CN106546735A - 一种肺炎支原体、衣原体联检试剂卡、试剂盒及检测方法 - Google Patents

一种肺炎支原体、衣原体联检试剂卡、试剂盒及检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种肺炎支原体、衣原体联检试剂卡、试剂盒及检测方法，所述试剂卡包括外壳和试纸条，所述外壳上依次设有稀释液加液孔、样品加样孔、结果观察窗；所述试纸条上包括底板以及在底板上顺次搭接的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水纸；所述稀释液加液孔和样本加样孔与试纸条样品垫对应，所述结果观察窗与所述硝酸纤维素膜对应；所述硝酸纤维素膜上包被有至少一条检测线和一条质控线。本发明可实现对肺炎支原体和肺炎衣原体的一次性联合检测，有利于全面检测，避免漏检，检测结果有利于更好地指导临床诊断与正确用药，提高临床诊断效率。同时，联合检测有利于节省样本，减轻检测对患者带来的有创痛苦。

Description

一种肺炎支原体、衣原体联检试剂卡、试剂盒及检测方法
技术领域
本发明涉及体外检测技术领域，特别是涉及一种肺炎支原体、肺炎衣原体联合检测试剂卡、试剂盒及其检测方法。
背景技术
肺炎支原体（Mycopplasma pneumonia, MP）属于柔膜体纲支原体科支原体属，是一种能在无生命培养基上自行生长繁殖，介于病毒和细菌之间最小的不易染色的无细胞壁原核微生物。肺炎支原体生长缓慢，培养周期长、体外分离培养比较困难。P1蛋白是MP顶端结构中的一对胰酶敏感的跨膜蛋白，也是肺炎支原体的主要黏附素，其相对分子量（Mr）约为170x103。缺乏P1或P1不能密集在顶器表面或非定居顶器表面的合适位置，肺炎支原体就不能黏附于呼吸道上皮，也无毒力。它不仅在介导MP黏附于宿主细胞的过程中起重要作用，其本身也是一种免疫原，能刺激机体产生强烈的免疫应答，产生特异性抗体IgM。
肺炎支原体经飞沫传染，潜伏期及病程较长，人群普遍易感。由于儿童抵抗力低，2~4岁为易感染年龄。肺炎支原体感染后，可引起轻度呼吸道感染、咽炎、扁桃体炎、支气管炎，乃至非典型肺炎等，并可同时或相继引起脑炎、心肌炎、肝炎等多系统损害。
肺炎支原体作为病原体侵入机体后，免疫系统发生反应，产生特异性IgM抗体。一般在感染后1周出现IgM类抗体，3~4周达到高峰，以后逐渐降低，由于MP感染的潜伏期为2~3周，当患者出现症状而就诊时，IgM已达到相当高的水平。因此，检测MP-IgM可作为MP急性期感染的主要诊断指标。
肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae，Cpn)是1989年定名的新种，它只有一个血清型，MOMP蛋白为其特异性抗原，代表株为TWAR。目前已新分离出10多株肺炎衣原体，该衣原体是一种重要的呼吸道病原体。
肺炎衣原体呼吸道感染是世界各地广泛存在的常见病，引起地方性和流行性肺炎，无显著的性别和地区差异，一年四季均可发生，几乎每人一生中均受过感染，而且常常反复感染；感染是双峰分布，第一个高峰在8-9岁，第二个高峰在70岁。潜伏期约10-65天。
肺炎衣原体的感染具有散发和流行交替出现的周期性，散发通常持续3-4年，有2-3年的流行期，在流行期间可有数月的短暂爆发发生。病人之间传播间隔期平均为30天，在密集人群中流行可持续6个月。无症状的感染者在本病的传播上比病人更为重要。
肺炎衣原体经飞沫传染，肺炎衣原体主要引起人的非典型性肺炎，同时还可致支气管炎、咽炎、鼻窦炎、中耳炎、虹膜炎、肝炎、心肌炎、心内膜炎、脑膜炎、结节性红斑等疾病，也是艾滋病、白血病等继发感染的重要病原菌之一，另外，流行病学和病原学研究认为，肺炎衣原体感染与心血管疾病相关，已引起各国学者的高度重视。
早期衣原体感染的特征是在2-4周内出现IgM抗体，随后6-8周内才有IgA和IgG反应。在急性感染肺炎衣原体后，IgM抗体在2-6个月内会消失而IgG抗体滴度会慢慢减少，而IgA抗体趋向于迅速消失。当患者出现症状而就诊时，IgM已达到相当高的水平。因此，检测CP-IgM可作为CP急性期感染的主要诊断指标。
现有检测诊断技术中大部分是针对肺炎支原体或肺炎衣原体的单一检测，而未见到两者的联合检测产品。基于肺炎支原体和肺炎衣原体感染时出现的临床症状非常相似，单单检测肺炎支原体或肺炎衣原体抗原容易漏检，或需要分别针对肺炎衣原体和肺炎支原体检测两次，极为不便，临床诊断效率较低，因此急需提供一种能够实现肺炎衣原体和肺炎支原体联合检测的检测装备。
发明内容
基于此，本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种肺炎支原体、肺炎衣原体联合检测试剂卡、试剂盒及其检测方法，以更好地指导临床诊断与正确用药，提高临床诊断效率。
为实现上述目的，本发明采取了以下技术方案：
首先，提供了一种肺炎支原体、肺炎衣原体联合检测试剂卡，所述试剂卡包括外壳和试纸条，所述外壳上依次设有稀释液加液孔、样品加样孔、结果观察窗；所述试纸条上包括底板以及在底板上顺次搭接的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水纸；所述稀释液加液孔和样本加样孔与试纸条样品垫对应，所述结果观察窗与所述硝酸纤维素膜对应；所述肺炎支原体、肺炎衣原体联合检测试剂卡，在硝酸纤维素膜上包被有肺炎支原体重组抗原第一检测线（T1）、肺炎衣原体重组抗原的第二检测线（T2）、抗鼠或抗兔IgM抗体的质控线（C）；所述结合垫上涂覆有胶体金标记的抗人-IgM抗体。
在其中一个实施例中，所述硝酸纤维素膜上从结合垫到吸水纸方向依次设置有第一检测线、第二检测线和质控线。
在其中一个实施例中，所述第一检测线、第二检测线之间的距离为2-5mm。
在其中一个实施例中，所述第二检测线和质控线之间的距离为2-5mm。
其次，本发明还公开了一种肺炎衣原体、肺炎支原体联合检测试剂盒，包括所述的检测试剂卡以及样本稀释液、吸管。
再次，本发明还公开了一种肺炎衣原体、肺炎支原体联合检测试剂盒的检测方法，包括以下步骤：
（1）取出试剂卡，水平放置；
（2）用吸管吸取血清或血浆样本，垂直加入10ul于加样孔中；
（3）滴加2-3滴稀释液到稀释液加液孔中；
（4）等待10分钟后观察结果。
如第一检测线、质控线同时显色，说明样本中存在肺炎支原体抗原；
如第二检测线、质控线同时显色，说明样本中存在肺炎衣原体抗原；
如第一检测线和第二检测线不显色，质控线显色，说明样本中不存在肺炎衣原体抗原和肺炎支原体抗原，结果呈阴性；
如质控线不显色，说明检测出错，检测结果无效。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明在试剂卡上同时设置了加样孔和稀释液加液孔，检测者只需在加样孔中滴加1-2滴血样，再在稀释液加液孔中滴加稀释液即可完成稀释，无需提前抽取样本并对样本进行稀释处理，操作十分便捷，且所需样本量极少，有利于节约样本，便于使用者在家庭等场所的自行检测，检测过程易于操作，使用者无需通过任何培训即可实现检测，同时检测结果一目了然，便于判断。另外，本发明可实现对肺炎支原体和肺炎衣原体的一次性联合检测，有利于全面检测，避免漏检，检测结果有利于更好地指导临床诊断与正确用药，提高临床诊断效率。同时，联合检测有利于节省样本，减轻检测对患者带来的有创痛苦。
附图说明
图1为实施例1检测试剂卡结构示意图；
图2为实施例1检测试纸条结构示意图；
图3为实施例1检测试剂盒中用吸管取样后在试剂卡上滴加样本的示意图；
图4为实施例1往试剂卡上滴加稀释液的示意图。
其中：1.试剂卡；11.试剂卡外壳；12.稀释液加液孔；13.加样孔；14.结果观察窗；2.试纸条；21.样品垫；22.结合垫；23.底板；24.硝酸纤维素膜；251.检测线T1；252.检测线T2；26.质控线C；27.吸水纸；3.样本吸管；4.稀释液。
具体实施方式
实施例 1
本实施例提供了一种肺炎支原体、肺炎衣原体联合检测试剂卡及包括该试剂卡的试剂盒。如图所示，该试剂卡1包括外壳11和试纸条2，外壳11上依次设有稀释液加液孔12、样品加样孔13、结果观察窗14；试纸条2上包括底板23以及在底板23上顺次搭接的样品垫21、结合垫22、硝酸纤维素膜24、吸水纸26；稀释液加液孔12和样本加样孔13与试纸条样品垫21对应，结果观察窗14与硝酸纤维素膜24对应。该肺炎支原体、肺炎衣原体联合检测试剂卡，在硝酸纤维素膜上包被有肺炎支原体重组抗原第一检测线251、肺炎衣原体重组抗原的第二检测线252、抗鼠或抗兔IgM抗体的质控线26；所述结合垫22上涂覆有胶体金标记的抗人-IgM抗体。其中，第一检测线251、第二检测线252之间的距离为2mm，第二检测线252和质控线26之间的距离为2mm。
本实施例的一种肺炎支原体、肺炎衣原体联合检测试剂盒，包括检测试剂卡1以及样本吸管3、样本稀释液4。
利用本实施例的试剂盒检测时，操作步骤如下：
（1）从试剂盒中取出试剂卡1，水平放置；
（2）用吸管3吸取血清或血浆样本，垂直加入10ul于加样孔13中；
（3）滴加2-3滴稀释液到稀释液加液孔12中；
（4）等待10分钟后观察结果。
如第一检测线251、质控线26同时显色，说明样本中存在肺炎支原体抗原，患者感染肺炎支原体；
如第二检测线252、质控线26同时显色，说明样本中存在肺炎衣原体抗原，患者感染肺炎衣原体。
如第一检测线251和第二检测线252不显色，质控线26显色，说明样本中不存在肺炎衣原体抗原或肺炎支原体抗原，结果呈阴性，患者没有受到肺炎衣原体或肺炎支原体感染；
如质控线26不显色，说明检测出错，检测结果无效。
实施例 2
本实施例与实施例1的不同之处在于，第一检测线251为肺炎衣原体重组抗原检测线、第二检测线252为肺炎支原体重组抗原检测线，且第一检测线251、第二检测线252、质控线26之间的距离为5mm。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (7)

1.一种肺炎支原体、衣原体联检试剂卡，其特征在于，所述试剂卡包括外壳和试纸条，所述外壳上依次设有稀释液加液孔、样品加样孔、结果观察窗；所述试纸条上包括底板以及在底板上顺次搭接的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水纸；所述稀释液加液孔和样本加样孔与试纸条样品垫对应，所述结果观察窗与所述硝酸纤维素膜对应；所述硝酸纤维素膜上包被有至少一条检测线和一条质控线。
2. 根据权利要求1所述的一种肺炎支原体、肺炎衣原体联合检测试剂卡，其特征在于，所述硝酸纤维素膜上包被有肺炎支原体重组抗原第一检测线（T1）、肺炎衣原体重组抗原的第二检测线（T2）、抗鼠或抗兔IgM抗体的质控线（C）；所述结合垫上涂覆有胶体金标记的抗人-IgM抗体。
3. 根据权利要求1所述的肺炎支原体、衣原体联检试剂卡，其特征在于，所述硝酸纤维素膜上从结合垫到吸水纸方向依次设置有第一检测线、第二检测线和质控线。
4. 根据权利要求1所述的肺炎支原体、衣原体联检试剂卡，其特征在于，所述第一检测线、第二检测线之间的距离为2-5mm。
5. 根据权利要求1所述的肺炎支原体、衣原体联检试剂卡，其特征在于，所述第二检测线和质控线之间的距离为2-5mm。
6. 一种肺炎支原体、衣原体联检试剂盒，其特征在于，包括权利要求1-5任一项所述的检测试剂卡以及样本稀释液、吸管。
7. 一种使用权利要求7所述的肺炎支原体、衣原体联检试剂盒的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）取出试剂卡，水平放置；
（2）用吸管吸取血清或血浆样本，垂直加入10ul于加样孔中；
（3）滴加2-3滴稀释液到稀释液加液孔中；
（4）等待10分钟后观察结果。
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Cited By (4)

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Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111122860A (zh) * 2019-12-31 2020-05-08 南京拂晓生物科技有限公司 一种检测肺炎衣原体抗体间接elisa检测试剂盒及检测方法
CN111610329A (zh) * 2020-05-27 2020-09-01 北京柏兆嘉业科技有限公司 同步检测A、B型流感病毒和肺炎衣原体、支原体IgM抗体的联合装置及检测方法
CN113624975A (zh) * 2021-08-20 2021-11-09 浙江嘉孚生物科技有限公司 一种时间分辨免疫荧光层析试剂条及其在非诊断目的的定性检测支原体和衣原体中的应用
CN117471098A (zh) * 2023-12-27 2024-01-30 北京芯迈微生物技术有限公司 肺炎支原体、肺炎衣原体IgM抗体联合检测的芯片及应用

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111122860A (zh) * 2019-12-31 2020-05-08 南京拂晓生物科技有限公司 一种检测肺炎衣原体抗体间接elisa检测试剂盒及检测方法
CN111610329A (zh) * 2020-05-27 2020-09-01 北京柏兆嘉业科技有限公司 同步检测A、B型流感病毒和肺炎衣原体、支原体IgM抗体的联合装置及检测方法
CN113624975A (zh) * 2021-08-20 2021-11-09 浙江嘉孚生物科技有限公司 一种时间分辨免疫荧光层析试剂条及其在非诊断目的的定性检测支原体和衣原体中的应用
CN117471098A (zh) * 2023-12-27 2024-01-30 北京芯迈微生物技术有限公司 肺炎支原体、肺炎衣原体IgM抗体联合检测的芯片及应用
CN117471098B (zh) * 2023-12-27 2024-03-12 北京芯迈微生物技术有限公司 肺炎支原体、肺炎衣原体IgM抗体联合检测的芯片及应用

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