CN106563518B - 快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片及其制造和使用方法 - Google Patents
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Abstract
一种快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片及其制造和使用方法，尿液样本入口与尿液样本主通道通过第一尿液样本分通道、第二尿液样本分通道和第三尿液样本分通道分别与第一尿液样本出口、第二尿液样本出口和第三尿液样本出口连通，第一尿液样本分通道上串接有第一缓冲单元与第一检测单元，第二尿液样本分通道上串接有第二缓冲单元与第二检测单元，第三尿液样本分通道上串接有第三缓冲单元的出口与第三检测单元，尿液样本入口、第一尿液样品出口、第二尿液样品出口和第三尿液样品出口中均设置有柱状体阵列,第一检测单元、第二检测单元和第三检测单元中均设置有长方体阵列。用本发明芯片检测速度快、结果精确、价廉且便于检测。
Description
技术领域
本发明涉及一种微流控芯片，特别是涉及一种快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片及其制造和使用方法。
背景技术
膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，主要包括膀胱移行上皮癌细胞、膀胱腺癌细胞及膀胱鳞癌细胞三种亚型。快速而又精确地诊断出膀胱癌三种亚型，对于膀胱癌及早发现与治疗以及膀胱癌患者术后的复查均具有重要意义。临床检测手段均存在检测速度慢、检测结果不精确、价格昂贵等缺点，目前市场上缺少一种检测速度快、检测结果精确、廉价的膀胱癌三种亚型的检测工具。
发明内容
本发明的第一目的是提供一种检测速度快、检测结果精确、廉价、便于检测的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片。
实现上述第一目的的技术方案是：
一种快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片，由基片和玻璃片键合构成，其中，包括相互连通的尿液样本入口和尿液样本主通道，其创新点在于：
a、还具有第一缓冲单元、第一检测单元、第一尿液样本出口、第二缓冲单元、第二检测单元 、第二尿液样本出口 、第三缓冲单元 、第三检测单元 和第三尿液样本出口 ；
b、所述尿液样本主通道与第一尿液样本分通道、第二尿液样本分通道和第三尿液样本分通道连通，第一尿液样本分通道上依次串接有第一缓冲单元、第一检测单元和第一尿液样本出口，第二尿液样本分通道上依次串接有第二缓冲单元、第二检测单元和第二尿液样本出口，第三尿液样本分通道上依次串接有第三缓冲单元、第三检测单元和第三尿液样本出口，第一缓冲单元的入口、第二缓冲单元的入口和第三缓冲单元的入口分别与第一尿液样本分通道的入口、第二尿液样本分通道的入口和第三尿液样本分通道的入口连通，第一缓冲单元的出口与第一检测单元的入口连通，第一检测单元的出口与第一尿液样本出口连通，第二缓冲单元的出口与第二检测单元的入口连通，第二检测单元的出口与第二尿液样本出口连通，第三缓冲单元的出口与第三检测单元的入口连通，第三检测单元的出口与第三尿液样本出口连通；
c、所述第一检测单元、第二检测单元和第三检测单元中均设置有长方体阵列, 长方体阵列的边界线呈矩形，相邻两列长方体的中心直线平行，且长方体阵列交错分布，相邻两行长方体的中心直线平行。
上述技术方案的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片中，其尿液样本入口、第一样品出口、第二样品出口和第三样品出口中均设置有柱状体阵列,其中的柱状体等间距分布，所有柱状体形成的圆环形阵列的边缘线与尿液样本入口的内腔壁之间有间隙。
上述技术方案的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片中，其柱状体阵列中，相邻的柱状体之间的最小间距为50μm，所有柱状体形成的圆环形阵列的边缘线与尿液样本入口的内腔壁之间的最小间隙为120μm。
上述技术方案的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片中，其第一尿液样本出口、第二尿液样本出口和第三尿液样本出口同时是异性抗体的入口。
上述技术方案的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片中，其尿液样本主通道通过第一支通道和第二支通道与一条汇合通道相通，第一尿液样本分通道的入口、第二尿液样本分通道的入口和第三尿液样本分通道的入口均与汇合通道相通，且第一尿液样本分通道、第二尿液样本分通道和第三尿液样本分通道平行布置, 且在汇合通道上的第一尿液样本分通道的入口、第一条支通道的出口、第二尿液样本分通道的入口、第二条支通道的出口、第三尿液样本分通道的入口依次之间的间距相同。
上述技术方案的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片中，其长方体阵列中的长方体，其长为40±5μm，宽为10±5μm，高为30～50μm之间，每一列长方体中相邻的长方体之间的最小间隔为30μm，相邻两列长方体单元的边缘线所在直线的最小间隔为40μm； 相邻两行长方体单元的边缘线所在直线的最小间隔为15μm。
上述技术方案的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片中，其第一缓冲单元、第二缓冲单元和第三缓冲单元为直角拐形通道结构。
上述技术方案的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片中，其微流控芯片采用聚二甲基硅氧烷基片,所述第一检测单元、第二检测单元和第三检测单元底部对应的玻璃片区域为经硅烷化处理或经等离子体氧处理的玻璃片。
本发明的第二目的是提供一种上述快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片的制造方法。
实现上述第二目的的技术方案是：
一种上述快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片的制造方法，其创新点在于：该微流控芯片的基片是由聚二甲基硅氧烷标准制作，然后将微流控芯片基片与0.17 毫米厚度的玻璃片用等离子体封接方法进行键合，构成玻璃-聚二甲基硅氧烷型芯片, 在键合之后，从尿液样本入口通入体积浓度为5%的硅烷化试剂3-氨丙基三乙氧基硅烷的丙酮溶液，在反应5分钟之后，依次灌入丙酮、无水乙醇和去离子水冲洗，最后加热烘干，烘干的芯片自然降温至室温而成。
本发明的第三目的是提供一种快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片的使用方法。
实现上述第三目的的技术方案是：
一种快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片的使用方法，其创新点在于：包括以下步骤：
（a）、采用上述快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片, 从第一尿液样本出口注入一定量的膀胱移行上皮癌细胞特异抗体，从第二尿液样本出口注入一定量的膀胱腺癌细胞特异抗体，从第三尿液样本出口注入一定量的膀胱鳞癌细胞特异抗体，膀胱移行上皮癌细胞特异抗体、膀胱腺癌细胞特异抗体和膀胱鳞癌细胞特异抗体分别从第一检测单元的出口、第二检测单元出口和第三检测单元出口进入第一检测单元、第二检测单元和第三检测单元，然后置于摄氏零下二十度保存；
（b）、从尿液样本入口注入尿液样本，尿液样本分别经第一缓冲单元、第二缓冲单元和第三缓冲单元到达第一检测单元、第二检测单元和第三检测单元，尿液样本中的膀胱移行上皮癌细胞粘附到具有膀胱移行上皮癌细胞特异抗体的第一检测单元，膀胱腺癌细胞粘附到具有膀胱腺癌细胞特异抗体的第二检测单元，膀胱鳞癌细胞粘附到具有膀胱鳞癌细胞特异抗体的第三检测单元，其余尿液样本分别经第一尿液样本出口、第二尿液样本出口和第三尿液样本出口流出；
（c）通过第一尿液样本出口向第一检测单元注入标记荧光基团的特异性检测试剂，通过第二尿液样本出口向第二检测单元注入标记荧光基团的特异性检测试剂，通过第三尿液样本出口向第三检测单元注入标记荧光基团的特异性检测试剂；
（d）在荧光显微镜下观察第一检测单元、第二检测单元和第三检测单元中的荧光细胞，即可检测出尿液样本中是否存在膀胱移行上皮癌细胞、膀胱腺癌细胞、膀胱鳞癌细胞三种亚型膀胱癌细胞。
本发明的好处是： 1）、由于尿液样本入口与尿液样本主通道连通，所述尿液样本主通道分别与第一尿液样本分通道的入口、第二尿液样本分通道的入口和第三尿液样本分通道的入口连通，第一尿液样本分通道的出口、第二尿液样本分通道的出口和第三尿液样本分通道的出口分别为第一尿液样本出口、第二尿液样本出口和第三尿液样本出口，第一尿液样本分通道上串接有第一缓冲单元与第一检测单元，第二尿液样本分通道上串接有第二缓冲单元与第二检测单元，第三尿液样本分通道上串接有第三缓冲单元的出口与第三检测单元，因此，注入一次尿液即可检测出膀胱癌的三种亚型，检测速度快；2）、由于从第一尿液样本出口注入一定量的膀胱移行上皮癌细胞特异抗体至第一检测单元，从第二尿液样本出口注入一定量的膀胱腺癌细胞特异抗体至第二检测单元，从第三尿液样本出口注入一定量的膀胱鳞癌细胞特异抗体至第三检测单元，这样，其中的膀胱移行上皮癌细胞粘附到具有膀胱移行上皮癌细胞特异抗体的第一检测单元，其中的膀胱腺癌细胞粘附到具有膀胱腺癌细胞特异抗体的第二检测单元，其中的膀胱鳞癌细胞粘附到具有膀胱鳞癌细胞特异抗体的第三检测单元，因此检测结果精确；3）、由于本发明的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片只包括尿液样本入口、尿液样本通道、第一缓冲单元、第二缓冲单元、第三缓冲单元、第一检测单元、第二检测单元、第三检测单元、第一尿液样本出口、第二尿液样本出口和第三尿液样本出口，通过向三个检测单元抗体注入口同时注入一定量的相应的特异性抗体，即可精确地检测出膀胱癌的三种亚型，故整个通道容积非常小，属于微升级别，检测用的试剂消耗量很少，因此廉价；4）、由于第一检测单元、第二检测单元、第三检测单元设置有长方体阵列，因此会对尿液样本造成局部的扰动流，便于尿液样本中待测物质沉淀和便于检测。
本发明的微流控芯片将流体力学原理、免疫吸附反应与微流控技术结合，通过尿液样本即可快速而又精确地检测出膀胱癌三种亚型。
附图说明
图1 是本发明快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片的结构示意图；
图2 是尿液样本入口、尿液样本出口的内部结构示意图；
图3 是各检测单元的内部结构示意图。
具体实施方式
以下结合附图以及给出的实施方式，对本发明作进一步的说明：
如图1-3所示，一种快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片，由基片和玻璃片键合构成，其中，包括相互连通的尿液样本入口1和尿液样本主通道2，其创新点在于：
a、还具有第一缓冲单元3-1、第一检测单元4-1、第一尿液样本出口5-1、第二缓冲单元3-2、第二检测单元4-2、第二尿液样本出口5-2、第三缓冲单元3-3、第三检测单元4-3和第三尿液样本出口5-3；
b、所述尿液样本主通道2与第一尿液样本分通道2-1、第二尿液样本分通道2-2和第三尿液样本分通道2-3连通，第一尿液样本分通道2-1上依次串接有第一缓冲单元3-1、第一检测单元4-1和第一尿液样本出口5-1，第二尿液样本分通道2-2上依次串接有第二缓冲单元3-2、第二检测单元4-2和第二尿液样本出口5-2，第三尿液样本分通道2-3上依次串接有第三缓冲单元3-3、第三检测单元4-3和第三尿液样本出口5-3，第一缓冲单元3-1的入口、第二缓冲单元3-2的入口和第三缓冲单元3-3的入口分别与第一尿液样本分通道2-1的入口、第二尿液样本分通道2-2的入口和第三尿液样本分通道2-3的入口连通，第一缓冲单元3-1的出口与第一检测单元4-1的入口连通，第一检测单元4-1的出口与第一尿液样本出口5-1连通，第二缓冲单元3-2的出口与第二检测单元4-2的入口连通，第二检测单元4-2的出口与第二尿液样本出口5-2连通，第三缓冲单元3-3的出口与第三检测单元4-3的入口连通，第三检测单元4-3的出口与第三尿液样本出口5-3连通；
c、所述第一检测单元4-1、第二检测单元4-2和第三检测单元4-3中均设置有长方体6-2阵列, 长方体（6-2）阵列的边界线呈矩形，相邻两列长方体6-2的中心直线平行，且长方体6-2阵列交错分布，相邻两行长方体6-2的中心直线平行。
上述快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片中，其尿液样本入口1、第一样品出口5-1、第二样品出口5-2和第三样品出口5-3中均设置有柱状体6-1阵列,其中的柱状体6-1等间距分布，所有柱状体6-1形成的圆环形阵列的边缘线与尿液样本入口1的内腔壁之间有间隙（如图2所示）。
上述快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片中，其柱状体6-1阵列中，相邻的柱状体6-1之间的最小间距为50μm，所有柱状体6-1形成的圆环形阵列的边缘线与尿液样本入口1的内腔壁之间的最小间隙为120μm。
上述快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片中，其第一尿液样本出口5-1、第二尿液样本出口5-2和第三尿液样本出口5-3同时是异性抗体的入口。
上述快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片中，其尿液样本主通道2通过第一条支通道202-1和第二条支通道202-2与一条汇合通道203相通，第一尿液样本分通道2-1的入口、第二尿液样本分通道2-2的入口和第三尿液样本分通道2-3的入口均与汇合通道203相通，且第一尿液样本分通道2-1、第二尿液样本分通道2-2和第三尿液样本分通道2-3平行布置, 且在汇合通道203上的第一尿液样本分通道2-1的入口、第一条支通道202-1的出口、第二尿液样本分通道2-2的入口、第二条支通道202-2的出口、第三尿液样本分通道2-3的入口依次之间的间距相同。目的是保证三个分通道流量与液体内的物质浓度都保持一致。
上述快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片中，其长方体6-2阵列中的长方体6-2，其长为40±5μm，宽为10±5μm，高为30～50μm之间，每一列长方体6-2中相邻的长方体6-2之间的最小间隔为30μm，相邻两列长方体6-2单元的边缘线所在直线的最小间隔为40μm；相邻两行长方体单元的边缘线所在直线的最小间隔为15μm。
上述快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片中，其第一缓冲单元3-1、第二缓冲单元3-2和第三缓冲单元3-3为直角拐形通道结构。这种直角拐形通道的功能在于产生的流场能自动混匀液体里面的物质，达到均匀浓度。
上述快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片中，其微流控芯片采用聚二甲基硅氧烷基片,所述第一检测单元4-1、第二检测单元4-2和第三检测单元4-3底部对应的玻璃片区域为经硅烷化处理或经等离子体氧处理的玻璃片。这种经过表面改性处理的玻璃片有助于按照需求固定对应的特异性抗体。
本发明的上述快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片的制造方法，其创新点在于：该微流控芯片的基片是由聚二甲基硅氧烷标准制作，然后将微流控芯片基片与0.17 毫米厚度的玻璃片用等离子体封接方法进行键合，构成玻璃-聚二甲基硅氧烷型芯片, 在键合之后，从尿液样本入口通入体积浓度为5%的硅烷化试剂3-氨丙基三乙氧基硅烷的丙酮溶液，在反应5分钟之后，依次灌入丙酮、无水乙醇和去离子水冲洗，最后加热烘干，烘干的芯片自然降温至室温而成。
本发明上述快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片的使用方法：
（a）、采用上述快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片, 从第一尿液样本出口5-1注入一定量的膀胱移行上皮癌细胞特异抗体，从第二尿液样本出口5-2注入一定量的膀胱腺癌细胞特异抗体，从第三尿液样本出口5-3注入一定量的膀胱鳞癌细胞特异抗体，膀胱移行上皮癌细胞特异抗体、膀胱腺癌细胞特异抗体和膀胱鳞癌细胞特异抗体分别从第一检测单元4-1的出口、第二检测单元4-2出口和第三检测单元4-3出口进入第一检测单元4-1、第二检测单元4-2和第三检测单元4-3，然后置于摄氏零下二十度保存；
（b）、从尿液样本入口1注入尿液样本，尿液样本分别经第一缓冲单元3-1、第二缓冲单元3-2和第三缓冲单元3-3到达第一检测单元4-1、第二检测单元4-2和第三检测单元4-3，尿液样本中的膀胱移行上皮癌细胞粘附到具有膀胱移行上皮癌细胞特异抗体的第一检测单元4-1，膀胱腺癌细胞粘附到具有膀胱腺癌细胞特异抗体的第二检测单元4-2，膀胱鳞癌细胞粘附到具有膀胱鳞癌细胞特异抗体的第三检测单元4-3，其余尿液样本分别经第一尿液样本出口5-1、第二尿液样本出口5-2和第三尿液样本出口5-3流出；
（c）通过第一尿液样本出口5-1向第一检测单元4-1注入标记荧光基团的特异性检测试剂，通过第二尿液样本出口5-2向第二检测单元4-2注入标记荧光基团的特异性检测试剂，通过第三尿液样本出口5-3向第三检测单元4-3注入标记荧光基团的特异性检测试剂；
（d）在荧光显微镜下观察第一检测单元4-1、第二检测单元4-2和第三检测单元4-3中的荧光细胞，即可检测出尿液样本中是否存在膀胱移行上皮癌细胞、膀胱腺癌细胞、膀胱鳞癌细胞三种亚型膀胱癌细胞。
本发明在检测尿样时，优选所用微流控芯片的尿液样本出口5-1、5-2、5-3的直径均为3000μm，尿液样本主通道2的宽度为500μm。
本发明在检测的过程中，从经过步骤(a)处理的芯片的尿液样本入口1注入的待测尿液样本，其中的杂质等被尿液样本入口1中的柱状体6-1阵列拦截，待测尿液样本中含有的癌细胞经过主通道2到达各缓冲单元3-1、3-2、3-3和各检测单元4-1、4-2、4-3，待测尿液样本中的膀胱癌细胞粘附到已被相应的特异抗体包被的各检测单元4-1、4-2、4-3中，剩余尿液经各出口5-1、5-2、5-3流出芯片。通过各出口5-1、5-2、5-3同时向各个检测单元4-1、4-2、4-3注入标记荧光基团的特异性检测试剂，使其与已经抓捕到的不同亚型膀胱癌细胞结合，然后在荧光显微镜下观察各个检测单元4-1、4-2、4-3中的荧光细胞，即可检出待测尿液样本中是否存在各个亚型膀胱癌细胞。简单、快速，特别实用。
Claims (9)
1.一种快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片，由基片和玻璃片键合构成，其中，包括相互连通的尿液样本入口(1)和尿液样本主通道(2)，其特征在于：
a、还具有第一缓冲单元(3-1)、第一检测单元(4-1)、第一尿液样本出口(5-1)、第二缓冲单元(3-2)、第二检测单元(4-2)、第二尿液样本出口(5-2)、第三缓冲单元(3-3)、第三检测单元(4-3)和第三尿液样本出口(5-3)；
b、所述尿液样本主通道(2)与第一尿液样本分通道(2-1)、第二尿液样本分通道(2-2)和第三尿液样本分通道(2-3)连通；第一尿液样本分通道(2-1)上依次串接有第一缓冲单元(3-1)、第一检测单元(4-1)和第一尿液样本出口(5-1)，第二尿液样本分通道(2-2)上依次串接有第二缓冲单元(3-2)、第二检测单元(4-2)和第二尿液样本出口(5-2)，第三尿液样本分通道(2-3)上依次串接有第三缓冲单元(3-3)、第三检测单元(4-3)和第三尿液样本出口(5-3)；第一缓冲单元(3-1)的入口、第二缓冲单元(3-2)的入口和第三缓冲单元(3-3)的入口分别与第一尿液样本分通道(2-1)的入口、第二尿液样本分通道(2-2)的入口和第三尿液样本分通道(2-3)的入口连通，第一缓冲单元(3-1)的出口与第一检测单元(4-1)的入口连通，第一检测单元(4-1)的出口与第一尿液样本出口(5-1)连通，第二缓冲单元(3-2)的出口与第二检测单元(4-2)的入口连通，第二检测单元(4-2)的出口与第二尿液样本出口(5-2)连通，第三缓冲单元(3-3)的出口与第三检测单元(4-3)的入口连通，第三检测单元(4-3)的出口与第三尿液样本出口(5-3)连通；
c、所述第一检测单元(4-1)、第二检测单元(4-2)和第三检测单元(4-3)中均设置有长方体(6-2)阵列,长方体(6-2)阵列的边界线呈矩形，相邻两列长方体(6-2)的中心直线平行，且长方体(6-2)阵列交错分布，相邻两行长方体(6-2)的中心直线平行。
2.根据权利要求1所述的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片，其特征是：所述尿液样本入口(1)、第一尿液样品出口(5-1)、第二尿液样品出口(5-2)和第三尿液样品出口(5-3)中均设置有柱状体(6-1)阵列,其中的柱状体(6-1)等间距分布，所有柱状体(6-1)形成的圆环形阵列的边缘线与尿液样本入口(1)的内腔壁之间有间隙。
3.根据权利要求2所述的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片，其特征在于：所述柱状体(6-1)阵列中，相邻的柱状体(6-1)之间的最小间距为50μm，所有柱状体(6-1)形成的圆环形阵列的边缘线与尿液样本入口(1)的内腔壁之间的最小间隙为120μm。
4.根据权利要求1所述的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片，其特征在于：所述第一尿液样本出口(5-1)、第二尿液样本出口(5-2)和第三尿液样本出口(5-3)同时是异性抗体的入口。
5.根据权利要求1所述的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片，其特征在于：所述尿液样本主通道(2)通过第一支通道(202-1)和第二支通道(202-2)与一条汇合通道(203)相通，第一尿液样本分通道(2-1)的入口、第二尿液样本分通道(2-2)的入口和第三尿液样本分通道(2-3)的入口均与汇合通道(203)相通，且第一尿液样本分通道(2-1)、第二尿液样本分通道(2-2)和第三尿液样本分通道(2-3)平行布置,且在汇合通道(203)上的第一尿液样本分通道(2-1)的入口、第一条支通道(202-1)的出口、第二尿液样本分通道(2-2)的入口、第二条支通道(202-2)的出口、第三尿液样本分通道(2-3)的入口依次之间的间距相同。
6.根据权利要求1所述的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片，其特征在于：所述长方体(6-2)阵列中的长方体(6-2)，其长为40±5μm，宽为10±5μm，高为30～50μm之间，每一列长方体(6-2)中相邻的长方体(6-2)之间的最小间隔为30μm，相邻两列长方体(6-2)单元的边缘线所在直线的最小间隔为40μm；相邻两行长方体单元的边缘线所在直线的最小间隔为15μm。
7.根据权利要求1所述的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片，其特征在于：所述第一缓冲单元(3-1)、第二缓冲单元(3-2)和第三缓冲单元(3-3)为直角拐形通道结构。
8.根据权利要求1所述的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片，其特征在于：所述微流控芯片采用聚二甲基硅氧烷基片,所述第一检测单元(4-1)、第二检测单元(4-2)和第三检测单元(4-3)底部对应的玻璃片区域为经硅烷化处理或经等离子体氧处理的玻璃片。
9.一种如权利要求1～8之任一项所述的快速检测膀胱癌三种亚型的微流控芯片的制造方法，其特征在于：该微流控芯片的基片是由聚二甲基硅氧烷制作，然后将微流控芯片基片与0.17毫米厚度的玻璃片用等离子体封接方法进行键合，构成玻璃-聚二甲基硅氧烷芯片,在键合之后，从尿液样本入口(1)通入体积浓度为5％的硅烷化试剂3-氨丙基三乙氧基硅烷的丙酮溶液，在反应5分钟之后，依次灌入丙酮、无水乙醇和去离子水冲洗，最后加热烘干，烘干的芯片自然降温至室温而成。
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