CN106465679A

CN106465679A - 一种人工提取水芹花粉克服水芹杂交花期不遇的方法

Info

Publication number: CN106465679A
Application number: CN201510510756.5A
Authority: CN
Inventors: 熊爱生; 谭国飞; 王枫; 徐志胜
Original assignee: Nanjing Agricultural University
Current assignee: Nanjing Agricultural University
Priority date: 2015-08-19
Filing date: 2015-08-19
Publication date: 2017-03-01

Abstract

一种人工提取水芹花粉克服水芹杂交花期不遇的方法，本发明涉及一种利用人工的方法，提取水芹花粉，用来克服水芹杂交中花期不遇的问题。该技术包括：水芹花粉的提取、干燥、检测、保存、花粉与其它营养元素配比技术。该技术能够较好的解决水芹杂交过程中，存在严重花期不遇的问题，对我国水芹杂交育种具有重要意义，对于促进水芹遗传与育种工作具有重要意义。

Description

一种人工提取水芹花粉克服水芹杂交花期不遇的方法

技术领域

本发明涉及一种利用人工提取水芹花粉的方法，该方法是根据水芹杂交育种过程中，存在严重的花期不育问题以及水芹花粉保存特点设计。该发明包括：水芹花粉的提取、干燥、检测、保存、水芹花粉与其它营养元素配比技术。该技术较好的解决了水芹杂交育种中花期不遇问题，大大提高了水芹杂交的效率。该技术对促进我国水芹育种及遗传研究具有重要意义。

背景技术

杂交育种，一直是遗传育种研究的重要方法，是获得新性状及新品种的最好、最安全途径。花期不遇，一直成为杂交育种的难题。人们常通过人工的方法，如光调节、药剂处理、调整播期、施肥、植株调整等方法，来解决花期不遇问题，取得了一些较好的结果。生产上，这些不同的方法，对某一种或某一类作物效果良好，但是，对其它作物不一定适用。存在严重花期不遇的水芹，很难通过光调节、激素调节、播期调整等来调节不同来源水芹花期相遇。水芹为伞形科植物，以无性繁殖为主，不同地域来源的水芹材料，花期可从4月开始一直延续到10月，水芹有些年份还存在不开花的现象，严重影响水芹杂交育种工作。同时水芹以无性繁殖为主，对表现良好的杂交F1代，便可进行选择扩繁，作为新品种和新材料供蔬菜生产及遗传研究使用，所以克服水芹花期不遇，对水芹育种具有重要意义。为此，我们通过多年在水芹杂交育种探索的基础上，成功的运用人工提取水芹花粉的方法，解决了水芹杂交过程中，存在严重花期不遇问题。该专利对水芹遗传、育种研究具有重要意义。

由于水芹花发育存在严重的花期不遇问题，生产上很难通过人工调节方式，进行花发育调节。通过人工提取花粉保存技术，来解决水芹花期不遇问题。该专利主要涉及到：水芹花采摘、水芹花粉提取、水芹花粉干燥、检测、保存、水芹花粉与其它营养元素配比技术。

附图说明

图1.水芹花采摘部位(箭头处)

图2.粗提的水芹花粉

图3.水芹纯花粉(2mL试管)

图4.显微镜下，检测提取的水芹花粉活力及完整性良好(碱性品红法)

图5.授粉前对水芹花粉萌发检测，活力良好(碘-碘化钾法)

图6.人工提取水芹花粉授粉后得到的水芹杂交种

发明内容

1.本发明目的在于提供一种人工提取水芹花粉方法，克服水芹杂交过程中存在的花期不遇问题。

2.发明通过人工提取水芹花粉，克服水芹杂交花期不遇过程中，涉及的技术方法及其参数控制，从而解决水芹花期不育问题。

具体实施方式

1、采摘水芹花的时间。水芹花采摘应在早上进行，采摘时水芹花序上约有50～75％花开放，能明显看到花丝露出，且雄蕾由白色变成黄色为宜。采摘时将整个水芹花序剪下(图1)，放入干净的、凉爽的容器中。采摘水芹花时应注意避光，以免水芹花粉散开。

2、水芹花的培养。采摘的水芹花，将花朝上，放至于培养箱中。培养箱采用荧光灯为光源，光密度为200～500μmol·(m^-2·s)^-1，温度在25～28℃，湿度在65％～75％，防止水芹花萎蔫。培养一天后，雄蕾将散开花粉。

3、水芹花粉粗提。将水芹花放置不锈钢盘子中，进行促进水芹花药散开花粉。此时湿度降低到40％～50％，温度降低到22℃左右，5～8小时后，用手将花丝搓下，为粗提的水芹花粉(图2)。

4、粗提水芹花粉的精提。粗提的水芹花粉，由于存在大量的花丝等杂物，严重影响水芹花粉保存。精提花粉是通过200目的筛子，将花粉与杂物分离，得到纯净的水芹花粉。

5、水芹花粉干燥。水芹花粉干燥是为了长时间保存花粉，花粉干燥方法，采用暗室阴干方法，温度控制在22±2℃，阴干12小时，水分含量在10～13％即可。阴干的水芹花粉，呈现出白黄色(图3)，干燥的水芹花粉经过碱性品红检测其活力及花粉完整性后(图4)，及时进行小袋或试管包装。

6、水芹花粉保存技术。干燥的水芹花粉应在逐渐降低温度的冷藏库中进行保存，冷藏库温度降低为5℃/小时，最终冷藏温度控制在2～4℃。水芹花粉可保存1～3年。

7、水芹花粉的活性检测。水芹花粉进行授粉时，将分装好的水芹花粉，按需求拿取。拿取的水芹花粉，可采用温度逐渐升高方式，进行5℃/小时升温，温度到室温即可。检测采用碘-碘化钾配制溶液进行检测，检测水芹花粉萌发率是否正常(图5)。

8、水芹花粉与微量元素的配制。为了提高水芹花粉在柱头上的萌发率，需要按照一定的比例与微量元素碱性配制，微量元素包括：硼、镁等(配方未公布)，然后对事先去雄好的水芹花上，采用棉球方式进行授粉。

9.结果1：得到质量高、活力良好的水芹花粉。

10.结果2：经过水芹花粉提取，授粉给水芹，得到杂交水芹种子(图6)。

Claims

1.一种利用人工的方法，提取水芹花粉，克服水芹杂交中的花期不遇问题。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于该技术在水芹杂交育种中的应用。

3.根据权利要求2所述，杂交过程中所涉及使用的材料，以及该技术涉及到的药品配制和各种技术参数等，在水芹杂交育种中的应用。