CN106501045A - 一种粪便样品处理方法及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种粪便样品的处理方法及其在消化系统疾病以及癌症诊断中的应用。所述的操作方法包含有以下步骤：将待测粪便样品置于储存袋的内袋中；向储存袋外袋中加入固体干燥剂；将储存袋密封，干燥剂吸收粪便样品中和空气中的水分。本发明所述的处理方法能够有效的保证粪便样品中待检测成分(如DNA)的稳定性，从而提高后续检测诊断结果的准确性和可信度。此外，该发明操作方法简便易行，方便病人自助取样后送检，有助于粪便样品及时的进行检测。

Description

一种粪便样品处理方法及其应用

技术领域

本发明涉及生物化学领域，涉及了一种粪便样品的处理方法及其应用。

背景技术

目前，临床上粪便样品的检测通常采用的方式是病人在医院或体检中心收集便样，由医院或体检中心统一送至实验室进行检测。但是无论粪便样品的镜下检验还是化学检验，都需要保证样品的新鲜度，因此病人往往需要在采集样品后立即送检，否则会严重影响样品的检测结果。这样会給病人带来一定的不便，同时也在一定程度上增加了粪便样品检测的难度及工作量。虽然目前市面上已经出现了粪便样品保存的缓冲液或者保护液，但是由于粪便样品中待测成分大部分为蛋白、核酸，因此在液体成分中十分不稳定。此外液体保护液或者缓冲液的价格十分昂贵并且在运输过程中液体样品的泄露的风险往往要大于固体样品。因此针对现状，开发出一种能够以固体形式保存粪便样品的方法显得尤为重要。

发明内容

本发明针对粪便样品处理过程中存在的问题，提供了一种新的处理方法，能够在很大程度上保证粪便样品中待测成分的稳定性，保证后期检测结果的可信度，操作安全简便。

本发明采用以下的技术方案进行操作，包括以下的步骤：

本发明涉及包含有滤膜内袋的粪便样品储存袋以及固体干燥剂，

1.将待测粪便样品置于样品储存袋内袋中；

2.将内袋密封向外袋中加入干燥剂；

3.将整体样品储存袋密封，干燥剂即可吸收粪便样品以及空气中的水分；

优选的，根据临床检验实验需求，干燥后的粪便样品含水量一般小于10％

优选的，所述的干燥剂为无水硫酸镁或无水氯化钙；

由于无水氯化钙价廉且可再生利用，因此本发明干燥剂优选为氯化钙

优选的，无水球状氯化钙粒径一般为2-5mm，优选的粒径为2-3mm；

优选的，无水氯化钙的用量为粪便样品重量的1-3倍；

本发明中所述样品储存袋分为内外袋，其中内袋作为滤袋使用，能够有效的避免粪便样品与干燥剂的接触，从而避免了样品污染，保证样品中待测成分的稳定性；

优选的，外袋材质采用PET/AL复合材料，能够增加储存袋机械强度，并且起到了避光的作用，保证粪便样品的稳定性；

优选的，内袋材质采用PE，孔径为100-200微米，能够有效保证样品及空气中水分通过内袋被干燥剂吸收；

优选的，内袋直径长度为180*420mm，所述内外袋袋口均采用PP塑环，能够方便有效的密封内袋及整体的样品储存袋；

本发明的有益效果为：

本发明通过添加固体干燥剂的方式使粪便样品及空气中的水分能够迅速的被吸收，从而保证了粪便样品的稳定性。本发明采用的固体干燥剂价格低廉，且可再生使用，同时也避免了使用液体保护液或缓冲液所致液体外泄

本发明中样品储存袋的内袋具有滤膜的功效，能够在干燥剂吸收水分的同时很大程度上避免了干燥剂与粪便样品的直接接触，不但利于样品的稳定保存，而且有助于干燥剂的回收再利用。

粪便样品中存在大量的微生物，在干燥的条件下微生物的代谢及生长能够受到明显的抑制。蛋白质、核酸作为后续临床检测中重要的待测成分，其在液体条件下十分不稳定，因此本发明中采用固体干燥剂，能够迅速的吸收样品及空气中的水分，保证后续检测结果的准确性。

本发明的样品处理方法十分简单快捷，无需详细的说明书也可使用，因此使得病人，尤其是老年病人能够在家中自助提取样品送检。

本发明中采用的固体干燥剂为日常生活中常见的干燥剂，不会影响样品的稳定性，更不会对病人、医生及实验室检测人员的身体健康产生危害。采用的无水氯化钙能够再生利用，不但节约成本，而且十分环保。

总之，本发明能够在吸收粪便样品及空气中水分的同时很大程度保持样品的稳定性，操作简便安全，价格低廉，使得一些医疗条件相对落后的地区也能够享受到方便快捷的消化系统疾病的检测服务。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细的描述：

实施例一：

1.设置两组实验，管1和管2均为可密闭的容器，分别向管1及管2内加入粪便样品3g，(所述的粪便样品为经医院诊断检测为肠炎病人的粪便，白细胞镜检结果为8个/高倍视野)

2.管1中加入7g的无水氯化钙干燥剂，密闭管体；管2作为对照不加入干燥剂。保存样品于室温，于第0、1、2、3、6镜下检测白细胞，分别记录。

3.检测方法：取管1及管2中保存的样品进行镜检，检测粪便样品中的白细胞数目，正常粪便中没有或偶见白细胞，当发生肠炎等炎症时，粪便样品中白细胞数目增加。

4.检测结果如下：

5.表1室温条件保存下粪便样品镜检结果

6.如表1所示，采用本发明的处理方法，添加干燥剂的管1在第3天内可检测到白细胞数目为6/高倍视野，第6天为3/高倍视野，而不加入干燥剂的管2在第3天内可检测到的白细胞触目为2/高倍视野，第6天检测不到白细胞。即作为对照的管2自第1天起及白细胞发生降解，第3天出现明显的降解，第6天无法检测。加入干燥剂的管1第2天白细胞开始降解，第6天出现明显的降解，但是仍可检测。说明经过本发明处理后能够有效的防止粪便样品中白细胞的降解，有助于提高检品检测结果的可信度。

实施例二

1.设置两组实验，其中实验一为分别称取同一正常人粪便2g置于密闭的管1和管2中，实验二为分别称取同一结肠癌患者粪便2g置于密闭的管3和管4中。

2.管1中加入5g的无水氯化钙干燥剂，密闭管体，管2作为对照不加入干燥剂；管3中加入5g的无水氯化钙干燥剂，密闭管体，管4作为对照不加入干燥剂。保存样品于室温，于第0、1、2、3、6天从粪便样品中提取的DNA。

3.检测方法：每次检测从各管中分别称取等量的粪便样品，约300mg。随后利用相同的核酸提取试剂盒提取称量粪便样品中的DNA，仪器检测提取的DNA含量。

4.检测结果如表2所示

5.表2室温条件保存样品中提取的DNA的总量

6.

7.如表2所示，采用本发明处理正常人粪便样品后，管1在6天内，可提取到的最小DNA量为0.09μg，而对照管2在6天内可提取到的最小DNA量仅为0.011μg。采用本发明处理结肠癌病人粪便样品后，管1在6天内，可提取到的最小DNA量为0.26μg，而对照管2在6天内可提取到的最小DNA量仅为0.037μg。说明经本发明方法处理后粪便中DNA能够比不经处理保存时间更长，相同质量样品提取的DNA量明显的增加，有效的防止粪便样品中DNA的降解，增加粪便样品稳定性并且能够为后续进一步的基因检测提供充足的DNA样品量，提高诊断结果的准确度和可靠性。

Claims (9)

1.一种粪便样品的处理方法，其特征在于，所述方法如下步骤：

将待测粪便样品装入样品储存袋内袋中，密封内袋向样品储存袋外袋中加入固体干燥剂将样品储存袋密封，固体干燥剂能够吸收粪便样品和空气中的水分。

2.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于干燥后粪便样品中的含水量小于10％。

3.根据权利要求1所述的处理方法，固体干燥剂优选无水氯化钙。

4.根据权利要求3所述，无水氯化钙的粒径为2-3mm。

5.根据权利要求3所述，固体干燥剂的用量为粪便样品量的1-3倍。

6.权利要求1中储存袋外袋的材质为PET/AL复合材料，避光并且增加储存袋的机械强度。

7.权利要求1中储存袋内袋的材质为PE，孔径大小为100-200微米。

8.权利要求6、7中储存袋内袋和外袋的袋口均采用PP塑环，能够有效的封闭内袋。

9.如权利要求1所述的粪便样品的处理方法在检测消化系统疾病以及癌症检测诊断中的应用。