CN106798740A

CN106798740A - 一种用于治疗细菌感染的药物

Info

Publication number: CN106798740A
Application number: CN201510882111.4A
Authority: CN
Inventors: 师健友; 童荣生
Original assignee: Sichuan Provincial Peoples Hospital
Current assignee: Sichuan Provincial Peoples Hospital
Priority date: 2015-12-03
Filing date: 2015-12-03
Publication date: 2017-06-06
Anticipated expiration: 2035-12-03
Also published as: CN106798740B

Abstract

本发明公开了一种用于治疗细菌感染的药物，包含具有式Ⅰ所示结构式的苯并咪唑酮类化合物或其药用盐作为活性成分。本发明的治疗细菌感染的药物对于杀死多种致病细菌作用良好。

Description

一种用于治疗细菌感染的药物

技术领域

本发明涉及一种用于治疗细菌感染的药物，特别涉及一种含有苯并咪唑酮类化合物的治疗细菌感染的药物，属于生物医药技术领域。

背景技术

现代社会生活节奏快，人们日常工作压力大，长期处于亚健康状态。自身免疫力的不足，导致各种外源性的病菌入侵和内源性的细胞异常生长比率持续增高，严重威胁人类生命。20世纪以来人类对于药物的研究逐渐转向有机化学合成，其中杂环化合物以其独特的空间立体结构、电子分布、活性基团的空间排布等特点，在各种疾病治疗中发挥出了突出的作用。

苯并咪唑环是含两个氮原子的芳香杂环，这种特殊的结构可以与生物体内的酶和受体等形成氢键。众多含有苯并咪唑结构片段的药物被应用于多种疾病的临床治疗，如阿司咪唑、奥美拉唑、阿苯达唑等。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种具有式Ⅰ结构的苯并咪唑酮类化合物，同时本发明还提供了制备该化合物的方法。

本发明的另一目的是提供一种用于治疗细菌感染的药物化合物或组合物，该药物化合物或组合物含有式Ⅰ苯并咪唑酮类化合物、或其生物学可接受的盐，作为为活性成分。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

一种用于治疗细菌感染的药物，包含具有式Ⅰ所示结构式的苯并咪唑酮类化合物或其药用盐作为活性成分：

其中，X为氧或硫；

Y为C1-C5的亚基，可以是直链的C1-C5的亚基，也可以是含有支链的C1-C5的亚基。

或者说，Y为m＝1-5，其上原子可以被C1-C3烷基取代；优选Y为亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚异丙基、亚丁基或亚异丁基。

R₁选自未被取代或被取代基取代的如下基团：芳基、烷基芳基、或者氮杂芳基，其中，所述取代基选自氢、卤素、氰基、氨基、羟基、C3-C7环烷基、C1-C3烷基、卤代C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、C3-C7环烷基氨基、二(C1-C3烷基)氨基、卤代烷基、烷氧基和硝基中的一个。

其中，R5是

R₂、R₃可以是各自独立的取代基，也可以是相互连接形成的环形结构。

当其为各自独立的取代基时，R2、R3各自独立的选自：氢、卤素、氰基、C1-C7烷基、C1-C6烷氧基、C3-C7环烷基、C1-C6烷氧基羰基、C1-C6烷基羰基、氨基羰基，C1-C6烷基氨基羰基、硝基、氨基、取代氨基、恶唑基、噻唑基、哌啶基、六氢哌啶基、吡啶基、二氢吡啶基、四氢吡啶基、噻嗪基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、嘧啶基、哌嗪基、吗啉基、取代哌嗪基、呋喃基、吡喃基、任选地被取代基Z取代的杂环基，任选地被取代基Z取代的芳基，任选地被取代基Z取代的杂芳基；

所述取代基Z为氢原子、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、卤素、羟基、芳基、氨基、C1-C6烷基氨基、C3-C7环烷基氨基、二(C1-C6烷基)氨基、氰基、或C3-C7环烷基；

R₂、R₃与连接它们的环原子一起形成具有3-8个环原子的环。当R₂和R₃共同形成环状结构时，不再是单独的取代基结构。

所述取代氨基包括苯基氨基、苯基甲基氨基、取代苯基氨基、甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、异丙基氨基、环丙基氨基、环己基氨基、哌啶基氨基、甲基哌啶基氨基、吡啶基氨基、哌嗪基氨基。

取代苯基氨基是指甲基苯基氨基、乙基苯基氨基、丙基苯基氨基、二甲基苯基氨基、甲基(乙基)苯基氨基、卤取代苯基氨基、硝基苯基氨基、苯基亚砜基苯基氨基、苯甲酮基苯基氨基、二苯甲酮基氨基中的一个。

所述取代哌嗪基是指甲基哌嗪基、乙基哌嗪基、丙基哌嗪基、二甲基哌嗪基、甲基(乙基)哌嗪基、异丙基哌嗪基、卤取代哌嗪基；卤取代哌嗪基中卤素包括氟、氯、溴、碘。

n＝0-3。

R4为各自独立的选自：氟、氯、溴、硝基、氨基、C1-C4烷基、C3-C7环烷基、卤代C1-C6烷基、C2-C6烯基，羟基-C1-C6烷基，(二-C1-C6烷基氨基)-C1-C6烷基、氨基、C1-C6烷基氨基、C3-C7环烷基氨基、二(C1-C6烷基)氨基、氨基-C1-C6烷基氨基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基氨基、C1-C6烷氧基羰基C1-C6烷基氨基、二(C1-C6烷氧基-C1-C6烷基)氨基、氨基羰基、C1-C6烷基氨基羰基、二(C1-C6烷基)氨基羰基、C3-C7环烷基氨基羰基、C1-C6烷氧基、C3-C7环烷氧基、羟基-C1-C6烷氧基、卤代C1-C6烷氧基、氨基C1-C6烷基、氨基C1-C6烷氧基、C1-C6烷基砜、C2-6烯基砜、C3-C7环烷基砜、C3-C7环烷基、卤代C3-C7环烷基、杂环氧基、哌啶基氨基、N-甲基哌啶-4-羰基、哌嗪-C1-C6烷基、吡咯甲酰胺基、N-甲基哌啶甲酰胺基、或杂环C1-C6烷基氧基。各个取代基R₄都可以相同，也可以不同。

进一步，所述式Ⅰ化合物的药用盐是式Ⅰ化合物和乙酸、二氢乙酸、苯甲酸、柠檬酸、山梨酸、丙酸、草酸、富马酸、马来酸、盐酸、苹果酸、磷酸、亚硫酸、硫酸、香草酸、酒石酸、抗坏血酸、硼酸、乳酸、乙二胺四乙酸等形成的盐。可以是单一有机酸、无机酸成盐，也可以是多种有机酸或无机酸成盐得到的药用盐。

进一步，R₁为苯基、苄基或它们的衍生物。所述苯基或苄基的衍生物是指被C1-C3烷基、卤素、硝基和氨基中的任意一种或几种取代的苯基或苄基。

进一步，R₂、R₃其中一个为氢。

进一步，优选的R₅选自：恶唑基、中的一个。所述恶唑基的恶字是口边一个恶的恶。

进一步，更具体的来说，本发明所述的苯并咪唑酮化合物是以下化合物之一。

本发明同时还提供了一种制备上述式Ⅰ化合物的方法，其中，即是R5。。

合成上述苯并咪唑酮化合物的方法，包括以下步骤：

(1)向邻硝基苯胺溶液中加入溴化苄或其类似物，反应，得到式Ⅴ化合物；

(2)将式Ⅴ化合物和氯磺酸反应得到式Ⅳ化合物；

(3)用胺与式Ⅳ化合物反应得到式Ⅲ化合物；

(4)还原式Ⅲ化合物得到式Ⅱ化合物；

(5)将式Ⅱ化合物与BTC(三光气)反应得到式Ⅰ化合物。

反应流程如下：

进一步，所述生物学可接受的盐是指式Ⅰ化合物与乙酸、二氢乙酸、苯甲酸、柠檬酸、山梨酸、丙酸、草酸、富马酸、马来酸、盐酸、苹果酸、磷酸、亚硫酸、硫酸、香草酸、酒石酸、抗坏血酸、硼酸、乳酸、乙二胺四乙酸等形成的盐。当然还可以是其它现有技术中已知的可用于医药领域的有机酸或无机酸。

进一步，式Ⅰ化合物或其药用盐在制备抗细菌感染药物中的应用。优选的，在用于治疗金葡菌、绿脓杆菌和溶血性链球菌感染的药物制备过程中的应用。

进一步，式Ⅰ化合物或其药用盐在制备抗病毒感染药物中的应用。

进一步，式Ⅰ化合物或其药用盐在制备抗真菌感染药物中的应用。

与现有技术相比，本发明的有益效果：

本发明提供了一种具有式Ⅰ结构的全新化合物，可以有效的抑制肿瘤细胞的生长，应用于多种人体自身细胞异常生长导致的肿瘤疾病的治疗和预防。同时本发明提供的具有式Ⅰ结构的全新化合物，可以有效的抑制多种致病细菌的生长并具有将其杀死的潜力，可以应用于多种细菌感染疾病的治疗和预防。

具体实施方式

本发明中部分专业术语解释如下：“三光气”，英文缩写BTC，即双(三氯甲基)碳酸酯，俗称固体光气，化学式为C₃Cl₆O₃。低级烷基包括甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、己基、庚基。

C1-C5烷基包括：甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、正-戊基、异-戊基、新戊基、仲戊基、叔戊基等。C1-C7烷基包括：甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、正-戊基、异-戊基、新戊基、仲戊基、叔戊基、己基、庚基等。低级烯基包括：乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基等。

下面结合试验例及具体实施方式对本发明作进一步的详细描述。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明内容所实现的技术均属于本发明的范围。

实施例1制备式Ⅴ化合物

方案1Z：a为丙酮为溶剂，氢氧化钠催化，滴加溴化苄或其类似物反应；产物用乙酸乙酯萃取，无水硫酸镁干燥，柱层析分离；优选的，分离液为环己烷：乙酸乙酯＝6～10：1。

将1毫摩尔邻硝基苯胺溶于3～5毫升的丙酮，再加入1～2倍的氢氧化钠在60～70℃搅拌3～5分钟，缓慢滴加1.2～1.5毫摩尔的溴化苄或其类似物，反应5～60分钟，薄层色谱跟踪监测，反应完毕后加入5～10倍水，用乙酸乙酯萃取(10毫升×2)，合并有几层并用饱和食盐水反洗(20毫升×2)，无水硫酸镁干燥半小时，回收溶剂，柱层析分离(环己烷：乙酸乙酯＝6～10：1)，产率35～95％。

方案1A：a为丙酮作为溶剂，叔丁醇钾催化，滴加溴化苄或其类似物反应；产物用乙酸乙酯萃取，无水硫酸镁干燥，柱层析分离；优选的，分离液为环己烷：乙酸乙酯＝6～10：1。

将1毫摩尔邻硝基苯胺溶于3～5毫升的丙酮，再加入1～2倍的叔丁醇钾在60～70℃搅拌3～5分钟，缓慢滴加1.2～1.5毫摩尔的溴化苄及或其类似物，反应5～60分钟，薄层色谱跟踪监测，反应完毕后加入5～10倍水，用乙酸乙酯萃取(10毫升×2)，合并有几层并用饱和食盐水反洗(20毫升×2)，无水硫酸镁干燥半小时，回收溶剂，柱层析分离(环己烷：乙酸乙酯＝6～10：1)，产率60～85％。

方案1B：a为丙酮作为溶剂，氢化钠催化，滴加溴化苄或其类似物反应；产物用乙酸乙酯萃取，无水硫酸镁干燥，柱层析分离；优选的，分离液为环己烷：乙酸乙酯＝6～10：1。

将1毫摩尔邻硝基苯胺溶于3～5毫升的丙酮，再加入1～2倍的氢化钠在60～70℃搅拌3～5分钟，缓慢滴加1.2～1.5毫摩尔的溴化苄及其类似物，反应5～60分钟，薄层色谱跟踪监测，反应完毕后加入5～10倍水，用乙酸乙酯萃取(10毫升×2)，合并有几层并用饱和食盐水反洗(20毫升×2)，无水硫酸镁干燥半小时，回收溶剂，柱层析分离(环己烷：乙酸乙酯＝6～10：1)，产率30～70％。

方案1C：a为二氯甲烷作为溶剂，甲醇钠催化，滴加溴化苄或其类似物反应；产物用乙酸乙酯萃取，无水硫酸镁干燥，柱层析分离；优选的，分离液为环己烷：乙酸乙酯＝6～10：1。

将1毫摩尔邻硝基苯胺溶于3～5毫升的二氯甲烷，再加入1～2倍的甲醇钠在60～70℃搅拌几分钟，缓慢滴加1.2～1.5毫摩尔的溴化苄或其类似物，反应5～60分钟，薄层色谱跟踪监测，反应完毕后加入5～10倍水，用乙酸乙酯萃取(10毫升×2)，合并有几层并用饱和食盐水反洗(20毫升×2)，无水硫酸镁干燥半小时，回收溶剂，柱层析分离(环己烷：乙酸乙酯＝6～10：1)，产率30～95％

方案1D：a为四氢呋喃作为溶剂，甲醇钠催化，滴加溴化苄或其类似物反应；产物用乙酸乙酯萃取，无水硫酸镁干燥，柱层析分离；优选的，分离液为环己烷：乙酸乙酯＝6～10：1。

将1毫摩尔邻硝基苯胺溶于3～5毫升的四氢呋喃，再加入1～2倍的甲醇钠在60～70℃搅拌3～5分钟，缓慢滴加1.2～1.5毫摩尔的溴化苄及其类似物，反应5～60分钟，薄层色谱跟踪监测，反应完毕后加入5～10倍水，用乙酸乙酯萃取(10毫升×2)，合并有几层并用饱和食盐水反洗(20毫升×2)，无水硫酸镁干燥半小时，回收溶剂，柱层析分离(环己烷：乙酸乙酯＝6～10：1)，产率20～75％

实施例2制备式Ⅳ化合物

方案2Z：b为分批次将式Ⅴ化合物加入到氯磺酸中反应，反应完毕，冰浴，乙酸乙酯萃取，无水硫酸镁干燥，柱层析分离；优选的，分离液为环己烷：乙酸乙酯＝4～6：1。

取5～10毫摩尔的氯磺酸在0℃搅拌5～10分钟，分批次加入1毫摩尔原料，加毕，将温度缓慢升至室温(20～35℃)，反应0.5～3h，薄层色谱跟踪监测，反应完毕后，把反应液极缓慢的倒入冰水浴(带有大量冰块，体积为反应液10～20倍)中并用玻璃棒不断搅拌，用乙酸乙酯萃取(20毫升×2)，合并有几层并用饱和食盐水反洗(20毫升×2)，无水硫酸镁干燥半小时，回收溶剂，柱层析分离(环己烷：乙酸乙酯＝4～6：1)，产率40～95％。

方案2A：b：向氯磺酸中加入五氧化二磷，然后分批次将式Ⅴ化合物加入到氯磺酸中反应，反应完毕，冰浴，乙酸乙酯萃取，饱合食盐水反洗，无水硫酸镁干燥，柱层析分离；优选的，分离液为环己烷：乙酸乙酯＝4～6：1。

取5～10毫摩尔的氯磺酸在0℃搅拌5～10分钟，加入1毫摩尔的五氧化二磷继续搅拌5～10分钟，分批次加入1毫摩尔原料，加毕，将温度缓慢升至室温(20～35℃)，反应0.5～3h，薄层色谱跟踪监测，反应完毕后，把反应液极缓慢的倒入冰水浴(带有大量冰块，体积为反应液10～20倍)中并用玻璃棒不断搅拌，用乙酸乙酯萃取(20毫升×2)，合并有几层并用饱和食盐水反洗(20毫升×2)，无水硫酸镁干燥半小时，回收溶剂，柱层析分离(环己烷：乙酸乙酯＝4～6：1)，产率50～95％。

方案2B：b：以氯仿为溶剂，将式Ⅴ化合物溶解于其中，然后加入氯磺酸反应，反应完毕，冰浴，乙酸乙酯萃取，饱合食盐水反洗，无水硫酸镁干燥，柱层析分离；优选的，分离液为环己烷：乙酸乙酯＝4～6：1。

取1毫摩尔原料溶于3～5毫升氯仿，在0℃搅拌10分钟左右，一次性加入5～10毫摩尔的氯磺酸，将温度缓慢升至室温(20～35℃)，反应0.5～3h，薄层色谱跟踪监测，反应完毕后，把反应液极缓慢的倒入冰水浴(带有大量冰块，体积为反应液10～20倍)中并用玻璃棒不断搅拌，用乙酸乙酯萃取(20毫升×2)，合并有几层并用饱和食盐水反洗(20毫升×2)，无水硫酸镁干燥半小时，回收溶剂，柱层析分离(环己烷：乙酸乙酯＝4～6：1)，产率40～90％。

方案2C：b：向式Ⅴ化合物中，缓慢加入氯磺酸反应，反应完毕，冰浴，乙酸乙酯萃取，饱合食盐水反洗，无水硫酸镁干燥，柱层析分离；优选的，分离液为环己烷：乙酸乙酯＝4～6：1。

将1毫摩尔的原料置于0℃保温10分钟，缓慢加入5～10毫摩尔的氯磺酸，加毕将温度缓慢升至室温(20～35℃)，反应0.5～3h，薄层色谱跟踪监测，反应完毕后，把反应液极缓慢的倒入冰水浴(带有大量冰块，体积为反应液10～20倍)中并用玻璃棒不断搅拌，用乙酸乙酯萃取(20毫升×2)，合并有几层并用饱和食盐水反洗(20毫升×2)，无水硫酸镁干燥半小时，回收溶剂，柱层析分离(环己烷：乙酸乙酯＝4～6：1)，产率35～85％。

实施例3制备式Ⅲ化合物

具体方案：c：取式Ⅳ化合物与胺，在有机溶剂中反应，反应完毕萃取分离得到式Ⅲ化合物。

取原料1毫摩尔，氨1毫摩尔，溶于3～5毫升四氢呋喃，室温(20～35℃)搅拌0.5～2h，薄层色谱跟踪监测，反应完全后加入适量甲醇，再加入适量300～400目硅胶，回收溶剂，柱层析分离(环己烷：乙酸乙酯＝2～4：1)产率为60～95％。

实施例4制备式Ⅱ化合物

方案4Z反应条件d：铁粉、硅胶在乙醇溶液中，pH＝3～5，80±5℃的条件下反应，反应完毕，过滤，用调节pH＝8～9，过滤收集滤液，乙酸乙酯萃取，柱层析分离得到产物。优选的，柱层析分离液为环己烷：乙酸乙酯＝1～2：1。

取2.5～3毫摩尔的铁粉和适量300～400目硅胶加入10～15毫升50～90％的乙醇溶液，用稀盐酸将乙醇溶液pH调制4左右，80℃搅拌5～10分钟左右，将原料1毫摩尔分批加入混合液，反应2～5h，薄层色谱跟踪监测，反应完毕，过滤(漏斗中装有适量300～400目硅胶)，向滤液中加入适量300～400目硅胶，用饱和碳酸氢钠将溶液pH调制8～9，过滤(漏斗中装有适量硅胶)，向滤液中加入5～10倍水，用乙酸乙酯萃取(20毫升×2)，合并有几层并用饱和食盐水反洗(20毫升×2)，无水硫酸镁干燥半小时，回收溶剂，柱层析分离(环己烷：乙酸乙酯＝1～2：1)，产率60～90％。

方案4A水合肼还原式Ⅲ化合物，结果不反应。

方案4B氢气还原式Ⅲ化合物，结果不反应。

(文献：Benzimidazole derivatives as novel nonpeptide luteinizing hormone-releasinghormone(LHRH)antagonists.Part 1:Benzimidazole-5-sulfonamides中采用H₂,10％Pd/C,THF,rt,99％；)

实施例5制备式Ⅰ化合物

方案5Z反应条件e：以四氢呋喃为溶剂，将式Ⅱ化合物与BTC反应生成式Ⅰ化合物。反应完毕调节pH＝8～9，乙酸乙酯萃取，柱层析分离得到式Ⅰ化合物。优选的，柱层析分离液为二氯甲烷：甲醇＝15～30:1。

取原料1毫摩尔溶于3～5毫升无水四氢呋喃，在0℃搅拌5～10分钟，取0.6毫摩尔的BTC(三聚光气)(三聚光气)用1～2毫升无水四氢呋喃溶解，用恒压滴液漏斗缓慢滴入上述溶液中(3～5分钟滴完)，反应0.2h～3h，薄层色谱跟踪监测，反应完毕，向反应液中加入3～5倍水，用饱和碳酸氢钠将溶液pH调制8～9，再用乙酸乙酯萃取(20毫升×2)，合并有几层并用饱和食盐水反洗(20毫升×2)，无水硫酸镁干燥半小时，回收溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝15～30:1)，产率60～95％。

方案5A反应条件e：将式Ⅱ化合物溶于四氢呋喃中，缓慢滴加BTC的四氢呋喃溶液，反应完毕，调节pH＝8～9，乙酸乙酯萃取，柱层析分离得到式Ⅰ化合物。优选的，柱层析分离液为二氯甲烷：甲醇＝15～30:1。

取原料1毫摩尔溶于四氢呋喃，在0℃搅拌5～10分钟左右，取0.6毫摩尔的BTC(三聚光气)用3～5毫升四氢呋喃溶解，用恒压滴液漏斗缓慢滴入上述溶液中(3～5分钟滴完)，反应0.5～3h，薄层色谱跟踪监测，反应不完全且较杂，向反应液中加入3～5倍水，用饱和碳酸氢钠将溶液pH调制8～9，再用乙酸乙酯萃取(20毫升×2)，合并有几层并用饱和食盐水反洗(20毫升×2)，无水硫酸镁干燥半小时，回收溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝15～30:1)，产率为10～50％。

方案5B反应条件e：将式Ⅱ化合物溶于四氢呋喃中，缓慢滴加BTC的四氢呋喃溶液，反应完毕，调节pH＝8～9，乙酸乙酯萃取，柱层析分离得到式Ⅰ化合物。优选的，柱层析分离液为二氯甲烷：甲醇＝15～30:1。

取原料1毫摩尔溶于无水四氢呋喃，在0℃搅拌5～10分钟，取0.3毫摩尔的BTC(三聚光气)用3～5毫升无水四氢呋喃溶解，用恒压滴液漏斗缓慢滴入上述溶液中(3～5分钟滴完)，反应0.5～3h，薄层色谱跟踪监测，反应不完毕，向反应液中加入3～5倍水，用饱和碳酸氢钠将溶液pH调制8～9，再用乙酸乙酯萃取(20毫升×2)，合并有几层并用饱和食盐水反洗(20毫升×2)，无水硫酸镁干燥半小时，回收溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝15～30:1)，产率60～75％。

方案5C反应条件e：将式Ⅱ化合物溶于四氢呋喃中，缓慢滴加BTC的四氢呋喃溶液，反应完毕，调节pH＝8～9，乙酸乙酯萃取，柱层析分离得到式Ⅰ化合物。优选的，柱层析分离液为二氯甲烷：甲醇＝15～30:1。

取原料1毫摩尔溶于3～5毫升无水四氢呋喃，在室温(20～35℃)搅拌，取0.6毫摩尔的BTC(三聚光气)用3～5毫升无水四氢呋喃溶解，用恒压滴液漏斗缓慢滴入上述溶液中(3～5分钟滴完)，反应0.5～3h，薄层色谱跟踪监测，反应不完毕，向反应液中加入过量水，用饱和碳酸氢钠将溶液pH调制8～9，再用乙酸乙酯萃取(20毫升×2)，合并有几层并用饱和食盐水反洗(20毫升×2)，无水硫酸镁干燥半小时，回收溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝15～30:1)，产率60～85％。

实施例6-N

按照实施例1-5的工艺步骤，多次合成得到表1和表2中化合物(Coupounds)并将其用于相关的抑菌活性和抗肿瘤细胞活性试验。

试验1：苯并咪唑酮类化合物的抗菌活性

并采用体外试验试验方法测试其对于金葡菌、绿脓杆菌和溶血性链球菌的最小抑菌浓度(MIC)，结果如下。

1.琼脂扩散法初筛

(1)药液的制备

称取各化合物100mg,用二甲基亚砜配成浓度为100mg/ml的溶液，过滤除菌作初筛用。

(2)菌液的制备

将菌株接种于普通琼脂平板上,置于35℃恒温箱中培养24h,用接种环将菌株转移至试管中,加入无菌生理盐水,配成浓度为1.5×10⁸个/ml的菌液作初筛用。

(3)抑菌圈的测定

用无菌棉签将浓度为1.5×10⁸个/ml的标准菌液均匀涂布于M-H氏琼脂培养基上，然后用直径为6mm的无菌圆形玻璃管打孔，将各受试物(浓度为100mg/ml)加入孔中，加满为止，不得溢出。再将培养皿置于35℃恒温箱中培养24h，取出观察，用卡尺测量抑菌圈的直径。平行操作3次，取平均值。根据药理学试验方法判定：抑菌圈＜10mm的为耐药或无抑菌作用；10mm的为轻度敏感；11～15mm为中度敏感；≥16mm的为高度敏感。

2.微量稀释法测定受试物对敏感菌株的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)

(1)药液的制备

称取各化合物100mg，以二甲基亚砜配成浓度为100mg/ml的溶液，过滤除菌备用。

(2)菌液的制备

将菌株接种于普通琼脂平板上，置于35℃恒温箱中培养24h，用接种环将菌株转移至试管中,加入无菌生理盐水,配成浓度为1.5×10⁸个/ml的菌液，再稀释成浓度为106个/ml的菌液。

(3)MIC的测定

取无菌96孔平底微量培养板，于每排第1孔中加入培养液200μL(M－H肉汤培养基)，第2～12孔中加入培养液100μL，第2孔中加入受试药物100μL，混匀后取出100μL移至第3孔中，以此类推进行倍比稀释直至第11孔，混匀后弃掉100μL，使稀释后各孔中的受试药物浓度倍比减少，最后于第2～12孔中各加入细菌的菌悬液100μL，每排第1孔只加培养液作为阴性对照，第12孔中加菌液和培养液作为阳性对照。将培养板置35℃恒温箱中培养18～24h，取出在黑色背景下肉眼观察，阴性对照孔溶液应清晰透亮，阳性对照孔的菌落生长良好，以溶液清晰透亮的最低浓度孔中的药物浓度作为MIC值。若实验时药液与培养液的混合液是浑浊的，须经涂片在显微镜下观察，无菌的孔为MIC，平行操作3次，取平均值。

(4)MBC的测定

确定MIC后，把上述每排MIC前(包括MIC孔)各孔用接种环移种于普通琼脂平板培养基上作次代培养，35℃培养18～24h，涂片在显微镜下观察，平皿上菌量平均数小于5个的最小稀释度的受试物浓度即为MBC(即能杀死99.9％或以上原始种入的细菌的药物最低浓度)，平行操作3次，取平均值。

表1：苯并咪唑酮类化合物的抗菌活性

上述试验结果表明本发明制备的式Ⅰ结构的化合物对多种细菌具有抑制作用，可以用于多种细菌感染所致疾病的治疗和预防。

试验2：苯并咪唑酮的抗肿瘤细胞活性

采用体外培养的试验方法测试本发明苯并咪唑酮化合物对于A549、HCC1937和MDA-MB-48肿瘤细胞的IC₅₀浓度(MIC)，结果显示本发明的化合物对于多种不同的肿瘤细胞均具有不同程度的抑制杀灭活性。

例如：以为结构母核。当R1＝Ph，时，对于A549IC₅₀(μM)＝5.2。

当R1＝Ph，时，对于HCC1937IC₅₀(μM)＝2.6。结果表明本发明制备的式Ⅰ结构的化合物对肿瘤细胞具有生长具有良好抑制作用，可以用于多种人体肿瘤疾病的治疗。

Claims

1.一种用于治疗细菌感染的药物，其特征在于，包含具有式Ⅰ所示结构式的苯并咪唑酮类化合物或其药用盐作为活性成分，

其中，X是氧或硫；

Y是m＝1-5；还包括Y是被取代的C1-C5的亚基，C1-C5的亚基上的氢原子可以被C1-C3烷基取代；

R1选自未被取代或被取代基取代的如下基团：芳基、烷基芳基或者氮杂芳基；其中，所述取代基选自氢、卤素、氰基、氨基、羟基、C3-C7环烷基、C1-C3烷基、卤代C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、C3-C7环烷基氨基、二(C1-C3烷基)氨基、卤代烷基、烷氧基和硝基中的一个；

其中，R₅是

R2、R3各自独立的选自：氢、卤素、氰基、C1-C7烷基、C1-C6烷氧基、C3-C7环烷基、C1-C6烷氧基羰基、C1-C6烷基羰基、氨基羰基、C1-C6烷基氨基羰基、硝基、氨基、取代氨基、恶唑基、噻唑基、哌啶基、六氢哌啶基、吡啶基、二氢吡啶基、四氢吡啶基、噻嗪基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、嘧啶基、哌嗪基、吗啉基、取代哌嗪基、呋喃基和吡喃基，以及任选地被取代基Z取代的杂环基、任选地被取代基Z取代的芳基、任选地被取代基Z取代的杂芳基；

所述取代基Z为氢原子、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、卤素、羟基、芳基、氨基、C1-C6烷基氨基、C3-C7环烷基氨基、二(C1-C6烷基)氨基、氰基或C3-C7环烷基；

所述取代氨基包括苯基氨基、苯基甲基氨基、取代苯基氨基、甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、异丙基氨基、环丙基氨基、环己基氨基、哌啶基氨基、甲基哌啶基氨基、吡啶基氨基、哌嗪基氨基；

所述取代苯基氨基是指甲基苯基氨基、乙基苯基氨基、丙基苯基氨基、二甲基苯基氨基、甲基(乙基)苯基氨基、卤取代苯基氨基、硝基苯基氨基、苯基亚砜基苯基氨基、苯甲酮基苯基氨基和二苯甲酮基氨基中的一个；

所述取代哌嗪基是指甲基哌嗪基、乙基哌嗪基、丙基哌嗪基、二甲基哌嗪基、甲基(乙基)哌嗪基、异丙基哌嗪基、卤取代哌嗪基；卤取代哌嗪基中卤素包括氟、氯、溴、碘；或者，R2、R3与连接它们的环原子一起形成具有3-8个环原子的环；

n＝0-3；

R4为各自独立的选自：氟、氯、溴、硝基、氨基、C1－C4烷基，C1－C3烷氧基、C3-C7环烷基、卤代C1-C6烷基、C2-6烯基，羟基取代的C1-C6烷基、(二-C1-C6烷基氨基)-C1-C6烷基、氨基、C1-C6烷基氨基、C3-C7环烷基氨基、二(C1-C6烷基)氨基、氨基-C1-C6烷基氨基、C1-C6烷氧基C1-C6烷基氨基、C1-C6烷氧基羰基、C1-C6烷基氨基、二(C1-C6烷氧基-C1-C6烷基)氨基、氨基羰基、C1-C6烷基氨基羰基、二(C1-C6烷基)氨基羰基、C3-C7环烷基氨基羰基、C1-C6烷氧基、C3-C7环烷氧基、羟基-C1-C6烷氧基、卤代C1-C6烷氧基、氨基C1-C6烷基、氨基C1-C6烷氧基、C1-C6烷基砜、C2-6烯基砜、C3-C7环烷基砜、C3-C7环烷基、卤代C3-C7环烷基、杂环氧基、哌啶基氨基、N-甲基哌啶-4-羰基、哌嗪-C1-C6烷基、吡咯甲酰胺基、N-甲基哌啶甲酰胺基、或杂环C1-C6烷基氧基。

2.根据权利要求1所述用于治疗细菌感染的药物，其特征在于，X是氧。

3.根据权利要求1所述用于治疗细菌感染的药物，其特征在于，Y是亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚异丙基或亚丁基。

4.根据权利要求1所述用于治疗细菌感染的药物，其特征在于，R1为苯基、苄基或它们的衍生物；所述苯基或苄基的衍生物是指被C1-C3烷基、卤素、硝基和氨基中的任意一种或几种取代的苯基或苄基。

5.根据权利要求1所述用于治疗细菌感染的药物，其特征在于，R2、R3其中一个为氢。

6.根据权利要求1所述用于治疗细菌感染的药物，其特征在于，R5选自：恶唑基、中的一个。

7.根据权利要求1所述用于治疗细菌感染的药物，其特征在于，所述药用盐是指式Ⅰ化合物与乙酸、二氢乙酸、苯甲酸、柠檬酸、山梨酸、丙酸、草酸、富马酸、马来酸、盐酸、苹果酸、磷酸、亚硫酸、硫酸、香草酸、酒石酸、抗坏血酸、硼酸、乳酸和乙二胺四乙酸中的至少一种形成的盐。