CN106237300B - 一种预防和治疗晕动症的药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents
一种预防和治疗晕动症的药物组合物及其制备方法和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106237300B CN106237300B CN201610797665.9A CN201610797665A CN106237300B CN 106237300 B CN106237300 B CN 106237300B CN 201610797665 A CN201610797665 A CN 201610797665A CN 106237300 B CN106237300 B CN 106237300B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- parts
- pharmaceutical composition
- root
- extraction
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
- A61K36/898—Orchidaceae (Orchid family)
- A61K36/8988—Gastrodia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
- A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
- A61K36/076—Poria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/25—Araliaceae (Ginseng family), e.g. ivy, aralia, schefflera or tetrapanax
- A61K36/254—Acanthopanax or Eleutherococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
- A61K36/284—Atractylodes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
- A61K36/535—Perilla (beefsteak plant)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/54—Lauraceae (Laurel family), e.g. cinnamon or sassafras
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/61—Myrtaceae (Myrtle family), e.g. teatree or eucalyptus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/65—Paeoniaceae (Peony family), e.g. Chinese peony
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/71—Ranunculaceae (Buttercup family), e.g. larkspur, hepatica, hydrastis, columbine or goldenseal
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/71—Ranunculaceae (Buttercup family), e.g. larkspur, hepatica, hydrastis, columbine or goldenseal
- A61K36/718—Coptis (goldthread)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/74—Rubiaceae (Madder family)
- A61K36/744—Gardenia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/75—Rutaceae (Rue family)
- A61K36/752—Citrus, e.g. lime, orange or lemon
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
- A61K36/888—Araceae (Arum family), e.g. caladium, calla lily or skunk cabbage
- A61K36/8888—Pinellia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
- A61K36/899—Poaceae or Gramineae (Grass family), e.g. bamboo, corn or sugar cane
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
- A61K36/906—Zingiberaceae (Ginger family)
- A61K36/9068—Zingiber, e.g. garden ginger
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation, decoction
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Botany (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开一种与方法治疗晕动症的中药药物组合物所述药物组合物的原料药组成为:天麻,广藿香,炒白术,干姜,苏梗,桂枝,茯苓,姜半夏,白芍,竹茹,陈皮,刺五加,丁香,黄连,栀子。具体地,所述药物组合物的原料药组成为:天麻1‑18重量份,广藿香1‑12重量份,炒白术1‑14重量份,干姜1‑6重量份,苏梗1‑18重量份,桂枝1‑12重量份,茯苓1‑12重量份,姜半夏1‑12重量份,白芍1‑12重量份,竹茹1‑12重量份,陈皮1‑12重量份,刺五加1‑10重量份,丁香1‑8重量份,黄连1‑8重量份,栀子1‑12重量份。本发明还提供了所述药物组合物的制备方法,该组合物用于眩晕、恶心、呕吐等症状,防治晕船、晕车等疾病。其治则为芳香化浊、理气化痰、平逆降冲。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药组合物,特别涉及一种治疗晕动症的中药组合物。
背景技术
晕动症,即晕车病、晕船病、晕机病和由于各种原因引起的摇摆、颠簸、旋转、加速运动等所致疾病的统称。中国是世界“晕动症”发生率最高的国家之一,80%的人都曾经历过不同程度的晕动反应。这种疾病目前没有彻底治愈的办法,因此开发毒性低、药效明确的药物成为本领域技术人员亟待解决的问题。
从晕动症的发病原理看,控制症状的发生和发展以及提高集体的耐受能力是预防和治疗晕动症的关键。而这些症状发生的主要机理是由前庭-内脏神经反射引起的。当前庭器官受到过度刺激后,导致前庭核群的神经元过度兴奋,进而经前庭核的传出投射传导到内脏活动的相关核团。前庭核内存在大量的谷氨酸能神经元,谷氨酸能兴奋性前庭-眼动反射以及前庭-脊髓反射通路中具有重要作用。
突触传递是一个极其复杂的过程,GLu及其受体起着重要的作用,参与了大量疾病的发生与演变,如失眠、抑郁症、晕动症、阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)、帕金森病(Parkinson disease,PD)及亨廷顿舞蹈病(Huntington disease,HD)等。
(1)NMDA受体对谷氨酸的亲和力较高,结合谷氨酸时间较长,引起NMDAR通道的反复开放。所以,有研究表明增加NMDAR的活性,将加剧兴奋性毒性的作用。Liu,等观察到,阻断NR2A亚基,就会阻断LTP的形成而不影响LTD的诱导。Mallon,等也发现在Wistar大鼠海马切片CA1区,NR2A的阻断剂完全阻断饱和LTP的发生。
(2)CaMK Ⅱ是突触后致密物(postsynaptic densitied,PSD)的主要成分。CaMKⅡ的激活对学习记忆、平衡协调功能及神经元的可塑性都起着重要的作用。在LTP过程中,内流的Ca2+作为第二信使触发CaMK Ⅱ,引起下游一系列生化反应,包括突触后膜AMPA受体的上调。所以,CaMK Ⅱ可通过不同的信号转导通路和不同的大脑部位,参与了不同的协调和记忆过程。
(3)当谷氨酸转运体表达或功能失调时,引起突触间隙或胞外谷氨酸大量蓄积或者谷氨酸浓度低于正常水平,可导致疾病发生。因此,谷氨酸转运体对于兴奋性氨基酸的再循环、兴奋性信号的终止,防止神经毒性的发生占有重要地位。所以,转运体作为药物靶标用于开发治疗谷氨酸能系统相关疾病的药物具有重要价值。质膜型谷氨酸转运体(excitatory amino acid trans porters,EAATs)。亚型之一是GLT-1,在终止谷氨酸能神经传递、维持细胞外液Glu浓度处于低水平、防止其兴奋性毒性作用以及对过量Glu的转运中发挥着重要作用。其中脑区高达95%的谷氨酸摄取由GLT-1完成,起着“谷氨酸泵”的作用。
因此,开发一种针对谷氨酸调节通路缓解晕动症症状,进而治疗晕动症成为本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
本发明解决的技术问题是提供一种治疗晕动的中药组合物,具体来说本发明提供一种通过谷氨酸通路治疗晕动的中药组合物。
更具体来说,本发明通过如下技术方案实现的。
本发明提供一种预防和治疗晕动症的药物组合物,所述组合物包括如下生药材:天麻,广藿香,炒白术,干姜,苏梗,桂枝,茯苓,姜半夏,白芍,竹茹,陈皮,刺五加,丁香,黄连,栀子。
优选地,所述药物组合物的原料药组成为:
天麻1-18重量份,广藿香1-12重量份,炒白术1-14重量份,干姜1-6重量份,
苏梗1-18重量份,桂枝1-12重量份,茯苓1-12重量份,姜半夏1-12重量份,
白芍1-12重量份,竹茹1-12重量份,陈皮1-12重量份,刺五加1-10重量份,
丁香1-8重量份,黄连1-8重量份,栀子1-12重量份
更优选地,所述药物组合物的原料药组成为:
天麻7-11重量份,广藿香4-8份,炒白术5-9重量份,干姜1-5重量份,
苏梗7-11重量份,桂枝4-8重量份,茯苓4-8重量份,姜半夏5-7重量份,
白芍4-8重量份,竹茹4-8重量份,陈皮4-8重量份,刺五加4-8重量份,
丁香2-6重量份,黄连2-6重量份,栀子4-8重量份
还优选地,所述药物组合物的原料药组成为:
天麻8-10重量份,广藿香5-7重量份,炒白术6-8重量份,干姜2-4重量份,
苏梗8-10重量份,桂枝5-7重量份,茯苓5-7重量份,姜半夏6-8重量份,
白芍5-7重量份,竹茹5-7重量份,陈皮5-7重量份,刺五加4-6重量份,
丁香3-5重量份,黄连3-5重量份,栀子5-7重量份。
优选地,所述药物组合物的原料药组成为:
天麻9重量份,广藿香6重量份,炒白术7重量份,干姜3重量份,
苏梗9重量份,桂枝6重量份,茯苓6重量份,姜半夏7重量份,
白芍6重量份,竹茹6重量份,陈皮6重量份,刺五加5重量份,
丁香4重量份,黄连4重量份,栀子6重量份。
本发明还提供了一种药物组合物,所述药物组合物是通过如下方法制备得到的:按比例取各原料药,以水或有机溶剂按常规提取方法提取,并按常规制剂工艺制备成常规口服剂型。
另外,本发明还提供所述药物组合物的制备方法,所述制备方法包括如下步骤:按比例取各原料药,以水或有机溶剂按常规提取方法提取,并按常规制剂工艺制备成常规口服剂型。
其中,所述常规提取方法包括煎煮提取、回流提取、浸渍提取、超声提取或渗漉提取等常规提取方法中的任意一种方式,或者不同提取方法的组合;优选所述有机溶剂为20~95%的乙醇溶液;更优选所述常规口服剂型包括颗粒剂、片剂、散剂、胶囊剂、口服液、丸剂等
本发明还提供所述药物组合物在制备预防和治疗晕动症的药物中的应用。
优选地,本发明进一步提供所述药物组合物在制备预防和治疗谷氨酸通路相关晕动症的药物中的应用。
为使本发明所述剂型能够实现,需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料,例如:填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括:淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等;崩解剂包括:淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等;润滑剂包括:硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等;助悬剂包括:聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等;粘合剂包括:淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等;甜味剂包括:糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等;矫味剂包括:甜味剂及各种香精;防腐剂包括:尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等;基质包括:PEG6000,PEG4000,虫蜡等。为使上述剂型能够实现中药药剂学,需在制备这些剂型时加入药学可接受的其它辅料(范碧亭《中药药剂学》,上海科学出版社1997年12月第1版中各剂型记载的辅料)。
本发明中药组合物除了以天麻、广藿香、白术、干姜、苏梗、桂枝、茯苓、姜半夏、白芍,竹茹、陈皮、刺五加、丁香,黄连和栀子的原药材投料的形式外,还可以采用以上述原药材的提取物(有效部位)投料的形式,因此本发明进一步公开了一种预防和缓解晕动症的中药组合物,其各个原药材提取物的比例与原药材的比例相同。
上述原料药提取物可以是各原料药的水提物,或有机溶剂提取物,或水提物/有机溶剂提取物经过进一步精制纯化工艺得到的精制物。
所述有机溶剂为20~95%的乙醇溶液;
制备上述提取物所用的提取方法包括煎煮提取、回流提取、浸渍提取、超声提取或渗漉提取等本领域常规提取方法中的任意一种方式,或者不同提取方法的组合;所述精制纯化工艺包括醇沉、萃取、硅胶色谱柱分离、大孔树脂柱分离等。
本发明有益效果如下:
本发明中药组合物用于眩晕、恶心、呕吐等症状,防治晕船、晕车等疾病。其治则为芳香化浊、理气化痰、平逆降冲。天麻味甘,性微温,入肝经,具有平肝熄风、祛风定惊的功效,主要针对晕动症的头晕目眩;广藿香是临床上常用的芳香化湿药,其味辛,微温,归脾、胃、肺经,具有芳香化浊,开胃止呕,发表解暑的功能,主要针对晕动症的恶心、呕吐等症状;两药相合,共为君药。生姜味辛,性微温,归肺、脾、胃经,功能解表散寒、温中止呕。白术性温,味苦甘,归脾、胃经,有健脾益气之功;苏梗辛,温,归肺、脾经,可理气宽中,两药补气行气以助藿香化湿。诸药相合,共奏芳香化浊、理气化痰、平逆降冲之功。
本发明所述“治疗”包括用于缓解症状也包括将症状完全消除。所述“预防”包括在没有发现症状以前的给药,也包括出现轻微症状后的给药。本发明中所使用的炮制药材均是通过常规方法进行泡制而成。实施例中使用的药材全部商购获得的,均购于北京同仁堂药业有限公司。所述“晕动症”包括晕车病、晕船病、晕机病和由于各种原因引起的摇摆、颠簸、旋转、加速运动等所致疾病及其相关症状。
效果实验例
效果实验例1
1实验材料
1.1动物与分组
Spargue-Dawley雄性成年大鼠40只,体重为220±20g,均由北京中医药大学动物实验中心提供(许可证号:SYXK(京)2006-0012)。将大鼠适应性饲养3d后,按体重随机分为正常组(Con)、模型组(Mod)、阳性对照组(东莨菪碱)(DBZ)、全部组方组(YDY),共7组,每组4只。大鼠5只/笼,饲养于清洁级动物房,40W日光灯照射(8∶00-20∶00),室内温度控制在22℃左右,湿度:60%-70%。给药前后以全价颗粒饲料喂养,自由饮水。
1.2中药制备
(1)晕船药颗粒:实施例1制备得到药物组合物颗粒。以上生药均来源于北京同仁堂药业有限公司(批号:110401)。
(2)阳性对照组所用东莨菪碱,其由北京中医药大学第一临床医学院东直门医院药剂科提供。
1.3实验仪器设备
2实验方法
2.1模型复制
适应性饲养:购进动物先进行3天适应性饲养,在中医诊断动物研究实验室进行。40W日光灯照射(8∶00-20∶00),室内温度控制在22.0℃-24.0℃,保持安静,大鼠5只/笼。常规鼠类饲料喂养。
造模方法:模拟晕车刺激装置根据Crampton等的报道[Crampton GH LJ.Astimulator for laboratory studies of motion sickness in cats.Aviat SpaceEnviron Med 1985;56:462-5.]仿制而成。将大鼠无束缚地放入该装置的有机玻璃笼内,进行角加速度刺激。刺激的方式为:绕水平轴顺时针旋转,以16°角加速度加速,达最大速度120°/s后,立即以48°/s2的角加速度减速,直至旋转停止为1个旋转周期,每周期时间均为10s,2h/d×3d。另外,将对照组大鼠单笼单只置于旋转刺激装置旁2h/d×3d,以消除噪音,室温,湿度等对模型可能造成的影响。
2.2给药方案
自造模第1天始,每天于睡眠剥夺后早9:00分别给各中药组与西药组灌服相应的药液,按人体用药量换算成大鼠等效剂量作为大鼠用药量,灌胃容积为1mL/100g。余组则灌服等体积的蒸馏水。
2.3检测指标及方法
ⅠMOD值测定:
(1)取材
造模结束,依据体重,随机选取各组4只大鼠,用10%水合氯醛以0.3ml/100g进行腹腔麻醉,铡头,放置于冰上取出全脑,迅速用锡箔纸包裹,移至液氮中冷冻保存,待脑组织表面颜色变白,放置-80℃冰箱保存,备用。
(2)实验步骤
A.组织切片
将脑组织从-80℃冰箱取出,迅速放置在-15℃恒温冷冻切片机中,以刀片进行脑组织修整,按照《大鼠断层解剖彩色图谱》进行海马与前额叶皮质定位,并连续切片,平均厚度为8um,将脑片贴敷于涂有2%多聚赖氨酸的载玻片上,随将载玻片放入预冷过的EAF固定液中,进行固定5min,选取完整和未变形的脑片进行染色。
B.免疫荧光染色步骤
①从-80℃冰箱中取出脑片,室温静置平衡5min。
②将脑片放入盛有抗原修复液的片盒中,置于微波炉中,进行加热至修复液沸腾,随将温度维持在92℃-98℃,保持15min。用ddH2O漂洗3次,每次5min。然后用0.01mol/L PBS漂洗3次,每次5min。随再用ddH2O漂洗3次,每次5min。
③将载玻片放入3%的H2O2中,室温静置避光30min。
④将载玻片取出,用0.01mol/L PBS漂洗3次,每次5min。随以羊血清(3:200)封闭切片,置于湿盒内,37℃静置20min。甩去多余液体,不洗。
⑤处理多余羊血清,并加入一抗:GLT1(1:40)/CaMK Ⅱ(1:40)/NR1(1:40)/CREB(1:40)/NR2A(1:50)/NR2B(1:50),放入湿盒,4℃孵育过夜(>12h)。
⑥用0.01mol/L PBS洗涤3次,加入FITC(1∶100),37℃避光20min,0.01mol/L PBS洗涤3次,晾干,80%甘油封固。
⑦显微镜观察:选择实验组和对照组的阳性和阴性组织相、进行100×和400×的显微照相;
⑧图象分析:Olympus荧光显微镜(1X71型)观察并采集图像,选择有意义的组织相,经登录、编号、采集、分析、读取数据、最后存盘。
C.对照实验设置及结果判断
分别以正常羊血清和0.01MPBS代替一抗,同步进行阴性对照。结果判断以细胞呈现明显的绿色为阳性,所有阴性对照表现为不着色或者仅有淡背景色,无特异性反应。
D.切片图像处理
采用科学级RGB彩色CMOS相机discoveryc15拍摄脑片,以相同的曝光参数进行拍照(目镜10×和物镜40×倍数)。拍照部位根据《大鼠断层解剖彩色图谱》所示进行,分别对海马CA3区、PFC区进行拍照。每组随机选出4只大鼠的切片,每张脑片随机选取3个视野。图像分析采用ISCapture成像软件采集系统,并采用IPP 6.0图像分析系统测量免疫组化图像中阳性反应物的平均光密度值(MOD)值,数值与蛋白表达成正比。
Ⅱ蛋白质水平检测:
A.脑组织蛋白提取
①每10-100mg固体组织剪碎后加入0.5ml裂解液,放入EP管内置于冰上,用超声蛋白粉碎机匀浆3-5次。
②按每0.5ml组织匀浆液加入2倍体积的(1ml)抽提试剂充分混匀。室温或4℃静置10分钟,偶尔晃动。
③将放有匀浆液的EP管放入离心机中,4℃,10000rpm,离心10分钟。溶液分为上下两相,两相中间为蛋白膜。吸除上层液体;随后用吸头或针头轻轻拨开蛋白膜,吸除下层液体。蛋白膜将附着于离心管壁。
④敞开管口,室温空气干燥沉淀45min。未溶解的蛋白沉淀不含盐、去垢剂、和还原剂成分,可在4℃或-20℃条件下保存。
⑤溶解蛋白沉淀,每1mg起始组织加入5ul 2%SDS溶液继续溶解,放入水浴锅中95℃水浴15min。
⑥将EP管取出,室温静置30min。
⑦将EP管放入离心机中,4℃,12000rpm,离心5分钟。取上清液移入新EP管中。
⑧将BSA按1:2梯度加入96孔板中,并将蛋白溶液按1:50浓度加入96孔板中,37℃孵育30min。
⑨将96孔板放入紫外荧光分度计进行蛋白定量,计算ddH2O、Loading Buffer的当量,并将样品混匀,4℃保存备用。
B.Western blot操作流程
(1)将玻璃板洗净,晾干后安装至灌胶架,并保持前后两玻璃板底部齐平。
(2)配制10%的分离胶,各个物质的具体量以及方法如下:
将以上试剂混匀后,即用移液器匀速将分离胶加入两层玻璃板之间,上面留出一定的空间备灌浓缩胶(约在梳齿下1.5cm-2.0cm处),用去离子水匀速加满至玻璃板上缘以去除气泡,室温静置约50min。
(3)去除处玻璃板之间的去离子水,并用滤纸条蘸取多余水分。
配制5%的浓缩胶,各个物质的具体量和配制方法如下:
将以上试剂混匀后,将其灌入玻璃板并立即将梳子,防止产生气泡,室温聚合120min。
(4)电泳前准备:将梳子拔出,用ddH2O冲洗胶孔,将去除残胶。将玻璃板装入电泳槽中,倒入适量l×电泳缓冲液,视其是否侧漏,随即加l×电泳缓冲液至“2GEL”上约1cm处。
(5)上样:取出相当于20ug体积的蛋白样品当量的上样缓冲液,用移液器将10ul蛋白样品和10ul Marker,匀速加入梳孔(2-8)中。
(6)电泳:组装电泳设备,接通电源,将电压调至恒压6Ov,视Marker移动至第一条与第二条分开时,将电压调至恒压100v,待目的条带移至胶版的中间时,关闭电源。
(7)转膜
①视目的条带胶版规格,剪取PVDF膜,做出标记(左上角切角),浸于甲醇中1min,并移至电转液中平衡5min。
②视目的条带胶版规格,剪取滤纸2张,用电转缓冲液完全浸湿平衡5min。
③电泳结束后,取出胶板,放置电转液中平衡5min。按照PVDF膜裁减浓缩胶。
④按以下顺序制作:阳极板(白色)―—海绵―—1张滤纸―—PVDF膜―—胶板―—1张滤纸―—海绵―—阴极板(黑色),用玻璃棒以适力挤压,去除夹层间的气泡。
⑤移入入电转仪中,并将电转仪放置碎冰中,将电压调至恒压100v,电转50min。
(8)漂洗:电转结束后,将PVDF膜正面朝上用镊子移入盛有1×TBST的平皿中,漂洗3次,每次5min。
(9)封闭:将PVDF膜装入杂交袋中并标记,加入适量的5%脱脂奶粉封闭液,封口。室温脱色摇床摇30min―—37℃孵育30min―—室温脱色摇床摇30min。
(10)一抗孵育:将anti-GLT-1(1:5000)/anti-NR1(1:500)/anti-NR2A(1:200)/anti-NR2B(1:200)/anti-CaMKII(1:5000)/anti-CREB(1:500)/β-actingantibody(1:5000)加入杂交袋中,封闭,置于脱色摇床上,室温摇动1h后4℃过夜。
(11)漂洗:次日将PVDF膜取出正面朝上移入平皿中,以1×TBST漂洗3次,每次5min。
(12)二抗孵育:将PVDF膜放入新的杂交袋中,并将用同量的5%脱脂奶粉封闭液稀释的二抗(比例均为1:10000)加入杂交袋中,封闭,置于脱色摇床上,室温摇动1h。
(13)漂洗:次日将PVDF膜取出正面朝上移入平皿中,以1×TBST漂洗3次,每次5min。
(14)曝光:将PVDF膜取出。配好发光液(A、B液各500ul,混匀),用滤纸轻轻吸去多余缓冲液,将膜浸入发光液中约1min,放入装好X光片的压片夹进行曝光。曝光时间根据荧光的强弱而定。
(15)显影、定影:在暗室内将胶片取出并浸入显影液中1min,定影液中5min,最后以自来水冲洗并晾干胶片。
(16)用透射扫描仪对胶片进行灰度扫描,分辨率为300DPI。
C.图像处理
扫描后用Bio-Rad Quantity One软件对胶片图像进行分析,并以β-acting作内参,比较GLT-1/NR1/NR2A/NR2B/CaMKII/CREB与β-acting条带的灰度比值,比值记为目的蛋白的表达水平。
2.4数据处理
数据采用SPSS 17.0软件进行统计学处理。各项指标中,计量变量采用均数±标准差描述,正态分布的资料采用单因素方差分析,两两比较进行LSD-t检验。偏态分布的资料采用秩和检验进行组间比较。检验水准取α=0.05,P<0.05为有显著性差异,P<0.01为有极显著性差异,具有统计学意义。
2.5结果
在海马CA3区域:GLT-1、NR2A、CaMKⅡ的各组数据间有统计学差异,三个指标的晕动症模型组(MOD)表达均低于正常组(CON),晕动药全部组方组(YDY)表达数值趋近于正常组,并高于对比方组(DBZ)。具体结果见表1。
表1大鼠海马CA3区指标MOD值分析
*与模型组比较有差异(P<0.05),▲与正常组比较有差异(P<0.05)
在前额叶皮质区域免疫荧光检测结果发现,GLT-1、CaMKⅡ、CREB数据具有统计学差异。其中,各指标的模型组均低于正常组数值,数值趋近于正常组表达状态的为晕动药全部组方组。同时,对比方组略高于模型组。具体结果见表2。
表2大鼠海马CA3区指标蛋白质表达分析
*与模型组比较有差异(P<0.05),▲与正常组比较有差异(P<0.05)。
效果实验例2
1实验药物:本发明实施例1制备的颗粒剂,一次一袋,一日两次;
2患者统计:实验者为长期海上航行人员,共计155人次,其中严重晕动症者5人,乘船时出现严重的恶心呕吐症状,出冷汗甚至昏倒;中度晕动症者20人,其在乘船时出现头晕、恶心症状;轻度晕动症者130人,其在乘船时出现轻微头晕恶心症状。
3治疗结果
结果见表1。
表1本发明中药组合物治疗晕动症效果
人员 | 严重晕动症者 | 中度晕动症者 | 轻度晕动症者 |
5 | 20 | 130 | |
症状解除 | 5 | 13 | 112 |
症状减轻 | 0 | 5 | 18 |
无效 | 0 | 2 | 0 |
上述结果表明,症状解除者共计130例,占83.87%;症状减轻者共计23例,占14.84%;无效者共2例,占1.3%。总有效率为98.71%。
具体实施方式
实施例1
原料药组成:
天麻9g,广藿香6g,炒白术7g,干姜3g,
苏梗9g,桂枝6g,茯苓6g,姜半夏7g,
白芍6g,竹茹6g,陈皮6g,刺五加5g,
丁香4g,黄连4g,栀子6g
制备方法:按比例取原料药,加水煎煮两次,每次1.5小时,合并煎液,滤过,浓缩,减压干燥,以糊精为赋形剂,按药辅比3:1进行混合,混匀,制成颗粒,干燥,既得颗粒剂。
规格:每袋重30g,相当于原料药45g;
用法用量:温开水冲服,一次1袋,一日2次。
实施例2
原料药组成:
天麻10g,广藿香5g,炒白术6g,干姜4g,
苏梗10g,桂枝5g,茯苓5g,姜半夏8g,
白芍7g,竹茹5g,陈皮5g,刺五加6g,
丁香5g,黄连3g,栀子7g
制备方法:按比例取原料药,70%乙醇超声提取二次,第一次1小时,第二次0.5小时,合并提取液,滤过,减压浓缩,提取物以糊精为赋形剂,按药辅比3:1进行混合,混匀,制成颗粒,干燥,既得颗粒剂。
实施例3
原料药组成:
天麻8g,广藿香7g,炒白术8g,干姜2g,
苏梗8g,桂枝7g,茯苓7g,姜半夏6g,
白芍5g,竹茹7g,陈皮7g,刺五加4g,
丁香3g,黄连5g,栀子5g
制备方法:按比例取原料药,加水回流提取二次,每次1.5小时,合并煎液,滤过,浓缩,加入60%乙醇溶液醇沉,静置,过滤,浓缩,减压干燥,以糊精为赋形剂,按药辅比3:1进行混合,混匀,制成颗粒,干燥,既得颗粒剂。
实施例4
原料药组成:
天麻11g,广藿香4份,炒白术5g,干姜5g,
苏梗11g,桂枝4g,茯苓4g,姜半夏7g,
白芍8g,竹茹4g,陈皮4g,刺五加8g,
丁香6g,黄连2g,栀子8g;
制备方法:按比例取原料药,混合,粉碎过60-80目筛,制成散剂。
实施例5
原料药组成:
天麻7g,广藿香8份,炒白术9g,干姜1g,
苏梗7g,桂枝8g,茯苓8g,姜半夏5g,
白芍4g,竹茹8g,陈皮8g,刺五加4g,
丁香2g,黄连6g,栀子4g;
制备方法:按比例取原料药,70%乙醇超声提取二次,第一次1小时,第二次0.5小时,合并提取液,滤过,减压浓缩,浓缩液上D101大孔树脂纯化,先用2BV水洗脱,再用5BV50%乙醇溶液洗脱,收集50%乙醇洗脱液,回收乙醇,提取物通过常规工艺,加入常规辅料,制成片剂。
实施例6
原料药组成:天麻20g、广藿香5g、炒白术30g、生姜5g、紫苏梗18g;
制备方法:按比例取原料药,加水煎煮二次,每次1.5小时,合并煎液,滤过,按常规工艺制成口服液。
实施例7
原料药组成:
天麻18g,广藿香1g,炒白术1g,干姜6g,
苏梗18g,桂枝1g,茯苓1g,姜半夏12g,
白芍12g,竹茹1g,陈皮1g,刺五加10g,
丁香8g,黄连1g,栀子12g;
制备方法:按比例取原料药,加水煎煮两次,每次1.5小时,合并煎液,滤过,浓缩,减压干燥,以糊精为赋形剂,按药辅比3:1进行混合,混匀,制成颗粒,干燥,既得颗粒剂。
实施例8
原料药组成:
天麻1g,广藿香12g,炒白术14g,干姜1g,
苏梗1g,桂枝12g,茯苓12g,姜半夏1g,
白芍1g,竹茹12g,陈皮12g,刺五加1g,
丁香1g,黄连8g,栀子1g;
按比例取原料药,加6倍量75%乙醇回流提取2次,每次1.5小时;合并提取液,滤过,加入常规辅料制成口服液。
Claims (7)
1.一种预防和治疗晕动症的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物的原料药组成为:
天麻7-11重量份,广藿香4-8份,炒白术5-9重量份,干姜1-5重量份,
苏梗7-11重量份,桂枝4-8重量份,茯苓4-8重量份,姜半夏5-7重量份,
白芍4-8重量份,竹茹4-8重量份,陈皮4-8重量份,刺五加4-8重量份,
丁香2-6重量份,黄连2-6重量份,栀子4-8重量份。
2.如权利要求1所述的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物的原料药组成为:
天麻8-10重量份,广藿香5-7重量份,炒白术6-8重量份,干姜2-4重量份,
苏梗8-10重量份,桂枝5-7重量份,茯苓5-7重量份,姜半夏6-8重量份,
白芍5-7重量份,竹茹5-7重量份,陈皮5-7重量份,刺五加4-6重量份,
丁香3-5重量份,黄连3-5重量份,栀子5-7重量份。
3.如权利要求2所述的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物的原料药组成为:
天麻9重量份,广藿香6重量份,炒白术7重量份,干姜3重量份,
苏梗9重量份,桂枝6重量份,茯苓6重量份,姜半夏7重量份,
白芍6重量份,竹茹6重量份,陈皮6重量份,刺五加5重量份,
丁香4重量份,黄连4重量份,栀子6重量份。
4.如权利要求1-3任一项所述药物组合物的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括如下步骤:按比例取各原料药,以水或有机溶剂按常规提取方法提取,并按常规制剂工艺制备成常规口服剂型;所述有机溶剂为20~95%的乙醇溶液。
5.如权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述常规提取方法包括煎煮提取、回流提取、浸渍提取、超声提取或渗漉提取中的任意一种方式,或者不同提取方法的组合;所述常规口服剂型包括颗粒剂、片剂、散剂、胶囊剂、口服液、丸剂。
6.权利要求1-3任一项所述药物组合物在制备预防和治疗晕动症的药物中的应用。
7.权利要求1-3任一项所述药物组合物在制备预防和治疗谷氨酸通路相关晕动症的药物中的应用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610797665.9A CN106237300B (zh) | 2016-08-31 | 2016-08-31 | 一种预防和治疗晕动症的药物组合物及其制备方法和用途 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610797665.9A CN106237300B (zh) | 2016-08-31 | 2016-08-31 | 一种预防和治疗晕动症的药物组合物及其制备方法和用途 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106237300A CN106237300A (zh) | 2016-12-21 |
CN106237300B true CN106237300B (zh) | 2019-12-24 |
Family
ID=58080859
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610797665.9A Active CN106237300B (zh) | 2016-08-31 | 2016-08-31 | 一种预防和治疗晕动症的药物组合物及其制备方法和用途 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN106237300B (zh) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101757587A (zh) * | 2008-12-09 | 2010-06-30 | 景午辰 | 治疗晕动病的中药制剂 |
CN102274441A (zh) * | 2011-03-21 | 2011-12-14 | 南京中医药大学 | 一种具有抗晕动作用的中药复方及其制备方法和应用 |
-
2016
- 2016-08-31 CN CN201610797665.9A patent/CN106237300B/zh active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101757587A (zh) * | 2008-12-09 | 2010-06-30 | 景午辰 | 治疗晕动病的中药制剂 |
CN102274441A (zh) * | 2011-03-21 | 2011-12-14 | 南京中医药大学 | 一种具有抗晕动作用的中药复方及其制备方法和应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN106237300A (zh) | 2016-12-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101310751B (zh) | 一种具有益气养血作用的药物组合物的检测方法 | |
CN1899361A (zh) | 贞芪药物组合及其制备 | |
CN102085282B (zh) | 治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物及其制法和检测方法 | |
CN105535505A (zh) | 一种制备治疗肝胆结石的药物组合物的方法 | |
CN103285119A (zh) | 一种治疗自身免疫性肝病的中药组合物及其制备方法 | |
CN1887324B (zh) | 一种治疗肝肾不足的中药组合物及其制备方法和分析方法 | |
CN106237300B (zh) | 一种预防和治疗晕动症的药物组合物及其制备方法和用途 | |
CN101716252A (zh) | 肾康丸 | |
CN107998314B (zh) | 一种补肾健脑的中药组合物及其制备方法 | |
CN102885928A (zh) | 一种治疗黄疸的中药注射剂及其制备方法 | |
CN103108639A (zh) | 一种中药活性成分组合物及其用途 | |
CN103517709A (zh) | 治疗自身免疫失调的组合物及其方法 | |
CN102366621B (zh) | 五加生化中药复方提取物的植物雌激素样作用及应用 | |
CN104189349A (zh) | 一种治疗月经量少的中药组合物 | |
CN103055112B (zh) | 一种治疗葡萄膜炎的中药复方药物组合物 | |
CN103272146B (zh) | 一种防治酒精性脂肪肝的药物组合物及制备方法 | |
CN111035685A (zh) | 一种治疗功能性消化不良的中药组合物及其制备方法 | |
CN111773328A (zh) | 一种治疗三叉神经痛的中药组合物及其应用 | |
CN1308019C (zh) | 一种治疗急慢性盆腔炎的中药组合物及制备方法 | |
CN1969937B (zh) | 一种治疗肝炎的药物组合物 | |
CN110448649A (zh) | 清瘟败毒颗粒的制备工艺 | |
CN1970001B (zh) | 一种苦参素、五味子和人参配伍的治疗肝炎的药物组合物 | |
CN108938656A (zh) | 治疗胃肠功能紊乱或肠易激综合症的芍药苷组合物及其应用 | |
CN108771683A (zh) | 治疗胃肠功能紊乱或肠易激综合症的芍药苷/辛弗林组合物及其应用 | |
CN108524477A (zh) | 治疗胃肠功能紊乱或肠易激综合症的辛弗林组合物及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |