CN1067965A - 用偏振光散射技术筛选微观细胞的方法和装置 - Google Patents

Abstract

利用至少一个偏振光检测参量，来完成一个或多 个感兴趣细胞群的筛选，所述细胞群被一个细胞种 群，例如一个WBC种群的感兴趣的一个或多个子种 群，所遮蔽的方法和装置(10，30，50，90，190，250， 280，340，360)。通过利用上面结合有单克隆抗体的 微球，改进特定细胞的检测特性，以便从遮蔽细胞种 群中区分感兴趣的细胞群，来计数感兴趣的细胞群。

Description

本发明一般涉及一种用偏振光散射技术筛选具有选择特性微观细胞的方法和装置。具体地说，本发明用一种在上面键合有单克隆抗体的微球改变每一特定细胞的检测特性，以便从一个细胞种群中鉴别出感兴趣的细胞群的细胞来分析在所述细胞种群中感兴趣的被遮蔽一个或多个细胞群。

本发明一般涉及一个自动分析器和使用该仪器来筛选生物细胞或成形体以进行种群计数的方法，这种种群计数表征了一些我们用作研究、诊断、医疗或工业目的各种选择特性。更具体地说，体现本发明的一些自动分析仪器和方法，独特的将光学或光学和电子技术和选择能力生物分子（如抗体）的特殊性结合起来，能够对细胞或成形体筛选和选择计数多部分分类细胞和成形体、分类细胞和成形体的功能表现型，在其他细胞中区分白血病、淋巴瘤或硬肿瘤细胞，用于这些细胞和成形体的筛选和选择性计数。

采用柯尔特电子公司（Inc.ofHialean，Florida）的COULTER    COUNTER    A型可以成功地使自动血细胞计算器达到人体外周血液常规全血细胞（CBC）分析的自动化。这种仪器的电子微粒检测系统的原理在美国专利2656508（1953年10月20日颁发给Wallace    H、Coulter）中有所公开。这种柯尔特检测原理被发展和扩大到更多采用先进技术的仪器（例如COULTER    COUNTER（注册商标）Model    S一些仪器）中，这些仪器借助于特殊计算机程序使CBC参数、绝对细胞计数、血小板计数和形态、红血细胞（RBC）形态、能够解释正常和异常血液样品。

柯尔特电子微粒原理应用了一个使用直流（DC）孔径电源的孔径检测电路，这种微粒传感器结构简单，非常稳定可靠，美国和世界其他各地的临床实验室大都普遍采用COULTER    COUNTER（注册商标）自动分析器就证明了这一点。这个基本的孔径检测电路一个改进型在美国专利3502974（在1970年颁发给Wallace    Coultter和Walter    Hogg）中已公开。除了标准的直流孔径电源外，还加了一个高频孔径电流，这使检测一个用来进行分类的附加参数成为可能。高频孔径电流产生一个信号，这个信号是血细胞内部导电性和细胞体积的函数。同时由直流孔径电路产生一个常规直流幅度信号，这个信号基本上指示了细胞体积。用一个高速除法电路将射频振幅除以直流脉冲振幅，得到一个为细胞体积和内部电阻的函数的商，通常称之谓“浊度”。这个原理在美国专利3502973（1970年颁发给Wallace    Coulter和Walter    Hogg）中进一步公开。这个浊度参数可以用于细胞分类系统。无论是单一孔径还是一对分开的孔径都可用于这种用途。

不同种群的分类是通过核对所产生的一对信号的数据来完成的，一个测量微粒体积，而另一个测量细胞内部的电阻率或浊度。表示该数据的一种方便形式称为散点图的二维图形。这类图形在Flow    Cytometry    and    sorting（Melamed    Melaney，和Medelsohn编辑，John    Wiley父子公司1979版）371页中有详细说明。

起初柯尔特电子微粒检测原理用来对红血细胞进行计数，而后更完善的用来确定红血细胞的其他一些参数。将红血细胞从全外周血液中除去，只要除去红血胞的过程并不显著地损害所留下的待测白血细胞种群的性质，就可着手对白血细胞（WBC）种群进行分析。为此研制了各种红血细胞的溶胞剂，这些溶胞剂虽然很有用，并且广泛地使用着，但对于接着的白血细胞测定来说并不是一切都令人满意的。

上述的单独用直流体积或用在各个角度上的光散射进行白血细胞流动分析的方法就显示三簇白血细胞，分别相应于淋巴细胞、单核细胞和粒性白细胞，粒性白细胞包括：嗜中性细胞、嗜碱性细胞和嗜酸性细胞种群。根据一些样品对嗜酸性种群浓度进行一个粗略而有用的估计。对于这种方法来说，第五主要种群嗜碱性细胞相对说来是太小了。采用专门的荧光技术也已观察到一簇明显的嗜酸性细胞种群。

在一外周血液涂片中发现异常时，免疫研究也是很重要的。为了针对白血病更好的选择治疗方法以及给病人提供一个尽可能明确的予后症状，必须确定白血病的特定的子型。例如，在急性白血病的情况，在外周血液中有胚胞优势，因为缺少差别，把未成熟的细胞分为淋巴细胞或粒性白细胞可能是困难的。如果发现这个胚胞子种群很快增殖是T₁₁受体的举止，这个白血病可能是一急性淋巴母细胞白血病，T-细胞型。通常T系ALL比B系ALL予后症状差，根据这些白血病之间的差别的大小进一步把它们分组也是通常的。组Ⅰ和Ⅱ呈现出在早期的胸腺母细胞上发现抗原，而组Ⅲ中表示抗原是类似于在成熟的T细胞上发现的表面抗原。对于病人予后症状和治疗，有关在白血病的细胞上表现出的表面抗原这样信息是有用的。

利用光学显微镜测定淋巴细胞子种群已初步改进了免疫试验。1970年Coombs和其他人在人的淋巴细胞和绵羊红血细胞之间观察到玫瑰花结形态。后来的研究发现，在适当条件下胸腺产生淋巴细胞（T-细胞）的所有的或至少一主要部分显示出玫瑰花结形态。这些研究利用菲科尔分离淋巴细胞，并且在一定时间内用光学显微镜对分离的淋巴细胞作常规的子种群分类。

目前，在一个带有荧光示踪单克隆抗体的样品中，通常是用荧光标记细胞来测定淋巴细胞的子种群的。荧光示踪单克隆抗体结合到表达抗原的细胞的表面上有关抗原上。然后细胞样品用一荧光显微镜或一个高度复杂的流式细胞计数仪器来分析。当利用一个流式细胞计数仪器时，细胞样品的制备，数据采集和数据分析一定要由一专门培训的技术人员来完成。这种流式细胞计数仪器包括一激光器和复杂的光学系统，一高效率计算机和电子及流体系统。这种流式细胞计数仪器的各个分支系统必须适当的保养，定期和经常校准。虽然目前流式细胞计数仪器是标准的淋巴细胞子种群测定方法，这个方法有如下缺点：仪器的高成本，以及要求专家正确地操作这样的仪器。

利用由本申请的受让人（Coulter    Electronics，Inc.）研制的自动化仪器和方法也能测定淋巴细胞的子种群。在1990年9月20日申请的美国专利申请587646（名称为“Automated    Analyser    and    Method    For    screening    Cells    or    Formed    Bodies    For    Enumeration    of    Populations    Expressing    Selected    Characteristics”它是同样名称的美国专利申请号025345，申请日：1987年3月13日的后续申请）中公开了一个改进的简单自动仪器和使用该仪器方法。这篇申请结合了电子检测原理的申请、对鉴别和/或计数确定的细胞或形成体的种群的选择的生物分子的特异性、以及显微颗粒技术。这种自动分析仪器可以与专门的溶胞试剂和/或键合到显微球体或各种组份的支持体上的抗体一起使用。

第二个申请（美国专利申请：285856，申请日1988年12月16日，名称“Method    and    Apparatus    For    screening    Cells    or    Formed    Bodies    with    Populations    Expressing    Selected    Characteristics）公开了从全血样品或它的一部分中直接筛选子种群。

第三个申请（1989年4月14日申请的美国专利申请：339156，名称Method    and    Apparatus    For    Screening    Cells    or    Formed    Bodies    with    Populations    Expressing    Selected    Characteristics    Utilizing    AT    Least    One    sensing    Parameter）公开了从全血样品或从通过种群和/或子种群消除来除去红血细胞和/或白血细胞种群的一个样品中用一个或多个光学或电子参数来完成多部分或五部分白血细胞分类计数淋巴细胞子种群和重叠的测定。

第四个申请（1990年5月17日申请的美国专利申请07/525231，名称“Method    and    Apparatus    For    Screening    Obscured    or    Partially    Obscured    Calls）公开了用结合有专用单克隆抗体的微球体把被遮蔽细胞的检测特性从散布图上的一细胞种群区域移动到另一区域来分析一被遮蔽细胞，结合上述四个提到申请在此作参考。

在美国专利申请025442（1987年3月13日申请，是1987年12月4日申请129954的后续申请，两者名称“Multi-Part    Differential    Analyzing    Apparatus    Utilizing    light    Scatter    Techninques”）公开了一个改进的分析血液学的仪器和仪器的使用方法，也结合作为参考。这种所谓VCS血液学仪器用光散射和电子检测技术获得淋巴细胞（L）WBC种群的多部分区分。但是，这个血液学仪器不能完成L子种群区分，因为在L种群中这样的子种群被遮蔽。

另一个有关的申请（1990年11月23日申请，申请号617075，名称“Method    and    Apparatus    For    Screening    Microscopic    Cells    Utilizing    light    Scatter    Techniques）利用光散射技术获得L子种群和重叠子种群测定，也结合作本文的参考。

通过使微细颗粒有选择地附着在一种细胞种群的每个细胞上，可以使决定至少一个种群的原始位置的参量发生改变。把很多微细颗粒加到选定的靶种群的每一个细胞上，这种附加物影响测量的体积和/或浊度值，从而使在描述一个种群的散点图上的点的位置发生改变。

把已知特异性的抗体用在涂覆微细颗粒中，这个涂层能赋予颗粒有选择地附着到那些能表现出对该抗体有特异性的抗原细胞上。这些涂覆过的细胞或标记细胞是颗粒和细胞的组合体，它们表现类似一个新的实体。可以把它们的浊度、体积或者浊度和体积二者一起组合参量认为是代表细胞和颗粒二者对所测得信号影响的总和。如果这些组分的特性是不同的，那么新的实体就根据净的影响在散点图上移到一个新的位置。将这个新的位置与单独细胞的原来位置对照就可以对这样的一个新实体或新实体组进行分类。如果这些附着到细胞上的颗粒是磁性的，根据现在的实际情况，那么就可以采用磁铁来捕获这些新实体，如果迅速地搅拌，就会产生出人意料的效果，即能完全捕获一个种群，而又没有损害在研究中的细胞性质发生。

利用前面提到的种群的DC体积和浊度参量的固有的和唯一的性质，只能容易地从一个血样中鉴别和计数出三种明显不同种群的细胞。为了能对更多的种群进行检测和计数，必须采用一些例如改进溶解系统等附加的步骤。当然，这些额外的种群是代表三个基本种群的子种群，它们分别被称为淋巴细胞、单核细胞和粒状白细胞，在上述引证的专利申请的操作步骤中描述了如何获得这三个基本种群的子种群。

利用这种与两个或多个生物颗粒相结合的简单的孔检测技术可获得一个独特和新颖的代表一个给定种群的点簇的位置。一些种群在点图象或散点图上的选择性位移是可以重现的，因此可以用于把一个种群从三个基本种群中区分开来。

通过把微颗粒附到选定的各个细胞上，可以使原来的和固有的DC体积和浊度检测技术的组合得到改进。选择性是由生物分子，尤其是抗体的本性或特异性赋予颗粒的，这些生物分子被用作颗粒表面的涂料，如果一个单个细胞种群，而在细胞表面上没有颗粒，那么这个种群可能和其它一些种群或子种群无区别地占据一个点图位置，因而使这些种群不可能相互区分开。通过这一途径可以把具有选择引力的颗粒附着到要试图鉴别、计数和研究的一个特定细胞种群上。通过把足够量的选择颗粒有选择的加到感兴趣的性质不同的种群上，可以使这个种群的散点图的位置根据每个细胞的新的唯一的质量、体积和浊度的组合结果而移动。

本发明的具体化的方法和装置可以用于各种免疫反应，例如包括有反应试剂和形成体或细胞的免疫反应中。本发明还可用于分析形成体的悬浮液，例如，细菌和其中的病毒。在此使用的细胞定义为动物或植物细胞，包括细胞质状的细菌、真菌，它们可以单独鉴别或在聚集中鉴别。细胞是能够作为一个独立单位起作用的生命物质的最低等结构聚集体。例如，细胞可以是人类的红血细胞和白红细胞种群，在组织上或血液样品中的癌细胞或其它异常细胞。形成体被定义为某些细菌和病毒。可以予料，这些被用适宜的方法标记或示踪的细胞和形成体当然可以借助于采用和人类血液例子的方式的本发明的方法和装置用光学方法鉴别出。

虽然“试剂”一词在上述的那些申请中已经被限定为溶胞剂和单克隆抗体，但是这些试剂可以包括能检测和与一个或多个特定分子反应的各种试剂，这些特定的分子处在细胞或形成体的表面上。见下面的例子：

试剂    特定的分子

抗体    抗原

药品    药品受体

激素    激素受体

生长因子    生长因子受体

这些试剂偶联或结合到细胞的特定分子上。这些试剂确定构成了化学反应的一部分;然而这些试剂未必发生化学变化。

一种用于完成筛选被一细胞种群，例如WBC种群的一种或多种感兴趣的子种群，遮蔽的感兴趣的一个或多个细胞群的方法和装置。利用上面结合有单克隆抗体微球改变特异细胞的检测特性，以便从遮蔽的细胞种群中区分出感兴趣的细胞群来计数感兴趣的细胞群。

为了提供一个感兴趣的WBC子种群体的期望分析结果，可以对一个全血样品或其一部分进行筛选。把该样品一部分同上面结合有对感兴趣的WBC子种群是特异的单克隆抗体的微球相混合，以便使微球结合到感兴趣的细胞上，从而使该细胞的检测特性移位。然后再至少用两个检测参量对含有感兴趣的WBC子种群的样品部分进行检测，这两个参量有一个是偏振光检测参量，再使感兴趣的WBC子种群的特性充分地移位，以便能直接测量感兴趣的子种群。还可以对重叠的细胞种群进行分析;可以使两个感兴趣细胞群同时移位。

首先测量样品的一部分，然后再贫化其中特异性的细胞，以便能在一个区域内检测该感兴趣的细胞群，否则在上述区域内，该感兴趣细胞群被贫化细胞遮蔽。再对这份样品进行测量，然后同第一次测量结果相比较，从而区分出感兴趣的细胞群，在一个全血样品中，感兴趣的细胞群是在另一状态下被WBC的一个细胞种群遮蔽的感兴趣的WBC的子种群。

为此，本发明的第一个目的是提供一种在具有至少一个遮蔽细胞种群的细胞样品的至少一部分中分析出至少一个感兴趣的细胞群的方法，其特征在于为了把上述细胞群的检测特性从遮蔽细胞种群的检测特性中移出，而改变在第一样品部分至少第一选择感兴趣细胞群的检测特性;借助于至少一个偏振光参量对该第一样品部分进行检测和计数，以便获得该选择的感兴趣的细胞群所占的百分率。

本发明的第二个目的是提供一个用于在具有至少一种遮蔽细胞种群的细胞样品的至少一部分中分析出至少一个感兴趣细胞群的装置，其特征在于包括：为了把该细胞群的检测特性从遮蔽细胞种群的检测特性中移出而使在第一样品部分中的至少第一感兴趣选择细胞群的检测特性发生改变的装置;为获得该选择的感兴趣的细胞群所占的百分率而采用至少一个偏振光参量对该第一样品部分进行检测和计数的装置。

本发明的第三个目的是提供一种在具有至少一个遮蔽细胞种群的细胞样品的至少一部分中分析出至少一个感兴趣细胞群的方法，其特征在于包括：借助于至少一个偏振光参量对第一样品部分检测和计数，把该遮蔽细胞种群从第二样品部分中分离出，借助于至少一个偏振光参量对该第二样品部分进行检测和计数，以及把这二个计数相比较，从而获得该感兴趣的被遮蔽细胞组所占的百分率。

本发明的另一个目的是提供一个用在具有至少一个遮蔽细胞种群的细胞样品的至少一部分中分析出至少一个感兴趣细胞组的装置，其特征在于包括：借助于至少一个偏振光参量对第一样品部分进行检测和计数的装置;使遮蔽着的细胞种群从第二样品部分中分离出的装置;借助至少一个偏振光参量对该第二样品部分进行检测和计数的装置;以及为获得该感兴趣的被遮蔽的细胞群所占的百分率而使这两个计数相比较的装置。

下面参考说明书的附图，通过举例来详细说明本发明的优选的实施例，这些附图是：

图1是本发明的一个筛选细胞分析装置实施例的示意方块图;

图2是本发明的第二个筛选细胞分析装置实施例的示意方块图;

图3是本发明的一个具体的分析装置实施例;

图4是本发明的一个偏振检测器的结构;

图5A-6D是说明本发明为测得一个感兴趣的WBC子种群的技术的散点图;

图7A-7C是利用不同的检测参量测得的感兴趣WBC子种群的散点图;

图8A-9D是根据本发明采用两个相同尺寸的微球体而测得的散点图;

图10是本发明为测定重叠的子种群的另一个筛选细胞分析装置实施例的示意方块图;

图11是本发明为测定被遮蔽细胞的一个筛选细胞分析装置实施例的示意方块图;

图12是本发明为测定被遮蔽细胞的另一筛选细胞分析装置实施例的示意方块图;

图13是本发明为同时分析两个感兴趣细胞群的一个筛选细胞分析装置实施例的示意方块图;

图14是本发明用于同时分析两个感兴趣细胞群的第二个筛选细胞分析装置实施例示意方块图。

在图1中，用数字（10）代表本发明的整个第一筛选细胞分析装置实施例。该分析装置（10）包括至少包含有一个第一组细胞或细胞种群（未示出）的样品（12），当按照如下所述的分析时，这个细胞种群遮蔽着一个感兴趣的细胞组，例如一个子种群或第二组细胞。样品（12）可以包含一种细胞加到其中的缓冲剂。

样品（12）或其一部分经管路（14）同经过管路（18）的至少一个试剂（16）混合。感兴趣细胞群的那些细胞中至少一个检测细胞特性在移位细胞群部位（20）被改变或移位。将感兴趣细胞群的细胞检测特性充分地改变或移位，直至使细胞的特性从遮蔽细胞种群的检测细胞特性中移出。

试剂（16）可以是或可以包括很多上面结合有对感兴趣细胞群特异性的抗体的微球。试剂（16）和样品部分（12）最好是一起搅拌，以便提高微球对感兴趣细胞群的结合。通常是采用把微球涂覆到感兴趣细胞组的每个细胞上的方法来使很多微球结合到感兴趣细胞群的每个细胞上，这个情况使感兴趣细胞群每个细胞的最后的检测特性改变或移位。然后把样品部分（12）经管路（24）输送到分析器（22）中。分析器（22）至少对样品部分（12）中的细胞进行检测和计算数目。分析器（22）包括至少一个但最好是两个检测参量，至少其中的一个是偏振光参量，这将在下面进一步描述。

在图2中，用数字（30）代表本发明的第二个筛选细胞分析器的具体装置。分析仪器（30）包括一个生物样品（32），该样品至少包括一个第一组生物细胞（未示出），例如是在一个全血样品中的生物细胞或来自一个全血样品的生物细胞。生物样品（32）的那些细胞是被卷入到定量和/或定性测定或分析的一个生物反应中。生物样品（32）至少包括一个WBC种群，这个WBC种群遮蔽一个感兴趣的WBC子种群。样品（32）还可以包括一种细胞加到其中的缓冲剂。

按照在此处的应用，WBC子种群可以是使特异的单克隆抗体结合到上面WBC种群的子种群。单克隆抗体这一术语现已被世界卫生组织和国际免疫学会确定。单克隆抗体被定义为由一集合代号为（CD）的术语，它确定为对一个细胞或细胞群所具有的特定特异性以及对CD群细胞有特异性的单克隆抗体。仅以举例为目的，在下述例子中用了三个CD组，即CD₂、CD₁和CD₈，单克隆抗体的CD术语，特异性和某些商品来源列在表2中。

表1

分化群    抗体(商品来源)b    特异性

CD2(gp50)^aT11(Coulter) EROssette

OKT11(ortho);Leu5a(BD)    受体

CD4(gp56)    T4(Coulter)    辅助物/诱导物T

OKT4_a(ortho);Leu3a(BD)

CD8(gp32-33)    T8(coulter)    胞毒/压制基因T

OKT8(ortho);Leu2a(BD)

a_yp-糖蛋白,分子量以干道尔顿计。

b  coulter    -Coulter公司Coulter免疫部(Hialeah,Florida)

BD    -Becton-Dickinson    免疫测量系统

ortho    -ortho诊断系统

(Raritan,New  Jersey)

将样品（32）或其一部分经管路（34）同经管路（38）的至少一个试剂（36）混合，然后借助指定用作红血细胞（RBC）除去部位（40）将红血细胞从混合物分离出去。可以用各种方式借助于部位（40）把红血细胞从混合物中分离出来。可以用试剂（36）中一溶胞剂来溶胞RBC。在1987年12月10日申请的名为“用于从全血样品中分离、鉴别和/或分析白血病的方法和指示剂系统”的美国专利申请No130911中描述了这样的一个可用的合适的溶胞剂和谇灭剂，这两者可以同时采用。这篇申请是1987年3月13日申请的相同名称的No025303的后续申请，它们都被作为本申请的参考文件而被引证。试剂（36）可以是或可以包括很多磁性微球（未标出），该微球上面带有对红血细胞有特异性的抗体。在名称为“用于回收在人的周边血液中的白血细胞的单克隆抗体和回收使用的所述单克隆抗体的方法”美国专利No4752563中描述了这个例子中使用的特殊红血细胞的特异抗体，这篇专利申请被作为参考文件引证。除了样品缓冲剂外试剂（36）还可包括一个缓冲剂，或代替样品的缓冲剂。而且，试剂（36）最好是红血细胞溶胞剂和红血细胞的特异微球的结合。

当红血细胞基本上以样品部分的混合物中除去以后，就把这混合物的一部分输送到子种群的移位部位（42）。例如在分析装置（10）中那样，为了使感兴趣的白血细胞子种群的检测特性从遮蔽白血细胞种群的检测细胞特性移出去，这个感兴趣的白血细胞子种群应该在部位（42）中使至少一个检测细胞特性发生改变或移位。

此外，试剂（36）可以是或可以包括很多微球，该球上结合有对感兴趣的白血细胞子种群有特异性的抗体。试剂（36）和样品部分（32）最好一起搅拌，以便增强微球和白血细胞子种群的结合。使很多微球结合到感兴趣的白血球子种群的每一个细胞上。把微球涂覆到每个细胞上，可以使感兴趣的白血细胞子种群的每一个细胞的合成的检测细胞特性发生改变或移位。

然后将该样品部分输送到分析器（44），这个分析器与分析器（22）相同，能利用至少一个偏振参量对样品部分（32）中的细胞至少能进行检测和计数。

一个实现本发明的以及能完成第一和第二分析装置（10）和（30）的分析方法具体的分析仪器实施例在图3中用代号（50）来代表。

在仪器（50）中，只列举一个具体的数字，根据本发明的原理，它的部件几乎可以做无穷的改变。而且仪器（50）示出了一般的功能细节，而具体的实施例可以用很多已知的方法来进行结构上的改进。

仪器（50）包括一个吸气泵装置（52），它被用于抽吸感兴趣的细胞样品，例如把样品（12）或（32）抽到仪器（50）中，吸气泵（52）经管路（53）与一个取样阀（54）相连接，这个阀可以接到一个取样管（55）上。稀释剂泵（56）可以包含稀释剂或缓冲剂溶液，并可以经管路（58）与阀（54）相连接。根据需要，阀（54）和泵（52）可以使样品（12）或（32）与经过泵（56）的稀释剂一起抽入。

然后将反应混合物或细胞样品本身经一个排放管路（60）输入到一个混合装置（66）中，混合装置（66）包括一个接收输入样品或试剂的混合容器（68）。红血细胞将被来自溶胞剂泵（62）的溶胞剂溶解，然后经管路（64）输送到容器（68）。在反应完成后，经管路（72）从部位（70）提供一个谇灭（剂）和固着剂。这个反应可以通过使溶胞剂和/或谇灭剂同样品在混合容器（68）中的混合来加速完成，这正如在（74）的功能说明中所描述的那样。

在1987年3月13日申请的美国专利申请No025337和1990年5月1日申请的No517309（它是前一申请的接续申请）名称均为“用于促进生物反应小体积迅速混合的方法和装置”的申请中，描述了可使用适当的混合器（66）的具体细节。这两篇申请作为参考文件被引证。由于采用混合器（66）而使反应速度大大加快，并且没有明显损害感兴趣细胞的性质，例如由于提高反应温度可能出现的损害。此外，这个反应是在显著缩短的时间内完成的，通常在2分钟或更短的时间内完成。这样就适合于自动的高容量分析仪器（50）迅速地进行分析。

把经过溶胞剂分离出RBC的谇灭过的样品部分经管路（76）直接输送到白血细胞分析器（78）[（即分析器（22）或（44）]。该样品部分直接输送到分析器（78），在那里从该样品中首先测得一个参考或非移位的数据，以便供后面的参考或比较时用。分析器（78）可以是根据由wallace    H.Coulter在美国专利No2656508中描述的和体现在受让人（Coulter    Electronies.Inc）的众多的市售血细胞计数器中的计数和分粒技术而设计的很多实际类型。

分析器（78）通常包括一流动细胞型的检测池（80），流动池（80）包括至少一个偏振光检测器，最好还包括一个电子学检测器。流动池（80）是由任何光学透明材料制成，例如熔凝硅石或石英。流动池（80）包括一个变窄的水缩的孔径（82），样品部分用公知方式形成的流体力学流的作用下，通过该孔径。流动池（80）包括一个为使偏振的电磁光能束（84）聚焦的光学平板表面，最好是使用来自激光源（86）的激光束经过透镜系统（88）聚集在孔径（82）中的斑点上。在单个的细胞通过孔径（82）时，由这些细胞使光散射，因此，光束（84）由偏振光检测器装置（90）检测出，这将结合图4描述。

流动池（80）还包括电子检测电路。流动池（80）包括一个具有同在池中流体接触的第一电极（92）的第一部分（91）。

流动池容器部分（91）和电极（92）经孔（82）与在该容器中具有一个第二电极（98）的第二容器部分（96）相连接。电极（92）和（98）经过电抗导线（100）和（102）连接到一个RF/DC电源和检测电路（104）。电路（104）既同DC或低频电流或信号相耦合，又同在电极（91）和（98）之间的高频信号相耦合。

低频信号被用于检测在细胞通过孔（82）时引起的信号脉冲幅度。高频信号被用于测得由同一细胞通过孔（82）时的电子学浊度。

测量细胞的电子学浊度的方法由Wallace    H    Coulter和Walter    R    Hogg在美国专利3502974中和受让人（Coulter    Electronies    Inc）的几份专利和自其以后的出版物中作了描述。在名称为“用于测量一个颗粒的电阻和电抗的颗粒分析装置”美国专利4791355中描述了在此应用的一个具体电路。该专利被引证为本发明的参考文件。

由来自被检测细胞的电路（104）产生的信号经DC信号导线（106）和射频信号导线（108）耦合到比较器（110）中。比较器（110）能够保持从样品的各部分产生的信号，即为了同来自待描述的其它样品各部分的数据进行比较。比较器（110）还可以包括经来自光学检测装置（90）经导线（112）的一个光学检测输入或多个光学检测输入。

分析器（78）包括一个能按公知方式使细胞汇聚在流动池（80）中的鞘流，该鞘流可以按公知的方法由一个射流系统（114）提供，通过一对管路（116）和（118）联接到流动池（80）。样品反应混合物可以经一个导管（120）输送到流动池（80），然后可以经一个出口管（122）从流动池（80）中输送到废液容器（124）中。

当混合物的第一部分在分析器（78）中已经进行分析时，可以经冲洗管路（126）清洗或冲洗混合器（56），并经过排废管（128）排出。接着可以把第二样品部分输送到容器（68），以便使该样品中的细胞的检测细胞特性发生改变或移位。另一方面可以使改变的样品部分先输送到容器（68）中，而不首先测定第一非移位或标准样品部分的数据。通过从部位（130）经管路（132）、阀（134）和容器管路（136）把WBC微球加入到容器（68）中和该样品部分混合，使WBC或其它的感兴趣细胞组移位。

利用搅拌器（74）使WBC微球同第二样品部分混合。为了移位，将WBC微球与含有结合WBC微球的反应混合物经管路（76）输送到分析器（78）（即分析器（22）或（44））中，对其中的第二样品部分按类似第一部分的方法进行分析，然后把所得的那些数据在比较器（110）中进行比较。使第二样品部分的至少一个WBC子种群细胞的检测细胞特性发生变化，例如借助于结合微球的WBC子种群改变细胞的浊度，以便获得在接下来可以分析的变化的结果。

如果WBC微球是磁性的，由于下述理由，则可以在混合过种中和/或在混合之后利用一个磁场或磁铁（138）把结合到微球上的WBC子种群分离出去。这个磁场可以借助电磁装置或能相对容器（68）作机械运动的磁铁（138）来产生，以便捕获磁性结合WBC子种群。再使不含结合WBC子种群的第二样品部分经管路（76）输送到分析器（86）中，按照前述的方法测得分析数据。

仪器（66）准备接受下次分析用的下一个样品或样品部分，可以用取样管清洗装置（140）清洗取样管（58），以及用通常的手段清洗管路和容器（68）。后续样品混合物的分析结果是在快速和自动的方式下测得的。在后续混合物样品分析之间的时间可以是在几分钟或更少一些。

在操作分析仪器（66）过程中，使掺有溶胞剂/试剂的反应混合物同样品部分在容器（68）中与来自部位（130）的非磁性WBC微球一道混合，这些非磁性微球结合到WBC的一个子种群上。将淬灭剂（70）加到反应混合物中，然后把反应混合物经管路（76）输送到WBC分析器（78）中进行分析。

作为代替使用溶胞剂情况，不使用溶胞剂的情况下，可以使样品（12）或（32）经阀（56）不通入溶胞剂输送到混合器（66）中。在这种情况下，利用来自RBC微球部位（142）的上面结合有RBC特异性抗体的微球用磁力把RBC分离出去，经过管路（142）输送到阀（134），然后经管路（136）输送到容器（68）中。在这里不使用溶胞剂，按照基本上与上述的用磁结合WBC方法相同的方法，在混合之后用磁铁（140）磁性除去结合的RBC。

此外，在为了提高反应速度的第二种情况下，可以利用掺有RBC溶胞剂和RBC磁性小球两者的样品反应混合物。将该混合物混合，使溶胞淬灭，并使结合的RBC种群用磁力分离出去，然后再用前面描述的方法分析WBC。

虽然描述本发明技术时是利用一个自然状态的样品，例如一个直接输送到仪器（66）中的全血样品，但是根据需要样品也可以是离线制备的或者部分离线制备的。样品也可以先贫化RBC。还可以利用一个能离线或在制备模式下加入微球的系统，然后可以使检测的细胞特性已经移位的样品部分导入系统中，以便进行分析。下面描述几下具体的例子。

在由Sequoia-Turner    of    Mountainview（California）销售的CELL-DYN3000仪器的说明书中描述了利用多维光散射鉴别白细胞或WBC种群的方法。这个仪器利用了一个偏振光源和具有正向10°和90°（正交）偏振和消偏振的散射器的测头。为了使RBC对激光是透明的，这个仪器可以利用一种指示剂配方。然而，既使采用这些多个参量，这个仪器也不能完成对WBC的任何子种群的鉴别。

参照图4，在图4中示出了一个偏振光检测器装置（90）的例子，装置（90）包括一偏振激光光源（150），它把偏振激光束（152）射到流动池（80）上，光束（152）同细胞流（未示出）相互作用，产生一个含有与细胞有关的情报信号的反射光束（154），反射光束（154）射到光束分离器（156）上。

光束的第一部分（158）通过光束分离器（156），透过偏振光滤光器（160）被光电倍增管（162）作为一个90°偏振光散射信号或输出信号检测出。由光束分离器（156）反射射出光束的第二部分（164），并;被第二光电倍增管（166）作为一个非偏振光散射信号测出。也可以采用其它的检测光参量，例如在上面引证的VCS和Case35368仪器中所描述的参量。

参看图5A-6B，在图5中示出了DC/偏振光散射绘图仪测出的散点图。三个WBC种群组，单核细胞（M）（168）和淋巴细胞（L）（170）。嗜中细胞（N）与嗜酸细胞（E）相混合（172），在这个散点图中，没有使用微球。

当把微球加入以后，被微球散射的光使这些检测特性混合，从而使只有两个WBC种群组分开计数，这正如图5B中所示，L（170）和M，N，E是混合的（174）。通过利用最小数目的微球，可以使细胞组的这个混合限制一最小程度，此外，在光源发的光波波长为488nm时采用很小的微球，当其直径小于0.6μm时不会引起明显的混合。

利用图5A作为标准或对照组，把上面结合有对L子种群例如CD4有特异性的单克隆抗体的非磁性微球混合在同一样品中或该样品的第二部分中，结果是由于产生位移而构成一个如图5B中所示的直观的子种群组（176）。

这个程序可以离线使用，也可以在线使用，程序步骤1-3可以离线完成。这样将会省去填加微球和把微球与样品混合所需要的设备。利用一个全自动化的仪器（50），可以自动地在线完成全部步骤，这些步骤通常包括：

1、提供150μl（或更多）全血液。

2加入15μl的非磁性的直径2μm的上面线合有对L子种群具有特异性的单克隆抗体（T₄、T₈或T₁₁，每种微球在分开的容器中混合）或加入10μlMSIG中对照微球，以便得到对照/背景标准。

3、搅拌2分钟（此后，可以保持一定时间，至少1小时以上）。

4、使系统在自动模式下运转。

5、在系统中，在线溶胞和淬灭。

参看图6A，再一次说明一个对照组或非移位过的散点图的结果，L在组（178）中出现，而M在组（180），而N和E在组（182）中出现。如上所述，对照组不是必需的，因为从图5B和6B中可以发现感兴趣的WBC子种群可以直接地找到，因此不需要把背景同一个标准结果比较。只有在要求散点图不受干扰的时候，才使用MSIG对照微球，MSIG是一老鼠的单克隆免疫球蛋白，它对WBC任何种群或WBC的任何子种群没有特异性。

通过使T₄微球结合到CD₄细胞上，使感兴趣的第一WBC子种群CD₄细胞移位，如图6B所示，不带有移位的子种群的剩余物L在组（178）中被发现，而M、N和E在组（184）中被发现，CD₄细胞移位检测细胞特性构成了一个新的组（186），把组（186）同图6A中的结果相比较，或者直接进行分析，就可得到CD₄细胞相对总的L的百分率。在这个例子中，测得的CD₄细胞占有的百分率为53.2%。为了比较，对相同的样品在通用的EPICS（注册商标）流动细胞计数仪器中作了分析，所得的CD₄细胞占有百分率为53.3%。

在图7A-7C中，通过利用不同的检测参量所形成的不同的散点图，说明CD₄的移位情况。这些结果不是最优化的，但是它是为了说明利用另外的检测参量例如MAS（中间角度散射，在图3和图4中没有说明）原理。图7A说明一个属于所有WBC种群的对照细胞组（188）。在这个散点图中绘出了90°散射光和90°偏振散射光的对应关系。

图7B说明了一个属于所有WBC种群的单个细胞组（190）和一个属于位移的来自同一样品混合物CD₄细胞的一个散开的CD₄组（191）。在这个散点图中，绘出了90°的消偏振散射光和90°散射光的对应关系。

图7C示出了图7B中相同的数据。散点图是根据DC对MALS的关系绘出的。L出现在组（192）中，而位移的CD₄细胞出现在组（194）中。

图8A-D说明了同时利用两个相同直径的微球筛选两个不同感兴趣的细胞群的潜在的可行性，这些感兴趣细胞群例如是两个感兴趣的WBC子种群。利用两种不同类型的微球，一个直径为5.74μm，另一个直径为5.11μm，测出了非偏振的散射光的对数数值和浊度的对应关系，如图8B所示，只测得一个单个的微球组（196）。但是利用偏振光的检测参量，90°偏振散射光的对数值。如图8B所示测得两个分开的组（198）和（200）。利用这些参量，大概可以把二个分开的WBC子种群移位，并且在一个样品部分中获得结果。在这个所列举的检测结果中，不包括任何细胞只有一个微球本身。此外，正如图8C和图8D所示，只利用唯一的偏振光参量，90°散射偏振光的对数值，获得了一维分开的两个微球组的结果（图8D）。普通的非偏振光散射表明不能在各组间进行区分（图8C）。

利用偏振光可以在图上使两个不同类型的微球（一个直径为10μm，另一个直径为10.35μm）可能分开，如图9A-9D所示。图9A说明了用90°散射和浊度的对应关系只能显示出唯一的组，而图9B说明了用偏振光散射可以使组（204）和（206）分开。此外，这些结果也可以用一单个偏振光检测参量测得，如图9D所示。在图9C中的非偏振光数据中没有显示出两个组。

参照图10，用数字（190）代表本发明的第三个筛选细胞分析仪器的实施例。为了测定感兴趣细胞的重叠百分率，可以利用分析仪器（190），下面将针对来自全血样品或其一部分的WBC种群的子种群来描述这个分析仪器。

分析仪器（190）包括一个生物样品（192），它又至少包括一个第一WBC种群，该WBC种群至少包括两个感兴趣的WBC种群的子种群。使生物样品（192）或某一部分经管路（194）同经管路（198）的至少一种试剂混合。然后借助一个功能指定的RBC除去部位（200）把RBC从样品部分中分离出去。RBC可以用先前描述的技术之一分离出去。

一旦把RBC分离出去以后，立即将混合物的各部分输送到不同的管路中。第一管路（202）可以用于经管路（206）把第一样品部分直接输送到分析器（204）。就上述的分析器（22）和（44）来讲，是借助至少两个检测参量来检测细胞的特性，其中的一个参量是光检测参量。

第二管路（208）把第二样品部分输送到“X”细胞移位部位（210）。前面的“X”是感兴趣的第一WBC种群的子种群，它具有至少一个检测细胞特性在部位（210）中被改变或移位，以便使感兴趣的WBC种群的子种群的检测特性从遮蔽的WBC种群的检测细胞特性中移出。如前所述，通过使一些带有一个对感兴趣WBC种群的子种群有特异性的抗体的大多数非磁性微球结合到细胞上，使检测细胞特性移位。然后使样品部分输送到分析器（204）。可以把分析器（204）测得的每组数据，经过通道（214）储存在比较器（212）用于以后的比较。

用类似的方式，使第三样品部分经管路（218）输送到“Y”细胞移位部位（216）。使“Y”细胞的检测细胞特性在部位（216）中移位或改变，然后再把该样品部分输送到分析器（204）和比较器（212）。这既可以直接得到“X”细胞和“Y”细胞的百分率，也可以用来自通道（202）非移位的数据比较而获得“X”细胞和“Y”细胞的百分率。但是这种方法不能测得“X”和“Y”细胞可能存在的重叠数量。

为了测定这个重叠百分率，需把第四样品部分经管路（222）输送到“X”和“Y”移位部位（220）中。采用重叠意味着至少包括两个感兴趣的受体或抗体的某些细胞，细胞种群、细胞子种群或形成体。在这个样品部分中，把带有对“X”细胞或感兴趣的第一WBC种群的子种群有特异性的抗体的微球和带有对“Y”细胞或感兴趣的第二WBC种群子种群有特异性抗体的微球两者混合在一起。然后使这个样品部分输送到分析器（204），并把获得数据供给比较器（212）。

通过把分别来自通道（208）和（218）的单独的“X”和“Y”的百分率数值加在一起，可以求出重叠百分率。从这个总和中减去来自管路（222）组合的“X”和“Y”的百分率。如果这两个总的百分率基本相等，则表明“X”和“Y”细胞没有明显的重叠。如果有一个差，则这个差值就是上面结合有两种“X”和“Y”特异性微球的细胞的重叠百分率。尽管已经描述了具有很多管路的分析仪器（190），分析仪器（190）也可以是一个利用单一管路的顺序工作的分析仪器，如对分析器（50）所述的那样。按照分析仪器（50），也可提供多管路，利用单个混合器（66），每个管路（208）、（218）和（222）平行排列，用这个程序所获得的结果示在图9A-9F中。

参看图11，用数字（250）代表本发明的另一个筛选被遮蔽细胞的分析仪器。分析仪器（250）包括至少含有一第一组细胞或细胞种群（未示出）的样品（252）。这个细胞种群在下述分析中遮蔽住一个感兴趣细胞组，例如细胞的一个子种群或细胞的第二子种群。样品（252）可以包括一个细胞加到里面的缓冲剂。

把样品（252）或其一部分经管路（254）同经管路（258）的至少一种试剂（256）混合。使该混合物的第一部分经管路（262）直接输送到分析器（260）中。分析器（260）可以是和分析器（22）相同的分析器，并对该样品部分的细胞数量至少进行检测和计数，其结果经通道（266）送到比较器（264）中。

经管路（270）把第二样品部分输送到一细胞除去部位（268）中，对这些细胞按照上述方法进行移位或贫化处理。为了移位，把非磁性微球结合遮蔽细胞种群上，从而改变检测细胞的特性，从感兴趣被遮蔽的细胞的检测特性中充分地移出它们。为了贫化，把磁性微球结合到遮蔽的细胞种群上，然后再用磁力把这些微球从这个样品部分中分离出去。

然后把这第二样品部分经管路（272）输送到分析器（260），并将获得的数据送到比较器（264）。然后把来自这两个样品部分的数据进行比较，以便确定感兴趣被遮蔽的细胞组所占的百分率。

参看图12，用数字（280）来代表本发明的另一个筛选细胞的分析仪器。分析仪器（280）与分析仪器（250）相类似，但还包括一个至少包含一第一组活的生物细胞（未示出）的生物样品（282），这个活的生物细胞例如可以是在全血样品里或来自全血样品。生物样品（282）的细胞要在定性和/或定量测定或分析中参与生物反应。该生物样品至少包括一个对一个感兴趣的WBC种群有遮蔽作用的WBC种群，样品（282）还可以包括一个细胞加到里面的缓冲剂。

使样品（282）或其一部分经管路（284）同来自管路（288）的试剂（286）混合。在RBC除去部位（290）中，使RBC从这个样品部分（282）中除去。可以采用上述的方法之一除去RBC。经管路（292）使除去RBC的样品的一部分输送到分析器（294），在该分析器中至少对该WBC种群体进行检测和计数。把来自分析器（294）的数据经通道（296）输送到比较器（298）（象在分析器250）中一样。）

把第二样品部分经管路（302）输送到按指定功能嗜中性细胞（N）除去部位（300）。通过移位或改变一个参量，例如浊度或通过磁分离，两者如上所述，可以把N从这个混合物中除去。在本例中所用的具体的N特异性抗体在名称为“对嗜中性细胞有特异性的单克隆抗体”的美国专利4931395作了描述。

把这个经除去N或移位过的混合物经管路（304）输送到WBC分析器（294）中。并把分析器（294）的分析结果输送给比较器（298）。再将第二样品部分的结果同第一样品部分的结果相比较，而测定出在N区域是否留下来的任何细胞，这些细胞是先前被N遮蔽住的。

参考图13，用数字（340）代表本发明的并存的筛选细胞分析仪器。分析仪器（340）包括一个样品（342），该样品至少包含有一个第一组细胞或细胞种群（未示出）。这个细胞种群在按下述方法分析时，遮蔽住至少感兴趣的两个细胞组，例如一些子种群或其他的细胞组。样品（342）可以包括一个供加入细胞的缓冲剂。

使样品（342）或其一部分经管路（344）同经过管路（348）的至少一种试剂（346）混合。每个感兴趣细胞组的至少一个检测细胞特性在移位细胞群部位（350）中改变或移位。为了把这些检测细胞特性从遮蔽的细胞种群中或从它们相互之间除去，要使每一群检测细胞特性发生充分的改变或位移。

试剂（346）可以是或包括多个不同的非磁性微球组，每组微球上都分别结合有一种对感兴趣的几个细胞组中的一组具有特异性的抗体。最好是把试剂（346）和样品部分（342）一起搅拌，以便促进微球同感兴趣的细胞组的结合。使多个微球结合到每个感兴趣细胞组的每个细胞上，通常以微球涂覆每个细胞，以便使感兴趣细胞群中的每个细胞最后的检测特性发生改变或移位。

然后使这个样品或混合物（342）经管路（354）输送到分析器（352）中。分析器（352）对这个样品部分（342）进行检测和计数细胞。分析器（352）至少包括两个检测参量，如前所述，其中至少一个是光学参量。分析仪器（340）基本上和分析仪器（10）和（50）相同，但附加至少两组不同的微球。

参看图14，用参考数字（360）来代表本发明的第二个并存的筛选细胞分析仪器。分析仪器（360）包括一个生物样品（362），该生物样品至少包含第一组活生物细胞（未示出），例如在一个全血样品中的活生物细胞或来自全血的活生物细胞。生物样品（362）的细胞要在定量和/或定性测定或分析中参加生物反应。生物样品（362）至少包括一种WBC种群，该WBC种群至少遮蔽住两个感兴趣的WBC子种群，样品（362）还可以包括一个供加入细胞的缓冲剂。

将样品（362）或其中一部分经管路（364）同经管路（368）的至少一种试剂（366）混合。然后用一功能指定RBC除去部位（370）从该混合物中除去RBC。由部位（370）利用前面描述的一些方法例如溶胞、磁性微球及其组合的方法从该混合物中可以除去RBC。

一旦在RBC基本上从这部分样品混合物（362）中除去，立即将一部分混合物输送到子种群移位部位（372）。如同在分析仪器（10）中一样，为了使感兴趣的WBC子种群的检测细胞特性从遮蔽WBC种群和从相互之间移出，在部位（42）中要使每个感兴趣的WBC子种群中至少有一个检测细胞特性发生改变或移位。

此外，试剂（366）可以是或可以包括两组不同的微球，每组包括一些上面结合有对感兴趣的WBC子种群之一具有特异性抗体的非磁性微球。为了促进微球和感兴趣WBC子种群的结合，最好使试剂（366）和样品部分（362）一起搅拌。如前述一样，把来自一组的多个微球结合到每个感兴趣WBC子种群的每个细胞上，使微球包覆到每个细胞上，这样就使感兴趣的WBC子种群的每个细胞的最后检测细胞特性发生改变或移位。

然后，把样品部分（362）输送到分析器（374）该分析器和分析器（22）相同，并在样品部分（362）中至少进行细胞检测和计数。分析仪器（50）可以完成分析仪器（360）的分析方法。

这些分析仪器最好能计算WBC种群绝对数目，从而也计算WBC子种群的绝对数目。这一点对治疗艾滋病患者是特别有用的，因为在决定如何对艾滋病患者进行药物治疗时，要利用特异的CD₄种群数目。借助通用方法，例如受让商（Coulter Electronics，Ins）销售的很多商品化细胞计数装置中所采用根据对特定体积内的WBC的数目的计算可以获得这个绝对数目。

所用的磁性微球可以是任何适用的型号，例如是0.7μ直径的聚苯乙烯磁性微球，具有重量对10%实心体积比（with    a    weight    to    Volume    of    10%Solids），由Bangs    Laboratories    of    Carmel，Inaiana销售。非磁性微球可以是任何适用的型号，例如是直径为2.17μm，重量对8%实心体积比，经表面活性剂游离磺化的苯乙烯乳胶微球，例如Interfacial    Dynamics    of    Portland，Oregon销售的IDC微球。这些特定的微球只是作为例子而使用的，其它类型和尺寸的由其它一般来源的微球也可以使用。

通常情况下，为了移位，最好利用直径大体上比细胞直径小的微球，因为在每个细胞上要结合多个微球。微球的典型直径是以0.65到3.0μm，以便保证仪器不能象指出细胞那样检测和计数游离微球本身。此外，太大的微球可能粘住或堵塞检测孔，因为很多细胞可能粘到这些球上，而形成一个大球和细胞团。虽然为了使检测细胞移位也可以利用磁性微球，但是在通常的情况下，因为非磁性微球的价格低廉而被用于检测细胞的移位中。所采用的微球尺寸范围还与所用光的波长有关。

为了用磁力分离出细胞，只能利用磁性微球。在这个申请中，微球尺寸不是主要的，因为在检测之前把这些细胞从样品中除去。为了迅速容易地在磁场被除去，微球是有效的手段。在这种情况下，适用0.65到4.5μm直径的微球。进一步，因为仅是除去细胞，可使用10μm或大于10μm直径的微球，可以使多个细胞结合到每个微球上，但是因为不需计数，所以不干扰仪器的操作。

Claims (82)

1、一种从具有至少一个遮蔽其中细胞种群的一细胞样品的至少一部分中分析至少一个感兴趣的细胞群的方法，其特征在于：

在第一样品部分中改变至少第一选择的感兴趣的细胞群的检测特性，从遮蔽细胞种群检测特性中除去该细胞群检测特性；以及

用至少一个光偏振参量，检测和计数所述第一样品部分，得到所述感兴趣的选择细胞群占有的百分率。

2、如权利要求1所述的方法，其特征在于：通过提供具有结合到那里的一试剂的微球，该试剂对所述感兴趣的选择的细胞群上一特定分子是特异的，并所述微球与所述样品部分一起混合，以移位所述感兴趣的选择的细胞群的至少一个检测特性，来改变所述的检测特性。

3、如权利要求2所述的方法，其特征在于：提供形成所述试剂的单克隆抗体，以及形成所述特定分子的在所述感兴趣的细胞种群的子种群上的抗原。

4、如权利要求1所述的方法，其特征在于：从有是一WBC种群的所述遮蔽细胞种群和是一所述WBC种群的子种群的一全血样品中形成所述的细胞样品。

5、如权利要求4所述的方法，其特征在于：通过提供具有一试剂结合到上面的微球，该试剂对所述WBC种群的子种群上的一特定分子是特异性的，并把所述微球与所述样品部分混合，结合到所述WBC种群的子种群上，从而移位所述WBC种群的子种群的至少一个检测特性，来改变所述检测特性。

6、如权利要求5所述的方法，其特征在于：提供形成所述试剂的单克隆抗体，以及在所述WBC种群的感兴趣的子种群上形成所述特定分子的抗原。

7、如权利要求6所述的方法，其特征在于：通过提供具有结合到上面的单克隆抗体的微球，该抗体对所述第一白血细胞种群的子种群是特异的，并把所述微球与所述样品混合，结合到所述第一子种群上，移位所述第一子种群的至少一个检测特性，来移位一第一白血细胞种群的子种群。

8、如权利要求7所述的方法，其特征在于：在一第二样品部分通过提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该抗体对所述第二白血细胞种群的子种群是特异的，并把所述微球与所述样品混合，结合到所述第二子种群上，移位所述第二子种群的至少一个检测特性，来移位一第二白血细胞种群的子种群。

9、如权利要求8所述的方法，其特征在于：在一第三样品部分，通过提供两组微球，第一组微球具有所述的结合到上面的单克隆抗体，该抗体对所述第一白血细胞种群的子种群是特异的，第二组微球具有所述的结合到上面的单克隆抗体，该抗体对所述的第二WBC种群的子种群是特异的，以及把所述的微球与所述样品混合，结合到所述第一和第二子种群上，移位所述第一和第二子种群的每一个的至少一个检测特性，来移位所述第一和第二白血细胞种群的子种群，并比较所述第一、第二、以及第三样品部分的结果，确定第一和第二WBC种群的子种群重叠百分率。

10、如权利要求6所述的方法，其特征在于：通过提供具有一结合到上面的单克隆抗体的微球，该抗体对CD₄白血细胞种群的子种群是特异的，把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₄子种群上，移位所述CD₄子种群的至少一个检测特性，来移位所述CD₄白血细胞种群的子种群。

11、如权利要求10所述的方法，其特征在于：在第二样品部分中，通过提供具有一单克隆抗体结合到上面的微球，该抗体对CD₈白血细胞种群的子种群是特异的;把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₈子种群上，以移位所述CD₈子种群的至少一个检测特性，来移位所述CD₈白血细胞种群的子种群。

12、如权利要求11所述的方法，其特征在于：在第三样品部分，通过提供每个具有单克隆抗体结合到上面的两组微球，单克隆抗体对所述CD₄和CD₈白血细胞种群的子种群的一种群是特异的，并把所述微球与所述的样品混合，结合到所述的CD₄和CD₈子种群上，移位所述CD₄和CD₈子种群的一种群的至少一个检测特性，来移位CD₄和CD₈白血细胞种群的子种群双方，以及比较所述第一、第二、以及第三样品部分的结果，从而确定CD₄和CD₈白血细胞种群的子种群的重叠百分率。

13、如权利要求6所述的方法，其特征在于：通过提供具有一单克隆抗体结合到上面的微球，该单克隆抗体对所述CD₄白血细胞种群的子种群是特异的，并把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₄子种群上，以移位所述CD₄子种群的至少一个检测特性，来移位CD₄白血细胞种群的子种群。

14、如权利要求13所述的方法，其特征在于：在第二样品部分中，通过提供具有一单克隆抗体结合到上面的微球，该抗体对CD₂白血细胞种群的子种群是特异的，并把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₂子种群上，移位所述CD₂子种群的至少一个检测特性，来移位所述CD₂白血细胞种群的子种群。

15、如权利要求14所述的方法，其特征在于：在第三样品部分中，通过提供两组具有结合到上面的单克隆抗体的微球，所述抗体对所述CD₂和CD₄白血细胞种群的子种群之一是特异的，并把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₂和CD₄子种群上，以移位所述CD₂和CD₄子种群的每一个的至少一个检测特性，来移位CD₂和CD₄白血细胞种群的子种群双方，并把所述第一、第二和第三样品部分的结果进行比较，以确定CD₂和CD₄白血细胞种群的子种群的重叠百分率。

16、如权利要求6所述的方法，其特征在于：通过提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该抗体对CD₈白血细胞种群的子种群是特异的，并把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₈子种群上，以移位所述CD₈子种群的至少一个检测特性，来移位CD₈白血细胞种群的子种群。

17、如权利要求16所述的方法，其特征在于：在第二样品部分，通过提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该单克隆抗体对CD₂白血细胞种群的子种群是特异的，并把所述的微球与所述样品混合，结合到所述CD₂子种群上，以移位所述CD₂子种群的至少一个检测特性，从而移位CD₂白血细胞种群的子种群。

18、如权利要求17所述的方法，其特征在于：在第三样品部分中，通过提供上面结合有单克隆抗体的两组微球，该抗体对CD₂和CD₈白血细胞种群的子种群之一是特异的，并把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₂和CD₈子种群上，从而移位所述CD₂和CD₈子种群的每一个的至少一个检测特性，来移位所述CD₂和CD₈白血细胞种群的子种群，并比较所述第一、第二和第三样品部分的结果，以确定CD₂和CD₈白血细胞种群的子种群的重叠百分率。

19、如权利要求4所述的方法，其特征在于：所述全血样品包括一红血细胞种群，并且从所述样品中除去所述红血细胞种群，不明显有害地影响所述白血细胞种群的相关的定性和/或定量。

20、如权利要求1所述的方法，其特征在于：在改变所述检测特性前，首先检测和计数所述第一样品部分，并比较所数计数，得到所占的百分率。

21、如权利要求1所述的方法，其特征在于：在所述第一样品部分，与所述感兴趣的第一细胞群同时改变感兴趣的至少第二选择的细胞群的检测特性，从而由遮蔽细胞种群的检测特性和所述感兴趣第一细胞群检测特性中除去第二细胞群的检测特性。

22、如权利要求21所述的方法，其特征在于：通过提供上面结合有一试剂的微球，该试剂对在所述感兴趣的第二细胞群上特定分子是特异的，并把所述微球与所述样品部分混合，结合到所述感兴趣的第二细胞群上，以移位所述感兴趣的第二细胞群的至少一检测特性，来改变所述感兴趣的第二细胞群的检测特性。

23、如权利要求22所述的方法，其特征在于：提供形成所述试剂的单克隆抗体和在所述感兴趣的细胞种群的子种群上形成所述特定分子的抗原。

24、如权利要求21所述的方法，其特征在于：从具有所述遮蔽细胞种群，它是一WBC种群，和所述感兴趣的选择细胞群，它是所述WBC种群的子种群的一全血样品中形成所述细胞样品。

25、如权利要求24所述的方法，其特征在于：提供多组微球，每一组微球上面结合有一试剂，该试剂对所述WBC种群各个子种群之上的一特定分子是特异的，把所述各组微球与所述样品部分混合，把每组微球结合到所述WBC种群的各个子种群之一上，以移位每一个所述的WBC种群的子种群的至少一个检测特性，来改变所述的检测特性。

26、如权利要求25所述的方法，其特征在于：提供形成所述试剂的单克隆抗体，以及在所述感兴趣WBC种群的各个子种群上形成所述特定分子的抗原。

27、如权利要求26所述的方法，其特征在于：通过提供上面结合有单克隆抗体的微球，该抗体对所述第一白血细胞种群的子种群是特异的，并把所述微球与所述样品混合，结合到所述第一子种群上，从而移位所述第一子种群的至少一个检测特性，来移位第一白血细胞种群的子种群;以及在所述样品部分中，通过提供上面结合有单克隆抗体的微球，该抗体对所述第二白血细胞种群的子种群是特异的，并把所述微球与所述样品混合，结合到所述第二子种群上，以移位所述第二子种群的至少一个检测特性，来移位第二白血细胞种群的子种群。

28、如权利要求26所述的方法，其特征在于：通过提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该单克隆抗体对所述CD₄白血细胞种群的子种群是特异的，并把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₄子种群上，以移位所述CD₄子种群的至少一个检测特性，来移位CD₄白血细胞种群的子种群;以及在所述样品部分，提供上面结合有单克隆抗体的微球，该抗体对CD₈白血细胞种群的子种群是特异的，并把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₈子种群上，以移位所述CD₈子种群的至少一个检测特性，来移位所述CD₈白血细胞种群的子种群。

29、一种用于从含有至少一个遮蔽细胞种群的一细胞样品的至少一部分中获得至少一个感兴趣的细胞群分析的装置，其特征在于，包括：

在第一样品部分中，改变至少第一选择的感兴趣细胞群的检测特性，从遮蔽细胞种群检测特性中除去该细胞群的检测特性的部件（20，42，66，268，300，350，372）;以及

用至少一个光偏振参量检测和计数所述第一样品部分，得到感光趣的所述选择细胞群所占百分率的部件（22，44，104，162，204，264，294，352，374）。

30、如权利要求29所述的装置，其特征在于：用于改变所述检测特性的所述部件包括：用于提供上面结合有一试剂的微球，该试剂对感兴趣的所述选择的细胞群上一特定分子是特异的部件（16，36，130，196，346，366）;用于把所述微球与所述样品部分混合，结合到感兴趣的所述选择的细胞群上，以移位感兴趣的所述选择细胞群的至少一个检测特性的部件（74）。

31、如权利要求30所述的装置，其特征在于：用于提供单克隆抗体，形成所述试剂，以及在感兴趣的所述细胞种群子种群上形成所述特定分子的抗原的部件。

32、如权利要求29所述的装置，其特征在于;用于从含有所述遮蔽细胞种群，一WBC种群，和感兴趣的所述选择的细胞群，一所述WBC种群的子种群的全血样品中形成所述细胞样品的部件。

33、如权利要求32所述的装置，其特征在于：用于改进所述检测特性的部件包括：用于提供上面结合有一试剂的微球，该试剂对在所述WBC种群的子种群上的特定分子是特异的部件，以及用于把所述微球与所述样品部分混合，结合到所述WBC种群的子种群上，以移位所述WBC种群的子种群的至少一个检测特性的部件。

34、如权利要求33所述的装置，其特征在于：用于提供形成所述试剂的单克隆抗体和在所述感兴趣的WBC种群的子种群上的形成所述特定分子的抗原的部件。

35、如权利要求34所述的装置，其特征在于：通过提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该抗体对所述第一WBC种群的子种群是特异的，移位第一白血细胞种群的子种群的部件;以及用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述第一子种群上，从而移位所述第一子种群的至少一个检测特性的部件。

36、如权利要求35所述的装置，其特征在于：用于在第二样品部分中移位第二白血细胞种群的子种群，是通过提供在上面结合有单克隆抗体的微球，该抗体对所述第二白细胞种群的子种群是特异的部件;以及用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述第二子种群上，以移位所述第二子种群的至少一个检测特性的部件。

37、如权利要求36所述的装置，其特征在于：用于在第三样品部分，提供两组微球，第一组上面结合有所述单克隆抗体的微球，该抗体对所述第一白血细胞种群的子种群是特异的;以及第二组上面结合有所述单克隆抗体的微球，该抗体对所述第二WBC种群的子种群是特异的，移位所述第一、第二白血细胞种群子种双方的部件;和用于把所述微球与所述样品混合，结合到第一和第二子种群上，移位所述第一和第二子种群的每一个的至少一个检测特性的部件;以及用于比较所述第一、第二和第三样品部分的结果，以确定第一和第二WBC种群的子种群的重叠百分率的部件。

38、如权利要求34所述的装置，其特征在于：用于提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该抗体对所述CD₄白血细胞种群的子种群是特异的，移位CD4白血细胞种群的子种群的部件，以及用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₄子种群上，移位所述CD₄子种群的至少一个检测特性的部件。

39、如权利要求38所述的装置，其特征在于：用于在第二样品部分中，用提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该抗体对所述CD₈白血细胞种群的子种群是特异的，来移位CD₈白血细胞种群的子种群的部件;以及用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₈子种群上，以移位所述CD₈子种群的至少一个检测特性的部件。

40、如权利要求39所述的装置，其特征在于：用于在第三样品部分中，通过提供两组微球，每一组上结合有单克隆抗体，该抗体对所述CD₄和CD₈白血细胞种群的子种群之一是特异的，来移位CD₄和CD₈白血细胞种群子种群双方的部件;以及用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₄和CD₈子种群上，移位所述CD₄和CD₈子种群的每一个的至少一个检测特性的部件;和用于比较所述第一、第二和第三样品部分的结果，以确定CD₄和CD₈白血细胞种群的子种群的重叠百分率的部件。

41、如权利要求34所述的装置，其特征在于：通过提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该抗体对所述CD₄白血细胞种群的子种群是特异的，来移位CD₄白血细胞种群的子种群的部件;以及用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₄子种群上，以移位所述CD₄子种群的至少一个检测特性的部件。

42、如权利要求41所述的装置，其特征在于：用于在第二样品部分中，通过提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该抗体对CD₂白血细胞种群的子种群是特异的，来移位所述CD₂白血细胞种群的子种群的的部件;以及用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₂子种群上，移位所述CD₂子种群的至少一个检测特性的部件。

43、如权利要求42所述的装置，其特征在于：用于在第三样品部分中，通过提供两组上面结合有单克隆抗体的微球，该抗体对所述CD₂和CD₄白血细胞种群的子种群的一个子种群是特异的，来移位CD₂和CD₄白血细胞种群的子种群的部件;用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₂和CD₄子种群上，以移位所述CD₂和CD₄子种群的每一个的至少一个检测特性的部件;以及用于比较所述第一、第二和第三样品部分的结果，以确定CD₂和CD₄白血细胞种群的子群种的重叠百分率的部件。

44、如权利要求37所述的装置，其特征在于：用提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该抗体对CD₈白血细胞种群的子种群是特异的，移位所述CD₈白血细胞种群的子种群的部件;以及用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₈子种群上，以移位所述CD₈子种群的至少一个检测特性的部件。

45、如权利要求44所述的装置，其特征在于：用于在第二样品部分中，通过提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该抗体对CD₂白血细胞种群的子种群是特异的，来移位所述CD₂白血细胞种群的子种群的部件;以及用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₂子种群上，移位所述CD₂子种群的至少一个检测特性的部件。

46、如权利要求45所述的装置，其特征在于：用于在第三样品部分中，通过提供两组每组上面结合有单克隆抗体的微球，该抗体对于所述CD₂和CD₈白血细胞种群的子种群之一是特异的，来移位所述CD₂和CD₈白血细胞种群的子种群的部件;用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₂和CD₈子种上，以移位所述CD₂和CD₈子种群的每一个的至少一个检测特性的部件;以及用于比较所述第一、第二和第三样品部分的结果，以确定CD₂和CD₈白血细胞种群的子种群的重叠百分率的部件。

47、如权利要求32所述的装置，其特征在于：所述全血样品包一红血细胞种群，以及用于从所述样品中除去所述红血细胞种群，而不明显有害地影响所述白血细胞种群的相关的定性和/或定量。

48、如权利要求29所述的装置，其特征在于：用于在改变所述检测特性前，首先检测和计数所述第一样品部分的部件;以及用于比较所述计数，得到所占百分率的部件。

49、如权利要求29所述的装置，其特征在于：用于在所述第一样品部分中，与所述第一感兴趣细胞群同时改变感兴趣的至少第二选择的细胞群的检测特性，以便从遮蔽细胞种群的检测特性和所述第一感兴趣细胞群检测特性两者中除去第二细胞群检测特性的部件。

50、如权利要求49所述的装置，其特征在于：通过提供上面结合有一试剂的微球，该试剂对所述感兴趣的第二细胞群上一特定分子是特异的，来改变所述感兴趣第二细胞群的检测特性的部件;以及用于把述微球与所述样品部分混合，结合到所述感兴趣第二细胞群上，以移位所述感兴趣的第二细胞群的至少一个检测特性的部件。

51、如权利要求50所述的装置，其特征在于：用于提供形成所述试剂的单克隆抗体和在所述感兴趣的细胞种群的子种群上形成所述特定分子的抗原的部件。

52、如权利要求49所述的装置，其特征在于：用于从具有所述遮蔽细胞种群，-WBC种群，和所述感兴趣的选择细胞群，所述WBC种群的子种群的一全血样品中，形成所述细胞样品的部件。

53、如权利要求52所述的装置，其特征在于：通过提供若干组微球，每一组上面结合有一试剂，该试剂对所述WBC种群的子种群的一个上的一特定分子是特异的，来改变所述检测特性的部件;以及用于把所述若干组微球与所述样品部分混合，把每一组结合到所述WBC种群子种群之一上，以移位每一个所述WBC种群的子种群的至少一个检测特性的部件。

54、如权利要求53所述的装置，其特征在于：用于提供形成所述试剂的单克隆抗体和在所述感兴趣WBC种群各子种群上形成所述特定分子的抗原的部件。

55、如权利要求54所述的装置，其特征在于：通过提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该抗体对所述第一白血细胞种群的子种群是特异的，来移位第一白血细胞种群的子种群的部件;用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述第一子种群上，移位所述第一子种群的至少一个检测特性的部件;在所述样品部分，通过提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该抗体对所述第二白血细胞种群的子种群是特异的，来移位第二白血细胞种群的子种群的部件;以及用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述第二子种群上，移位所述第二子种群的至少一个检测特性的部件。

56、如权利要求54所述的装置，其特征在于：通过提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该抗体对CD₄白血细胞种群的子种群是特异的，来移所述CD₄白血细胞种群的子种群的部件;用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₄子种群上，以移位所述CD₄子种群的至少一个检测特性的部件;用于在所述样品部分，通过提供上面结合有一单克隆抗体的微球，该抗体对CD₈白血细胞种群的子种群是特异的，来移位所述CD₈白血细胞种群的子种群的部件;以及用于把所述微球与所述样品混合，结合到所述CD₈子种群上，以移位所述CD₈子种群的至少一个检测特性的部件。

57、一种从具有至少一个遮蔽细胞种群的一细胞样品的至少一部分中分析至少一个感兴趣的细胞群的方法，其特征在于：

用至少一个光偏振参量检测和计数第一样品部分;

从第二样品部分除去遮蔽细胞种群;

用至少一个光偏振参量检测和计数所述第二样品部分;以及

比较所述两个计数，得到所述感兴趣的被遮蔽的细胞群所占百分率。

58、如权利要求57所述的方法，其特征在于：提供上面结合有一试剂的微球，该试剂对所述遮蔽细胞种群上一特定分子是特异的;把所述微球与所述第二样品部分混合，结合到所述遮蔽细胞种群上，以移位所述遮蔽细胞种群的至少一个检测特性。

59、如权利要求58所述的方法，其特征在于：提供形成所述试剂的单克隆抗体，和在所述遮蔽细胞种群上形成所述特定分子的抗原。

60、如权利要求57所述的方法，其特征在于：提供上面结合有一试剂的微球，该试剂对在所述遮蔽细胞种群上一特定分子是特异的，把所述微球与所述第二样品部分混合，结合到所述遮蔽细胞种群上，以及从所述样品中除去上面结合有所述遮蔽细胞的微球。

61、如权利要求60所述的方法，其特征在于：提供形成所述试剂的单克隆抗体，以及在所述遮蔽细胞种群上形成所述特定分子的抗原。

62、如权利要求57所述的方法，其特征在于：从带有所述遮蔽细胞种群，-WBC种群，和所述被遮蔽感兴趣的细胞群，由所述WBC种群遮蔽的一种群的一全血样品中形成所述的细胞样品。

63、如权利要求62所述的方法，其特征在于：提供上面结合有一试剂的微球，该试剂对所述遮蔽细胞种群上的一特定分子是特异的;把所述微球与所述第二样品部分混合，结合到所述遮蔽细胞种群上，移位所述遮蔽细胞种群的至少一个检测特性。

64、如权利要求63所述的方法，其特征在于：提供形成所述试剂的单克隆抗体，以及在所述遮蔽细胞种群上形成所述特定分子的抗原。

65、如权利要求64所述的方法，其特征在于：提供上面结合有一嗜中性细胞特异单克隆抗体的微球，并把所述微球与所述第二样品部分混合，结合到所述嗜中性细胞种群上，移位所述嗜中性细胞种群的至少一个检测特性，所述感兴趣的选择细胞群是未成熟的白血细胞种群。

66、如权利要求62所述的方法，其特征在于：提供上面结合有一试剂的微球，该试剂对所述遮蔽细胞种群上一特定分子是特异的，并把所述微球与所述第二样品部分混合，结合到所述遮蔽细胞种群上，以及从所述样品除去带有结合到上面的所述遮蔽细胞种群的所述微球。

67、如权利要求66所述的方法，其特征在于：提供形成所述试剂的单克隆抗体，和在所述遮蔽细胞种群上形成所述特定分子的抗原。

68、如权利要求67所述的方法，其特征在于：提供上面结合有一嗜中性细胞特异的单克隆抗体的微球，并把所述微球与所述第二样品部分混合，结合到所述嗜中性细胞种群上，以及从所述样品部分除去上面结合有所述嗜中性细胞种群的所述微球。

69、如权利要求68所述的方法，其特征在于：提供磁性微球和一磁场，以及在所述磁场中当吸引所述磁性微球时，通过除去所述第二样品部分的剩余部分，从所述第二样品部分除去所述嗜中性细胞种群。

70、从含有至少一个遮蔽细胞种群的一细胞样品的至少一部分中分析至少一个感兴趣的细胞群的装置，其特征在于：

用至少一个光偏振参量检测和计数第一样品部分的部件（204，260，294）;

用于从第二样品部分除去遮蔽细胞种群的部件（210，268，300）;

用至少一个光偏振参量检测和计数所述第二样品部分的部件;以及

用于比较所述两个计数，从而得到所述感兴趣的被遮蔽细胞种群的所占百分率的部件。

71、如权利要求70所述的装置，其特征在于：用于提供上面结合有一试剂的微球，该试剂对所述遮蔽细胞种群上的一特定分子是特异的部件（196，256，286）;用于把所述微球与所述第二样品部分混合，结合到所述遮蔽细胞种群上，以移位所述遮蔽细胞种群的至少一个检测特性的部件。

72、如权利要求71所述的装置，其特征在于：用于提供形成所述试剂的单克隆抗体和在所述遮蔽细胞种群上形成所述特定分子的抗原的部件。

73、如权利要求70所述的装置，其特征在于：用于提供上面结合有一试剂的微球，该试剂对所述遮蔽细胞种群上一特定分子是特异的部件;用于把所述微球与所述第二样品部分混合，结合到所述遮蔽细胞种群上的部件;以及用于从所述样品中除去结合有所述遮蔽细胞种群的所述微球的部件。

74、如权利要求73所述的装置，其特征在于：用于提供形成所述试剂的单克隆抗体和在所述遮蔽细胞种群上形成所述特定分子的抗原的部件。

75、如权利要求70所述的装置，其特征在于：用于从含有所述遮蔽细胞种群，-WBC种群，和所述被遮蔽的感兴趣的细胞群，一个被所述WBC种群遮蔽的种群的部件。

76、如权利要求75所述的装置，其特征在于：用于提供上面结合有一试剂的微球，该试剂对所述遮蔽细胞种群上一特定分子是特异的部件;和用于把所述微球与所述第二样品部分混合，结合到所述遮蔽细胞种群上，以移位所述遮蔽细胞种群的至少一个检测特性的部件。

77、如权利要求76所述的装置，其特征在于：用于提供形成所述试剂的单克隆抗体和在所述遮蔽细胞种群上形成所述特定分子的抗原的部件。

78、如权利要求77所述的装置，其特征在于：用于提供上面结合有一嗜中性细胞特异的单克隆抗体的微球的部件;以及用于把所述微球与所述第二样品部分混合，结合到所述嗜中性细胞种群上，以移位所述嗜中性细胞种群的至少一个检测特性，所述感兴趣的选择的细胞群是未成熟的白血细胞种群的部件。

79、如权利要求75所述的装置，其特征在于：用于提供上面结合有一试剂的微球，该试剂对在所述遮蔽细胞种群上一特定分子是特异的部件;和用于把所述微球与所述第二样品部分混合，结合到所述遮蔽细胞种群上的部件;以及用于从所述样品中除去结合有所述遮蔽细胞种群的所述微球的部件。

80、如权利要求79所述的装置，其特征在于：用于提供形成所述试剂的单克隆抗体和在所述遮蔽细胞种群上形成所述特定分子的抗原的部件。

81、如权利要求80所述的装置，其特征在于：用于提供上面结合有嗜中性细胞特异的单克隆抗体的微球的部件，和把所述微球与所述第二样品部分混合，结合到所述嗜中性细胞种群上的部件;以及用于从所述样品部分中除去上面结合有所述嗜中性细胞种群的所述微球的部件。

82、如权利要求81所述的装置，其特征在于：用于提供磁性微球和一磁场的部件，和当所述磁性微球吸引在所述的磁场中时，通过除去所述第二样品部分的剩余部分从所述第二样品部分除去所述嗜中性细胞种群的部件。

Images