CN106962695B - 一种茶尺蠖人工饲料、制备方法及茶尺蠖饲养方法 - Google Patents
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Abstract
一种茶尺蠖人工饲料、制备方法及茶尺蠖饲养方法，属于昆虫饲养技术领域。该饲料包括以下原料：茶叶粉，黄豆粉、酵母粉、蔗糖、琼脂、山梨酸、苯甲酸和纯净水。本发明具有以下有益效果：一、本饲料配方简单，成本低廉，所用原料易制易得，饲料制作简便。饲养1代幼虫一般只需配制2‑3次饲料。二、本饲料不易霉变，饲养效果好。用本饲料喂养，茶尺蠖生长发育正常，幼虫存活率、成虫生殖力等生物学指标与鲜叶饲喂的无显著差异，可从卵孵化开始全程取食人工饲料完成世代，并可连续饲养多代。
Description
技术领域
本发明属于昆虫饲养技术领域，具体涉及一种茶尺蠖人工饲料、制备方法及茶尺蠖饲养方法。
背景技术
茶尺蠖（Ectropis obliqua Prout）和灰茶尺蠖（Ectropis grisescens Warren）为两近缘种，常统称为茶尺蠖，它们是我国茶园最主要的尺蠖类害虫。发生代数多、繁殖速度快，常暴发成灾，对茶叶产量、品质影响极大。室内大量饲养茶尺蠖，是开展防治药剂筛选、病毒增殖和各项相关研究的基础。采用人工饲料饲养具有鲜叶饲养所不具备的优点，如不受季节影响，更易做到标准化和规模化饲养等。
目前已报道的茶尺蠖人工饲料有好几种，其中多数是带茶叶粉的半纯饲料(柳德宝等1982，赵烨烽等1982，李云寿等1992，陈建明等CN200710068384.0，史洪中等CN201410174219.3)，也有不带茶叶粉的半纯饲料(张永安等CN200510116783.0)。综合起来，已有饲料主要存在以下不足：（1）配方组分复杂，或饲料成本高，或饲料制作过程繁琐，难以大量应用；（2）饲养效果不佳，有的幼虫历期较鲜叶对照延长很多天，有的不能完成一个世代，无法进行全程继代饲养。因此，亟需寻找一种成本低廉、操作简便、饲养效果好的人工饲料及其饲养方法。这对提高茶尺蠖大量饲养的效率具有重要的意义。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种茶尺蠖人工饲料、制备方法及茶尺蠖饲养方法的技术方案。
所述的一种茶尺蠖人工饲料，其特征在于包括以下重量的原料：茶叶粉110～135g，黄豆粉30～50g、酵母粉10～20g、蔗糖15～35g、VC1～5g、琼脂10～20g、山梨酸0.5～1.5g、苯甲酸0.5～1.5g和纯净水700～800mL。
所述的一种茶尺蠖人工饲料，其特征在于包括以下重量的原料：茶叶粉115～130g，黄豆粉35～45g、酵母粉12～18g、蔗糖20～30g、VC2～4g、琼脂12～18g、山梨酸0.8～1.2g、苯甲酸0.8～1.2g和纯净水700～800mL。
所述的一种茶尺蠖人工饲料的制备方法，其特征在于包括以下工艺步骤：
（1）茶叶粉制备：采集春季或秋季的新鲜嫩茶梢，在室内空调房中自然晾干后，用高速粉碎机将之磨成粉，过60目筛后倒入瓶中，瓶口用玻璃纸扎紧密封，低温保存备用；
（2）黄豆粉制备：取食用黄豆，用高速粉碎机磨成粉，过60目筛，再在锅中炒熟炒香，倒入瓶中，瓶口用玻璃纸扎紧，低温保存备用；
（3）按照所述重量称取各原料；
（4）先用少量丙酮或无水乙醇将山梨酸和苯甲酸分别溶解后，混匀，倒入茶叶粉、黄豆粉和酵母粉的混合粉中，搅拌均匀，再将混合物置于40℃烘箱低温烘干，研磨搅拌均匀后备用；
（5）将琼脂用纯净水溶解并加热至沸腾，待冷却至60℃时加入已用水溶解的蔗糖和VC，搅拌均匀后，倒入步骤（4）的混合物中，迅速搅拌均匀后，倒入小烧杯中或培养皿中，其中少量倒成1mm厚的薄层，供饲养前期使用，再用保鲜膜将小烧杯或培养皿封口后放入冰箱冷藏备用。
利用所述的茶尺蠖人工饲料进行茶尺蠖人工饲养的方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）将得到的薄层饲料切成小块，较分散地贴在养虫瓶内一侧的瓶壁上，将即将孵化的卵放入养虫瓶中或接入初孵茶尺蠖幼虫，瓶口用白纸和保鲜膜封口，放置在养虫室内饲养，将贴有饲料的一侧朝向光源；
（2）4天后添加饲料，将小块薄层饲料贴在瓶内原饲料间或附近，便于幼虫爬至新饲料取食；
（3）待幼虫长至3龄时，将冷藏备用的饲料取出切成小块，用玻璃毛细管将饲料块串起，一根毛细管上串2-4块，每瓶放置3-4根，相互交叉放置，任幼虫爬行取食，根据饲料的干湿情况添加或更换饲料，一般4-5天更换或添加1次，幼虫进入4龄后，加大饲料的添加量，每天或隔天添加1次；
（4）幼虫饲养直至化蛹，在瓶中羽化后，按常规方法配对、取卵，然后按上述方法继续饲养下1代。
所述的茶尺蠖人工饲养的方法，其特征在于所述的步骤1）中养虫瓶内的接虫量为60～100头。
本发明所述的人工饲料及其饲养的方法，不仅适用于茶尺蠖人工饲养，同样也适用于灰茶尺蠖的人工饲养及茶尺蠖核型多角体病毒的增殖。
本发明具有以下有益效果：一、本饲料配方简单，成本低廉，所用原料易制易得，饲料制作简便。茶叶粉与黄豆粉制好后冷藏保存，可供1年之内使用。饲料使用时现配现用，若有多余，可低温保存，保质期10-12天。饲养1代幼虫一般只需配制2-3次饲料。二、本饲料不易霉变，饲养效果好。用本饲料喂养，茶尺蠖生长发育正常，幼虫历期比鲜叶饲喂的延长2-4天，存活率、生殖力等生物学指标与鲜叶饲喂的无显著差异，可从卵孵化开始全程取食人工饲料完成世代，并可连续饲养多代。
本发明的创新之处有：①一般配制人工饲料的茶叶粉是绿茶粉（CN200710068384.0）或茶鲜叶在110-120℃之间烘干磨碎而成（李云寿等1992），绿茶粉在茶叶加工过程中经过了180℃高温杀青，高温对茶叶中养分物质影响较大。本发明茶叶粉的制备采用的是将新鲜茶梢在空调间中自然阴干后磨粉的方法，较大程度上保持了茶叶中原有物质，满足茶尺蠖所需要的微量元素，有利其生长发育。试验表明，饲养效果优于现有技术，幼虫死亡率显著低于现有技术，可实现从卵孵化开始全程取食人工饲料完成整个世代。CN200710068384.0中茶尺蠖是从2龄才开始取食人工饲料，无法实现用人工饲料全程饲养。②配制人工饲料需加入防腐剂，一般均是将防腐剂直接加入琼脂液体中。由于防腐剂不溶于水，这样防腐剂在人工饲料中是小颗粒状的，也难于分布均匀，对茶尺蠖影响很大。本发明采用将防腐剂先用有机溶剂溶解，混入茶叶粉等主要材料后再低温烘干、使有机溶剂彻底蒸发的方法，使防腐剂能十分均匀地分布在人工饲料中，防腐效果好，同时对茶尺蠖生长发育不会产生影响。③本发明充分考虑茶尺蠖幼虫的取食习性，1-2龄期（幼虫活动性不强，有较强趋光性）采用将饲料贴在瓶内一侧瓶壁的方式饲喂，3龄起幼虫活动性增强，采用将人工饲料串在毛细管上、毛细管交叉放置的方式，利于幼虫爬行与取食，饲养效果好。
具体实施方式
以下结合实施例来进一步说明本发明。
实例1：
一、饲料材料准备
1茶叶粉，自制。采集春季或秋季的新鲜嫩茶梢，在室内空调房中（温度26℃左右）自然晾干后，用高速粉碎机将之磨成粉，过60目筛后倒入瓶中，瓶口用玻璃纸扎紧密封，低温保存备用。
2黄豆粉，自制。购买食用黄豆，用高速粉碎机磨成粉，过60目筛，在锅中炒熟炒香，倒入瓶中，瓶口用玻璃纸扎紧，低温保存备用。
3山梨酸，国药集团化学试剂有限公司产品。
4苯甲酸，西陇化工股份有限公司产品。
5维生素C，浙江瑞新药业股份有限公司产品。
6琼脂粉，国药集团化学试剂有限公司产品。
7酵母粉，浙江富阳市杭福生物制品厂生产（浓缩酵母浸出粉）。
8蔗糖，杭州雅丽食品有限公司产品。
二、人工饲料配制
按以下配方称好各原料：茶叶粉12.5克，黄豆粉4.0克，酵母粉1.5克，蔗糖2.5克，Vc 0.3克，琼脂1.5克，山梨酸0.1克，苯甲酸0.1克，纯净水72～77.5mL。
先用少量丙酮（或无水乙醇）将山梨酸和苯甲酸分别溶解后，混匀倒入茶叶粉、黄豆粉和酵母粉的混合粉中搅拌均匀，以混合粉全部湿润为度，再将混合物放入烘箱中低温（40℃）烘干，使溶剂全部蒸发，后研磨搅拌均匀备用。
用10mL纯净水溶解蔗糖，5mL纯净水溶解Vc片剂，57-62.5mL纯净水溶解琼脂。将琼脂液加热至沸腾，持续3～5min。待冷却至60℃时加入已用水溶解的蔗糖和VC。充分搅拌均匀，倒入上述茶叶粉、黄豆粉和酵母粉的混合粉中，迅速搅拌均匀后，倒入100mL小烧杯中或培养皿中，其中少量倒成1mm厚的薄层，供饲养前期使用，将小烧杯中或培养皿用保鲜膜封口后放入冰箱冷藏备用。
每次配制的饲料量应根据饲养需要而确定。一般幼虫低龄期用量较少，高龄期则需成倍增加。
三、人工饲料饲养
将薄层饲料切成小块（1cm×0.5~1cm），较分散地贴在养虫瓶（500mL罐头瓶）内一侧的瓶壁上，接入初孵的茶尺蠖幼虫，每瓶接虫60～100头。注意将贴有饲料的一侧朝向光源。以鲜叶饲喂作为对照。所有养虫瓶均用白纸和保鲜膜封口，放置在养虫室内养虫架上。饲养条件为自然变温20～26℃、湿度70～80%、光照L/D=12h/12h。
待幼虫长至2龄后（约4天后），添加饲料。将小块薄层饲料贴在瓶内原饲料间或附近，便于幼虫爬至新饲料取食。待幼虫长至3龄时，将冷藏备用的饲料取出切成小块，用玻璃毛细管将饲料块串起，一根毛细管上串2～4块，每瓶放置2～4根，相互交叉放置，任幼虫爬行取食。因1～3龄幼虫取食量较小，饲料添加的量较少。是否添加或更换饲料根据饲料的干湿情况而定。幼虫进入4龄后，饲料添加量相应加大，可每天或隔天添加1次。饲养1代幼虫一般只需配制2～3次饲料。
幼虫饲养直至化蛹，在瓶中羽化后，按常规方法配对、取卵。然后按上述方法继续饲养下1代。也可将饲养瓶内的蛹取出，放入干净的瓶中饲养，每瓶40-50头蛹，羽化后按常规方法配对、取卵。再按上述方法继续饲养下1代。
本发明幼虫饲养过程中虫粪不长霉。比鲜叶饲养更换食料次数少很多，十分简便实用。人工饲料饲喂的茶尺蠖生长发育正常，幼虫历期比鲜叶饲喂的略有延长，存活率、生殖力等生物学指标与取食鲜叶的对照无显著差异（表1），可从卵孵化开始全程取食人工饲料，并可连续饲养多代（表2）。
表1 人工饲料与鲜叶饲养茶尺蠖的效果
表2 用人工饲料继代饲养茶尺蠖的效果
实例2：利用本发明的饲料进行EoNPV增殖
一、带毒（EoNPV）人工饲料制备
人工饲料所用材料同上，EoNPV为中国农科院茶叶研究所制备的提纯液，多角体含量为5×108PIB/mL。
按以下配方称好各原料：茶叶粉12.5克，黄豆粉4.0克，酵母粉1.5克，蔗糖2.5克，Vc 0.3克，琼脂1.5克，山梨酸0.1克，苯甲酸0.1克，EoNPV提纯液0.23mL。
先用少量丙酮（或无水乙醇）将山梨酸和苯甲酸分别溶解后，混匀倒入茶叶粉、黄豆粉和酵母粉的混合粉中搅拌均匀，再将混合物放入烘箱中低温（40℃）烘干后，研磨搅拌均匀备用。
用10mL纯净水溶解蔗糖，5mL纯净水溶解Vc片剂，57mL纯净水溶解琼脂。将琼脂液加热至沸腾，持续3~5min。待冷却至60℃时加入蔗糖液、VC液和EoNPV病毒的混合液。搅拌均匀后，倒入上述茶叶粉、黄豆粉和酵母粉的混合粉中，迅速搅拌均匀后，倒入100mL小烧杯中或小培养皿中，用保鲜膜封口后放入冰箱冷藏备用。
二、饲毒增殖
将饲料切成小块（1cm×1~2cm），用玻璃毛细管将饲料块串起放入养虫瓶中，一根毛细管上串4～5块，每瓶放置2～3根，相互交叉放置。接入健康茶尺蠖3龄幼虫，每瓶接入30～40头，任幼虫取食。以饲喂带病毒鲜叶（鲜叶在1×106PIB/mL病毒液中浸渍晾干）为对照。待幼虫全部死亡后，收集死虫，按常规方法离心提纯病毒并测定多角体含量。
试验结果（表3）表明，用本发明人工饲料添加病毒后饲喂3龄茶尺蠖幼虫进行病毒增殖可行，其病毒产量与鲜叶饲毒增殖的相当，相互之间没有显著差异。
表3 人工饲料增殖病毒与鲜叶增殖病毒的比较
实例3：本发明与现有技术进行对比饲养
设置了3种人工饲料的对比试验，按照茶粉制备方法的不同，设置了以下处理：（1）鲜叶自然晾干后磨粉（同本发明方法）,（2）鲜叶110℃烘干后磨粉（同李云寿等1992），（3）购买的特级炒青绿茶磨粉（同CN200710068384.0方法），按实例1方法分别配制3种饲料并进行饲养。结果（表4）表明，茶尺蠖卵孵化后取食人工饲料3，幼虫发育不良，未至3龄即陆续死亡，死亡率达100%，不能完成一个世代；而取食人工饲料1和人工饲料2则能顺利完成一个世代。与人工饲料2相比，本发明所用方法（取食人工饲料1），幼虫死亡率显著更低，幼虫历期与鲜叶对照更接近。
表4 3种人工饲料的饲养效果比较
Claims (3)
1.一种茶尺蠖人工饲料，其特征在于由以下组分制备得到：茶叶粉115～130g，黄豆粉35～45g、酵母粉12～18g、蔗糖20～30g、VC2～4g、琼脂12～18g、山梨酸0.8～1.2g、苯甲酸0.8～1.2g和纯净水700～800mL；
该种茶尺蠖人工饲料的制备方法，包括以下工艺步骤：
（1）茶叶粉制备：采集春季或秋季的新鲜嫩茶梢，在室内空调房中自然晾干后，用高速粉碎机将之磨成粉，过60目筛后倒入瓶中，瓶口用玻璃纸扎紧密封，低温保存备用；
（2）黄豆粉制备：取食用黄豆，用高速粉碎机磨成粉，过60目筛，再在锅中炒熟炒香，倒入瓶中，瓶口用玻璃纸扎紧，低温保存备用；
（3）按照下述重量称取各原料：茶叶粉115～130g，黄豆粉35～45g、酵母粉12～18g、蔗糖20～30g、VC2～4g、琼脂12～18g、山梨酸0.8～1.2g、苯甲酸0.8～1.2g和纯净水700～800mL；
（4）先用少量丙酮或无水乙醇将山梨酸和苯甲酸分别溶解后，混匀，倒入茶叶粉、黄豆粉和酵母粉的混合粉中搅拌均匀，再将混合物置于40℃烘箱低温烘干，研磨搅拌均匀后备用；
（5）将琼脂用纯净水溶解并加热至沸腾，待冷却至60℃时加入已用水溶解的蔗糖和VC，搅拌均匀后，倒入步骤（4）的混合物中，迅速搅拌均匀后，倒入小烧杯中或培养皿中，其中少量倒成1mm厚的薄层，供饲养前期使用，再用保鲜膜将小烧杯或培养皿封口后放入冰箱冷藏备用。
2.利用权利要求1制得的茶尺蠖人工饲料进行茶尺蠖人工饲养的方法，其特征在于包括以下步骤：
1）将得到的薄层饲料切成小块，较分散地贴在养虫瓶内一侧的瓶壁上，将即将孵化的卵放入养虫瓶中或接入初孵茶尺蠖幼虫，瓶口用白纸和保鲜膜封口，放置在养虫室内饲养，将贴有饲料的一侧朝向光源；
2）4天后添加饲料，将小块薄层饲料贴在瓶内原饲料间或附近，便于幼虫爬至新饲料取食；
3）待幼虫长至3龄时，将冷藏备用的饲料取出切成小块，用玻璃毛细管将饲料块串起，一根毛细管上串2-4块，每瓶放置3-4根，相互交叉放置，任幼虫爬行取食，根据饲料的干湿情况添加或更换饲料，一般4-5天更换或添加1次，幼虫进入4龄后，加大饲料的添加量，每天或隔天添加1次；
4）幼虫饲养直至化蛹，在瓶中羽化后，按常规方法配对、取卵，然后按上述方法继续饲养下1代。
3.如权利要求2所述的茶尺蠖人工饲养的方法，其特征在于所述的步骤1）中养虫瓶内的接虫量为60～100头。
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