CN106619186B - 一种保护超氧化物歧化酶活性的制剂及其制作方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种保护超氧化物歧化酶活性的制剂及其制作方法，所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂包括下述原料：SOD、透明质酸钠、卡波姆、丙三醇、三乙醇胺、咪唑烷基脲、海藻糖、去离子水；其制作方法为：将卡波姆用水进行浸泡，浸泡完毕后，向浸泡液中依次加入海藻糖、丙三醇并搅拌均匀，然后进行灭菌，得基液；将透明质酸钠加入SOD中，搅拌均匀过滤除菌得SOD透明质酸钠液，备用；在无菌的条件下，向基液中依次加入SOD透明质酸钠液、三乙醇胺和咪唑烷基脲，然后加入去离子水调节，混合搅拌均匀，密封进行乳化得所述的保护超氧化物歧化酶活性的制剂。本发明的有益效果为：本发明所述的制剂中各原料结合在一起能有效地保护SOD的活性，且制作成本较低。

Description

一种保护超氧化物歧化酶活性的制剂及其制作方法
技术领域
本发明涉及一种生物制品，具体涉及一种保护超氧化物歧化酶活性的制剂及其制作方法。
背景技术
超氧化物歧化酶别名肝蛋白，简称：SOD。SOD是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质(超氧阴离子自由基)。SOD最基本特征是具有生物活性，广泛存在于绝大部分需氧生物体内，主要功能是清除体内生成的过多超氧化性物质，具有重要的抗氧化酶的功能，是国内外科学界公认的，无争议的迄今为止发现的所有酵素类中唯一能歧化超氧阴离子自由基的一种生物活性酶，被称为自由基的克星，人类健康的“保护神”。
近年来，随着科技的发展，人们可以通过各种途径获得SOD，如从植物中提取，从动物血中提取和生物发酵素技术获得等。SOD被广泛的应用于医药、食品、饮料、化工及化妆品中。人们在应用时，为了保障它的活性，通常是采用冷冻干燥进行SOD活性保护的。但现有的冷冻干燥技术过于复杂、设备昂贵，增加了保护SOD活性的成本；而且在冻干干燥过程中损失大约10％SOD的活性，并且冻干时加入的添加剂，限制了SOD的应用，如在冻干时加入大量甘露醇等，就会限制SOD在化妆品中的应用，而且经过冻干的SOD的活力有所减弱。
发明内容
为了解决现有技术存在的上述问题，本发明提供了一种操作简单、成本低且能有效地保护SOD活性的制剂及其制作方法。
本发明所采用的技术方案为：
一种保护超氧化物歧化酶活性的制剂：包括下述重量份的原料，SOD300-500份、透明质酸钠1-4份、卡波姆2-6份、丙三醇100-300份、三乙醇胺10-50份、咪唑烷基脲1-3份、海藻糖5-15份、去离子水122-581份。
进一步地，所述的保护超氧化物歧化酶活性的制剂，包括下述重量份的原料，SOD400份、透明质酸钠3份、卡波姆4.5份、丙三醇200份、三乙醇胺25份、咪唑烷基脲2份、海藻糖10份、去离子水355.5份。
所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂的制作方法，包括以下步骤：
(1)将卡波姆用水进行浸泡，浸泡完毕后，向浸泡液中依次加入海藻糖、丙三醇并搅拌均匀，然后进行灭菌，得基液；因卡波姆为粉末状物质，经水浸泡后吸收水分会变成膏状；
(2)将透明质酸钠加入SOD中，并搅拌均匀，过滤除菌得SOD透明质酸钠液，备用；在过滤除菌后，一般需要对SOD的活性进行检测，检测采用GB/T5009.171-2003标准，邻苯三酚法，这样可以对SOD的活性有一个定量化，方便后面的调配；
(3)在无菌的条件下，向基液中依次加入SOD透明质酸钠液、三乙醇胺和咪唑烷基脲，然后加入去离子水调节，混合搅拌均匀，密封进行乳化得所述的保护超氧化物歧化酶活性的制剂。向基液中加入SOD透明质酸钠液之前，先将基液冷却到25-60℃，防止高温破坏SOD的活性，加入丙三醇是为了调节基液的粘稠度和增加溶媒的计量，方便对后加物质的溶解。三乙醇胺起到调节pH值的作用，因SOD的活性在pH值为7.2-8时较稳定，加入一定量的三乙醇胺可以调节制剂的pH值，卡波姆在加入三乙醇胺后即变成凝胶膏状，这样可以进一步确保SOD活性的稳定。
将各原料混合搅拌均匀后，需密封进行乳化，其乳化的过程即各原料反应及兼容的过程，此过程需在无菌的条件下进行，即此过程可以在无菌操作箱中进行操作。
进一步地，步骤(1)中，所述卡波姆与水的重量比为1:20-40；所述浸泡的时间为1-7天。因卡波姆为粉末状物质，经水浸泡后吸收水分会变成稀膏状；其浸泡时间为1-7天，在浸泡的过程中，若浸泡不完全卡波姆会结块影响其均匀性，为使卡伯姆能均匀地溶解在水中，在浸泡过程中可以进行搅拌。
进一步地，步骤(1)中，所述灭菌为湿热灭菌。湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，以高温高压水蒸气为介质，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，最终导致微生物的死亡，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高，是药物制剂生产过程中最常用的灭菌方法。
进一步地，所述灭菌的温度为115-125℃，所述灭菌的时间为25-30min。
进一步地，步骤(2)中，所述过滤除菌为使用滤菌器进行过滤除菌。常用的滤菌器有薄膜滤菌器、陶瓷滤菌器、石棉滤菌器、烧结玻璃滤菌器等；过滤除菌是用物理阻留的方法将液体或空气的细菌除去，以达到无菌目的。
进一步地，步骤(3)中，去离子水经灭菌后再加入。
进一步地，所述去离子水经湿热灭菌法进行灭菌；所述灭菌的温度为115-125℃，所述灭菌的时间为25-30min。
进一步地，步骤(3)中，密封乳化24-28h后得所述的保护超氧化物歧化酶活性的制剂。
超氧化物歧化酶Orgotein(Superoxide Dismutase,SOD)，别名肝蛋白、简称：SOD。SOD是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质(超氧阴离子自由基)。本发明所使用的SOD为从植物或动物血中提取，经发酵法获得的SOD液体原液。SOD生物酶只有在具有生物活性状态下，才具有生物酶的功能。即“一清、五抗、一提高”，一清：即清出过量的自由基；五抗即：抗氧化、抗辐射、抗衰老、抗疲劳、抗炎；一提高：即提高机体免疫力。
透明质酸钠为从鸡冠中提取的物质，也可通过乳酸球菌发酵制得，为白色或类白色颗粒或粉末，无臭味。将其用于化妆品中，能起到独特的保护皮肤作用，可保持皮肤滋润光滑，细腻柔嫩，富有弹性，具有防皱、抗皱、美容保健和恢复皮肤生理功能的作用。而透明质酸钠对SOD具有保鲜和保活的作用。
卡波姆为白色疏松状粉末，是以季戊四醇等与丙烯酸交联得到的丙烯酸交联树脂，是一类非常重要的流变调节剂，中和后的卡波是优秀的凝胶基质，有增稠、悬浮等重要用途，广泛应用于乳液、膏霜、凝胶中。
丙三醇是无色味甜澄明黏稠液体，具有保湿、保润的功能。
三乙醇胺无色至淡黄色透明粘稠液体，微有氨味，在化妆品中用作乳化剂、保湿剂、增湿剂、增稠剂、PH平衡剂，三乙醇胺是乳膏制剂中常用乳化剂，用三乙醇胺乳化的乳膏产品具有膏体细腻，膏体亮白的特点。
咪唑烷基脲为白色粉末，在化妆品中常常作防腐剂使用。
海藻糖是一种安全、可靠的天然糖类，海藻糖能有效地保护表皮细胞膜结构，活化细胞，调理肌肤，令肌肤健康自然、有弹性。表皮细胞在高温、高寒、干燥、强紫外线辐射等环境下，极易失去水分而使皮肤受损，海藻糖在这种情况下能够在细胞表层形成一层特殊的保护膜，保持皮肤原有营养和水分，避免皮肤晒伤及黑色素沉淀，有效抵抗皮肤老化现象；从膜上析出的粘液可温和滋润肌肤，使肌肤莹亮、光泽、柔嫩。
本发明的有益效果为：本发明所述的保护超氧化物歧化酶活性的制剂中含有的SOD为从植物或动物血中提取，经发酵法获得的SOD原液，其活性较高；透明质酸钠对SOD具有保鲜的作用；卡波姆对SOD具有固化的作用；丙三醇本身是一种生物活性的保护剂；三乙醇胺具有调节pH的功能，使所述制剂的pH位于SOD活性比较稳定的区域，丙三醇可以使卡波姆在液态下变成凝胶膏状；海藻糖对各种活性酶具有一定的保护作用，即本发明所述的保护超氧化物歧化酶活性的制剂中各原料有机地结合在一起能有效地保护SOD的活性，且制作成本较低。此外，本发明所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂中各原料均是化妆品生产中可以应用的原料，而SOD在化妆品中的应用比较广泛，但其酶制剂活性难以得到保护，而本发明所述的制剂可以直接作为化妆品生产的原料，且能保护SOD的生物酶活性。此外，本发明的制剂，也具有如下功能，如：修复烧烫伤、对阴道炎、宫颈糜烂有消炎修复作用；对红斑狼疮、鼻炎、牛皮藓有制疗和改善作用，台湾有医学工作者将其应用于痔疮也收到了良好的效果
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。实施例一
一种保护超氧化物歧化酶活性的制剂，包括下述重量份的原料，SOD300ml、透明质酸钠1g、卡波姆2g、丙三醇100g、三乙醇胺10g、咪唑烷基脲1g、海藻糖5g、去离子水122g。
所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂的制作方法，包括以下步骤：
(1)将卡波姆用水进行浸泡1天，所述卡波姆的重量与水的重量比为1:20，浸泡完毕后，向浸泡液中依次加入海藻糖、丙三醇并搅拌均匀，然后使用湿热灭菌法进行灭菌，灭菌时的温度控制在115℃，在此温度下灭菌25min，得基液；
(2)将透明质酸钠加入SOD中，并搅拌均匀，然后用滤菌器对加有透明质酸钠的SOD进行过滤除菌得SOD透明质酸纳液，备用；
(3)然后在无菌的条件下，向基液中依次加入SOD透明质酸钠液、三乙醇胺和咪唑烷基脲，然后加入去离子水调节，混合搅拌均匀，密封进行乳化24h得所述的保护超氧化物歧化酶活性的制剂。
实施例二
一种保护超氧化物歧化酶活性的制剂，包括下述重量份的原料，SOD400ml、透明质酸钠3g、卡波姆4.5g、丙三醇200g、三乙醇胺25g、咪唑烷基脲2g、海藻糖10g、去离子水355.5g。
所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂的制作方法，包括以下步骤：
(1)将卡波姆用水进行浸泡3天，所述卡波姆的重量与水的重量比为1:30，浸泡完毕后，向浸泡液中依次加入海藻糖、丙三醇并搅拌均匀，然后使用湿热灭菌法进行灭菌，灭菌时的温度控制在120℃，在此温度下灭菌28min，得基液；
(2)将透明质酸钠加入SOD中，并搅拌均匀，然后用滤菌器对加有透明质酸钠的SOD进行过滤除菌得SOD透明质酸钠液，备用；在过滤除菌后，对SOD的活性进行检测，检测采用GB/T5009.171-2003标准，邻苯三酚法，这样可以对SOD的活性有一个定量化，方便后面的调配；
(3)然后在无菌的条件下，向基液中依次加入SOD透明质酸钠液、三乙醇胺和咪唑烷基脲，然后加入去离子水调节，去离子水在加入前，使用湿热灭菌法进行灭菌，灭菌时的温度控制在120℃，在此温度下，灭菌28min；混合搅拌均匀，密封进行乳化26h得所述的保护超氧化物歧化酶活性的制剂。
实施例三
一种保护超氧化物歧化酶活性的制剂，包括下述重量份的原料，SOD500ml、透明质酸钠4g、卡波姆6g、丙三醇300g、三乙醇胺50g、咪唑烷基脲3g、海藻糖15g、去离子水581g。
所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂的制作方法，包括以下步骤：
(1)将卡波姆用水进行浸泡7天，所述卡波姆的重量与水的重量比为1:40，浸泡完毕后，向浸泡液中依次加入海藻糖、丙三醇并搅拌均匀，然后使用湿热灭菌法进行灭菌，灭菌时的温度控制在125℃，在此温度下灭菌30min，得基液；
(2)将透明质酸钠加入SOD中，并搅拌均匀，然后用滤菌器对加有透明质酸钠的SOD进行过滤除菌得SOD透明质酸钠液，备用；在过滤除菌后，对SOD的活性进行检测，检测采用GB/T5009.171-2003标准，邻苯三酚法，这样可以对SOD的活性有一个定量化，方便后面的调配；
(3)然后在无菌的条件下，向基液中依次加入SOD透明质酸钠液、三乙醇胺和咪唑烷基脲，然后加入去离子水调节，去离子水在加入前，使用湿热灭菌法进行灭菌，灭菌时的温度控制在125℃，在此温度下，灭菌30min；混合搅拌均匀，密封进行乳化28h得所述的保护超氧化物歧化酶活性的制剂。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

Claims (10)

1.一种保护超氧化物歧化酶活性的制剂，其特征在于：包括下述重量份的原料，SOD300-500份、透明质酸钠1-4份、卡波姆2-6份、丙三醇100-300份、三乙醇胺10-50份、咪唑烷基脲1-3份、海藻糖5-15份、去离子水122-581份。
2.根据权利要求1所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂，其特征在于：包括下述重量份的原料，SOD 400份、透明质酸钠3份、卡波姆4.5份、丙三醇200份、三乙醇胺25份、咪唑烷基脲2份、海藻糖10份、去离子水355.5份。
3.权利要求1-2之一所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂的制作方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)将卡波姆用水进行浸泡，浸泡完毕后，向浸泡液中依次加入海藻糖、丙三醇并搅拌均匀，然后进行灭菌，得基液；
(2)将透明质酸钠加入SOD中，并搅拌均匀，过滤除菌得SOD透明质酸钠液，备用；
(3)在无菌的条件下，向基液中依次加入SOD透明质酸钠液、三乙醇胺和咪唑烷基脲，然后加入去离子水调节，混合搅拌均匀，密封进行乳化得所述的保护超氧化物歧化酶活性的制剂。
4.根据权利要求3所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂的制作方法，其特征在于：步骤(1)中，所述卡波姆与水的重量比为1:20-40；所述浸泡的时间为1-7天。
5.根据权利要求3所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂的制作方法，其特征在于：步骤(1)中，所述灭菌为湿热灭菌。
6.根据权利要求5所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂的制作方法，其特征在于：所述灭菌的温度为115-125℃，所述灭菌的时间为25-30min。
7.根据权利要求3所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂的制作方法，其特征在于：步骤(2)中，所述过滤除菌为使用滤菌器进行过滤除菌。
8.根据权利要求3所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂的制作方法，其特征在于：步骤(3)中，去离子水经灭菌后再加入。
9.根据权利要求8所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂的制作方法，其特征在于：所述去离子水经湿热灭菌法进行灭菌；所述灭菌的温度为115-125℃，所述灭菌的时间为25-30min。
10.根据权利要求3所述保护超氧化物歧化酶活性的制剂的制作方法，其特征在于：步骤(3)中，密封乳化24-28h后得所述的保护超氧化物歧化酶活性的制剂。
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