CN106432405A - 一种蚕蛹蛋白的精制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种蚕蛹蛋白的精制方法，先取缫丝后蚕蛹，洗净、晾干，破碎将蚕蛹碎片加至纤维素酶的水溶液中进行酶解，过滤，再将酶解后的碎片加至蒸馏水中匀浆，浆液经压滤，然后将滤液置于80‑90℃水浴中加热，调节pH至2‑4，5‑10℃静置，离心，最后将沉淀干燥，即得蚕蛹蛋白。本发明的精制方法提取率高，所得蚕蛹蛋白不仅氨基酸种类丰富且各氨基酸配比合理，分子量分布范围从500～100000u，符合保健类食品、药品要求，有着巨大的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于天然产物提取技术领域，具体涉及一种蚕蛹蛋白的精制方法。
背景技术
蚕蛹( Silkworm pupa) 为蚕蛾科昆虫家蚕蛾的蛹。蚕蛹蛋白占鲜蛹质量的14%～15%，占干蚕蛹质量45%～50%。蚕蛹蛋白中富含18 种氨基酸，且配比均衡，其中8 种必需氨基酸占总量的40% 以上，高于世界卫生组织提出的食品中氨基酸最佳组合模式，是一种优质的纯天然全价蛋白。我国每年缫丝工业需求蚕茧约在60×104 t左右，相应会得到干蚕蛹高达20×104 t，但干蚕蛹资源利用率极低。若能将蚕蛹蛋白进行提取精制，可有效提高蚕蛹利用率，对推动地区桑蚕产业发展有着重要意义。目前，蚕蛹蛋白精制流程主要为鲜蚕蛹预处理、蚕蛹蛋白提取等工艺，存在提取不完全、产物纯度低等问题。
发明内容
解决的技术问题：本发明的目的是克服现有技术的不足而提供一种蚕蛹蛋白的精制方法，该精制方法提取率高，所得蚕蛹蛋白不仅氨基酸种类丰富且各氨基酸配比合理。
技术方案： 一种蚕蛹蛋白的精制方法，包括以下步骤：
步骤1，取缫丝后蚕蛹，洗净、晾干，破碎后得到蚕蛹碎片；
步骤2，以重量份计，将蚕蛹碎片10份加至0.5-1.2wt.%纤维素酶的水溶液30-40份中进行酶解，过滤，得到酶解后的碎片；
步骤3，将酶解后的碎片加至1-1.5倍重量份蒸馏水中匀浆，浆液经压滤后，得到滤液；
步骤4，将滤液置于80-90℃水浴中加热，调节pH至2-4，5-10℃静置，离心得到沉淀；
步骤5，将沉淀干燥，即得蚕蛹蛋白。
进一步地，步骤1中蚕蛹碎片大小在0.5-1cm。
进一步地，步骤2中酶解温度为40-50℃、1-2h。
进一步地，步骤2中纤维素酶的水溶液pH在3.5-4.5。
进一步地，步骤5中干燥温度在40-50℃。
进一步地，步骤3中蒸馏水中含有0.5-1.2wt.%柠檬酸。
有益效果： 本发明的精制方法提取率高，所得蚕蛹蛋白不仅氨基酸种类丰富且各氨基酸配比合理，分子量分布范围从500～100000u，符合保健类食品、药品要求，有着巨大的应用前景。
具体实施方式
实施例1
一种蚕蛹蛋白的精制方法，包括以下步骤：
步骤1，取缫丝后蚕蛹，洗净、晾干，破碎后得到蚕蛹碎片；
步骤2，以重量份计，将蚕蛹碎片10份加至0.5wt.%纤维素酶的水溶液30份中进行酶解，过滤，得到酶解后的碎片；
步骤3，将酶解后的碎片加至1倍重量份蒸馏水中匀浆，浆液经压滤后，得到滤液；
步骤4，将滤液置于80℃水浴中加热，调节pH至2，5℃静置，离心得到沉淀；
步骤5，将沉淀干燥，即得蚕蛹蛋白。
其中，步骤1中蚕蛹碎片大小在0.5-1cm；步骤2中酶解温度为40℃、2h；步骤2中纤维素酶的水溶液pH在3.5-4.5；步骤5中干燥温度在40℃。
本实施例的蛋白提取率为55.2%，蚕蛹蛋白中水分含量为66.6%、蛋白含量为16.2%、蛹油含量为10.7%、灰分含量为1.3%；所得蚕蛹蛋白中含有18种氨基酸，且八种必需氨基酸占总量的48.03%，必需氨基酸与非必需氨基酸之比为92.42%。
实施例2
一种蚕蛹蛋白的精制方法，包括以下步骤：
步骤1，取缫丝后蚕蛹，洗净、晾干，破碎后得到蚕蛹碎片；
步骤2，以重量份计，将蚕蛹碎片10份加至0.7wt.%纤维素酶的水溶液33份中进行酶解，过滤，得到酶解后的碎片；
步骤3，将酶解后的碎片加至1.2倍重量份蒸馏水中匀浆，浆液经压滤后，得到滤液；
步骤4，将滤液置于85℃水浴中加热，调节pH至3，10℃静置，离心得到沉淀；
步骤5，将沉淀干燥，即得蚕蛹蛋白。
其中，步骤1中蚕蛹碎片大小在0.5-1cm；步骤2中酶解温度为45℃、2h；步骤2中纤维素酶的水溶液pH在3.5-4.5；步骤5中干燥温度在45℃。
本实施例的蛋白提取率为57.8%，蚕蛹蛋白中水分含量为64.1%、蛋白含量为18.2%、蛹油含量为10.3%、灰分含量为1.5%；所得蚕蛹蛋白中含有18种氨基酸，且八种必需氨基酸占总量的52.14%，必需氨基酸与非必需氨基酸之比为95.35%。
实施例3
一种蚕蛹蛋白的精制方法，包括以下步骤：
步骤1，取缫丝后蚕蛹，洗净、晾干，破碎后得到蚕蛹碎片；
步骤2，以重量份计，将蚕蛹碎片10份加至0.9wt.%纤维素酶的水溶液30份中进行酶解，过滤，得到酶解后的碎片；
步骤3，将酶解后的碎片加至1倍重量份蒸馏水中匀浆，浆液经压滤后，得到滤液；
步骤4，将滤液置于80℃水浴中加热，调节pH至2，10℃静置，离心得到沉淀；
步骤5，将沉淀干燥，即得蚕蛹蛋白。
其中，步骤1中蚕蛹碎片大小在0.5-1cm；步骤2中酶解温度为50℃、2h；步骤2中纤维素酶的水溶液pH在3.5-4.5；步骤5中干燥温度在50℃。
本实施例的蛋白提取率为51.7%，蚕蛹蛋白中水分含量为67.2%、蛋白含量为15.3%、蛹油含量为11.4%、灰分含量为1.5%；所得蚕蛹蛋白中含有18种氨基酸，且八种必需氨基酸占总量的46.72%，必需氨基酸与非必需氨基酸之比为91.57%。
实施例4
一种蚕蛹蛋白的精制方法，包括以下步骤：
步骤1，取缫丝后蚕蛹，洗净、晾干，破碎后得到蚕蛹碎片；
步骤2，以重量份计，将蚕蛹碎片10份加至1.2wt.%纤维素酶的水溶液40份中进行酶解，过滤，得到酶解后的碎片；
步骤3，将酶解后的碎片加至1.5倍重量份蒸馏水中匀浆，浆液经压滤后，得到滤液；
步骤4，将滤液置于90℃水浴中加热，调节pH至4，10℃静置，离心得到沉淀；
步骤5，将沉淀干燥，即得蚕蛹蛋白。
其中，步骤1中蚕蛹碎片大小在0.5-1cm；步骤2中酶解温度为50℃、1h；步骤2中纤维素酶的水溶液pH在3.5-4.5；步骤5中干燥温度在50℃。
本实施例的蛋白提取率为52.6%，蚕蛹蛋白中水分含量为65.6%、蛋白含量为15.2%、蛹油含量为11.8%、灰分含量为2.3%；所得蚕蛹蛋白中含有18种氨基酸，且八种必需氨基酸占总量的46.53%，必需氨基酸与非必需氨基酸之比为91.25%。
实施例5
本实施例与实施例2的区别在于：步骤3中蒸馏水中含有0.5-1.2wt.%柠檬酸。
一种蚕蛹蛋白的精制方法，包括以下步骤：
步骤1，取缫丝后蚕蛹，洗净、晾干，破碎后得到蚕蛹碎片；
步骤2，以重量份计，将蚕蛹碎片10份加至0.9wt.%纤维素酶的水溶液30份中进行酶解，过滤，得到酶解后的碎片；
步骤3，将酶解后的碎片加至1倍重量份蒸馏水中匀浆，蒸馏水中含有0.8wt.%柠檬酸，浆液经压滤后，得到滤液；
步骤4，将滤液置于80℃水浴中加热，调节pH至2，10℃静置，离心得到沉淀；
步骤5，将沉淀干燥，即得蚕蛹蛋白。
其中，步骤1中蚕蛹碎片大小在0.5-1cm；步骤2中酶解温度为50℃、2h；步骤2中纤维素酶的水溶液pH在3.5-4.5；步骤5中干燥温度在50℃。
本实施例的蛋白提取率为61.5%，蚕蛹蛋白中水分含量为63.2%、蛋白含量为19.7%、蛹油含量为9.7%、灰分含量为1.1%；所得蚕蛹蛋白中含有18种氨基酸，且八种必需氨基酸占总量的55.26%，必需氨基酸与非必需氨基酸之比为96.83%。
Claims (6)
1.一种蚕蛹蛋白的精制方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1，取缫丝后蚕蛹，洗净、晾干，破碎后得到蚕蛹碎片；
步骤2，以重量份计，将蚕蛹碎片10份加至0.5-1.2wt.%纤维素酶的水溶液30-40份中进行酶解，过滤，得到酶解后的碎片；
步骤3，将酶解后的碎片加至1-1.5倍重量份蒸馏水中匀浆，浆液经压滤后，得到滤液；
步骤4，将滤液置于80-90℃水浴中加热，调节pH至2-4，5-10℃静置，离心得到沉淀；
步骤5，将沉淀干燥，即得蚕蛹蛋白。
2.根据权利要求1所述的蚕蛹蛋白的精制方法，其特征在于：步骤1中蚕蛹碎片大小在0.5-1cm。
3.根据权利要求1所述的蚕蛹蛋白的精制方法，其特征在于：步骤2中酶解温度为40-50℃、1-2h。
4.根据权利要求1所述的蚕蛹蛋白的精制方法，其特征在于：步骤2中纤维素酶的水溶液pH在3.5-4.5。
5.根据权利要求1所述的蚕蛹蛋白的精制方法，其特征在于：步骤5中干燥温度在40-50℃。
6.根据权利要求1所述的蚕蛹蛋白的精制方法，其特征在于：步骤3中蒸馏水中含有0.5-1.2wt.%柠檬酸。
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