CN106459839A - 多肽的用途 - Google Patents

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CN106459839A CN201580024455.XA CN201580024455A CN106459839A CN 106459839 A CN106459839 A CN 106459839A CN 201580024455 A CN201580024455 A CN 201580024455A CN 106459839 A CN106459839 A CN 106459839A
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L.E.T.巴尔森
M.阿莱森-霍尔姆
K.戈里
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Abstract

本发明涉及具有脱氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少物品上的污垢的再沉积的用途。本发明进一步涉及包括具有脱氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽的洗涤剂组合物和用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少物品上的污垢的再沉积的方法。

Description

多肽的用途
对序列表的引用
本申请包括计算机可读形式的序列表,将其通过引用结合在此。
发明领域
本发明涉及具有脱氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少物品上的污垢的再沉积的用途。本发明进一步涉及包括具有脱氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽的洗涤剂组合物和用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少物品上的污垢的再沉积的方法。
发明背景
在许多自然、工业和医疗环境中,微生物一般附着于表面而生存,由包括生物聚合物和高分子的细胞外物质进行囊化。经粘液囊化的微生物所产生的层被称为生物膜。生物膜是细菌在自然环境中生长的主要模式,并且在生物膜中生长的细菌表现出独特的生理性质。与其浮游生长的对应物相比,生物膜中的细菌更耐受抗生素、紫外光照射、洗涤剂和宿主免疫应答。
随时间流逝,衣物物品像男衬衫和女衬衫变得越来越灰,这已经是一个多年已知的问题。针对平常天服装连同运动服,汗水和由此产生的气味是一个挑战。这些污渍通常由粘附到该衣服的纺织品上的许多不同组分组成并且会难以溶解并去除。当使用衣物物品(像T恤或运动服)时,它们与来自使用者的身体的汗水和细菌以及来自它们使用的环境的其余部分的其他种类的污物接触。这些细菌中的一些能够粘附于衣物物品并且在该物品上形成生物膜。细菌的存在意味着,衣物物品变得粘稠,并且因此污垢粘附在粘稠区域上。这种污垢已经显示出难以通过可商购的洗涤剂组合物来去除。此外,当非常脏的衣物物品与不太脏的衣物物品一起洗涤时,洗涤液中存在的污物倾向于附着于生物膜上。其结果是,该衣物物品在洗涤后比洗涤前更“脏”并且更灰。
运动服是一个很好的实例,因为在与非常汗湿的男衬衫一起洗涤的这些衣服上通常存在污垢、泥土和交通污物。从洗涤到洗涤,衣服变得越来越灰并且它们最终表现为形成的斑点。这种污物是人们丢弃他们的衣服的一个原因。尽管该问题在大多数衣服中是熟知的,但该问题对于混合织物是非常显著的。欧洲有一种政治意愿,即要保护洗涤的资源,这导致他们采用了欧盟中针对洗涤机的标签法以排除具有高能耗的机器。这意味着冷水洗涤在欧盟中远远更普遍,并且因此变得更像世界其他地方的洗涤环境。然而,通过在更低温度下洗涤而节约能量会导致消费者丢弃衣服并购买新衣服,因为汗渍没有被适当地去除。存在一种迫切需要以解决有效地去除汗渍的问题。
国际专利申请WO 2011/098579涉及细菌脱氧核糖核酸酶化合物以及用于破坏和预防生物膜的方法。
发明概述
本发明涉及具有DNA酶活性的多肽用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少物品上的污垢的再沉积的用途。本发明进一步涉及包括具有脱氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽的洗涤剂组合物。进一步要求保护的是用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少物品上的污垢的再沉积的方法,该方法包括以下步骤:
a)将物品与根据本发明所述的组合物或包含具有DNA酶活性的多肽的液体溶液接触;以及
b)任选地冲洗该物品,
其中该物品是纺织品或硬表面。
定义
术语烷基是指直链的或支链的、饱和的或不饱和的烃基部分。除非另外说明,烷基部分优选地是饱和的或具有双键的不饱和的,优选地具有一个或两个双键。酰基基团的烷基部分包括在该术语“烷基”中。
术语“自动餐具洗涤组合物”是指旨在在洗碗机中清洁餐具,例如盘子、杯子、玻璃杯、碗、用餐工具(例如匙、刀、叉)、上菜用具、陶瓷、塑料、金属、瓷器、玻璃及丙烯酸酯的组合物。该术语涵盖经选择用于家庭或工业洗涤应用的任何材料/化合物并且产品形式可以是液体、粉末或颗粒。除脂肪酶之外,该自动餐具洗涤组合物包含洗涤剂组合物,如聚合物、漂白系统、漂白活化剂、漂白催化剂、硅酸盐、染料和金属护理剂。
等位基因变体:术语“等位基因变体”意指占据同一染色体基因座的基因的两种或更多种可替代形式中的任一种。等位基因变异由突变天然产生,并且可以导致群体内的多态性。基因突变可以是沉默的(在所编码的多肽中没有改变)或可编码具有改变的氨基酸序列的多肽。多肽的等位基因变体是由基因的等位基因变体编码的多肽。
细菌的:在本发明的上下文中,术语“细菌的”相对于多肽(如酶,例如,DNA酶)是指由细菌基因组编码并且因此直接从细菌基因组衍生的多肽,其中这种细菌未经过遗传修饰来编码所述多肽,例如,通过重组DNA技术将编码序列引入基因组中。因此,在本发明的上下文中,术语“细菌DNA 酶”或“获得自细菌来源的具有DNA酶活性的多肽”或“细菌来源的多肽”是指由细菌物种的基因组编码并且因此直接从细菌物种的基因组可衍生的DNA酶,其中该细菌物种未经受通过引入编码所述DNA酶的重组DNA进行的遗传修饰。因此,编码具有DNA酶活性的细菌多肽的核苷酸序列是细菌物种遗传背景中的天然序列。由这种序列编码的具有DNA酶活性的细菌多肽还可以是指野生型DNA酶(或亲本DNA酶)。在另一个方面中,本发明提供了具有DNA酶活性的多肽,其中所述多肽与细菌DNA酶基本上同源。在本发明的上下文中,术语“基本上同源”表示一种具有DNA酶活性的多肽,该多肽与所选择的细菌DNA酶的氨基酸序列具有至少80%,优选地至少85%,更优选地至少90%,更优选地至少95%,甚至更优选地至少96%、97%、98%,以及最优选地至少99%的一致性。
生物膜:生物膜是其中细胞彼此粘附在一起或粘附至表面(例如纺织品、餐具或硬表面)或另一种表面的任何群组的微生物。这些粘附细胞经常包埋在胞外高聚物(EPS)的自身产生的基质内。生物膜EPS是一般由细胞外的DNA、蛋白、和多糖组成的聚合物团块。生物膜可以形成在活的或非活的表面上。在生物膜中生长的微生物细胞与同一有机体的浮游细胞(相比之下,浮游细胞是可以在液体培养基中漂浮或浮游的单个细胞)是在生理上不同的。
生活在生物膜中的细菌通常与同一物种的浮游细菌具有显著不同的特性,因为被膜的密集并且受保护的环境允许它们以不同方式协作和相互作用。微生物的这一环境的一个益处是增加对洗涤剂和抗生素的抗性,因为,密集的细胞外基质和细胞的外层保护群落的内部。
在衣物上,会发现产生生物膜的细菌是在以下物种中:不动杆菌属物种、气微菌属物种、短波单胞菌属物种、微杆菌属物种、滕黄微球菌、假单胞菌属物种、表皮葡萄球菌、和寡养单胞菌属物种。在硬表面上,产生生物膜的细菌可以发现于以下物种中:不动杆菌属物种、气微菌属物种、短波单胞菌属物种、微杆菌属物种、滕黄微球菌、假单胞菌属物种、表皮葡萄球菌、和寡养单胞菌属物种。在一个实施例中,产生生物膜的菌株是短波单胞菌属物种。在一个实施例中,产生生物膜的菌株是嗜碱性假单胞菌或荧光假单胞菌。
cDNA:术语“cDNA”意指可以通过从得自真核或原核细胞的成熟的、剪接的mRNA分子进行反转录而制备的DNA分子。cDNA缺乏可以存在于对应基因组DNA中的内含子序列。早先的初始RNA转录本是mRNA的前体,其在呈现为成熟的剪接的mRNA之前要经一系列的步骤进行加工,包括剪接。
编码序列:术语“编码序列”意指直接指定一个多肽的氨基酸序列的多核苷酸。编码序列的边界一般由开放阅读框架决定,该开放阅读框架从起始密码子(如ATG、GTG或TTG)开始并且以终止密码子(如TAA、TAG或TGA)结束。编码序列可以是基因组DNA、cDNA、合成DNA或其组合。
色差(L值):Lab色彩空间是针对明度具有尺寸L的色彩对立空间。L值,L*代表在L*=0下的最暗的黑色,并且为在L*=100下的最亮的白色。在本发明的上下文中,L值还称为色差。在本专利申请的实例中使用了色差法。
控制序列:术语“控制序列”意指对于表达编码本发明的成熟多肽的多核苷酸所必需的核酸序列。每个控制序列对于编码该多肽的多核苷酸来说可以是天然的(即,来自相同基因)或外源的(即,来自不同基因),或相对于彼此是天然的或外源的。这些调控序列包括但不限于前导序列、聚腺苷酸化序列、前肽序列、启动子、信号肽序列和转录终止子。至少,控制序列包括启动子,以及转录和翻译终止信号。出于引入有利于将这些控制序列与编码一种多肽的多核苷酸的编码区连接的特异性限制酶切位点的目的,这些控制序列可以提供有多个接头。
关于术语“深度清洁”意指生物膜或生物膜的组分,例如多糖、蛋白、DNA、污垢或生物膜中存在的其他组分的破坏、减少或去除。任何不破坏、减少或去除生物膜的清洁不是深度清洁。
洗涤剂组分:在此将术语“洗涤剂组分”定义为意指可以用于洗涤剂组合物中的化学品的类型。
洗涤剂组合物:术语“洗涤剂组合物”是指用于从有待清洁的物品(例如纺织品)去除不希望的化合物的组合物。该洗涤剂组合物可以用于例如清洁纺织品,用于家用清洁剂和工业清洁二者。这些术语涵盖选择用于希望的具体类型的清洁组合物和产品的形式(例如,液体、凝胶、粉末、颗粒、糊状、或喷雾组合物)的任何材料/化合物,并且包括但不限于洗涤剂组合物(例如,液体和/或固体衣物洗涤剂和精细织物洗涤剂;织物清新剂;织物柔软剂;以及纺织品和衣物预去污剂/预处理)。除了包含本发明的酶之外,该洗涤剂配制品还可以包含一种或多种另外的酶(例如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、角质酶、纤维素酶、内切葡聚糖酶、木葡聚糖酶、果胶酶、果胶裂解酶、黄原胶酶、过氧化物酶、卤代过氧合酶、过氧化氢酶以及甘露聚糖酶,或其任何混合物),和/或洗涤剂佐剂成分,例如表面活性剂、助洗剂、螯合剂(chelator)或螯合试剂(chelating agent)、漂白系统或漂白组分、聚合物、织物调理剂、增泡剂、抑泡剂、染料、香料、晦暗抑制剂、光学增亮剂、杀细菌剂、杀真菌剂、污垢悬浮剂、防蚀剂、酶抑制剂或稳定剂、酶激活剂、一种或多种转移酶、水解酶、氧化还原酶、上蓝剂和荧光染料、抗氧化剂以及增溶剂。
餐具:术语“餐具”旨在意指任何形式的厨房用具、成套餐具或餐桌用餐具,例如但不限于锅、陶器、用餐工具,例如盘子、杯子、刀、叉、匙、瓷器等。
餐具洗涤组合物:术语“餐具洗涤组合物”是指包括洗涤剂组分的组合物,该组合物是适合的并且旨在用于清洁餐具、餐桌用餐具、陶器、罐、锅、用餐工具。在本发明的一个实施例中,该餐具洗涤组合物可以用于清洁厨房中的硬表面区域。本发明不局限于任何具体类型的餐具洗涤组合物或任何具体洗涤剂。
DNA酶(脱氧核糖核酸酶):术语“DNA酶”意指具有DNA酶活性的多肽,该多肽催化DNA主链中的磷酸二酯键的水解断裂,从而降解DNA。出于本发明的目的,根据测定I中所描述的程序确定DNA酶活性。在一个方面中,本发明的这些多肽具有SEQ ID NO:2的成熟多肽的至少20%,例如至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或至少100%的DNA酶活性。出于本发明的目的,可以根据测定I中所描述的程序确定DNA酶活性。在本发明的一个实施例中,多肽具有的DNA酶活性是参照SEQ ID NO:2的成熟多肽的DNA酶活性的至少105%,例如至少110%、至少120%、至少130%、至少140%、至少160%、至少170%、至少180%、或至少200%,包含SEQ ID NO:3中所阐明的序列或由其组成的多肽,包含SEQ ID NO:5中所阐明的序列或由其组成的多肽,包含SEQ ID NO:6的成熟多肽或由其组成的多肽,包含SEQ ID NO:7的成熟多肽或由其组成的多肽或包含SEQ ID NO:8的成熟多肽或由其组成的多肽。
酶洗涤益处:在此将术语“酶洗涤益处”定义为将一种酶添加至洗涤剂中与不具有该酶的同一洗涤剂相比的有利效果。可以由酶提供的重要的洗涤益处是在洗涤和/或清洁之后没有或有非常少的可见污垢的污渍去除,预防或减少在洗涤过程中释放的污垢的再沉积(一种也被称作抗再沉积的效果),完全或部分恢复纺织品的白度(一种也被称作增白的效果),这些纺织品初始是白色的但是在重复使用和洗涤后获得浅灰色或浅黄色的外观。不直接与污垢的催化去污或其再沉积的预防相关的纺织品护理益处对于酶洗涤益处而言也是重要的。此类纺织品护理益处的实例是预防或减少染料从一织物转移至另一织物或同一织物的另一部分(一种也被称作染料转移抑制或抗返染的效果),从织物表面去除突出或断裂的纤维以减少起球倾向或去除已经存在的绒球或绒毛(一种也被称作抗起球的效果),改进织物柔软性,织物的颜色澄清以及去除陷在织物或服装的纤维中的微粒状污垢。酶漂白是一种另外的酶洗涤益处,其中通常将催化活性用于催化漂白组分(例如过氧化氢或其他过氧化物)的形成。
表达:术语“表达”包括涉及多肽产生的任何步骤,包括但不限于,转录、转录后修饰、翻译、翻译后修饰、以及分泌。
表达载体:术语“表达载体”意直链性或环状DNA分子,该分子包含编码多肽的多核苷酸并且该多核苷酸可操作地与提供用于其表达的控制序列相连接。
片段:术语“片段”意指从成熟多肽或结构域的氨基和/或羧基末端缺失的一个或多个(例如,若干个)氨基酸的多肽;其中片段具有DNA酶活性。在一个方面中,该片段包含至少206个氨基酸残基(例如,SEQ ID NO:2的氨基酸1至206)、至少205个氨基酸残基(例如,SEQ ID NO:2的氨基酸2至206)、或至少204个氨基酸残基(例如,SEQ ID NO:2的氨基酸3至206)。在一个方面中,片段包含至少139个氨基酸残基(例如,SEQ ID NO:5的氨基酸50至188)、或至少188个氨基酸残基(例如,SEQ ID NO:5的氨基酸1至188)。
真菌的:在本发明的上下文中,术语“真菌的”相对于多肽(如酶,例如,DNA酶)是指由真菌基因组编码并且因此直接从真菌基因组衍生的多肽,其中这种真菌未经过遗传修饰来编码所述多肽,例如,通过重组DNA技术将编码序列引入基因组中。因此,在本发明的上下文中,术语“真菌DNA酶”或“获得自真菌来源的具有DNA酶活性的多肽”或“真菌来源的多肽”是指由真菌基因组编码并且因此直接从真菌基因组衍生的DNA酶,其中该真菌物种未经受通过引入编码所述DNA酶的重组DNA进行的遗传修饰。因此,编码具有DNA酶活性的真菌多肽的核苷酸序列是真菌物种遗传背景中的天然序列。由这种序列编码的具有DNA酶活性的真菌多肽还可以是指野生型DNA酶(或亲本DNA酶)。在另一个方面中,本发明提供了具有DNA酶活性的多肽,其中所述多肽与真菌DNA酶基本上同源。在本发明的上下文中,术语“基本上同源”表示一种具有DNA酶活性的多肽,该多肽与所选择的真菌DNA酶的氨基酸序列具有至少80%,优选地至少85%,更优选地至少90%,更优选地至少95%,甚至更优选地至少96%、97%、98%,以及最优选地至少99%的一致性。
硬表面:术语“硬表面”在本文中定义为不吸水的表面。具体来说,术语“硬表面”不涵盖纺织品或织物。
因此,具有硬表面并落入该术语的预期含义内的物品包括家庭表面,医院/机构中的表面和室外表面,如地板、墙壁、屋顶等,连同硬物体如汽车(汽车洗涤)表和其他家具的表面,以及餐具。餐具洗涤包括但不限于陶器,如杯子,玻璃杯,碗,用餐工具(例如匙、刀、叉),上菜用具,以及用陶瓷、塑料、金属、瓷器、玻璃及丙烯酸酯制成的其他物品等。
硬表面洗涤剂组合物:术语“硬表面洗涤剂组合物”指的是包括洗涤剂组分的组合物,该组合物是适合的并且旨在用于清洁硬表面区域。本发明不限于任何具体类型的硬表面组合物或任何具体的洗涤剂。
宿主细胞:术语“宿主细胞”意指易于用包含本发明的多核苷酸的核酸构建体或表达载体转化、转染、转导等的任何细胞类型。术语“宿主细胞”涵盖由于复制期间发生的突变而与亲本细胞不同的亲本细胞的任何后代。
分离的:术语“分离的”意指处于自然界中不存在的形式或环境中的物质。分离的物质的非限制性实例包括(1)任何非天然存在的物质,(2)包括但不限于任何酶、变体、核酸、蛋白、肽或辅因子的任何物质,该物质至少部分地从与其本质相关的一种或多种或所有天然存在的成分中去除;(3)相对于天然发现的物质通过人工修饰的任何物质;或(4)通过相对于与其天然相关的其他组分,增加物质的量而修饰的任何物质(例如宿主细胞中的重组产生;编码该物质的基因的多个拷贝;以及使用比与编码该物质的基因天然相关的启动子更强的启动子)。分离的物质可以存在于发酵液样品中,例如,可以将宿主细胞进行遗传修饰来表达本发明多肽。来自宿主细胞的发酵液将包括分离的多肽。
洗涤:术语“洗涤”涉及家用洗涤和工业洗涤两者并且意指用包含本发明的清洁或洗涤剂组合物的溶液处理纺织品的过程。洗涤过程可以例如使用例如家用或工业洗涤机进行或可以手动进行。
关于术语“恶臭”意指在清洁物品上不希望的气味。清洁的物品应气味清新并且干净,而没有附着在该物品上的恶臭。恶臭的一个实例是具有使人不愉快的气味的化合物,这些化合物可以是微生物产生的。另一实例是令人不愉悦的气味可以是附着至已经与人类或动物接触的物品的汗水或体味。恶臭的另一实例可以是来自香料的气味,其粘附于物品,例如气味强烈的咖喱或其他异国香料。测量物品附着恶臭的能力的一个方式是通过使用如在实例5和6中的测定II。
成熟多肽:术语“成熟多肽”意指在翻译和任何翻译后修饰如N末端加工、C末端截短、糖基化作用、磷酸化作用等之后处于其最终形式的多肽。在一个方面中,成熟多肽是SEQID NO:2的氨基酸1至206,并且SEQ ID NO:2的氨基酸-37至-16是信号肽,并且SEQ ID NO:2的氨基酸-15至-1是前肽。在一个方面中,该成熟多肽是SEQ ID NO:5的氨基酸1至188,并且SEQ ID NO:2的氨基酸-17至-1是信号肽。在一个方面中,成熟多肽是SEQ ID NO:6的氨基酸1至110,成熟多肽是SEQ ID NO:7的氨基酸1至109或成熟多肽是SEQ ID NO:8的氨基酸1至206。本领域已知,宿主细胞可以产生由同一多核苷酸表达的两种或更多种不同成熟多肽(即,具有不同C-末端和/或N-末端氨基酸)的混合物。本领域还已知,不同的宿主细胞不同地加工多肽,并且因此一个表达一种多核苷酸的宿主细胞当与另一个表达相同多核苷酸的宿主细胞相比时可以产生一种不同的成熟多肽(例如,具有一个不同的C-末端和/或N-末端氨基酸)。在一个方面中,成熟多肽包含SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:8的高达206个氨基酸残基(例如,SEQ ID NO:2的氨基酸1至206)、或高达204个氨基酸残基(例如,SEQ ID NO:2的氨基酸3至206)。
成熟多肽编码序列:术语“成熟多肽编码序列”意指编码具有DNA酶活性的成熟多肽的多核苷酸。在一个方面中,成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:1的核苷酸1至242、309至494、556至714和766至907。在一个方面中,该成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:4的核苷酸52至864,其中在SEQ ID NO:4中的氨基酸序列中的位置76-164、289-362和520-615中预测三个内含子。分泌信号存在于SEQ ID NO:4的位置1-51中的氨基酸处。
核酸构建体:术语“核酸构建体”意指单链或双链的核酸分子,该核酸分子是从天然存在的基因中分离的,或以本来不存在于自然界中的方式被修饰成包含核酸的区段,或是合成的,该核酸分子包括一个或多个控制序列。
可操作地连接:术语“可操作地连接”意指如下的构造,其中,控制序列相对于多核苷酸的编码序列安置在适当位置,从而使得该控制序列指导该编码序列的表达。
序列一致性:用参数“序列一致性”来描述两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的相关性。出于本发明的目的,使用如在EMBOSS包(EMBOSS:欧洲分子生物学开放软件套件(The European Molecular Biology Open Software Suite),赖斯(Rice)等人,2000,遗传学趋势(Trends Genet.)16:276-277)(优选5.0.0版或更新版本)的尼德尔(Needle)程序中所实施的尼德尔曼-翁施(Needleman-Wunsch)算法(Needleman(尼德尔曼)和Wunsch(翁施),1970,分子生物学杂志(J.Mol.Biol.)48:443-453)可以确定两个氨基酸序列之间的序列一致性。所使用的参数是空位开放罚分10,空位延伸罚分0.5,以及EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版本)取代矩阵。将标记为“最长同一性”的Needle输出(使用-nobrief选项获得)用作百分比同一性并且是如下计算的:
(一致的残基X 100)/(比对长度-比对中的空位总数)
为了本发明的目标,使用Needleman(尼德曼)-Wunsch(翁施)算法(Needleman(尼德曼)和Wunsch(翁施),1970,同上)可以确定两个脱氧核糖核苷酸序列之间的序列一致性,如在EMBOSS包中的Needle(尼德尔)程序中实施(EMBOSS:The European MolecularBiology Open Software Suite(EMBOSS:欧洲分子生物学开放软件套装),Rice(赖斯)等人,2000,同上),优选是版本5.0.0或更新版本。所使用的参数是空位开放罚分10,空位拓展罚分0.5,和EDNAFULL(NCBI NUC4.4的EMBOSS版)取代矩阵。将标记为“最长同一性”的Needle输出(使用-nobrief选项获得)用作百分比同一性并且是如下计算的:
(一致的脱氧核糖核苷酸X 100)/(比对长度-比对中的空位总数)
严格条件:术语“非常低严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言,遵循标准DNA印迹程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑精DNA和25%甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在45℃下使用2X SSC、0.2%SDS将载体材料洗涤三次,每次15分钟。
术语“低严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言,遵循标准DNA印迹程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑精DNA和25%甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在50℃下使用2X SSC、0.2%SDS将载体材料洗涤三次,每次15分钟。
术语“中严格条件”是指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言,遵循标准DNA印迹程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑精DNA和35%甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在55℃下使用2X SSC、0.2%SDS将载体材料洗涤三次,每次15分钟。
术语“中-高严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言,遵循标准DNA印迹程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑精DNA和35%甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在60℃下使用2X SSC、0.2%SDS将载体材料洗涤三次,每次15分钟。
术语“高严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言,遵循标准DNA印迹程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑精DNA和50%甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在65℃下使用2X SSC、0.2%SDS将载体材料洗涤三次,每次15分钟。
术语“非常高严格条件”是指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言,遵循标准DNA印迹程序,在42℃下在5X SSPE、0.3%SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑精DNA和50%甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在70℃下使用2X SSC、0.2%SDS将载体材料洗涤三次,每次15分钟。
子序列:术语“子序列”意指使一个或多个(例如,若干个)核苷酸从成熟多肽编码序列的5'端和/或3'端缺失的多核苷酸;其中该子序列编码具有DNA酶活性的片段。在一个方面中,子序列包含至少796个核苷酸(例如,SEQ ID NO:1的核苷酸112至907),至少793个核苷酸(例如,SEQ ID NO:1的核苷酸115至907),或至少790个核苷酸(例如,SEQ ID NO:1的核苷酸118至907)。在一个方面中,子序列包含至少587个核苷酸(例如,SEQ ID NO:4的核苷酸278至864)、至少650个核苷酸(例如,SEQ ID NO:4的核苷酸215至864)、或至少816个核苷酸(例如,SEQ ID NO:4的核苷酸52至864)。
纺织品:术语“纺织品”意指包括纱线、纱线中间体、纤维、非机织物材料、天然材料、合成材料、以及任何其他纺织品材料的任何纺织品材料,这些材料制造的织物和由这些织物制成的产品(例如服装和其他物品)。该纺织品或织物可以处于针织品、机织物、牛仔布、非机织物、毡、纱线、以及毛巾布的形式。这些纺织品可以是纤维素基的,如天然纤维素,包括棉布、亚麻/亚麻布、黄麻、苎麻、剑麻或椰壳纤维或者人造纤维素(例如,来源于木浆),包括纤维胶/人造丝、醋酸纤维素纤维(三胞)、莱赛尔纤维(lyocell)或其共混物。纺织品或织物也可以不基于纤维素,如天然聚酰胺,包括羊毛、驼毛、羊绒、马海毛、兔毛和蚕丝或合成聚合物如尼龙、芳族聚酰胺、聚酯、丙烯酸、聚丙烯和氨纶/弹性纤维(spandex/elastane)、或其共混物其以及基于纤维素和不基于纤维素的纤维的共混物。共混物的实例是棉布和/或人造丝/纤维胶与一种或几种伴随材料的共混物,该伴随材料例如是羊毛、合成纤维(例如聚酰胺纤维、丙烯酸纤维、聚酯纤维、聚氯乙烯纤维、聚氨酯纤维、聚脲纤维、芳族聚酰胺纤维)和/或含纤维素的纤维(例如人造丝/纤维胶、苎麻、亚麻/亚麻布、黄麻、醋酸纤维素纤维、莱赛尔纤维)。织物可以是常规的可洗涤衣物,例如弄脏的家居衣物。当使用术语织物或衣服时,旨在也包括广义术语纺织品。
变体:术语“变体”意指在一个或多个(例如,若干个)位置包括改变(即,取代、插入和/或缺失)的与亲本酶具有相同活性的多肽。取代意指占据一个位置的氨基酸由不同的氨基酸代替;缺失意指去除占据一个位置的氨基酸;以及插入意指在占据一个位置的氨基酸的毗邻处和紧邻处添加一个氨基酸。在本发明的上下文中,所鉴别的DNA酶的变体具有亲本的酶活性,即,催化DNA主链中的磷酸二酯键水解断裂的能力(脱氧核糖核酸酶活性)。在一个实施例中,变体的脱氧核糖核酸酶活性关于亲本DNA酶是增加的,例如,SEQ ID NO:2的成熟多肽。
洗涤周期:在此将术语“洗涤周期”定义为一个洗涤操作,其中将纺织品浸泡在洗液中,将某种机械作用施加至该纺织品,以释放污渍,并且协助洗液流进和流出该纺织品,并且最终去除多余的洗液。在一个或多个洗涤周期后,总体上对该纺织品进行冲洗和干燥。
洗涤液:术语“洗涤液”旨在表示任选地包括用于将纺织品洗涤、用于硬表面清洁或用于餐具洗涤的酶类的水和洗涤剂的溶液或混合物。
发明详述
如以上所述的,随时间流逝,衣物物品像男衬衫和女衬衫失去白度或变得越来越灰,这已经是一个多年已知的问题。据信,这个问题的一部分是由于洗涤期间污垢的再沉积,使得当非常脏的衣物物品与不太脏的衣物物品一起洗涤时,洗涤液中存在的污物倾向于粘附到所述衣物物品上。其结果是,该衣物物品在洗涤后比洗涤前变得更“脏”并且更灰。本发明的诸位发明人已经出人意料地发现,具有DNA酶活性的多肽的使用可以用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少污垢的这种再沉积。该物品可以是纺织品或硬表面,例如餐具。
本发明的诸位发明人已经发现,当将物品,例如衣物物品与具有脱氧核糖核酸酶活性的多肽接触时,该衣物物品在没有DNA酶存在的随后的洗涤之后比类似的衣物物品更干净并且更少变灰,该类似的衣物物品没有与具有DNA酶活性的多肽进行接触,参见实例1和2。本发明的诸位发明人已经发现,具有DNA酶活性的多肽可用于保持或改进物品的白度,参见例如实例1和2。
此外,本发明涉及具有DNA酶活性的多肽用于在随后的其中没有使用DNA酶的清洁或洗涤过程期间防止或减少污垢和/或气味粘附至物品上的用途,参见实例1-7。
本发明的诸位发明人已经发现,具有DNA酶活性的多肽的使用可以防止或减少来自物品,例如纺织品(参见实例3至7),硬表面,例如餐具的恶臭。在本发明的一个实施例中,该恶臭由E-2-壬烯醛引起。
在常规的洗涤方法中,恶臭甚至可以在洗涤过程和干燥过程中幸存。这具有以下效果:当使用纺织品时,可以感受到恶臭。这对于纺织品的使用者而言是令人非常不快的,即当穿着甚至在开始体育活动之前便闻到气味的运动衣时。这对于选择购买新运动服而不是难闻的运动服的纺织品的使用者而言会是尴尬的。通过使用本发明,这被避免并且因而由于使用有限的资源资料(如用于新的纺织品的原料)、水、能量以及环境污染而节约环境。在本发明的一个实施例中,防止、减少或去除在洗涤后的干物品上存在的E-2-壬烯醛的量。
本发明的一个优势在于这种恶臭不会从湿的衣物出现,即当打开洗涤机时。这使得洗涤过程在家庭和工业应用中都变成一项更具吸引力的任务。
本发明的另一个优势在于,当从洗涤机或洗涤液中直接取出湿的衣物时,衣物没有恶臭并且感觉到是干净的。因而,节省了用于不必要的第二次或甚至第三次洗涤的时间、金钱和能量。这对于环境而言具有巨大优势。
在本发明的一个实施例中,该物品与具有DNA酶活性的多肽接触。例如可以将具有DNA酶活性的多肽喷洒至该物品上。由此可以通过喷洒该多肽至例如地毯、地板或板材上来减少或去除污垢和/或气味的沉积。
防止或减少再沉积的另一种方式是使物品与包含具有DNA酶活性的多肽的液体溶液接触。该物品可以与液体溶液例如通过将物品浸泡在该液体溶液中进行接触。该液体溶液可以是洗涤液,并且可以同时洗涤该物品。本发明的该实施例优选用于可以同时洗涤的纺织品,例如洗涤纺织品。在本发明的一个实施例中,纺织品是新生产的,并且在该纺织品生产之后通过用具有DNA酶活性的多肽洗涤、浸泡或浸渍该纺织品来进行预处理。通过浸渍该物品(例如纺织品),该物品可以更抗污垢和/或气味在物品上的沉积。
该洗涤液也可以用于洗涤需要抗再沉积处理的地板或其它硬表面。
该液体溶液也可以是浸渍液体,该浸渍液体防止物品在随后的清洁或洗涤过程期间积累污物。用于浸渍的液体溶液可以同时用作洗涤剂和抗再沉积溶液。
在本发明的一个实施例中,具有DNA酶活性的多肽用于在随后的清洁或洗涤过程之前清洁或洗涤该物品至少一次,其中该随后的洗涤过程可能不包括DNA酶的使用。在一个实施例中,具有DNA酶活性的多肽不用于随后的清洁或洗涤过程。
在一个实施例中,该具有DNA酶活性的多肽用于在随后的清洁或洗涤过程之前清洁或洗涤该物品至少两次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次或十次。在一个实施例中,具有DNA酶活性的多肽用于在随后的清洁或洗涤过程之前清洁或洗涤该物品至少两次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次或十次,其中该随后的清洁或洗涤过程不使用具有DNA酶活性的多肽。
本发明进一步涉及洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括具有脱氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的的多肽和表面活性剂,其中该组合物满足以下a)或b)中的至少一个:
a)该组合物进一步包括气味控制剂;和/或
b)该表面活性剂不是阳离子表面活性剂。
该气味控制剂选自下组,该组由以下各项组成:环糊精及其混合物、气味阻断剂、反应性醛、黄酮类、金属盐、沸石、活性炭、疏水修饰的恶臭控制聚合物(HMP’s)、异噻唑啉酮的衍生物,如苯并异噻唑啉酮,和/或挥发性醛。
在本发明的一个实施例中,该组合物包括苯并异噻唑啉酮并且用于防止、减少或去除生物膜,用于减少恶臭,用于改进白度和/或用于减少再沉积。苯并异噻唑啉酮是广泛使用的杀生物剂,并且属于异噻唑啉酮的组。
在本发明的一个实施例中,表面活性剂是非离子表面活性剂、阴离子表面活性剂、两性离子表面活性剂或半极性表面活性剂。
该表面活性剂可以是选自下组的阴离子表面活性剂,该组由以下各项组成:硫酸盐和磺酸盐,如直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)(如十二烷基硫酸钠(SDS))、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES,也被称为醇乙氧基硫酸盐或脂肪醇醚硫酸盐)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α- SFMe或SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸或脂肪酸盐(皂)的二酯和单酯及其组合。
该阴离子表面活性剂的量按重量计是从约1%至约40%,如从约5%至约30%,包括从约5%至约15%、或从约15%至约20%、或从约20%至约25%。
该表面活性剂可以是选自下组的非离子表面活性剂,该组由以下各项组成:醇乙氧基化物(AE或AEO)、醇丙氧基化物、丙氧基化的脂肪醇(PFA)、烷氧基化的脂肪酸烷基酯(例如乙氧基化的和/或丙氧基化的脂肪酸烷基酯)、烷基酚乙氧基化物(APE)、壬基酚乙氧基化物(NPE)、烷基多糖苷(APG)、烷氧基化胺、脂肪酸单乙醇酰胺(FAM)、脂肪酸二乙醇酰胺(FADA)、乙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(EFAM)、丙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(PFAM)、多羟基烷基脂肪酸酰胺、或葡萄糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(葡糖酰胺(GA)、或脂肪酸葡糖酰胺(FAGA))、SPANTM、TWEENTM及其组合。
该非离子表面活性剂的量按重量计是从约0.2%至约40%的非离子表面活性剂,例如从约0.5%至约30%,特别是从约1%至约20%、从约3%至约10%,如从约3%至约5%、从约8%至约12%、或从约10%至约12%。
该表面活性剂可以是选自下组的半极性表面活性剂,该组由以下各项组成:氧化胺(AO),如烷基二甲胺氧化物、N-(椰油基烷基)-N,N-二甲胺氧化物和N-(牛油-烷基)-N,N-双(2-羟乙基)胺氧化物、及其组合。
该表面活性剂可以是选自下组的两性离子表面活性剂,该组由以下各项组成:甜菜碱,如烷基二甲基甜菜碱、磺基甜菜碱。
在一个实施例中,该表面活性剂选自下组,该组由以下各项组成:烷醇乙氧基硫酸钠、直链烷基苯磺酸钠、脂肪酸钠、烷基硫酸钠、月桂基胺氧化物、直链烷基苯磺酸盐(MEA盐)、直链烷基苯磺酸盐(钠盐)、醇乙氧基化物。
本发明的洗涤剂组合物可以用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少物品上的污垢的再沉积,并且用于防止或减少恶臭。
该组合物可以进一步包括助洗剂、絮凝助剂、螯合剂、染料转移抑制剂、酶、酶稳定剂、酶抑制剂、催化材料、漂白活化剂、过氧化氢、过氧化氢源、预形成的过酸、聚合的分散剂、粘土去污剂/抗再沉淀剂、增白剂、抑泡剂、染料、香料、结构弹力剂、织物柔软剂、载体、助水溶物、助洗剂和共助洗剂、织物调色剂、防沫剂、分散剂、加工助剂、和/或色素。
该组合物可以包含一种或多种选自下组的酶,该组由以下各项组成:蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、糖酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶和氧化酶。
该组合物可以是适合于洗涤、餐具洗涤或硬表面清洁的洗涤剂组合物。
本发明进一步涉及一种液体洗涤剂组合物,该组合物包括总浓度按重量计是至少3%的表面活性剂和洗涤剂和洗涤剂助洗剂,以及含洗涤剂酶的微囊,其中该微囊的膜是通过具有高于1kDa分子量的多支化的多胺的交联而产生。诸位发明人已经发现,将酶包封在具有半透膜的微囊中,并且在这些囊(在添加至该液体洗涤剂之前)中具有高于该液体洗涤剂中的水活度时,当被添加到该洗涤剂(水正溢出)中时这些囊将经历(部分地)崩溃,因此在这些囊中留下更为浓缩的并且更粘的含酶内部。该膜的崩溃还可导致可透性的降低。这可以通过添加稳定剂/聚合物进一步使用,尤其是不会通过该膜可透的那些。该崩溃和所得黏度增加将降低/妨碍敌对组分(例如,表面活性剂或螯合剂)扩散进入这些囊中,并且因此增加液体洗涤剂中酶的储存稳定性。该液体洗涤剂中的对该酶敏感的组分(例如,充当该酶底物的组分)还被保护免于受该酶的降解。在洗涤过程中,该液体洗涤剂被水稀释,因此增加了水活度。水现在将扩散进这些囊(渗透作用)中。这些囊将溶胀并且该膜将变得对该酶可透过由此它们可以离开这些囊,或简单地胀裂并且以此方式释放该酶。该概念在稳定这些酶对抗液体洗涤剂中的敌对组分方面非常有效,反之亦然还保护该液体洗涤剂中酶敏感的组分不受酶的影响。
对酶敏感并且可以被酶降解的洗涤剂组分的实例包括(括号中的相关酶):黄原胶(黄原胶酶)、具有酯键的聚合物(脂肪酶)、氢化蓖麻油(脂肪酶)、香料(脂肪酶)、甲酯磺酸盐表面活性剂(脂肪酶)、纤维素和纤维素衍生物(例如,CMC)(纤维素酶)、和糊精和环糊精(淀粉酶)。
敏感的洗涤剂成分还可以被囊化,并且由此被稳定化在微囊中。敏感的洗涤剂成分在储存期间易于降解。这类洗涤剂成分包括漂白化合物、漂白活化剂、香料、聚合物、助洗剂、表面活性剂等。
通常,这些微囊可以被用于分离洗涤剂中不相容的组分/化合物。
将这些微囊添加到洗涤剂中可以被用于影响该洗涤剂产品的可视外观,例如不透光效应(小型微囊)或明显可见的颗粒(大型微囊)的效应。这些微囊也可以是着色的。
这些微囊可以被用于在处理和加工酶产品期间降低酶尘埃水平。
除非另外指明,贯穿本申请所有的百分比指示为重量百分比(%w/w)。
微囊:典型地,这些微囊通过将水滴形成不可与水混溶的连续体而产生-即典型地通过制备一种油包水乳剂-并且随后通过界面聚合经由添加一种交联剂形成该膜。在最终固化之后,可以收获这些囊并进行进一步清洗并通过本领域已知的方法进行配制。随后将该囊配制品加入该洗涤剂中。
有效负载、有待囊化的主膜成分和最终另外的组分是在水相中发现的。在该连续体中发现了稳定化这些水滴趋向凝聚的组分(乳化剂、乳化稳定剂、表面活性剂等),并且还通过该连续体添加该交联剂。
可以通过本领域中任何方法来制备该乳剂,例如,通过机械搅动、滴注方法、膜乳化、微流体技术、超声处理等。在一些情况下,这些相的简单混合将自动导致一种乳剂,通常被称为自乳化。使用方法导致一个窄的粒度分布是有利的。
随后典型地将该或这些交联剂加入该乳剂中,这是直接或更典型地通过制备交联剂在一种溶剂中的溶液,该溶剂在连续相中是可溶的。该乳剂和交联剂或其溶液可以通过本领域中常规使用的方法来混合,例如,通过简单混合或通过仔细地控制该乳剂以及该交联剂溶液流动通过一个串联混合器。
在一些情况下,需要固化这些囊来完成膜的形成。固化经常是简单的搅拌这些囊一段时间以允许界面聚合反应结束。在其他情况下,该膜的形成可以通过添加反应淬灭剂来终止。
这些囊可以被后修饰,例如通过使组分反应到该膜上以阻碍或减少这些颗粒在如在WO 99/01534中所述的洗涤剂中的絮凝。
可以通过本领域中已知的方法分离或浓缩这些产生的囊,例如,通过过滤、离心、蒸馏或倾析该囊分散体。
这些所得囊可以被进一步配制,例如,通过添加表面活性剂以赋予产物对于存储、运输和稍后处理以及添加至洗涤剂的所需性质。其他微囊配制剂包括流变改性剂、杀生物剂(例如,Proxel)、用于pH调节的酸/碱(其也将在这些微囊内调节)、以及用于调节水活度的水。
该囊形成方法可以包括以下步骤:
-制备初始的一个或多个水相和油相,
-形成油包水乳剂,
-通过界面聚合形成膜,
-任选的后修饰,
-任选的分离和/或配制,
-添加至洗涤剂。
该方法可以是一个分批法或是一个连续或半连续方法。
根据本发明的微囊是小型的水性球体,其周围有一个均匀的膜。该微囊内部的材料被称为核心、内相、或填充物,而该膜有时被称为壳、包衣、或壁。这些微囊具有在0.5μm和2毫米之间的直径。优选地,这些微囊的平均直径是在1μm至1000μm的范围中,更优选地在5μm至500μm的范围中,甚至更优选地在10μm至500μm的范围中,甚至更优选地在50μm至500μm的范围中,并且最优选地在50μm至200μm的范围中。可替代地,这些微囊的直径是在0.5μm至30μm的范围中;或在1μm至25μm的范围中。该微囊的直径是当聚合作用完成之后在油相中测定的。该囊的直径可以根据周围化学环境的水活度改变。
酶的微囊化(如本发明中所用的)可以通过界面聚合来进行,其中聚合反应中的这两种反应物在一个界面处相遇并且快速反应。这一方法的基础是多胺与酸衍生物的反应,通常是酸性卤化物,充当一种交联剂。该多胺优选地是基本上水溶性的(当处于游离碱形式时)。在正确的条件下,柔性薄膜在该界面处快速形成。进行该聚合作用的一种方式是使用该酶和多胺的一种水性溶液,其与一种非水溶剂(以及一种乳化剂)进行乳化,并添加包含该酸衍生物的溶液。该酶溶液中可以存在碱剂以中和在该反应过程中形成的酸。聚合物(聚酰胺)膜在这些乳滴的界面处立即形成。该微囊的聚合物膜典型地具有阳离子性质,并且因此与具有阴离子性质的化合物结合/络合。
这些微囊的直径是通过这些乳滴的大小而确定的,乳滴的大小通过例如搅拌速率来控制。
乳剂:乳剂是一个液相在第二液相内暂时或永久的分散体。该第二液相通常被称为连续相。表面活性剂通常用于帮助乳剂的形成和稳定化。不是所有的表面活性剂都能同样地稳定化乳剂。需要针对最优乳剂效用选择表面活性剂的类型和数量,尤其是对于该乳剂的制备和物理稳定性,以及在稀释或进一步加工过程中的稳定性。物理稳定性是指将乳剂以分散体形式进行维持。例如凝聚、聚合、吸附至容器壁、沉降和乳油化的过程是物理不稳定性的多种形式,并且应被避免。适合的表面活性剂的实例描述于WO 97/24177,第19-21页;以及WO 99/01534中。
可以将乳剂进一步分类为简单的乳剂,其中该分散的液相是一种简单的均质液体,或一种更复杂的乳剂,其中该分散的液相是液相或固相的非均质组合,例如双重乳剂或复合型乳剂。例如,可以形成一种油包水双重乳剂或复合型乳剂,其中该水相本身进一步包含乳化的油相;这种类型的乳剂可以被指定为一种油包水包油(o/w/o)乳剂。可替代地,可以形成油包水乳剂,其中该水相包含分散的固相,通常被称为一种悬浮液-乳剂。可以描述其他更复杂的乳剂。因为在描述这类系统方面固有的困难,术语乳剂用于描述简单和更复杂的乳剂两者,不必要限制乳剂的形式或存在的相类型和相数。
多胺:膜的刚性/柔性和可透性主要受多胺选择的影响。根据本发明的多胺是一种多支化的多胺。
每个分支(优选地以一个伯氨基团结束)充当膜网络中的一个系拴点,从而产生有利性质。根据本发明的多支化的多胺是一种具有多于两个分支点和多于两个反应性氨基的多胺(能够与交联剂反应,即,伯氨基团和仲氨基团)。当制备该乳剂时,该多支化的多胺被用作起始材料-它不是从其他起始材料原位形成的。为了得到引人注目的特性,该多胺的多支化结构必须作为起始材料存在。
分支点数目和伯胺数目之间存在密切的关系,由于伯胺将总是位于分支的末端:一个直链胺只能包含两个伯胺。对于假设地引入这样一种直链二胺的每个分支点将允许一个或多个伯胺引入到该或这些被引入的分支的末端。在本文中,我们将该伯氨基团理解为该分支的一部分,即该分支的端点。例如,我们认为三(2-氨乙基)胺或1,2,3-丙烷三胺都是具有一个分支点的分子。对于本发明,该多胺具有至少四个伯胺。可以从脂肪族烃链(如在之前所述实例中)或从不饱和的碳键(例如在,例如3,3’-二氨基联苯胺中)、或从叔氨基团(例如在N,N,N’,N’-四-(2-氨乙基)乙二胺)中引入多个分支点。
除了分支点的数目之外,我们已经发现,反应性氨基团的紧密度非常重要。例如,N,N,N’,N’-四-(12-氨十二基)乙二胺的物质是不适合的。肽或蛋白(例如一种酶)都不适合用于膜形成。因此,该多支化的多胺不是肽或蛋白。
在一个实施例中,这些反应性氨基团构成该多支化的多胺至少15%的分子量,例如超过20%,或超过25%。优选地,该多支化的多胺的分子量至少为1kDa;更优选地,该多支化的多胺的分子量至少为1.3kDa。
在一个优选的实施例中,该多支化的多胺是聚乙烯亚胺(PEI),及其修饰体,具有多于两个分支点和多于两个反应性氨基,其中这些反应性氨基构成该PEI至少15%的分子量,例如超过20%,或超过25%。优选地,该PEI的分子量是至少为1kDa。
不同的多支化的多胺的组合可以用于制备根据本发明的微囊。
可以通过添加一种或多种具有小于1kDa分子量的小胺来改进微囊的有利特性(例如,酶储存稳定性、降低的酶渗出、降低的洗涤剂成分的入通量)。该小胺优选地是基本上水溶性的(当处于游离碱形式时)并且可以是一种例如乙二胺、六亚甲基二胺、己二胺、二亚乙基四胺、乙四胺、苯二胺、哌嗪、四亚甲基五胺或、优选地二亚乙基三胺(DETA)的物质。在制备微囊时,可以按小胺和多支化的多胺的总含量重量计高达50%、优选地高达40%、高达30%、高达20%、高达10%、高达5%的量添加这些小胺。
交联剂:如在本发明中所使用的交联剂是一种具有至少两个能够与胺类反应形成共价键的基团/位点的分子。
该交联剂优选地是油可溶性的并且可以呈酸酐或酸性卤化物的形式,优选地为酰基氯。例如,它可以是己二酰氯、癸二酰氯、十二烷基二酰氯、邻苯二甲酰氯、对苯二甲酰氯、间苯二甲酰氯、或均苯三甲酰氯,但优选地,该交联剂是对苯二甲酰氯或均苯三甲酰氯。本发明进一步涉及用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少物品上的污垢的再沉积的方法,该方法包括以下步骤:
a)使物品与根据权利要求26-52中任一项所述的组合物或包含具有DNA酶活性的多肽的液体溶液接触;以及
b)任选地冲洗该物品,
其中该物品是纺织品、餐具或硬表面。
具有DNA酶活性的组合物或多肽可以例如通过用该组合物或该液体溶液喷洒、包衣、浸渍、洗涤或浸泡该物品而与该物品接触。该项可以与物品短时间段接触,如1-60秒,或者更长的时间段如1-60分钟,或甚至更长如1-12小时。
在本发明的一个实施例中,其中步骤a)下的该组合物或多肽用于在随后的清洁或洗涤过程之前清洁或洗涤该物品至少一次。
在一个实施例中,步骤a)下的该组合物或多肽用于在随后的清洁或洗涤过程之前清洁或洗涤该物品至少两次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次或十次。
该液体溶液可以进一步包含表面活性剂、助洗剂、絮凝助剂、螯合剂、染料转移抑制剂、酶、酶稳定剂、酶抑制剂、催化材料、漂白活化剂、过氧化氢、过氧化氢源、预形成的过酸、聚合的分散剂、粘土去污剂/抗再沉淀剂、增白剂、抑泡剂、染料、香料、结构弹力剂、织物柔软剂、载体、助水溶物、助洗剂和共助洗剂、织物调色剂、防沫剂、分散剂、加工助剂、和/或色素。
在一个实施例中,该液体溶液可以进一步包含一种或多种选自下组的酶,该组由以下各项组成:蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、糖酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶和氧化酶。
该液体溶液的pH在1到11的范围内,如在5.5到11的范围内,如在7到9的范围内,在7到8的范围内或在7到8.5的范围内。
该液体溶液的温度可以在5℃至95℃的范围内、或在10℃至80℃的范围内、在10℃至70℃的范围内、在10℃至60℃的范围内、在10℃至50℃的范围内、在15℃至40℃的范围内或在20℃至30℃的范围内。在一个实施例中,该液体溶液的温度是30℃。
在一个实施例中,在与该液体溶液接触后冲洗该物品。可以将该物品用水或用包含调节剂的水进行冲洗。
DNA酶的浓度典型地在0.00004-100ppm范围内的酶蛋白,如在0.00008-100范围内、在0.0001-100范围内、在0.0002-100范围内、在0.0004-100范围内、在0.0008-100范围内、在0.001-100ppm范围内的酶蛋白、0.01-100ppm酶蛋白,优选地0.05-50ppm酶蛋白,更优选地0.1-50ppm酶蛋白,更优选地0.1- 30ppm酶蛋白,更优选地0.5-20ppm酶蛋白,并且最优选地0.5-10ppm酶蛋白。
可以将本发明的DNA酶以一定量添加到洗涤剂组合物中,该量对应于至少0.002mg的DNA酶蛋白,如至少0.004mg的DNA酶蛋白、至少0.006mg的DNA酶蛋白、至少0.008mg的DNA酶蛋白、至少0.01mg的DNA酶蛋白、至少0.1mg的蛋白,优选地1mg的蛋白,更优选地至少10mg的蛋白,甚至更优选地至少15mg的蛋白,最优选地至少20mg的蛋白,并且甚至最优选地至少25mg的蛋白。因此,该洗涤剂组合物可以包括至少0.00008%DNA酶蛋白,优选地至少0.002%、0.003%、0.004%、0.005%、0.006%、0.008%、0.01%、0.02%、0.03%、0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%或1.0%的DNA酶蛋白。
具有DNA酶活性的多肽可以是动物、植物、微生物来源的。在一个实施例中,该多肽具有人类或牛来源。在一个实施例中,该多肽获得自植物,例如绿豆。在一个实施例中,该多肽具有细菌或真菌来源。
真菌来源的多肽可以选自下组,该组由以下各项组成:
a.与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,与SEQ ID NO:3的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽或与SEQ ID NO:5的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽或与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;
b.由如下多核苷酸编码的多肽,该多核苷酸在低严格条件下与以下各项杂交
i.SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列或SEQ ID NO:4的成熟多肽编码序列
ii.其cDNA序列,或
iii.(i)或(ii)的全长互补体;
c.由与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸编码的多肽、或与SEQ ID NO:4的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸编码的多肽;
d.在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:2的成熟多肽的变体,在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:3的成熟多肽的变体,或在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:5的成熟多肽的变体或在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:8的成熟多肽的变体;以及
e.具有DNA酶活性的(a)、(b)、(c)或(d)的多肽的片段。
欧洲专利申请号14164424.5在实施例1至3中披露了如何产生SEQ ID NO:2,SEQID NO:3和SEQ ID NO:8的多肽。欧洲专利申请号14164429.4在实施例1至2中披露了如何产生SEQ ID NO:5的多肽。
细菌来源的多肽可以选自下组,该组由以下各项组成:
a.与SEQ ID NO:6的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽或与SEQ ID NO:7的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;
b.一种SEQ ID NO:6的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,或一种SEQ ID NO:7的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入;以及
c.具有DNA酶活性的(a)、或(b)的多肽的片段;
该多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽、与与SEQ ID NO:3的成熟多肽、与SEQ ID NO:5的成熟多肽、或与SEQ ID NO:6的成熟多肽、或与SEQ ID NO:7的成熟多肽具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。
在编号WO 2011098579公开的国际专利申请在实施例3中披露了如何克隆和表达SEQ ID NO:6的多肽。
该多肽可以包括SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:2的成熟多肽或由它们组成,该多肽可以包括SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:3的成熟多肽或由它们组成,该多肽可以包括SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:5的成熟多肽或由它们组成,该多肽可以包括SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:6的成熟多肽或由它们组成,该多肽可以包括SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:7的成熟多肽或由它们组成,或者该多肽可以包括SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:8的成熟多肽或由它们组成。
该成熟多肽可以包括SEQ ID NO:2的氨基酸1至206,SEQ ID NO:3的氨基酸1至206,SEQ ID NO:5的氨基酸1至188,SEQ ID NO:6的氨基酸1至110,SEQ ID NO:7的氨基酸1至109或SEQ ID NO:8的氨基酸1至206。
该多肽可以是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ IDNO:7或SEQ ID NO:8的成熟多肽的变体,其中该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,或SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ IDNO:8的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入。
该多肽可以是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ IDNO:7或SEQ ID NO:8的片段,其中该片段具有DNA酶活性。
具有DNA酶活性的多肽可以获得自曲霉属,例如获得自米曲霉。
在一个实施例中,本发明涉及与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多肽,这些多肽具有DNA酶活性。在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸的差异。
在一个实施例中,本发明涉及与SEQ ID NO:3的成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多肽,这些多肽具有DNA酶活性。在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有多达10个(例如1个、3个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸的差异。
在一个实施例中,本发明涉及与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多肽,这些多肽具有DNA酶活性。在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸的差异。
在实施例中,该多肽已经被分离。本发明的多肽优选地包括SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其等位基因变体或由其组成;或为其具有DNA酶活性的片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:2的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:2的氨基酸1至206或由其组成。
在实施例中,该多肽已经被分离。本发明的多肽优选地包括SEQ ID NO:3的氨基酸序列或其等位基因变体或由其组成;或为其具有DNA酶活性的片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:3的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:3的氨基酸1至206或由其组成。
在实施例中,该多肽已经被分离。本发明的多肽优选地包括SEQ ID NO:8的氨基酸序列或其等位基因变体或由其组成;或为其具有DNA酶活性的片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:8的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:8的氨基酸1至206或由其组成。
在另一个实施例中,本发明涉及一种具有DNA酶活性的分离的多肽,该分离的多肽是由在低严格条件下与(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全长补体杂交的一种多核苷酸所编码(萨姆布鲁克等,1989,分子克隆实验指南,第2版,纽约冷泉港)。在实施例中,该多肽已经被分离。
在另一个实施例中,本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有DNA酶活性的多肽,该多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在另外的实施例中,该多肽已经被分离。
在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:2的成熟多肽的变体。在实施例中,引入SEQ ID NO:2的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目多达10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地为1-30个氨基酸;小的氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;高达20-25个残基的小连接肽;或通过改变净电荷或另一功能有利于纯化的小的延伸,例如聚组氨酸段、抗原表位或结合结构域。
在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:3的成熟多肽的变体。在实施例中,引入SEQ ID NO:3的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目多达10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地为1-30个氨基酸;小的氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;高达20-25个残基的小连接肽;或通过改变净电荷或另一功能有利于纯化的小的延伸,例如聚组氨酸段、抗原表位或结合结构域。
具有DNA酶活性的多肽还可以获得自木霉属,例如哈茨木霉。在一个实施例中,本发明涉及与SEQ ID NO:5的成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多肽,这些多肽具有DNA酶活性。在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:5的成熟多肽具有多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸的差异。
在实施例中,该多肽已经被分离。本发明的多肽优选地包括SEQ ID NO:5的氨基酸序列或其等位基因变体或由其组成;或为其具有DNA酶活性的片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:5的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:5的氨基酸1至188或由其组成。
在另一个实施例中,本发明涉及一种具有DNA酶活性的分离的多肽,该分离的多肽是由在低严格条件下与(i)SEQ ID NO:4的成熟多肽编码序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全长补体杂交的一种多核苷酸所编码(萨姆布鲁克等,1989,分子克隆实验指南,第2版,纽约冷泉港)。在实施例中,该多肽已经被分离。
可以使用SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:4或其子序列,连同SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3的多肽或其片段来设计核酸探针以便根据本领域熟知的方法鉴定和克隆编码来自不同属或物种的菌株的具有DNA酶活性的多肽的DNA。
具体地,可以遵循标准DNA印迹程序,使用此类探针与感兴趣的细胞的基因组DNA或cDNA杂交,以便鉴定和分离其中的对应基因。此类探针可以明显短于完整序列,但是长度应为至少15,例如至少25、至少35、或至少70个核苷酸。优选地,核酸探针的长度为至少100个核苷酸,例如长度为至少200个核苷酸、至少300个核苷酸、至少400个核苷酸、至少500个核苷酸、至少600个核苷酸、至少700个核苷酸、至少800个核苷酸、或至少900个核苷酸。DNA和RNA探针两者都可使用。典型地将探针进行标记(例如,用32P、3H、35S、生物素、或抗生物素蛋白),以检测相应的基因。本发明涵盖此类探针。
可以筛选从此类其他菌株制备的基因组DNA或cDNA文库的与上述探针杂交并编码具有DNA酶活性的多肽的DNA。来自此类其他菌株的基因组DNA或其他DNA可以通过琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳、或其他分离技术来分离。来自文库的DNA或分离的DNA可转移到并固定在硝酸纤维素或其他适合的载体材料上。为了鉴定与SEQ ID NO:4或其子序列杂交的克隆或DNA,将载体材料用于DNA印迹中。
出于本发明的目的,杂交表示多核苷酸与对应于以下项的标记的核酸探针杂交:(i)SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:4;(ii)SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:4的成熟多肽编码序列;(iii)其cDNA序列,(iv)其全长互补体;或(v)其子序列;杂交是在非常低的至非常高的严格条件下进行。可以使用例如X-射线胶片或本领域已知的任何其他检测手段来检测在这些条件下核酸探针杂交的分子。
在另一个实施例中,本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有DNA酶活性的多肽,该多核苷酸与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:4的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在另外的实施例中,该多肽已经被分离。
在另一个实施例中,本发明涉及SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5的成熟多肽的变体,这些变体在一个或多个(例如若干个)位置包括取代、缺失和/或插入。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目多达10个,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地为1-30个氨基酸;小的氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;高达20-25个残基的小连接肽;或通过改变净电荷或另一功能有利于纯化的小的延伸,例如聚组氨酸段、抗原表位或结合结构域。
具有DNA酶活性的多肽还可以获得自芽胞杆菌属,例如获得自枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌。
在一个实施例中,本发明涉及与SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的多肽,这些多肽具有DNA酶活性。在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:6或SEQID NO:7的成熟多肽具有多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸的差异。
在实施例中,该多肽已经被分离。本发明的多肽优选地包括SEQ ID NO:6、SEQ IDNO:7的氨基酸序列或其等位基因变体或由其组成;或为其具有DNA酶活性的片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:6的氨基酸1至110或SEQ ID NO:7的氨基酸1至109或由它们组成。
在另一个实施例中,本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有DNA酶活性的多肽,该多核苷酸与SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在另外的实施例中,该多肽已经被分离。
在另一个实施例中,本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有DNA酶活性的多肽,该多核苷酸与SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性,并且其中该多肽用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少污垢在物品上的再沉积。
在另一个实施例中,本发明涉及SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的成熟多肽的变体,这些变体在一个或多个(例如,若干个)位置包含取代、缺失和/或插入。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目多达10个,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地为1-30个氨基酸;小的氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;高达20-25个残基的小连接肽;或通过改变净电荷或另一功能有利于纯化的小的延伸,例如聚组氨酸段、抗原表位或结合结构域。
保守取代的实例是在下组的范围内:碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸及组氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、极性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸及缬氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸及酪氨酸)及小氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸及甲硫氨酸)。一般不会改变比活性的氨基酸取代是本领域已知的并且例如由H.诺伊拉特(Neurath)和R.L.希尔(Hill),1979,在蛋白质(The Proteins),学术出版社(Academic Press),纽约中描述。常见的取代为Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu、和Asp/Gly。
可替代地,氨基酸改变具有这样一种性质:改变多肽的物理化学特性。例如,氨基酸改变可以提高多肽的热稳定性、改变底物特异性、改变最适pH,等等。
可以根据本领域中已知的程序,如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(坎宁汉(Cunningham)和威尔斯(Wells),1989,科学(Science)244:1081-1085)来鉴定多肽中的必需氨基酸。在后一项技术中,在该分子中的每个残基处引入单个丙氨酸突变,并且对所得突变体分子的DNA酶活性进行测试以鉴定对于该分子的活性至关重要的氨基酸残基。还参见希尔顿(Hilton)等人,1996,生物化学杂志(J.Biol.Chem.)271:4699-4708。酶活性位点或其他生物学相互作用也可以通过对结构进行物理学分析来进行确定,如通过以下技术例如核磁共振、结晶学、电子衍射、或光亲和标记,与假定接触位点氨基酸的突变相结合来进行确定。参见,例如,德沃斯(de Vos)等人,1992,科学(Science)255:306-312;史密斯(Smith)等人,1992,分子生物学杂志(J.Mol.Biol.)224:899-904;Wlodaver等人,1992,欧洲生化学会联合会快报(FEBS Lett.)309:59-64。还可以从与相关多肽的比对推断鉴别必需氨基酸。
可以做出单个或多个氨基酸取代、缺失和/或插入并且使用诱变、重组和/或改组的已知方法进行测试,随后进行相关筛选程序,如由里德哈尔-奥尔森(Reidhaar-Olson)和萨奥尔(Sauer),1988,科学(Science)241:53-57;博维(Bowie)和萨奥尔,1989,美国科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)86:2152-2156;WO 95/17413;或WO 95/22625所披露的那些。可以使用的其他方法包括易错PCR、噬菌体展示(例如,罗曼(Lowman)等人,1991,生物化学(Biochemistry)30:10832-10837;美国专利号5,223,409;WO 92/06204)和区域定向诱变(德比舍尔(Derbyshire)等人,1986,基因(Gene)46:145;内尔(Ner)等人,1988,DNA 7:127)。
可以结合诱变/改组方法与高通量自动化筛选方法来检测由宿主细胞表达的克隆的、诱变的多肽的活性(内斯(Ness)等人,1999,自然生物技术(Nature Biotechnology)17:893-896)。编码活性多肽的诱变的DNA分子可以回收自宿主细胞,并且使用本领域的标准方法对其进行迅速测序。这些方法允许迅速确定多肽中单个氨基酸残基的重要性。
该多肽可以是杂合多肽,其中一种多肽的区域在另一种多肽的区域的N-末端或C-末端处融合。
该多肽可以是融合多肽或可裂解的融合多肽,其中另一种多肽在本发明多肽的N-末端或C-末端处融合。通过将编码另一多肽的多核苷酸融合到本发明的多核苷酸而产生融合多肽。用于产生融合多肽的技术在本领域是已知的,并且包括连接编码多肽的编码序列,这样使得它们在框内并且使得融合多肽的表达处于相同的一个或多个启动子和终止子的控制下。还可以使用内含肽技术构建融合多肽,其中在翻译后产生融合多肽(库珀(Cooper)等人,1993,欧洲分子生物学学会杂志12:2575-2583;道森(Dawson),1994,科学(Science)266:776-779)。
融合多肽可以在两种多肽之间进一步包括切割位点。在融合蛋白分泌之时,该位点被切割,从而释放出这两种多肽。切割位点的实例包括但不限于以下各项中披露的位点:马丁(Martin)等人,2003,工业微生物学与生物技术杂志(J.Ind.Microbiol.Biotechnol.)3:568-576;斯韦蒂纳(Svetina)等人,2000,生物技术杂志(J.Biotechnol.)76:245-251;拉斯马森(Rasmussen)-威尔逊(Wilson)等人,1997,应用环境微生物学(Appl.Environ.Microbiol.)63:3488-3493;华德(Ward)等人,1995,生物技术(Biotechnology)13:498-503;以及孔特拉斯(Contreras)等人,1991,生物技术9:378-381;伊顿(Eaton)等人,1986,生物化学(Biochemistry)25:505-512;柯林斯(Collins)-莱斯(Racie)等人,1995,生物技术13:982-987;卡特(Carter)等人,1989,蛋白:结构、功能和遗传学(Proteins:Structure,Function,and Genetics)6:240-248;以及史蒂文斯(Stevens),2003,世界药物发现(Drug Discovery World)4:35-48。
脱氧核糖核酸酶(DNA酶)
具有DNA酶活性的多肽或脱氧核糖核酸酶(DNA酶)是催化DNA骨架中的磷酸二酯键的水解切割从而降解DNA的任何酶。可互换地使用两个术语,具有DNA酶活性的多肽和DNA酶。
根据本发明,获得自真菌的DNA酶是优选的;具体而言获得自曲霉属的DNA酶是优选的;具体而言获得自米曲霉的DNA酶是优选的。在本发明的一个实施例中,具有脱氧核糖核酸酶活性的多肽不是来自米曲霉的S1核酸酶。
本发明中使用的DNA酶包括示为SEQ ID NO:2的氨基酸1至206的SEQ ID NO:2的成熟多肽,其获得自米曲霉。具有DNA酶活性的多肽可以获得自曲霉属,例如获得自米曲霉。在本发明的一个实施例中,具有DNA酶活性的多肽是要求保护的多肽。
本发明的一个方面涉及与SEQ ID NO:2成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的分离的多肽,这些分离的多肽具有DNA酶活性。在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸的差异。
在一个实施例中,本发明涉及与SEQ ID NO:3成熟多肽具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的分离的多肽,这些分离的多肽具有DNA酶活性。在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有多达10个(例如1个、3个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸的差异。
在一个实施例中,本发明涉及与SEQ ID NO:8具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性的分离的多肽,这些分离的多肽具有DNA酶活性。在一个方面中,这些多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有多达10个(例如1个、8个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸的差异。
本发明的多肽优选地包括SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其等位基因变体或由其组成;或为其具有DNA酶活性的片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:2的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:2的氨基酸1至206或由其组成。
在实施例中,该多肽已经被分离。本发明的多肽优选地包括SEQ ID NO:3的氨基酸序列或其等位基因变体或由其组成;或为其具有DNA酶活性的片段。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:3的成熟多肽或由其组成。在另一个方面中,该多肽包括SEQ ID NO:3的氨基酸1至204或由其组成。本发明的一方面涉及组合物,该组合物包括由SEQ ID NO:8的氨基酸序列组成的多肽和由SEQ ID NO:3的氨基酸序列组成的本发明的多肽,或基本上由其组成。
在另一个实施例中,本发明涉及一种具有DNA酶活性的分离的多肽,该分离的多肽是由在低严格条件下与(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全长补体杂交的一种多核苷酸所编码(萨姆布鲁克等,1989,分子克隆实验指南,第2版,纽约冷泉港)。在实施例中,该多肽已经被分离。
在另一个实施例中,本发明涉及一种具有DNA酶活性的分离的多肽,该分离的多肽是由在低-中严格条件下与(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全长补体杂交的一种多核苷酸所编码。在实施例中,该多肽已经被分离。
在另一个实施例中,本发明涉及一种具有DNA酶活性的分离的多肽,该分离的多肽是由在中严格条件下与(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全长补体杂交的一种多核苷酸所编码。在实施例中,该多肽已经被分离。
在另一个实施例中,本发明涉及一种具有DNA酶活性的分离的多肽,该分离的多肽是由在中-高严格条件下与(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全长补体杂交的一种多核苷酸所编码。在实施例中,该多肽已经被分离。
在另一个实施例中,本发明涉及一种具有DNA酶活性的分离的多肽,该分离的多肽是由在高严格条件下与(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全长补体杂交的一种多核苷酸所编码。在实施例中,该多肽已经被分离。
在另一个实施例中,本发明涉及一种具有DNA酶活性的分离的多肽,该分离的多肽是由在非常高严格条件下与(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列、(ii)其cDNA序列、或(iii)(i)或(ii)的全长补体杂交的一种多核苷酸所编码。在实施例中,该多肽已经被分离。
在另一个实施例中,本发明涉及由以下多核苷酸编码的具有DNA酶活性的多肽,该多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少60%,例如至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。在另外的实施例中,该多肽已经被分离。
在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:2的成熟多肽的变体。在实施例中,引入SEQ ID NO:2的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目多达10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地为1-30个氨基酸;小的氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;高达20-25个残基的小连接肽;或通过改变净电荷或另一功能有利于纯化的小的延伸,例如聚组氨酸段、抗原表位或结合结构域。
在另一个实施例中,本发明涉及在一个或多个(例如,若干个)位置包括取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:3的成熟多肽的变体。在实施例中,引入SEQ ID NO:3的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目多达10,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地为1-30个氨基酸;小的氨基-或羧基-末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;高达20-25个残基的小连接肽;或通过改变净电荷或另一功能,例如聚组氨酸段、抗原表位或结合域,有利于纯化的小的延伸。
该DNA酶可以包括SEQ ID NO:2的氨基酸-37至206所示的氨基酸序列或具有DNA酶的其片段,如成熟多肽,或由其组成。或者该DNA酶可以包括SEQ ID NO:2的氨基酸-37至206的片段或SEQ ID NO:2的氨基酸1至206,或由其组成,针对该片段从SEQ ID NO:2的氨基和/或羧基末端删除一个或多个氨基酸。
该DNA酶可以包括SEQ ID NO:3的氨基酸1至206所示的氨基酸序列或具有DNA酶的其片段,如成熟多肽,或由其组成。或者该DNA酶可以包括SEQ ID NO:3的氨基酸1至206的片段或SEQ ID NO:3的氨基酸1至206,或由其组成,针对该片段从SEQ ID NO:3的氨基和/或羧基末端删除一个或多个氨基酸。
该DNA酶可以包括SEQ ID NO:8的氨基酸1至206所示的氨基酸序列或具有DNA酶的其片段,如成熟多肽,或由其组成。或者该DNA酶可以包括SEQ ID NO:8的氨基酸1至206的片段或SEQ ID NO:8的氨基酸1至206,或由其组成,针对该片段从SEQ ID NO:8的氨基和/或羧基末端删除一个或多个氨基酸。
本发明还提供了基本上与以上多肽同源的DNA酶多肽及其种类同系物(旁系同源物或直系同源物)。在此使用术语“基本上同源”表示与SEQ ID NO:2的氨基酸序列或SEQ IDNO:3的氨基酸序列至少80%、优选至少85%、更优选至少90%、更优选至少95%、甚至更优选至少97%相同,并且最优选至少99%或更多相同的多肽、或其具有DNA酶活性的片段、或其直系同源物或旁系同源物。
在另一个实施例中,SEQ ID NO:2的DNA酶在一个或多个(例如,若干个)位置包括取代、缺失和/或插入。在另一个实施例中,SEQ ID NO:3的DNA酶在一个或多个(例如,若干个)位置包括取代、缺失和/或插入。在一个实施例中,引入SEQ ID NO:2的成熟多肽中或SEQID NO:3的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数目不超过10个,例如1、2、3、4、5、6、7、8或9个。这些氨基酸变化可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;小缺失,典型地为1-30个氨基酸;小的氨基或羧基-末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;高达20-25个残基的小连接肽;或通过改变净电荷或另一功能有利于纯化的小的延伸,例如聚组氨酸段、抗原表位或结合结构域。
根据本发明,获得自真菌的DNA酶是优选的;具体而言获得自木霉属的DNA酶是优选的;具体而言获得自哈茨木霉的DNA酶是优选的。
本发明中使用的DNA酶包括示为SEQ ID NO:5的氨基酸1至188的SEQ ID NO:5的成熟多肽,其获得自哈茨木霉。
该DNA酶可以包括SEQ ID NO:5的氨基酸-17至188所示的氨基酸序列或具有DNA酶的其片段,如成熟多肽,或由其组成。或者该DNA酶可以包括SEQ ID NO:5的氨基酸-17至188的片段或SEQ ID NO:5的氨基酸1至188,或由其组成,针对该片段从SEQ ID NO:5的氨基和/或羧基末端删除一个或多个氨基酸。
本发明还提供了基本上与以上多肽同源的DNA酶多肽及其种类同系物(旁系同源物或直系同源物)。在此使用术语“基本上同源”表示与SEQ ID NO:5的氨基酸序列至少80%、优选至少85%、更优选至少90%、更优选至少95%、甚至更优选至少97%相同,并且最优选至少99%或更多相同的多肽、或其具有DNA酶活性的片段、或其直系同源物或旁系同源物。
根据本发明,获得自细菌的DNA酶是优选的;具体而言获得自芽孢杆菌属的DNA酶是优选的;具体而言获得自枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌的DNA酶是优选的。
在本发明中使用的DNA酶包括SEQ ID NO:6的成熟多肽,该成熟多肽如SEQ ID NO:6的氨基酸1至110所示,其来源于枯草芽孢杆菌;或SEQ ID NO:7的成熟多肽,该成熟多肽如SEQ ID NO:7的氨基酸1至109所示,其来源于地衣芽孢杆菌。
该DNA酶可以包括SEQ ID NO:6的氨基酸-26至110或SEQ ID NO:7的氨基酸-33至109所示的氨基酸序列或具有DNA酶的其片段(如成熟多肽),或由其组成。SEQ ID NO:6的氨基酸-26至110或SEQ ID NO:6的氨基酸1至110的片段是一种多肽,该多肽具有一个或多个从SEQ ID NO:6的氨基和/或羧基末端缺失的氨基酸。SEQ ID NO:7的氨基酸-33至109或SEQID NO:7的氨基酸1至109的片段是一种多肽,该多肽具有一个或多个从SEQ ID NO:7的氨基和/或羧基末端缺失的氨基酸。
本发明还提供了基本上与以上多肽同源的DNA酶多肽及其种类同系物(旁系同源物或直系同源物)。在此使用术语“基本上同源”表示与SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的氨基酸序列至少80%、优选至少85%、更优选至少90%、更优选至少95%、甚至更优选至少97%相同,并且最优选至少99%或更多相同的多肽、或其具有DNA酶活性的片段、或其直系同源物或旁系同源物。
保守取代的实例是在下组的范围内:碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸及组氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、极性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸及缬氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸及酪氨酸)及小氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸及甲硫氨酸)。一般不会改变比活性的氨基酸取代是本领域已知的并且例如由H.诺伊拉特(Neurath)和R.L.希尔(Hill),1979,在蛋白质(The Proteins),学术出版社(Academic Press),纽约中描述。常见的取代为Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu、和Asp/Gly。
可替代地,氨基酸改变具有这样一种性质:改变多肽的物理化学特性。例如,氨基酸改变可以提高多肽的热稳定性、改变底物特异性、改变最适pH,等等。
可以根据本领域中已知的程序,如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(坎宁汉(Cunningham)和威尔斯(Wells),1989,科学(Science)244:1081-1085)来鉴定多肽中的必需氨基酸。在后一项技术中,在该分子中的每个残基处引入单个丙氨酸突变,并且对所得突变体分子的DNA酶活性进行测试以鉴定对于该分子的活性至关重要的氨基酸残基。还参见希尔顿(Hilton)等人,1996,生物化学杂志(J.Biol.Chem.)271:4699-4708。酶活性位点或其他生物学相互作用也可以通过对结构进行物理学分析来进行确定,如通过以下技术例如核磁共振、结晶学、电子衍射、或光亲和标记,与假定接触位点氨基酸的突变相结合来进行确定。参见,例如,德沃斯(de Vos)等人,1992,科学(Science)255:306-312;史密斯(Smith)等人,1992,分子生物学杂志(J.Mol.Biol.)224:899-904;Wlodaver等人,1992,欧洲生化学会联合会快报(FEBS Lett.)309:59-64。还可以从与相关多肽的比对推断鉴别必需氨基酸。
可以做出单个或多个氨基酸取代、缺失和/或插入并且使用诱变、重组和/或改组的已知方法进行测试,随后进行相关筛选程序,如由里德哈尔-奥尔森(Reidhaar-Olson)和萨奥尔(Sauer),1988,科学(Science)241:53-57;博维(Bowie)和萨奥尔,1989,美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)86:2152-2156;WO 95/17413;或WO 95/22625披露的那些。可以使用的其他方法包括易错PCR、噬菌体展示(例如,洛曼(Lowman)等人,1991,生物化学(Biochemistry)30:10832-10837;美国专利号5,223,409;WO 92/06204)以及区域定向诱变(德比什尔(Derbyshire)等人,1986,基因(Gene)46:145;内尔(Ner)等人,1988,DNA 7:127)。
可以结合诱变/改组方法与高通量自动化筛选方法来检测由宿主细胞表达的克隆的、诱变的多肽的活性(内斯(Ness)等人,1999,自然生物技术(Nature Biotechnology)17:893-896)。编码活性多肽的诱变的DNA分子可以回收自宿主细胞,并且使用本领域的标准方法对其进行迅速测序。这些方法允许迅速确定多肽中单个氨基酸残基的重要性。
该多肽可以是一种杂交多肽,其中一个多肽的一个区域融合在另一个多肽的一个区域的N-末端或C-末端。
该多肽可以是一种融合多肽或可裂解的融合多肽,其中另一个多肽是在本发明多肽的N末端或C末端处融合。通过将编码另一多肽的多核苷酸融合到本发明的多核苷酸而产生融合多肽。用于产生融合多肽的技术在本领域是已知的,并且包括连接编码多肽的编码序列,这样使得它们在框内并且使得融合多肽的表达处于相同的一个或多个启动子和终止子的控制下。还可以使用内含肽技术构建融合多肽,其中在翻译后产生融合多肽(库珀(Cooper)等人,1993,欧洲分子生物学学会杂志12:2575-2583;道森(Dawson),1994,科学(Science)266:776-779)。
融合多肽可以在两种多肽之间进一步包括切割位点。在融合蛋白分泌之时,该位点被切割,从而释放出这两种多肽。切割位点的实例包括但不限于以下各项中披露的位点:马丁(Martin)等人,2003,工业微生物学与生物技术杂志(J.Ind.Microbiol.Biotechnol.)3:568-576;斯韦蒂纳(Svetina)等人,2000,生物技术杂志(J.Biotechnol.)76:245-251;拉斯马森(Rasmussen)-威尔逊(Wilson)等人,1997,应用环境微生物学(Appl.Environ.Microbiol.)63:3488-3493;华德(Ward)等人,1995,生物技术(Biotechnology)13:498-503;以及孔特拉斯(Contreras)等人,1991,生物技术9:378-381;伊顿(Eaton)等人,1986,生物化学(Biochemistry)25:505-512;柯林斯(Collins)-莱斯(Racie)等人,1995,生物技术13:982-987;卡特(Carter)等人,1989,蛋白:结构、功能和遗传学(Proteins:Structure,Function,and Genetics)6:240-248;以及史蒂文斯(Stevens),2003,世界药物发现(Drug Discovery World)4:35-48。
DNA酶的浓度典型地在0.00004-100ppm范围内的酶蛋白,如在0.00008-100范围内、在0.0001-100范围内、在0.0002-100范围内、在0.0004-100范围内、在0.0008-100范围内、在0.001-100ppm范围内的酶蛋白、0.01-100ppm酶蛋白,优选地0.05-50ppm酶蛋白,更优选地0.1-50ppm酶蛋白,更优选地0.1-30ppm酶蛋白,更优选地0.5-20ppm酶蛋白,并且最优选地0.5-10ppm酶蛋白。
可以将本发明的DNA酶以一定量添加到洗涤剂组合物中,该量对应于至少0.002mg的DNA酶蛋白,如至少0.004mg的DNA酶蛋白、至少0.006mg的DNA酶蛋白、至少0.008mg的DNA酶蛋白、至少0.01mg的DNA酶蛋白、至少0.1mg的蛋白,优选地1mg的蛋白,更优选地至少10mg的蛋白,甚至更优选地至少15mg的蛋白,最优选地至少20mg的蛋白,并且甚至最优选地至少25mg的蛋白。因此,该洗涤剂组合物可以包括至少0.00008%DNA酶蛋白,优选地至少0.002%、0.003%、0.004%、0.005%、0.006%、0.008%、0.01%、0.02%、0.03%、0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%或1.0%的DNA酶蛋白。可以使用常规稳定剂稳定本发明的清洁剂组合物的DNA酶,这些常规稳定剂例如是多元醇,例如丙二醇或甘油、糖或糖醇、乳酸、硼酸或硼酸衍生物,例如芳香族硼酸酯,或苯基硼酸衍生物,例如4-甲酰苯基硼酸,并且可以如在例如WO 92/19709和WO 92/19708中所述配置该组合物。
本发明的多肽还可以结合到WO 97/07202中所披露的洗涤剂配制品中,通过引用将其结合在此。
洗涤剂组合物
在一个实施例中,本发明针对洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括结合一种或多种额外的清洁组合物组分的本发明的酶。另外的组分的选择在普通技术人员技术内并且包括常规成分,包括以下列出的示例性、非限制性组分。
气味控制剂
气味控制剂是减少来自物品的恶臭的试剂,气味控制剂是当在物品的洗涤(washing或laundering)期间使用气味控制剂时减少、中和或去除来自物品的恶臭的试剂。该气味控制剂不同于DNA酶。
本发明的气味控制剂可以包括但不限于HMP、挥发性醛或环糊精或其混合物。
通常,目前的控制恶臭组合物将包括一种或多种在以下水平下的气味控制剂:占控制恶臭组合物重量的从约0.001%至约99.99%,优选地从约0.002%至约99.9%,并且更优选地从约0.005%至约99%。当这些组合物是待喷洒至表面(如织物)上的水性液体组合物(尤其是非气雾组合物)时,这些组合物将优选地包括占所述组合物重量的小于约20%、优选地小于约10%、更优选地小于约5%的气味控制剂。该气味控制剂用于减少或去除来自用本发明组合物处理的表面或物体的恶臭。该气味控制剂优选地选自下组,该组由以下各项组成:未复合的环糊精;气味阻断剂;反应性醛;黄酮类;沸石;活性炭;以及其混合物。
未复合的环糊精
如本文使用的,术语“未复合的环糊精”包括任何已知的处于未复合形式的环糊精(如未取代的环糊精),这些环糊精包含从六至十二个葡萄糖单元,尤其是α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精和/或它们的衍生物和/或其混合物。该α-环糊精由六个葡萄糖单元组成,该β-环糊精由七个葡萄糖单元组成,并且该γ-环糊精由安排在圆环形环中的八个葡萄糖单元组成。这些葡萄糖单元的特异性偶联和构象给予环糊精一个刚性的、圆锥形分子结构,该结构具有特定体积的中空内部。每个内部空腔的“内层”由氢原子和糖苷桥接氧原子形成;因此,该表面是相当疏水的。所述空腔的独特形状和物理化学特性使得这些环糊精分子能够吸收(与之形成包合复合物)可以装配到所述空腔中的有机分子或有机分子的部分。许多气味分子可以装配到该空腔中,该空腔包括许多恶臭分子和香味分子。因此,环糊精,并且尤其是具有不同尺寸空腔的环糊精的混合物可以用于控制由广谱有机气味材料引起的气味,所述有机气味材料可以或可以不包含反应性官能团。环糊精和气味分子之间的复合在水的存在下迅速发生。然而,复合物形成的程度也取决于吸附分子的极性。在水性溶液中,如果真发生的话,强亲水性分子(高度水溶性的那些)仅部分被吸收。因此,当环糊精以低水平存在于表面上时,它们不与一些非常低分子量的有机胺和酸进行有效地复合。本发明的除臭组合物中的环糊精内的这些空腔应在溶液中基本上保持未填充(该环糊精保持未复合),以便当该溶液施用于表面时允许该环糊精吸收不同气味分子。在室温下使用的条件下,非衍生的(正常的)β-环糊精可以按达到其溶解度极限为约1.85%(在100g水中约1.85g)的水平下存在。优选地,本发明中使用的环糊精是高度水溶性的,如α-环糊精和/或其衍生物、γ-环糊精和/或其衍生物、衍生的β-环糊精、和/或其混合物。环糊精的这些衍生物主要由其中OH基团中的一些转化为OR基团的分子组成。环糊精衍生物包括,例如,具有短链烷基团的那些,如甲基化的环糊精、和乙基化的环糊精,其中R是甲基或乙基基团;具有经羟烷基取代的基团的那些,如羟丙基环糊精和/或羟乙基环糊精,其中R是-CH2-CH-(OH)-CH3或-CH2CH2-OH基团;支链环糊精,如麦芽糖键合的环糊精;阳离子环糊精,如包含2-羟基-3-(二甲基氨基)丙基醚的那些,其中R是CH2-CH(OH)-CH2-N-(CH3)2,其在低pH下是阳离子;季铵,例如,2-羟基-3-(三甲基铵基)丙基醚氯化物基团,其中R是CH2-CH-(OH)-CH2-N+(CH3)3Cl-;阴离子环糊精,如羧甲基环糊精、环糊精硫酸酯、以及环糊精琥珀酸酯;两性环糊精,如羧甲基/季铵环糊精;环糊精,其中至少一个吡喃葡萄糖单元具有3-6-脱水-环麦芽糖结构,例如单3-6-脱水环糊精,如在“具有最小化学修饰的环糊精的最佳性能(OptimalPerformances with Minimal Chemical Modification of Cyclodextrins)”,F.Diedaini-Pilard和B.佩尔利(Perly),第七届国际环糊精研讨会摘要(The 7thInternational Cyclodextrin Symposium Abstracts),1994年4月,第49页所披露的;及其混合物。其他环糊精衍生物披露于以下美国专利号中:3,426,011,Parmerter等人,1969年2月4日发行;3,453,257、3,453,258、3,453,259、和3,453,260,全部在Parmerter等人的名下,并且全部在1969年7月1日发行;3,459,731,格拉梅拉(Gramera)等人,1969年8月5日发行;3,553,191,Parmerter等人,1971年1约5日发行;3,565,887,Parmerter等人,1971年2约23日发行;4,535,152,Szejtli等人,1985年8约13日发行;4,616,008,平井(Hirai)等人,1986年10月7日发行;4,678,598,荻野(Ogino)等人,1987年7月7日发行;4,638,058,勃兰特(Brandt)等人,1987年1月20日发行;以及4,746,734,土山(Tsuchiyama)等人,1988年5月24日发行。另外的本文适合的环糊精衍生物包括披露于V.T.迪索萨(D'Souza)和K.B.Lipkowitz,化学评论:环糊精(CHEMICAL REVIEWS:CYCLODEXTRINS),98卷,5期(美国化学学会(American Chemical Society),1998年7月/8月)中的那些。
高水溶性环糊精是在室温下在100ml水中具有至少约10g的水溶性的那些,优选地在室温下在100ml水中至少约20g,更优选在100ml水中至少约25g。当溶解的水溶性环糊精沉积在表面,尤其是铺有地毯的表面上时,其可以表现出比非水溶性环糊精更有效的气味控制性能。
适用于本文的优选的水溶性环糊精衍生物的实例是羟丙基α-环糊精、甲基化的α-环糊精、甲基化的β-环糊精、羟乙基β-环糊精、以及羟丙基β-环糊精。羟烷基环糊精衍生物优选地具有从约1至约14,更优选从约1.5至约7的取代度,其中每个环糊精的OR基团的总数被定义为取代度。甲基化的环糊精衍生物典型地具有从约1至约18,优选地从约3至约16的取代度。已知的甲基化β-环糊精是通常称为DIMEB的七-2,6-二-O-甲基-环糊精,其中每个葡萄糖单元具有2个约14的取代度的甲基基团。优选的、更商业上可得的甲基化β-环糊精是通常称为RAMEB的随机甲基化的β-环糊精,其具有不同的取代度,通常为约12.6。RAMEN比DIMEB更优选,因为DIMEB比RAMEN更影响优选的表面活性剂的表面活性。这些优选的环糊精是可获得的,例如来自赛利事达美国公司(Cerestar USA,Inc.)和瓦克化学品(美国)公司(Wacker Chemicals(USA),Inc.)。
使用环糊精的混合物也是优选的。这些混合物通过与具有更宽范围的分子大小的更宽范围的有气味分子进行复合而更广泛地吸收气味。优选地,至少一部分环糊精是α-环糊精及其衍生物、γ-环糊精及其衍生物、和/或衍生的β-环糊精,更优选地是α-环糊精或α-环糊精衍生物和衍生的β-环糊精的混合物,甚至更优选地是衍生的α-环糊精和衍生的β-环糊精的混合物,最优选地是羟丙基α-环糊精和羟丙基β-环糊精的混合物、和/或甲基化的α-环糊精和甲基化的β-环糊精的混合物。由于环糊精可以是某些微生物的主要繁殖场所,所以尤其当在水性组合物中时,优选包括如下所述的水溶性防腐剂(其有效抑制和/或调节微生物生长)以增加包含水溶性环糊精的吸收气味的水溶液的储存稳定性。
气味阻断剂“气味阻断剂”可以用作气味控制剂以减轻恶臭作用。
为了有效,这些气味阻断剂正常必须要始终存在。如果气味阻塞剂在气味来源消失之前蒸发了,则更不可能控制气味。而且,气味阻断剂可以通过阻断所需的气味如香味而倾向于不利地影响美感。在本发明组合物中适合作为气味控制剂的气味阻断剂的非限制性实例包括4-环己基-4-甲基-2-戊酮、4-乙基环己基甲基酮、4-异丙基环己基甲基酮、环己基甲基酮、3-甲基环己基甲基酮、4-叔丁基环己基甲基酮、2-甲基-4-叔丁基环己基甲基酮、2-甲基-5-异丙基环己基甲基酮、4-甲基环己基异丙基酮、4-甲基环己基异丙基酮、4-甲基环己基仲丁基酮、4-甲基环己基异丁基酮、2,4-二甲基环己基甲基酮、2,3-二甲基环己基甲基酮、2,2-二甲基环己基甲基酮、3,3-二甲基环己基甲基酮、4,4-二甲基环己基甲基酮、3,3,5-三甲基环己基甲基酮、2,2,6-三甲基环己基甲基酮、1-环己基-1-乙基甲酸酯、1-环己基-1-乙基乙酸酯、1-环己基-1-乙基丙酸酯、1-环己基-1-乙基异丁酸酯、1-环己基-1-乙基异丁酸酯、1-环己基-1-乙基正丁酸酯、1-环己基-1-丙基乙酸酯、1-环己基-1-丙基正丁酸酯、1-环己基-2-甲基-1-丙基乙酸酯、2-环己基-2-丙基乙酸酯、2-环己基-2-丙基丙酸酯、2-环己基-2-丙基异丁酸酯、2-环己基-2-丙基正丁酸酯、5,5-二甲基-1,3-环己二酮(二甲酮)、2,2-二甲基-1,3-二恶烷-4,6-二酮(米氏酸(Meldrum's acid))、螺-[4.5]-6,10-二氧杂-7,9-二氧代癸烷、螺-[5.5]-1,5-二氧杂-2,4-二氧代十一烷、2,2-羟甲基-1,3-二恶烷-4,6-二酮以及1,3-环己二酮。气味阻断剂更详细地披露于美国专利号4,009,253;4,187,251;4,719,105;5,441,727;以及5,861,371中。
反应性醛
作为一种任选的气味控制剂,反应性醛可以用作气味控制剂以减轻恶臭作用。适合的反应性醛的非限制性实例包括I类醛、II类醛、及其混合物。I类醛的非限制性实例包括茴香醛(anisic aldehyde)、邻烯丙基香草醛、苯甲醛、茴香甲醛、乙基茴香醛(ethyl-aubepin)、乙基香草醛、胡椒醛、甲苯醛以及香草醛。II类醛的非限制性实例包括3-(4'-叔丁基苯基)丙醛、2-甲基-3-(4'-叔丁基苯基)丙醛、2-甲基-3-(4'-异丙基苯基)丙醛、2,2-二甲基-3-(4-乙基苯基)丙醛、肉桂醛、α-戊基-肉桂醛以及α-己基-肉桂醛。这些反应性醛更详细地描述于美国专利号5,676,163中。
当使用时,反应性醛可包括至少两种醛的组合,其中一种醛选自无环脂族醛、非萜烯脂族醛、非萜烯脂环族醛、萜烯醛、被芳族基团取代的脂族醛、以及双官能醛;并且该第二种醛选自具有与芳香环共轭的醛官能团的α不饱和度的醛、和其中所述醛基在芳香环上的醛。该至少两种醛的组合更详细地描述于国际专利申请公开号WO 00/49120中。
如本文所使用的,术语“反应性醛”进一步涵盖除臭材料,该除臭材料是以下反应的反应产物:(i)醛与醇,(ii)酮与醇,或(iii)醛与相同或不同的醛。这种除臭材料可以是:(a)借助醛与甲醇反应产生的缩醛或半缩醛;(b)借助酮与甲醇反应产生的缩酮或半缩酮;(c)至少两种醛的环状三缩醛或混合环状三缩醛,或任何这些缩醛、半缩醛、缩酮、半缩酮或环状三缩醛的混合物。这些除臭香味材料更详细地描述于国际专利申请公开号WO 01/07095中。
黄酮类
黄酮类也可以用作气味控制剂。黄酮类是基于Ca Q Q、黄烷骨架的化合物。黄酮类可以发现于典型的精油中。这样的油包括通过干燥蒸馏从针叶树和草,如雪松、日本柏树、桉树、日本红松、蒲公英、矮条纹竹以及老鹳草提取的精油,并且可以包含萜烯材料,如α-蒎烯、β-蒎烯、月桂烯、酰苯以及莰烯。也包括来自茶叶的提取物。此类材料的说明可以发现于JP 02284997和JP 04030855中。
金属盐
本发明的气味控制剂可以包括用于恶臭控制益处的金属盐。这些金属盐选自下组,该组由以下各项组成:铜盐、锌盐、及其混合物。
优选的锌盐具有恶臭控制能力。锌因其减轻恶臭的能力已经最常用于例如漱口水产品中,如在美国专利号4,325,939和4,469,674中所披露的。高离子化的和可溶性的锌盐,如氯化锌提供了最好的锌离子来源。优选的锌盐选自下组,该组由以下各项组成:硼酸锌、辛酸锌、氯化锌、蓖麻油酸锌、七水合硫酸锌、十一碳烯酸锌、及其混合物。
优选地这些金属盐是水溶性锌盐、铜盐或其混合物,并且更优选地是锌盐,尤其是ZnCl2。这些盐优选地作为主要以吸收胺和含硫化合物的气味控制剂存在于本发明中。低分子量含硫材料,例如硫化物和硫醇,是许多类型的恶臭,例如食物气味(大蒜、洋葱)、身体/汗味、呼吸气味等的组分。低分子量胺也是许多恶臭,例如食物气味、身体异味、尿液等的组分。
当使用时,锌盐可以与具有化学式R-(O-CH2-CH2)-X-O-CH2COO-的阴离子表面活性剂进行组合,其中R是脂肪醇取代基或烷基芳基取代基,并且X是至少2个。这种阴离子表面活性剂可以充当锌盐的控制释放剂,以改进所述组合物的恶臭控制性能。该锌盐和阴离子表面活性剂的组合更详细地描述于美国专利号6,358,469中。
当使用时,锌盐也可以与碳酸盐和/或碳酸氢盐进行组合以改进所述组合物的恶臭控制特性。当锌盐与碳酸盐和/或碳酸氢盐组合时,所述组合物优选地进一步包括稳定化阴离子,该稳定化阴离子选自具有多于一个-(P=O)-基团的磷酸盐和具有多于一个酸官能团的有机酸。锌盐、碳酸盐和/或碳酸氢盐、以及稳定化的阴离子的这一组合更详细地描述于美国专利号6,015,547中。
铜盐拥有一些恶臭控制能力。参见美国专利号3,172,817,里奥波特(Leupold)等人,该专利号披露了用于处理一次性制品的除臭组合物,该除臭组合物包括至少轻微水溶性的乙酰丙酮盐,包括铜盐和锌盐。当将金属盐作为气味控制剂添加至本发明的组合物中时,它们通常以占所述组合物重量的从约0.001%至有效量的水平存在以提供饱和盐溶液,优选地从约0.002%至约25%,更优选地从约0.003%至约8%,甚至更优选地从约0.1%至约5%。
沸石
本文的这些气味控制剂还可以是沸石。优选的一类沸石被表征为“中间体”硅酸盐/铝酸盐沸石。通过小于约10的SiOx/A10z摩尔比来表征这些中间体沸石。优选地,Si02/A102的摩尔比范围从约2至约10。这些中间体沸石可以具有优于“高”沸石的优点。这些中间体沸石对胺类气味具有更高亲和力,它们对于气味吸收更有效,因为它们具有更大的表面积,并且它们比高沸石更耐水分并且在水中保持更多的它们的气味吸收能力。适用于本文使用的多种多样的中间体沸石是可商购的,如CP301-68、300-63、CP300-35、以及CP300-56,获得自PQ公司,并且沸石的系列获得自Conteka公司。
以商品名销售的,获得自联合碳化物公司(Union CarbideCorporation)和UOP的沸石材料,也是优选的。这些材料优于用于控制含硫气味(例如硫醇(thiol)、硫醇(mercaptan))的中间体沸石。当沸石用作待喷洒至表面上的组合物中的气味控制剂时,该沸石材料优选地具有小于约10微米的颗粒大小,并且以占所述组合物重量的小于约1%的水平存在于组合物中。
活性炭
活性炭是用于掺入本发明的组合物中的另一种适合的气味控制剂。适合用于在本发明中使用的碳材料是在商业实践中作为针对有机分子和/或空气净化目的的吸附剂而言熟知的材料。通常,这种碳材料被称为“活性”碳或“活性”活性木炭。
这样的碳从在这样的商品名下的商业来源可获得:Calgon-TypeTypeTypeType以及Type
当活性炭用作待喷洒至表面上的组合物中的气味控制剂时,该活性炭优选地具有小于约10微米的颗粒大小,并且以占所述组合物重量的小于约1%的水平存在于组合物中。
就本文所述的作为气味控制剂的任何材料也可以分类为本文所述的另一种组分的程度而言,出于本发明的目的,这种材料应被归类为气味控制剂。
疏水修饰的恶臭控制聚合物(HMP)
该气味控制剂可以是如在WO 2012097034中所描述的疏水修饰的恶臭控制聚合物。
本发明的该组合物包括疏水修饰的恶臭控制聚合物(HMP)。HMP由具有伯胺、仲胺和/或叔胺基团的多胺聚合物形成,这些伯胺、仲胺和/或叔胺基团被疏水基团如烷基、烯基、烷基氧化物或酰胺修饰。尽管所述胺基团已被修饰,但是HMP具有至少一个游离并且未修饰的伯胺、仲胺和/或叔胺基团,以与恶臭组分反应。不希望受理论束缚,疏水修饰可以增加聚合物对疏水性气味的亲和力,从而使得气味分子和活性胺位点之间能够相互作用。反过来,HMP可以改进恶臭去除效率的广度。
本发明的HMP具有以下通式(I):
P(R)x (I)
其中:P是多胺聚合物;
R是C2至C26疏水基团;并且
x是该聚合物上的胺位点的总取代度,其小于100%。
1.多胺聚合物
HMP可以包括可以是直链或环状的多胺聚合物主链。HMP还可以包括多胺支链。该多胺聚合物具有通式(I1):
其中Q是具有0-3之间的值的整数。
多胺聚合物的非限制性实例包括直链或支链的聚乙烯胺(PVam)、聚乙烯亚胺(PEI),聚酰胺胺(PAMam),聚烯丙胺(PAam),聚醚胺(PEam)或其它含氮聚合物(如赖氨酸),或这些含氮聚合物的混合物。
a.PVam在一个实施例中,该HMP包括PVam主链。PVam是具有悬垂的伯胺基团的直链聚合物,这些伯胺基团直接连接至交替的碳的主链上。PVam由聚(N-乙烯基甲酰胺)(PVNF)的水解制造,该PVNF生成对如下式(I1a)所述的con no基团:
其中n是取决于水解度的从0.1至0.99的数字。例如,在95%水解的PVam中,n将是0.95,同时5%的聚合物将具有乙烯基甲酰胺单位。PVam可以是部分水解的,意指1%至99%、可替代地30%至99%,可替代地50%至99%、可替代地70%至99%、可替代地80%至99%、可替代地85%至99%、可替代地90%至99%、可替代地95%至99%、可替代地97%至99%、可替代地99%的PVam被水解。已经发现,高度水解的PVam增加了所得聚合物减轻气味的能力。可以水解的PVam可以具有5,000至350,000的平均分子量(MW)。适合的水解的PVam是从BASF可商购的。一些实例包括Lupamin(TM)9095、9030、5095、以及1595。
然后这些水解的PVam可以是疏水修饰的。如下面所述的疏水修饰可以进一步改进去除恶臭效力。
b.聚烷基烯亚胺/PEI在另一个实施例中,该HMP包括聚烷基烯亚胺主链。聚烷基烯亚胺包括PEI和聚丙烯亚胺连同C4-C12烷基烯亚胺。PEI是适合的聚烷基烯亚胺。PEI的化学结构遵循一个简单的原则:一个胺官能和两个碳。PEI具有以下通式(l1b):-(CH2-CH2-NH)n- (l1b):
其中n=10-105
PEI构成具有不同分子量、结构和修饰程度的大家族的水溶性多胺。它们可以充当弱碱并且可以表现出阳离子特性,这取决于由pH驱动的质子化程度。
通过如下所示的乙烯亚胺的开环阳离子聚合来产生PEI。
PEI被认为是高度支链化的,其包含比例为约1:2:1的伯胺、仲胺和叔胺基团。PEI可以包括范围从约30%至约40%、可替代地从约32%至约38%、可替代地从约34%至约36%的伯胺。PEI可以包括范围从约30%至约40%、可替代地从约32%至约38%、可替代地从约34%至约36%的仲胺。PEI可以包括范围从约25%至约35%、可替代地从约27%至约33%、可替代地从约29%至约31%的叔胺。
其它合成途径会生成具有修饰的支链结构的产物或甚至直链PEI。直链PEI在主链上包含胺位点,同时支链的PEI在主链和侧链上包含胺。下面是直链PEI的实例。
本发明的组合物可以包括具有以下MW的PEI:约800至约2,000,000、可替代地约1,000至约2,000,000、可替代地约1,200至约25,000、可替代地约1,300至约25,000、可替代地约2,000至约25,000、可替代地约10,000至约2,000,000、可替代地约25,000至约2,000,000、可替代地约25,000。
在一个实施例中,该PEI可以具有1.05的比重和/或18(mmol/g,固体)的胺值。为了清楚起见,PEI的这种比重和/或胺值描述了在其作为水性组合物的一部分被修饰或添加之前的PEI。本领域技术人员将理解,例如,伯氨基和仲氨基可以与该组合物的其它组分进行反应。
示例性PEI包括以商品名从BASF公司或以商品名EpomineTM从NipponShokubia公司可商购的那些。
在一些实施例中,小于100%的活性胺位点被疏水官能团取代,可替代地约0.5%至约90%、可替代地约0.5%至约80%、可替代地约0.5%至约70%、可替代地约0.5%至约60%、可替代地约0.5%至约50%、可替代地约0.5%至约40%、可替代地约0.5%至约35%、可替代地约0.5%至约30%、可替代地约1%至约30%、可替代地约可替代地约1%至约25%、可替代地约1%至约20%、可替代地约5%至约20%、可替代地约10%至约30%、可替代地约20%至约30%、可替代地约20%的活性胺位点被疏水官能团取代。当PEI具有被疏水官能团完全取代的活性胺位点时,这种疏水修饰的PEI会对恶臭控制没有活性。
c.PAMam在另一个实施例中,该HMP包括PAMam主链。PAMam是聚合物,该PAMam的主链包含氨基官能团(NH)和酰胺官能团(NH-C(O))二者。PAMam还在聚合物链的末端包含伯胺基团和/或羧基基团。PAMam的通用结构是下面的(l1e):
d.PAam在另一个实施例中,该HMP包括PAam主链。从烯丙胺-C3H5NH2的聚合来制备PAam。不像PEI,它们仅包含针对PAAm的伯胺基基团,示于下面(l1d):
e.PEam在又一另一个实施例中,该HMP包括PEam主链。PEam包含附接至聚醚主链末端的伯氨基基团。该聚醚主链可以基于丙烯氧化物(PO)、丙烯氧化物(EO)、或混合的PO/EO。针对PEam的通式示于下面(l1e):
R=针对(EO)的H或针对(PO)的CH3
这些所谓的单胺,M系列,是从Hunstman公司以商品名单胺可商购的。在另一个实施例中,该HMP包括具有如以下(I1f)示出的二胺的PEam主链:
二胺是从Hunstman公司以商品名Jeffamine<(R)>二胺(例如D、ED、以及EDR系列)可商购的。该HMP还可以包括具有三胺(例如三胺T系列)的PEam主链。
2.其他聚合物单元HMP可以包括具有以下化学式(I2)的含氮聚合物的共聚物:
其中Q是具有0-3之间的值的整数并且V是共聚单体。(I2)未修饰的聚合物的非限制性实例包括乙烯基酰胺、乙烯基吡咯烷酮、乙烯基咪唑、乙烯基酯、乙烯基醇、及其混合物。
3.疏水基团
HMP的疏水基团可以是直链的、支链的或环状的烷基、羟基烷基、烯基、羟基烯基、烷基羧基、醇盐、烷基氧化物、亚烷基、酰胺或芳基。在一些实施例中,该疏水基团是C2至C26,可替代地是C2至C12,可替代地是C2至C10,可替代地是C4是C10,可替代地是C16是C26,可替代地是C6。当环糊精包括在配制品中时,可能希望使用已经用C2至C10烷基基团、可替代地C16至C26烷基基团、可替代地C6烷基基团修饰的HMP,因为这样的烷基是环糊精相容的。
4.疏水修饰
这些多胺主链以这样的方式进行疏水修饰,使得该多胺链的至少一个氮,可替代地每个氮,随后根据被取代、季铵化、氧化或其组合的单位来描述。
有许多方式将多胺聚合物疏水修饰。通常,该修饰是针对聚合物的伯胺、仲胺和/或叔胺的修饰。通过将未修饰的多胺主链与适当的试剂进行反应,可以使多胺聚合物疏水,尤其增加去除恶臭的效力。以下是制备本文披露的HMP的方式的非限制性实例。
a.烷氧基化
多胺聚合物与包含环氧化物烃(R)的反应导致聚合物上的一个或多个氮部分的取代。
其中R>C2。
这种烃的非限制性实例包括取代的或未取代的、支链的或非支链的C2-C26链。例如,十二碳烯氧化物与PEI聚合物的反应导致本文披露的C6-HMP具有如下所示的结构。
可替代地,可以通过首先与EO反应然后通过烷基化完成修饰,从而修饰该基础聚合物。如果希望更多的水溶性,另外的修饰也可以包括用EO基团封端这一修饰的聚合物。可替代地,可以通过进一步与如下面c小段中所述的烷氧基化聚合物进行反应来取代羟基基团。
b.酰胺化
多胺聚合物与酰胺形成试剂如酸酐、内酯、异氰酸酯或羧酸的反应导致该聚合物上的一个或多个氮部分的取代,赋予疏水特征赋予疏水特征。在酰胺化之前,可以用EO或PO开始部分取代胺位点,并且然后对剩余的胺部分进行酰胺化。酸酐与多胺聚合物的反应导致通过部分取代伯胺/仲胺位点而形成该聚合物的酰胺单元。非限制性实例包括非环状羧酸酐如乙酸酐,或环状羧酸酐如马来酸酐、琥珀酸酐或邻苯二甲酸酐。例如,多胺与乙酸酐的反应将酰胺单元引入到该聚合物上。
其中R>C2。
另一方面,多胺聚合物与环状酸酐的反应将氨基酸单元引入到该聚合物上。
可以通过使用环状酸酐如亚烷基琥珀酸酐、十二烯基琥珀酸酐或聚异丁烷琥珀酸酐来制备更多的疏水修饰的衍生物。
其中R>C2。
包含羟基末端的聚酰胺基单元的多胺聚合物可以通过聚合物与内酯反应来制备。使用更疏水的烷基取代的内酯可以引入更多的疏水性。任选地,羟基端基团可以进一步被如下面小段c中所述的官能团取代。
与多胺聚合物的异氰酸酯反应导致形成如下所示的脲衍生物。
其中R>C2。
c.烷氧基化。随后是羟基基团取代后
另外的官能团可以共价键合到烷氧基化的多胺聚合物上的OH基团上(化学式(I)中的“x”)。这可以通过使烷氧基化的聚合物与双官能化合物如表卤代醇(如表氯醇)、2-卤代酸卤化物、异氰酸酯或二异氰酸酯(如三甲基己烷二异氰酸酯)、或环状羧酸酐(如马来酸酐或邻苯二甲酸酐)进一步反应来实现。例如,烷氧基化的PEI与异氰酸酯的反应产生:
其中R>C2。
烷氧基化的PEI和烷(烯)基琥珀酸酐的反应产物产生
其中R>C2。
本文披露的所有这些HMP可以任选地用亲水基团如EO进行封端,以在必要时赋予水溶性。
在一些实施例中,约0.5%至约90%的整体未修饰的多胺聚合物上的胺基团可以被疏水基团取代,可替代地约0.5%至约80%、可替代地约0.5%至约70%、可替代地约0.5%至约60%、可替代地约0.5%至约50%、可替代地约0.5%至约40%、可替代地约0.5%至约35%、可替代地约0.5%至约30%、可替代地约1%至约30%、可替代地约可替代地约1%至约25%、可替代地约1%至约20%、可替代地约5%至约20%、可替代地约10%至约30%、可替代地约20%至约30%、可替代地约20%的整体未修饰的多胺聚合物上的胺基团可以被疏水基团取代。这些胺单元的取代水平可以低至在所有伯胺、仲胺和/或叔胺单元已经被替换的情况下的理论最大值的0.01摩尔百分数。用于本文使用的HMP可以具有从约150至约2*106、可替代地从约400至约106、可替代地从约5000至约106的MW。适合用于在本发明中使用的恶臭控制聚合物是水溶性的或可分散的。在一些实施例中,该多胺链的伯胺、仲胺和/或叔胺被部分取代,赋予疏水性,同时保持所希望的水溶性。HMP的最小溶解度指数可以为约2%(即2g/100ml的水)。用于水性织物清新剂配制品的适合的HMP可以具有大于约0.5%至100%、可替代地大于约5%、可替代地大于约10%、可替代地大于约20%的水溶性百分比。水溶性指数可以通过WO 2012/097034的第13页上的水溶性测试进行确定。
挥发性醛
所述恶臭控制组合物包括经由化学反应,中和蒸气和/或液相中的恶臭的挥发性醛。部分挥发性的醛可以被认为是如本文所使用的挥发性醛。挥发性醛可以与基于胺的气味进行反应,遵循席夫碱(Schiff-base)形成的路径。挥发性醛还可以与基于硫的气味进行反应,在蒸气和/或液相中形成硫醇缩醛、半硫醇缩醛和硫酯。会希望这些蒸气和/或液相挥发性醛对产品的希望香味特征几乎没有负面影响。
适合的挥发性醛可以具有在25℃下测量的范围为以下各项的蒸气压(VP):约0.0001托至约100托、可替代地约0.0001托至约10托、可替代地约0.001托至约50托、可替代地约0.001托至约20托、可替代地约0.001托至约0.100托、可替代地约0.001托至0.06托、可替代地约0.001托至0.03托、可替代地约0.005托至约20托、可替代地约0.01托至约20托、可替代地约0.01托至约15托、可替代地约0.01托至约10托、可替代地约0.05托至约10托。挥发性醛也可以具有某一沸点(B.P.)和辛醇/水分配系数(P)。本文提及的B.P.是在760mmHg的正常标准压力下测量的。在标准760mm Hg下,许多挥发性醛的B.P.在例如由斯蒂芬·阿克坦诺(Steffen Arctander),1969年写的和出版的“香料和香精化学品(芳香化学品)(Perfume and Flavor Chemicals(Aroma Chemicals))”中给出。
挥发性醛的辛醇/水分配系数是其在辛醇和在水中的平衡浓度之间的比率。在恶臭控制组合物中使用的挥发性醛的分配系数可以更方便地按它们以10为底的对数logP的形式给出。已经报道了许多挥发性醛的logP值。参见,例如,Pomona92数据库,从加利福尼亚州、尔湾市(Irvine)、日光化学信息系统公司(Daylight Chemical Information Systems,Inc.(Daylight CIS))可获得。然而,通过也从Daylight CIS可获得的“CLOGP”程序,最方便地计算logP值。该程序还列出了实验logP值,当它们在Pomona 92数据库中可用时。通过汉施(Hansch)和利奥(Leo)的片段方法来确定该“计算的logP”(ClogP)(参见,A.利奥(Leo),在综合药物化学(Comprehensive Medicinal Chemistry)中,第4卷,C.汉施(Hansch),P.G.Sammens,J.B.泰勒(Taylor)以及C.A.拉姆斯登(Ramsden)编辑,第295页,培格曼出版社(Pergamon Press),1990)。该片段方法基于每种挥发性醛的化学结构,并且考虑原子的数量和类型、原子连接性、以及化学键合。在选择用于所述恶臭控制组合物的挥发性醛中,优选使用ClogP值(该ClogP值是对于该物理化学特性而言最可靠和广泛使用的估计值),而不使用实验logP值。
该ClogP值可以由四个组限定,并且这些挥发性醛可以选自这些组中的一个或多个。第一组包括挥发性醛,这些挥发性醛具有为约250℃或更低的B.P.和为约3或更低的ClogP。第二组包括挥发性醛,这些挥发性醛具有为约250℃或更低的B.P.和为约3.0或更高的ClogP。第三组包括挥发性醛,这些挥发性醛具有为约250℃或更高的B.P.和为约3.0或更低的ClogP。第四组包括挥发性醛,这些挥发性醛具有为约250℃或更高的B.P.和为约3.0或更高的ClogP。所述恶臭控制组合物可以包括来自一个或多个ClogP组的挥发性醛的任何组合。
在一些实施例中,该恶臭控制组分可以包括按恶臭控制组分的重量计从约0%至约30%的来自组1的挥发性醛,可替代地约25%;和/或约0%至约10%的来自组2的挥发性醛,可替代地约10%;和/或从约10%至约30%的来自组3的挥发性醛,可替代地约30%;和/或从约35%至约60%来自组4的挥发性醛,可替代地约35%。
可以配制成新鲜组合物中的挥发性醛的量可以是按新鲜组合物的重量计的从约0.015%至约1%、可替代地从约0.01%至约0.5%、可替代地从约0.015%至约0.3%。
可以用于恶臭控制组分的示例性挥发性醛包括但不限于阿道克醛(Adoxal)(2,6,10-三甲基-9-十一烯醛)、Bourgeonal(4-叔-丁基苯丙醛)、铃兰醛(Lilestralis)33(2-甲基-4-叔-丁基苯基)丙醛)、肉桂醛、肉桂醛(苯基丙烯醛、3-苯基-2-丙烯醛)、柠檬醛、香叶醛、橙花醛(Neral)(二甲基辛二烯醛、3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-醛)、Cyclal C(2,4-二甲基-3-环己烯-1-甲醛)、花青醛(Florhydral)(3-(3-异丙基-苯基)-丁醛)、香茅醛(3,7-二甲基6-辛烯醛)、Cymal、仙客来醛、Cyclosal、柠檬醛(Lime aldehyde)(α-甲基-对-异丙基苯基丙醛)、甲基壬基乙醛、醛C12MNA(2-甲基-1-十一烷醛)、羟基香茅醛、香茅醛水合物(7-羟基-3,7-二甲基辛-1-醛)、新洋茉莉醛(Helional)(α-甲基-3,4-(亚甲基二氧基)-氢化肉桂醛)、氢化肉桂醛(3-苯基丙醛(3-phenylpropanal)、3-苯基丙醛(3-phenylpropionaldehyde))、Intreleven醛(十一-10-烯-1-醛)、女贞醛(Ligustral)、Trivertal(2,4-二甲基-3-环己烯-1-甲醛)、Jasmorange、satinaldehyde(2-甲基-3-甲苯基丙醛、4-二甲基苯丙醛)、新铃兰醛(Lyral)(4-(4-羟基-4-甲基戊基)-3-环己烯-1-甲醛)、甜瓜醛(2,6-二甲基-5-庚醛)、甲氧基甜瓜醛(6-甲氧基-2,6-二甲基庚醛)、甲氧基肉桂醛(反式-4-甲氧基肉桂醛)、柑青醛(Myrac aldehyde)异己烯基环己烯基-甲醛、trifernal(3-甲基-4-苯基丙醛、3-苯基丁醛)、铃兰醛(lilial)、P.T.Bucinal、lysmeral、苯丙醛(4-叔-丁基-α-甲基-氢化肉桂醛)、Dupical、三环亚癸基丁醛(4-三环5210-2,6-亚癸基-8丁醛)、Melafleur(1,2,3,4,5,6,7,8-八氢-8,8-二甲基-2-萘醛)、甲基辛基乙醛、醛C-ll MOA(2-甲基十-1-醛)、Onicidal(2,6,10-三甲基-5,9-十一碳二烯-1-醛)、香茅基氧基乙醛、Muguet醛50(3,7-二甲基-6-辛烯基)氧基乙醛)、苯乙醛、Mefranal(3-甲基-5-苯基戊醛)、女贞醛(Triplal)、Vertocitral二甲基四氢苯醛(2,4-二甲基-3-环己烯-1-甲醛)、2-苯基丙醛、水解醛(Hydrotropaldehyde)、Canthoxal、茴香基丙醛4-甲氧基-α-甲基苯丙醛(2-亚茴香基丙醛)、Cylcemone A(1,2,3,4,5,6,7,8-八氢-8,8-二甲基-2-萘醛)以及Precylcemone B(1-环己烯-1-甲醛)。
其它示例性醛包括但不限于乙醛(acetaldehyde、ethanal)、戊醛(pentanal、valeraldehyde、amylaldehyde)、Scentenal(八氢-5-甲氧基-4,7-桥亚甲基-1H-茚-2-甲醛)、丙醛(propionaldehyde、propanal)、环柠檬醛、β-环柠檬醛、(2,6,6-三甲基-1-环己烯-1-乙醛)、异环柠檬醛(2,4,6-三甲基-3-环己烯-1-甲醛)、异丁醛、丁醛、异戊醛(3-甲基丁醛)、甲基丁醛(2-甲基丁醛(2-methyl butyraldehyde、2-methyl butanal))、二氢香茅醛(3,7-二甲基辛-1-醛)、2-乙基丁醛、3-甲基-2-丁烯醛、2-甲基戊醛(2-Methylpentanal)、2-甲基戊醛(2-Methyl Valeraldehyde)、己烯醛(2-己烯醛、反式-2-己烯醛)、庚醛、辛醛、壬醛、癸醛、月桂醛、十三醛、2-十二烷醛、甲基硫代丁醛、戊二醛(Glutaraldehyde、Pentanedial、Glutaric aldehyde)、庚烯醛、顺式-或反式-庚烯醛、十一烯醛(2-、10-)、2,4-辛二烯醛、壬烯醛(2-、6-)、癸烯醛(2-、4-)、2,4-己二烯醛、2,4-癸二烯醛、2,6-壬二烯醛、辛烯醛、2,6-二甲基5-庚烯醛、2-异丙基-5-甲基-2-己烯醛、Trifernal、β甲基苯丙醛、2,6,6-三甲基-1-环己烯-1-乙醛、苯基丁烯醛(2-苯基2-丁烯醛)、2-甲基-3(对-异丙基苯基)丙醛、3(对-异丙基苯基)丙醛、对甲苯基乙醛(4-甲基苯基乙醛)、茴香醛(对-甲氧基苯醛)、Vernaldehyde(1-甲基-4-(4-甲基戊基)-3-环己烯甲醛)、胡椒醛(Heliotropin、piperonal)3,4-亚甲基二氧基苯甲醛、α-戊基肉桂醛、2-戊基-3-苯基丙烯醛、香草醛(4-甲氧基3-羟基苯甲醛)、乙基香草醛(3-乙氧基-4-羟基苯甲醛)、己基肉桂醛、Jasmonal H(α-正己基-肉桂醛)、海风醛(Floralozone)(α,α-二甲基-对-乙基苯基丙醛)、Acalea(对-甲基-α-戊基肉桂醛)、甲基肉桂醛、α-甲基肉桂醛(2-甲基-3-苯基丙烯醛)、α-己基肉桂醛(2-己基-3-苯基丙烯醛)、水杨醛(2-羟基苯甲醛)、4-乙基苯甲醛、枯茗醛(Cuminaldehyde)(4-异丙基苯甲醛)、乙氧基苯甲醛、2,4-二甲基苯甲醛、藜芦醛(3,4-二甲氧基苯甲醛)、丁香醛(3,5-二甲氧基-4-羟基苯甲醛)、儿茶醛(3,4-二羟基苯甲醛)、藏花醛(2,6,6-三甲基-1,3-二烯甲醛)、桃金娘烯醛(pin-2-烯-1-甲醛)、紫苏醛L-4(1-甲基乙烯基)-1-环己烯-1-甲醛)、2,4-二甲基-3-环己烯甲醛、2-甲基-2-戊烯醛、2-甲基戊烯醛、丙酮醛、甲酰基三环癸醛、Mandarin醛、Cyclemax、Pino乙醛、Corps Iris、马赛醛以及Corps4322。
在一个实施例中,该恶臭控制组分包括两种或更多种挥发性醛的混合物,这些挥发性醛选自下组,该组由以下各项组成:2-乙氧基苄醛、2-异丙基-5-甲基-2-己烯醛、5-甲基糠醛、5-甲基-噻吩-甲醛、阿道克醛、对-茴香醛、卞醛、Bourgenal、肉桂醛、Cymal、癸基醛、超级Floral(4,8-二甲基癸-4,9-二烯醛)、花青醛、新洋茉莉醛、月桂醛、女贞醛、新铃兰醛、甜瓜醛、邻-茴香醛、Pino乙醛、P.T.Bucinal、噻吩甲醛、反式-4-十烯醛、反式2,4-壬二烯醛、十一醛、及其混合物。
表面活性剂
洗涤剂组合物可以包括一种或多种表面活性剂,它们可以是阴离子的和/或阳离子的和/或非离子的和/或半极性的和/或兼性离子的或其混合物。在一个具体的实施方案中,该洗涤剂组合物包括一种或多种非离子型表面活性剂和与一种或多种阴离子表面活性剂的化合物。这种或这些表面活性剂典型地以按重量计从约0.1%至60%的水平存在,例如约1%至约40%、或约3%至约20%、或约3%至约10%。基于所希望的清洁应用来选择这种或这些表面活性剂,并且这种或这些表面活性剂包括本领域中已知的任何一种或多种常规表面活性剂。
当包含在其中时,该洗涤剂通常将会包含按重量计约1%至约40%的阴离子表面活性剂,如约5%至约30%,包括从约5%至约15%,或从约15%至约20%,或从约20%至约25%的阴离子型表面活性剂。阴离子表面活性剂的非限制性实例包括硫酸盐和磺酸盐,具体地说是直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)(如十二烷基硫酸钠(SDS))、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES,也被称为醇乙氧基硫酸盐或脂肪醇醚硫酸盐)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸或脂肪酸盐(皂)的二酯和单酯及其组合。
当被包括在其中时,该洗涤剂将通常包含按重量计从约0.2%至约40%的非离子表面活性剂,例如从约0.5%至约30%,特别是从约1%至约20%、从约3%至约10%,如从约3%至约5%、从约8%至约12%或从约10%至约12%。非离子型表面活性剂的非限制性实例包括醇乙氧基化物(AE或AEO)、醇丙氧基化物、丙氧基化的脂肪醇(PFA),烷氧基化的脂肪酸烷基酯(例如乙氧基化的和/或丙氧基化的脂肪酸烷基酯),烷基酚乙氧基化物(APE),壬基酚乙氧基化物(NPE),烷基多糖苷(APG),烷氧基化胺,脂肪酸单乙醇酰胺(FAM),脂肪酸二乙醇酰胺(FADA),乙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(EFAM),丙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(PFAM),多羟基烷基脂肪酸酰胺,或葡萄糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(葡糖酰胺(GA),或脂肪酸葡糖酰胺(FAGA)),连同在SPAN和TWEEN商品名下可获得的产品,及其组合。
当被包括在其中时,洗涤剂将通常包含按重量计从约0%至约40%的半极性表面活性剂。半极化表面活性剂的非限制性实例包括氧化胺(AO),如烷基二甲胺氧化物、N-(椰油基烷基)-N,N-二甲胺氧化物和N-(牛油-烷基)-N,N-双(2-羟乙基)胺氧化物,及其组合。
当被包括在其中时,洗涤剂将通常包含按重量计从约0%至约40%的兼性离子表面活性剂。兼性离子表面活性剂的非限制性实例包括甜菜碱,如烷基二甲基甜菜碱、磺基甜菜碱及其组合。
助水溶剂
助水溶剂是如下化合物,该化合物在水性溶液中溶解疏水化合物(或相反地,在非极性环境中的极性物质)。一般地,助水溶物具有亲水和疏水两种特征(所谓的两亲性质,如由表面活性剂已知的);然而,助水溶剂的分子结构一般不利于自发性自聚集,参见例如通过霍奇登(Hodgdon)和卡勒(Kaler)(2007),胶体&界面科学新见(Current Opinion inColloid&Interface Science)12:121-128的综述。助水溶剂并不显示临界浓度,高于该浓度就会发生如对表面活性剂而言所发现的自聚集以及脂质形成胶束、薄层或其他很好地定义的中间相。相反,许多助水溶物显示连续类型的聚集过程,其中聚集物的大小随着浓度增加而增长。然而,很多助水溶剂改变了包括极性和非极性特征的物质的系统(包括水、油、表面活性剂、和聚合物的混合物)的相行为、稳定性、和胶体特性。经典地从制药、个人护理、食品跨行业至技术应用使用助水溶剂。助水溶剂在洗涤剂组合物中的使用允许例如更浓的表面活性剂配制品(如在通过去除水而压缩液体洗涤剂的过程中)而不引起不希望的现象,例如相分离或高粘度。
洗涤剂可以包含按重量计0-10%,例如按重量计0-5%,例如约0.5至约5%、或约3%至约5%的助水溶剂。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何助水溶剂。助水溶剂的非限制性实例包括苯磺酸钠、对甲苯磺酸钠(STS)、二甲苯磺酸钠(SXS)、枯烯磺酸钠(SCS)、伞花烃磺酸钠、氧化胺、醇和聚乙二醇醚、羟基萘甲酸钠、羟基萘磺酸钠、乙基己基磺酸钠、及其组合。
助洗剂和共助洗剂
洗涤剂组合物可以包含按重量计约0-65%,例如约5%至约50%的洗涤剂助洗剂或共助洗剂或其混合物。助洗剂和/或共助洗剂可以具体是形成具有Ca和Mg的水溶性复合物的螫合剂。可以使用本领域中已知用于在洗涤剂中使用的任何助洗剂和/或共助洗剂。助洗剂的非限制性实例包括沸石、二磷酸盐(焦磷酸盐)、三磷酸盐例如三磷酸钠(STP或STPP)、碳酸盐例如碳酸钠、可溶性硅酸盐例如硅酸钠、层状硅酸盐(例如来自赫斯特公司(Hoechst)的SKS-6)、乙醇胺例如2-氨基乙-1-醇(MEA)、二乙醇胺(DEA,也称为2,2’-亚氨基二乙-1-醇)、三乙醇胺(TEA,也称为2,2’,2”-次氮基三乙-1-醇)、以及羧甲基菊粉(CMI)、及其组合。
该洗涤剂组合物还可以包含按重量计0-50%,例如约5%至约30%的洗涤剂共助洗剂。洗涤剂组合物可以单独地包括一种共助洗剂,或与一种助洗剂,例如沸石助洗剂组合。共助洗剂的非限制性实例包括聚丙烯酸酯的均聚物或其共聚物,例如聚(丙烯酸)(PAA)或共聚(丙烯酸/马来酸)(PAA/PMA)。另外的非限制性实例包括柠檬酸盐,螯合剂,例如氨基羧酸盐、氨基多羧酸盐和膦酸盐,以及烷基-或烯基琥珀酸。另外的具体实例包括2,2’,2”-次氨基三乙酸(NTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、亚氨基二丁二酸(IDS)、乙二胺-N,N’-二丁二酸(EDDS)、甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、谷氨酸-N,N-二乙酸(GLDA)、1-羟基乙烷-1,1-二膦酸(HEDP)、乙二胺四(亚甲基膦酸)(EDTMPA)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTMPA或DTPMPA)、N-(2-羟乙基)亚氨基二乙酸(EDG)、天冬氨酸-N-单乙酸(ASMA)、天冬氨酸-N,N-二乙酸(ASDA)、天冬氨酸-N-单丙酸(ASMP)、亚氨基二丁二酸(iminodisuccinic acid)(IDA)、N-(2-磺甲基)-天冬氨酸(SMAS)、N-(2-磺乙基)-天冬氨酸(SEAS)、N-(2-磺甲基)-谷氨酸(SMGL)、N-(2-磺乙基)-谷氨酸(SEGL)、N-甲基亚氨基二乙酸(MIDA)、α-丙氨酸-N,N-二乙酸(α-ALDA)、丝氨酸-N,N-二乙酸(SEDA)、异丝氨酸-N,N-二乙酸(ISDA)、苯丙氨酸-N,N-二乙酸(PHDA)、邻氨基苯甲酸-N,N-二乙酸(ANDA)、磺胺酸-N,N-二乙酸(SLDA)、牛磺酸-N,N-二乙酸(TUDA)以及磺甲基-N,N-二乙酸(SMDA)、N-(2-羟乙基)-亚乙基二胺-N,N’,N’-三乙酸盐(HEDTA)、二乙醇甘氨酸(DEG)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTPMP)、氨基三(亚甲基膦酸)(ATMP)及其组合和盐。其他示例性助洗剂和/或共助洗剂描述于例如WO 09/102854、US 5977053中
漂白系统
所述洗涤剂可以包含按重量计0-30%,如约1%至约20%的漂白系统。可以使用本领域中已知用于洗涤剂中的任何漂白系统。适合的漂白系统组分包括漂白催化剂、光漂白剂、漂白活化剂、过氧化氢源如过碳酸钠、过硼酸钠和过氧化氢-尿素(1:1)、预成型过酸及其混合物。适合的预成型过酸包括但不限于过氧羧酸及盐、二过氧二羧酸、过亚氨酸(perimidic acid)及盐、过氧单硫酸及盐(例如过硫酸氢钾(Oxone(R))及其混合物。漂白系统的非限制性实例包括基于过氧化物的漂白系统,这些系统可以包括例如与过酸形成漂白活化剂组合的无机盐,包括碱金属盐,如过硼酸盐(通常是单水合物或四水合物)、过碳酸盐、过硫酸盐、过磷酸盐、过硅酸盐的钠盐。术语漂白活化剂在此意指与过氧化氢反应以经由过水解反应形成过酸的化合物。以此方式形成的过酸构成活化的漂白剂。有待在此使用的适合漂白活化剂包括属于酯、酰胺、酰亚胺或酸酐类别的那些。适合的实例是四乙酰基乙二胺(TAED)、4-[(3,5,5-三甲基己酰基)氧基]苯-1-磺酸钠(ISONOBS)、4-(十二酰基氧基)苯-1-磺酸盐(LOBS)、4-(癸酰基氧基)苯-1-磺酸盐、4-(癸酰基氧基)苯甲酸盐(DOBS或DOBA)、4-(壬酰基氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)和/或披露于WO 98/17767中的那些。感兴趣的漂白活化剂的具体家族披露于EP 624154中并且在那个家族中特别优选的是乙酰柠檬酸三乙酯(ATC)。ATC或短链甘油三酸酯(像三醋汀)具有以下优点,它是环境友好的。此外,乙酰柠檬酸三乙酯和三醋汀在存储时在产品中具有良好的水解稳定性,并且是有效的漂白活化剂。最后,ATC是多功能的,因为在过水解反应中释放的柠檬酸盐可以作为助洗剂起作用。可替代地,漂白系统可以包括例如酰胺、酰亚胺或砜型的过氧酸。该漂白系统还可以包括过酸,例如6-(苯二甲酰亚氨基)过己酸(PAP)。该漂白系统还可以包括漂白催化剂。在一些实施例中,漂白组分可以是选自下组的有机催化剂,该组由以下各项组成:具有下式的有机催化剂:
(iii)及其混合物;
其中每个R1独立地是包含从9到24个碳的支链烷基或包含从11到24个碳的直链烷基,优选地每个R1独立地是包含从9到18个碳的支链烷基或包含从11到18个碳的直链烷基,更优选地每个R1独立地选自下组,该组由以下各项组成:2-丙基庚基、2-丁基辛基、2-戊基壬基、2-己基癸基、十二烷基、十四烷基、十六烷基、十八烷基、异壬基、异癸基、异十三烷基以及异十五烷基。其他示例性漂白系统描述于例如WO 2007/087258、WO 2007/087244、WO2007/087259、EP 1867708(维生素K)以及WO 2007/087242中。适合的光漂白剂可以例如是磺化的酞菁锌或酞菁铝。
优选地,除了漂白催化剂、特别是有机漂白催化剂以外,漂白组分还包括过酸源。过酸源可以选自(a)预形成的过酸;(b)过碳酸盐、过硼酸盐或过硫酸盐(过氧化氢源),优选与一种漂白活化剂组合;和(c)过水解酶以及酯,用于在纺织品处理步骤中在水的存在下原位形成过酸。
聚合物
所述洗涤剂可以包含按重量计0-10%,例如0.5%-5%、2%-5%、0.5%-2%或0.2%-1%的聚合物。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何聚合物。该聚合物可以作为如以上提到的共助洗剂起作用,或可以提供抗再沉积、纤维保护、污垢释放、染料转移抑制、油污清洁和/或防沫特性。一些聚合物可以具有多于一种的以上提到的特性和/或多于一种的以下提到的基序(motif)。示例性聚合物包括(羧甲基)纤维素(CMC)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚(乙烯吡咯烷酮)(PVP)、聚(乙二醇)或聚(环氧乙烷)(PEG)、乙氧基化的聚(亚乙基亚胺)、羧甲基菊粉(CMI)、和聚羧化物,例如PAA、PAA/PMA、聚-天冬氨酸、和甲基丙烯酸月桂酯/丙烯酸共聚物、疏水修饰CMC(HM-CMC)和硅酮、对苯二甲酸和低聚乙二醇的共聚物、聚(对苯二甲酸乙二酯)和聚(氧乙烯对苯二甲酸乙二酯)的共聚物(PET-POET)、PVP、聚(乙烯基咪唑)(PVI)、聚(乙烯吡啶-N-氧化物)(PVPO或PVPNO)以及聚乙烯吡咯烷酮-乙烯基咪唑(PVPVI)。另外的示例性聚合物包括磺化的聚羧酸酯、聚环氧乙烷和聚环氧丙烷(PEO-PPO)以及乙氧基硫酸二季铵盐。其他示例性聚合物披露于例如WO 2006/130575中。也考虑了以上提到的聚合物的盐。
织物调色剂
本发明的洗涤剂组合物还可以包括织物调色剂,例如染料或色素,当配制在洗涤剂组合物中时,当所述织物与一种洗涤液接触时织物调色剂可以沉积在织物上,该洗涤液包括所述洗涤剂组合物,并且因此通过可见光的吸收/反射改变所述织物的色彩。荧光增白剂发射至少一些可见光。相比之下,因为它们吸收至少一部分可见光光谱,所以织物调色剂改变表面的色彩。适合的织物调色剂包括染料和染料-粘土轭合物,并且还可以包括色素。适合的染料包括小分子染料和聚合物染料。适合的小分子染料包括选自下组的小分子染料,该组由落入颜色索引(Colour Index)(C.I.)分类的以下染料组成:直接蓝、直接红、直接紫、酸性蓝、酸性红、酸性紫、碱性蓝、碱性紫和碱性红、或其混合物,例如描述于WO 2005/03274、WO 2005/03275、WO 2005/03276和EP 1876226中(将其通过引用而特此结合)。洗涤剂组合物优选包括从约0.00003wt%至约0.2wt%、从约0.00008wt%至约0.05wt%、或甚至从约0.0001wt%至约0.04wt%的织物调色剂。该组合物可以包括从0.0001wt%至0.2wt%的织物调色剂,当该组合物处于单位剂量袋的形式时,这可以是特别优选的。适合的调色剂还披露于例如WO 2007/087257和WO 2007/087243中。
所述洗涤剂添加剂连同所述洗涤剂组合物可以包括一种或多种另外的酶,例如蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、糖酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、氧化酶,例如漆酶、和/或过氧化物酶。
一般而言,一种或多种所选酶的特性应与选定的洗涤剂相容(即,最适pH,与其他酶和非酶成分的相容性,等等),并且该一种或多种酶应以有效量存在。
纤维素酶:
适合的纤维素酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的或蛋白质工程处理的突变体。适合的纤维素酶包括来自芽孢杆菌属、假单胞菌属、腐质霉属、镰刀菌属、梭孢壳菌属、支顶孢属的纤维素酶,例如披露于US 4,435,307、US 5,648,263、US 5,691,178、US5,776,757以及WO 89/09259中的由特异腐质霉、嗜热毁丝霉和尖孢镰刀菌产生的真菌纤维素酶。
特别适合的纤维素酶是具有颜色护理益处的碱性或中性纤维素酶。此类纤维素酶的实例是描述于EP 0 495 257、EP 0 531 372、WO 96/11262、WO 96/29397、WO 98/08940中的纤维素酶。其他实例是例如描述于WO 94/07998、EP 0 531 315、US 5,457,046、US 5,686,593、US 5,763,254、WO 95/24471、WO 98/12307以及WO 99/001544中的那些纤维素酶变体。
其他纤维素酶是具有以下序列的内切-β-1,4-葡聚糖酶,该序列与WO 2002/099091的SEQ ID NO:2的位置1至位置773的氨基酸序列具有至少97%一致性,或家族44木葡聚糖酶,该木葡聚糖酶具有以下序列,该序列与WO 2001/062903的SEQ ID NO:2的位置40-559具有至少60%一致性。
可商购的纤维素酶包括CelluzymeTM和CarezymeTM(诺维信公司(Novozymes A/S))、Carezyme PremiumTM(诺维信公司)、CellucleanTM(诺维信公司)、CellucleanClassicTM(诺维信公司)、CellusoftTM(诺维信公司)、WhitezymeTM(诺维信公司)、ClazinaseTM和Puradax HATM(杰能科国际公司(Genencor International Inc.))以及KAC-500(B)TM(花王株式会社(Kao Corporation))。
蛋白酶:
适合的蛋白酶包括细菌、真菌、植物、病毒或动物来源的那些,例如植物或微生物来源。优选微生物来源。包括化学修饰的或蛋白质工程处理的突变体。它可以是一种碱性蛋白酶,例如丝氨酸蛋白酶或金属蛋白酶。丝氨酸蛋白酶可以例如是S1家族(如胰蛋白酶)或S8家族(如枯草杆菌蛋白酶)。金属蛋白酶可以例如是来自例如家族M4的嗜热菌蛋白酶或其他金属蛋白酶,例如来自M5、M7或M8家族的那些。
术语“枯草杆菌酶”是指根据斯艾森(Siezen)等人,蛋白质工程学(ProteinEngng.)4(1991)719-737和斯艾森等人,蛋白质科学(Protein Science)6(1997)501-523的丝氨酸蛋白酶亚组。丝氨酸蛋白酶是特征为在活性位点具有与底物形成共价加合物的丝氨酸的蛋白酶的一个亚组。枯草杆菌酶可以划分为6个亚部,即,枯草杆菌蛋白酶家族、嗜热蛋白酶家族、蛋白酶K家族、羊毛硫抗生素肽酶家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。
枯草杆菌酶的实例是获得自芽孢杆菌属的那些,例如描述于US 7262042和WO 09/021867中的迟缓芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和吉氏芽孢杆菌;和描述于WO 89/06279中的枯草杆菌蛋白酶迟缓(lentus)、枯草杆菌蛋白酶诺和(Novo)、枯草杆菌蛋白酶嘉士伯(Carlsberg)、地衣芽孢杆菌、枯草杆菌蛋白酶BPN’、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶147和枯草杆菌蛋白酶168以及描述于(WO 93/18140)中的蛋白酶PD138。其他有用的蛋白酶可以是描述于WO 92/175177、WO 01/016285、WO 02/026024以及WO 02/016547中的那些。胰蛋白酶样蛋白酶的实例是胰蛋白酶(例如猪或牛来源的)和镰孢菌蛋白酶(描述于WO 89/06270、WO 94/25583和WO 05/040372中),以及获得自纤维单胞菌(Cellumonas)的胰凝乳蛋白酶(描述于WO 05/052161和WO 05/052146中)。
进一步优选的蛋白酶是来自迟缓芽孢杆菌DSM 5483的碱性蛋白酶(如在例如WO95/23221中所述)、及其变体(在WO 92/21760、WO 95/23221、EP 1921147以及EP 1921148中描述的)。
金属蛋白酶的实例是如描述于WO 07/044993(杰能科国际公司(Genencor Int.))中的中性金属蛋白酶,例如获得自解淀粉芽孢杆菌的那些。
有用的蛋白酶的实例是于以下各项中的变体:WO 92/19729、WO 96/034946、WO98/20115、WO 98/20116、WO 99/011768、WO 01/44452、WO 03/006602、WO 04/03186、WO 04/041979、WO 07/006305、WO 11/036263、WO 11/036264,尤其是在以下位置的一个或多个中具有取代的变体:3、4、9、15、27、36、57、68、76、87、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、106、118、120、123、128、129、130、160、167、170、194、195、199、205、206、217、218、222、224、232、235、236、245、248、252以及274,使用BPN’编号。更优选地,这些枯草杆菌酶变体可以包含以下突变:S3T、V4I、S9R、A15T、K27R、*36D、V68A、N76D、N87S,R、*97E、A98S、S99G,D,A、S99AD、S101G,M,R、S103A、V104I,Y,N、S106A、G118V,R、H120D,N、N123S、S128L、P129Q、S130A、G160D、Y167A、R170S、A194P、G195E、V199M、V205I、L217D、N218D、M222S、A232V、K235L、Q236H、Q245R、N252K、T274A(使用BPN’编号)。
适合的可商购蛋白酶包括以下列商品名出售的那些:DuralaseTm、DurazymTmUltra、Ultra、 Ultra、 Ultra、(诺维信公司),以下列商品名出售的那些: PurafectPreferenzTm、Purafect PurafectPurafectEffectenzTm 以及(丹尼斯克/杜邦公司(Danisco/DuPont))、AxapemTM(吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-BrocasesN.V.))、BLAP(序列示于US 5352604的图29中)及其变体(汉高股份(Henkel AG))以及来自花王株式会社(Kao)的KAP(嗜碱芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶)。
脂肪酶和角质酶:
适合的脂肪酶和角质酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的或蛋白工程化的突变体酶。实例包括来自嗜热真菌属的脂肪酶,例如如描述于EP 258068和EP 305216中的来自疏绵状嗜热丝孢菌(早先命名为疏棉状腐质霉);来自腐质霉属的角质酶,例如特异腐质霉(WO 96/13580);来自假单胞菌属的菌株的脂肪酶(这些中的一些现在改名为伯克霍尔氏菌属),例如产碱假单胞菌或类产碱假单胞菌(EP 218272)、洋葱假单胞菌(EP331376)、假单胞菌属菌株SD705(WO 95/06720&WO 96/27002)、威斯康星假单胞菌(P.wisconsinensis)(WO 96/12012);GDSL-型链霉菌属脂肪酶(WO 10/065455);来自稻瘟病菌的角质酶(WO 10/107560);来自门多萨假单胞菌的角质酶(US 5,389,536);来自褐色嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的脂肪酶(WO 11/084412);嗜热脂肪土芽孢杆菌脂肪酶(WO 11/084417);来自枯草芽孢杆菌的脂肪酶(WO 11/084599);以及来自灰色链霉菌(WO11/150157)和始旋链霉菌(S.pristinaespiralis)的脂肪酶(WO 12/137147)。
其他实例是脂肪酶变体,例如描述于EP 407225、WO 92/05249、WO 94/01541、WO94/25578、WO 95/14783、WO 95/30744、WO 95/35381、WO 95/22615、WO 96/00292、WO 97/04079、WO 97/07202、WO 00/34450、WO 00/60063、WO 01/92502、WO 07/87508以及WO 09/109500中的那些。
优选的商业化脂肪酶产品包括LipolaseTM、LipexTM;LipolexTM和LipocleanTM(诺维信公司),Lumafast(来自杰能科公司(Genencor))以及Lipomax(来自吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-Brocades))。
再其他实例是有时称为酰基转移酶或过水解酶的脂肪酶,例如与南极假丝酵母(Candida antarctica)脂肪酶A具有同源性的酰基转移酶(WO 10/111143)、来自耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)的酰基转移酶(WO 05/56782)、来自CE 7家族的过水解酶(WO 09/67279)以及耻垢分枝杆菌过水解酶的变体(特别是来自亨斯迈纺织品染化有限公司(Huntsman Textile Effects Pte Ltd)的商业产品Gentle Power Bleach中所用的S54V变体)(WO 10/100028)。
淀粉酶:
可以与本发明的酶一起使用的适合的淀粉酶可以是α-淀粉酶或葡糖淀粉酶并且可以具有细菌或真菌起源。包括化学修饰的或蛋白质工程处理的突变体。淀粉酶包括例如获得自芽孢杆菌属的α-淀粉酶,例如GB 1,296,839中更详细描述的地衣芽孢杆菌具体株系的α-淀粉酶。
适合的淀粉酶包括具有WO 95/10603中的SEQ ID NO:2的淀粉酶或其与SEQ IDNO:3具有90%序列一致性的变体。优选的变体描述于WO 94/02597、WO 94/18314、WO 97/43424以及WO 99/019467的SEQ ID NO:4中,例如在一个或多个以下位置中具有取代的变体:15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408以及444。
不同的适合的淀粉酶包括具有WO 02/010355中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或其与SEQ ID NO:6具有90%序列一致性的变体。SEQ ID NO:6的优选变体是在位置181和182中具有缺失并且在位置193中具有取代的那些。
其他适合的淀粉酶是包括示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的获得自解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:4中的地衣芽孢杆菌α-淀粉酶的残基36-483的杂合α-淀粉酶或其具有90%序列一致性的变体。这一杂合α-淀粉酶的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:G48、T49、G107、H156、A181、N190、M197、I201、A209以及Q264。包括示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的获得自解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和SEQ ID NO:4的残基36-483的杂合α-淀粉酶的最优选变体是具有以下取代的那些:
M197T;
H156Y+A181T+N190F+A209V+Q264S;或
G48A+T49I+G107A+H156Y+A181T+N190F+I201F+A209V+Q264S。
适合的另外的淀粉酶是具有WO 99/019467中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或其与SEQID NO:6具有90%序列一致性的变体。SEQ ID NO:6的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:R181、G182、H183、G184、N195、I206、E212、E216以及K269。特别优选的淀粉酶是在位置R181和G182或位置H183和G184中具有缺失的那些。
可以使用的另外的淀粉酶是具有WO 96/023873的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQID NO:2或SEQ ID NO:7的那些或其与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ IDNO:7具有90%序列一致性的变体。使用WO 96/023873的SEQ ID 2用于编号,SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:7的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:140、181、182、183、184、195、206、212、243、260、269、304以及476。更优选的变体是在选自181、182、183和184的两个位置,例如181和182、182和183、或位置183和184具有缺失的那些。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的最优选的淀粉酶变体是在位置183和184中具有缺失并且在位置140、195、206、243、260、304以及476的一个或多个中具有取代的那些。
可以使用的其他淀粉酶是具有WO 08/153815中的SEQ ID NO:2、WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的淀粉酶或其与WO 08/153815的SEQ ID NO:2具有90%序列一致性或与WO01/66712中的SEQ ID NO:10具有90%序列一致性的变体。WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:176、177、178、179、190、201、207、211以及264。
另外的适合的淀粉酶是具有WO 09/061380中的SEQ ID NO:2的淀粉酶或其与SEQID NO:2具有90%序列一致性的变体。SEQ ID NO:2的优选变体是在以下位置中的一个或多个中具有C-末端的截短和/或取代、缺失或插入的那些:Q87、Q98、S125、N128、T131、T165、K178、R180、S181、T182、G183、M201、F202、N225、S243、N272、N282、Y305、R309、D319、Q320、Q359、K444以及G475。SEQ ID NO:2的更优选变体是在一个或多个以下位置中具有取代的那些:Q87E,R、Q98R、S125A、N128C、T131I、T165I、K178L、T182G、M201L、F202Y、N225E,R、N272E,R、S243Q,A,E,D、Y305R、R309A、Q320R、Q359E、K444E以及G475K和/或位置R180和/或S181或T182和/或G183的缺失。SEQ ID NO:2的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些:
N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K;
N128C+K178L+T182G+F202Y+Y305R+D319T+G475K;
S125A+N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K;或
S125A+N128C+T131I+T165I+K178L+T182G+Y305R+G475K,其中这些变体是C-末端截短的并且任选地进一步在位置243处包括取代和/或在位置180和/或位置181处包括缺失。
其他适合的淀粉酶是具有WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的α-淀粉酶或与SEQ IDNO:12具有至少90%序列一致性的变体。优选的淀粉酶变体是在WO 01/66712中的SEQ IDNO:12的以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:R28,R118,N174;R181,G182,D183,G184,G186,W189,N195,M202,Y298,N299,K302,S303,N306,R310,N314;R320,H324,E345,Y396,R400,W439,R444,N445,K446,Q449,R458,N471,N484。特别优选的淀粉酶包括具有D183和G184的缺失并且具有R118K、N195F、R320K及R458K的取代的变体,以及另外在选自下组的一个或多个位置中具有取代的变体:M9、G149、G182、G186、M202、T257、Y295、N299、M323、E345以及A339,最优选的是另外在所有这些位置中具有取代的变体。
其他实例是例如描述于WO 2011/098531、WO 2013/001078及WO 2013/001087中的那些淀粉酶变体。
可商购的淀粉酶是DuramylTM、TermamylTM、FungamylTM、Stainzyme TM、StainzymePlusTM、NatalaseTM、Liquozyme X及BANTM(来自诺维信公司),以及RapidaseTM、PurastarTM/EffectenzTM、Powerase及Preferenz S100(来自杰能科国际有限公司/杜邦公司(GenencorInternational Inc./DuPont))。
过氧化物酵/氧化酶:
根据本发明的过氧化物酶是由如由国际生物化学与分子生物学联合会命名委员会(IUBMB)陈述的酶分类EC 1.11.1.7包括的过氧化物酶,或获得自其中的展示出过氧化物酶活性的任何片段。
适合的过氧化物酶包括植物、细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的或蛋白质工程处理的突变体。有用的过氧化物酶的实例包括来自拟鬼伞属,例如来自灰盖拟鬼伞(C.cinerea)的过氧化物酶(EP 179,486),及其变体,如在WO 93/24618、WO 95/10602以及WO 98/15257中描述的那些。
根据本发明的过氧化物酶还包括卤代过氧化物酶,例如氯过氧化物酶、溴过氧化物酶以及展示出氯过氧化物酶或溴过氧化物酶活性的化合物。根据其对卤素离子的特异性将卤代过氧化物酶加以分类。氯过氧化物酶(E.C.1.11.1.10)催化从氯根离子形成次氯酸盐。
在一个实施例中,本发明的卤代过氧化物酶是氯过氧化物酶。优选地,该卤代过氧化物酶是钒卤代过氧化物酶,即含钒酸盐的卤代过氧化物酶。在本发明的优选方法中,将含钒酸盐的卤代过氧化物酶与氯根离子来源组合。
已经从许多不同真菌,特别是从暗色丝孢菌(dematiaceous hyphomycete)真菌组中分离出了卤代过氧化物酶,比如卡尔黑霉属(Caldariomyces)(例如煤卡尔黑霉(C.fumago))、链格孢属、弯孢属(例如疣枝弯孢(C.verruculosa)和不等弯孢(C.inaequalis))、内脐蠕孢属、细基格孢属以及葡萄孢属。
还已经从细菌,如假单胞菌属(例如,吡咯假单胞菌(P.pyrrocinia))和链霉菌属(例如,金色链霉菌(S.aureofaciens))中分离出了卤代过氧化物酶。
在一个优选实施例中,该卤代过氧化物酶可源自弯孢属,特别是疣枝弯孢(Curvularia verruculosa)或不等弯孢,如如描述于WO 95/27046中的不等弯孢CBS102.42或描述于WO 97/04102中的疣枝弯孢CBS 147.63或疣枝弯孢CBS 444.70;或可源自如描述于WO 01/79459中的Drechslera hartlebii,如描述于WO 01/79458中的盐沼小树状霉(Dendryphiella salina)、如描述于WO 01/79461中的Phaeotrichoconis crotalarie或如描述于WO 01/79460中的Geniculosporium属。
根据本发明的氧化酶具体包括由酶分类EC 1.10.3.2囊括的任何漆酶或获得自其中的展示出漆酶活性的片段、或展示出类似活性的化合物,例如儿茶酚氧化酶(EC1.10.3.1)、邻氨基苯酚氧化酶(EC 1.10.3.4)或胆红素氧化酶(EC 1.3.3.5)。
优选的漆酶是微生物来源的酶。这些酶可以获得自植物、细菌或真菌(包括丝状真菌和酵母)。
来自真菌的适合实例包括可源自以下项的菌株的漆酶:曲霉属,脉孢菌属(例如,粗糙脉孢菌),柄孢壳菌属,葡萄孢属,金钱菌属(Collybia),层孔菌属(Fomes),香菇属,侧耳属,栓菌属(例如,长绒毛栓菌和变色栓菌),丝核菌属(例如,立枯丝核菌(R.solani)),拟鬼伞属(例如,灰盖拟鬼伞、毛头拟鬼伞(C.comatus)、弗瑞氏拟鬼伞(C.friesii)及C.plicatilis),小脆柄菇属(Psathyrella)(例如,白黄小脆柄菇(P.condelleana)),斑褶菇属(例如,蝶形斑褶菇(P.papilionaceus)),毁丝霉属(例如,嗜热毁丝霉),Schytalidium(例如,S.thermophilum),多孔菌属(例如,P.pinsitus),射脉菌属(例如,射脉侧菌(P.radiata))(WO 92/01046)或革盖菌属(例如,毛革盖菌(C.hirsutus))(JP 2238885)。
来自细菌的适合实例包括可源自芽孢杆菌属的菌株的漆酶。
优选的是获得自拟鬼伞属或毁丝霉属的漆酶;特别是获得自灰盖拟鬼伞的漆酶,如披露于WO 97/08325中;或来自嗜热毁丝霉,如披露于WO 95/33836中。
该一种或多种洗涤剂酶可以通过添加包含一种或多种酶的单独的添加剂,或通过添加包括所有这些酶的组合添加剂而被包括于洗涤剂组合物中。本发明的洗涤剂添加剂,即单独的或组合的添加剂,可以配制成例如颗粒、液体、浆液等,优选的洗涤剂添加剂剂型为颗粒,特别是无粉尘颗粒;液体,特别是稳定化液体;或者浆液。
非尘颗粒可以例如如在US 4,106,991和4,661,452中所披露而产生,并且可以任选地通过本领域已知的方法进行包衣。蜡状包衣材料的实例是平均分子量为1000至20000的聚(环氧乙烷)产品(聚乙二醇,PEG);具有16到50个环氧乙烷单位的乙氧基化壬基酚;具有15至80个环氧乙烷单位的乙氧基化脂肪族醇,其中醇包含12至20个碳原子;脂肪醇;脂肪酸;以及脂肪酸的单-和双-和三甘油酯。适用于通过流化床技术应用的成膜包衣材料的实例在GB 1483591中给出。液体酶制品可以例如通过根据已确立的方法添加多元醇(如丙二醇)、糖或糖醇、乳酸或硼酸而稳定化。受保护的酶可以根据EP 238,216中披露的方法来制备。
其他材料
还可以使用本领域中已知用于洗涤剂中的任何洗涤剂组分。其他任选的洗涤剂组分包括防腐剂、防缩剂、抗污垢再沉积剂、抗皱剂、杀细菌剂、粘合剂、腐蚀抑制剂、崩解剂(disintegrant)/崩解试剂(disintegration agent)、染料、酶稳定剂(包括硼酸、硼酸盐、CMC和/或多元醇如丙二醇)、织物整理剂(包括粘土)、填充剂/加工助剂、荧光增白剂/光学增亮剂、增泡剂、泡沫(泡)调节剂、香料、污垢助悬剂、软化剂、抑泡剂、晦暗抑制剂以及芯吸剂,单独或组合使用。可以使用本领域中已知用于洗涤剂中的任何成分。此类成分的选择完全在普通技术人员的技术内。
分散剂
本发明的洗涤剂组合物还可以包含分散剂。具体地说,粉末洗涤剂可以包括分散剂。适合的水溶性有机材料包括均聚合或共聚合的酸或其盐,其中聚羧酸包括至少两个羧基,这两个羧基被不超过两个碳原子彼此分开。适合的分散剂例如描述于粉末洗涤剂,表面活性剂科学系列(Surfactant Science Series),第71卷中,马塞尔·德克尔公司(MarcelDekker)。
染料转移抑制剂
本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种染料转移抑制剂。适合的聚合物染料转移抑制剂包括但不限于聚乙烯吡咯烷酮聚合物、多胺N-氧化物聚合物、N-乙烯吡咯烷酮与N-乙烯基咪唑的共聚物、聚乙烯噁唑烷酮以及聚乙烯咪唑或其混合物。当存在于主题组合物中时,染料转移抑制剂可以按组合物重量计的以下水平存在:从约0.0001%至约10%、从约0.01%至约5%或甚至从约0.1%至约3%。
荧光增白剂
本发明的洗涤剂组合物将优选地还包含另外的组分,这些组分可以给正在清洁的物品着色,例如荧光增白剂或光学增亮剂。其中增亮剂优选以约0.01%至约0.5%的水平存在。在本发明的组合物中可以使用适合用于在衣物洗涤剂组合物中使用的任何荧光增白剂。最常用的荧光增白剂是属于以下类别的那些:二氨基芪-磺酸衍生物、二芳基吡唑啉衍生物和二苯基-联苯乙烯基衍生物。二氨基芪-磺酸衍生物类型的荧光增白剂的实例包括以下的钠盐:4,4'-双-(2-二乙醇氨基-4-苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸盐、4,4'-双-(2,4-二苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2.2'-二磺酸盐、4,4'-双-(2-苯胺基-4-(N-甲基-N-2-羟基-乙基氨基)-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸盐、4,4'-双-(4-苯基-1,2,3-三唑-2-基)芪-2,2'-二磺酸盐以及5-(2H-萘并[1,2-d][1,2,3]三唑-2-基)-2-[(E)-2-苯基乙烯基]苯磺酸钠。优选的荧光增白剂是可从汽巴-嘉基股份有限公司(Ciba-GeigyAG)(巴塞尔,瑞士)获得的天来宝(Tinopal)DMS和天来宝CBS。天来宝DMS是4,4'-双-(2-吗啉代-4-苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸盐的二钠盐。天来宝CBS是2,2'-双-(苯基-苯乙烯基)-二磺酸盐的二钠盐。还优选荧光增白剂,是可商购的Parawhite KX,由派拉蒙矿物与化学(Paramount Minerals and Chemicals),孟买,印度供应。适合用于在本发明中使用的其他荧光剂包括1-3-二芳基吡唑啉和7-烷氨基香豆素。
适合的荧光增亮剂水平包括从约0.01wt%、从0.05wt%、从约0.1wt%或甚至从约0.2wt%的较低水平至0.5wt%或甚至0.75wt%的较高水平。
污垢释放聚合物
本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种污垢释放聚合物,这些聚合物帮助从织物(如棉布和基于聚酯的织物)移除污垢,特别是从基于聚酯的织物去除疏水性污垢。污垢释放聚合物可以例如是非离子型或阴离子型对苯二甲酸基聚合物、聚乙烯基己内酰胺和相关共聚物、乙烯基接枝共聚物、聚酯聚酰胺,参见例如粉末洗涤剂,表面活性剂科学系列第71卷第7章,马塞尔·德克尔公司(Marcel Dekker,Inc.)。另一种类型的污垢释放聚合物是包括核心结构和连接至该核心结构的多个烷氧基化基团的两亲性烷氧基化油污清洁聚合物。核心结构可以包括聚烷基亚胺结构或聚烷醇胺结构,如WO 2009/087523中详细描述的(将其通过引用而特此结合)。此外,随机接枝共聚物是适合的污垢释放聚合物。适合的接枝共聚物更详细地描述于WO 2007/138054、WO 2006/108856和WO 2006/113314中(将其通过引用而特此结合)。其他污垢释放聚合物是取代的多糖结构,尤其是取代的纤维素结构,例如改性纤维素衍生物,例如EP 1867808或WO 2003/040279中描述的那些(将二者都通过引用而特此结合)。适合的纤维素聚合物包括纤维素、纤维素醚、纤维素酯、纤维素酰胺及其混合物。适合的纤维素聚合物包括阴离子改性的纤维素、非离子改性的纤维素、阳离子改性的纤维素、兼性离子改性的纤维素及其混合物。适合的纤维素聚合物包括甲基纤维素、羧甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、酯羧甲基纤维素及其混合物。该污垢释放聚合物不同于DNA酶。
抗再沉积剂
本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种抗再沉积剂,例如羧甲基纤维素(CMC)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚氧乙烯和/或聚乙二醇(PEG)、丙烯酸的均聚物、丙烯酸和马来酸的共聚物、和乙氧基化的聚乙亚胺。以上在污垢释放聚合物下描述的纤维素基聚合物还可以用作抗再沉积剂。该抗再沉积剂不同于DNA酶。
流变改性剂
本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种流变改性剂、结构剂或增稠剂,不同于降粘剂。流变改性剂选自下组,该组由以下各项组成:非聚合物结晶、羟基功能材料、聚合物流变改性剂,它们为液体洗涤剂组合物的水性液相基质赋予剪切稀化特征。可以通过本领域已知的方法修饰和调整洗涤剂的流变学和粘度,例如如在EP 2169040中所示。
其他适合的辅料包括但不限于防缩剂、抗皱剂、杀细菌剂、粘合剂、载体、染料、酶稳定剂、织物柔软剂、填充剂、泡沫调节剂、助水溶剂、香料、色素、抑泡剂、溶剂以及用于液体洗涤剂的结构剂和/或结构弹性剂。
洗涤剂产品的配制品
本发明的洗涤剂组合物可以处于任何常规形式,例如条、均匀的片剂、具有两个或更多个层的片剂、具有一个或多个室的袋、规则的或压缩的粉末、颗粒、膏、凝胶、或规则的、压缩的或浓缩的液体。
袋可以被配置为单个或多个的室。它可以具有适合容持该组合物的任何形式、形状和材料,例如在与水接触之前,不允许该组合物从袋中释放出来。袋由封装内体积的水溶性膜制成。可以将所述内体积分为具有袋的室。优选的膜是形成膜或片的聚合材料,优选是聚合物。优选的聚合物、共聚物或其衍生物选自聚丙烯酸酯、和水溶性丙烯酸酯共聚物、甲基纤维素、羧甲基纤维素、糊精钠、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、麦芽糊精、聚甲基丙烯酸酯,最优选地是聚乙烯醇共聚物以及羟丙基甲基纤维素(HPMC)。优选地,在膜中的聚合物(例如PVA)的水平是至少约60%。优选的平均分子量将典型地是约20,000至约150,000。膜还可以是共混组合物,该共混组合物包括可水解降解并且水可溶的聚合物共混物,例如聚乳酸和聚乙烯醇(已知在贸易参考M8630下,如由美国印第安纳州的MonoSolLLC公司销售)加增塑剂,像甘油、乙二醇、丙二醇、山梨醇及其混合物。这些袋可以包括固体衣物清洁组合物或部分组分和/或液体清洁组合物或由水溶性膜分开的部分组分。用于液体组分的室在组成上可以与包括固体的室不同:US 2009/0011970 A1。
可以由水可溶的袋中或片剂的不同层中的室来将洗涤剂成分物理地彼此分开。由此可以避免组分之间的负面的存储相互作用。在洗涤溶液中,每个室的不同溶解曲线还可以引起选择的组分的延迟溶解。
非单位剂量的液体或凝胶洗涤剂可以是水性的,典型地包含按重量计至少20%并且高达95%的水,例如高达约70%的水、高达约65%的水、高达约55%的水、高达约45%的水、高达约35%的水。包括但不限于链烷醇、胺、二醇、醚以及多元醇的其他类型的液体可以被包括在水性液体或凝胶中。含水液体或凝胶洗涤剂可以包含从0-30%的有机溶剂。
液体或凝胶洗涤剂可以是非水性的。
洗涤皂条
本发明的DNA酶可以被添加至洗涤皂条中并且用于手洗洗涤、织物和/或纺织品。术语洗涤皂条包括洗涤条、皂条、组合条(combo bar)、合成洗涤剂条以及洗涤剂条。条的类型通常区别在于它们包含的表面活性剂的类型,并且术语洗涤皂条包括包含来自脂肪酸的皂和/或合成皂的那些。洗涤皂条具有在室温下为固体而非液体、凝胶或粉末的物理形式。术语固体被定义为不随时间推移显著改变的实体形式,即如果将一个固体物件(例如洗涤皂条)放置在一种容器内,那么该固体物件不会改变以填充放置该固体物件的容器。该条是典型地呈条形式但是可以呈其他固体形状、如圆形或卵形的一种固体。
洗涤皂条可以包含一种或多种另外的酶,蛋白酶抑制剂例如肽醛类(或次硫酸盐加合物或半缩醛加合物),硼酸,硼酸盐,硼砂和/或苯基硼酸衍生物例如4-甲酰苯基硼酸,一种或多种肥皂或合成表面活性剂,多元醇例如甘油,pH控制化合物例如脂肪酸、柠檬酸、乙酸和/或甲酸,和/或一价阳离子和有机阴离子的盐,其中该一价阳离子可以是例如Na+、K+或NH4 +并且该有机阴离子可以是例如甲酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐或乳酸盐,这样使得一价阳离子和有机阴离子的盐可以是例如甲酸钠。
洗涤皂条还可以包含络合剂像EDTA和HEDP,香料和/或不同类型的填充剂,表面活性剂例如阴离子型合成表面活性剂,助洗剂,聚合的污垢释放剂,洗涤剂螯合剂,稳定剂,填充剂,染料,着色剂,染料转移抑制剂,烷氧基化的聚碳酸酯,抑泡剂,结构剂,粘合剂,浸出剂,漂白活化剂,粘土去污剂,抗再沉积剂,聚合分散剂,增白剂,织物柔软剂,香料和/或本领域已知的其他化合物。
洗涤皂条可以在常规的洗涤皂条制造设备中进行加工,例如但不限制于:混合器、压条机例如双级真空压条机、挤出机、切割机、标识压模机(logo-stamper)、冷却隧道以及包装机。本发明不局限于通过任何单一方法制备洗涤皂条。可以在过程的不同阶段向肥皂中添加本发明的预混料。例如,可以制备包含肥皂、DNA酶、任选地一种或多种另外的酶、蛋白酶抑制剂以及一价阳离子和有机阴离子的盐的预混料并且然后将该混合物压条。可以同时添加作为例如处于液态的蛋白酶抑制剂的DNA酶以及任选的另外的酶。除了混合步骤和压条步骤以外,该工艺还可以进一步包括研磨、挤出、切割、压模、冷却和/或包装的步骤。
共颗粒中酶的配制品
该DNA酶可以被配制为颗粒,例如,配制为结合一种或多种酶的共颗粒。然后,每种酶将存在于多种颗粒中,这些颗粒确保酶在洗涤剂中的分布更均匀。这还减少了由于不同的粒度,不同酶的物理隔离。用于生产针对洗涤剂工业的多酶共颗粒的方法披露于Ip.com披露内容IPCOM000200739D中。
通过使用共颗粒的酶的配制品的另一个实例披露于WO 2013/188331中,其涉及包括以下各项的洗涤剂组合物:(a)多酶共颗粒;(b)少于10wt沸石(无水基底);和(c)少于10wt磷酸盐(无水基底),其中所述酶共颗粒包括从10至98wt%的水分汇组分,并且该组合物另外还包括从20至80wt%的洗涤剂水分汇组分。WO 2013/188331还涉及处理和/或清洁表面的方法,优选织物表面,该方法包括以下步骤:(i)将所述表面与在含水洗涤液中如在此要求保护的并且描述的洗涤剂组合物接触,(ii)冲洗和/或干燥该表面。
该多酶共颗粒可以包括DNA酶和(a)选自下组的一种或多种酶,该组由以下各项组成:首次洗涤脂肪酶、清洁纤维素酶、木葡聚糖酶、过水解酶、过氧化酶、脂氧合酶、漆酶及其混合物;和(b)选自下组的一种或多种酶,该组由以下各项组成:半纤维素酶、蛋白酶、护理纤维素酶、纤维二糖脱氢酶、木聚糖酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶酸裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、木质酶、普鲁兰酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、地衣聚糖酶、葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、玻璃酸酶、软骨素酶、淀粉酶、及其混合物。
在以下各段中进一步概述本发明:
1.具有DNA酶活性的多肽用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少物品上的污垢和/或气味的再沉积的用途。
2.根据段落1所述的用途,其中没有具有DNA酶活性的多肽存在于随后的清洁或洗涤过程。
3.根据段落1-2中任一项所述的用途,其中该物品是纺织品或硬表面。
4.根据前述段落中任一项所述的用途,用于防止或减少污垢对该物品的附着。
5.根据前述段落中任一项所述的用途,用于维持或改进该物品的白度。
6.根据前述段落中任一项所述的用途,用于防止或减少来自该物品的恶臭。
7.根据段落6所述的用途,其中该恶臭由E-2-壬烯醛引起。
8.根据段落6-7中任一项所述的用途,其中防止、减少或去除在湿物品上存在的E-2-壬烯醛的量。
9.根据段落6-7中任一项所述的用途,其中防止、减少或去除在干物品上存在的E-2-壬烯醛的量。
10.根据前述段落中任一项所述的用途,其中将该物品与包含具有DNA酶活性的多肽的液体溶液接触。
11.根据前述段落中任一项所述的用途,其中将该具有DNA酶活性的多肽喷洒至该物品上。
12.根据段落10所述的用途,其中该液体溶液是洗涤液。
13.根据前述段落中任一项所述的用途,其中将该具有DNA酶活性的多肽用于浸渍该物品。
14.根据前述段落中任一项所述的用途,其中将该具有DNA酶活性的多肽用于在随后的清洁或洗涤过程之前清洁或洗涤该物品至少一次。
15.根据前述段落中任一项所述的用途,其中将该具有DNA酶活性的多肽用于在随后的清洁或洗涤过程之前清洁或洗涤该物品至少两次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次或十次。
16.根据前述段落中的任一项所述的用途,其中该具有DNA酶活性的多肽是动物、植物或微生物来源的。
17.根据段落16所述的用途,其中该多肽是人类或动物来源的。
18.根据段落16所述的用途,其中该多肽获得自绿豆。
19.根据段落16所述的用途,其中该多肽是细菌或真菌来源的。
20.根据段落19所述的用途,其中该多肽是真菌来源的并且该多肽选自下组,该组由以下各项组成:
a)与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,与SEQ ID NO:3的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,与SEQ ID NO:5的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,或与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;
b)由如下多核苷酸编码的多肽,该多核苷酸在低严格条件下与以下各项杂交
i.SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列或SEQ ID NO:4的成熟多肽编码序列
ii.其cDNA序列,或
iii.(i)或(ii)的全长互补体;
c)由与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸编码的多肽、或与SEQ ID NO:4的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸编码的多肽;
d)SEQ ID NO:2的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,SEQ ID NO:3的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,SEQ ID NO:5的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,或SEQ ID NO:8的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入;以及
e)具有DNA酶活性的(a)、(b)、(c)或(d)的多肽的片段。
21.根据段落19所述的用途,其中该多肽是细菌来源的并且该多肽选自下组,该组由以下各项组成:
a)与SEQ ID NO:6的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽或与SEQ ID NO:7的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;
b)一种SEQ ID NO:6的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,或一种SEQ ID NO:7的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入;以及
c)具有DNA酶活性的(a)、或(b)的多肽的片段。
22.根据段落19-21中任一项所述的用途,其中该多肽可以与SEQ ID NO:2的成熟多肽、与SEQ ID NO:3的成熟多肽、与SEQ ID NO:5成熟多肽、与SEQ ID NO:6的成熟多肽、与SEQ ID NO:7的成熟多肽或与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。
23.根据段落19-22中的任一项所述的用途,其中该多肽包括SEQ ID NO:2或SEQID NO:2的成熟多肽或由它们组成,该多肽包括SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:3的成熟多肽或由它们组成,该多肽包括SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:5的成熟多肽或由它们组成,该多肽包括SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:6的成熟多肽或由它们组成,该多肽包括SEQ ID NO:7或SEQID NO:7的成熟多肽或由它们组成,或者该多肽包括SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:8的成熟多肽或由它们组成。
24.根据段落19-23中的任一项所述的用途,其中该成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸1至206,SEQ ID NO:3的氨基酸1至206,SEQ ID NO:5的氨基酸1至188,SEQ ID NO:6的氨基酸1至110,或SEQ ID NO:7的氨基酸1至109,或SEQ ID NO:8的氨基酸1至206。
25.根据段落19-24中的任一项所述的用途,其中该多肽是SEQ ID NO:2、SEQ IDNO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的成熟多肽的变体,其中该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,或SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ IDNO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入。
26.根据段落19-25中任一项所述的用途,其中该多肽是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的片段,其中该片段具有DNA酶活性。
27.一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括具有脱氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的的多肽和表面活性剂,其中该组合物满足以下a)或b)中的至少一个:
a)该组合物进一步包括气味控制剂;和/或
b)该表面活性剂不是阳离子表面活性剂。
28.根据段落27所述的组合物,其中该气味控制剂选自下组,该组由以下各项组成:环糊精及其混合物、气味阻断剂、反应性醛、黄酮类、金属盐、沸石、活性炭、疏水修饰的恶臭控制聚合物(HMP’s)、异噻唑啉酮衍生物,如苯并异噻唑啉酮,和/或挥发性醛。
29.根据段落27-28中任一项所述的组合物,其中该表面活性剂是非离子表面活性剂、阴离子表面活性剂、两性离子表面活性剂或半极性表面活性剂。
30.根据段落29所述的组合物,其中该表面活性剂可以是选自下组的阴离子表面活性剂,该组由以下各项组成:硫酸盐和磺酸盐,如直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)(如十二烷基硫酸钠(SDS))、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES,也被称为醇乙氧基硫酸盐或脂肪醇醚硫酸盐)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸或脂肪酸盐(皂)的二酯和单酯及其组合。
31.根据段落30所述的组合物,其中该阴离子表面活性剂的量按重量计是从约1%至约40%,如从约5%至约30%,包括从约5%至约15%、或从约15%至约20%、或从约20%至约25%。
32.根据段落27-29中任一项所述的组合物,其中该表面活性剂可以是选自下组的非离子表面活性剂,该组由以下各项组成:醇乙氧基化物(AE或AEO)、醇丙氧基化物、丙氧基化的脂肪醇(PFA)、烷氧基化的脂肪酸烷基酯(例如乙氧基化的和/或丙氧基化的脂肪酸烷基酯)、烷基酚乙氧基化物(APE)、壬基酚乙氧基化物(NPE)、烷基多糖苷(APG)、烷氧基化胺、脂肪酸单乙醇酰胺(FAM)、脂肪酸二乙醇酰胺(FADA)、乙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(EFAM)、丙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(PFAM)、多羟基烷基脂肪酸酰胺、或葡萄糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(葡糖酰胺(GA)、或脂肪酸葡糖酰胺(FAGA))、SPANTM、TWEENTM及其组合。
33.根据段落32所述的组合物,其中该非离子表面活性剂的量按重量计是从约0.2%至约40%的非离子表面活性剂,例如从约0.5%至约30%,特别是从约1%至约20%、从约3%至约10%,如从约3%至约5%、从约8%至约12%、或从约10%至约12%。
34.根据段落29所述的组合物,其中该表面活性剂是选自下组的半极性表面活性剂,该组由以下各项组成:氧化胺(AO),如烷基二甲胺氧化物、N-(椰油基烷基)-N,N-二甲胺氧化物和N-(牛油-烷基)-N,N-双(2-羟乙基)胺氧化物、及其组合。
35.根据段落29所述的组合物,其中该表面活性剂是选自下组的两性离子表面活性剂,该组由以下各项组成:甜菜碱,如烷基二甲基甜菜碱、磺基甜菜碱。
36.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该表面活性剂选自下组,该组由以下各项组成:烷醇乙氧基硫酸钠、直链烷基苯磺酸钠、脂肪酸钠、烷基硫酸钠、月桂基胺氧化物、直链烷基苯磺酸盐(MEA盐)、直链烷基苯磺酸盐(钠盐)、醇乙氧基化物。
37.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少物品上的污垢和/或气味的再沉积。
38.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少物品上的污垢和/或气味的再沉积,其中具有DNA酶活性的多肽不用于随后的清洁或洗涤过程。
39.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,用于防止或减少恶臭。
40.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该组合物进一步包括助洗剂、絮凝助剂、螯合剂、染料转移抑制剂、酶、酶稳定剂、酶抑制剂、催化材料、漂白活化剂、过氧化氢、过氧化氢源、预形成的过酸、聚合的分散剂、粘土去污剂/抗再沉淀剂、增白剂、抑泡剂、染料、香料、结构弹力剂、织物柔软剂、载体、助水溶物、助洗剂和共助洗剂、织物调色剂、防沫剂、分散剂、加工助剂、和/或色素。
41.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该组合物进一步包括选自下组的一种或多种酶,该组由以下各项组成:蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、糖酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶和氧化酶。
42.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该具有DNA酶活性的多肽是动物、植物或微生物来源的。
43.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该多肽是人类来源的。
44.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该多肽获得自绿豆。
45.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该多肽是细菌或真菌来源的。
46.根据段落45所述的组合物,其中该多肽是真菌来源的并且该多肽选自下组,该组由以下各项组成:
a)与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,与SEQ ID NO:3的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,与SEQ ID NO:5的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,或与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;
b)由如下多核苷酸编码的多肽,该多核苷酸在低严格条件下与以下各项杂交
i.SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列或SEQ ID NO:4的成熟多肽编码序列
ii.其cDNA序列,或
iii.(i)或(ii)的全长互补体;
c)由与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸编码的多肽、或与SEQ ID NO:4的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸编码的多肽;
d)SEQ ID NO:2的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,SEQ ID NO:3的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,SEQ ID NO:5的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,或SEQ ID NO:8的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入;以及
e)具有DNA酶活性的(a)、(b)、(c)或(d)的多肽的片段。
47.根据段落45所述的组合物,其中该多肽是细菌来源的并且该多肽选自下组,该组由以下各项组成:
a)与SEQ ID NO:6的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽或与SEQ ID NO:7的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;
b)一种SEQ ID NO:6的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,或一种SEQ ID NO:7的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入;以及
c)具有DNA酶活性的(a)、或(b)的多肽的片段。
48.根据段落46-47中任一项所述的组合物,其中该多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽、与SEQ ID NO:3的成熟多肽、与SEQ ID NO:5的成熟多肽、或与SEQ ID NO:6的成熟多肽、与SEQ ID NO:7的成熟多肽、或与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。
49.根据段落46-48中任一项所述的组合物,其中该多肽包括SEQ ID NO:2或SEQID NO:2的成熟多肽或由它们组成,该多肽包括SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:3的成熟多肽或由它们组成,该多肽包括SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:5的成熟多肽或由它们组成,该多肽包括SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:6的成熟多肽或由它们组成,该多肽包括SEQ ID NO:7或SEQID NO:7的成熟多肽或由它们组成,或者该多肽包括SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:8的成熟多肽或由它们组成。
50.根据段落46-49中任一项所述的组合物,其中该成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸1至206,SEQ ID NO:3的氨基酸1至206,SEQ ID NO:5的氨基酸1至188,SEQ ID NO:6的氨基酸1至110,SEQ ID NO:7的氨基酸1至109,或SEQ ID NO:8的氨基酸1至206。
51.根据段落46-50中任一项所述的组合物,其中该多肽是SEQ ID NO:2、SEQ IDNO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的成熟多肽的变体,其中该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,或SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:5、SEQ ID NO:6、或SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入。
52.根据段落46-51中任一项所述的组合物,其中该多肽是SEQ ID NO:2、SEQ IDNO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的片段,其中该片段具有DNA酶活性。
53.根据前述组合物段落中任一项所述的洗涤剂组合物,其中该组合物是棒、均匀的片剂、具有两个或更多个层的片剂、具有一个或多个室的袋、规则的或压缩的粉末、颗粒、膏、凝胶、或规则的、压缩的或浓缩的液体。
54.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该组合物是液体洗涤剂、粉末洗涤剂或颗粒洗涤剂。
55.一种用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少物品上的污垢的再沉积的方法,该方法包括以下步骤:
a)将物品与根据段落27-54和82-96中任一项所述的组合物或包含具有DNA酶活性的多肽的液体溶液接触;并且
b)任选地冲洗该物品,
其中该物品是纺织品或硬表面。
56.根据段落55所述的方法,其中该随后的清洁或洗涤过程不包括使用具有DNA酶活性的多肽。
57.根据段落55-56中任一项所述的方法,其中通过浸渍该物品或当洗涤该物品时进行步骤a)下的该接触。
58.根据段落55所述的方法,其中该液体溶液是洗涤液或用于浸渍该物品的溶液。
59.根据前述方法段落中任一项所述的方法,其中通过喷洒该组合物或液体溶液至该物品上来进行步骤a)下的该接触。
60.根据前述方法段落中任一项所述的方法,其中步骤a)下的该组合物或多肽用于在随后的清洁或洗涤过程之前清洁或洗涤该物品至少一次。
61.根据段落60所述的方法,其中步骤a)下的该组合物或多肽用于在随后的清洁或洗涤过程之前清洁或洗涤该物品至少两次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次或十次。
62.根据前述方法段落中任一项所述的方法,其中该液体溶液进一步包括表面活性剂、助洗剂、絮凝助剂、螯合剂、染料转移抑制剂、酶、酶稳定剂、酶抑制剂、催化材料、漂白活化剂、过氧化氢、过氧化氢源、预形成的过酸、聚合的分散剂、粘土去污剂/抗再沉淀剂、增白剂、抑泡剂、染料、香料、结构弹力剂、织物柔软剂、载体、助水溶物、助洗剂和共助洗剂、织物调色剂、防沫剂、分散剂、加工助剂、和/或色素。
63.根据前述方法段落中的任一项所述的方法,其中该液体溶液进一步包括选自下组的一种或多种酶,该组由以下各项组成:蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、糖酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶和氧化酶。
64.根据前述方法段落中的任一项所述的方法,其中该液体溶液的pH在1至11的范围内。
65.根据前述方法段落中的任一项所述的方法,其中该液体溶液的pH在5.5至11的范围内,如在7至9的范围内,在7至8的范围内或在7至8.5的范围内。
66.根据前述方法段落中的任一项所述的方法,其中该液体溶液的温度在5℃至95℃的范围内、或在10℃至80℃的范围内、在10℃至70℃的范围内、在10℃至60℃的范围内、在10℃至50℃的范围内、在15℃至40℃的范围内或在20℃至30℃的范围内。
67.根据前述方法段落中的任一项所述的方法,其中该液体溶液的温度是30℃。
68.根据前述方法段落中的任一项所述的方法,其中在与步骤a)下的该组合物或多肽接触后,冲洗该物品。
69.根据前述方法段落中任一项所述的方法,其中将该物品用水或用包含调节剂的水进行冲洗。
70.根据前述方法段落中的任一项所述的方法,其中具有DNA酶活性的多肽是动物、植物或微生物来源的。
71.根据段落70所述的方法,其中该多肽是人类来源的。
72.根据段落70所述的方法,其中该多肽获得自绿豆。
73.根据段落70所述的方法,其中该多肽是细菌或真菌来源的。
74.根据段落73所述的方法,其中该多肽是真菌来源的并且该多肽选自下组,该组由以下各项组成:
a)与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,与SEQ ID NO:3的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,与SEQ ID NO:5的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,或与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;
b)由如下多核苷酸编码的多肽,该多核苷酸在低严格条件下与以下各项杂交
i.SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列或SEQ ID NO:4的成熟多肽编码序列
ii.其cDNA序列,或
iii.(i)或(ii)的全长互补体;
c)由与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸编码的多肽、或与SEQ ID NO:4的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少60%序列一致性的多核苷酸编码的多肽;
d)SEQ ID NO:2的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,SEQ ID NO:3的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,SEQ ID NO:5的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,或SEQ ID NO:8的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入;以及
e)具有DNA酶活性的(a)、(b)、(c)或(d)的多肽的片段。
75.根据段落73所述的方法,其中该多肽是细菌来源的并且该多肽选自下组,该组由以下各项组成:
a)与SEQ ID NO:6的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽或与SEQ ID NO:7的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽;
b)一种SEQ ID NO:6的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,或一种SEQ ID NO:7的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入;以及
c)具有DNA酶活性的(a)、或(b)的多肽的片段。
76.根据段落74-75中任一项所述的方法,其中该多肽与SEQ ID NO:2的成熟多肽、与SEQ ID NO:3的成熟多肽、与SEQ ID NO:5的成熟多肽、或与SEQ ID NO:6的成熟多肽、与SEQ ID NO:7的成熟多肽、或与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性。
77.根据段落74-76中的任一项所述的方法,其中该多肽包括SEQ ID NO:2或SEQID NO:2的成熟多肽或由它们组成,该多肽包括SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:3的成熟多肽或由它们组成,该多肽包括SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:5的成熟多肽或由它们组成,该多肽包括SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:6的成熟多肽或由它们组成,该多肽包括SEQ ID NO:7或SEQID NO:7的成熟多肽或由它们组成,或者该多肽包括SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:8的成熟多肽或由它们组成。
78.根据段落74-77中任一项所述的方法,其中该成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸1至206,SEQ ID NO:3的氨基酸1至206,SEQ ID NO:5的氨基酸1至188,SEQ ID NO:6的氨基酸1至110,或SEQ ID NO:7的氨基酸1至109,或SEQ ID NO:8的氨基酸1至206。
79.根据段落74-78中任一项所述的方法,其中该多肽是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的成熟多肽的变体,其中该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入,或SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的成熟多肽的变体,该变体在一个或多个位置包括取代、缺失、和/或插入。
80.根据段落74-79中任一项所述的方法,其中该多肽是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的片段,其中该片段具有DNA酶活性。
81.根据前述方法段落中任一项所述的方法,其中洗涤液中的多肽的浓度是在0.00004-100ppm酶蛋白的范围内,如在0.00008-100的范围内,在0.0001-100的范围内,在0.0002-100的范围内,在0.0004-100的范围内,在0.0008-100的范围内,在0.001-100ppm酶蛋白的范围内,在0.01-100ppm酶蛋白的范围内,在0.05-50ppm酶蛋白的范围内,在0.1-50ppm酶蛋白的范围内,在0.1-30ppm酶蛋白的范围内,在0.5-20ppm酶蛋白的范围内或在0.5-10ppm酶蛋白的范围内。
82.根据段落27所述的洗涤剂组合物,其中该组合物是一种液体洗涤剂组合物,包括总浓度按重量计是至少3%的表面活性剂和洗涤剂助洗剂,和含洗涤剂酶的微囊,其中该微囊的膜是通过具有高于1kDa分子量的多支化的多胺的交联而产生。
83.根据段落82所述的洗涤剂组合物,其中该多支化的多胺的这些反应性氨基构成该分子量的至少15%。
84.根据段落82-83中任一项所述的洗涤剂组合物,其中通过使用酰基氯作为交联剂生成该微囊。
85.根据段落82-84中任一项所述的洗涤剂组合物,其中该微囊的直径是至少50微米,或大于50微米。
86.根据段落82-85中任一项所述的洗涤剂组合物,其中该微囊包含按重量计至少1%的活性酶。
87.根据段落82-86中任一项所述的洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物进一步包括醇,例如多元醇。
88.根据段落82-87中任一项所述的洗涤剂组合物,其中该表面活性剂是阴离子表面活性剂。
89.根据段落82-88中任一项所述的洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物是液体洗涤或自动餐具洗涤剂组合物。
90.根据段落82-89中任一项所述的洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包含按重量计少于90%的水。
91.根据段落82-90中任一项所述的洗涤剂组合物,其中该洗涤剂酶是具有DNA酶活性的多肽、蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶、甘露聚糖酶、果胶酶、或氧化还原酶。
92.根据段落82-91中任一项所述的洗涤剂组合物,其中该蛋白酶是金属蛋白酶或碱性丝氨酸蛋白酶,例如枯草杆菌蛋白酶。
93.根据段落82-92中任一项所述的洗涤剂组合物,其中具有DNA酶活性的多肽是与SEQ ID NO:2具有至少60%序列一致性的多肽,与SEQ ID NO:3的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,与SEQ ID NO:5的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽,或与SEQID NO:8的成熟多肽具有至少60%序列一致性的多肽。
94.根据段落82-93中任一项所述的洗涤剂组合物,其中使用酰基氯作为交联剂,通过界面聚合来生成该微囊。
95.根据段落82-94中任一项所述的洗涤剂组合物,其中该多支化的多胺是聚乙亚胺。
96.根据段落82-95中任一项所述的洗涤剂组合物,其中该微囊包括Mg2+、Ca2+、或Zn2+离子的来源,如Mg2+、Ca2+、或Zn2+的难溶盐。
97.用具有DNA酶活性的多肽处理或浸渍物品。
98.根据段落97所述的物品,其中该物品是纺织品。
测定和洗涤剂组合物
洗涤剂组合物
可以将以下提及的洗涤剂组合物结合本发明的多肽一起使用,用于防止或减少静电。
Biotex黑(液体)
5%-15%的阴离子表面活性剂、<5%非离子表面活性剂、香料、酶、DMDM和乙内酰脲。
碧浪灵敏性白色与彩色组合物、液体洗涤剂组合物
水、酒精乙氧基硫酸盐、醇乙氧基化物、氨基氧化物、柠檬酸、C12-18拔顶棕榈仁脂肪酸、蛋白酶、糖苷酶、淀粉酶、乙醇、1,2丙二醇、甲酸钠、氯化钙、氢氧化钠、有机硅乳液、跨硫酸EHDQ(这些成分以递减次序列出)。
WFK IEC-A标准洗涤剂的组合物(粉末)
成分:直链烷基苯磺酸钠8.8%、乙氧基化的脂肪醇C12-18(7EO)4.7%、钠皂3.2%、消泡剂DC2-4248S 3.9%、硅酸铝钠沸石4A 28.3%、碳酸钠11.6%、丙烯酸和马来酸的共聚物的钠盐(Sokalan CP5)2.4%、硅酸钠3.0%、羧甲基纤维素1.2%、Dequest 20662.8%,光学增白剂0.2%、硫酸钠6.5%、蛋白酶0.4%。
标准洗涤剂A组合物(液体)
成分:12%LAS、11%AEO Biosoft N25-7(NI)、7%AEOS(SLES)、6%MPG(丙二醇)、3%乙醇、3%TEA、2.75%可可皂、2.75%大豆皂、2%甘油、2%氢氧化钠、2%柠檬酸钠、1%甲酸钠、0.2%DTMPA和0.2%PCA(所有的百分数都是w/w)
碧浪Actilift组合物(液体)
成分:5%-15%阴离子表面活性剂;<5%非离子型表面活性剂、磷酸盐、肥皂;酶、光学增亮剂、苯并异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮、香料、α-异甲基紫罗兰酮、香茅醇、香叶醇、芳樟醇。
碧浪Actilift彩色&风格组合物(液体)
成分:5%-15%阴离子表面活性剂;<5%非离子型表面活性剂、磷酸盐、肥皂;酶、香料、苯并异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮、α-异甲基紫罗兰酮、丁苯基甲基丙醛、香茅醇、香叶醇、芳樟醇。
碧浪Actilift彩色&风格的组合物
水、十二烷基苯磺酸钠、C14-C15 Pareth-7、柠檬酸钠、丙二醇、棕榈仁油酸钠、月桂醇醚硫酸钠、MEA十二烷基苯磺酸、季铵化的硫酸化乙氧基化的六亚甲基二胺、枯烯磺酸钠、香料、PEG/乙酸乙烯酯的共聚物、甲酸钠、氢化蓖麻油、二亚乙基三胺五亚甲基磷酸钠、PEG/PPG-10/2丙基庚基醚、丁苯基甲基丙醛、聚乙烯吡啶-N-氧化物、山梨糖醇、甘油、乙醇胺、氢氧化钠、α-异甲基紫罗兰酮、蛋白酶、氯化钙、香叶醇、芳樟醇、香茅醇、三丙二醇、糖苷酶、苯并异噻唑啉酮、二甲硅油、糖苷酶、乙酸钠、纤维素酶、着色剂、甘油硬脂酸酯、羟乙基纤维素、二氧化硅。
碧浪Actilift彩色&风格的组合物,新包装
成分:水、月桂醇醚硫酸钠、丙二醇、C14-C15 Pareth-7、柠檬酸钠、棕榈仁油酸钠、醇、甲酸钠、季铵化的硫酸化乙氧基化的六亚甲基二胺、氢氧化钠、香料、聚乙烯吡啶-N-氧化物、山梨糖醇、氯化钙、蛋白酶、甘油、葡糖苷酶、糖苷酶、乙酸钠、着色剂、纤维素酶。
碧浪Actilift白色与彩色酷洁组合物,新包装
成分:水、月桂醇醚硫酸钠、丙二醇、C14-C15 Pareth-7、柠檬酸钠、棕榈仁油酸钠、醇、甲酸钠、季铵化的硫酸化乙氧基化的六亚甲基二胺、氢氧化钠、香料、山梨糖醇、氯化钙、蛋白酶、甘油、葡糖苷酶、糖苷酶、乙酸钠、着色剂、纤维素酶。
碧浪灵敏性白色与彩色组合物
成分:水、月桂醇醚硫酸钠、丙二醇、C14-C15 Pareth-7、柠檬酸钠、棕榈仁油酸钠、醇、甲酸钠、季铵化的硫酸化乙氧基化的六亚甲基二胺、氢氧化钠、山梨糖醇、氯化钙、蛋白酶、甘油、糖苷酶、乙酸钠、纤维素酶、二氧化硅。
碧浪Actilif组合物,普通
水、十二烷基苯磺酸钠、C14-C15 Pareth-7、柠檬酸钠、丙二醇、棕榈仁油酸钠、月桂醇醚硫酸钠、MEA十二烷基苯磺酸、季铵化的硫酸化乙氧基化的六亚甲基二胺、枯烯磺酸钠、香料、PEG/乙酸乙烯酯的共聚物、甲酸钠、C12-C14 Pareth-7、氢化蓖麻油、二亚乙基三胺五亚甲基磷酸钠、PEG/PPG-10/2丙基庚基醚、丁苯基甲基丙醛、荧光增亮剂9、山梨糖醇、甘油、乙醇胺、氢氧化钠、α-异甲基紫罗兰酮、蛋白酶、氯化钙、香叶醇、芳樟醇、香茅醇、三丙二醇、氯化钠、糖苷酶、苯并异噻唑啉酮、二甲硅油、糖苷酶、乙酸钠、纤维素酶、着色剂、甘油硬脂酸酯、羟乙基纤维素、二氧化硅。
宝莹小&强大洗涤剂组合物(液体)
成分:15%-30%阴离子表面活性剂、非离子型表面活性剂、5%-15%皂、<5%聚羧酸酯、香料、磷酸盐、光学增亮剂
宝莹2合1与舒适西番莲粉末
硫酸钠、碳酸钠、十二烷基苯磺酸钠、膨润土、碳酸钠过氧化物、硅酸钠、沸石、水、柠檬酸、TAED、C12-15 Pareth-7、硬脂酸、香精、丙烯酸钠/MA共聚物、纤维素胶、所修饰的玉米淀粉、氯化钠、羟乙磷酸四钠、EDTMP钙钠、苯胺吗啉三嗪基-氨基苯磺酸二钠、碳酸氢钠、苯丙基乙基聚甲基硅氧烷、丁苯基甲基丙醛、甘油硬脂酸酯、碳酸钙、聚丙烯酸钠、α-异甲基紫罗兰酮、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、纤维素、蛋白酶、柠檬烯、PEG-75、二氧化钛、糊精、蔗糖、聚芳基磺酸钠、CI 12490、CI 45100、CI 42090、硫代硫酸钠、CI 61585。
宝莹生物粉末
蔗糖、山梨醇、硅酸铝、聚甲醛三聚氰胺、聚芳基磺酸钠、CI 61585、CI 45100、脂肪酶、淀粉酶、黄胞胶、羟丙基甲基纤维素、CI 12490、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、硫代硫酸钠、CI 42090、甘露聚糖酶、CI 11680、羟乙磷酸、EDTA四钠。
宝莹生物片剂
碳酸钠、碳酸钠过氧化物、碳酸氢钠、沸石、水、硅酸钠、月桂基硫酸钠、纤维素、TAED、十二烷基苯磺酸钠、半纤维素、木质素、月桂基葡糖苷、丙烯酸钠/MA共聚物、膨润土、氯化钠、香精、羟乙磷酸四钠、硫酸钠、聚丙烯酸钠、二甲硅油、苯胺基吗啉代三嗪基氨基芪磺酸二钠盐、十二烷基苯磺酸、三甲基硅氧基硅酸盐、碳酸钙、纤维素、PEG-75、二氧化钛、糊精、蛋白酶、所修饰的玉米淀粉、蔗糖、CI 12490、聚芳基磺酸钠、硫代硫酸钠、淀粉酶、高岭土。
宝莹色彩护理生物粉末
枯草杆菌蛋白酶、咪唑啉酮、己基肉桂醛、蔗糖、山梨醇、硅酸铝、聚甲醛三聚氰胺、CI 61585、CI 45100、脂肪酶、淀粉酶、黄胞胶、羟丙基甲基纤维素、CI 12490、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、硫代硫酸钠、CI 42090、甘露聚糖酶、CI 11680、羟乙磷酸、EDTA四钠。
宝莹色彩护理生物片剂
碳酸氢钠、碳酸钠、沸石、水、硅酸钠、十二烷基硫酸钠、纤维素胶、十二烷基苯磺酸钠、月桂基葡糖苷、氯化钠、丙烯酸钠/MA共聚物、香精、硫代乙酸钠、PVP、硫酸钠、羟乙磷酸四钠、聚丙烯酸钠、二甲硅油、膨润土、十二烷基苯磺酸、三甲基硅氧基硅酸盐、碳酸钙、纤维素、PEG-75、二氧化钛、糊精、蛋白酶、所修饰的玉米淀粉、蔗糖、硫代硫酸钠、淀粉酶、CI74160、高岭土。
宝莹双效胶囊生物制品
MEA-十二烷基苯磺酸、MEA-氢化椰油酸、C12-15 Pareth-7、二丙二醇、水、羟乙磷酸四钠、聚乙烯醇、甘油、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、丙二醇、香精、二亚乙基三胺五亚甲基磷酸钠、山梨醇、MEA-硫酸、乙醇胺、枯草杆菌蛋白酶、乙二醇、丁苯基甲基丙醛、硼酸、(4-甲酰苯基)、己基肉桂醛、柠檬烯、芳樟醇、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、α-异甲基紫罗兰酮、香叶醇、淀粉酶、聚合的蓝色着色剂、聚合的黄色着色剂、滑石粉、氯化钠、苯并异噻唑啉酮、甘露聚糖酶、苯酸苄铵酰胺。
宝莹2合1与舒适晴天粉末
硫酸钠、碳酸钠、十二烷基苯磺酸钠、膨润土、碳酸钠过氧化物、硅酸钠、沸石、水、柠檬酸、TAED、C12-15 Pareth-7、香精、硬脂酸、丙烯酸钠/MA共聚物、纤维素胶、所修饰的玉米淀粉、氯化钠、羟乙磷酸四钠、EDTMP钙钠、苯胺吗啉三嗪基-氨基苯磺酸二钠、碳酸氢钠、苯丙基乙基聚甲基硅氧烷、丁苯基甲基丙醛、甘油硬脂酸酯、碳酸钙、聚丙烯酸钠、香叶醇、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、纤维素、蛋白酶、PEG-75、二氧化钛、糊精、蔗糖、聚芳基磺酸钠、CI 12490、CI 45100、CI 42090、硫代硫酸钠、CI 61585。
宝莹小&强大2合1余舒适晴天
水、C12-15 Pareth-7、十二烷基苯磺酸钠、丙二醇、氢化椰油酸钠、三乙醇胺、甘油、TEA-氢化椰油酸酯、香精、氯化钠、聚季铵盐-10、PVP、聚合的粉色着色剂、硫酸钠、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、丁苯基甲基丙醛、苯乙烯/丙烯酸酯共聚物、己基肉桂醛、香茅醇、丁子香酚、聚乙烯醇、乙酸钠、异丙醇、聚合的黄色着色剂、十二烷基硫酸钠。
宝莹小&强大生物制品
水、MEA-十二烷基苯磺酸、丙二醇、月桂醇醚硫酸钠、C12-15Pareth-7、TEA-氢化椰油酸酯、MEA-柠檬酸、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、MEA-羟乙磷酸、三乙醇胺、香精、丙烯酸酯共聚物、山梨醇、MEA-硫酸、亚硫酸钠、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、丁苯基甲基丙醛、苯乙烯/丙烯酸酯共聚物、香茅醇、硫酸钠、肽、盐、来自发酵(工艺)的糖、枯草杆菌蛋白酶、甘油、硼酸、(4-甲酰苯基)、香叶醇、果胶裂解酶、淀粉酶、十二烷基硫酸钠、甘露聚糖酶、CI42051。
宝莹小&强大胶囊生物制品
MEA-十二烷基苯磺酸、MEA-氢化椰油酸、C12-15 Pareth-7、二丙二醇、水、甘油、聚乙烯醇、香精、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、二亚乙基三胺五亚甲基磷酸钠、丙二醇、山梨醇、MEA-硫酸、乙醇胺、枯草杆菌蛋白酶、乙二醇、丁苯基甲基丙醛、己基肉桂醛、淀粉、硼酸、(4-甲酰苯基)、柠檬烯、芳樟醇、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、α-异甲基紫罗兰酮、香叶醇、淀粉酶、滑石粉、聚合的蓝色着色剂、氯化钠、苯并异噻唑啉酮、苯酸苄铵酰胺、聚合的黄色着色剂、甘露聚糖酶。
宝莹小&强大胶囊色彩护理
MEA-十二烷基苯磺酸、MEA-氢化椰油酸、C12-15 Pareth-7、二丙二醇、水、甘油、聚乙烯醇、香精、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、二亚乙基三胺五亚甲基磷酸钠、丙二醇、MEA-硫酸、乙醇胺、PVP、山梨醇、丁苯基甲基丙醛、枯草杆菌蛋白酶、己基肉桂醛、淀粉、柠檬烯、芳樟醇、硼酸、(4-甲酰苯基)、α-异甲基紫罗兰酮、香叶醇、滑石粉、聚合的蓝色着色剂、苯酸苄铵酰胺、聚合的黄色着色剂。
宝莹小&强大色彩护理
水、MEA-十二烷基苯磺酸、丙二醇、月桂醇醚硫酸钠、C12-15Pareth-7、TEA-氢化椰油酸酯、MEA-柠檬酸、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、MEA-羟乙磷酸、三乙醇胺、香精、丙烯酸酯共聚物、山梨醇、MEA-硫酸、亚硫酸钠、甘油、丁苯基甲基丙醛、香茅醇、硫酸钠、肽、盐、来自发酵(工艺)的糖,苯乙烯/丙烯酸酯共聚物、枯草杆菌蛋白酶、硼酸、(4-甲酰苯基)、香叶醇、果胶裂解酶、淀粉酶、十二烷基硫酸钠、甘露聚糖酶、CI 61585、CI 45100。
Fairy非生物制品组合物(液体)
成分:15%-30%阴离子表面活性剂、5%-15%非离子表面活性剂、肥皂、苯并异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮、香料
标准洗涤剂T组合物(粉末)
成分:11%LAS、2%AS/AEOS、2%肥皂、3%AEO、15.15%碳酸钠、3%硅酸钠、18.75%沸石、0.15%螯合剂、2%柠檬酸钠、1.65%AA/MA共聚物、2.5%CMC和0.5%SRP(所有的百分数都是w/w)。
标准洗涤剂X组合物(粉末)
成分:16.5%LAS、15%沸石、12%二硅酸钠、20%碳酸钠、1%sokalan、35.5%硫酸钠(所有的百分数都是w/w)。
碧浪Actilift彩色&风格组合物(粉末)
成分:15%-30%阴离子表面活性剂、<5%非离子表面活性剂、磷酸盐、聚羧酸盐、沸石;酶、香料、己基肉桂醛。
碧浪Actilif组合物(粉末)
成分:5%-15%阴离子表面活性剂、基于氧的漂白剂、<5%非离子表面活性剂、磷酸盐、聚羧酸盐、沸石、光学增亮剂、酶、香料、丁苯基甲基丙醛、香豆素、己基肉桂醛
宝莹Megaperls组合物(粉末)
成分:以下的15%-30%:阴离子表面活性剂、基于氧的漂白剂和沸石,以下的少于5%:非离子表面活性剂、磷酸盐、聚羧酸盐、肥皂、另外成分:香料、己基肉桂醛、水杨酸苄酯、芳樟醇、光学增亮剂、酶和香茅醇。
嘉盛液体,原版:
成分:水、醇乙氧基硫酸盐、二乙二醇、醇乙氧化物、乙醇胺、直链烷基苯磺酸盐、脂肪酸钠、聚乙烯亚胺乙氧基化物、柠檬酸、硼砂、枯烯磺酸钠、丙二醇、DTPA、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、二丙乙基四氨、氢氧化钠、甲酸钠、甲酸钙、二甲硅油、淀粉酶、蛋白酶、LiquitintTM、氢化蓖麻油、香味。
汰渍液体,原版:
成分:线形烷基苯磺酸酯、丙二醇、柠檬酸、氢氧化钠、硼砂、乙醇胺、乙醇、醇硫酸盐、聚乙烯亚胺乙氧基化物、脂肪酸钠、乙氧基硫酸二季铵盐、蛋白酶、二乙二醇、月桂醇聚醚-9、烷基二甲胺氧化物、香味、淀粉酶、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、DTPA、甲酸钠、甲酸钙、聚乙二醇4000、甘露聚糖酶、LiquitintTM蓝、二甲硅油。
液体汰渍,自由和温和型:水、醇乙氧基硫酸钠、丙二醇、硼砂、乙醇、线形烷基苯磺酸钠、盐、聚乙烯亚胺乙氧基化物、二乙二醇、反式硫酸化和乙氧基化的六亚甲基二胺、醇乙氧化物、线形烷基苯磺酸酯、MEA盐、甲酸钠、烷基硫酸钠、DTPA、氧化胺、甲酸钙、二氨基二苯乙烯二钠、二磺酸盐、淀粉酶、蛋白酶、二甲硅油、苯并异噻唑啉酮
汰渍冷水液体,清香型:水、醇乙氧基硫酸酯、线形烷基苯磺酸酯、二乙二醇、丙二醇、乙醇胺、柠檬酸、硼砂、醇硫酸盐、氢氧化钠、聚乙烯亚胺、乙氧基化物、脂肪酸钠、乙醇、蛋白酶、月桂醇聚醚-9、乙氧基硫酸二季铵盐、月桂基胺氧化物、异丙苯钠、磺酸盐、香味、DTPA、淀粉酶、二钠、二氨基二苯乙烯、二磺酸盐、甲酸钠、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、甲酸钙、聚乙二醇4000、甘露聚糖酶、果胶酶、LiquitintTM蓝、二甲硅油
汰渍TOTALCARETM液体,冷棉:水、醇乙氧基硫酸酯、丙二醇、脂肪酸钠、月桂基三甲基氯化铵、乙醇、氢氧化钠、枯烯磺酸钠、柠檬酸、乙醇胺、二乙二醇、聚醚硅氧烷、硼砂、香味、聚乙烯亚胺乙氧基化物、蛋白酶、月桂醇聚醚-9、
DTPA、聚丙烯酰胺季铵盐氯化物、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、甲酸钠、LiquitintTM橙、二丙基乙四胺、二甲硅油、纤维素酶。
液体汰渍加漂白剂AlternativeTM,生动白和鲜艳、最初以及清洁微风:水、醇乙氧基硫酸钠、烷基硫酸钠、MEA柠檬酸、线形烷基苯磺酸酯、MEA盐、丙二醇、二乙二醇、聚乙烯亚胺乙氧基化物、乙醇、脂肪酸钠、乙醇胺、月桂基胺氧化物、硼砂、月桂醇聚醚-9、DTPA、枯烯磺酸钠、甲酸钠、甲酸钙、线形烷基苯磺酸酯、钠盐、醇硫酸盐、氢氧化钠、乙氧基硫酸二季铵盐、香味、淀粉酶、蛋白酶、甘露聚糖酶、果胶酶、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、苯并异噻唑啉酮、LiquitintTM蓝、二甲硅油、二丙基乙四胺。
液体汰渍HE,原味:水、醇乙氧基硫酸钠、MEA柠檬酸、烷基硫酸钠、醇乙氧化物、线形烷基苯磺酸酯、MEA盐、脂肪酸钠、聚乙烯亚胺乙氧基化物、二乙二醇、丙二醇、乙氧基硫酸二季铵盐、硼砂、聚乙烯亚胺、乙氧基化物丙氧基化物、乙醇、枯烯磺酸钠、香味、DTPA、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、甘露聚糖酶、纤维素酶、淀粉酶、甲酸钠、甲酸钙、月桂基胺氧化物、LiquitintTM蓝、二甲硅油/聚二甲基硅酮。
汰渍TOTALCARE HE液体,新生雨润(renewing Rain):水、醇乙氧基硫酸酯、线形烷基苯磺酸酯、醇乙氧化物、柠檬酸、乙醇胺、脂肪酸钠、二乙二醇、丙二醇、氢氧化钠、硼砂、聚乙烯亚胺乙氧基化物、聚醚硅氧烷、乙醇、蛋白酶、枯烯磺酸钠、乙氧基硫酸二季铵盐、月桂醇聚醚-9、香味、淀粉酶、DTPA、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、甲酸钠、甲酸钙、甘露聚糖酶、LiquitintTM橙、二甲硅油、聚丙烯酰胺季铵盐氯化物、纤维素酶、二丙基乙四胺。
汰渍液体HE自由:水、醇乙氧基硫酸酯、二乙二醇、单乙醇胺柠檬酸、甲酸钠、丙二醇、线形烷基苯磺酸酯、乙醇胺、乙醇、聚乙烯亚胺乙氧基化物、淀粉酶、苯并异噻唑啉、硼砂、甲酸钙、柠檬酸、乙二烯三胺五乙酸钠、二甲硅油、乙氧基硫酸二季铵盐、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、月桂醇聚醚-9、甘露聚糖酶、蛋白酶、枯烯磺酸钠、脂肪酸钠。
汰渍冷水HE液体,清香型:水、醇乙氧基硫酸酯、MEA柠檬酸、醇硫酸盐、醇乙氧化物、线形烷基苯磺酸酯MEA、脂肪酸钠、聚乙烯亚胺乙氧基化物、二乙二醇、丙二醇、乙氧基硫酸二季铵盐、硼砂、聚乙烯亚胺乙氧基化物丙氧基化物、乙醇、枯烯磺酸钠、香味、DTPA、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、蛋白酶、甘露聚糖酶、纤维素酶、淀粉酶、甲酸钠、甲酸钙、月桂基胺氧化物、LiquitintTM蓝、二甲硅油。
汰渍冷水HE自由液体:水、醇乙氧基硫酸钠、MEA柠檬酸、线形烷基苯磺酸酯:钠盐、醇乙氧化物、线形烷基苯磺酸酯:MEA盐、脂肪酸钠、聚乙烯亚胺乙氧基化物、二乙二醇、丙二醇、乙氧基硫酸二季铵盐、硼砂、蛋白酶、聚乙烯亚胺乙氧基化物丙氧基化物、乙醇、枯烯磺酸钠、淀粉酶、柠檬酸、DTPA、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、甲酸钠、甲酸钙、二甲硅油。
汰渍简单洁净与清新:水、醇乙氧化物硫酸盐、线形烷基苯磺酸钠/Mea盐、丙二醇、二乙二醇、甲酸钠、乙醇、硼砂、脂肪酸钠、香味、月桂基胺氧化物、DTPA、聚乙烯胺乙氧基化物、甲酸钙、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、二甲硅油、四胺、LiquitintTM蓝。
汰渍舱,海雾,神秘森林,春天牧场:线形烷基苯磺酸酯、C12-16Pareth-9、丙二醇、醇乙氧基硫酸酯、水、聚乙烯亚胺乙氧基化物、甘油、脂肪酸盐、PEG-136聚乙酸乙烯酯、乙二胺琥珀酸盐、单乙醇胺柠檬酸、亚硫酸氢钠、乙二烯三胺五乙酸钠、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、甲酸钙、甘露聚糖酶、木葡聚糖酶、甲酸钠、氢化蓖麻油、natalase、染料、termamyl、枯草杆菌蛋白酶、苯并异噻唑啉、香料。
汰渍去污笔(Tide to Go):去离子水、二丙二醇丁基醚、烷基硫酸钠、过氧化氢、乙醇、硫酸镁、烷基二甲基氧化胺、柠檬酸、氢氧化钠、三甲氧基苯甲酸、香味。
汰渍污渍释放液体:水、烷基乙氧基化物、直链烷基苯磺酸盐、过氧化氢、乙氧基硫酸二季铵盐、乙醇胺、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、四丁基乙叉基双酚、F&DC黄3、香味。
汰渍污渍释放粉末:过碳酸钠、硫酸钠、碳酸钠、铝硅酸钠、壬酰氧基苯磺酸盐、聚丙烯酸钠、水、烷基苯磺酸钠、DTPA、聚乙二醇、棕榈酸钠、淀粉酶、蛋白酶、修饰的淀粉、FD&C蓝1、香味。
汰渍污渍释放,预处理器喷雾:水、烷基乙氧基化物、MEA硼酸盐、直链烷基苯磺酸盐、丙二醇、乙氧基硫酸二季铵盐、氯化钙酶、蛋白酶、乙醇胺、苯并异噻唑啉酮、淀粉酶、柠檬酸钠、氢氧化钠、香味。
汰渍去污渍橡皮擦:水、烷基氧化胺、二丙二醇苯基醚、过氧化氢、柠檬酸、乙二胺二琥珀酸钠盐、烷基硫酸钠、香味。
汰渍氧化加强:碳酸氢钠、碳酸钠、过碳酸钠、醇乙氧化物、氯化钠、马来酸/丙烯酸共聚物、壬酰氧基苯磺酸盐、硫酸钠、着色剂、乙二烯三胺五乙酸钠盐、水合硅铝酸盐(沸石)、聚乙二醇、烷基苯磺酸钠、棕榈酸钠、淀粉、水、香味。
汰渍污渍释放加强双重Pac:聚乙烯醇袋膜,其中有被包装的液体部分和粉末部分:
液体成分:二丙二醇、乙氧基硫酸二季铵盐、水、甘油、LiquitintTM橙,粉末成分:过碳酸钠、壬酰氧基苯磺酸盐、碳酸钠、硫酸钠、铝硅酸钠、聚丙烯酸钠、烷基苯磺酸钠、马来酸/丙烯酸共聚物、水、淀粉酶、聚乙二醇、棕榈酸钠、修饰的淀粉、蛋白酶、甘油、DTPA、香味。
汰渍超级污渍释放:水、醇乙氧基硫酸钠、直链烷基苯磺酸盐、钠/MEA盐、MEA柠檬酸、丙二醇、聚乙烯亚胺乙氧基化物、乙醇、二乙二醇、聚乙烯亚胺丙氧基乙氧基化物、脂肪酸钠、蛋白酶、硼砂、枯烯磺酸钠、DTPA、香味、淀粉酶、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、甲酸钙、甲酸钠、葡聚糖酶、二甲硅油、LiquitintTM蓝、甘露聚糖酶。
具有少许粉末洗涤剂的超级汰渍,四月清新/清洁微风/四月精华:碳酸钠、铝硅酸钠、硫酸钠、线形烷基苯磺酸酯、膨润土、水、过碳酸钠、聚丙烯酸钠、硅酸盐、烷基硫酸盐、壬酰氧基苯酚酯磺酸、DTPA、聚乙二醇4000、硅胶、乙氧基化物、香味、聚氧化乙烯、棕榈酸、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、蛋白酶、LiquitintTM红、FD&C蓝1、纤维素酶。
具有少许Downy清洁微风的超级汰渍:水、醇乙氧基硫酸钠、MEA柠檬酸、直链烷基苯磺酸盐:钠/MEA盐、丙二醇、聚乙烯亚胺乙氧基化物、乙醇、二乙二醇、聚乙烯亚胺、丙氧基乙氧基化物、乙氧基硫酸二季铵盐、醇硫酸盐、二甲硅油、香味、硼砂、脂肪酸钠、DTPA、蛋白酶、亚硫酸氢钠、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、淀粉酶、葡聚糖酶、蓖麻油、甲酸钙、MEA、苯乙烯丙烯酯共聚物、甲酸钠、LiquitintTM蓝。
具有Downy阳花的超级汰渍:水、醇乙氧基硫酸钠、MEA柠檬酸、直链烷基苯磺酸盐:钠/MEA盐、丙二醇、乙醇、二乙二醇、聚乙烯亚胺丙氧基乙氧基化物、聚乙烯亚胺乙氧基化物、醇硫酸盐、二甲硅油、香味、硼砂、脂肪酸钠、DTPA、蛋白酶、亚硫酸氢钠、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、淀粉酶、蓖麻油、甲酸钙、MEA、苯乙烯丙烯酯共聚物、丙铵丙酰胺、葡聚糖酶、甲酸钠、LiquitintTM蓝。
具有Downy四月清新/甜蜜梦境的超级汰渍:水、醇乙氧基硫酸钠、MEA柠檬酸、直链烷基苯磺酸盐:钠/MEA盐、丙二醇、聚乙烯亚胺乙氧基化物、乙醇、二乙二醇、聚亚乙基亚胺丙氧基乙氧基化物、乙氧基硫酸二季铵盐、醇硫酸盐、二甲硅油、香味、硼砂、脂肪酸钠、DTPA、蛋白酶、亚硫酸氢钠、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、淀粉酶、葡聚糖酶、蓖麻油、甲酸钙、MEA、苯乙烯丙烯酯共聚物、丙铵丙酰胺、甲酸钠、LiquitintTM蓝。
超级汰渍自由粉末洗涤剂:碳酸钠、铝硅酸钠、烷基硫酸盐、硫酸钠、线形烷基苯磺酸酯、水、聚丙烯酸钠、硅酸盐、乙氧基化物、过碳酸钠、聚乙二醇4000、蛋白酶、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、硅胶、纤维素酶。
超级汰渍粉末洗涤剂,清洁微风/春日薰衣草/森林泉:碳酸钠、铝硅酸钠、硫酸钠、线形烷基苯磺酸酯、烷基硫酸盐、过碳酸钠、水、聚丙烯酸钠、硅酸盐、壬酰氧基苯酚酯磺酸、乙氧基化物、聚乙二醇4000、香味、DTPA、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、棕榈酸、蛋白酶、硅胶、纤维素酶。
超级汰渍HE(高效率)粉末洗涤剂,清洁微风:碳酸钠、铝硅酸钠、硫酸钠、线形烷基苯磺酸酯、水、壬酰氧基苯酚酯磺酸、烷基硫酸盐、聚丙烯酸钠、硅酸盐、过碳酸钠、乙氧基化物、聚乙二醇4000、香味、DTPA、棕榈酸、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、蛋白酶、硅胶、纤维素酶。
超级汰渍冷水粉末洗涤剂,清香型:碳酸钠、铝硅酸钠、硫酸钠、过碳酸钠、烷基硫酸盐、线形烷基苯磺酸酯、水、壬酰氧基苯酚酯磺酸、聚丙烯酸钠、硅酸盐、乙氧基化物、聚乙二醇4000、DTPA、香味、Natalase、棕榈酸、蛋白酶、二钠、二氨基二苯乙烯二磺酸盐、FD&C蓝1、硅胶、纤维素酶、烷基醚硫酸盐。
具有漂白剂粉末洗涤剂的超级汰渍,清洁微风:碳酸钠、铝硅酸钠、硫酸钠、线形烷基苯磺酸酯、过碳酸钠、壬酰氧基苯酚酯磺酸、烷基硫酸盐、水、硅酸盐、聚丙烯酸钠乙氧基化物、聚乙二醇4000、香味、DTPA、棕榈酸、蛋白酶、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、硅胶、FD&C蓝1、纤维素酶、烷基醚硫酸盐。
具有Febreeze FreshnessTM粉末洗涤剂的超级汰渍,春日新生:
碳酸钠、铝硅酸钠、硫酸钠、线形烷基苯磺酸酯、过碳酸钠、烷基硫酸盐、水、聚丙烯酸钠、硅酸盐、壬酰氧基苯酚酯磺酸、乙氧基化物、聚乙二醇4000、DTPA、香味、纤维素酶、蛋白酶、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、硅胶、FD&C蓝1。
具有Febreeze Freshness的液体汰渍加-运动HE活跃新鲜:
水、醇乙氧基硫酸钠、MEA柠檬酸、线形烷基苯磺酸酯、钠盐、线形烷基苯磺酸酯:MEA盐、醇乙氧化物、脂肪酸钠、丙二醇、二乙二醇、聚乙烯亚胺乙氧基化物丙氧基化物、乙氧基硫酸二季铵盐、乙醇、枯烯磺酸钠、硼砂、香味、DTPA、硫酸氢钠、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、甘露聚糖酶、纤维素酶、淀粉酶、甲酸钠、甲酸钙、月桂基胺氧化物、LiquitintTM蓝、二甲硅油/聚二甲基硅酮。
汰渍加Febreeze Freshness春日新生:
水、醇乙氧基硫酸钠、直链烷基苯磺酸盐:钠/MEA盐、MEA柠檬酸、丙二醇、聚乙烯亚胺乙氧基化物、香味、乙醇、二乙二醇、聚乙烯亚胺丙氧基乙氧基化物、蛋白酶、醇硫酸盐、硼砂、脂肪酸钠、DTPA、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、MEA、甘露聚糖酶、葡聚糖酶、甲酸钠、二甲硅油、LiquitintTM蓝、四胺。
具有Febreeze Freshness的液体汰渍加,运动HE胜利新鲜:水、醇乙氧基硫酸钠、MEA柠檬酸、线形烷基苯磺酸酯、钠盐、线形烷基苯磺酸酯:MEA盐、醇乙氧化物、脂肪酸钠、丙二醇、二乙二醇、聚乙烯亚胺乙氧基化物丙氧基化物、乙氧基硫酸二季铵盐、乙醇、枯烯磺酸钠、硼砂、香味、DTPA、硫酸氢钠、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、甘露聚糖酶、纤维素酶、淀粉酶、甲酸钠、甲酸钙、月桂基胺氧化物、LiquitintTM蓝、二甲硅油/聚二甲基硅酮。
汰渍生动白+鲜艳,原版:
碳酸钠、铝硅酸钠、硫酸钠、线形烷基苯磺酸酯、过碳酸钠、壬酰氧基苯酚酯磺酸、烷基硫酸盐、水、硅酸盐、聚丙烯酸钠乙氧基化物、聚乙二醇4000、香味、DTPA、棕榈酸、蛋白酶、二氨基二苯乙烯二磺酸钠、硅胶、FD&C蓝1、纤维素酶、烷基醚硫酸盐。
HEY SPORT纺织品洗涤剂
水、十二烷基苯磺酸、月桂醇聚醚-11、peg-75羊毛脂、丙二醇、改性醇、大豆油酸钾、氢氧化钾、椰油两性二乙酸二钠、乙二胺三乙椰子烷基酰胺、香精、蓖麻醇酸锌、氯化钠、苯并异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮、ci 16255、苯甲醇。
命名为汰渍、嘉盛和Fairy的产品是由宝洁公司(Procter&Gamble)提供的可商购产品。命名为宝莹的产品是由联合利华和汉高公司(Unilever and Henkel)提供的可商购产品。命名为Hey Sport的产品是由Hey Sport提供的可商购产品。
所有酶水平表达为rug活性酶蛋白/100g洗涤剂组合物。表面活性剂成分获得自巴斯夫公司(BASF)、路德维希港、德国(Lutensol(R));壳牌化学公司(Shell Chemicals),伦敦,英国;斯泰潘公司(Stepan),诺思菲尔德,III,美国;亨斯曼公司(Huntsman),盐湖城,犹他州,美国;科莱恩公司(Clariant),苏尔茨巴赫市,德国(Praepagen(R))。
三聚磷酸钠可以获得自罗地亚公司(Rhodia)、巴黎、法国。沸石可以获得自工业沸石(英国)有限公司,格雷士,艾塞克斯,英国。柠檬酸和柠檬酸钠可以获得自永本兹劳尔公司(Jungbunzlauer),巴塞尔,瑞士。NOBS是壬酰基羟苯磺酸钠,由伊士曼公司(Eastman),贝茨维尔,阿肯色州,美国提供。
TAED是四乙酰乙二胺,在科莱恩有限公司(Clariant GmbH),祖尔茨巴赫,德国的Peractive(R)品牌下提供。
碳酸钠和碳酸氢钠可以获得自索尔维公司(Solvay),布鲁塞尔,比利时。
聚丙烯酸酯、聚丙烯酸酯/马来酸酯共聚物可以获得自巴斯夫公司、路德维希港、德国。
Repel-O-Tex(R)可以获得自罗地亚公司(Rhodia)、巴黎、法国。
Texcare(R)可以获得自科莱恩公司,祖尔茨巴赫,德国。过碳酸钠和碳酸钠可以获得自索尔维公司,休斯顿,德克萨斯州,美国。
乙二胺-N,N’-二琥珀酸的Na盐,(S,S)异构体(EDDS)是通过联合奥泰公司(Octel),埃尔斯米尔港,英国提供。
羟基乙醇二磷酸盐(HEDP)是由美国陶氏化学公司(Dow Chemical),米德兰,密歇根州,美国提供。
酶Savinase(R)、Savinase(R)Ultra、Stainzyme(R)Plus、Lipex(R)、Lipolex(R)、Lipoclean(R)、Celluclean(R)、Carezyme(R)、Natalase(R)、Stainzyme(R)、Stainzyme(R)Plus、Termamyl(R)、Termamyl(R)ultra、和Mannaway(R)可以获得自诺维信公司(Novozymes),巴格斯瓦德,丹麦。
酶Purafect(R)、FN3、FN4和Optisize可以获得自杰能科国际公司(GenencorInternational Inc.),帕洛阿尔托,加利福尼亚州,美国。
直接紫9和99可以获得自巴斯夫公司、路德维希港、德国。溶剂紫13可以获得自宁波立兴化工有限公司(Ningbo Lixing Chemical Co.,Ltd.),宁波,浙江,中国。增亮剂可以获得自汽巴精化有限公司,巴塞尔,瑞士。除非另外指明,所有百分比和比率都是按重量计计算。除非另外指明,所有百分比和比率都是基于总组合物计算。应当理解的是贯穿本说明书给出的每一最大数值限度包括每一较低的数值限度,如同此类较低数值限度在此被明确写出。贯穿本说明书给出的每一最小数值限度将包括每一较高的数值限度,如同此类较高数值限度在此被明确写出。本说明书中所给出的每个数值范围将包括落入在这样更宽泛数值范围内的每一狭小的范围,好像这样狭小的数值范围都在这里被书面表达了。
洗涤测定
Launder-O-Meter(LOM)模式洗涤系统
Launder-O-Meter(LOM)是中等规模标准洗涤系统,它可以应用于同时测试多达20种不同洗涤条件。LOM基本上是大型的具有20个封闭金属烧杯在其中旋转的温度受控的水浴。每个烧杯构成一个小的洗涤机并且在一次实验过程中,每个试管将包含一种具有特定的有待测试的洗涤剂/酶系统连同在关于其进行测试的弄脏的和未弄脏的织物。机械压力由在水浴中旋转的烧杯并且由包括在烧杯中的金属球实现。
LOM标准洗涤系统主要用于清洁剂和酶的中等规模测试,在例如欧洲洗涤条件下。在一个LOM实验中,如压载物与污垢的比率和织物与洗涤液的比率的因素可以变化。因此,LOM提供了在小规模实验(如AMSA和微型洗涤)与在前面加载型洗涤机中的更费时的全规模实验之间的联系。
迷你Launder-O-Meter(迷你LOM)模式洗涤系统
迷你LOM是Launder-O-Meter(LOM)的修饰的迷你洗涤系统,其是中等规模标准洗涤系统,它可以应用于同时测试多达20种不同洗涤条件。LOM基本上是大型的具有20个封闭金属烧杯在其中旋转的温度受控的水浴。每个烧杯构成一个小的洗涤机并且在一次实验过程中,每个试管将包含一种具有特定的有待测试的洗涤剂/酶系统连同在关于其进行测试的弄脏的和未弄脏的织物。机械压力由在水浴中旋转的烧杯并且由包括在烧杯中的金属球实现。
LOM标准洗涤系统主要用于清洁剂和酶的中等规模测试,在例如欧洲洗涤条件下。在一个LOM实验中,如压载物与污垢的比率和织物与洗涤液的比率的因素可以变化。因此,LOM提供了在小规模实验(如AMSA和微型洗涤)与在前面加载型洗涤机中的更费时的全规模实验之间的联系。
在迷你LOM中,洗涤是在置于斯图尔特(Stuart)旋转器中的50ml试管中进行的。
Terg-O-tometer(TOM)洗涤测定
Tergo-To-Meter(TOM)是一种中等规模标准洗涤系统,它可以应用于同时测试12种不同洗涤条件。TOM基本上是大型的具有多达12个开放金属烧杯淹没至其中的温度受控的水浴。每个烧杯构成一个小的顶部加载型洗涤机器并且在实验期间,它们中的每一者将包含特定洗涤剂/酶系统的溶液并且对弄脏的和未弄脏的织物测试其性能。通过旋转搅拌臂获得机械应力,该旋转搅拌臂搅拌在每个烧杯内的液体。因为TOM杯子不含盖子,所以有可能在TOM实验期间收回样品并且在洗涤期间在线分析信息。
TOM标准洗涤系统主要用于清洁剂和酶的中等规模测试,在例如US或LA/AP洗涤条件下。在一个TOM实验中,如压载物与污垢的比率和织物与洗涤液的比率的因素可以变化。因此,TOM提供了在小规模实验(如AMSA和微型洗涤)与在顶部加载型洗涤机中的更费时的全规模实验之间的联系。
设备:水浴具有12个钢制烧杯并且每个烧杯1个旋转臂,每个烧杯的容量是500或1200mL的洗涤剂溶液。温度范围是从5℃至80℃。水浴应当用去离子水填充。转速可以设定为70至120rpm/min。
设定Terg-O-Tometer中的温度并且开始在水浴中旋转。等待温度调整(公差是+/-0,5℃)应该对所有烧杯进行清洁并且不含微量先前测试物质。
在一个桶中制备具有所希望的量的洗涤剂、温度和水硬度的洗涤溶液。允许将该洗涤剂在磁搅拌10分钟期间进行溶解。洗涤溶液应该在制备之后30到60分钟之内使用。
将800ml洗涤液添加到TOM烧杯中。将洗涤液在120rpm下进行搅拌,并且任选地将一种或多种酶添加到该烧杯中。将小块布样撒到烧杯中并且然后是压载加载物。当小块布样和压载物添加到烧杯中时开始时间测量。将小块布样洗涤20分钟,此后,停止搅拌。随后,将洗涤加载物从TOM烧杯转移到筛,并且用冷自来水冲洗。将固体小块布样从压载加载物中分离。在流动的水下,将污垢小块布样转移到含冷自来水的5L烧杯,持续5分钟针对即将到来的灭活,分开存放压载加载物。用手轻轻压出小块布样中的水,并且置于铺有纸的托盘上。将另一张纸置于小块布样的顶部。在使这些小块布样经受分析之前,允许小块布样干燥过夜,例如,如按在实例7中所描述的来测定除臭。
全规模洗涤
这是用于在EU条件下(在前装载式洗涤机中洗涤)在全规模洗涤中测试DNA酶的洗涤性能的测试方法。
将真实物品(T恤)和压载物与洗涤剂和酶一起添加至每次洗涤中。洗涤后,干燥这些真实物品(T恤)。干燥后,切下圆形小块布样并且用在miniLOM中的添加污垢的洗涤剂(脏的洗涤剂)进行洗涤。在MacBeth Color Eye分光光度计上测量色差。
基于每次洗涤中洗涤剂剂量的重量百分比来添加这些酶。
使用的设备:
·洗涤机:Miele Softtronic W2445
·水表和自动数据采集系统
·MacBeth Color Eye分光光度计
为了水硬度的制备和调节,需要以下成分:
·氯化钙(CaCl2·2H2O)
·氯化镁(MgCL2·6H2O)
·碳酸氢钠(NaHCO3)
压载物
该压载物由干净的白色布料组成,没有由棉、聚酯或棉/聚酯制成的光学增白剂。该压载物的构成是基于重量的棉/聚酯比为65/35的不同物品的混合物。每次洗涤中的压载物重量、干燥度和物品构成必须相同。
每次洗涤后,在85℃/15min的工业洗涤器中或在95℃的没有洗涤剂的洗涤(EU机器)中,将该压载物灭活。
压载物实例:(标准EU压载物构成,总共3kg)
·3件T恤(100%棉)
·10件衬衫,短袖(55%棉45%聚酯)
·4件枕头套(35%棉,65%聚酯),110x 75cm
·1件小床单,大小100x 75cm(100%棉)
·3件茶巾(100%棉)
·袜子(80%棉20%聚酯)作为平衡物
洗涤条件
·温度:30℃。
·洗涤程序:无预洗的正常棉洗:“棉”。
·水位13-14L,带“加水”
·水硬度:标准EU条件:15°dH,Ca2+:Mg2+:HCO3=4:1:7.5
·DNA酶剂量:1ppm。
进行全规模洗涤试验的详细步骤
1按研究计划中选择洗涤程序。
2将洗涤剂和DNA酶置于洗涤滚筒中的“洗涤球”(液体和粉末洗涤剂两者)中。将其放在底部。
3将这些真实物品(T恤)和压载物置于该洗涤滚筒中。
4启动数字水表
5通过按下按钮“开始”启动洗涤机
6洗涤后,取出真实物品(T恤)和压载物,将真实物品放入干燥室。
干燥程序
将污渍放在托盘上或挂在线上,并且在室温下干燥。该室具有一台除湿机,每天24小时工作以保持该室干燥。
测量
切下来自T恤(腋窝、前部、后部和边缘)的圆形小块布样并在miniLOM中用添加污垢的脏的洗涤剂洗涤。通过测量色差(L值)来评估小块布样,使用Color Eye(MacbethColor Eye 7000反射分光光度计)来测量色差。在入射光中没有UV的情况下进行测量并且从CIE Lab色空间中提取L值。
酶测定
测定I
DNA酶活性的测试
在具有甲基绿(BD公司,富兰克林湖,新泽西州,美国)的DNA酶测试琼脂上确定DNA酶活性。简言之,将21g琼脂溶于500ml水中,并且然后在121℃下高压灭菌15分钟。将高压蒸汽处理的琼脂在水浴中温和至48℃,并且将20ml的琼脂倒入培养皿并且允许在室温下通过孵育来固化。在固化的琼脂平板上,添加5μl的酶溶液,并且DNA酶活性被观察为斑点酶溶液周围的无色区域。
测定II
使用电子鼻分析纺织品上的E-2-壬烯醛
测试纺织品上的恶臭的存在的一种方式是通过使用作为恶臭的标志物的E-2-壬烯醛,因为此化合物引起衣物上的恶臭。
将E-2-壬烯醛的溶液添加至5cm x 5cm纺织品小块布样上并且将该小块布样放入20mL玻璃小瓶中用于GC分析并且盖住该小瓶。在40℃下孵育20分钟后,在来自法国阿尔法M.O.S.(Alpha M.O.S.)的Heracles II电子鼻中分析来自加帽小瓶的5mL顶部空间(具有2个FID的双柱气相色谱仪,柱1:MXT5并且柱2:MXT1701)。
实例
实例1
检测对跑步T恤的深层清洁效果
将两件由100%聚酯制成的白色跑步T恤在洗涤机中使用3.33g/L的标准洗涤剂A进行洗涤(全规模洗涤)。
这两件T恤由测试者(男性)穿上,一次一件T恤。在体力活动一小时期间,该测试者穿每件T恤。在穿后,将一件T恤在洗涤机中使用3.33g/L的具有SEQ ID NO:7的DNA酶(1ppm)的标准洗涤剂A进行洗涤,而将第二件T恤在洗涤机中使用3.33g/L的没有DNA酶(0ppm)的标准洗涤剂A进行洗涤。如在以上描述的满刻度洗涤中所描述的洗涤这些T恤,并且使用15L自来水用于洗涤。两件T恤在体力活动期间都被穿了,并且然后都进行了洗涤。将这种穿和洗涤的循环重复10次。
为了评价清洁效果(深度清洁效果),从T恤的腋窝、背部(上背部,肩部之间)、前部(胸部)和下前边缘切出五个圆形小块布样(直径为2cm)。将来自腋窝、背部、前部和边缘的五个小块布样分别与五个无菌聚酯WFK30A小块布样在50mL试管中混合,并添加10mL的洗涤液,通过添加已添加0.7g/L污垢(Pigmentschmutz,09V,wfk,克雷费尔德(Krefeld),德国)的3.33g/l的标准洗涤剂A的水溶液来制备该洗涤液。在30℃下将试管置于Stuart旋转器(miniLOM)中1小时,并且根据以上所述的miniLOM进行洗涤。将小块布样用10ml的自来水冲洗两次并且在滤纸上干燥过夜。
使用Color Eye(Macbeth Color Eye 7000反射分光光度计)测量色差(L值)。在入射光中没有UV的情况下进行测量并且从CIE Lab色空间中提取L 值。高L值反映了白色纺织品。因此,ΔL越高,纺织品越白。
下面的结果示出,在10次洗涤期间,用DNA酶洗涤在随后的洗涤过程中防止了污垢的沉积。此外,这些结果示出,在10次洗涤期间,用DNA酶洗涤改进了该纺织品的白度。
实例2
2次洗涤中的液体洗涤剂中的DNA酶的深度清洁性能
在本实例中使用一种分离自衣物的短波单胞菌属的菌株。在30℃下,使短波单胞菌属物种在胰胨豆胨琼脂(TSA)(pH 7.3)(CM0131;Oxoid有限公司,贝辛斯托克,英国)上预生长2-5天。将来自一个单菌落的满环物转移至10mL的TSB(胰胨大豆肉汤,胰蛋白胨)中并且伴随振荡(240rpm)于30℃下孵育16小时。繁殖后,通过离心(西格玛实验室离心机(SigmaLaboratory Centrifuge)6K15)(3000g,在21℃下,7min)沉淀短波单胞菌属并且将其重悬于10mL的用milliQ水稀释两次的TSB中。使用分光计(POLARstar Omega(BMG莱伯泰科(BMGLabtech),奥滕贝格(Ortenberg),德国))测量600nm处的光密度(OD)。将用无菌milliQ水稀释两次的新鲜TSB用短波单胞菌属接种至OD600nm 0.03,并且将1.6mL添加到12孔的聚苯乙烯平底微板的各孔(3512;康宁公司(Corning Incorporated),康宁(Corning),纽约州(NY),美国),在该微板中放置无菌聚酯WFK30A的圆形小块布样(直径2cm)。伴随振荡(100rpm)在15℃下,分别培养24h和72h后,去除生长培养基,并且将小块布样用0.9%(w/v)NaCl冲洗两次。
在洗涤1中,将如以上制备的具有短波单胞菌属物种的五个冲洗的小块布样(供体小块布样)与五个无菌聚酯WFK30A小块布样(示踪小块布样)在50mL试管中混合,并且添加10mL的洗涤液,通过添加3.33g/l的标准洗涤剂A的水溶液和SEQ ID NO:2的DNA酶(0.04ppm)来制备该洗涤液。平行地制成具有标准洗涤剂A而不添加DNA酶的洗涤。在30℃下将试管置于Stuart旋转器(miniLOM)中1小时,并且根据以上所述的miniLOM进行洗涤。将小块布样用自来水冲洗两次并且在滤纸上干燥过夜。
在洗涤2中,将来自洗涤1的五个干燥的供体和示踪小块布样在50mL试管中洗涤,所述试管添加有10mL的洗涤液,通过添加3.33g/l的标准洗涤剂A的水溶液和0.7g/L污垢(Pigmentschmutz,09V,wfk,克雷费尔德(Krefeld),德国)来制备该洗涤液。在30℃下将试管置于斯图尔特(Stuart)旋转器中1小时,并根据以上所述的miniLOM进行洗涤。将小块布样用自来水冲洗两次并且在滤纸上干燥过夜。
使用Color Eye(Macbeth Color Eye 7000反射分光光度计)测量色差(L值)。在入射光中没有UV的情况下进行测量并且从CIE Lab色空间中提取L值。高L值反映了白色纺织品。因此,ΔL越高,纺织品越白。
下表中的结果示出洗涤2后测量的L值。这些结果示出,在洗涤1中用DNA酶洗涤在随后的没有DNA酶存在的洗涤过程中防止了污垢的沉积。此外,这些结果示出,在10次洗涤期间,用DNA酶洗涤改进了该纺织品的白度。
实例3
跑步T恤上汗臭味检测
将两件由100%聚酯制成的白色跑步T恤在洗涤机中(全规模洗涤)使用3.33g/L的标准洗涤剂A进行洗涤。
这两件T恤由测试者(男性)穿上,一次一件T恤。在体力活动一小时期间,该测试者穿每件T恤。在穿后,将一件T恤在洗涤机中使用3.33g/L的具有SEQ ID NO:7的DNA酶(1ppm)的标准洗涤剂A进行洗涤,而将第二件T恤在洗涤机中使用3.33g/L的没有DNA酶(0ppm)的标准洗涤剂A进行洗涤。如在以上描述的满刻度洗涤中所描述的洗涤这些T恤,并且使用15L自来水用于洗涤。两件T恤在体力活动期间都被穿了,并且然后都进行了洗涤。将这种穿和洗涤的循环重复10次。
为了评估臭味,训练有素的测试者通过闻T恤来调研使用前T恤的汗臭味(恶臭)。如果检测到汗臭味,在下表中添加标记(X)。下面的这些观察示出,在10次洗涤期间用DNA酶洗涤在随后的不使用DNA酶的洗涤过程中防止了气味的累积。
表1.
实例4
在收集的跑步衣服(运动衫和跑步T恤)上进行洗涤实验,这些衣服在训练运动至少50次期间已经被穿过。在训练运动期间,这些跑步衣服被汗水浸湿,但是一般不会弄脏。这些跑步衣服之前已经在Miele Softtronic W5825中,在30℃(机器的低填充)下,按推荐标准剂量使用BioTex黑(联合利华)进行洗涤。
在进行本实验之前,将运动衫和跑步T恤(100%聚酯)通过训练有素的气味小组成员来进行评估,该训练有素的气味小组成员发现酸臭汗的显臭味(恶臭),具体地而言存在于衣服腋下中。在使用BioTex黑洗涤这些衣服后恶臭存在,并且该恶臭对着跑步衣服使用次数而积累。
将这些跑步衣服在Miele Softtronic W5825中在30℃(机器的低填充)下使用标准剂量的BioTex黑和一定剂量的米曲霉DNA酶(0.4ppm)进行洗涤。
每个训练运动之间,使运动衣服经受该气味小组成员的另一轮评估。该气味小组成员发现,该恶臭在本发明的米曲霉DNA酶的存在下1至3次洗涤循环后显著降低并且几乎不可检测到。在扩展研究中,每次洗涤衣服时,在本发明的米曲霉DNA酶的存在下洗涤这些跑步衣服。该气味小组成员发现,当在米曲霉DNA酶的存在下洗涤这些跑步衣服时,在恶臭明显可检测之前,其可以被穿至少两次训练运动(在训练运动之间不洗涤衣服的情况下允许使这些衣服干燥)。
实例5
通过DNA酶(电子鼻)的除臭
制备具有E-2-壬烯醛的DNA小块布样
遵循制造商说明书,通过QIAamp DNA血液迷你试剂盒(QIAamp DNA Blood MiniKit)(凯杰公司(Qiagen),希尔登,德国)分离来自假单胞菌属物种的染色体DNA。在Holm&Halby Systec Db-23高压釜中,在121℃下,将聚酯小块布样(WFK30A)(直径2cm)进行杀菌。将被稀释至1ng/μl终浓度的100μl纯化的假单胞菌属物种添加到每个高压蒸汽处理的小块布样上,并且将这些小块布样在空气层流工作台上在连续流下干燥2小时。在干燥后,将10个具有DNA的小块布样置于无菌25mL NUNC管(364238;赛墨科技公司(ThermoScientific))中,并且添加10ml的0.2mME-2-壬烯醛(255653;西格玛-奥利奇公司(Sigma-Aldrich))(测定II)。将该管置于斯图尔特(Stuart)旋转器(miniLOM)(在20rpm下,在室温下,持续20min)。将10个小块布样转移至50.000MWCO离心管(VS203,Vivaspin 20,Satorius)中。将这些管在3000g下,在21℃下离心1min,并且将10个小块布样分到2个无菌NUNC管(364238;赛墨科技公司)中,每个管中5个小块布样。此外,向各管中添加没有DNA和E-2-壬烯醛的5个无菌聚酯小块布样(WFK30A)(直径2cm)。标记没有DNA的小块布样,允许与有DNA/E-2-壬烯醛的小块布样进行区分。
具有E-2-壬烯醛的DNA小块布样的洗涤过程
通过溶解5.0g的洗涤剂于1000ml硬度为15°dH(欧洲条件)的无菌MilliQ水中,来制备碧浪Actilift粉末风格&彩色和碧浪Actilif粉末白色的洗涤液。通过溶解1.8g的白相洗涤剂于1000ml硬度为6°dH的无菌milliQ水中,来制备汰渍舱的洗涤液。在使用前,将洗涤液留在磁力搅拌器上20min。
将洗涤液(10ml)添加到两个具有含E-2-壬烯醛的5个DNA小块布样和5个无菌小块布样的相同的管中的每个,将产生5ppm终浓度的10μl本发明的米曲霉DNA酶添加到这些管之一。将这些管置于斯图尔特(Stuart)旋转器(20rpm,在30℃下,持续60min)。倒出洗涤液,并且将小块布样用20mL硬度为15°dH的无菌milliQ水进行冲洗。将小块布样从每个管中转移至50.000MWCO离心管(VS203,Vivaspin 20,Satorius)中,并且在3000g下在21℃下离心1min。然后将每个具有E-2-壬烯醛的小块布样转移至20mL Gc顶空瓶,使用干净无菌的镊子放置每个小块布样,每个小瓶中一个小块布样。然后将其在阿尔法莫斯公司(Alpha MOS)HERACLES快速气相色谱电子鼻中进行分析,该电子鼻配有Restek MXT-5毛细管柱、HS100自动进样器和FID检测器。
表2.用电子鼻测量的E-2-壬烯醛的强度。
结论:纺织品上的DNA捕获的臭味可以用米曲霉DNA酶去除,从而导致臭味减少。
实例6
通过DNA酶(感官分析)的除臭
将聚酯和棉小块布样(直径2cm)用假单胞菌属物种DNA和0.5mME-2-壬烯醛(255653;西格玛-奥利奇公司)弄脏(针对制备DNA小块布样的细节参见实例5)并且在本发明的米曲霉DNA酶(5ppm)的存在或不存在下在斯图尔特(Stuart)旋转器(miniLOM)60min中在30℃下在标准洗涤剂A(通过溶解3.33g在1升的硬度15°dH的milliQ水中来制备)中洗涤。在洗涤后,将小块布样在20ml硬度15°dH的milliQ水中冲洗两次。针对E-2-壬烯醛的感知强度,通过四位气味小组成员来评估这些小块布样(其上看不到的样品)。为了评估,使用从0至9的感知强度规模。0指示无E-2-壬烯醛的感知强度,而9指示E-2-壬烯醛的最高感知强度。结果示出在所有四位气味小组成员内达成共识。
表3
纺织品类型 DNA酶添加 四位气味小组成员的平均分数
- 5.0
+ 1.3
聚酯 - 6.3
聚酯 + 2.8
纺织品上的DNA捕获的臭味可以用米曲霉DNA酶去除,并且从而导致臭味减少。
实例7
视觉确定除臭的测定
在30℃下,使短波单胞菌属物种在胰胨豆胨琼脂(TSA)(pH 7.3)(CM0131;Oxoid有限公司,贝辛斯托克,英国)上预生长2-5天。将来自单菌落的满环物(loop-full)转移至10mL的TSB中并且伴随振荡(240rpm)于30℃下孵育20小时。繁殖后,通过离心(西格玛实验室离心机(Sigma Laboratory Centrifuge)6K15)(3000g,在21℃下,7min)沉淀短波单胞菌属并且将其重悬于10mL用水稀释两次的TSB中。使用分光计(POLARstar Omega(BMG莱伯泰科(BMG Labtech),奥滕贝格(Ortenberg),德国))测量600nm处的光密度(OD)。将用水稀释两次的新鲜TSB接种至0.03的OD600nm,并且将20mL添加到培养皿,其中放置了5cm x 5cm的无菌聚酯WFK30A的小块布样。伴随振荡(75rpm)在15℃下孵育24h后,将小块布样用0.9%(w/v)NaCl冲洗两次。在冲洗后或在LAF工作台中干燥24小时后立即在TOM中洗涤小块布样。
溶液中的视觉指示剂酚红是通过溶解0.1g在100ml 99%乙醇中来制备。将指示剂溶液(50μL)添加到滤纸(直径2cm),并且在通风橱中干燥过夜,以形成包括视觉指示剂(酚红)的气味捕获基。将四个洗涤的小块布样置于玻璃容器(每个小块布样一个容器)的底部,并且添加500μL的17%TSB。作为对照,将洗涤干净的纺织品聚酯置于另一个玻璃容器的底部,并且添加500μL的17%TSB。将具有小块布样的容器在37℃下进行孵育。监视这些容器长达48小时,来检测酚红示踪物的颜色变化。
表4.孵育结果
洗涤剂 无酶 DNA酶(10ppm)
汰渍原味洗涤剂 红(24h) 黄(24h)
碧浪敏感型白色&彩色 红(48h) 黄(48h)
标准T 红(24h) 黄(24h)
表中小时指示出检测的颜色变化的时间点。
序列表
<110> 诺维信公司(Novozymes A/S)
<120> 多肽的用途
<130> 12939-WO-PCT
<140> -
<141> 2015-05-28
<160> 8
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
<211> 910
<212> DNA
<213> 米曲霉
<220>
<221> 外显子
<222> (1)..(242)
<220>
<221> 内含子
<222> (243)..(308)
<220>
<221> 外显子
<222> (309)..(494)
<220>
<221> 内含子
<222> (495)..(555)
<220>
<221> 外显子
<222> (556)..(714)
<220>
<221> 内含子
<222> (715)..(765)
<220>
<221> 外显子
<222> (766)..(907)
<220>
<221> 内含子
<222> (908)..(910)
<400> 1
atg cag ctt act aag tcc ctc ctg gta ttc gcg ctt tac atg ttt ggc 48
Met Gln Leu Thr Lys Ser Leu Leu Val Phe Ala Leu Tyr Met Phe Gly
1 5 10 15
act cag cac gtt cta gct gtg cct gtc aat ccc gag cct gat gct acg 96
Thr Gln His Val Leu Ala Val Pro Val Asn Pro Glu Pro Asp Ala Thr
20 25 30
agc gtc gaa aat gtt gcc ctt aaa aca ggc agc ggt gat agc cag agc 144
Ser Val Glu Asn Val Ala Leu Lys Thr Gly Ser Gly Asp Ser Gln Ser
35 40 45
gat ccc atc aag gcg gac ttg gag gtc aaa ggc caa agt gct ttg cct 192
Asp Pro Ile Lys Ala Asp Leu Glu Val Lys Gly Gln Ser Ala Leu Pro
50 55 60
ttc gac gtc gac tgc tgg gct atc ctg tgc aag ggc gcc ccg aat gtc 240
Phe Asp Val Asp Cys Trp Ala Ile Leu Cys Lys Gly Ala Pro Asn Val
65 70 75 80
ct gtatgtcttc ctttattgaa gctcttgatg tggcttgtat gtttgactaa 292
Leu
tatatcgcac ccttag g cag cgc gtg aat gaa aag acg aaa aat agt aat 342
Gln Arg Val Asn Glu Lys Thr Lys Asn Ser Asn
85 90
cgc gat cgg agc ggt gcg aac aaa ggg cct ttc aaa gat cct cag aaa 390
Arg Asp Arg Ser Gly Ala Asn Lys Gly Pro Phe Lys Asp Pro Gln Lys
95 100 105
tgg ggc atc aaa gcc ctt cca cct aag aat cca tcc tgg agc gca caa 438
Trp Gly Ile Lys Ala Leu Pro Pro Lys Asn Pro Ser Trp Ser Ala Gln
110 115 120
gac ttc aaa tca ccc gaa gaa tac gca ttt gcg tct tcc ctt caa ggc 486
Asp Phe Lys Ser Pro Glu Glu Tyr Ala Phe Ala Ser Ser Leu Gln Gly
125 130 135 140
gga acc aa gtatgctaag atcatcactg cttcaatcaa tgtgttgtta 534
Gly Thr Asn
gctgactccg atgtgaccaa g t gcc atc cta gcg ccc gtc aac ctc gct tct 586
Ala Ile Leu Ala Pro Val Asn Leu Ala Ser
145 150
cag aac tcc caa ggc ggc gtc ttg aac ggt ttc tac tcg gcg aac aaa 634
Gln Asn Ser Gln Gly Gly Val Leu Asn Gly Phe Tyr Ser Ala Asn Lys
155 160 165
gta gca caa ttt gat cct agc aag ccc caa cag aca aag gga aca tgg 682
Val Ala Gln Phe Asp Pro Ser Lys Pro Gln Gln Thr Lys Gly Thr Trp
170 175 180 185
ttt cag atc act aag ttc aca ggt gca gct gg gtaagaactt ccagtaccat 734
Phe Gln Ile Thr Lys Phe Thr Gly Ala Ala Gly
190 195
ggtcatatgc aatttactaa gaaaatacta g t cct tac tgc aag gct ctg ggg 787
Pro Tyr Cys Lys Ala Leu Gly
200
agt aat gat aag agt gtg tgc gat aag aac aag aat att gca ggg gac 835
Ser Asn Asp Lys Ser Val Cys Asp Lys Asn Lys Asn Ile Ala Gly Asp
205 210 215
tgg ggc ttc gac ccg gcg aaa tgg gca tat cag tat gat gag aag aat 883
Trp Gly Phe Asp Pro Ala Lys Trp Ala Tyr Gln Tyr Asp Glu Lys Asn
220 225 230 235
aac aag ttc aac tat gtt ggt aag taa 910
Asn Lys Phe Asn Tyr Val Gly Lys
240
<210> 2
<211> 243
<212> PRT
<213> 米曲霉
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(22)
<220>
<221> 前肽
<222> (23)..(37)
<220>
<221> 肽
<222> (38)..(243)
<400> 2
Met Gln Leu Thr Lys Ser Leu Leu Val Phe Ala Leu Tyr Met Phe Gly
1 5 10 15
Thr Gln His Val Leu Ala Val Pro Val Asn Pro Glu Pro Asp Ala Thr
20 25 30
Ser Val Glu Asn Val Ala Leu Lys Thr Gly Ser Gly Asp Ser Gln Ser
35 40 45
Asp Pro Ile Lys Ala Asp Leu Glu Val Lys Gly Gln Ser Ala Leu Pro
50 55 60
Phe Asp Val Asp Cys Trp Ala Ile Leu Cys Lys Gly Ala Pro Asn Val
65 70 75 80
Leu Gln Arg Val Asn Glu Lys Thr Lys Asn Ser Asn Arg Asp Arg Ser
85 90 95
Gly Ala Asn Lys Gly Pro Phe Lys Asp Pro Gln Lys Trp Gly Ile Lys
100 105 110
Ala Leu Pro Pro Lys Asn Pro Ser Trp Ser Ala Gln Asp Phe Lys Ser
115 120 125
Pro Glu Glu Tyr Ala Phe Ala Ser Ser Leu Gln Gly Gly Thr Asn Ala
130 135 140
Ile Leu Ala Pro Val Asn Leu Ala Ser Gln Asn Ser Gln Gly Gly Val
145 150 155 160
Leu Asn Gly Phe Tyr Ser Ala Asn Lys Val Ala Gln Phe Asp Pro Ser
165 170 175
Lys Pro Gln Gln Thr Lys Gly Thr Trp Phe Gln Ile Thr Lys Phe Thr
180 185 190
Gly Ala Ala Gly Pro Tyr Cys Lys Ala Leu Gly Ser Asn Asp Lys Ser
195 200 205
Val Cys Asp Lys Asn Lys Asn Ile Ala Gly Asp Trp Gly Phe Asp Pro
210 215 220
Ala Lys Trp Ala Tyr Gln Tyr Asp Glu Lys Asn Asn Lys Phe Asn Tyr
225 230 235 240
Val Gly Lys
<210> 3
<211> 204
<212> PRT
<213> 米曲霉
<220>
<221> 肽
<222> (1)..(204)
<400> 3
Lys Thr Gly Ser Gly Asp Ser Gln Ser Asp Pro Ile Lys Ala Asp Leu
1 5 10 15
Glu Val Lys Gly Gln Ser Ala Leu Pro Phe Asp Val Asp Cys Trp Ala
20 25 30
Ile Leu Cys Lys Gly Ala Pro Asn Val Leu Gln Arg Val Asn Glu Lys
35 40 45
Thr Lys Asn Ser Asn Arg Asp Arg Ser Gly Ala Asn Lys Gly Pro Phe
50 55 60
Lys Asp Pro Gln Lys Trp Gly Ile Lys Ala Leu Pro Pro Lys Asn Pro
65 70 75 80
Ser Trp Ser Ala Gln Asp Phe Lys Ser Pro Glu Glu Tyr Ala Phe Ala
85 90 95
Ser Ser Leu Gln Gly Gly Thr Asn Ala Ile Leu Ala Pro Val Asn Leu
100 105 110
Ala Ser Gln Asn Ser Gln Gly Gly Val Leu Asn Gly Phe Tyr Ser Ala
115 120 125
Asn Lys Val Ala Gln Phe Asp Pro Ser Lys Pro Gln Gln Thr Lys Gly
130 135 140
Thr Trp Phe Gln Ile Thr Lys Phe Thr Gly Ala Ala Gly Pro Tyr Cys
145 150 155 160
Lys Ala Leu Gly Ser Asn Asp Lys Ser Val Cys Asp Lys Asn Lys Asn
165 170 175
Ile Ala Gly Asp Trp Gly Phe Asp Pro Ala Lys Trp Ala Tyr Gln Tyr
180 185 190
Asp Glu Lys Asn Asn Lys Phe Asn Tyr Val Gly Lys
195 200
<210> 4
<211> 868
<212> DNA
<213> 哈茨木霉
<220>
<221> 外显子
<222> (1)..(75)
<220>
<221> 内含子
<222> (76)..(154)
<220>
<221> 外显子
<222> (155)..(288)
<220>
<221> 内含子
<222> (289)..(362)
<220>
<221> 外显子
<222> (363)..(519)
<220>
<221> 内含子
<222> (520)..(615)
<220>
<221> 外显子
<222> (616)..(867)
<400> 4
atg aag ctg tcc atc tct gtc gct ctt act tcg gcc atc gcg gtt ctc 48
Met Lys Leu Ser Ile Ser Val Ala Leu Thr Ser Ala Ile Ala Val Leu
1 5 10 15
gcc gcc ccg gct cct atg cct aca ccg gtatgtagca tcaatgcaac 95
Ala Ala Pro Ala Pro Met Pro Thr Pro
20 25
atgacataac ttgtatctcg actatatatc agactggcta atgcttcaac tcattacag 154
ccc ggt att ccc acg gaa agc agc gcc aga acc caa ctt gcc ggc ctg 202
Pro Gly Ile Pro Thr Glu Ser Ser Ala Arg Thr Gln Leu Ala Gly Leu
30 35 40
act gtt gcc gtt gct ggc tct gga act ggt tac tcc cgc gac ctg ttt 250
Thr Val Ala Val Ala Gly Ser Gly Thr Gly Tyr Ser Arg Asp Leu Phe
45 50 55
ccc act tgg gat gcc atc tct ggt aac tgc aac gct cg gtatgataac 298
Pro Thr Trp Asp Ala Ile Ser Gly Asn Cys Asn Ala Arg
60 65 70
atcctaggac ctttcaagct tcggaaatac aacacaaagg ctaacaaagt ggatgtgcaa 358
atag c gaa tat gtg ttg aag cga gat ggt gaa ggt gtc caa gtc aac 405
Glu Tyr Val Leu Lys Arg Asp Gly Glu Gly Val Gln Val Asn
75 80
aat gct tgt gaa tct cag tcc ggc acc tgg atc aga tcc tta tga caa 453
Asn Ala Cys Glu Ser Gln Ser Gly Thr Trp Ile Arg Ser Leu Gln
85 90 95
cgc cag ttt cac aaa tgc atc cag ctt gga tat tga cca cat ggt gcc 501
Arg Gln Phe His Lys Cys Ile Gln Leu Gly Tyr Pro His Gly Ala
100 105 110
tct aaa gaa tgc ctg gat cgtgagtttt ctcctttttc actgcgtatc 549
Ser Lys Glu Cys Leu Asp
115 120
tccgttccct acctttttgc gatactatat catgccacat cactaatatg gacaaatttc 609
tcgcca gtc cgg tgc ctc aag ctg gac cac agc cca acg tga agc cct 657
Val Arg Cys Leu Lys Leu Asp His Ser Pro Thr Ser Pro
125 130
cgc caa cga cgt ctc ccg tcc cca act ctg ggc cgt ctc cgc aag cgc 705
Arg Gln Arg Arg Leu Pro Ser Pro Thr Leu Gly Arg Leu Arg Lys Arg
135 140 145
aaa ccg ctc caa ggg cga ccg cag ccc aga cca gtg gaa gcc tcc tct 753
Lys Pro Leu Gln Gly Arg Pro Gln Pro Arg Pro Val Glu Ala Ser Ser
150 155 160 165
gac cag ctt cta ctg cac cta cgc caa gtc gtg gat cga tgt caa gag 801
Asp Gln Leu Leu Leu His Leu Arg Gln Val Val Asp Arg Cys Gln Glu
170 175 180
ctt cta taa gct gac aat cac cag tgc cga gaa gac agc tct gag cag 849
Leu Leu Ala Asp Asn His Gln Cys Arg Glu Asp Ser Ser Glu Gln
185 190 195
cat gtt aga tac ttg cta g 868
His Val Arg Tyr Leu Leu
200
<210> 5
<211> 205
<212> PRT
<213> 哈茨木霉
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(17)
<220>
<221> 肽
<222> (18)..(205)
<400> 5
Met Lys Leu Ser Ile Ser Val Ala Leu Thr Ser Ala Ile Ala Val Leu
1 5 10 15
Ala Ala Pro Ala Pro Met Pro Thr Pro Pro Gly Ile Pro Thr Glu Ser
20 25 30
Ser Ala Arg Thr Gln Leu Ala Gly Leu Thr Val Ala Val Ala Gly Ser
35 40 45
Gly Thr Gly Tyr Ser Arg Asp Leu Phe Pro Thr Trp Asp Ala Ile Ser
50 55 60
Gly Asn Cys Asn Ala Arg Glu Tyr Val Leu Lys Arg Asp Gly Glu Gly
65 70 75 80
Val Gln Val Asn Asn Ala Cys Glu Ser Gln Ser Gly Thr Trp Ile Ser
85 90 95
Pro Tyr Asp Asn Ala Ser Phe Thr Asn Ala Ser Ser Leu Asp Ile Asp
100 105 110
His Met Val Pro Leu Lys Asn Ala Trp Ile Ser Gly Ala Ser Ser Trp
115 120 125
Thr Thr Ala Gln Arg Glu Ala Leu Ala Asn Asp Val Ser Arg Pro Gln
130 135 140
Leu Trp Ala Val Ser Ala Ser Ala Asn Arg Ser Lys Gly Asp Arg Ser
145 150 155 160
Pro Asp Gln Trp Lys Pro Pro Leu Thr Ser Phe Tyr Cys Thr Tyr Ala
165 170 175
Lys Ser Trp Ile Asp Val Lys Ser Phe Tyr Lys Leu Thr Ile Thr Ser
180 185 190
Ala Glu Lys Thr Ala Leu Ser Ser Met Leu Asp Thr Cys
195 200 205
<210> 6
<211> 136
<212> PRT
<213> 枯草杆菌
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(26)
<220>
<221> 肽
<222> (27)..(136)
<400> 6
Met Lys Lys Trp Met Ala Gly Leu Phe Leu Ala Ala Ala Val Leu Leu
1 5 10 15
Cys Leu Met Val Pro Gln Gln Ile Gln Gly Ala Ser Ser Tyr Asp Lys
20 25 30
Val Leu Tyr Phe Pro Leu Ser Arg Tyr Pro Glu Thr Gly Ser His Ile
35 40 45
Arg Asp Ala Ile Ala Glu Gly His Pro Asp Ile Cys Thr Ile Asp Arg
50 55 60
Asp Gly Ala Asp Lys Arg Arg Glu Glu Ser Leu Lys Gly Ile Pro Thr
65 70 75 80
Lys Pro Gly Tyr Asp Arg Asp Glu Trp Pro Met Ala Val Cys Glu Glu
85 90 95
Gly Gly Ala Gly Ala Asp Val Arg Tyr Val Thr Pro Ser Asp Asn Arg
100 105 110
Gly Ala Gly Ser Trp Val Gly Asn Gln Met Ser Ser Tyr Pro Asp Gly
115 120 125
Thr Arg Val Leu Phe Ile Val Gln
130 135
<210> 7
<211> 142
<212> PRT
<213> 地衣芽孢杆菌
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(33)
<220>
<221> 肽
<222> (34)..(136)
<400> 7
Met Ile Lys Lys Trp Ala Val His Leu Leu Phe Ser Ala Leu Val Leu
1 5 10 15
Leu Gly Leu Ser Gly Gly Ala Ala Tyr Ser Pro Gln His Ala Glu Gly
20 25 30
Ala Ala Arg Tyr Asp Asp Ile Leu Tyr Phe Pro Ala Ser Arg Tyr Pro
35 40 45
Glu Thr Gly Ala His Ile Ser Asp Ala Ile Lys Ala Gly His Ser Asp
50 55 60
Val Cys Thr Ile Glu Arg Ser Gly Ala Asp Lys Arg Arg Gln Glu Ser
65 70 75 80
Leu Lys Gly Ile Pro Thr Lys Pro Gly Phe Asp Arg Asp Glu Trp Pro
85 90 95
Met Ala Met Cys Glu Glu Gly Gly Lys Gly Ala Ser Val Arg Tyr Val
100 105 110
Ser Ser Ser Asp Asn Arg Gly Ala Gly Ser Trp Val Gly Asn Arg Leu
115 120 125
Ser Gly Phe Ala Asp Gly Thr Arg Ile Leu Phe Ile Val Gln
130 135 140
<210> 8
<211> 206
<212> PRT
<213> 米曲霉
<400> 8
Ala Leu Lys Thr Gly Ser Gly Asp Ser Gln Ser Asp Pro Ile Lys Ala
1 5 10 15
Asp Leu Glu Val Lys Gly Gln Ser Ala Leu Pro Phe Asp Val Asp Cys
20 25 30
Trp Ala Ile Leu Cys Lys Gly Ala Pro Asn Val Leu Gln Arg Val Asn
35 40 45
Glu Lys Thr Lys Asn Ser Asn Arg Asp Arg Ser Gly Ala Asn Lys Gly
50 55 60
Pro Phe Lys Asp Pro Gln Lys Trp Gly Ile Lys Ala Leu Pro Pro Lys
65 70 75 80
Asn Pro Ser Trp Ser Ala Gln Asp Phe Lys Ser Pro Glu Glu Tyr Ala
85 90 95
Phe Ala Ser Ser Leu Gln Gly Gly Thr Asn Ala Ile Leu Ala Pro Val
100 105 110
Asn Leu Ala Ser Gln Asn Ser Gln Gly Gly Val Leu Asn Gly Phe Tyr
115 120 125
Ser Ala Asn Lys Val Ala Gln Phe Asp Pro Ser Lys Pro Gln Gln Thr
130 135 140
Lys Gly Thr Trp Phe Gln Ile Thr Lys Phe Thr Gly Ala Ala Gly Pro
145 150 155 160
Tyr Cys Lys Ala Leu Gly Ser Asn Asp Lys Ser Val Cys Asp Lys Asn
165 170 175
Lys Asn Ile Ala Gly Asp Trp Gly Phe Asp Pro Ala Lys Trp Ala Tyr
180 185 190
Gln Tyr Asp Glu Lys Asn Asn Lys Phe Asn Tyr Val Gly Lys
195 200 205

Claims (15)

1.具有DNA酶活性的多肽用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少物品上的污垢和/或气味的再沉积的用途,其中该物品是纺织品或硬表面。
2.根据权利要求1所述的用途,其中没有具有DNA酶活性的多肽存在于随后的清洁或洗涤过程。
3.根据权利要求1-2中任一项所述的用途,用于防止或减少污垢和/或气味对该物品的附着。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途,用于维持或改进该物品的白度。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的用途,用于防止或减少来自该物品的恶臭。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的用途,其中将该具有DNA酶活性的多肽用于在随后的清洁或洗涤过程之前清洁或洗涤该物品至少一次。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的用途,其中将该具有DNA酶活性的多肽用于在随后的清洁或洗涤过程之前清洁或洗涤该物品至少两次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次或十次。
8.一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包括具有脱氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的的多肽和表面活性剂,其中该组合物满足以下a)或b)中的至少一个:
a)该组合物进一步包括气味控制剂;和/或
b)该表面活性剂不是阳离子表面活性剂。
9.根据权利要求8所述的组合物,其中该气味控制剂选自下组,该组由以下各项组成:环糊精及其混合物,气味阻断剂、反应性醛、黄酮类、金属盐、沸石、活性炭、疏水修饰的恶臭控制聚合物(HMP’s)、异噻唑啉酮衍生物,如苯并异噻唑啉酮,和/或挥发性醛。
10.一种用于在随后的清洁或洗涤过程期间防止或减少物品上的污垢的再沉积的方法,该方法包括以下步骤:
a)使物品与根据权利要求7-9中任一项所述的组合物或包含具有DNA酶活性的多肽的液体溶液接触;并且
b)任选地冲洗该物品,
其中该物品是纺织品或硬表面。
11.根据权利要求10所述的方法,其中通过浸渍该物品或当洗涤该物品时进行步骤a)下的该接触。
12.根据权利要求10-11中任一项所述的方法,其中该液体溶液是洗涤液或用于浸渍该物品的溶液。
13.根据权利要求10-12中任一项所述的方法,其中步骤a)下的该组合物或多肽用于在随后的清洁或洗涤过程之前清洁或洗涤该物品至少一次。
14.用具有DNA酶活性的多肽处理或浸渍物品。
15.根据权利要求14所述的物品,其中该物品是纺织品。
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