CN106680474A - 一种家用餐具大肠杆菌快速检测仪 - Google Patents

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Abstract

本发明属于生物检测技术领域，具体公开了一种家用餐具大肠杆菌快速检测仪，包括检测仪主体；所述检测仪主体内设置有光源模块、光学感测器和分析处理模块，所述光源模块的下方设置有光源，所述光源模块内还设置有试剂孔，该试剂孔与用于检测大肠杆菌的试剂盒相匹配；光学感测器与分析处理模块电性连接，所述分析处理模块分析光学感测器感测到的光学信号。本发明能方便快捷的检测出家用餐具是否被大肠杆菌污染，本发明的家用餐具大肠杆菌快速检测仪不需要配套其他大型仪器使用，即可以脱离实验室，基层实验条件比较差的单位也可以使用。配套使用的试剂高效低毒，也可以在家庭使用，有利于人们了解家庭环境的卫生状况，保障家人的身体健康。

Description

一种家用餐具大肠杆菌快速检测仪
技术领域
本发明涉及生物检测技术领域，尤其涉及一种家用餐具大肠杆菌快速检测仪。
背景技术
大肠杆菌(E.coli)为埃希氏菌属(Escherichia)代表菌。一般不致病，是一种生活在人类或者动物消化道的细菌。它有很多种类，大多数都不致病，但是在一定的条件下可引起肠道外感染，例如血清型菌株的致病性强，引起腹泻，称为致病性大肠杆菌。
然而，目前我国很多农村乡镇的卫生条件非常差，仍然存在被大肠杆菌感染的潜在风险，情况不容乐观，其中致病性最强烈的是0157：H7型大肠杆菌，该菌会产生致命的毒素。因此，快速便捷的检测大肠杆菌对改善人们的身体健康状况意义重大。相关技术中所采用的检测试剂盒的操作过于繁杂且容易受到污染，不能及时地帮助这些地区居民远离由大肠杆菌引起的身体疾病的困扰。
发明内容
本发明旨在提供一种家用餐具大肠杆菌快速检测仪，以解决上述技术问题。
为了解决上述技术问题，本发明通过以下技术方案得以实现：
一种家用餐具大肠杆菌快速检测仪，包括检测仪主体，所述检测仪主体内设置有光源模块、光学感测器和分析处理模块，所述光源模块在其下方设置有光源，所述光源模块内还设置有试剂孔，所述试剂孔与用于检测大肠杆菌的试剂盒相匹配；光学感测器与分析处理模块电性连接，所述分析处理模块分析光学感测器感测到的光学信号。
相对于现有技术，本发明的有益效果：
本发明的上述实施例提供的一种家用餐具大肠杆菌快速检测仪，本发明能方便快捷的检测出家用餐具是否被大肠杆菌污染，简单实用。本发明的家用餐具大肠杆菌快速检测仪不需要配套其他大型仪器使用，即可以脱离实验室，基层实验条件比较差的单位也可以使用。配套使用的试剂高效低毒，也可以在家庭使用，有利于人们了解家庭环境的卫生状况，保障家人的身体健康。
附图说明
此处的附图被并入说明书中并构成本说明书的一部分，示出了符合本发明的实施例，并与说明书一起用于解释本发明的原理。
图1是本发明的结构示意图。
图2为3种植物组织基因组DNA琼脂糖凝胶电泳分析图。
图3为本发明试剂盒的离心管、吸附柱和注射器。
具体实施方式
结合以下实施例对本发明作进一步描述。
图1是根据一示例性实施例示出的一种家用餐具大肠杆菌快速检测仪，如图1所示，包括检测仪主体11，所述检测仪主体11内设置有光源模块12、光学感测器13和分析处理模块14，所述光源模块12在其下方设置有光源15，所述光源模块12内还设置有试剂孔，所述试剂孔与用于检测大肠杆菌如图3所示的试剂盒相匹配；光学感测器13与分析处理模块14电性连接，所述分析处理模块14分析光学感测器13感测到的光学信号。在本实施例中，光学感测器13和分析处理模块14可以使用现有技术中的相关模块。
如图3所示，试剂盒包括吸附柱1、离心管2和注射器3；所述离心管2的管口处设置有密封胶垫2-1；所述吸附柱的管口处设置有密封胶垫，所述吸附柱1的内部设置硅胶膜1-1形成硅胶膜柱.
在本实施例中，硅胶膜1-1为特殊硅基质吸附材料，可以特异性吸附DNA，排斥RNA和蛋白质，因此，在此实施例中，硅胶膜的填充厚度为0.5mm～2mm，作为优选地，硅胶膜的填充厚度为0.5mm或2.0mm。
所述注射器3内部的前端内置2个过滤层，分别为大孔径的海绵过滤层4和超小孔径的微孔滤膜层5，海绵过滤层4设置于注射器3的底部出口位置，所述微孔滤膜层5设置于射出口位置，所述注射器管口处外侧设置有密封胶垫；为了延长过滤层的使用寿命，在本实施例中，海绵过滤层4选用耐酸耐碱的材料制备；微孔滤膜层5选用孔径为0.8nm～1μm的耐酸耐碱的陶瓷膜。
其中，离心管2的体积为2mL，该离心管2在常见的离心管的基础上经过改良，其管口处设置有密封胶垫2-1，保证内置的吸附柱1可以与注射器3的连接是严格密封，这样才能产生足够的气压来进行过滤、清洗、洗脱等步骤，省却高速离心机、水浴锅和震荡仪等大型仪器。吸附柱1内置硅胶膜1-1，硅胶膜1-1为特殊硅基质吸附材料，可以特异性吸附DNA，排斥RNA和蛋白质。注射器3中前端内置2个过滤层，包括大孔径的海绵过滤层4和超小孔径的微孔滤膜5，它可以从原液中过滤掉固体的碎片和一些微生物菌体，从而避免了少量固体的混入而使硅胶膜1-1堵塞，同时防止其他微生物的基因组DNA的污染。
大肠杆菌DNA提取缓冲液瓶、洗液瓶、洗脱液瓶、贮存液瓶，由于大肠杆菌DNA提取缓冲液瓶、洗液瓶、洗脱液瓶和贮存液瓶都采用常见的50ml的塑料瓶作为存储容器，故不在此示出瓶体的具体结构。
所述大肠杆菌DNA提取缓冲液瓶中的大肠杆菌DNA提取缓冲液的主要成分包括裂解物质、表面活性剂、螯合剂和缓冲剂；所述大肠杆菌DNA提取缓冲液成分为5M异硫氰酸胍，10mM 2-巯基乙醇，50mM Tris，20mM EDTA，21.3mM聚乙二醇辛基苯基醚，pH 6.8；所述洗液瓶中的洗液包括洗液A和洗液B，所述洗液A成分为4M硫氰酸胍，50mM Tris，pH6.8；所述洗液B成分为10mM Tris，100mM KCl，pH 7.4；所述洗脱液瓶内的洗脱液包括洗脱液Ⅰ和洗脱液Ⅱ，所述洗脱液Ⅰ成分为10mM Tris-HCl，pH 7.8；1mM EDTA，pH 7.8；所述洗脱液Ⅱ为75％酒精，pH 8.0；所述贮存液成分为100mM Tris-HCl，10mM EDTA，20mM乙醇。
优选地，所述光源15为EL、CCFL或者LED。
优选地，所述光源15设置于光学模块12的前方。
在采用该检测仪的时候，将通过试剂盒提取到DNA溶液200μL置于试剂孔中并密封，通过光学感测器13和分析处理模块14分析，记录数值，与标准值对比即可快速检测出家用餐具中是否被大肠杆菌污染。
为了评价该试剂盒及其使用方法在不同植物品系和同一品系不同组织的适用性，对本发明的试剂盒进行横向评价和纵向评价。
1、DNA提取
利用上述的大肠杆菌DNA试剂盒使用方法，对水稻、油菜和大豆的幼嫩叶片进行基因组DNA提取，每个样品进行3次平行试验。用琼脂糖凝胶分析提取到3种植物组织的基因组，检测其DNA完整程度及提取产量，结果如附图2所示。
从附图2的琼脂糖凝胶分析结果显示：
琼脂糖凝胶分析结果显示：不同植物组织提取的DNA条带均显示单一条带，没有拖尾现象，且条带亮度较亮，说明本试剂盒提取DNA产量高，提取质量较好，满足现场快速检测需要。
2、纵向评价
取不同的植物组织，使用本发明的试剂盒提取DNA，评价所提取到的DNA质量和产量，进而评价本发明试剂盒质量。本发明的试剂盒提取所得的基因组DNA，使用微量核酸分析仪进行DNA质量评价，OD260/280范围在1.8～2.2之间表示DNA纯度较高，蛋白质和RNA污染较少，OD260/230范围在2.0～2.6之间表示有机溶剂污染较少，杂质较少。
表1-1本发明试剂盒提取3种不同植物组织基因组DNA对比
表1-2采用本试剂盒的硅胶膜柱与普通吸附柱制备的水稻DNA浓度比较
项目 硅胶膜柱 吸附柱
DNA浓度(ug/uL) 0.085±0.02 0.034±0.01
OD260/280 1.85±0.02 1.80±0.02
由表1-1和表1-2可知，本试剂盒提取DNA的OD260/280值均在1.8～2.2之间，OD260/230基本在2.0～2.6之间，表明本试剂盒提取的DNA质量较好，蛋白质、RNA或其他有机溶剂污染较少，满足现场快速检测需要，不同植物组织的DNA产量有差异，这可能与不同植物组织的性质有关。
3、横向评价
取相同的植物组织，使用本发明试剂盒和其他商业试剂盒，分别提取基因组DNA，评价所提取到的DNA质量，进而评价试剂盒质量。使用本发明的试剂盒和两种商业试剂盒(植物基因组DNA提取试剂盒，天根生化科技(北京)有限公司；Plant DNA IsolationReagent，TaKaRa)，对相同植物组织大白菜叶片进行DNA提取，并对提取得到的DNA质量进行评价
表2本发明试剂盒与两种商业试剂盒对比
由表2可知，使用本试剂盒与两种不同品牌的商业试剂盒，所提取的基因组DNA的OD260/280值和OD260/230值，显示大体一致的良好范围，表明本试剂盒大体上能达到一般商业试剂盒的水平，本发明的试剂盒提取产量稍微低于两种商业试剂盒，但对于监测部门的现场快速检测，DNA的量完全满足检测需要。
采用该家用餐具大肠杆菌快速检测仪能够及时准确的检测出餐具是否被大肠杆菌污染，结合大肠杆菌DNA试剂盒的使用，使得检测大肠杆菌污染的准确率提升，降低了上述地区由于不能及时检测大肠杆菌引起的疾病。配套使用的试剂高效低毒，也可以在家庭使用，有利于人们了解家庭环境的卫生状况，保障家人的身体健康。
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细地说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (4)

1.一种家用餐具大肠杆菌快速检测仪，其特征在于，包括检测仪主体(11)；所述检测仪主体(11)内设置有光源模块(12)、光学感测器(13)和分析处理模块(14)，所述光源模块(12)的下方设置有光源(15)，所述光源模块(12)内还设置有试剂孔，该试剂孔与用于检测大肠杆菌的试剂盒相匹配；光学感测器(13)与分析处理模块(14)电性连接，所述分析处理模块(14)分析光学感测器(12)感测到的光学信号。
2.根据权利要求1所述的一种家用餐具大肠杆菌快速检测仪，其特征在于，所述光源(15)为EL、CCFL或者LED。
3.根据权利要求2所述的一种家用餐具大肠杆菌快速检测仪，其特征在于，所述光源(15)设置于光学模块(12)的前方。
4.根据权利要求3所述的家用餐具大肠杆菌快速检测仪，其特征在于，所述试剂盒包括吸附柱、离心管和注射器，所述离心管的管口处设置有密封胶垫；所述吸附柱的内部设置硅胶膜形成硅胶膜柱，所述吸附柱的管口处设置有密封胶垫；所述注射器内部的前端内置2个过滤层，分别为大孔径的海绵过滤层和超小孔径的微孔滤膜层，所述注射器管口处外侧设置有密封胶垫。
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