膜3-1覆盖于第一反应物工作电极2-1上,第二反应膜3-2覆盖于第二反应物工作电极2-2上。
所述反应膜层3包括至少一种电子介体,至少一种与被检测物质反应的酶,还包括缓冲液、粘合剂及表面活性剂;
样品溶液可透过所述反应膜层3后,进入覆盖有反应膜层3的电化学电极反应区,与电子介体或电子介体及氧化还原酶进行反应。
所述导液槽体4设置在第一导电膜层2上,所述导液槽体4将第一反应膜3-1和第二反应膜3-2分隔在独立的导液槽内,导液槽体4形成第一导液槽4-3和第二导液槽4-6,第一反应膜3-1设置在第一导液槽4-3内,第二反应膜3-2设置在第二导液槽4-6内,第一导液槽4-3对应第一反应物工作电极2-1,第二导液槽4-6对应第二反应物工作电极2-2;第一导液槽4-3设有第一进样口4-2,第二导液槽4-6设有第二进样口4-5。
所述的第一导液槽4-3设有第一排气口4-4,第二导液槽4-6设有第二排气口4-7。
所述第二绝缘基片7的背面设有第二导电膜层6,第二导电膜层6包括第一反应物参比电极6-1和第二反应物参比电极6-2;
包括亲水膜层5,所述亲水膜层5包括第一亲水膜5-1和第二亲水膜5-2,第一亲水膜5-1覆盖于第一反应物参比电极6-1上,第二亲水膜5-2覆盖于第二反应物参比电极6-2上,亲水膜层起到加速样品吸入的作用;
第二绝缘基片7的背面与导液槽体4、第一绝缘基片1贴接,第一导液槽4-3形成第一反应腔,第二导液槽4-6形成第二反应腔,导液槽体4将第一反应膜3-1、第二反应膜3-2分隔在独立的反应腔内;第一亲水膜5-1与第一反应膜3-1相对应,第二亲水膜5-2与第二反应膜3-2相对应。
包括第三导电膜层8,所述第三导电膜层8设置在第二绝缘基片7的前面,第三导电膜层8分别设有第一引脚8-1和第二引脚8-2;
第二绝缘基片7设有第一导通孔7-2、第二导通孔7-3,第一导通孔7-2使第一引脚8-1与第一反应物参比电极6-1形成电连接,第二导通孔7-3使第二引脚8-2与第二反应物参比电极6-2形成电连接。第一引脚8-1、第二引脚8-2与检测仪器的试纸连接器实现电连接。
所述第二绝缘基片7和第二导电膜层6对应于第一亲水膜5-1处设有第一进样观察窗6-3,第二绝缘基片7和第二导电膜层6对应于第二亲水膜5-2处设有第二进样观察窗6-4,进样观察窗用于测试时观察样品是否到达观察窗位置。
所述第二绝缘基片7的下部设有基片缺口7-4,第一绝缘基片1上的第一反应物工作电极2-1和第二反应物工作电极2-2从基片缺口7-4露出。
本同步多分析物传感试纸,在制备同步检测血液样本或尿液样本的乙酰氨基葡萄糖苷酶、胆汁酸、谷丙转氨酶、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、尿酸、尿糖、乳酸、血糖、酮体、血红蛋白、胆红素任意组合的两项或多项生化标志物检测试纸中的应用。
所述的同步多分析物传感试纸,配合智能多参数分析仪使用,可同步检测血液样本或尿液样本的乙酰氨基葡萄糖苷酶、胆汁酸、谷丙转氨酶、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、尿酸、尿糖、乳酸、血糖、酮体、血红蛋白、胆红素任意组合两项生化标志物,实现一片试纸一次进样精确检测两个或多个项目。
本文中所说的绝缘基片,即第一绝缘基片1和第二绝缘基片7,系指具有平直的表面及电绝缘特性的薄层片。较佳地,该绝缘基片选自下列所组成的群:聚氯乙烯(PVC)片、玻璃纤维片(FR-4)、聚酯、电木片、聚对苯二甲酸乙二酯(PET)片、聚碳酸酯(PC)片、聚丙烯(PP)片、聚乙烯(PE)片、聚酰胺(PA)片、聚苯乙烯(PS)片、玻璃片及陶瓷片(CEM-I)。本例第一绝缘基片1和第二绝缘基片7为PC或PET片,厚度为0.10-0.45mm。
本文中所说的导电膜层,包括第一导电膜层2、第二导电膜层6、第三导电膜层8,系指能起到电导通的层,可以是分离且互不相接触的电极,充当工作电极和参考电极,也可是仅仅起到电连接的导电结构。根据本发明的一较佳实施例,电极一端分别形成工作电极和参考电极而与电化学电极反应区相连,而另一端则形成工作电极和参考电极的接头,可与检测样品在电化学反应时产生电效应的检测装置相连。较佳地,该电极系统的材料可选用适合网版印刷的导电性浆状材质,例如但不限于碳胶、金胶、银胶、碳银混合胶、挥发性石墨或铜胶或其组合(例如以网印先印银胶后再印碳胶),或其它任何适合网版印刷的导电性浆状材料。
本文中所说的反应膜层3,系指位于上述电化学电极反应区,含有与被测物质反应的生物试剂。反应膜层3中包括与被测物质反应的酶和一种电子传递介体,同时还含有缓冲液、粘合剂及表面活性剂的调配物薄层,或者反应膜层3中包括与被测物质反应的电子传递介体,同时还含有缓冲液、粘合剂及表面活性剂的调配物薄层。较佳地,该调配物可以印刷涂覆或滴加的方式加至该反应层后,于50-70℃下干燥。
本文中所说的氧化还原酶,系指可与样品中的待测标志物产生氧化还原反应的酶。所使用酶种类视所欲检测的标志物不同而有所不同。例如,欲检测尿酸浓度时,所选用的酶为尿酸氧化酶,欲检测葡萄糖浓度时,所选用的酶为葡萄糖氧化酶,欲检测总胆固醇浓度时,所选用的酶为胆固醇氧化酶,胆固醇酯酶,如有需要可以选用过氧化物酶,通过选用合适的酶,可以检测甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、乳酸或谷丙转氨酶等生化标志物。
本文中所说的电子介体,系指可与经前述氧化还原酶作用所产生的物质反应后,本身可由氧化状态还原成还原状态的物质。所述电子传递介体可以是铁氰化钾、二茂铁及其衍生物、钌的络合物或苯醌类化合物、亚铁氰化钾。根据本发明的一个较佳具体实施例,该电子介体可为铁氰化钾。较佳地,该电子介体的含量为3%(W/W)至20%(W/W)。
本文中所说的缓冲液、粘合剂及表面活性剂,系指可助于氧化还原酶及电子介体干燥后附着于绝缘基片上的物质,或可保护氧化还原的物质。所述缓冲液为磷酸缓冲液、MES缓冲液、柠檬酸缓冲液组成的组中的一种;所述粘合剂采用淀粉、糊精、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、海藻酸钠中的一种或几种;所述表面活性剂为TritonX-100、TW-20。
本文中所说的亲水膜层5,是指浆液中含有亲水材料的固化层;亲水材料可以是曲拉通-100,十二烷基硫酸钠,吐温-20,气溶胶等表面活性剂;亲水层中还可以含有增稠剂,比如羧甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、海藻酸钠等中一种或者两种。亲水浆液可以通过使用喷液机器滴加到基片上或通过印刷技术涂覆到基片上。
上述进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸的制备方法,包括如下步骤:
1)在第一绝缘基片1上加工出第一进样缺口1-1;在第二绝缘基片7上加工出第二进样缺口7-1、第一导通孔7-2、第二导通孔7-3和基片缺口7-4;
2)在第一绝缘基片1上印刷第一导电膜层2,放到70-90℃烘箱中烘干50-70min,形成第一反应物工作电极2-1和第二反应物工作电极2-2;
3)将第一反应膜3-1喷涂到第一反应物工作电极2-1上,接着将第二反应膜3-2喷涂到第二反应物工作电极2-2上,然后40-60℃烘干10-30min,备用;
4)将具有第三进样缺口4-1的导液槽体4粘贴到第一绝缘基片1上,第三进样缺口4-1与第一进样缺口1-1对齐;
5)在第二绝缘基片7两面分别印刷第三导电膜层8和第二导电膜层6,第三导电膜层8形成第一引脚8-1和第二引脚8-2;第二导电膜层6形成第一反应物参比电极6-1和第二反应物参比电极6-2;
6)将亲水浆液分别喷涂到第一反应物参比电极6-1和第二反应物参比电极6-2上;第一反应物参比电极6-1上的亲水浆液和第二反应物参比电极6-2上的亲水浆液相同,然后40-60℃烘干10-30min,形成第一亲水膜5-1和第二亲水膜5-2;
7)将固定好第一亲水膜5-1、第二亲水膜5-2的第二绝缘基片7粘贴到导液槽体4及第一绝缘基片1上,第一导通孔7-2使第一引脚8-1与第一反应物参比电极6-1形成电连接,第二导通孔7-3使第二引脚8-2与第二反应物参比电极6-2形成电连接;第二进样缺口7-1与第一进样缺口1-1、第三进样缺口4-1对齐,形成层叠进样缺口9。
步骤1)中使用激光切割机或冲床加工出第一进样缺口1-1和第二进样缺口7-1;第一绝缘基片1厚度为0.20-0.30mm,优选为0.25mm。
步骤2)中采用丝网印刷技术印刷第一导电膜层2,通过丝网印刷将导电碳墨在第一绝缘基片1PET塑料基片上铺上分散均匀的油墨薄层,导电碳墨来自美国Acheson公司。
步骤3)中通过喷酶机将第一反应膜3-1酶液喷涂到第一反应物工作电极2-1上,通过喷酶机将第二反应膜3-2酶液喷涂到第二反应物工作电极2-2上。
步骤6)中通过喷酶机将亲水浆液喷涂到第一反应物参比电极6-1和第二反应物参比电极6-2上。
如下实施例为了更好的理解本发明,但并不作为对本发明的限定。
实施例1:
本实施例提供一用于检测血液中葡萄糖和总胆固醇多分析物传感试纸的制备实施例,从而说明本发明通过进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸制备方法,该制备方法包括如下步骤:
1)在第一绝缘基片1上加工出第一进样缺口1-1;在第二绝缘基片7上加工出第二进样缺口7-1、第一导通孔7-2、第二导通孔7-3和基片缺口7-4;
2)在第一绝缘基片1上印刷第一导电膜层2,放到80℃烘箱中烘干60min,形成第一反应物工作电极2-1和第二反应物工作电极2-2;
3)将与血液中葡萄糖反应的第一反应膜3-1酶液即血糖酶液喷涂到第一反应物工作电极2-1上,接着将与血液中总胆固醇反应的第二反应膜3-2酶液即总胆固醇酶液喷涂到第二反应物工作电极2-2上,然后50℃烘干20min,备用,所取血糖酶液的各组分及其重量百分比见表1:
表1
材料 | 重量(w/v) |
葡萄糖氧化酶 | 1% |
铁氰化钾 | 18% |
羧甲基纤维素 | 2% |
海藻糖 | 2% |
磷酸钾缓冲液(pH=8.0) | 77% |
所取总胆固醇酶液的各组分及其重量百分比见表2:
表2
材料 | 重量(w/v) |
胆固醇氧化酶 | 2% |
胆固醇酯酶 | 1% |
柠檬酸缓冲液(pH=6.0) | 83.5% |
铁氰化钾 | 12% |
海藻酸钠 | 1.5% |
4)将具有第三进样缺口4-1的导液槽体4粘贴到第一绝缘基片1上,第三进样缺口4-1与第一进样缺口1-1对齐;
5)在第二绝缘基片7两面分别印刷第三导电膜层8和第二导电膜层6,第三导电膜层8形成第一引脚8-1和第二引脚8-2;第二导电膜层6形成第一反应物参比电极6-1和第二反应物参比电极6-2;
6)将亲水浆液喷涂到第一反应物参比电极6-1上,接着将亲水浆液喷涂到第二反应物参比电极6-2上;第一反应物参比电极6-1上的亲水浆液和第二反应物参比电极6-2上的亲水浆液相同;然后50℃烘干20min,形成第一亲水膜5-1和第二亲水膜5-2;
所取第一反应物参比电极6-1上的亲水浆液和第二反应物参比电极6-2上的亲水浆液的各组分及其重量百分比见表3:
表3
材料 | 重量(w/v) |
十二烷基硫酸钠 | 0.8% |
气化二氧化硅 | 1% |
柠檬酸缓冲液(pH=6.6) | 92.2% |
铁氰化钾 | 5% |
海藻酸钠 | 1.0% |
7)将固定好第一亲水膜5-1、第二亲水膜5-2的第二绝缘基片7粘贴到导液槽体4及第一绝缘基片1上,第一导通孔7-2使第一引脚8-1与第一反应物参比电极6-1形成电连接,第二导通孔7-3使第二引脚8-2与第二反应物参比电极6-2形成电连接;第二进样缺口7-1与第一进样缺口1-1、第三进样缺口4-1对齐,形成层叠进样缺口9;
8)将印有公司商标的上盖(附图中未示出)粘贴到第二绝缘基片7上,制作成具有进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸。
比较例1:
本比较例的同步多分析物传感试纸,如图3所示,与实施例1具有进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸相比,比较例1的同步多分析物传感试纸缺少第一进样缺口1-1、第二进样缺口7-1、第三进样缺口4-1组成的层叠进样缺口9,其它结构与实施例1相同。
实施例2:
本实施例使用实施例1制备的具有进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸及比较例1的同步多分析物传感试纸测试血样。
采集新鲜静脉血液,调整红细胞压积比为40%,配制两个血样,用YSI2300葡萄糖分析仪测试血糖浓度,用生化分析仪及复星长征总胆固醇生化试剂盒测试总胆固醇。将实施例1制备的具有进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸测试,置于配套多参数分析仪中并在工作电极和参考电极两端施加300mV工作电压;取配制的血样,加到采样缺口,血液通过虹吸导样槽自动吸取约3μL样品,进入反应区与酶反应膜中试剂反应形成电流,在多参数分析仪上可快速检测出血糖、胆固醇浓度,并同时在显示屏中显视检测出的血糖、胆固醇结果,记录结果,结果见表4、表5。
表4实施例1试纸与比较例1试纸测试血糖结果
表5实施例1试纸与比较例1试纸测试总胆固醇结果
从表4、表5可以看出,实施例1制备的具有进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸测试血糖和总胆固醇重复性比比较例1的同步多分析物传感试纸更好,测试值更接近参考方法测试值。分析测试值发现,比较例1测试值中有很多异常偏高的数值,因此CV值很高。
为了分析原因,本专利研究人员对异常偏高的试纸使用万用表测量第一反应物工作电极2-1和第二反应物参比电极6-2电阻,发现所有异常偏高的试纸,第一反应物工作电极2-1和第二反应物参比电极6-2电阻只有2kΩ左右,说明两个本应该独立的反应体系短路联通了,如图5所示,虚线框内为样品分布范围,可以看到第一进样口4-2、第二进样口4-5处是联通的。
本专利研究人员对实施例1的所有试纸使用万用表测量第一反应物工作电极2-1和第二反应物参比电极6-2电阻,发现所有第一反应物工作电极2-1和第二反应物参比电极6-2电阻均超过100mΩ,说明两个本应该独立的反应体系没有短路联通。也就是说,通过在第一绝缘基片1、导液槽体4、第二绝缘基片7上分别设置第一进样缺口1-1、第三进样缺口4-1和第二进样缺口7-1,三个缺口形状相同,层叠在一起时形成的层叠进样缺口9,测试时,当样品离开第一进样口4-2、第二进样口4-5后,将不会有样品残留在进样口,从而隔绝电流干扰,如图4所示,虚线框内为样品分布范围,可以看到第一进样口4-2、第二进样口4-5处是被层叠进样缺口9隔断的。
实施例3:
举例说明具有进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸的检测物组合应用。
本实施例制备的具有进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,除了第一反应物工作电极2-1上通过印刷方法固定总胆固醇检测酶浆,第二反应物工作电极2-2上通过印刷方法固定甘油三酯检测酶浆,其它与实施例1相同。如图4所示,虚线框内为样品分布范围,可以看到第一进样口4-2、第二进样口4-5处是被层叠进样缺口9隔断的。
所取甘油三酯检测酶浆的各组分及其重量百分比见表6:
表6
材料 | 重量(w/v) |
脂蛋白脂酶 | 1% |
甘油激酶 | 2% |
磷酸甘油氧化酶 | 1 |
羧甲基纤维素 | 4% |
铁氰化钾 | 14% |
磷酸钾缓冲液(pH=7.0) | 78% |
所取总胆固醇酶液的各组分及其重量百分比见表7:
表7
材料 | 重量(w/v) |
胆固醇氧化酶 | 2% |
铁氰化钾 | 12% |
羟乙基纤维素 | 4% |
胆固醇酯酶 | 1% |
柠檬酸缓冲液(pH=6.0) | 81% |
采集新鲜静脉血液,调整红细胞压积比为40%,配制两个血样,用生化分析仪及复星长征总胆固醇、甘油三酯生化试剂盒分别测试总胆固醇、甘油三酯。将实施例3制备的具有进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸测试,置于配套多参数分析仪中并在工作电极和参考电极两端施加300mV工作电压;取配制的血样,加到层叠进样缺口9,测试总胆固醇、甘油三酯浓度,记录结果,结果见表8、表9。
表8实施例3具有进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸测试甘油三酯结果
表9实施例3具有进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸测试总胆固醇结果
表8、表9结果表明,实施例3制备的具有进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸测试总胆固醇和甘油三酯重复性好,测试值接近参考方法测试值。说明本发明具有进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸在第一绝缘基片1、导液槽体4、第二绝缘基片7上分别设置第一进样缺口1-1、第三进样缺口4-1和第二进样缺口7-1,三个缺口形状相同,层叠在一起时形成的层叠进样缺口9,应用在不同生化标志物的测试,可以获得很好的测试重复性和准确度。
以上举例仅为举例性,并非限制性。任何未脱离本发明的精神与范畴,而对其进行的等效修改和变更,包含但不限定将本发明实施例中所述原件以软体或硬体或韧体或其任何组合,均应包含于本发明的权利范围内。
Claims (10)
1.一种进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,包括第一绝缘基片和第二绝缘基片、以及设置在第一绝缘基片和第二绝缘基片上的两个相互独立的检测体系,所述检测体系包括设置在第一绝缘基片和第二绝缘基片中的导液槽体,所述导液槽体设有独立的第一导液槽和第二导液槽,第一导液槽设有第一进样口,第二导液槽设有第二进样口;
其特征在于,所述第一绝缘基片设有第一进样缺口,第二绝缘基片设有第二进样缺口,导液槽体设有第三进样缺口;所述第一进样缺口、第二进样缺口和第三进样缺口的形状和尺寸相同;第一绝缘基片、导液槽体、第二绝缘基片顺序层叠后,形成一个层叠进样缺口,层叠进样缺口进深方向的两侧端面,分别是第一进样口、第二进样口。
2.根据权利要求1所述的进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,其特征在于,所述层叠进样缺口开口宽度为0.5mm~5mm、垂直进深为1mm~10mm。
3.根据权利要求1所述的进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,其特征在于,所述层叠进样缺口呈长方形、U形或V形。
4.根据权利要求1所述的进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,其特征在于,包括
位于第一绝缘基片上的第一导电膜层,所述第一导电膜层包括相互绝缘的第一反应物工作电极和第二反应物工作电极;
反应膜层,所述反应膜层包括第一反应膜和第二反应膜,第一反应膜覆盖于第一反应物工作电极上,第二反应膜覆盖于第二反应物工作电极上。
5.根据权利要求4所述的进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,其特征在于,所述导液槽体设置在第一导电膜层上,所述导液槽体将第一反应膜和第二反应膜分隔在独立的导液槽内,导液槽体形成第一导液槽和第二导液槽,第一反应膜设置在第一导液槽内,第二反应膜设置在第二导液槽内,第一导液槽对应第一反应物工作电极,第二导液槽对应第二反应物工作电极。
6.根据权利要求4所述的进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,其特征在于,所述第二绝缘基片的背面设有第二导电膜层,第二导电膜层包括第一反应物参比电极和第二反应物参比电极;
包括亲水膜层,所述亲水膜层包括第一亲水膜和第二亲水膜,第一亲水膜覆盖于第一反应物参比电极上,第二亲水膜覆盖于第二反应物参比电极上;
第二绝缘基片的背面与导液槽体、第一绝缘基片贴接,第一导液槽形成第一反应腔,第二导液槽形成第二反应腔,导液槽体将第一反应膜、第二反应膜分隔在独立的反应腔内;第一亲水膜与第一反应膜相对应,第二亲水膜与第二反应膜相对应。
7.根据权利要求6所述的进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,其特征在于,包括第三导电膜层,所述第三导电膜层设置在第二绝缘基片的前面,第三导电膜层分别设有第一引脚和第二引脚;
第二绝缘基片设有第一导通孔、第二导通孔,第一导通孔使第一引脚与第一反应物参比电极形成电连接,第二导通孔使第二引脚与第二反应物参比电极形成电连接。
8.根据权利要求6所述的进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,其特征在于,所述第二绝缘基片和第二导电膜层对应于第一亲水膜处设有第一进样观察窗,第二绝缘基片和第二导电膜层对应于第二亲水膜处设有第二进样观察窗。
9.根据权利要求6所述的进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,其特征在于,所述第二绝缘基片的下部设有基片缺口,第一绝缘基片上的第一反应物工作电极和第二反应物工作电极从基片缺口露出。
10.权利要求1-9任一项所述的进样缺口隔绝电流干扰的同步多分析物传感试纸,在制备同步检测血液样本或尿液样本的乙酰氨基葡萄糖苷酶、胆汁酸、谷丙转氨酶、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、尿酸、尿糖、乳酸、血糖、酮体、血红蛋白或胆红素任意组合的两项生化标志物检测试纸中的应用。
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