CN106927969A - 具有防控稻瘟病和蔓枯病功能的生物有机肥及其制备方法 - Google Patents

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CN106927969A CN201710052947.0A CN201710052947A CN106927969A CN 106927969 A CN106927969 A CN 106927969A CN 201710052947 A CN201710052947 A CN 201710052947A CN 106927969 A CN106927969 A CN 106927969A
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Abstract

本发明公开了一种具有防控稻瘟病和蔓枯病功能的生物有机肥，其特征在于，原料组成包括：地衣芽孢杆菌ABTNL‑1和多粘类芽孢杆菌ABTNL‑X1两种拮抗菌、以动物粪便与植物残体为原材料制备的好氧堆肥以及聚γ谷氨酸溶液；制备方法为：将地衣芽孢杆菌ABTNL‑1和多粘类芽孢杆菌ABTNL‑X1两种拮抗菌培养活化后制成混合菌液，将所述混合菌液接种于以动物粪便与植物残体为原材料制备的好氧堆肥中，发酵得到的腐熟产品后加入聚γ谷氨酸溶液，阴干，制得具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥。本发明产品的生产工艺简单，原料来源广泛，生产成本低，适合大规模生产具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥。

Description

具有防控稻瘟病和蔓枯病功能的生物有机肥及其制备方法
技术领域
本发明生物有机肥技术领域，特别涉及一种具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥及其制备方法。
背景技术
水稻(学名：Oryza sativa)是草本稻属的一种，也是稻属中作为粮食的最主要最悠久的一种，是世界主要粮食作物之一。中国水稻播种面占全国粮食作物的1/4，而产量则占一半以上。稻瘟病是由Magnaporthe oryzae(无性态：Pyricularia oryzae)侵染所致。稻瘟病是水稻三大病害之一，可引起大幅度减产，严重时减产40％～50％，甚至颗粒无收。全球每年因稻瘟病造成的水稻产量损失达11％～30％，20世纪90年代以来，中国稻瘟病的年发生面积均在380万hm2以上，稻谷损失达数亿公斤。
瓜类蔓枯病(Gummy stem blight)又称黑腐病，亚隔孢壳属的瓜类黑腐球壳菌Didymella bryoniae引起的，属子囊菌亚门真菌腔菌纲座囊菌目座囊科。瓜类蔓枯病是影响瓜类蔬菜生产的重要病害之一，它可以为害甜瓜、黄瓜、西瓜等作物，常造成减产15％～30％，重病田块可减产80％以上，果实品质也会受到极大影响，严重威胁蔬菜生产。瓜类蔓枯病是由
于此同时随着我国养殖业与种植业分离，没有足够的农田来消纳规模化、集约化养殖业所产生大量的养殖业废弃物，对生态环境造成严重影响。而农田的化学肥料施用量逐年递增，对作物产量的贡献瓶颈日益凸显。
目前对于水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病的主要防治方法是：抗病品种和药剂防治，其只针对个别品种有效，而且长期使用化学药剂会破坏生态平衡，造成次要病害猖獗、药剂残留、环境污染等问题。因此，结合抗病品种的选育及具备拮抗功能的有益菌的生物防控等防控方法将是未来土传植物病害的防控趋势。
生物有机肥的使用能够改良土壤、提高作物品质并能通过增强作物抗病性、利用微生物多样性抑制病原菌等防控控制土传植物病害，而且可以为拮抗菌提供营养，通过拮抗菌自身及其代谢产物对病原菌的抑制达到很好的防治效果。其中，许多芽孢杆菌产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质对多种致病菌有明显的抑制作用。
发明内容
本发明的目的在于制备一种具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥，采用对水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病的病原菌有明显抑制作用的拮抗芽孢杆菌制备生物有机肥，提高土壤肥力的同时，防控植物病害，减少农药施用。
为达到上述目的，本发明提供了一种具有防控稻瘟病和蔓枯病功能的生物有机肥，原料组成包括：地衣芽孢杆菌(Baclicus lincheniformis)ABTNL-1+CGMCC+NO.10037和多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1两种拮抗菌、以动物粪便与植物残体为原材料制备的好氧堆肥以及聚γ谷氨酸溶液；
其中，各原料的处理方法为：将地衣芽孢杆菌ABTNL-1和多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1两种拮抗菌培养活化后制成混合菌液，将所述混合菌液接种于以动物粪便与植物残体为原材料制备的好氧堆肥中，发酵得到的腐熟产品后加入聚γ谷氨酸溶液，阴干，制得具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥。
优选方式下，所述混合菌液为地衣芽孢杆菌ABTNL-1和多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1菌液等比例混合；所述多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1菌液与地衣芽孢杆菌ABTNL-1菌液的菌体浓度均为108～109CFU·ml-1；
所述动物粪便与植物残体的质量比为3.5～4.5:1～1.5；
所述混合菌液体积与所述堆料质量的比例为1～5ml菌液/100g堆料；
所述聚γ谷氨酸溶液与所述腐熟产物的体积质量比为3.0～5.0:100(ml/g)。
本发明方法制得的生物有机肥有效活菌数>5×108CFU·g-1，有机质含量>45％，含水率为15～30％。
上述地衣芽孢杆菌ABTNL-1保藏编号：CGMCC NO.10037，多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1可从中国农业微生物菌种保藏管理中心获得，也可以通过自行分离得到。
本发明还提供了上述具有防控稻瘟病和蔓枯病功能的生物有机肥的制备方法，将地衣芽孢杆菌ABTNL-1和多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1两种拮抗菌培养活化后制成混合菌液，将所述混合菌液接种于以动物粪便与植物残体为原材料制备的好氧堆肥中，发酵得到的腐熟产物后加入聚γ谷氨酸溶液，阴干，制得具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥。
优选方式下，具体步骤包括：
S1、堆肥的建立：
将动物粪便与植物残体粉碎后混合，所述动物粪便与植物残体的质量比为3.5～4.5:1～1.5，混合后的堆料中控制含水率在50～65％，得到堆料；
S2、制备拮抗菌混合菌液：
用液体培养基分别培养拮抗菌地衣芽孢杆菌ABTNL-1、多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1至每种拮抗菌菌液中菌体浓度为108～109CFU·ml-1后，等比例混合两种菌液，制得混合菌液；
S3、接种拮抗菌混合菌液：在步骤S1制备的堆料中接种步骤S2制得的混合菌液，建立堆肥，进行发酵得到腐熟产物；
所述混合菌液体积与所述堆料质量的比例为1～5ml菌液/100g堆料；
S4、制备生物有机肥：
向步骤S3制得的腐熟产物中接入浓度为200mg·L-1的聚γ谷氨酸溶液，充分混匀，阴干至含水量为15～30％，即得到具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥；
加入的所述聚γ谷氨酸溶液与所述腐熟产物的体积质量比为3.0～5.0:100(ml/g)。
优选方式下，步骤S1所述动物粪便为猪粪、鸡粪或牛粪；所述植物残体为粉碎的枯草、树枝或秸秆。
进一步优选，步骤S2所述液体培养基为每升蒸馏水中溶解氯化钠10.0g、胰蛋白胨10.0g、酵母粉5.0g，经121℃，20分钟灭菌后使用。
进一步优选地，步骤S3所述发酵的条件为：在堆肥容器中分层放置物料，并均匀泼洒所述混合菌液后充分混合进行微生物好氧发酵，温度随之上升，达到并维持55～65℃的高温；当堆料温度首次出现明显下降时进行翻堆，并补充水分，堆料温度再一次升高，同样，温度明显下降时，再次翻堆，如此往复2-3次，直至堆料温度高于室温5℃以内时，得到腐熟产物。
本发明温度下降10℃左右认为为明显下降；本发明补充水分的具体标准为在堆肥初始水分为60％，后续补充水分不是固定的比例，能维持发酵即可。
本发明制得的堆肥无异味、不招引蚊虫，种子发芽率>80％、虫卵含量0％符合国家标准。
与现有技术相比，本发明的优势和积极效果为：
1、本发明从动物粪便中筛选得到的两株芽孢杆菌地衣芽孢杆菌ABTNL-1、多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1菌体本身能够对水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病致病菌有竞争营养的拮抗作用，且能够产生枯草菌素、多粘菌素、等代谢产物，其对水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病致病菌均有明显的抑制作用。
2、本发明利用发酵制备的生物有机肥可提高土壤肥力，有利于土壤形成团粒结构从而改良土壤性状，促进植物种子萌发及生长，增强植物抗逆能力，改善产品品质，使产品达到绿色或有机标准。
3、本发明能在一定程度上防控植物病害，减少农药施用，起到一举多得的功用。
本发明产品的生产工艺简单，原料来源广泛，生产成本低，适合大规模生产具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥。
保藏说明
本发明涉及的生物材料样品的保藏信息：参据的微生物(株)为ABTNL-1，分类命名为地衣芽孢杆菌(Baclicus lincheniformis)，于2014年11月21日由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)保藏，保藏编号CGMCC NO.10037。CGMCC地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
具体实施方式
本发明提供如下实施例和对比例，以水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病为例说明本发明对水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病的防控效果的具体效果。
实施例1
一种具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥，通过以下步骤的生产方法制得：
1、堆料的准备
将猪粪、鸡粪或牛粪等动物粪便与枯草、树枝或秸秆等植物残体粉碎后按质量比3.5：1混合后，调整堆料含水率为60％，保存备用。
2、混合菌液与聚γ谷氨酸溶液的制备：
用液体培养基分别培养拮抗菌地衣芽孢杆菌ABTNL-1、多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1，等比例混合，制得混合菌液；制备浓度为200mg·L-1的聚γ谷氨酸溶液。
其中液体培养基配为氯化钠10.0g、胰蛋白胨10.0g、酵母粉5.0g溶解于1L蒸馏水中，经121℃，20分钟灭菌后使用；每种拮抗菌液中菌体浓度均为108～109CFU·ml-1。
3、堆肥的建立与条件控制
将步骤2中制备的混合菌液以菌液体积与堆料质量比(以下称体积质量比)1％添加到步骤1中制备的堆料中。在堆肥容器中分层放置物料，并均匀泼洒液态菌液后充分混合进行微生物好氧发酵，温度随之上升，达到并维持55～65℃的高温；当堆料温度首次出现明显下降时进行翻堆，并补充水分，堆料温度再一次升高，同样，温度明显下降时，再次翻堆，如此往复2～3次直至堆料温度接近或稍高于室温，并且堆肥无异味、不招引蚊虫。测定其种子发芽率>80％、虫卵含量为0％时，将堆肥腐熟产物保存备用。
4、具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥的制备
向步骤3所得堆肥腐熟产物中以体积质量比3％添加聚γ谷氨酸溶液，充分混匀后阴干至含水量为15～30％，且有效活菌数>5×108CFU·g-1，有机质含量>45％，符合国家标准。将产品粉碎后过筛，制成粉料，可根据商业需要进行造粒，制得具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥的。
实施例2
一种具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥，通过以下步骤的生产方法制得：
1、堆料的准备
将猪粪、鸡粪或牛粪等动物粪便与枯草、树枝或秸秆等植物残体粉碎后按质量比3.5：1混合后，调整堆料含水率为60％，保存备用。
2、混合菌液与聚γ谷氨酸溶液的制备：
用液体培养基分别培养拮抗菌地衣芽孢杆菌ABTNL-1、多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1，等比例混合，制得混合菌液；制备浓度为200mg·L-1的聚γ谷氨酸溶液。
其中液体培养基配为氯化钠10.0g、胰蛋白胨10.0g、酵母粉5.0g溶解于1L蒸馏水中，经121℃，20分钟灭菌后使用；每种拮抗菌液中菌体浓度均为108～109CFU·ml-1。
3、堆肥的建立与条件控制
将步骤2中制备的混合菌液以菌液体积与堆料质量比(以下称体积质量比)5％添加到步骤1中制备的堆料中。在堆肥容器中分层放置物料，并均匀泼洒液态菌液后充分混合进行微生物好氧发酵，温度随之上升，达到并维持55～65℃的高温；当堆料温度首次出现明显下降时进行翻堆，并补充水分，堆料温度再一次升高，同样，温度明显下降时，再次翻堆，如此往复2～3次直至堆料温度接近或稍高于室温，并且堆肥无异味、不招引蚊虫。测定其种子发芽率>80％、虫卵含量为0％时，将堆肥腐熟产物保存备用。
4、具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥的制备
向步骤3所得堆肥腐熟产物中以体积质量比3％添加聚γ谷氨酸溶液，充分混匀后阴干至含水量为15～30％，且有效活菌数>5×108CFU·g-1，有机质含量>45％，符合国家标准。将产品粉碎后过筛，制成粉料，可根据商业需要进行造粒，制得具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥的。
对比例1(实施例2缺少地衣芽孢杆菌ABTNL-1)
1、堆料的准备
将猪粪、鸡粪或牛粪等动物粪便与枯草、树枝或秸秆等植物残体粉碎后按质量比3.5：1混合后，调整堆料含水率为60％，保存备用。
2、菌液与聚γ谷氨酸溶液的制备：
用液体培养基培养拮抗菌多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1后，制得菌液；制备浓度为200mg·L-1的聚γ谷氨酸溶液。
其中液体培养基配为氯化钠10.0g、胰蛋白胨10.0g、酵母粉5.0g溶解于1L蒸馏水中，经121℃，20分钟灭菌后使用；拮抗菌液中菌体浓度均为108～109CFU·ml-1。
3、堆肥的建立与条件控制
将步骤2中制备的菌液以菌液体积与堆料质量比(以下称体积质量比)5％添加到步骤1中制备的堆料中。在堆肥容器中分层放置物料，并均匀泼洒液态菌液后充分混合进行微生物好氧发酵，温度随之上升，达到并维持55～65℃的高温；当堆料温度首次出现明显下降时进行翻堆，并补充水分，堆料温度再一次升高，同样，温度明显下降时，再次翻堆，如此往复2～3次直至堆料温度接近或稍高于室温，并且堆肥无异味、不招引蚊虫。测定其种子发芽率>80％、虫卵含量为0％时，将堆肥腐熟产物保存备用。
4、具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥的制备
向步骤3所得堆肥腐熟产物中以体积质量比3％添加聚γ谷氨酸溶液，充分混匀后阴干至含水量为15～30％，且有效活菌数>5×108CFU·g-1，有机质含量>45％，符合国家标准。将产品粉碎后过筛，制成粉料，可根据商业需要进行造粒，制得具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥的。
对比例2(实施例2缺少多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1)
1、堆料的准备
将猪粪、鸡粪或牛粪等动物粪便与枯草、树枝或秸秆等植物残体粉碎后按质量比3.5：1混合后，调整堆料含水率为60％，保存备用。
2、菌液与聚γ谷氨酸溶液的制备：
用液体培养基培养拮抗菌地衣芽孢杆菌ABTNL-1后，制得菌液；制备浓度为200mg·L-1的聚γ谷氨酸溶液。
其中液体培养基配为氯化钠10.0g、胰蛋白胨10.0g、酵母粉5.0g溶解于1L蒸馏水中，经121℃，20分钟灭菌后使用；拮抗菌液中菌体浓度均为108～109CFU·ml-1。
3、堆肥的建立与条件控制
将步骤2中制备的菌液以菌液体积与堆料质量比(以下称体积质量比)5％添加到步骤1中制备的堆料中。在堆肥容器中分层放置物料，并均匀泼洒液态菌液后充分混合进行微生物好氧发酵，温度随之上升，达到并维持55～65℃的高温；当堆料温度首次出现明显下降时进行翻堆，并补充水分，堆料温度再一次升高，同样，温度明显下降时，再次翻堆，如此往复2～3次直至堆料温度接近或稍高于室温，并且堆肥无异味、不招引蚊虫。测定其种子发芽率>80％、虫卵含量为0％时，将堆肥腐熟产物保存备用。
4、具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥的制备
向步骤3所得堆肥腐熟产物中以体积质量比3％添加聚γ谷氨酸溶液，充分混匀后阴干至含水量为15～30％，且有效活菌数>5×108CFU·g-1，有机质含量>45％，符合国家标准。将产品粉碎后过筛，制成粉料，可根据商业需要进行造粒，制得具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥的。
肥料效果试验：
试验分A、B、C、D和E共5个小组分别进行水稻、西瓜、甜瓜和黄瓜的种植试验，每组100株作物，并设置三个重复。A组施用实施例1制备的生物有机肥；B组施用实施例2制备的生物有机肥；C和D组分别使用对比例3和4制备的生物有机肥；E组为对照组，土壤不施肥(施用等量土壤)。
土壤和种子的准备：
将经8目不锈钢筛网筛选的细密土壤121℃灭菌20min以除去其中影响种子生长的各种微生物后保存备用。
选取籽粒饱满、形状完整的水稻、西瓜、甜瓜和黄瓜种子各300粒，用高锰酸钾溶液(0.05％)消毒30min后用水反复冲洗干净后保存备用，并在37℃条件下催发24h。
种植试验：在种植槽中加入均匀混入生物有机肥的土壤(生物有机肥肥以10t·hm-2的剂量施用)后播种，并用一定量的土壤埋没种子。以上操作完成后在恒温培养箱中培养，每日进行常规的浇水管理，15～20天时，作物处于幼苗期。分别对水稻、西瓜、甜瓜和黄瓜种幼苗的种植土壤接种足量的特定土传致病菌，水稻的致病菌为稻梨孢菌，西瓜、甜瓜和黄瓜的致病菌为瓜类黑腐球壳菌。接种病菌后，5～10天内基本的基本管理不变，观察记录患病株数并计算比例。
统计各组植物的患病状况，结果如表1所示。
表1实施例和对比例制备的生物有机肥对水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病的防控效果
由表1中的结果可知，经过施用实施例1和实施例2制备的生物有机肥A组和B组相较于不施肥的对照组，水稻、西瓜、甜瓜和黄瓜患病株数明显偏少，防控率达到85％以上，而缺少其中任何一种拮抗菌时，其对土传植物病害的防控效果大大降低。这表明本发明制备的生物有机肥对水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病具有有效的防控效果，这是由于其中存在大量特有的地衣芽孢杆菌和多粘类芽孢杆菌及其代谢产物对水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病致病菌的拮抗和抑制作用。
综上所述，本发明制备的生物有机肥的施用对水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病病害有显著的防控效果，可应用于农业生产实践中。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种具有防控稻瘟病和蔓枯病功能的生物有机肥，其特征在于，原料组成包括：地衣芽孢杆菌(Baclicus lincheniformis)ABTNL-1+CGMCC+NO.10037和多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1两种拮抗菌、以动物粪便与植物残体为原材料制备的好氧堆肥以及聚γ谷氨酸溶液；
其中，各原料的处理方法为：将地衣芽孢杆菌ABTNL-1和多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1两种拮抗菌培养活化后制成混合菌液，将所述混合菌液接种于以动物粪便与植物残体为原材料制备的好氧堆肥中，发酵得到的腐熟产品后加入聚γ谷氨酸溶液，阴干，制得具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥。
2.根据权利要求1所述具有防控稻瘟病和蔓枯病功能的生物有机肥，其特征在于，所述混合菌液为地衣芽孢杆菌ABTNL-1和多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1菌液等比例混合；所述多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1菌液与地衣芽孢杆菌ABTNL-1菌液的菌体浓度均为108～109CFU·ml-1；
所述动物粪便与植物残体的质量比为3.5～4.5:1～1.5；
所述混合菌液体积与所述堆料质量的比例为1～5ml菌液/100g堆料；
所述聚γ谷氨酸溶液与所述腐熟产物的体积质量比为3.0～5.0:100(ml/g)。
3.权利要求1所述具有防控稻瘟病和蔓枯病功能的生物有机肥的制备方法，其特征在于，将地衣芽孢杆菌ABTNL-1和多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1两种拮抗菌培养活化后制成混合菌液，将所述混合菌液接种于以动物粪便与植物残体为原材料制备的好氧堆肥中，发酵得到的腐熟产物后加入聚γ谷氨酸溶液，阴干，制得具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥。
4.根据权利要求3所述具有防控稻瘟病和蔓枯病功能的生物有机肥的制备方法，其特征在于，具体步骤包括：
S1、堆肥的建立：
将动物粪便与植物残体粉碎后混合，所述动物粪便与植物残体的质量比为3.5～4.5:1～1.5，混合后的堆料中控制含水率在50～65％，得到堆料；
S2、制备拮抗菌混合菌液：
用液体培养基分别培养拮抗菌地衣芽孢杆菌ABTNL-1、多粘类芽孢杆菌ABTNL-X1至每种拮抗菌菌液中菌体浓度为108～109CFU·ml-1后，等比例混合两种菌液，制得混合菌液；
S3、接种拮抗菌混合菌液：在步骤S1制备的堆料中接种步骤S2制得的混合菌液，建立堆肥，进行发酵得到腐熟产物；
所述混合菌液体积与所述堆料质量的比例为1～5ml菌液/100g堆料；
S4、制备生物有机肥：
向步骤S3制得的腐熟产物中接入浓度为200mg·L-1的聚γ谷氨酸溶液，充分混匀，阴干至含水量为15～30％，即得到具有防控水稻稻瘟病和瓜类蔓枯病功能的生物有机肥；
加入的所述聚γ谷氨酸溶液与所述腐熟产物的体积质量比为3.0～5.0:100(ml/g)。
5.根据权利要求4所述具有防控稻瘟病和蔓枯病功能的生物有机肥的制备方法，其特征在于，步骤S1所述动物粪便为猪粪、鸡粪或牛粪；所述植物残体为粉碎的枯草、树枝或秸秆。
6.根据权利要求4所述具有防控稻瘟病和蔓枯病功能的生物有机肥的制备方法，其特征在于，步骤S2所述液体培养基为每升蒸馏水中溶解氯化钠10.0g、胰蛋白胨10.0g、酵母粉5.0g，经121℃，20分钟灭菌后使用。
7.根据权利要求4所述具有防控稻瘟病和蔓枯病功能的生物有机肥的制备方法，其特征在于，步骤S3所述发酵的条件为：在堆肥容器中分层放置物料，并均匀泼洒所述混合菌液后充分混合进行微生物好氧发酵，温度随之上升，达到并维持55～65℃的高温；当堆料温度首次出现明显下降时进行翻堆，并补充水分，堆料温度再一次升高；温度明显下降时，再次翻堆，如此往复2-3次，直至堆料温度高于室温5℃以内时，得到腐熟产物。
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