CN106289915A - 用于生物组织样本的脱水组合物、脱水方法和制备方法 - Google Patents
用于生物组织样本的脱水组合物、脱水方法和制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106289915A CN106289915A CN201610872467.4A CN201610872467A CN106289915A CN 106289915 A CN106289915 A CN 106289915A CN 201610872467 A CN201610872467 A CN 201610872467A CN 106289915 A CN106289915 A CN 106289915A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dewatering
- dehydrated
- sample
- organization sample
- biological organization
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 230000008520 organization Effects 0.000 title claims abstract description 48
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 29
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 18
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 37
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 claims abstract description 20
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 claims abstract description 20
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical group CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- SESFRYSPDFLNCH-UHFFFAOYSA-N benzyl benzoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 SESFRYSPDFLNCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N dibenzyl ether Chemical compound C=1C=CC=CC=1COCC1=CC=CC=C1 MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- USIUVYZYUHIAEV-UHFFFAOYSA-N diphenyl ether Chemical compound C=1C=CC=CC=1OC1=CC=CC=C1 USIUVYZYUHIAEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229960002903 benzyl benzoate Drugs 0.000 claims description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 claims description 3
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZIBGPFATKBEMQZ-UHFFFAOYSA-N triethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCO ZIBGPFATKBEMQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 22
- 238000005286 illumination Methods 0.000 abstract description 7
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 abstract description 7
- 230000013011 mating Effects 0.000 abstract description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 7
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 abstract description 5
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 abstract description 5
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 abstract description 3
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 abstract description 3
- 238000007654 immersion Methods 0.000 abstract 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 12
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 12
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000005030 aluminium foil Substances 0.000 description 4
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- MURGITYSBWUQTI-UHFFFAOYSA-N fluorescin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C1C2=CC=C(O)C=C2OC2=CC(O)=CC=C21 MURGITYSBWUQTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 2
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 2
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 206010028347 Muscle twitching Diseases 0.000 description 1
- 101150052863 THY1 gene Proteins 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 1
- 238000012754 cardiac puncture Methods 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 1
- 210000003792 cranial nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000003194 forelimb Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 125000004836 hexamethylene group Chemical group [H]C([H])([*:2])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[*:1] 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 1
- QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-N sodium;5-ethyl-5-pentan-2-yl-1,3-diazinane-2,4,6-trione Chemical compound [Na+].CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
一种用于生物组织样本的脱水组合物、脱水方法和制备方法，该制备方法包括脱水与透明两过程：脱水时每次采用不同梯度浓度的脱水剂，且最后一步的脱水剂中有机试剂的体积浓度为97％‑99.5％，每次的脱水时间视组织样本体积和最小厚度维度在0.5‑3小时之间选择；然后经透明剂浸泡0.5个小时即完成整个透明标本的制备。本发明方法制备的完整生物组织透明样本制备时间大大缩短，制得的透明标本透明度高，荧光蛋白荧光信号稳定，更可以利用光片照明显微镜进行快速连续的成像观察。
Description
技术领域
本发明属于生物医学和生物组织标本制备领域，更具体的涉及一种用于生物组织样本的脱水组合物、脱水方法和制备方法。
背景技术
全面准确地了解器官的内部结构及其神经血管走向情况是神经科学乃至整个生物医学研究领域不可或缺的基础，但组织不透明阻碍了对于大多数完整生物组织标本的全局式观察。在这种需求下应运而生了完整生物组织透明技术，使得器官不必切片，即可在完整状态下进行观察研究。
近年来，组织透明方法层出不穷，大体可以分为两类，一类是利用水溶性试剂透明，通过这类方法制备完整生物组织透明样本时间较长，处理时间通常在一周以上，并且透明效果较差，只有个别方法制得的样品可以利用双光子显微镜观察，更不能达到光片照明显微镜成像需求；另一类是利用有机溶剂透明，通过这类方法制备完整生物组织透明样本的处理时间要短于水溶性试剂透明的时间，根据样本大小的不同需要3-5天时间，获得的透明样本透明效果很好，达到对样品透明度要求最高的光片照明显微镜观察的要求，但是通过这类方法制作样品至少也需要数天的时间，且其组织内部荧光蛋白荧光信号易淬灭，不利于观察。
综上所述，目前完整生物组织样本透明的制备方法中缺乏快速的透明手段，同时也缺乏具备高透明度、保护荧光蛋白荧光信号的技术。
发明内容
为克服上述现有技术的不足，本发明的主要目的是提供用于生物组织样本的脱水组合物、脱水方法和制备方法，以便解决上述技术问题中的至少之一。
为了实现上述目的，作为本发明的一个方面，本发明提供了一种用于生物组织样本的脱水组合物，包括：
能够使所述生物组织样本脱水的有机试剂；以及
水；
其特征在于，所述脱水组合物用于生物组织样本最后一步的脱水，且水占所述脱水组合物的体积浓度在0.5-3％范围之间。
作为本发明的另一个方面，本发明还提供了一种用于生物组织样本脱水的脱水试剂组合，包括：
N种脱水试剂，所述脱水试剂均包含能够使所述生物组织样本脱水的有机试剂和水，其中，N为大于等于2的整数；
其特征在于，所述N种脱水试剂中用于生物组织样本最后一步脱水的脱水试剂采用如上所述的脱水组合物。
作为本发明的再一个方面，本发明还提供了一种生物组织样本的脱水方法，其特征在于，包括以下步骤：
采用如上所述的脱水试剂组合依次进行脱水，其中每一次脱水中，根据待处理的生物组织样本的体积和最小维度厚度，脱水时间在0.5-3小时之间选择；以及
所述脱水试剂组合中，有机试剂的体积浓度根据所述脱水试剂的使用先后顺序而逐渐增大。
作为本发明的还一个方面，本发明还提供了一种生物组织透明样本的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
采用如上所述的脱水方法对待处理的生物组织样本进行脱水；以及
使用透明剂浸泡所述待处理的生物组织样本来完成整个生物组织透明样本的制备。
基于上述技术方案可知，采用本发明的脱水组合物及脱水、透明方法可以在24小时内获得完整生物组织透明样本，具备快速制备完整生物组织样本的能力；本发明方法操作简便，透明效果好，更重要的是荧光蛋白荧光信号稳定，可用于光片照明成像设备进行完整器官快速整体成像。
附图说明
图1是C57小鼠脑标本经本发明实施例1处理后的透明效果图；
图2是SD大鼠脑标本经本发明实施例2处理后的透明效果图；
图3是荧光蛋白转基因小鼠脑标本经本发明实施例1处理后的光片照明成像效果图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，并参照附图，对本发明作进一步的详细说明。
现有的完整生物组织透明标本的制备方法多种多样，但是无论水溶性透明方法还是有机溶剂透明方法，对于完整动物组织来看透明标本的处理时间最短也需3天时间；而本发明公开了一种脱水、透明方法，可以在24小时内获得完整生物组织透明样本，具备快速制备完整生物组织样本的能力。
具体地，本发明公开了一种用于生物组织样本的脱水组合物，包括：
能够使生物组织样本脱水的有机试剂；以及
水；
其中，该脱水组合物用于生物组织样本最后一步的脱水，且水占脱水组合物的体积浓度在0.5-3％范围之间。
作为优选，该有机试剂选自乙醇、四氢呋喃、叔丁醇、丙醇、三甘醇、丁辛醇和环己醇中的一种或多种。
本发明还公开了一种用于生物组织样本脱水的脱水试剂组合，包括：
N种脱水试剂，该脱水试剂均包含能够使生物组织样本脱水的有机试剂和水，其中，N为大于等于2的整数；
其中，该N种脱水试剂中用于生物组织样本最后一步脱水的脱水试剂采用如上所述的脱水组合物。
本发明还公开了一种生物组织样本的脱水方法，包括以下步骤：
采用如上所述的脱水试剂组合依次进行脱水，其中每一次脱水中，根据待处理的生物组织样本的体积和最小维度厚度，脱水时间在0.5-3小时之间选择；以及
该脱水试剂组合中，有机试剂的体积浓度根据脱水试剂的使用先后顺序而逐渐增大。
作为优选，对于待处理的生物组织样本的最小维度厚度在1-3mm的，脱水时间为0.25-1h；最小维度厚度在3-5mm的，脱水时间为1-2h；最小维度厚度在5-10mm的，脱水时间为2-3h。
作为优选，N为3、4、5或6，即脱水次数为3、4、5或6。
其中，该生物组织样本可以是部分的，也可以是完整的生物组织样本，优选为完整的样本。
本发明还公开了一种生物组织透明样本的制备方法，包括以下步骤：
采用如上所述的脱水方法对待处理的生物组织样本进行脱水；以及
使用透明剂浸泡待处理的生物组织样本来完成整个生物组织透明样本的制备。
其中，透明剂例如选自苯甲酸与苯甲酸苄酯的混合液、苄醚、二苯醚、二甲苯或氯仿；透明剂的浸泡时间可以为0.5-1h，优选为0.5h。
本发明的脱水时间与现有技术构成鲜明的反差，下表中将这种对比清楚的展示了出来。
| 最小维度(mm) | 已有方法每次脱水时间(h) | 本申请方法每次脱水时间(h) |
| 1-3 | 1 | 0.25-1 |
| 3-5 | 12 | 1-2 |
| 5-10 | 24 | 2-3 |
下面结合具体实施例和实验结果对本发明的技术方案作进一步阐述说明。
成年Thy-1小鼠一只，体重约20g，用1ml注射器抽取1％戊巴比妥钠溶液0.2ml，腹腔注射麻醉。
待动物痛觉消失后，开胸充分暴露心脏，快速用装有1×PBS溶液(pH7.4)的注射器自左心室进行心脏穿刺，5分钟内均匀推注1×PBS溶液20ml，动物眼球、前肢及肝脏血色消失，继续灌注4％多聚甲醛溶液20ml(pH7.4，1×PBS配制)。刚开始灌注多聚甲醛时，可见到动物抽动、甩尾，之后动物肢体和尾巴绷直，提示灌注成功。
剪开颅骨，小心分离剪断与脑相连的颅神经，取出完整动物脑标本，浸入4％多聚甲醛溶液中，置于4℃冰箱内继续后固定2小时以上，最好过夜。
实施例1
用蒸馏水配制50％四氢呋喃、60％四氢呋喃、80％四氢呋喃、90％四氢呋喃、98％四氢呋喃各50ml，分别盛放于密封的玻璃瓶内，用铝箔纸将玻璃瓶包裹严实，以避光。将脑标本依次浸泡于由低浓度到高浓度的四氢呋喃脱水剂中各1小时，然后再用苄醚作为透明剂对脑标本进行透明处理，将脑标本从98％四氢呋喃溶液中取出后浸入装有50ml苄醚溶液的密封玻璃瓶内，同样此玻璃瓶也用铝箔纸进行包裹避光，3小时后用显微镜进行观察，结果如图1所示。对该样品进行光片照明成像处理，结果如图3所不。
实施例2
用蒸馏水配制50％乙醇、70％乙醇、80％乙醇、90％乙醇、99％乙醇各50ml，分别盛放于密封的玻璃瓶内，用铝箔纸将玻璃瓶包裹严实，以避光。将脑标本依次浸泡于由低浓度到高浓度的乙醇脱水剂中内各2小时，然后再用苯甲醇与苯甲酸苄酯的混合液作为透明剂对脑标本进行透明处理。将脑标本从99％乙醇溶液中取出后浸入装有50ml苄醚溶液的密封玻璃瓶内，同样此玻璃瓶也用铝箔纸进行包裹避光，2小时后用显微镜进行观察，结果如图2所示。
经过试验验证，通过本发明方法制备的完整生物组织透明样本制备时间大大缩短，例如成年小鼠脊髓只需2.5个小时，大鼠整脑只需18.5个小时，并且由此制得的透明标本透明度高，荧光蛋白荧光信号稳定，可以利用光片照明显微镜进行快速连续的成像观察。
以上所述的具体实施例，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施例而已，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种用于生物组织样本的脱水组合物，包括：
能够使所述生物组织样本脱水的有机试剂；以及
水；
其特征在于，所述脱水组合物用于生物组织样本最后一步的脱水，且水占所述脱水组合物的体积浓度在0.5-3％范围之间。
2.如权利要求1所述的脱水组合物，其特征在于，所述有机试剂选自乙醇、四氢呋喃、叔丁醇、丙醇、三甘醇、丁辛醇和环己醇中的一种或多种。
3.一种用于生物组织样本脱水的脱水试剂组合，包括：
N种脱水试剂，所述脱水试剂均包含能够使所述生物组织样本脱水的有机试剂和水，其中，N为大于等于2的整数；
其特征在于，所述N种脱水试剂中用于生物组织样本最后一步脱水的脱水试剂采用如权利要求1或2所述的脱水组合物。
4.一种生物组织样本的脱水方法，其特征在于，包括以下步骤：
采用如权利要求3所述的脱水试剂组合依次进行脱水，其中每一次脱水中，根据待处理的生物组织样本的体积和最小维度厚度，脱水时间在0.5-3小时之间选择；以及
所述脱水试剂组合中，有机试剂的体积浓度根据所述脱水试剂的使用先后顺序而逐渐增大。
5.如权利要求4所述的脱水方法，其特征在于，对于待处理的生物组织样本的最小维度厚度在1-3mm的，脱水时间为0.25-1h；最小维度厚度在3-5mm的，脱水时间为1-2h；最小维度厚度在5-10mm的，脱水时间为2-3h。
6.如权利要求4所述的脱水方法，其特征在于，所述N为3、4、5或6。
7.如权利要求4所述的脱水方法，其特征在于，所述生物组织样本为完整的生物组织样本。
8.一种生物组织透明样本的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
采用如权利要求4至7任意一项所述的脱水方法对待处理的生物组织样本进行脱水；以及
使用透明剂浸泡所述待处理的生物组织样本来完成整个生物组织透明样本的制备。
9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述透明剂选自苯甲酸与苯甲酸苄酯的混合液、苄醚、二苯醚、二甲苯或氯仿。
10.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述透明剂的浸泡时间为0.5-1h，优选为0.5h。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610872467.4A CN106289915A (zh) | 2016-09-30 | 2016-09-30 | 用于生物组织样本的脱水组合物、脱水方法和制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610872467.4A CN106289915A (zh) | 2016-09-30 | 2016-09-30 | 用于生物组织样本的脱水组合物、脱水方法和制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106289915A true CN106289915A (zh) | 2017-01-04 |
Family
ID=57716208
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610872467.4A Pending CN106289915A (zh) | 2016-09-30 | 2016-09-30 | 用于生物组织样本的脱水组合物、脱水方法和制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106289915A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019109818A1 (zh) * | 2017-12-08 | 2019-06-13 | 上海微创心通医疗科技有限公司 | 一种干态动物源性胶原纤维组织材料及其制备方法 |
| CN111492223A (zh) * | 2017-12-29 | 2020-08-04 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 组织样品制备系统 |
| CN113155563A (zh) * | 2021-04-13 | 2021-07-23 | 凭祥海关综合技术服务中心 | 一种介壳虫标本的制作方法 |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1587959A (zh) * | 2004-09-23 | 2005-03-02 | 上海交通大学 | 基于原子力显微镜观察的生物样品包埋块的制备方法 |
| CN102605084A (zh) * | 2012-03-29 | 2012-07-25 | 昆明理工大学 | 荧光原位杂交检测蜡样芽胞杆菌与枯草芽孢杆菌的方法 |
| CN102620966A (zh) * | 2012-03-31 | 2012-08-01 | 华中科技大学 | 一种适用于超薄切片和荧光成像的生物样品制备方法 |
| CN102944456A (zh) * | 2012-11-07 | 2013-02-27 | 西北农林科技大学 | 一种观察早期胚胎体内发育时空分布的组织切片的制备方法及应用 |
| CN103234797A (zh) * | 2013-04-28 | 2013-08-07 | 中南大学湘雅三医院 | 人体或动物组织的脱水包埋改良方法 |
| CN103257055A (zh) * | 2013-04-23 | 2013-08-21 | 上海海洋大学 | 一种三角帆蚌外套膜组织切片的制备方法 |
| CN104568553A (zh) * | 2014-12-30 | 2015-04-29 | 深圳先进技术研究院 | 一种组织光透明剂及其应用 |
-
2016
- 2016-09-30 CN CN201610872467.4A patent/CN106289915A/zh active Pending
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1587959A (zh) * | 2004-09-23 | 2005-03-02 | 上海交通大学 | 基于原子力显微镜观察的生物样品包埋块的制备方法 |
| CN102605084A (zh) * | 2012-03-29 | 2012-07-25 | 昆明理工大学 | 荧光原位杂交检测蜡样芽胞杆菌与枯草芽孢杆菌的方法 |
| CN102620966A (zh) * | 2012-03-31 | 2012-08-01 | 华中科技大学 | 一种适用于超薄切片和荧光成像的生物样品制备方法 |
| CN102944456A (zh) * | 2012-11-07 | 2013-02-27 | 西北农林科技大学 | 一种观察早期胚胎体内发育时空分布的组织切片的制备方法及应用 |
| CN103257055A (zh) * | 2013-04-23 | 2013-08-21 | 上海海洋大学 | 一种三角帆蚌外套膜组织切片的制备方法 |
| CN103234797A (zh) * | 2013-04-28 | 2013-08-07 | 中南大学湘雅三医院 | 人体或动物组织的脱水包埋改良方法 |
| CN104568553A (zh) * | 2014-12-30 | 2015-04-29 | 深圳先进技术研究院 | 一种组织光透明剂及其应用 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| HANS-ULRICH DODT等: "Ultramicroscopy: three-dimensional visualization of neuronal networks in the whole mouse brain", 《NATURE METHODS》 * |
| YOHANN BOUTTÉ等: "Immunocytochemical Fluorescent In Situ Visualization of Proteins In Arabidopsis", 《ARABIDOPSIS PROTOCOLS》 * |
| 古丽莎等: "下颌第一磨牙管间峡区清理技术的体外研究", 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 * |
| 谭可等: "尿激酶对慢性青光眼大鼠视神经保护机制研究", 《现代中西医结合杂志》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019109818A1 (zh) * | 2017-12-08 | 2019-06-13 | 上海微创心通医疗科技有限公司 | 一种干态动物源性胶原纤维组织材料及其制备方法 |
| CN111492223A (zh) * | 2017-12-29 | 2020-08-04 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 组织样品制备系统 |
| US12031891B2 (en) | 2017-12-29 | 2024-07-09 | Hoffman-La Roche, Inc. | Tissue sample preparation system |
| CN113155563A (zh) * | 2021-04-13 | 2021-07-23 | 凭祥海关综合技术服务中心 | 一种介壳虫标本的制作方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE4204012A1 (de) | Mitogenfreie substanz, deren herstellung und verwendung | |
| JPH10503950A (ja) | 生体適合性のあるハイドロゲル | |
| CN106289915A (zh) | 用于生物组织样本的脱水组合物、脱水方法和制备方法 | |
| CN106729984A (zh) | 一种鱼胶原蛋白修复海绵及其制备方法 | |
| CN111393521A (zh) | 一种水母胶原蛋白的提取方法 | |
| CN107998451A (zh) | 一种皮肤组织工程支架的3d打印制备方法及该支架的体外细胞毒性测试方法 | |
| CN109568646A (zh) | 一种医用凝胶及其制备方法与应用 | |
| CN108744057A (zh) | 一种可注射复合凝胶及其制备方法和应用 | |
| CN112639076A (zh) | 促进细胞生长和组织修复的方法及组合物 | |
| JP2019529015A (ja) | 生着率を増加させた移植用真皮層及びその製造方法 | |
| CN106139238A (zh) | 一种壳聚糖胶原海绵敷料及其制备方法 | |
| CN104174032A (zh) | siRNA分子组合物及其在治疗病理性瘢痕中的用途 | |
| CN105727360A (zh) | 用于手术皮肤切口、感染性和非感染性创面的生物材料及其应用 | |
| CN103007350A (zh) | 改性大鼠脱细胞脊髓支架材料及制备方法 | |
| CN104474535A (zh) | 一种治疗糖尿病足的水溶性凝胶 | |
| CN108653800A (zh) | 含生物活性玻璃和/或精氨酸的创面修复敷料及其制备方法与应用 | |
| CN107236032A (zh) | 一种从脐带组织中提取复合细胞因子的方法 | |
| Nikravesh et al. | The effect of camphor on the male mice reproductive system | |
| CN106353160A (zh) | 组织样本中荧光蛋白荧光信号的保护方法及脱水组合物 | |
| CN105267950B (zh) | 促进伤口愈合的敷料 | |
| Wright | On the dialysability of the growth-activating principle contained in extracts of embryonic tissues | |
| CN103961750B (zh) | 一种小口径原位组织工程血管及构建方法 | |
| CN115400271B (zh) | 干细胞复合物及其制备方法和pga在治疗骨骼或器官损伤的产品中的应用 | |
| CN107441102A (zh) | 一种红景天苷在制备治疗脊髓损伤药物中的应用 | |
| CN117122669B (zh) | 重组人生长激素在治疗中枢尿崩症的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170104 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |