CN106727313A - 一种载药聚合物纳米胶束及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种载药聚合物纳米胶束及其制备方法和应用，所述载药聚合物纳米胶束以含有聚β‑胺酯的两亲性聚合物作为载体，所述载体与促凋亡多肽共价连接，形成所述载药聚合物纳米胶束。本发明将pH敏感的含有聚β‑胺酯的两亲性聚合物与靶向性促凋亡多肽CGKRK‑D(KLAKLAK)2共轭连接，使其自组装成纳米胶束，胶束内核为聚β‑胺酯，胶束外壳为亲水性基团，不仅能够延长纳米胶束在血液中的循环时间，还可以使得靶向性促凋亡多肽能够穿透真核细胞，进入真核细胞细胞核，对细胞本身不会产生毒性。

Description

一种载药聚合物纳米胶束及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及医药技术领域，特别涉及载药纳米材料技术领域，具体涉及一种载药聚合物纳米胶束及其制备方法和应用。
背景技术
新生血管网络的形成是肿瘤增殖和转移扩散的重要因素。从已经存在的血管中产生新血管的过程叫做血管新生。因此，靶向肿瘤血管的血管新生被认为是治疗肿瘤的里程碑。肿瘤血管的细胞表面和细胞外基质会表达各种特异性蛋白标志物，这些蛋白标志物在正常细胞中不会表达或者表达水平比肿瘤中低很多。因此，血管新生的肿瘤细胞表面的受体容易锚定特定的靶向分子，如抗体、生物分子、DNA、核酸适配体和多肽等。具有靶向能力的配体能够输送药物或者大分子到达肿瘤血管或肿瘤细胞，从而降低其对正常细胞或组织的毒副作用。不过，与其他化疗治疗一样，抗血管新生的治疗不能产生持久的疗效来使肿瘤大大缩小甚至消失。为了解决这一问题，研究人员设计并开发了具有双重靶向作用的多肽。
CGKRK(Cys-Gly-Lys-Arg-Lys)多肽与肿瘤血管和细胞的血管新生的内表面具有高度的结合能力和特异性。线粒体蛋白p32被认为是CGKRK多肽的受体，它在多种肿瘤细胞表面都有较高的表达水平。促凋亡D-氨基酸多肽KLAKLAKKLAKLAK(又名D(KLAKLAK)2)是一种阳离子型α螺旋两亲性的多肽，它能够通过扰乱线粒体膜来诱导细胞凋亡。这种肽能够穿透细菌的细胞壁，因此通常用于杀菌；但是它对真核细胞的细胞质膜的穿透能力有限，因此对真核细胞的毒性较小。
为了加强D(KLAKLAK)2对肿瘤细胞的杀伤力，研究者将特异性靶向肿瘤的多肽CGKRK与D(KLAKLAK)2连接起来。在连接起来的多肽CGKRK-D(KLAKLAK)2中，CGKRK部分靶向肿瘤血管的血管新生；D(KLAKLAK)2部分作用于线粒体膜，通过凋亡途径来杀死肿瘤细胞。但是，CGKRK-D(KLAKLAK)2虽然具有肿瘤特异性靶向作用，它仍然呈现出明显的系统毒性。由于纳米载体输送能够明显降低系统毒性，因此该多肽药物被化学连接到多种纳米载体上。
近年来，聚合物胶束作为一种药物输送载体在肿瘤治疗研究中引起了很大重视。聚合物胶束载药范围广、结构稳定、表面易于修饰，具有优良的组织渗透性,体内滞留时间长,能使药物有效地到达靶点。而且聚合物胶束由于单体选择丰富，能够根据需要进行定制。近几年的研究中，pH敏感的聚合物胶束研究得较为广泛。肿瘤细胞与正常细胞和组织(pH 7.4)相比，通常具有较低的pH(6.5-7.2)。在细胞内，核小体和溶酶体也有较低的pH(5.0-6.0)。这些酸性条件使得pH敏感的聚合物胶束成为肿瘤治疗的理想载体。
2000年，Robert Langer团队首次合成聚β-胺酯作(PBAE)为递送基因的纳米载体。聚β-胺酯含有对pH敏感的叔胺，其主链上含有的酯键也能够在生理条件下降解，因此聚β-胺酯是一种生物可降解的、pH敏感的聚合物，它被应用于药物递送、药物和基因的共同递送。到目前为止，还没有研究者将CGKRK-D(KLAKLAK)2用pH敏感的聚β-胺酯来递送。
因此，在本领域中期望能够得到一种可递送CGKRK-D(KLAKLAK)2进入真核细胞的细胞核的载药纳米胶束。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种载药聚合物纳米胶束及其制备方法和应用，所述载药聚合物纳米胶束对pH敏感，可以共载促凋亡多肽和抗肿瘤药物，且对血管新生具有靶向作用。
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
一方面，本发明提供一种载药聚合物纳米胶束，以含有聚β-胺酯的两亲性聚合物作为载体，所述载体与促凋亡多肽共价连接，形成所述载药聚合物纳米胶束。
本发明中，针对纳米药物存在难以从溶酶体逃逸的问题，将pH敏感的含有聚β-胺酯的两亲性聚合物与靶向性促凋亡多肽CGKRK-D(KLAKLAK)2共轭连接，使其自组装成纳米胶束，胶束内核为聚β-胺酯，胶束外壳为亲水性基团，不仅能够延长纳米胶束在血液中的循环时间，还可以使得靶向性促凋亡多肽能够穿透真核细胞，进入真核细胞细胞核，对细胞本身不会产生毒性。
优选地，所述含有聚β-胺酯的两亲性聚合物为聚β-胺酯-聚乙二醇、聚β-胺酯-聚谷氨酸、聚β-胺酯-聚赖氨酸、聚β-胺酯-聚肌氨酸、聚β-胺酯-聚丙烯酸、聚β-胺酯-透明质酸或聚β-胺酯-磷酰胆碱中的任意一种或至少两种的组合，优选为聚β-胺酯-聚乙二醇。
优选地，所述促凋亡多肽为靶向性促凋亡多肽，所述靶向性促凋亡多肽的氨基酸序列为CGKRK-D(KLAKLAK)2。
根据本发明，所述载体与促凋亡多肽的质量比为1:(0.1-10)，例如可以是1:0.1、1:0.2、1:0.3、1:0.4、1:0.5、1:0.6、1:0.7、1:0.8、1:0.9、1:1、1:1.5、1:2、1:2.5、1:3、1:3.5、1:4、1:4.5、1:5、1:5.5、1:6、1:6.5、1:7、1:7.5、1:8、1:8.5、1:9、1:9.5或1:10，优选为1:(0.3-8)，进一步优选为1:(0.5-5)，以及上述数值之间的具体点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。
发明人发现，本发明载体与促凋亡多肽限定在这样的质量比下，可以使得载药聚合物纳米胶束取得较好的包覆率和载药量，得到的载药聚合物纳米胶束的靶向效果最好。
优选地，所述载药聚合物纳米胶束的粒径为3-600nm，例如可以是3nm、4nm、5nm、6nm、8nm、10nm、15nm、20nm、25nm、30nm、35nm、40nm、45nm、50nm、55nm、60nm、65nm、70nm、75nm、80nm、85nm、90nm、95nm、100nm、120nm、150nm、180nm、200nm、220nm、250nm、280nm、300nm、320nm、350nm、380nm、400nm、450nm、500nm、550nm、580nm或600nm，优选为5-400nm，进一步优选为10-200nm，以及上述数值之间的具体点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。
根据本发明，为了加强治疗效果，所述载药聚合物纳米胶束还包裹抗肿瘤药物，具体地，将载体与促凋亡多肽共价连接后自组装成纳米胶束，将抗肿瘤药物包裹在疏水核心中，形成一个稳定的纳米球结构，稳定性好，所述载药聚合物纳米胶束能够靶向肿瘤血管，并通过受体调节来实现细胞内吞，增加负载药物在细胞内的有效浓度。
优选地，所述抗肿瘤药物为紫杉醇、多烯紫杉醇、喜树碱、索菲拉尼、阿霉素或贝伐单抗中的任意一种或至少两种的组合，优选为多烯紫杉醇。
根据本发明，所述载药聚合物纳米胶束为以聚β-胺酯-聚乙二醇为载体，所述载体与靶向性促凋亡多肽CGKRK-D(KLAKLAK)2共价连接，包裹多烯紫杉醇，所述载药聚合物纳米胶束是一个致密的纳米球结构，进入细胞后，在溶酶体的酸性pH下，聚合物胶束解离，载药聚合物纳米胶束从一个致密的纳米球结构变为一个松散的结构，同时释放出载带的靶向性促凋亡多肽CGKRK-D(KLAKLAK)2和多烯紫杉醇，自由的多肽和多烯紫杉醇能够从溶酶体中逃逸出来，两者同时一起释放进入细胞质，起到了一种叠加的杀伤作用；在CGKRK的靶向作用下，D(KLAKLAK)2能够到达线粒体位置并破坏线粒体膜，诱导细胞凋亡，多烯紫杉醇则进入细胞核作用于微管蛋白，两者协同作用，加强了对肿瘤细胞的效果。
优选地，所述包裹抗肿瘤药物的载药聚合物纳米胶束的粒径为5-800nm，例如可以是5nm、6nm、8nm、10nm、15nm、20nm、25nm、30nm、35nm、40nm、45nm、50nm、55nm、60nm、65nm、70nm、75nm、80nm、85nm、90nm、95nm、100nm、120nm、150nm、180nm、200nm、220nm、250nm、280nm、300nm、320nm、350nm、380nm、400nm、450nm、500nm、550nm、600nm、650nm、700nm、750nm或800nm，优选为10-500nm，进一步优选为10-200nm，以及上述数值之间的具体点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。
优选地，所述包裹抗肿瘤药物的载药聚合物纳米胶束中促凋亡多肽共价连接的聚β-胺酯-聚乙二醇与抗肿瘤药物的质量比为(1-50):(0.1-5)，例如可以是1:0.1、1:0.2、1:0.5、1:0.8、1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、2:0.1、2:0.5、2:1、2:2、2:5、3:1、3:5、5:1、5:5、8:0.5、8:1、8:5、10:0.5、10:1、10:5、15:0.5、15:1、15:5、20:0.5、20:1、20:5、25:0.5、25:1、25:5、30:0.5、30:1、30:5、35:0.5、35:1、35:5、40:0.5、40:1、40:5、45:0.5、45:1、45:5、48:0.5、48:1、48:5、50:0.5、50:1或50:5，优选为(1-50):1，以及上述数值之间的具体点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。
第二方面，本发明提供如第一方面所述的载药聚合物纳米胶束的制备方法，包括以下步骤：
将含有聚β-胺酯的两亲性聚合物和促凋亡多肽溶于有机溶剂中，在惰性气体的保护下避光搅拌，而后除去有机溶剂，干燥后得到载药聚合物纳米胶束；
优选地，所述方法还包括如下步骤：将制备得到的载药聚合物纳米胶束与抗肿瘤药物溶解于有机溶剂中，并将上述有机溶剂加入到缓冲溶液中搅拌，除去有机溶剂，得到所述包裹抗肿瘤药物的载药聚合物纳米胶束。
作为优选技术方案，所述载药聚合物纳米胶束的制备方法，包括以下步骤：
(1)将含有聚β-胺酯的两亲性聚合物和促凋亡多肽溶于有机溶剂中，在惰性气体的保护下避光搅拌，而后除去有机溶剂，干燥后得到载药聚合物纳米胶束；
(2)将步骤(1)得到的载药聚合物纳米胶束与抗肿瘤药物溶解于有机溶剂中，并将上述有机溶剂加入到缓冲溶液中搅拌，除去有机溶剂，得到所述包裹抗肿瘤药物的载药聚合物纳米胶束。
优选地，所述有机溶剂为DMSO、丙酮、二氯甲烷、三氯甲烷或四氢呋喃中的任意一种或至少两种的组合，优选DMSO。
优选地，所述除去有机溶剂采用透析来实现。
优选地，所述透析使用的透析袋的截留分子量为1000-3000，例如可以是1000、1100、1200、1300、1500、1600、1800、2000、2100、2300、2500、2600、2800、2900或3000，优选为2000，以及上述数值之间的具体点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。
优选地，步骤(1)所述载体与促凋亡多肽的质量比为1:(0.1-10)，例如可以1:0.1、1:0.2、1:0.3、1:0.4、1:0.5、1:0.6、1:0.8、1:0.9、1:1、1:1.5、1:2、1:2.5、1:3、1:3.5、1:4、1:4.5、1:5、1:5.5、1:6、1:6.5、1:7、1:7.5、1:8、1:8.5、1:9、1:9.5或1:10，优选为1:(0.3-8)，进一步优选为1:(0.5-5)，以及上述数值之间的具体点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。
优选地，步骤(1)所述搅拌的温度为30-60℃，例如可以是30℃、31℃、32℃、33℃、35℃、36℃、8℃、40℃、41℃、43℃、45℃、48℃、50℃、51℃、53℃、55℃、58℃或60℃，优选为40-55℃，进一步优选为50℃，以及上述数值之间的具体点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。
优选地，步骤(1)所述搅拌的时间为3-10天，例如可以是3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天或10天，优选为4-6天，进一步优选为5天，以及上述数值之间的具体点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。
优选地，步骤(1)所述干燥的方式为冷冻干燥。
优选地，步骤(2)所述有机溶剂与缓冲溶液的体积比为1:(1-5)，例如可以是优选为1:(1-3)，以及上述数值之间的具体点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。
优选地，步骤(2)所述缓冲溶液为磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液或Tris-HCl，优选为磷酸盐缓冲液；
根据本发明，所述载药聚合物纳米胶束在pH7.4的缓冲液中稳定性良好，直径为10-200nm，具备丁达尔现象；在pH5.0的醋酸盐缓冲液中解离，不再具备丁达尔现象；步骤(2)所述缓冲溶液的pH为6.5-8.5，例如可以是6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8、8.1、8.2、8.3、8.4或8.5，优选为7-8，进一步优选为7.4，以及上述数值之间的具体点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。
优选地，步骤(2)所述搅拌的时间为1-20h，例如可以1h、2h、3h、4h、5h、6h、7h、8h、9h、10h、11h、12h、13h、14h、15h、16h、17h、18h、19h或20h，优选为1-12h，以及上述数值之间的具体点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。
第三方面，本发明提供如第一方面所述的载药聚合物纳米胶束在制备靶向肿瘤药物中的应用。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明将pH敏感的含有聚β-胺酯的两亲性聚合物与靶向性促凋亡多肽CGKRK-D(KLAKLAK)2共轭连接，使其自组装成纳米胶束，胶束内核为聚β-胺酯，胶束外壳为亲水性基团，不仅能够延长纳米胶束在血液中的循环时间，还可以使得靶向性促凋亡多肽能够穿透真核细胞，进入真核细胞细胞核，对细胞本身不会产生毒性；
(2)本发明将载体与促凋亡多肽共价连接后自组装成纳米胶束，将抗肿瘤药物包裹在疏水核心中，形成一个稳定致密的纳米球结构，稳定性好，两者同时一起释放进入细胞质，起到了一种叠加的杀伤作用，在CGKRK的靶向作用下，D(KLAKLAK)2能够到达线粒体位置并破坏线粒体膜，诱导细胞凋亡，多烯紫杉醇则进入细胞核作用于微管蛋白，两者协同作用，加强了对肿瘤细胞的效果。
附图说明
图1为本发明载药聚合物胶束的动态光散射检测结果；
图2为本发明载药聚合物胶束的TEM图像；
图3为本发明载药聚合物胶束的核磁图谱，其中，图3(A)为PBAE-PEG的核磁图，图3(B)为CGKRK-D(KLAKLAK)2修饰的PBAE-PEG的核磁图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
实施例1靶向性促凋亡多肽CGKRK-D(KLAKLAK)2修饰的pH敏感的聚β-胺酯-聚乙二醇的合成
称取900mg丁二醇二丙烯酸酯，300mg 5-氨基-1-戊醇和700mg mPEG-NH2溶于DMSO中，在惰性气氛保护下，50℃避光搅拌一周。待体系冷却后，用大量的冷乙醚洗涤三次以除去没反应完全的单体，之后真空干燥，即得到聚β-胺酯-聚乙二醇。
称取100mg聚β-胺酯-聚乙二醇和120mg靶向性促凋亡多肽CGKRK-D(KLAKLAK)2，溶于2mL DMSO中，在惰性气氛保护下，50℃避光搅拌5d，之后用截留分子量为2000的透析袋透析除去DMSO，并冻干以得到干燥的产物，即CGKRK-D(KLAKLAK)2修饰的聚β-胺酯-聚乙二醇。
实施例2靶向性促凋亡多肽CGKRK-D(KLAKLAK)2修饰的pH敏感的聚β-胺酯-聚乙二醇的合成
称取800mg丁二醇二丙烯酸酯，400mg 5-氨基-1-戊醇和600mg mPEG-NH2溶于2mLDMSO中，在惰性气氛保护下、50℃避光搅拌一周。待体系冷却后，用大量的冷乙醚洗涤三次以除去没反应完全的单体，之后真空干燥，即得到聚β-胺酯-聚乙二醇。
称取100mg聚β-胺酯-聚乙二醇和100mg靶向性促凋亡多肽CGKRK-D(KLAKLAK)2，溶于2mL DMSO中，在惰性气氛保护下、50℃避光搅拌5d，之后用截留分子量为2000的透析袋透析除去DMSO，并冻干以得到干燥的产物，即CGKRK-D(KLAKLAK)2修饰的聚β-胺酯-聚乙二醇。
实施例3靶向性促凋亡多肽CGKRK-D(KLAKLAK)2修饰的pH敏感的聚β-胺酯-聚乙二醇的合成
称取100mg实施例2制备得到的聚β-胺酯-聚乙二醇和50mg靶向性促凋亡多肽CGKRK-D(KLAKLAK)2，溶于2mL DMSO中，在惰性气氛保护下、30℃避光搅拌10d，之后用截留分子量为3000的透析袋透析除去DMSO，并冻干以得到干燥的产物，即CGKRK-D(KLAKLAK)2修饰的聚β-胺酯-聚乙二醇。
实施例4靶向性促凋亡多肽CGKRK-D(KLAKLAK)2修饰的pH敏感的聚β-胺酯-聚乙二醇的合成
称取100mg实施例2制备得到的聚β-胺酯-聚乙二醇和1000mg靶向性促凋亡多肽CGKRK-D(KLAKLAK)2，溶于2mL DMSO中，在惰性气氛保护下、60℃避光搅拌3d，之后用截留分子量为1000的透析袋透析除去DMSO，并冻干以得到干燥的产物，即CGKRK-D(KLAKLAK)2修饰的聚β-胺酯-聚乙二醇。
实施例5pH敏感的促凋亡多肽/多烯紫杉醇共载的血管新生靶向聚合物胶束的制备
称取6mg CGKRK-D(KLAKLAK)2修饰的聚β-胺酯-聚乙二醇和0.3mg多烯紫杉醇，混匀在1mL DMSO中，之后将该有机相逐滴加入到缓慢搅拌的2mL磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中，让聚合物自组装成胶束。最后，在磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中透析除去有机溶剂，得到pH敏感的促凋亡多肽/多烯紫杉醇共载的血管新生靶向聚合物胶束，动态光散射检测结果如图1所示，可以看出，平均粒径在110nm。
实施例6pH敏感的促凋亡多肽/多烯紫杉醇共载的血管新生靶向聚合物胶束的制备
称取6mg CGKRK-D(KLAKLAK)2修饰的聚β-胺酯-聚乙二醇和0.4mg多烯紫杉醇，混匀在1mL DMSO中，之后将该有机相逐滴加入到缓慢搅拌的2mL磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中，让聚合物自组装成胶束。最后，在磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中透析除去有机溶剂，得到pH敏感的促凋亡多肽/多烯紫杉醇共载的血管新生靶向聚合物胶束。
实施例7pH敏感的促凋亡多肽/多烯紫杉醇共载的血管新生靶向聚合物胶束的制备
称取6mg CGKRK-D(KLAKLAK)2修饰的聚β-胺酯-聚乙二醇和6mg多烯紫杉醇，混匀在1mL DMSO中，之后将该有机相逐滴加入到缓慢搅拌的2mL磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中，让聚合物自组装成胶束。最后，在磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中透析除去有机溶剂，得到pH敏感的促凋亡多肽/多烯紫杉醇共载的血管新生靶向聚合物胶束。
实施例8pH敏感的促凋亡多肽/多烯紫杉醇共载的血管新生靶向聚合物胶束的制备
称取10mg CGKRK-D(KLAKLAK)2修饰的聚β-胺酯-聚乙二醇和0.2mg多烯紫杉醇，混匀在1mL DMSO中，之后将该有机相逐滴加入到缓慢搅拌的2mL磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中，让聚合物自组装成胶束。最后，在磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中透析除去有机溶剂，得到pH敏感的促凋亡多肽/多烯紫杉醇共载的血管新生靶向聚合物胶束。
用英国马尔文仪器公司的Zetasizer Nano ZS激光动态光散射仪检测pH敏感的促凋亡多肽/多烯紫杉醇共载的血管新生靶向聚合物胶束的粒径，其平均粒径为117nm，采用TEM来验证载药聚合物胶束，结果如图2所示，平均粒径在117nm。
采用核磁来验证载药聚合物胶束，结果如图3(A)-图3(B)所示，h,g,i峰的消失证明CGKRK-D(KLAKLAK)2成功结合到PBAE-PEG的末端。
实施例9细胞毒性检测
将MCF-7(鼠乳腺癌)细胞以每孔7000个细胞的密度种植在96孔板中，生长24h之后，分布加入自由药物多烯紫杉醇或者促凋亡多肽/多烯紫杉醇共载的血管新生靶向聚合物胶束，以没有加药处理的细胞作为对照，共孵育24h之后，将旧培养基去掉，加入MTT溶液再孵育4h，之后加入100μL DMSO，检测570nm的紫外吸收，并计算细胞存活率，在相同多烯紫杉醇浓度5μg/mL下，自由多烯紫杉醇处理的细胞存活率为55％，而促凋亡多肽/多烯紫杉醇共载的血管新生靶向聚合物胶束处理的细胞存活率为25％，表明促凋亡多肽/多烯紫杉醇共载的血管新生靶向聚合物胶束能够明显增强多烯紫杉醇的抗肿瘤活性。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的载药聚合物纳米胶束及其制备方法和应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明所选用原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims (10)

1.一种载药聚合物纳米胶束，其特征在于，以含有聚β-胺酯的两亲性聚合物作为载体，所述载体与促凋亡多肽共价连接，形成所述载药聚合物纳米胶束。
2.根据权利要求1所述的载药聚合物纳米胶束，其特征在于，所述含有聚β-胺酯的两亲性聚合物为聚β-胺酯-聚乙二醇、聚β-胺酯-聚谷氨酸、聚β-胺酯-聚赖氨酸、聚β-胺酯-聚肌氨酸、聚β-胺酯-聚丙烯酸、聚β-胺酯-透明质酸或聚β-胺酯-磷酰胆碱中的任意一种或至少两种的组合，优选为聚β-胺酯-聚乙二醇；
优选地，所述促凋亡多肽为靶向性促凋亡多肽；
优选地，所述促凋亡多肽的氨基酸序列为CGKRK-D(KLAKLAK)2。
3.根据权利要求1或2所述的载药聚合物纳米胶束，其特征在于，所述载体与促凋亡多肽的质量比为1:(0.5-10)，优选为1:(0.8-8)，进一步优选为1:(1-5)；
优选地，所述载药聚合物纳米胶束的粒径为3-600nm，优选为5-400nm，进一步优选为10-200nm。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的载药聚合物纳米胶束，其特征在于，所述载药聚合物纳米胶束还包裹抗肿瘤药物；
优选地，所述抗肿瘤药物为紫杉醇、多烯紫杉醇、喜树碱、索菲拉尼、阿霉素或贝伐单抗中的任意一种或至少两种的组合，优选为多烯紫杉醇。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的载药聚合物纳米胶束，其特征在于，所述包裹抗肿瘤药物的载药聚合物纳米胶束的粒径为5-800nm，优选为10-500nm，进一步优选为10-200nm；
优选地，所述包裹抗肿瘤药物的载药聚合物纳米胶束中促凋亡多肽共价连接的聚β-胺酯-聚乙二醇与抗肿瘤药物的质量比为(1-50):(0.1-5)，优选为(1-50):1。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的载药聚合物纳米胶束的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将含有聚β-胺酯的两亲性聚合物和促凋亡多肽溶于有机溶剂中，在惰性气体的保护下避光搅拌，而后除去有机溶剂，干燥后得到载药聚合物纳米胶束；
优选地，所述方法还包括如下步骤：将制备得到的载药聚合物纳米胶束与抗肿瘤药物溶解于有机溶剂中，并将上述有机溶剂加入到缓冲溶液中搅拌，除去有机溶剂，得到所述包裹抗肿瘤药物的载药聚合物纳米胶束。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为DMSO、丙酮、二氯甲烷、三氯甲烷或四氢呋喃中的任意一种或至少两种的组合，优选DMSO；
优选地，所述除去有机溶剂采用透析来实现；
优选地，所述透析使用的透析袋的截留分子量为1000-3000，优选为2000。
8.根据权利要求6或7所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述载体与促凋亡多肽的质量比为1:(0.1-10)，优选为1:(0.3-8)，进一步优选为1:(0.5-5)；
优选地，步骤(1)所述搅拌的温度为30-60℃，优选为40-55℃，进一步优选为50℃；
优选地，步骤(1)所述搅拌的时间为3-10天，优选为4-6天，进一步优选为5天；
优选地，步骤(1)所述干燥的方式为冷冻干燥。
9.根据权利要求6-8中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述促凋亡多肽共价连接的聚β-胺酯-聚乙二醇与抗肿瘤药物的质量比为(1-50):(0.1-5)，优选为(1-50):1；
优选地，步骤(2)所述有机溶剂与缓冲溶液的体积比为1:(1-5)，优选为1:(1-3)；
优选地，步骤(2)所述缓冲溶液为磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液或Tris-HCl，优选为磷酸盐缓冲液；
优选地，步骤(2)所述缓冲溶液的pH为6.5-8.5，优选为7-8，进一步优选为7.4；
优选地，步骤(2)所述搅拌的时间为1-20h，优选为1-12h。
10.根据权利要求1-5中任一项所述的载药聚合物纳米胶束在制备靶向肿瘤药物中的应用。
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